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Las acuaporinas. Una entrada Molecular en Relaciones planta agua Christophe

Maurel * y Maarten J. Chrispeels Biochimie et Physiologie molculaire des Plantes,
Agro-Montpellier / Centro Nacional de la Investigacin Scientifique / Instituto
Nacional de Investigacin Agronmica / Universit Montpellier 2 Unidad Mixta de
Recherche 5004, Lugar Viala, F-34 060 Montpellier Cedex 1, Francia (CM); y el
Departamento de Biologa, Universidad de California, 9500 Gilman Drive, La Jolla,
CA 92093-0.116 (MJC) Relaciones hdricas son, evidentemente, crucial para la
fsica loga de las plantas terrestres, pero hace 25 aos ms bilogos de plantas
vieron esta rea de investigacin como alguien lo que de una rareza. Dominado
por ecuaciones y desempleo teoras fsicas habituales sobre lquidos fluyendo en
tuberas, relaciones hdricas pareca ser un campo con poco aparente necesidad
de que los conceptos florecientes y AP enfoques ofrecidos por la biologa
molecular y celular. El descubrimiento de las acuaporinas unido estos dos "cultura
ras "de los biofsicos y genetistas moleculares y despertado el inters de los
bilogos celulares y moleculares en relaciones hdricas de las plantas. Temprano
(y actual) de la planta biofsicos, explotando sofisticado teo fsico Ries, formul el
concepto general y unificador que el flujo de agua a travs de las clulas y los
tejidos de la planta puede ser entendida como el producto de la fuerza motriz y
con- conductancia (3, 16). En las plantas, en condiciones naturales, la absorcin
de agua por las races y la prdida de las hojas son impulsados por siempre
cambiantes fuerzas, y plantas mantienen un equilibrio apropiado del agua
ajustando continuamente la conductancia del agua de sus tejidos. El concepto del
potencial de agua unifica la descripcin de stos fuerzas, si hidrosttica, osmtica,
deriva de matriz, o gravitacional en la naturaleza (3, 16). Sin embargo, la in situ
medicin de estas fuerzas est sujeto a trampas, como ejemplificado por las
controversias actuales sobre el nismo meca- del ascenso de la savia del xilema. El
potencial hdrico gradientes tambin pueden ser manipuladas experimentalmente
y en estos estudios la conductancia de las clulas vegetales y tejidos de largo ha
sido visto como un cuadro negro (16). Cmo Por qu las clulas regulan su
conductancia en este cuadro de negro? Canales de agua: un revolucionario
DESCUBRIMIENTO? Clulas de guarda y tejidos vasculares juegan un papel
central en la realizacin de agua y el control de la transpiracin corriente cin, sino
para entrar y salir de los tejidos vasculares agua tiene que fluir a travs de las
clulas vivas. Cuando el agua fluye a travs de los tejidos vivos, se puede seguir
diferentes vas: a travs de las paredes celulares (camino apoplstico), a partir de
la clula a clula a travs de cualquiera de los plasmodesmos (simplstica ruta), o
atravesar las membranas celulares (transcellu- camino LAR). Se han desarrollado
criterios biofsicos para distinguir entre el apoplstico y la clula-a- caminos
celulares (16). Estos estudios se beneficiarn de recientes descripciones
bioqumicos y genticos de cr- barreras celulares cos, como la endodermis de la

