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OBJETIVOS
II.-
El alumno:
El alumno conocer y aplicar el procedimiento de esterilizacin por calor
hmedo, as como las ventajas del procedimiento.
FUNDAMENTO TERICO
Agentes fsicos antimicrobianos.
A) CALOR HMEDO.- La temperatura elevada, combinada con una humedad
elevada, es uno de los mtodos ms efectivos para matar microorganismos. El
calor hmedo mata a los microorganismos coagulando sus protenas. Es mucho
ms rpido y efectivo que el calor seco. El vapor a presin proporciona
temperaturas por encima de las que se pueden obtener al hervir. Tiene la ventaja
de un calentamiento rpido, as como penetracin rpida y abundante humedad.
El aparato a esterilizar que utiliza vapor de agua a presin regulada se denomina
autoclave. Consta de una cmara de doble pared que se llena de vapor saturado
libre de aire y se mantiene a la temperatura indicada y a la presin establecida
durante un periodo de tiempo determinado. Generalmente el autoclave funciona a
una presin de 15 libras/ pulgada cuadrada a 121C ( 249F). El tiempo de
funcionamiento para lograr la esterilidad depende de la naturaleza del material
que se va a esterilizar, del tipo de envase y del volumen del material. Una
temperatura de l00C es la suficiente para matar a todas las formas bacterianas
en 2 o 3 minutos, excepto a las esporas, para matar a estas se requiere una
temperatura de 121C durante 15 minutos y a una presin de 15 libras.
Este mtodo es adecuado para esterilizar aparatos que tienen hule, jeringas que
contienen metal, para medios de cultivo que contienen un azcar especial como
dextrosa. El autoclave se puede sustituir por la olla de presin.
B) CALOR SECO.- En este tipo de esterilizacin existe una destruccin de los
microorganismos oxidando sus constituyentes qumicos, desnaturalizando las
protenas y los cidos nucleicos de las clulas as como fragmentando las
membranas celulares. Para materiales que deben permanecer secos como
ciertos instrumentos de vidrio de laboratorio tales como: cajas de petri, pipetas,
as como aceites, polvos (por ser impermeables al vapor), los materiales que no
se pueden esterilizar por calor seco son: Material textil (algodn, sedas, lino,
etc.), gomas y materiales sintticos Todo material que se altere a la temperatura
de trabajo se dispone de hornos elctricos por los que circula aire caliente, en
vista de que el calor es menos eficaz en materiales secos, se acostumbra a
aplicar una temperatura de 160C a 170C durante una hora o ms. Para
materiales de vidrio de laboratorio es suficiente una exposicin de dos horas de
duracin a 160C (320F) para que quede esterilizado. Otras formas tiles de
calor seco incluyen incineracin para objetos que deben ser destruidos y
flameados por pasaje de agujas o pequeos instrumentos a travs de la llama de
un mechero bunsen.
III.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Materiales:
Reloj
Agua destilada
Autoclave
Mechero bunsen
Material de cristalera limpio, seco y empacado
Procedimiento:
Esterilizacin por calor hmedo (vapor a presin)
1.- Lava el material que te proporcione tu profesor con mezclas adecuadas como
Extran, mezcla Crmica con concentraciones adecuadas tomando en cuenta lo
sucio del material, seca en estufa o en forma manual con papel absorbente y
empcalo. Tenlo listo para su esterilizacin.
2.- Coloca el agua necesaria en la autoclave u olla de presin hasta la marca e
introduce unas gradillas metlicas que servirn de base al material a esterilizar.
Coloca el material a esterilizar dentro de la autoclave u olla de presin, evitando
que el material toque las paredes.
3.- Cierra el autoclave u olla de presin, cuidando de dejar abierta la vlvula de
salida de vapor que ayudar a expulsar el aire contenido dentro y que ste es
desplazado por el vapor que se produce. Si el aire no fue eliminado totalmente de
la autoclave, el manmetro aumentar a 15 libras. Pero la temperatura no habr
alcanzado los 121C Por esto se debe medir el tiempo cuando la temperatura
llegue a l21C.
4.- Cierra la vlvula cuando el vapor sea continuo. La temperatura de l05C
indica que est libre de aire. Vigila el termmetro. Cuando vaya en 120C,
mantenla durante 15 minutos para que se efecte la esterilizacin (15 libras de
presin). Transcurrido este tiempo se apaga.
5.-Deja enfriar hasta que el manmetro marque cero. Abre la vlvula de salida de
vapor, para expulsar el vapor restante. Abre el autoclave y retira el material
6.- Si el material no est en estado lquido la vlvula se puede abrir rpido a la
salida de vapor, pero si est en estado lquido la rpida prdida de presin las
hace hervir o bien saltar los tapones. Por lo tanto se espera unos minutos a que
se enfre perfectamente.
IV.
CUESTIONARIO:
1.- Cul material se puede esterilizar por calor seco y cul no y Por qu?
-
TIEMPO
C 1 horas
C 2 horas
C 2,5 horas
C 3 horas
BIBLIOGRAFA:
1. http://es.slideshare.net/Prymer/esterilizacin
2. http://www.soportehospitalario.com.ar/info_materiales_de_esterilizacion.ph
p
3. http://www.unavarra.es/genmic/microgral/03_eliminacion
%20microorganimos%20MG%2008-09.pdf
4. BROCK, TH. D: 1998. Biologa de los Microorganismos. Editorial Prentice
Hall.