FACULDADE DE CINCIAS MDICAS DE MINAS GERAIS

DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA

Curso de Medicina

RELATRIO REFERENTE AULA PRTICA DA

DISCIPLINA DE BIOQUMICA I: introduo s tcnicas e
normas de laboratrio e preparo de solues de Azul de
Metileno e Cloreto de Sdio

Eurides de Souza Lima Neta

Gabriela Gonalves Alam
Guilherme Passos de Freitas
Luiza Lamounier
Sara Newton Lima de Almeida
Washington Carlos Souza Jnior

Belo Horizonte
2015

SUMRIO

INTRODUO.................................................................................. 2
1.1 Normas de segurana.......................................................... 2
1.2 Vidrarias de laboratrio....................................................... 3
1.3 Normas de pesagem dos materiais.................................... 4
1.4 Normas de pipetagem dos lquidos.................................... 5

METODOLOGIA .............................................................................. 5
2.1 Materiais e reagentes........................................................... 5
2.2 A realizao.......................................................................... 6

RESULTADOS E DISCUSSO ...................................................... 7

CONCLUSO .................................................................................. 8

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS................................................ 9

INTRODUO

Esse relatrio refere-se aula prtica da disciplina de Bioqumica I, ministrada pela

professora Christiane no dia 26 de fevereiro de 2015. Foi realizada uma srie de

procedimentos laboratoriais com a finalidade de apresentar o laboratrio aos alunos,

capacit-los a manusear as ferramentas de trabalho no laboratrio e inform-los
sobre normas de conduta no ambiente. Para tanto, contamos com a ajuda da tcnica
em laboratrio Cludia e dos monitores da disciplina.

1.1 Normas de segurana

A realizao de atividades em ambiente de laboratrio pressupe um conjunto de
normas que visa garantir a segurana e a integridade dos alunos. Esse espao
oferece riscos devido aos materiais utilizados e, portanto, todas as medidas que
diminuem os riscos de trabalho so vlidas. Algumas normas bsicas so:

Uso obrigatrio de jalecos de manga comprida, que deve, de acordo com a

legislao nacional, ser restrito ao ambiente do laboratrio;

Uso de equipamentos de proteo individual sempre que requisitado;
Seguir sempre as orientaes do professor;
proibido o consumo de qualquer alimento dentro do laboratrio;
Evitar contato direto entre a pele e as substncias utilizadas;
Uso de lixeiras apropriadas e descarte correto dos materiais;
No cheirar diretamente nenhuma das substncias;
Certificar-se de ter deixado todos os aparelhos usados desligados e os

instrumentos limpos;
Cuidado ao manusear a vidraria;
No utilizar objetos sujos para trabalhar com os reagentes;
Estar atento aos rtulos de todos os frascos;
No utilizar produtos sem rtulo;
No aquecer a vidraria se ela estiver molhada;
Organizar a bancada ao final da aula e lavar a pia utilizada;
Manter a disciplina dentro do laboratrio;
Prestar ateno no roteiro que dever ser seguido e obedecer aos comandos

do professor;
Qualquer anormalidade ou acidente dever ser comunicado imediatamente
ao professor para que as devidas providncias sejam tomadas.

1.2 Vidrarias de laboratrio

As vidrarias de laboratrio so instrumentos de vidro cristal ou temperado para que

as medidas sejam precisas e o recipiente no reaja com a substncia contida nele.
Entretanto, elas devem ser tratadas com o maior cuidado possvel, principalmente
porque o vidro utilizado mais trabalhado que quaisquer outros vidros e, portanto,
muito mais caro. Os materiais de metal e madeira podem servir para suporte e
manuseio das vidrarias. Existem tambm materiais de porcelana, de borracha e de
plstico e materiais que so fontes de aquecimento.
As vidrarias mais utilizadas na aula prtica foram:

Tubos de ensaio de tamanhos variados: recipientes onde podem ser

realizadas reaes de pequena escala e podem ser aquecidos diretamente

pela chama do bico de Bunsen;

Pipeta graduada: utilizada na medio de pequenos volumes variveis e

possui preciso limitada;

Pipeta automtica: utilizada, tambm, na medio de pequenos volumes,

porm, com uma preciso muito alta;

Balo volumtrico: recipiente de volume definido, com alta preciso de

medida do volume, utilizado para preparo de solues;

Basto de vidro: utilizado para agitao ou transferncia de lquidos;
Bquer: muito comum em laboratrios, utilizado para diversas finalidades.
Entre elas esto a dissoluo de substncias, o aquecimento de lquidos e a

realizao de reaes qumicas;

Erlenmeyer: possui a mesma finalidade do bequer, alm de permitir agitao
mecnica devido ao seu afunilamento que evita perda de material e

acidentes;
Funil de vidro: Utilizado na transferncia de lquidos de um frasco para o outro
ou na filtrao simples.