raz con su bandas de Caspary, y de nuevos conocimientos sobre la mecanismos

moleculares de gating plasmodesmatal. El avance ms importante hasta la fecha
en la comprensin conductancia pie de las clulas vivas ha venido de el
descubrimiento de una clase de protenas de los canales de agua acuaporinas con
nombre (1). Las acuaporinas ahora han sido se encuentra en casi todos los
organismos vivos. Pertenecen a una familia ms grande de protenas de
membrana homlogas a la protena bovina importante intrnseca (MIP) y muestran
una estructura tpica con seis do- que atraviesa la membrana platos principales y
una simetra interna que muestra dos muy conservadas motivos Asn-Pro-Ala (Fig.
1). Be- causa de su abundancia, plantas homlogos MIP fueron identificados a
finales de 1980 (4), pero varios aos pasaron antes de que se reconoci que
algunos de ellos puede funcionar como canales de agua de alta eficiencia y
facilitar la difusin de las enormes cantidades de WA- ter a lo largo de gradientes
de potencial transmembrana de agua (10). Cuando este descubrimiento fue
presentado en la Planta Conferencia de membrana en Monterey, California, en
1992, reacciones de la audiencia mostraron claramente que el descubri- ery
estaba fuera de sintona con el pensamiento actual de muchos. En ese momento,
ya diferencia de lo que haba sido establecida en membranas de eritrocitos y de
los riones, que se suele suponer que el flujo de agua a travs de la fraccin
lipdica de las membranas de las plantas sera sufi- ciente para atender todas las
necesidades celulares. Sin embargo, canales acuosos en las membranas de las
plantas haban sido discutido ms de 25 aos antes (3), y funcional pruebas nal
haba sido proporcionado por un laboratorio (20). Se ha argumentado que el
descubrimiento de acuicultura porinas no revolucionan la base biofsica de
relaciones hdricas de las plantas (17), y esto bien puede ser cierto. Sin embargo,
creemos que la identificacin de las acuaporinas ha cambiado mucho nuestro
pensamiento acerca de cmo las plantas podra regular el flujo de agua, mucho
ms all de la simple representacin de los poros llenos de agua en un modelo bro
brana. El descubrimiento de las acuaporinas constituye un con- avance conceptual
en la fisiologa vegetal. NUEVAS PERSPECTIVAS SOBRE LA MOLECULAR Y
BIOLOGA CELULAR DE MEMBRANAS A diferencia de lo que se supona en un
principio, especfica composiciones de lpidos de la membrana apenas pueden
explicar * Autor de correspondencia; maurel@ensam.inra.fr e-mail; fax 33- 4-6752-57-37. Fisiologa Vegetal, enero de 2001, Vol. 125, pp. 135-138,
www.plantphysiol.org 2001 Sociedad Americana de fisilogos de plantas

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algunos de los valores de permeabilidad alta de agua (100 m s 1 ) Que fueron
reportados inicialmente para las membranas de las plantas. Por lo tanto, el
descubrimiento de las acuaporinas dio un fuerte apoyo puerto a la idea de que tan
alta permeabilidad al agua propiedades podran ser necesarias para ciertas
fisiolgica procesos. Lo ms importante, las acuaporinas inmediatamente
proporcionado una base molecular slida para el rpido y re- regulacin reversible
de transporte de agua transmembrana. Una vez que una protena est implicada,
la clula tiene la capacidad para regular su abundancia (o post-transcripcional
regulacin de la transcripcin) o para modular su actividad. La expresin gnica de
las acuaporinas se regula desarrollo mentalmente de una manera especfica de la
clula, a travs de las hormonas, y por seales ambientales tan diversos como innematodo infeccin o la sequa (revisado en 5 y 15). Reversible fosforilacin
controla la actividad de alguna planta acuaporinas (9). En hojas de espinaca, por
ejemplo, la nivel de fosforilacin de una membrana plasmtica acuicultura porina
depende del potencial hdrico apoplstico, estableciendo as un vnculo interesante
entre la conduccin la fuerza y la conductancia (revisado en 5). Trabajos recientes
hecho en animales puntos a otros mecanismos de acuicultura porinas regulacin,
a travs de pH o cambio calcio libre o la orientacin de protenas (revisado en 19)
controlada. Ex- quisite gating de control por las acuaporinas como ha sido rerevelada para los canales inicos de este modo se puede esperar. Con estos y los
nuevos mecanismos de regulacin que sean descu- Ered en las plantas, las
propiedades de transporte de agua de bro branas ahora aparecer como una
nueva e importante foco en moderna fisiologa de la clula de la planta.
Herramientas, tales como la clula Sonda de presin, que se desarrollaron antes
de medir transporte de agua segura a nivel celular (16), por lo tanto son ganando
un inters renovado. Despus del descubrimiento de las acuaporinas primero, un
sector ond sorprendente hallazgo ha sido su increble diversidad sidad en las
plantas (21). Ms de 30 genes codifican acuicultura porinas homlogos en
Arabidopsis. Sobre la base de la secuencia de homologa, las acuaporinas de
plantas se pueden clasificar en tres subfamilias especficas de la planta (5, 15),
dos de los cuales parece corresponder a la localizacin subcelular distinta ciones.
Tonoplast protenas intrnsecas (TIPS) y plasma protenas intrnsecas de
membrana (PIPs) residen principalmente en la membrana vacuolar y plasma,
respectivamente. Nodulin MIP-26 como ocurren en la peribacteroid membrana de
ndulos que fijan el nitrgeno (4), al menos en legumbres, pero su ubicacin en
otras plantas queda ser descubierto (21). Aunque todas las protenas en el PIP
clado puede no estar en la membrana plasmtica (7) y todos protenas en el clado
TIP en el tonoplasto, es evidente que las acuaporinas distintas isoformas estn
dirigidos a dis- compartimentos subcelulares y acuaporinas Tinct tienen surgido
como marcadores importantes de la clula de la planta bro diferenciacin brana.
Por ejemplo, los anticuerpos producidos contra varios homlogos TIP se han
utilizado para distinguir subtipos vacuolares distintas o morfologas Gies dentro de

