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ESCUELA DE BIOQUÍMICA
PROYECTO DE MICROBIOLOGÍA DE
ALIMENTOS
TÍTULO: Análisis de riesgo de
contaminación por patógenos en el
proceso de elaboración de queso
fresco en la empresa artesanal
“Industria Quesera Isabelita”
Tabla de contenido
Título....................................................................................................................2
Problemas............................................................................................................2
Antecedentes......................................................................................................2
Justificación........................................................................................................2
Objetivos..............................................................................................................3
Objetivo General................................................................................................3
Objetivos Específicos........................................................................................3
Hipótesis..............................................................................................................3
Hipótesis Nula....................................................................................................3
Hipótesis Cierta.................................................................................................3
Marco Teórico.....................................................................................................4
Marco Metodológico...........................................................................................6
Muestreo Estadístico.........................................................................................6
Muestreo General..............................................................................................6
Métodos Específicos de Análisis......................................................................6
Análisis de Riesgo.............................................................................................6
Tabla de Factores que afectan a la Ecología Microbiana.................................8
Diagrama de flujo Teórico de la Elaboración de Queso Fresco ......................9
Análisis Microbiológicos Cualitativos y Cuantitativos......................................10
Valores Referenciales proporcionados por la norma INEN............................11
Factibilidad........................................................................................................11
Cronograma.......................................................................................................12
Bibliografía........................................................................................................12
Anexos...............................................................................................................13
1. TÍTULO:
2
Análisis de riesgo de contaminación por patógenos en el proceso de
elaboración de queso fresco en la empresa artesanal
“Industria Quesera Isabelita”
2. PROBLEMA
El principal problema de mencionada industria es la elevada contaminación con
bacterias patógenas con la que salen los productos al mercado, generando problemas
en la salud de los consumidores y en la aceptación del producto provocando una
devolución del mismo.
La infraestructura de la industria no tiene acceso restringido las instalaciones y la
forma en la que está distribuida, no cumplen las condiciones básicas para un trabajo
adecuado.
3. ANTESCEDENTES Y JUSTIFICACIÓN
ANTECEDENTES:
La industria artesanal quesera “Isabelita” se encuentra ubicada en el cantón Mejía, la
cual elabora queso fresco, con una producción semanal de 1500 quesos; dicha
empresa no cumple con ciertos requerimientos como permiso de funcionamiento pero
el producto si posee registro sanitario, afectando la calidad del producto, teniendo
como principales factores erróneos:
• La poca selección de los proveedores de la leche que brinden la seguridad
necesaria mediante control veterinario de las vacas que proveen la leche como
materia prima, pudiéndose presentar casos de animales con mastitis.
• El incorrecto transporte de la leche desde las fincas hacia la planta, sin una cadena
de frío adecuada, puede generar aumento de las colonias de microorganismos que
pudiesen estar presentes.
• La infraestructura de la planta poco adecuada para el proceso del producto
pudiendo provocar una contaminación cruzada.
• La poca aplicación de BPM en la industria artesanal.
• La incorrecta manipulación del personal en el proceso, sin dar importancia en la
higiene y salud.
• Falta de capacitación al personal acerca de BPM.
• Las condiciones desfavorables para el producto terminado y su incorrecto
almacenado, sin contar con un lugar específico con temperatura adecuada, limpio
y desinfectado para que este no sea contaminado.
JUSTIFICACIÓN:
El queso fresco “Isabelita” es expendido en la región costa, principalmente a barrios
populares, siendo un producto de consumo masivo en poblaciones de todas las
edades, existiendo como grupo más vulnerable mujeres embarazadas, niños y
personas de la tercera edad.
Por consiguiente, en respuesta al problema se quiere proponer mejores medidas de
calidad, identificado los puntos de contaminación y a partir de ellos proponer medidas
correctivas. De esta forma se lograría reducir los conteos microbiológicos y evitar los
problemas de salud pública causados por el consumo del producto contaminado,
contribuyendo así a una mejora continua en la industria, reduciendo costos y pérdidas
que implican la devolución de los productos.
Por lo tanto todos los antecedentes y justificativos expuestos nos llevan a realizar un
correcto estudio y análisis en el control de contaminación por patógenos en el proceso
de elaboración de queso fresco ya que es factible la corrección.
3
1. OBJETIVOS
Objetivos Generales.
• Realizar el análisis de riesgo e identificación de patógenos, mediante la
comprobación en el laboratorio de la presencia o ausencia de estos en un proceso
de elaboración de queso fresco.
Objetivos Específicos.
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1. Después del prensado para verificar la contaminación exógena proveniente del
excesivo manipuleo y tiempos de exposición prologados al ambiente sin control
alguno.
2. En el Producto final por contaminación exógena debido al excesivo manipuleo
que sufre el queso fresco y un mal almacenamiento.
