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u

Examen microscpico
de la orina
OBJETIVOS DEL APRENDIZAJE
Al fin a liz a r es te captu lo, el lecto r p o d r :
Enumerar los parmetros fsicos y qumicos
incluidos en la evaluacin macroscpica de la
orina y establecer su importancia.
2

Describir las ventajas de los sistemas com ercia


les respecto del mtodo con portaobjetos para
el examen del sedimento.
Describir los mtodos recomendados para
estandarizar la preparacin y el volumen de la
muestra, la centrifugacin, la preparacin, el
volumen y el examen del sedim ento y el infor
me de los resultados.
Establecer el objetivo de las tinciones de
Stem heim er-M albin, cido actico, azul de
toluidina, Sudn 111, Gram, Hansel y azul de
Prusia en el examen del sedimento de orina.

9 Describir la importancia de los leucocitos en el


sedimento urinario.
10

Nombrar, describir y dar el origen y la im por


tancia de los tres tipos de clulas epiteliales
encontrados en el sedimento urinario.

11

Describir la im portancia de los cuerpos ovales


grasos.

12

Describir el proceso de formacin de cilindros.

13

Describir y analizar la importancia de los cilin


dros hialinos, de eritrocitos, de leucocitos, bac
terianos, de clulas epiteliales, granulosos,
creos, grasos y anchos.

14

M encionar e identificar los cristales normales


encontrados en la orina cida.

Identificar las muestras que deben enviarse


para la comprobacin citodiagnstica.

15

Mencionar e identificar los cristales normales


encontrados en la orina alcalina.

Describir los principios bsicos de la m icrosco


pa ptica de campo claro, contraste de fase,
polarizacin, campo oscuro, fluorescencia y de
interferencia-contraste, y su relacin con el
examen del sedimento.

16

Describir y establecer la importancia de los


cristales de cistina, colesterol, leucina, tirosina,
bilirrubina, sulfonamida, colorante radiogrfico
y ampicilina.

17

Diferenciar entre constituyentes reales y arte


factos del sedimento.

18

Correlacionar los resultados fsicos y qum icos


del anlisis de orina con las observaciones
m icroscpicas y reconocer las discrepancias.

7
8

Diferenciar entre constituyentes normales y


anormales del sedimento.
Describir la importancia de los eritrocitos en el
sedimento urinario.

PA LA BRA S CLA V E
cribado de sustancias qumicas

microscopia de contraste de fase

microscopa ptica de campo claro

cilindros

m icroscopia de fluorescencia

microscopia de polarizacin

ciindruria

m icroscopia de interferencia-

proteina deT am m -H o rsfall

microscopia de cam po oscuro

contraste

resolucin

81

pyrighted material

82

c a p itu lo 6

Examen m icroscpico de la orina

La tercera parte del anlisis de orina habitual es el exa


men m icroscpico del sedim ento urinario. Su propsito
es descubrir e identificar los materiales insolubles pre
sentes en la orina. La sangre, el rin, las vas genitouri
narias inferiores y la contam inacin externa contribuyen
a la presencia de elementos formes en la orina, com o eri
trocitos, leucocitos, clulas epiteliales, cilindros, bacte
rias, levaduras, parsitos, m oco, espermatozoides, crista
les y artefactos. Dado que algunos de estos com ponentes
carecen de importancia clnica y otros se consideran nor
males, a m enos que estn presentes en cantidades au
mentadas, el examen del sedim ento urinario debe incluir
la identificacin y la cuantificacin de los elementos pre
sentes. El examen m icroscpico del sedimento de orina
es la parte menos estandarizada y la ms laboriosa del
anlisis de orina habitual. Se han desarrollado protocolos
para aumentar la estandarizacin y la rentabilidad del
anlisis m icroscpico de la orina y se describirn en este
capitulo.