Outros materiais usados, que no so produzidos a partir do vidro, foram:

Pisseta ou frasco lavador: frasco de plstico utilizado para a lavagem de

materiais a partir de um jato de solvente armazenado em seu contedo;

Estante para tubo de ensaio: estante utilizada como suporte para os tubos de

ensaio;
Esptulas e colheres: utilizadas para a transferncia de slidos. So,

geralmente, produzidas em ao inox, porcelana ou nquel;

Balana analtica: utilizada para pesagem de massas com alta preciso.

1.3 Normas de pesagem dos materiais

A balana um dos principais instrumentos contidos em um laboratrio e o seu
manuseio deve ser feito com cuidado e seguindo algumas orientaes:

Em primeira instncia, deve-se investigar o peso mximo suportado pela

balana. Por ser um instrumento de preciso delicado, no capaz de

suportar cargas excessivas. Esse dado vem impresso na prpria balana;

fundamental nivelar a balana;
Observe as precaues especiais para a pesagem de lquidos;
Deve-se zerar e tarar a balana com o recipiente onde ser alocada a
substncia de interesse do aluno. Esse recipiente protege o equipamento

contra corroso;
Em seguida, feita a pesagem da substncia;
Aps a pesagem, a balana deve ser apagada, zerada e todo e qualquer
resduo que tenha cado no seu interior deve ser removido.

importante salientar que no devem ser realizadas pesagens de reagentes

qumicos diretamente sobre o prato da balana. Alm disso, materiais previamente
aquecidos devem retornar temperatura ambiente antes de serem pesados.

1.4 Normas de pipetagem dos lquidos

A medida correta dos volumes fundamental para o sucesso do trabalho no
laboratrio de bioqumica. Para medidas precisas de volumes, utilizamos, entre
outras opes, a pipeta graduada e a pipeta automtica. A medida de volume do
lquido realizada comparando-se o nvel do mesmo com os traos marcados nas
paredes do recipiente. A leitura do nvel para lquidos transparentes deve ser feita na
parte inferior do menisco, estando a linha de viso do operador perpendicular
escala graduada.
As medidas de volume realizadas por aparelhos esto sujeitas a erro decorrente da
dilatao e contrao do material de vidro, tenso superficial sobre a superfcie
lquida, imperfeies na calibragem dos equipamentos, erro de paralaxe na
observao do menisco.

METODOLOGIA
2.1 Materiais e reagentes
Pipeta graduada
Pipeta automtica
Bquer
Funil de vidro
Tubo de ensaio
Balo volumtrico
Basto de vidro
Erlenmeyer
Pisseta
Estante para tubos de ensaio
Esptula
Balana analtica
Fucsina
Azul de Metileno
gua destilada
2.2 A realizao

A metodologia foi traada e realizada com o intuito de iniciar os alunos nas prticas
laboratoriais. A atividade prtica foi desenvolvida em quatro etapas:

Primeira etapa: com o auxlio de pipetas graduadas, utilizadas para pipetar

valores de ml, e automticas, utilizada em valores referentes a ml , foram
pipetados volumes diferentes de fucsina, um lquido cor de rosa, em
diferentes tubos de ensaio. Os volumes pipetados foram 5ul; 13ul; 30ul; 80ul;

900ul; 1ml; 1,5ml; 2,5ml; 5ml; 9ml; 25ml.

Segunda etapa: com uma pipeta volumtrica, foram medidos 10 mL de azul
de metileno de concentrao 100%. Essa alquota foi transferida para um
balo volumtrico de 100mL no qual foram adicionados 90mL de gua
destilada (80 mL foram despejados diretamente da pisseta e os outros 10 mL
foram cuidadosamente pipetados a fim de evitar erros). Essa soluo foi
homogeneizada por inverso dez vezes, formando uma soluo de azul de
metileno 10% v/v. Aps esse procedimento foram realizadas diluies
seriadas em tubos de ensaio. Na primeira diluio, foi adicionado 1mL da
soluo de azul de metileno 10% v/v em um tubo de ensaio contendo 9mL de
gua destilada, formando uma soluo de azul de metileno de concentrao
1% v/v. Na segunda diluio, foi adicionado 1mL da soluo de azul de