1. MARCO TEÓRICO
Queso Fresco
Es el producto alimenticio sólido no madurado y sin corteza que se obtiene
separando los componentes sólidos de la leche, la cuajada, de los líquidos, el suero.
Cuanto más suero se extrae más compacto es el queso. Es un producto poco
fermentado, ligeramente ácido (pH 5,3), muy líquido (actividad del agua de 0,9), con
un bajo porcentaje de sal (menor al 3%) y con un potencial de óxido-reducción
electronegativo (ausencia de oxígeno).
Debido al elevado contenido de agua (50-80%) esta clase de queso no se conserva
durante mucho tiempo. Además, por la falta de un proceso de maduración, es preciso
pasteurizar la materia prima; porque cuando los gérmenes patógenos están presentes,
pueden desarrollarse en el producto elaborado.
5
Staphyloccocus aureus producen una exotoxina que causa fuertes trastornos
intestinales en los humanos, la cual es termorresistente, por lo cual no es
destruida con la pasteurización.
6
1. MARCO METODOLOGICO
1) MUESTREO ESTADISTICO
2) MUESTREO GENERAL
Queso.
1. La muestra está constituida por un queso entero o una porción sustancial del
mismo, utilícese este método para el queso fresco (por ejemplo, os quesos
cottage, cremosos o altamente cremosos), para quesos blandos de pequeño
tamaño y para queso en porciones envasados en cajas pequeñas (por ejemplo,
algunos tipos de queso fundido y quesos blandos pequeños).
7
8
Factores que afectan el c recimiento
Microorganismos
Modo de Tipo de
Simbología Patógenos pH Temperatura aw % NaCl Medios Observaciones
Contaminación alimento
• Tiempo de germinación a
4ºC es de 60 a 40 horas
• A bajas temperaturas
óptimo 7,0, mayor virulencia
rango 4,6 - Psicrótrofo 1.1ºC Res iste
Listeria t. mínima concentraciones
leche cruda • Termorresistente a la
9,0 Exógeno y OXFORD pasterización
Monocytogenes T. máxima 45 0,92 elevadas del
Termoresistente 10% pasterizada • Se multiplica a
temperaturas de
refrigeración
• Cierta tolerancia a
condiciones acidas
No son resistentes a la
Mesófilo 5-45 congelación su crecimiento se
Endógena y Leche cruda Caldo TSB
Salmonella ssp 4.5-9 Tolerante al frio 0.93 Exógena y derivados Agar XLD ve afectado por psic rotrofos y
4-5 lactobac ilos como cultivos
iniciadores
Resistente Endógena y
Esc herichia coli 7 - 48°C 0,95
a la acidez Exógena
Psicrótrofos 4-55
Leche y sus
Bacillus cereus 4.3-9.3 (esporas 0.92 Exógeno derivados MYEP
Termoresistente)
Optima 42
Cepas
Campylobacter
4,3-9,3 s icrotrofa.: 4- 0,92 Exógeno Leche cruda
jejuni
55ºC.
Listeria Listeria
monocytogenes 2. P r u e b a s
Monocytogenes
Salmonella spp de AN DE N Salmonella spp
Bacillus cereus Escherichia coli
2. Pruebas de Staphylococcus
im p u r e z a s
Staphylococcus
3. F ilt r a c ió n
ANDEN aureus aureus 10. Desuerado
Yersinia 7 2 º C p o1 r5se g e n f r ia r h a st a Bacillus cereus
enterocolitica 2 0º C (P a s te u r iz a c ió n )r á p id a
(espora)
Escherichia coli 4. P a st e u r iz a c ió n
2 5a 3 0º C (2 0m in)
Listeria Listeria
C u ltiv o lá ct1%
ic o 5. I n o c u la c ió n
Monocytogenes Monocytogenes
Salmonella spp 3 3-3 4° C(3 0-4 0m in) Salmonella spp
2 0-2 5g/1 0 0L C a C2 yl
Bacillus cereus c u a jo(d e a c u e r d o a 6. C o a g u la c ió n Escherichia coli
Yersinia la s e s p e cific a c io n e s
d e l p r o d u) c to
e n z im á tic a Staphylococcus
enterocolitica aureus
3. Filtración 1 cm
11. Moldeado
Staphylococcus Bacillus cereus
7. C o r te
aureus (espora)
5 m in
Escherichia coli 8. R e p o s o
5 a 1 0m in
Listeria 9. A g ita c ió n
Listeria
Monocytogenes Monocytogenes