E v a lu a c i n m a c ro s c p ic a

Para aumentar la rentabilidad del anlisis de orina, m u


chos laboratorios han desarrollado protocolos en los que
el exam en m icroscpico del sedimento de orina slo se
realiza en muestras que cum plen criterios especificados.
Las alteraciones en la parte fsica y qumica del anlisis de
orina desempean un papel fundamental en la decisin
de realizar el anlisis m icroscpico, por esto, el uso del
trm ino evaluacin m acroscpica", tambin llamado cribado de sustancias qumicas. Los parmetros considerados
importantes vanan entre los laboratorios pero suelen in
cluir: color, claridad, sangre, proteina, nitrito, esterasa
leucocitaria y, tal vez, glucosa. Los criterios designados
por el laboratorio tambin pueden ser programados en
ios instrum entos automatizados. En el cuadro 6-1 se ilus
tra la importancia de estos parmetros. Los porcentajes
de muestras anormales que podran pasar desapercibidas
mediante estos parmetros difieren en forma significativa
entre los estudios.12 Cuando se elaboran protocolos para
la evaluacin macroscpica tambin debe considerarse la

C u a d r o 6 -1

C orrelaciones de la
evaluacin m acroscpica

Prueba

Importancia

Color

Sangre

Claridad

Hematuria versus
hemoglobinuria/mioglobinuria
Confirma causa patolgica o no
patolgica que provoca turhidez

Sangre

Eritrocitos/cilindros de eritrocitos

Protenas

Cilindros/clulas

Nitrito

Bacterias/leucocitos

Esterasa leucocitaria

Leucocitos/cilindros de
leucocitos/bacterias

Glucosa

Levaduras

poblacin de pacientes, com o m ujeres embarazadas, ni


os, ancianos, diabticos, m m unocom prom ctidos y nefrpaias. 1:1 Clinical and Lnboratorv Standards Institute
(Instituto de Estndares Clnicos y de Laboratorio; CLS1)
recomienda que el examen m icroscpico se realice cuan
do es solicitado por el m dico, cuando se est probando
una poblacin de pacientes especificada por el laborato
rio o cuando se obtiene cualquier resultado fsico o qu
mico anorm al.


P re p a ra c i n y e x a m e n
d e l s e d im e n to d e o r in a
El anlisis m icroscpico est sujeto a distintas variacio
nes del procedimiento, com o los m todos para la prepa
racin del sedim ento, el volumen de sedimento realmen
te examinado, los mtodos y los equipos utilizados para
la visualizacin y la manera en que se informan los resul
tados. Addis desarroll el primer procedim iento para es
tandarizar la cuantificacin de los elem entos formes en el
anlisis microscpico de la orina en 1926.1:1 recuento de
Addis, com o se denomina, us un hemocitmetro para
contar el nmero de eritrocitos, leucocitos, cilindros y c
lulas epiteliales presentes en una muestra de 12 horas.
Los valores normales tienen una gama amplia y son de 0 a
5 0 0 0 0 0 eritrocitos, de 0 a 1 8 0 0 0 0 0 leucocitos y clulas
epiteliales, y de 0 a 5 0 0 0 cilindros hialinos.4 El recuento
de Addis, que se us sobre todo para monitorizar la evo
lucin de casos diagnosticados de enfermedad renal, se ha
reemplazado por los varios sistemas comerciales estandanzados para la preparacin, el examen y la cuantificacin
de elementos formes en muestras sin tiempo establecido.
S is te m a s c o m e rc ia le s

El mtodo convencional de colocar una gota de orina


centrifugada sobre un portaobjetos, cubrirla con un cu
breobjetos y examinarla al m icroscopio se m ejor de mo
do sustancial a travs del uso de sistemas de portaobjetos
com erciales.5 El C.LS1 recom ienda su uso ju n to con la
estandarizacin de todas las fases de la metodologa, in
cluso el mtodo convencional, com o se describe en las
secciones siguientes. Los sistemas disponible en la actua
lidad son: KOVA (Hycor Biomedical, Inc., Carden Grove,
California), Urisystem (Therm oFisher Scicntific. Waltham,
Mass.), C ou n t-10 (V-Tech, Inc., Pomona. California),
Quick-Prep Urinalysis System (Globe Scientific, Paramus, Nueva Jersey), CenSlide 2 0 0 0 Urinalysis System
(International Remte Im aging System s, N orw ood,
Massachusetts) y R/S W orkstations 1000, 2 0 0 0 , 2 0 0 3
(DioSys, Waterburv, California). Los sistemas proporcionan
una variedad de opciones com o tubos de centrfuga cali
brados y tapados; pipetas de decantacin para controlar
el volumen del sedimento, y portaobjetos que controlan la
cantidad de sedimento exam inado, producen una monocapa uniforme de sedimento para el examen y presentan
una cuadricula calibrada para la cuantificacin ms uni
forme.
El Cen-Slide y el R/S W orkstations no requieren la
carga manual de la muestra centrifugada sobre un por
taobjetos y se consideran sistemas cerrados que m inim i
C

