Universidade Comunitria da Regio de Chapec UNOCHAPECO

rea das cincias da sade

Graduao em Farmcia
Toxicologia II
Professor:

Controle de qualidade de equipamentos

Chapec, 25 de fevereiro de 2015.

Controle de qualidade de equipamentos

A espectrofotometria fundamentada na lei de Lambert-Beer, que a base
matemtica para medidas de absoro de radiao por amostras no estado slido,
lquido ou gasoso, nas regies ultravioleta, visvel e infravermelho do espectro
eletromagntico. A absortividade molar

uma grandeza caracterstica da espcie

absorvente, cuja magnitude depende do comprimento de onda da radiao incidente

(ALVES, 2010).
Muitas determinaes realizadas no laboratrio clnico so baseadas em
medies de energia radiante trasmitida, absorvida ou refletida sob condies
controladas. A Lei de Beer estabelece que a concentrao de uma substncia seja
diretamente proporcional a intencidade da luz absorvida ou inversamente proporcional
ao logaritimo da luz trasmitida. Na pratica a proporo direta a concentrao
estabelecida eperimentalmente para dado instrumento em condies especificas.
Existe uma relao linear ate uma determinada concentrao ou absorbncia. Quando
esta relao ocorre, dito que a reao obedece a Lei de Beer at este ponto que vai
de 0 1 assim um fator de calibrao pode ser usado para calcular a concentrao de
uma amostra desconhecida pela comparao com um calibrador.(BASQUES, 2010)
A partir dos dados obtidos na primeira tabela, pode-se notar que, ao variar o
comprimento de onda em ordem crescente (de 400nm at 700nm), a absorbncia
tambm variou progressivamente. As oscilaes do padro, observadas em
determinados comprimentos, podem ser justificadas a partir das condies do
experimento. Portanto, a tabela 1 obedece e comprova a Lei de Labert-Beer, ou seja,
mostra que a variao dos comprimentos de onda e manuteno dos demais fatores,
acarreta mudana dos valores de absorbncia a partir destes dados possvel
construir um grafico grfico onde medido a absorbncia em funo da concentrao
de uma substancia onde foi usado o sulfato de nquel, analisando o grfico 1, nota-se
que o aumento na concentrao da soluo provoca tambm o aumento da sua
absorbncia.

Enquanto

isso a

transmitncia

decresce

com

aumento

da

concentrao. Isto indica que, quanto maior for a concentrao de uma soluo, maior
quantidade de luz absorvida por ela e, consequentemente, menor quantidade de luz
passa atravs da mesma com isso, possvel observar que a Lei de Lambert-Beer
vlida e pode ser aplicada em condies reais e controladas. Ou seja, foi possvel
constatar experimentalmente que, conforme maior a concentrao de uma soluo,
maior sua absorbncia e menor sua transmitncia, portanto, menor quantidade de
luz passa atravs da soluo. Com a construo do grfico obtive-se um valor de R

de 0,8216, no um resultado muito satisfatrio,como vimos na explicao a cima o

melhor resultado de R de 0 1, sendo que quanto mais linear a curva mais prximo
de 1 ser o valor de R, como podemos observao no grfico, a curva no esta muita
linear. Contudo, pequenos desvios e variaes experimentais ocorreram, tendo em
vista uma possvel falha na calibrao dos aparelhos, o erro dos instrumentos digitais,
ou ainda a falha dos alunos envolvidos na prtica, inexperientes no campo da qumica
experimental.
A energia parasita, um tipo de energia indesejvel, tambm chamada de luz
adversa, sendo constituda por qualquer tipo de energia dentro do instrumento, que
chega ate a cubeta com comprimento de onda diferentes do indicado na escala do
monocromador promove a obteno de resultados incorretos. A energia parasitaria
responsvel por desvios de linearidade onde os problemas de energia so mais
graves nos limites de comprimento de onda,com isso podemos observar os resultados
obtidos que refletiram uma variao muito grande de transmitncia, acima dos valores
normais previstos, o que pode constatar que ouve um erro no processo do
experimento ou indicar problemas no espectrofotmetro.
Para um trabalho exato necessrio ter certeza que o volume contido ou
medido por uma pea ou vidraria realmente aquele indicado pela graduao.
Na calibrao das pipetas foram realizadas analises em triplicata, atravs da
pesagem da gua pipetada. Para observar os resultados obtidos forma calculados a
mdia das pesagens, o desvio padro e o coeficiente de variao. Atravs destes
clculos que tambm esto demonstrados em anexo, pode-se observar que a pipeta
de 10l, obteve um coeficiente de variao de 2,5%, enquanto a pipeta de 250 l
apresentou uma variao de apenas 0,84%. Estas variaes podem ser consideradas
pequenas, principalmente a da pipeta de 250 l, o que indica que esto de acordo com
a qualidade exigida para este tipo de equipamento, alm de ser necessrio levar em
considerao que nesta analise tambm podem ocorrer erros de que esta utilizando o
equipamento, por isso tambm importante ressaltar que as analises devem ser feitas
em triplicata.