Salmonella spp 3 3-3 4º C(4 5m in) Salmonella spp
Bacillus cereus 1 0. D e s u e r a d o suero Escherichia coli
(espora) Staphylococcus
Campilobacter aureus
4. Pasteurización jejuni Bacillus cereus
12. Prensado
1 1. M o ld e a d o
Staphilococcus 3 3a 3 4º C
(espora)
aureus p r e n sa d o1s0a0P S I e n u n a p r e n sa
h id r á u lic a p o r u n p e 4r io8hdoor ad se
Yersinia
enterocolitica 1 2. P r e n s a d o su e r o
Escherichia coli
Listeria
Listeria 1 2. P r e n s a d o su e r o Monocytogenes
Monocytogenes Salmonella spp
2 0ºC
Salmonella spp Escherichia coli
1 6-2 0% N a C l
Escherichia coli 3a 5 h o ras
1 3. S a la d o
Staphylococcus
5. Inoculación Staphylococcus
13. Salado
2 0ºC aureus
aureus 1 4. E m p a ca d o a l Bacillus cereus
Bacillus cereus v a c ío
(espora)
(espora) 4 a 8 ºC
Listeria 1 5. A lm a ce n a d o Listeria
Monocytogenes Monocytogenes
Salmonella spp F IN
Salmonella spp
Escherichia coli Escherichia coli
6. Coagulación Staphylococcus Staphylococcus 14. Empacado
enzimática aureus aureus
Bacillus cereus Bacillus cereus
(espora) (espora)
Listeria Listeria
Monocytogenes Monocytogenes
Salmonella spp Salmonella spp
Escherichia coli Escherichia coli
Staphylococcus Staphylococcus
7. Corte aureus aureus 15. Almacenado
Bacillus cereus Bacillus cereus
(espora) (espora)
Listeria
Monocytogenes
Salmonella spp
Escherichia coli
8. Reposo Staphylococcus
11
Contaminación endógena
Contaminación exógena
Muere en el proceso
Sobrevive
12
resultados más confiables.
Método horizontal para el
recuento de Bacillus
cereus
Recuento en placa
Cuantitativo
Salmonella spp La inexistencia de un
Técnica del BAM método específico para
salmonella en productos
lácteos nos lleva a utilizar
esta técnica
1. FACTIBILIDAD
13
Aceite de parafina
estéril
Agua peptonada
RM- VP 17g/l caldo rojo de 500g 52$
metilo
acetoína
Bacillus MYP 49g/900ml 500g 76$
Fosfato
tamponado
Agar nutritivo 8g/l caldo 20g/l 500g 40.43$
Caldo de nitrato 16.5g/l 500g 46.69$
Listeria TSB 30g/l
EB 39g/l 500g 55$
OXFORD 29.25g/500ml 500g 101$
PALCAM 34.4g/500ml 500g 75$
Urea
2. CRONOGRAMA:
Fechas Mes Enero Actividades
3. BIBLIOGRAFÍA:
1) http://www.ispch.cl/lab_amb/doc/microbiologia_alimentos/PRT-025.pdf
2) http://www.ispch.cl/lab_amb/doc/microbiologia_alimentos/PRT-024.pdf (AOAC
International, todos los alimentos (método 991.14))
3) Normas INEN, 1529-2 – 1529-9
4) MOSSEL D.A 1975, Microbiología de los alimentos, Editorial Acribia (España),
págs 226-227.
5) http://www.bvsops.org.uy/pdf/cereus.pdf
6) http://www.quiminet.com/ar9/ar_bcBuaasdaasd-el-proceso-de-elaboracion-del-
queso.htm
7) http://virtual.udca.edu.co/es/grupo/g100/web/quesopr.html
14
8) http://www.centa.gob.sv/html/ciencia/otrainformacion/pecuaria/procesamientoq
uesosfrescos.html
9) http://html.rincondelvago.com/proceso-de-elaboracion-del-queso.html
10) http://www.cigarros-
puros.com/02e2e099841046d05/02e2e09984107b221/02e2e09984107e429/in
dex.html
11) http://es.wikipedia.org/wiki/Campylobacter_jejuni
12) http://es.wikipedia.org/wiki/Bacillus_cereus
13) http://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus
14) http://www.alanrevista.org/ediciones/2006-
1/evaluacion_microbiologica_queso_gouda.asp
15) http://www.scribd.com/doc/6907272/Microbiologia-de-Alimentos-Analisis-
Microbiologico-Leche-y-Derivados
16) http://publicaciones.san.gva.es/publicaciones/documentos/V.2196-2001.pdf
17)ICMSF, MÉTODOS DE MUESTREO PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS:
Principios y aplicaciones específicas. Microorganismos de los
alimentos. Editorial Acribia. Zaragosa, España. Cáp 12.