c a p t u lo 6

zan la exposicin a la muestra. El Cen-Slide provee un


tubo especialmente diseado que permite la lectura di
recta del sedim ento de orina. Los R/S Workstations cons
tan de un portaobjetos para el flujo de clulas en el que
se bom bea el sedim ento de orina, se exam ina al m icros
copio y luego se expulsa del sistema.

Examen m icroscpico de la orina

83

minuir el tiempo de parado de la centrfuga causa la rup


tura del sedim ento antes de que se produzca la decanta
cin, y no debe hacerse.
Para evitar los aerosoles biolgicos peligrosos, todas las
muestras deben centrifugarse en tubos tapados.

Preparacin del sedim ento


Preparacin de la m u estra
Deben examinarse muestras recientes o conservadas de
manera adecuada. Los elementos formes -so b re todo eri
trocitos, leucocitos y cilindros h ialin os- se desintegran
con rapidez, en especial en orinas alcalinas diluidas. La
refrigeracin puede causar precipitacin de uratos y fos
fatos am orfos y otros cristales no patolgicos que pueden
enmascarar otros elem entos en el sedimento de orina.
Calentar la muestra a 37 C antes de centrifugarla puede
disolver algunos de estos cristales.
La muestra limpia del chorro medio minimiza la co n
taminacin externa del sedim ento. Com o sucede con los
anlisis fsicos y qum icos, las muestras al azar pueden
causar lecturas falsas negativas.
Debe lom arse la precaucin de mezclar en forma
exhaustiva la muestra antes de centrifugar una porcin en
un tubo de centrifuga.

V olum en de la m u estra
Se centrifuga una cantidad estndar de orina, por lo gene
ral entre 10 v 15 mL, en un tubo cnico. Esto proporcio
na un volumen adecuado para obtener una muestra re
presentativa de los elem entos presentes en la muestra.
Con frecuencia se utiliza un volumen de 12 m i. porque
en esa cantidad se sumergen con facilidad las tiras reacti
vas de parmetros mltiples y los tubos de centrfuga
tapados a menudo estn calibrados a este volumen.
Si no es posible obtener una muestra de 12 mL. como
sucede con los pacientes peditricos, el volumen de la
muestra usado debe anotarse en el formulario del informe.
Esto le permite al mdico corregir los resultados, si corres
ponde. Algunos laboratorios prefieren hacer esta correc
cin antes de realizar el informe. Por ejem plo, si se centri
fugan 6 tul., de orina, los resultados se multiplican por 2.

C entrifugacin
La velocidad de la centrfuga y el tiempo en los que se
centrifugan las muestras deben ser uniformes. La centrifu
gacin durante 5 m inutos a una fuerza centrifuga relativa
(RCF) de 4 0 0 produce una cantidad ptim a de sedimen
to con la menor posibilidad de daar los elem entos. Para
corregir las diferencias en el dimetro de los cabezales de
la centrfuga, se usa la RCF en lugar de las revoluciones
por m inuto (RPM). El valor de RPM mostrado en el tacmetro de la centrifuga puede convertirse a RCF median
te el em pleo de nomogramas disponibles en m uchos ma
nuales del laboratorio o por la frmula:
RCF = 1,1 IB x l - ' x radio en centm etros x RPM2
La calibracin de la centrfuga debe realizarse en forma
sistemtica. El uso del m ecanism o de frenado para dis

