CRECIMIENTO

BACTERIANO
Curso: microbiologa y parasitologa
2014
Prof. Dra. Patricia Palma Flux
patypalma2009@gmail.com

Objetivos
Conocer principios generales del crecimiento
bacteriano
Conocer el ciclo de crecimiento de las poblaciones
microbianas
Conocer factores que afectan el crecimiento bacteriano

Crecimiento sistemas biolgicos

crecimiento poblacional: Incremento en el n de clulas
crecimiento individual: Incremento en el tamao y peso
previo a la divisin celular funcin bacteriana para
preservar la especie

Crecimiento divisin
Reacciones de polimerizacin
Monmeros polmeros
(macromolculas)
cidos nuclecos y Protenas
2000 reacciones qumicas

Ensamblaje de macromolculas y formacin

de estructuras :
Flagelo, pared celular, ribosomas , etc

Etapas del ciclo celular procaritico

Proceso de replicacin Cromosmica y de plsmidos.

Segregacin de cromosoma y plsmidos a clulas hijas.

Sntesis de nuevos materiales de las envolturas bacterianas.

Proceso de divisin celular :

formacin del tabique o septum.

Crecimiento de la Pared Celular

Ocurren dos procesos fundamentales:

expansin o aumento de tamao de la pared

formacin del tabique transversal o septo en el

centro de la clula.

Crecimiento de la Pared Celular

Biosntesis del Peptidoglicn (PG)

Pared bacterias Gram Positivo

Sntesis del peptidoglican

Regulacin del crecimiento del peptidoglican

El crecimiento del peptidoglican y la formacin
del septo dependen de la actividad controlada y localizada de
autolisinas.
Autolisinas : transglucosidasa y/o transpeptidasa

Estas enzimas son los sitios de accin de las penicilinas (PBP).

Bacterias Gram Negativo

Sntesis del LPS

El ensamblaje del lpido A se realiza en la membrana celular y
los azcares centrales se van uniendo secuencialmente.

Polisacarido O

Polisacarido Central

Lpido A

Las subunidades del Ag O son sintetizadas

independientemente sobre un portador lipdico.
El Ag O sintetizado se une a la regin central y al lpido A,
generndose el LPS en la membrana celular antes de su paso
e insercin a la membrana externa.

Formacin del tabique transversal o septum

El comienzo de la tabicacin requiere 2 seales:
1.- Trmino de replicacin cromosomal y las copias hijas
separadas en extremos opuestos.

2.-La clula debe haber alcanzado una longitud umbral.

Formacin del tabique transversal o septum

Poco antes de la divisin y bajo control del ciclo celular,
protena FtsZ se ensambla en la cara citoplasmtica de la
membrana celular y forma un anillo citocintico.

Una vez que FtsZ ocupa el lugar del futuro septo, otras
protenas FtsZ forman un complejo llamado Divisoma.

Los polmeros de FtsZ se contraen tracccionando las

envolturas bacterianas al interior

FtsZ adems activan autolisina especficas de septum.

La divisin de la bacteria por fisin binaria simtrica se

logra gracias a la invaginacin de la membrana celular y del
peptidoglican en el centro de la clula madre.

Formacin del Septum

Divisin: fisin binaria

Formacin de 2 clulas hijas a partir de una
Replicacin y
elongacin celular
Formacin del septo

Terminacin del septo

Separacin

Tiempo de generacin
Tiempo requerido por una clula para duplicarse o
completar un ciclo de crecimiento

Variable

Escherichia
coli 20 min

Dependiente (genticos y
ambientales)

Streptococcus
mutans 2 h

Porphyromon
as gingivalis
15.8 h

Resumen de conceptos
Crecimiento implica:

Aumento del numero de clulas

Aumento del tamao celular

El crecimiento ocurre por fisin binaria

La divisin y replicacin son eventos coordinados

Velocidad de crecimiento
Cambio en el n de clulas o masa celular por unidad de
tiempo

crecimiento exponencial: duplicacin de una poblacin

celular en un tiempo dado

Crecimiento exponencial

1.- fase de latencia (lag)

2.- fase exponencial
3.- fase estacionaria
4.- muerte

Fases del crecimiento exponencial

Curva de crecimiento en un medio de cultivo cerrado

Formas de estudio del crecimiento bacteriano

Mtodos para medir el crecimiento

Mtodos para manipular el crecimiento

Conocimiento de factores medioambientales

que influyen en el crecimiento bacteriano
Ej. T, pH, oxigeno, nutrientes

Medicin del crecimiento

Mtodos que permiten seguir los cambios en el n de clulas o el peso de la
biomasa celular

Recuento total de clulas

Recuento de clulas viables
Diluciones

Recuento total de clulas

Microscopa de muestra seca

Microscopa de muestra lquida

Desventajas:
1. Cuenta clulas vivas y muertas
2. Clulas pequeas no se ven bien
3. Tiempo y habilidad
4. Microscopio de contraste de fases para muestras no teidas
5. La suspensin debe tener una concentracin de al menos 10 E6

Recuento de clulas viables

Permite contar slo clulas vivas
clula viable: tiene la capacidad de dividirse y
originar una colonia cuando se siembra en un
medio slido

Diluciones
Permite contar clulas viables. El n de colonias debe de
encontrarse en rangos de 30 a 300 colonias
La muestra debe ser diluda seriadamente en base 10

Recuento de clulas viables

10 -5

10 -4

10 -3

Clculo:
N de colonias
FD x VP

UFC/ml

Cultivos contnuos

QUIMIOSTATO
Permite controlar:
la densidad de poblacin
Velocidad de crecimiento

Mediante:
Velocidad de dilucin
Concentracin de nutrientes

Factores ambientales y crecimiento microbiano

Conocer como afectan diversos factores como:

t, pH, oxgeno, nutrientes, agua
en el crecimiento (viabilidad y reproduccin)

Aplicacin:
Explicar su distribucin
Disear mtodos para su control

pH Vaginal microbiome of reproductive-age

women Ravel et al. 2010 PNAS

Esquema que muestra los cinco agrupamientos genticos (I al V) encontrados en la

microbiota vaginal.
La cantidad de ramas nos indica la diversidad microbiana.
En la barra ms inferior se indica el valor de pH ptimo de dichos microorganismos.
(fuente: Ravel et al.)

Efecto de la T sobre el crecimiento microbiano

temperatura mnima por debajo de la
cul no es posible el crecimiento
temperatura ptima, a la que se
produce el crecimiento ms rpido
temperatura mxima por encima de la
cul es imposible que se d el
crecimiento.
Estas
tres
temperaturas
son
caractersticas de cada organismo y
podemos
encontrar
una
gran
variabilidad, desde organismos cuya
temperatura ptima son 4C hasta
microorganismos
que
crecen
ptimamente a 106C.

Growth curves of S. mutans UA159 grown under aerobic or anaerobic conditions.

. Growth in TV medium
supplemented with glucose (A),
fructose (B), or mannose (C)
was monitored in a Bioscreen C
system that was set to
continuously shake (aerobic
conditions).

For anaerobic conditions, sterile

mineral oil was placed on top of
the broth culture.

Ahn S et al. Appl. Environ. Microbiol. 2009;75:2517-2527

Confocal microscopic images of S. mutans UA159 biofilms grown under aerobic or anaerobic
conditions.

For biofilm formation, S.

mutans was grown in
BM with either 20 mM
glucose (A) or sucrose
(B) for 24 h.
Cells were stained with
SYTO 13 for 20 min.

Ahn S et al. Appl. Environ. Microbiol. 2009;75:2517-2527

Gracias por su atencin