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Pour les chromosomes circulaires, ie bactries, les plasmides et certain virus, une
origine de rplication suffit et les deux fourche qui en parte se confondent au cot oppos. En
ce qui concerne les longs chromosomes eucaryotes, en gnrale ils comportent un grand
nombre dorigines de rplication. Les deux fourches partent dune origine donne et
progressent jusqu' ce quelles rencontrent les fourches parties dune origine adjacente.
Chaque rgion copie par une origine de rplication sappelle un REPLICON.
Exprience avec alternance de milieu lourd 3H et lger.
III Vitesse de rplication de lADN.
Affin de dterminer la vitesse de progression des fourches de rplication des autoradiographies des fibres dADN de cellules marques pendant des laps de temps croissant.
Un cycle de rplication de E.Coli est de 42min, sachant que le chromosome unique
contient 4,4*106pb et quil est copi par deux fourches de rplication en mme temps, la
vitesse de progression dune fourche est denviron 1000pb.s-1 par fourche.
La vitesse de propagation des fourches dans les cellules humaines est de 100pb.s -1.
Comme le gnome humain fait 3*109 pb, et quil se rplique en 8 heures, il doit comporter au
moins 1000 fourches de rplication. En fait les autoradiographies montre quil y a entre 10 4 et
105 rplicons.
IV La rplication de lADN commence des sites prcis.
Origine de rplication = le tronon ncessaire et suffisant la rplication dun ADN.
Les origines de rplication sont des squences formes de petites squences rptitives
reconnues par des complexes se fixant lorigine essentielle dans lassemblage du complexe
de rplication. Cette zone est flanque de squences riche en AT, disposition propice la
dtorsion de lhlice bicatnaire.
V Rplication chez les procaryotes.
Il nexiste pas dADN polymerase qui puisse faire la synthse de 3 vers 5, toutes
les ADN polymrase font la synthse de 5 en 3, et aucune ne peut amorcer de synthse
de novo, ie sans amorce ADN ou ARN prexistantes.
Au niveau du brin 53 la synthse est continue, il sagit du brin avanc ou prcoce. Au
niveau du brin 35 la synthse se fait galement de 5 en 3 grce au fragment dokasaki
denviron 1000 nuclotides, il sagit du brin retard. Il y a une seule ADN polymrase de type
III (mais deux sous unit) qui travaille sur les deux brin au niveau dune fourche de
rplication.
Les ADN polymrases sont : ADN pol qui participe l'longation, ADN pol
qui fait les rparations et ADN pol qui est responsable de la rplication de
lADN mitochondriale ;
Rparation des dimres de thymines : ces dimre sont produit par les UV
lorsque deux thimines sont contigus sur le mme brin = photodimrisation. La
rplication sarrte au niveau du dimre car la polymrase en peut plus avancer,
une endonuclase coupe une dizaine de nuclotides autour du dimre, il y a
ressynthse par lADN pol III pour les procaryotes et lADN pol pour les
eucaryotes. Affin, une ligase referme les dernires liaisons phosphodiester. Il
existe une maladie rare (Xeroderma pigmentosum) ou il ny a pas
dendonuclase et donc pas de rparation. Les patient son extrmement
sensible la lumire et la kratose volue vers un cancer cutan.