INTRODUCCIN

Es de gran importancia tener en cuenta que al tratar con microorganismos debemos

tener mucho cuidado y trabajar con orden y limpieza para evitar tener resultados
errneos en la realizacin de la prctica. A continuacin se muestran algunos conceptos
y tcnicas necesarias para trabajar correctamente.

I.-

OBJETIVOS

El alumno:

II.-

Conocer y manejar correctamente las tcnicas de asepsia y antisepsia.

Diferenciar asepsia mdica y asepsia quirrgica.

Aprender la aplicacin de las tcnicas de aislamiento.

Manejar correctamente e indicar las ventajas y desventajas de los distintos

mtodos de esterilizacin.

FUNDAMENTO TERICO
EMPACADO DEL MATERIAL
Antes de iniciar un empaque del material que se desea esterilizar, es necesario
que todas las prcticas que se realicen estn en condiciones de esterilidad y se
debe, en primer lugar, limpiar el rea de trabajo con alguna sustancia
desinfectante y encender el mechero.
Se emplearn distintos agentes germicidas y desinfectantes (soluciones de
hipoclorito de sodio, cloroxilenol, formaldehdo, etc.) para desinfectar superficies.
El material a esterilizar se deber de empacar correctamente con papel estraza,
Una de las razones de la importancia del papel es que se puede adaptar a
diferentes usos como: Impedir el ingreso de microorganismos al interior, Sellar en
forma completa para evitar contaminacin, Soportar la traccin y manipulacin
habitual sin sufrir deterioro y hacer permeable al mtodo de esterilizacin
seleccionado.
ESTERILIZACIN POR CALOR SECO
La muerte microbiana se produce por una esterilizacin, ya sea como
consecuencia de mecanismos de transferencia de energa, adems de la
oxidacin. En la esterilizacin por Calor seco existe una destruccin de los
microorganismos oxidando sus constituyentes qumicos, desnaturalizando las
protenas y los cidos nucleicos de las clulas as como fragmentando las
membranas celulares.
Para materiales que deben permanecer secos como ciertos instrumentos de
vidrio de laboratorio tales como: cajas de Petri, pipetas, as como aceites,
polvos ( por ser impermeables al vapor), los materiales que no se pueden
esterilizar por calor seco son: Material textil (algodn, sedas, lino, etc.), Gomas y
Materiales sintticosTodo material que se altere a la temperatura de trabajo se
dispone de hornos elctricos por los que circula aire caliente, en vista de que el

calor es menos eficaz en materiales secos, se acostumbra a aplicar una

temperatura de 160C a 170C durante una hora o ms.

III.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Materiales:

Detergente
Agua destilada
Matraces
Cajas Petri
Tubos de ensayo
Pipetas
Escobillones
Papel estraza
Horno a 170 C
Mechero Bunsen
Algodn
Alcohol

Procedimiento:
Empacado del material.
1. Lava el material de laboratorio, principalmente la cristalera con
detergente, enjuaga con abundante agua de la llave y en seguida con
agua destilada.
2. Secar el material utilizando papel absorbente para acelerar el secado.
3. Empaca el material correctamente.
CAJAS DE PETRI: Corta el papel estraza, en forma de rectngulos adecuados
para la cantidad de 2 a 3 cajas. Colcalas en la parte central y Envulvelas
segn te indique tu profesor. Se toman los extremos de Papel y se unen. Se
hace un nuevo doblez recargando ligeramente en la caja para marcarlo, Los
extremos se doblan en forma triangular. Ya en forma triangular se doblan hacia
atrs quedando listas para esterilizar.
PIPETAS: Introduce una pequea porcin de algodn en el cuello de la pipeta,
procurando que quede lo suficientemente apretada. Con tiras de papel de 3 cm
de ancho envulvelas, comenzando por la punta y en forma de espiral gira hacia
arriba hasta el final de la pipeta.
TUBOS DE ENSAYE: Se toma el tubo con la mano izquierda y con la derecha el
tapn de algodn. Coloca algodn en la boca del tubo a 1/5 parte de la longitud
del mismo procurando que quede bien apretado, depositalos en recipientes
adecuados, tpalos con papel estraza y sellar con la cinta testigo.