ANEXOS
Cuadro de Proceso Teórico de Elaboración de Queso Fresco
INICIO
1. Tº de 2-6º C, en
depósitos frigoríficos
Tº de 2-6º C, en
de acero inoxidable,
depósitos
se descarga en una
cisterna
Temperatura
máxima: 28° C
Organolépticos:
2. Cuando la leche
olor, sabor y color
entra a la planta se
característicos de
toma muestras la
leche cruda
misma para la
Grasa: 3%
realización de
Prueba de Alcohol:
análisis, cuyos
no debe presentar
resultados deben
reacción o
cumplir con los
formación de
parámetros
coágulos
establecidos para la
Reductasa
aceptación.
(Reducción del azul
de metileno)
Acidez (18º Dornic).
3. Se efectúa con la
finalidad de eliminar
algunas impurezas
como raíces, pelos,
ramitas, etc.
15
4. Calentar cada INICIO
partícula de la leche 2 a 6 ºC
ºC (Pasteurización
lenta) o a 72 ºC por 3. Filtración impurezas
condiciones de 7. Corte
funcionamiento, 5 min
debidamente lavado 8. Reposo
y esterilizado con
anterioridad. 5 a 10 min
quesos, se obtiene
un producto 11. Moldeado
microbiológicamente 33 a 34 ºC
prensados a 100 PSI en una prensa
más seguro pero hidráulica por un periodo de 48 horas
más susceptible a la
contaminación 12. Prensado suero
después de la 20 ºC
pasteurización. Por 16-20 % NaCl
13. Salado
3 a 5 horas
lo que una vez que 20 ºC
se ha pasteurizado la 14. Empacado al
calentarla a unos 4 a 8 ºC
25 minutos y reponer
parte de la flora FIN
microbiana eliminada
con dicho
tratamiento mediante
la adición de cultivo
láctico (el cual es
una mezcla de
bacterias no
patógenas que
producen ácido
láctico y compuestos
saborizantes como el
diacetil y ácidos
volátiles) para que
tengan lugar las
transformaciones
propias de la
16
maduración del
queso (acidificación,
proteolisis, lipólisis).
6. La coagulación
enzimática es
producida por la
adición del cuajo,
que actúa sobre la
caseína de la leche
(proteína soluble), 20-25 g/100L CaCl2
transformándola, en y cuajo
presencia de sales
de calcio en
paracaseína
insoluble que
precipita formando el
coagulo.
7. La cuajada se corta
con liras horizontales
y verticales a fin de
cortar finalmente
toda la cuajada en
cubitos uniformes
cubitos uniformes de
de
aproximadamente
aproximadamente
1.0 cm de arista.
1.0 cm
Esto ayudará a salir
más rápidamente el
suero, para la
consistencia
deseada del queso
8. Después del corte de
la cuajada, esta se
encuentra muy frágil,
por lo que es
conveniente dejarla
en reposos unos
cinco minutos, para
que adquiera cierta Reposo cinco
consistencia y minutos
permita su agitación
sin fragmentarse, lo
que ocasionaría que
las partículas de
cuajada fragmentada
se pierdan con el
suero.
17
9. Se realiza al principio
muy suavemente
para no romper la
cuajada, luego
paulatinamente se va
aumentando la
velocidad de la
5 a 10 minutos
agitación. Se notará
que la cuajada va
tomando más
consistencia y
ofreciendo cierta
resistencia a su
rotura.
10. Por la válvula de
salida de la tina o
con baldes, se
elimina parte del
suero, equivalente a
1/3 del volumen Salida de suero
inicial de leche. Con equivalente a 1/3
esta parte del suero, del volumen inicial
se está eliminando de leche.
parte del ácido
láctico desarrollado
en el proceso y la
mayoría de lactosa
con el suero.
11.Se coloca la cuajada
en los moldes,
ayudado con baldes
o recipientes
cribados (estos
moldes son
recipientes rígidos
con perforaciones
por donde escapará
el suero y en su
interior retendrá la
cuajada), formando
el queso fresco. En
el interior del molde,
se suele colocar un
paño (tela) para
mejorar el acabado
de la superficie del
queso.
12.El prensado se
realiza a 100 PSI en
una prensa
hidráulica por un
periodo de 48 horas.
18
13.La finalidad del
salado es favorecer
la formación de la
corteza evitando que
se desarrolle
excesivamente la
flora microbiana y a
la vez confiriendo un
sabor característico
al queso. El salado
puede realizarse
siguiendo diferentes
prácticas. En
elaboraciones
artesanales se
realiza por frotación
de sal seca en las
caras del queso, el
llamado salado seco.
Por el contrario el
método más
comúnmente
utilizado es por
inmersión en
salmuera, aunque
también puede
hacerse en cuba,
añadiendo sal a la
cuajada recién
cortada.
14. Al vacío
15. Es conveniente
almacenarlo en
refrigeración para
lograr prolongar su
vida útil. El tiempo de
almacenamiento
tiene mucha
influencia en el
producto final
19