Despus de la decantacin debe quedar en el tubo una


cantidad uniforme de orina y de sedimento. Los volm e
nes de 0 ,5 y 1,0 m L son los que se usan con mayor fre
cuencia. El volumen de orina centrifugada dividido por el
volumen del sedim ento es igual al factor de concentra
cin, que en los ejem plos precedentes es de 2 4 y 12, res
pectivamente. El factor de concentracin del sedimento
se relaciona con la probabilidad de detectar elem entos
que estn presentes en cantidades bajas y se usa cuando
se pretende cuantificar el nm ero de elem entos presentes
por mililitro.
Para m antener un factor de concentracin de sedim en
to uniform e, la orina debe aspirarse en lugar de verterse,
a menos que se especifique de otro modo en el sistema
com ercial en uso. Algunos sistemas proveen pipetas para
este propsito. Las pipetas tambin se usan para resuspender el sedim ento y transferir al portaobjetos.
El sedimento debe ser resuspetidido por completo
mediante agitacin suave. Esto puede realizarse con la pi
peta provista por el sistema comercial o dando golpecitos
repetidos con el dedo en el fondo del tubo Debe evitar
se la agitacin vigorosa ya que algunos elementos celula
res pueden romperse. La resuspensin completa es esen
cial para proporcionar una distribucin uniforme de los
elem entos en los cam pos m icroscpicos.

V olum en del sedim ento exam inado


El volumen de sedim ento colocado en el portaobjetos
debe ser uniforme para cada muestra. Cuando se utiliza
el mtodo convencional de portaobjetos el volumen reco
mendado es de 2 0 j i L (0 ,0 2 mL) cubrindolo con un
cubreobjetos de 2 2 x 22 mm por deslizamiento. Si se
deja que la muestra fluya fuera del cubreobjetos puede
producirse la prdida de los elem entos ms pesados,
com o los cilindros.
Los sistemas com erciales controlan el volumen de sedi
mento examinado porque los portaobjetos provistos tie
nen cmaras que permiten contener un volumen especi
ficado. Debe tenerse la precaucin de asegurar que las
cmaras queden completam ente llenas. Los folletos de
inform acin del producto indican el volumen de la cm a
ra. el tamao del rea de observacin y el numero apro
ximado de reas observadas con objetivos 10x y 4 0 x ,
sobre la base del rea de cam po de visin de un m icros
copio estndar. Esta inform acin, ju n to con el factor de
concentracin de sedim ento, es necesaria para cuantificar
los elementos celulares por mililitro de orina.

E xam en del sedim ento


La manera en la que se realiza el exam en m icroscpico
debe ser uniforme y debe incluir la observacin de un

84

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

m nim o de 10 campos con objetivo seco dbil (lO x ) y


seco fuerte (4 0 x ). El portaobjetos se examina primero
con lOx para detectar cilindros y determinar la com posi
cin general del sedimento. Cuando se encuentran ele
mentos com o cilindros que requieren su identificacin,
se cam bia a un objetivo de mayor aumento.
Si se utiliza el mtodo del portaobjetos convencional,
los cilindros tienen tendencia a ubicarse cerca de los bor
des del cubreobjetos; por consiguiente, se recomienda
realizar el barrido por los bordes del cubreobjetos. Esto no
sucede si se usan los sistemas comerciales estandarizados.
Cuando el sedim ento se examina sin teir, muchos
constituyentes tienen un ndice de refraccin similar a la
orina. Por consiguiente, es esencial que los sedimentos se
exam inen con luz de baja intensidad al usar microscopa
ptica de cam po claro.
El enfocado inicial puede ser difcil con una muestra
lquida y debe tenerse cuidado para asegurar que el exa
men se est realizando en el plano correcto. A menudo
hay una clula epitelial presente para proporcionar un
punto de referencia. Debe evitarse enfocar en los artefac
tos, porque a menudo stos son ms grandes que los ele
mentos regulares del sedimento y hacen que el microscopista examine los objetos en el plano incorrecto. El enfo
cado continuo con el tornillo de ajuste fino ayuda a obte
ner una representacin completa de los constituyentes
del sedimento.