ANEXOS:
Tabela 01: Concentrao e absorbncia das solues de NiSO4 e HCl.

Sulfato de Nquel

HCl 1%

Conc. Relativa de

5%

Absorbncia

sulfato
0

5 ml

NiSO4(mg/ml)
0

1 ml

4 ml

12,5

0,169

2 ml

3 ml

33,3

0,358

3 ml

2 ml

75

0,551

4 ml

1 ml

200

0,737

Grfico 1. Lei de Lambert-beer e curva de calibrao

Grfico da Curva de Calibrao

0.8

f(x) = 0x + 0.15
0.6 R = 0.82
Absorbncia 0.4
0.2
0
1

21

41

61

81

101 121 141 161 181

Concetraco da soluco

Tabela 02: Resultados da verificao da energia parasita

Comprimento de onda

Absorbncia

Transmitncia

400

0,915

12,1%

460

0,069

85,3%

510

0,014

96,8%

550

0,031

93,1%

700

0,380

41,6%

Clculos de transmitncia:
Transmitncia em 400nm:

Transmitncia em 460nm:

A= -log t (-1)

A= -log t (-1)

-0,915 = log t

-0,069 = log t

10-0,917 x100 = T

10-0,069 x100 = T

T=12,1%

T= 85,3%

Transmitncia em 510nm:

Transmitncia em 550nm:

A= -log t (-1)

A= -log t (-1)

-0,014 = log t

-0,031 = log t

10-0,014 x100 = T

10-0,031 x100 = T

T= 94,6%

T= 93,1%

Transmitncia em 700nm:
A= -log t (-1)
-0,380 = log t
10-0,380 x100 = T
T= 41,6%

2. Calibrao das pipetas

Pipeta de 10l:

Pipeta de 250l:
Medida

1
Medida 1 Medida 2 Medida 3
Clculos de Desvio Padro:
0,2594
Peso
0,0075
0,0101
0,0102 Peso
Pipeta de 10l:
Mdia
0,2515
Mdia 0,0092
DP=
DP
1,204x 10-2
DP
1,5x10-3
CV

CV

16,3%

Medida

Medida

0,2577

4,82%

(X 1) +( X 2)+( X 3)
n-1
DP =

(0,00750,0092)+(0,01020,0092) +( 0,01010,0092)
3-1

0,2376

DP=1,5x10-3

Coeficiente de Variao
CV= DP x100
X
CV= 1,5x 10-3 x100
0,0092
CV= 16,3%
Pipeta de 250l
DP=

(X 1) +( X 2) +( X 3)
n-1

DP =

(0,25940,2515) +( 0,25770,2515) +(0,23760,2515)

3-1

DP= 1,204x 10-2

Coeficiente de Variao
CV= DP x100
X
CV= 1,204x 10-2 x100
0,2515
CV= 4,78%

REFERENCIAS

BASQUES. C. Jos. Manual de fotometria e padronizao; Labtest diaguinosticos

AS. Setembro de 2010. Disponivel em: www.labtest.com.br/download.php?a=6766
acesso em 25 de fevereiro de 2015.
ALVES, Lariza Darlene Santos et al.Desenvolvimento de mtodo analtico para
quantificao do efavirenz por espectrofotometria no UV-Vis. Qum. Nova [online].
2010, vol.33, n.9, pp. 1967-1972. ISSN 0100-4042. http://dx.doi.org/10.1590/S010040422010000900026.