 MATRACES: Tapa el cuello del matraz con algodn, lo suficientemente apretado

para evitar que se destape (se tapa en la misma forma que el tubo).
Tcnicas de desinfeccin (pasteurizacin)
Es un proceso al que son sometidos ciertos lquidos como la leche, para eliminar
agentes patgenos que podran enfermar al consumidor. Gracias a su uso, las
intoxicaciones de este tipo son menos.
Este proceso se basa en someter a los lquidos a altas temperaturas en un
tiempo determinado.
Los lcteos son los alimentos a los que se somete con mayor frecuencia a este
proceso, otros ejemplos son el agua embotellada, jugos, vinos y cervezas. La
mayora de sus derivados estn presentes en el yoghurt, leche y el queso.
Calor seco en la esterilizacin
El calor seco produce desecacin de la clula., es esto txico por niveles
elevados de electrolitos, fusin de membranas. Estos efectos se deben a la
transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en
contacto con stos.
La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos requiere mayor
temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es
baja.
Estufas presentan doble cmara, el aire caliente generado por una resistencia,
circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cmaras, a
temperatura de 170 C para el instrumental metlico y a 140 C para el contenido
de los tambores.
Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal, que al
dilatarse por el calor, cortan el circuito elctrico.
Ventajas del calor seco:
No es corrosivo para metales e instrumentos.
Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias
viscosas no voltiles.
Desventajas:
Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la
baja penetracin del calor.
Calor hmedo en la esterilizacin
Para este tipo de esterilizacin hacemos uso del autoclave, en este se esteriliza
durante 15 minutos en 1atm y 121 C.
El efecto que causa este calor es matar al microorganismo por la coagulacin de
sus protenas cuando se encuentran en una zona atmsfera hmeda y sometidos
a altas temperaturas, adems, es mucho ms rpido y efectivo en su accin.
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos
efectos se deben principalmente a dos razones:
El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas
son producidas por reacciones que eliminan agua.

El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms

elevado
que
el aire.
Esterilizacin por radiacin ultravioleta
La radiacin ultravioleta produce una disminucin exponencial en el nmero de
clulas vegetativas o de esporas vivas con el tiempo de irradiacin.
Existe una falta de informacin precisa sobre la susceptibilidad de las diferentes
especies microbianas a la radiacin UV: diferentes cepas de una misma especie
pueden tener una resistencia distinta.
El mayor valor del tratamiento con radiaciones UV se encuentra en el
saneamiento del aire, aunque tambin puede aplicarse para esterilizar
superficies de alimentos o para el equipo de los manipuladores de alimentos.
IV.

CUESTIONARIO:
1. Por qu antes de una esterilizacin es necesario lavar y desinfectar el
material?
Para que al esterilizarlos se eliminen todas las formas de vida microbiana.
2. Qu finalidad tiene el empacado antes de la esterilizacin?
Impedir el ingreso de micoorganismos al interior.
3. Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de estraza?
No, debido a que otros podran permitir que estos organismos entren.
4. Qu desventaja tiene el utilizar la esterilizacin por calor seco en este
laboratorio?
Requiere mayor tiempo de esterilizacin, debido a la baja penetracin del
calor.
5. Cmo acta la esterilizacin por calor seco en los microorganismos?
El calor cambia las protenasmicrobianas por las reacciones de oxidacin y
crea un medio interno rido, as quema a los microorganismos lentamente.
6. A qu temperatura y cunto tiempo tendrs que emplear para esterilizar
por calor seco el material de laboratorio para asegurar la destruccin de
microorganismos patgenos y esporas?
En la autoclave durante 2 horas a 121 C y 1atm.
7. Qu es la liofilizacin?
Es un proceso en el que se congela el producto y posteriormente es
introducido en una cmara al vaco para realizar la separacin de agua por
sublimacin.
8. En qu consiste la esporulacin?

Consiste en la divisin del ncleo en varios fragmentos, una parte del

citoplasma rodea cada nuevo ncleo, formandose as esporas.
9. Qu es la biotecnologa?
Es toda aplicacin tecnolgica que utiliza sistemas biolgicos y
organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de
productos para usos especficos.
10. Qu es la fermentacin?
Es un proceso catablico de oxidacin incompleta, totalmente anaerbico,
siendo el producto final un compuesto orgnico.
11. Cul es la importancia de la temperatura en el proceso de esterilizacin?
El aumento de la temperatura aumenta el poder bactericida del agente,
siempre que no lo desnaturalice. Para temperaturas bajas, por cada 10 de
incremento de esta la tasa de mortalidad se duplica.
V.

BIBLIOGRAFA:
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfPTkAL/practica-no-1
http://esterilizacionmf.wikispaces.com/M%C3%A9todos+de+Esterilizaci%C3%B3n