In fo rm e del exam en microscpico


La terminologa y los mtodos para informar los resulta
dos pueden presentar leves diferencias entre los laborato
rios, pero deben ser uniformes dentro del sistema de un
laboratorio particular. Por lo general, los cilindros se
informan como el nmero promedio por campo lOx.
despus del examen de 10 cam pos, y los eritrocitos y los
leucocitos, com o el nmero promedio por 10 campos
4 0 x . Con frecuencia se informan los resultados de clu
las epiteliales, cristales y otros elem entos en forma semicuaniitativa com o, raros, escasos, moderados y abundan
tes o com o 1+. 24-, 3+ y 4+ , seguido por la aclaracin de
acuerdo con el uso del laboratorio de campo lOx o 4 0x .
Los laboratorios tambin deben determinar sus valores de
referencia particulares basados en el factor de concentra
cin del sedim ento en uso. Por ejem plo, Urisystem, con
un factor de concentracin de 3 0 , establece un valor de
referencia para leucocitos de cero a ocho por campo 4 0 x ,
com o opuesto al valor convencional de cero a cinco por
cam po 4 0 x usado con un factor de concentracin de 12.
1.a conversin del nmero promedio de elementos por
cam po lO x o cam po 4 0 x a nmero por mililitro propor
ciona la estandarizacin entre las varias tcnicas en uso.
Los pasos incluyen:
Ejem plo
1. Clculo del rea de un campo lOx o uno 40x para
el microscopio en uso que emplea el dimetro del
campo de visin provisto por el fabrcame y la fr

mula Jtr2 = superficie.


Dimetro del campo 40x = 0.35 mm

3,14 x 0 ,1 7 5 ? = 0,096 mnv


2. Clculo del nmero mximo de campos lOx o campos
40x en el rea de visin.
Area con un cubreobjetos 22 x 22 mm n 484 mnv
484
: 5 040 por campos 40x
0,096
3. Clculo del nmero de campos 40x por mililitro de
orina probada usando el factor de concentracin y el
volumen de sedimento examinado.
5 040
5 040
------------------ = -------- = 21 000 campos 40x/mL de orina
0.02 mL x 12
0.24
4. Clculo del nmero de elementos formes por mililitro de
orina multiplicando el nmero de campos 40x por milili
tro por el nmero promedio de elementos formes por
campo.
4 leucocitos/campo 40x x 21 000 = 84 000 leucociios/mL

Siempre que se usen el mismo m icroscopio y el mismo


volumen de sedimento examinado, el nmero de campos
lOx y de campos 4 0 x por mililitro de orina sigue siendo
el mismo y. por lo tanto, se simplifica el clculo.
Los laboratorios deben evaluar las ventajas y las des
ventajas de agregar un paso de clculo adicional al examen
microscpico. El CLS1 establece que todas las decisiones
con respecto al informe m icroscpico deben basarse en
las necesidades de cada laboratorio. Los procedim ientos
deben estar completam ente docum entados y deben ser
seguidos por todo el personal.

C orrelaci n de resultados
Para asegurar la exactitud del informe deben correlacio
narse los resultados m icroscpicos con los resultados de
las caractersticas fsicas y qumicas. Las muestras en las
que los resultados no se correlacionan deben ser proba
das de nuevo para establecer errores tcnicos y adm inis
trativos. En el cuadro 6 -2 se observan algunas de las
correlaciones ms com unes en el anlisis de orina; sin
embargo, deben considerarse la cantidad de elementos
formes o la de sustancias qumicas, com o tambin la
posibilidad de interferencia con las pruebas qum icas y el
tiempo transcurrido desde la obtencin de la muestra.