la clula misma planta (13), y PIP antibod- IES han revelado membrana
plasmtica invaginado subdominios llamados plasmalemmasomes (15). Los
primeros estudios sobre las relaciones hdricas de las clulas vegetales se
centraron sobre la conductividad hidrulica de clulas enteras y supone que se
determina por el plasma bro brana. Sin embargo, en contraste con las clulas
animales, muchos acuaporinas vegetales estn situados intracelularmente. Varios
grupos recientemente investig el transporte de agua propiedades de vesculas
obtenidas de diferentes celular membranas. Vesculas derivado de la tonoplast de
de raz o de suspensin de clulas o de la peribacteroid membrana de ndulos
fijadores de nitrgeno exhibi WA- valores de permeabilidad ter (11, 12, 14) que
superaron por de varias veces la de la membrana de glbulos rojos, que durante
mucho tiempo ha sido considerado como el prototipo de la canal que contiene
agua de la membrana. Estos hallazgos nos hizo repensar la osmorregulacin de
clulas vegetales en relacin con su alto grado de compartimentacin. El
citoplasma, lo que representa slo una fraccin menor cin del volumen total de la
clula, debe ser crticamente sensible a cualquier diferencia de caudales de agua
que ocurre a travs de sus membranas limitantes. Osmoregula- Eficiente cin de
este compartimento se puede lograr por la rpida transporte de agua a travs de
membranas intracelulares, a proporcionar equilibrio de volumen rpido y la
disipacin de agua gradientes de potencial dentro de la clula (11, 12, 18). Un
tercer hallazgo sorprendente es el descubrimiento de que algunos acuaporinas
son protenas multifuncionales. Ho- mologs en microorganismos tienen un bien
establecidos papel en el transporte de solutos tales osmocompatible como glicerol
(1). Es una curiosidad biofsico que algunos acuaporinas vegetales pueden ser
permeados por tales moles cules (14, 18) (Fig. 1)? Si la relevancia de esta
permeabilidad acin puede probarse in planta, el transporte de solutos
propiedades de las acuaporinas vegetales pueden establecer una ms conexin
entre motor y conductividad Figura 1. Las acuaporinas facilitar la difusin de agua
y pequea solutos neutros travs de las membranas celulares de las plantas. La
permeabilidad residual dad de la membrana lipdica de estas molculas tambin
se indica. La capacidad de algunos acuaporinas para el transporte de solutos se
demostr utilizando molculas de ensayo tales como glicerol y urea, y el fisiolgica
importancia de esta propiedad an no se entiende claramente (ver texto). Planta
de aquaporinas similares a sus homlogos animales se cree que forman
tetrmeros, siendo cada monmero funcionalmente independientes. La supuesta
estructura de un monmero de acuaporina con seis inclinado se muestra que
atraviesa la membrana dominios. Estudios sobre la estructura de AQP1 humana
sugieren que los dos bucles de conexin que contienen la muy conservadas AsnPro-Ala: motivos chapuzn en la membrana y forma parte del poro acuoso. Maurel
y Chrispeels 136 Plant Physiol. Vol. 125, 2001

