Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
5 (2009) 26-33
Publicada en lnea por la Universidad Pontificia Bolivariana
http://convena.upb.edu.co/revistaaplicada
ISSN 2011-0413
ESTUDIO PRELIMINAR DE LA PRODUCCION DE ACIDO L-ASPRTICO CON
Pseudomonas fluorescens
Juan C. Oviedo L* , Patricia Castrilln H*, Margarita E. Ramrez C.*, Diana M. Vanegas H. *
*
1. INTRODUCCIN
El cido L-asprtico es un aminocido no esencial
empleado como material de partida para una
amplia variedad de aditivos para la industria
farmacutica y alimenticia por lo que varios
procesos qumicos y enzimticos han sido
descritos para su preparacin (Giselbrecht et al,
2001).
27
28
18-20
Abundante
1,94
33-40
Abundante
2,9
48-60
Abundante
3,87
80
Abundante
% cido fumrico
Turbidez
SI
SI
SI
SI
SI
SI
NO
29
Concentracion (mM)
8
7
6
5
4
3
2
1
0
-1 0
50
100
150
200
250
Tiempo (Horas)
Acido Fumarico
Biomasa
Acido L- Aspartico
De acuerdo a la Fig. 2 se
dira que el
microorganismo alcanza la fase estacionaria
alrededor del da cinco. Sin embargo, esto difiere
de los resultados obtenidos por Zagrandi y Peri
(1977) cuando trabajando con Bacillus ATCC
31177
observaron que el microorganismo
alcanzaba la fase estacionaria en 18 a 20 horas. Se
cree que el microorganismo sigue creciendo
despus del agotamiento del cido fumrico
porque emplea el cido L-asprtico como sustrato
(Mukouyama et al, 2001).
Aunque se esperaba el proceso convencional en el
que la formacin de producto aumenta con el
transcurso de los das, en la medida que la
concentracin del cido fumrico disminuye. A
partir de los datos de la Fig. 2, se establece que el
primer da, en el momento de la inoculacin, es
cuando
se
forma
ms
aminocido
(Aproximadamente 1,5mM) y que durante el
primer da se sigue formando aunque en menor
cantidad, por lo que se v en la muestra tomada
seis horas despus. En el segundo da, todava se
presenta alguna formacin de aminocido,
correspondiente a una concentracin aproximada
de 0,6 mM del aminocido. Una probable
explicacin de lo anterior, podra ser debido a que
el inculo, durante su desarrollo, produce enzima
y ms an, si lleva tres a cinco das en
crecimiento; hay lisis celular, se aumenta la
concentracin de enzima en el inculo, que al ser
vertido en el reactor, de donde se toman las
muestras para la determinacin de consumo de
sustrato y formacin de producto, se forma el
aminocido, especialmente en el primer da de
desarrollo del cultivo para la toma de muestras,
como se observ con la prueba de ninhidrina.
30
= max
S
Ks + S
(1)
,max, Ks y S representan,
Donde
respectivamente, velocidad Especifica de
crecimiento, velocidad mxima especifica de
crecimiento, constante de Monod y concentracin
de sustrato. La ecuacin 2 indica el ajuste
obtenido.
0.0097 * S
0.013 + S
(2)
P = ae bt + c
(3)
(4)
Por otro lado, para la obtencin del cido Lasprico es importante tener en cuenta el
comportamiento del amonio durante el desarrollo
del cultivo puesto que segn Duc (1976) a pH
alcalino el amonio se vuelve gaseoso. Adems,
con el sistema de aireacin trabajado pudo haber
prdidas de sta
molcula, alterando su
proporcin recomendada con respecto al cido
fumrico, para la formacin del cido L-asprtico
(Eyal et al, 2001). Esto es importante, porque si
bien se consider el cido fumrico, como el
sustrato limitante, la falta de amonio, tambin
limita la formacin del aminocido. Y segn los
resultados obtenidos, aun habiendo cido
fumrico en el medio, no se formaba del
aminocido.
31
4. CONCLUSIONES
Las La cepa de Pseudomona fluorescens del
laboratorio de microbiologa de la Universidad
Pontificia Bolivariana, si produce el aminocido
cido L-asprtico en una concentracin
aproximada de 1,5mM.
El cido L-asprtico se forma en los dos primeros
das de desarrollo del cultivo cuando es inoculado
con un pre-inculo de cinco das de desarrollo.
Bajo las condiciones de laboratorio estudiadas, en
un medio de cultivo con el cido fumrico al 1%,
el crecimiento de la cepa nativa de Pseudomona
fluorescens de la UPB obedece a los parmetros
cinticos max = 0,0097h-1 y Ks= 0,013g/L.
AGRADECIMIENTO
Los autores de este articulo quieren desean dar las
gracias a Centro Integrado para el Desarrollo de
la Investigacin, CIDI de la UPB por el apoyo
econmico que brindado para llevar a cabo este
proyecto y a la empresa Andercol por los aportes
en reactivos y equipos que hicieron en el tiempo
que duro la investigacin.
REFERENCIAS
Brun, Daniel; Lahary, Pierre-Yves and Thierry,
Jean- Francois. Preparation of L-aspartic acid.
Estados Unidos. Patente No. 5,488,155; Ene.
30, 1996.
Eyal, Aaron. Jansen; Robert J. Vitner;
Asher.
Cami; Pierre. Et al Process for the production
of aspartic acid condensate. U. S. Patent No.
6,344,348; Feb. 5, 2002.
Duc, Nguyen-Cong. Method of making Laspartic acid from fumaric acid. U. S. Patent
No. 3,933,586; Ene. 20, 1976.
Giselbrecht, Karl-heinz and Schaller, Josef.
Process for preparing L-aspartic acid. U. S.
Patent No 6,258,572; Jul. 10, 2001.
Kato, Naoki et al. Method for producing Laspartic acid. U. S. Patent No. 5,541,090.
5,741,681; Abr.21, 1998.
Linden, Guy y Lorient, Denis. Bioqumica
Agroindustrial: revaloracin alimentara de la
produccin agrcola. Zaragoza : Acribia, 1996.
p. 366-378.
Mukouyama, Masaharu and Yasuda, Shinzo.
Methods for producing a succinamida polymer,
32
Margarita E. Ramrez C.
Profesora de la Universidad Pontificia
Bolivariana en la Facultad de Ingeniera Qumica.
Doctora en Ciencias de la Universidad Federal de
Rio de Janeiro. Directora de Centro de Estudios e
Investigacin en Biotecnologa, CIBIOT. Trabaja
en temas de bioprocesos y biotecnologa
ambiental.
Diana M. Vanegas H.
Profesora de la Universidad Pontificia
Bolivariana en la Facultad de Ingeniera Qumica.
Estudiante de Doctorado en Ingenieria area de
materiales de la misma universidad.
33