metileno 1% v/v em um tudo de ensaio contendo 9mL de gua destilada,

resultando em uma soluo de azul de metileno de concentrao 0,1% v/v.
Posteriormente, na terceira diluio seriada, foi adicionado 1mL da soluo de
azul de metileno 0,1% v/v em um tubo de ensaio contendo 9mL de gua
destilada, formando uma soluo de azul de metileno de concentrao 0,01%

v/v.
Terceira etapa: foi preparada uma soluo de cloreto de sdio 1% p/v.
Primeiramente, foi pesado na balana analtica 1g de NaCl slido. Essa
alquota

foi

transferida

para

um

bquer,

onde

foi

adicionado,

aproximadamente, 50mL de gua destilada e a mistura foi agitada com basto

de vidro at a dissoluo completa do sal. Com o auxlio de um funil de vidro,
a soluo de NaCl 2% p/v foi transferida para um balo volumtrico de
100mL, que foi completado com gua destilada, utilizando a pisseta. Aps
esse acrscimo de gua destilada, foi feita a homogeneizao por inverso,

formando uma soluo de NaCl de concentrao 1% p/v.

Quarta etapa: Na ltima etapa do processo, as solues formadas na
segunda e na terceira etapas foram rotuladas. As imagens abaixo mostram as
etiquetas.

RESULTADOS E DISCUSSO

Como resultado principal, foi possvel conhecer o laboratrio e suas condies de

trabalho, seguir as normas de segurana, conhecer e manusear as vidrarias de
laboratrio e aplicar as normas de pesagem de materiais e de pipetagem de
lquidos. Na primeira etapa da aula prtica, foi possvel aplicar as normas de
pipetagem de lquidos e realizar mensuraes de diferentes volumes de lquidos.
Como resultado, foram obtidos diferentes volumes de amostras nos tubos de ensaio.
Na segunda etapa, foi observado, principalmente, a mudana de cor da soluo de
azul de metileno em cada diluio. Em concentrao 100% v/v, o azul de metileno
apresentava cor azul intensa e homognea. Em concentrao 10% v/v, o azul ainda
era a cor predominante, porm no to intenso quanto na primeira soluo. Em
concentrao 1% v/v, o azul se desbotou bastante, ficando muito claro. Em
concentrao 0,1% v/v, o tom azulado da soluo ficou ainda mais discreto. Na
ltima soluo, de concentrao 0,01%, o azul era praticamente imperceptvel. Foi
possvel, portanto, trabalhar com diferentes concentraes de solues e realizar
diluio seriada.
Na terceira etapa, macroscopicamente, no houve alterao entre as solues de
NaCl de concentrao 1% p/v e 2% p/v. Em relao agua pura, essas solues
ficaram discretamente trgidas. Microscopicamente, entretanto, houve mudanas
significativas na densidade da soluo e nas suas propriedades. Essa etapa permitiu
a aplicao das normas de pesagem de materiais e o trabalho com a balana
analtica. Na quarta etapa, as etiquetas foram confeccionadas e as solues,
devidamente rotuladas. Dessa forma, foi possvel aprender sobre o processo de
rotulagem de substncias e entender a importncia da correta identificao dos
materiais.

CONCLUSO

Essa aula prtica de Bioqumica I no laboratrio foi muito importante, na medida em

que permitiu aos alunos conhecer o laboratrio e suas condies de trabalho,
manusear as ferramentas laboratoriais, como vidrarias, equipamentos de pesagem e
outros materiais, aplicar e entender a importncia das normas de laboratrio, como
as de segurana, de pesagem e de pipetagem, trabalhar com reagentes e solues

e compreender a necessidade de se seguir corretamente a metodologia delineada

nas aulas prticas para a realizao dos procedimentos de preparo de amostras,
misturas, diluies e rotulagem de substncias.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

RUSSELL, J. B. , Qumica Geral, Volume 1 e 2, Makron Books, So Paulo,1994.

(LIVRO TEXTO).
MAHAN, B. M. e MYERS, R. J.; Qumica Um Curso Universitrio, Ed. Edgard
Blucha, So Paulo, 4 Edio, 1993.
BRITO, M. A. de e PIRES, A. T. N., Qumica Bsica, Teoria e Experimentos, Srie
Didtica, Ed. UFSC, 1997.