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tancia. El transporte por acuaporinas vegetales de gaseosa sustancias, tales como
CO 2 o NH 3 , Es un an ms provocativa idea que podra ser de gran importancia
en hojas o en ndulos de las races simbiticas (18). MEMBRANAS,
TRANSPORTE DE AGUA EN TODA LA PLANTA Y Plasticidad del desarrollo Ya
sea en el nivel de clula o tejido, un intrnseca dificultad en el estudio de transporte
de agua es distin- guir entre los caminos paralelos mencionados anteriormente. A
nivel celular, las propiedades reguladoras y la alta capacidad de transporte de las
acuaporinas han esta- cido un papel predominante para estas protenas con
respecto a la de lpidos de membrana en s. En el tejido nivel, acuaporinas
apuntan a la importancia de transcel- transporte de agua lular como una
alternativa a apoplstico y el transporte simplstica. El ubicuo y altamente
expresin regulada de las acuaporinas en plantas tambin sugiere que el
transporte de agua transmembrana puede ser relevante para muchos procesos
distintos de los relacionados a la transpiracin. Por ejemplo, la regulacin de la
acuicultura porin expresin en flores o semillas durante la maduracin cin y la
germinacin se ha descrito (revisado en 5, 15). De manera ms general, las
acuaporinas proporcionan valiosa marcadores espaciales capaces de explorar los
flujos complejos de agua y solutos que juegan un papel fundamental a lo largo de
todo el desarrollo de la planta o en la respuesta de las plantas a diversos estreses
biticos o abiticos (Fig. 2). Despus de slo unos pocos aos, la bsqueda de las
acuaporinas funcin a nivel de planta entera ya ha dado elevarse a nuevos
enfoques experimentales, principalmente en el estudio de la absorcin de agua
por las races. Las races pueden finamente ajustar su conductividad hidrulica en
respuesta a cambios ambientales, tales como un aumento en el suelo salinidad, la
privacin de nutrientes, los ciclos de da y noche, o anaerobiosis. Las acuaporinas
podran explicar perfectamente para tal regulacin (18) y su funcin en las races
es siendo investigado en varios laboratorios. Una cuestin fundamental que queda
por abordar es el recoleccin de evidencia inequvoca para ac- acuaporina tividad
a nivel de tejido u rgano. La farmacologa de acuaporinas sigue siendo pobre, y
derivados de mercurio son los nicos bloqueadores generales de acuaporinas
conocidos fecha. Estos compuestos diana residuos de Cys en acuicultura porinas,
pero, por desgracia, en otras protenas celulares como tambin. Algunos
laboratorios han descontado estos obvia efectos secundarios y caracterizan los
efectos del mercurio en transporte de agua de la raz (2, 8). Aunque cada individuo
estudio debe ser interpretado con cautela, la consistente tencia de los datos
proporciona evidencia convincente de que un parte importante de transporte de
agua de la raz (20% -80%) es bajo el rpido control metablico, y consiste en la
actividad dad de las protenas celulares, muy probablemente acuaporinas. La
gentica inversa permite un enfoque ms riguroso y puede revelar funciones
inesperadas de las acuaporinas. Plantas de Arabidopsis transgnicas que
expresan un anticuerpo anti copia sentido del gen pip1b demostraron una
reduccin de expresin sin de varios homlogos PIP1 y proporcionado definicin

pruebas tiva para la contribucin de las acuaporinas a el transporte de agua de la

membrana plasmtica (6). Sorprendentemente, estas plantas antisentido
mostraron un aumento de la raz masa, mientras que el desarrollo de la sesin era
sin cambios. A pesar de que este fenotipo podra ser relacionado con la edad
observacin de que la raz / brote proporcin de plantas ajusta en respuesta a su
agua estado, enfatiza directamente cmo trans- membrana puerto puede influir en
la plasticidad del desarrollo de plantas. En un futuro prximo, el anlisis de un solo
golpe de gracia mutantes acuaporina esperamos aportar pruebas para las
mltiples funciones de acuaporinas en el crecimiento y desarrollo de las plantas y
en su adaptacin TIVE respuesta a las tensiones. Ha sido fascinante observar
durante la ltima pocos aos, cmo el descubrimiento de las acuaporinas tiene fo
conceptos generales lenged sobre el papel de las membranas en las relaciones
hdricas de las plantas. En un tiempo se supuso por la mayora de los bilogos
vegetales que el agua residual per- permeabilidad de los lpidos de membrana de
plantas era suficiente para el flujo de agua en las plantas. El entusiasmo por el
descubrimiento de las acuaporinas llevado a la propuesta poco realista que flujo
de agua transmembrana debe ser necesariamente me- diated por estas protenas.
La verdad tiene que estar alguien donde en el medio y todava nos queda un largo
camino por recorrer Figura 2. Las acuaporinas pueden estar involucrados en un
gran nmero de fsica meto- funciones en las plantas. Estas funciones se infiere
de la patrones de expresin de isoformas especficas de acuaporina o desde el
Block ing efectos del mercurio en el transporte de agua a travs de los tejidos
vegetales. Las acuaporinas: una entrada Molecular en Relaciones planta agua
Plant Physiol. Vol. 125, 2001 137
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para entender completamente la importancia de estas protenas. Sin embargo, las
acuaporinas proporcionan una nica molecular punto de entrada en las relaciones
hdricas de las plantas y establecer conexiones fascinantes entre transporte de
agua puerto, desarrollo de las plantas y las respuestas adaptativas de plantas a su
entorno siempre cambiante.