T c n ic a s d e e x a m e n d e l s e d im e n to

Muchos factores pueden influir en el aspecto del sedi


mento urinario, com o clulas y cilindros en varias fases
de desarrollo y degeneracin, distorsin de clulas y cris
tales por el contenido qum ico de la muestra, presencia
de inclusiones en las clulas y cilindros, y contam inacin
por artefactos. Por consiguiente, la identificacin a veces
puede ser difcil, incluso para el personal de laboratorio
experimentado. La identificacin puede reforzarse a tra
vs del uso de tinciones del sedim ento (Cuadro 6 -3 ) y
diferentes tipos de microscopa.

naterial

c a p t u lo 6

liw

C orrelaciones de los anlisis de orina habituales

Elementos
Caractersticas Caractersticas
microscpicos fsicas
qumicas
Excepciones
Eritrocitos

Turbidez

+ Sangre

Color rojo
Leucocitos

Nmero
Hemolisis

Turbidez

+ Protena

Nmero

+ Nitrito

Lisis

+ Leucocitos
Clulas epite
liales

Nmero

Turbidez

Cilindros
Bacterias

Turbidez

+ Protena

Nmero

pH

Nmero y
tipo

+ Nitrito
+ Leucocitos
Cristales

Turbidez

PH

Color

Cuando se utilizan tinciones aumentan la visibilidad glo


bal de los elementos del sedimento que se exam inan con
microscopa ptica de campo claro porque cambian su
ndice de refraccin. Com o se m encion, ciertos elem en
tos, com o los cilindros hialinos, tienen un ndice de re
fraccin muy similar al de la orina. Las tinciones tambin
imparten caractersticas tiles para la identificacin a las
estructuras celulares, com o ncleos, citoplasma e inclu
siones.
La tincin usada con frecuencia en el anlisis de orina
es la de Sternheimer-M albin, que consta de cristal violeta
y safranina O .6 La tincin est disponible en forma co
mercial bajo una variedad de nombres, com o Sedi-Stain
(Becton-D ickinson, Parsippany, Nueva Jersey) y KOVA

Examen m icroscpico de la orina

85

(Hycor Biomedical, lnc, Garden Grove, California). Las


marcas comerciales contienen sustancias qumicas estabi
lizantes para prevenir la precipitacin que se produca
con la tincin original. El colorante se absorbe bien por
los leucocitos, las clulas epiteliales y los cilindros, lo que
proporciona una delineacin ms clara de la estructura y
los colores contrastantes del ncleo y el citoplasma. En el
cuadro 6 -4 se muestra un ejem plo de las reacciones de
tincin como figura en el folleto de inform acin del pro
ducto.
La solucin de azul de toluidina al 0 ,5 % , una tincin
metacromtica, proporciona m ejor detalle nuclear. Puede
ser til para la diferenciacin entre leucocitos y clulas
epiteliales de los tbulos renales y tambin se utiliza en el
examen de clulas de otros lquidos corporales.
El detalle nuclear tambin puede incrementarse por el
agregado al sedimento de cido actico al 2% . Este m to
do no puede emplearse para el anlisis inicial del sedi
mento porque los eritrocitos se lisan por el cido actico.

Nmero y
tipo

Tinciones del sedim ento

T incio nes p a r a lpidos

El pasaje de lpidos (triglicridos, grasas neutras y colesterol) a travs de la membrana glomerular da por resulta
do la aparicin de gotas de grasa libres, y clulas y cilin
dros que contienen lpidos en el sedimento urinario. Las
tinciones para lpidos, Red Oil O y Sudn III, y la microscopia de polarizacin pueden usarse para confirm ar la
presencia de estos elem entos. Los triglicridos y las gra
sas neutras se tien de rojo anaranjado en presencia del
colorante, mientras que el colesterol no se tie, pero pro
duce polarizacin. Los tres lpidos suelen presentarse en
forma simultnea en el sedim ento, por lo tanto, se puede
usar cualquiera de las tinciones o la polarizacin para su
confirm acin.
T in c i n d e G r a m

La tincin de Gram se usa sobre todo en la seccin de


microbiologa para la diferenciacin entre bacterias grampositivas (azul) y gramnegativas (rojas). Su papel en el
anlisis de orina habitual se limita a la identificacin de

C aractersticas de tincin del sedim ento

i
Tincin

Accin

Funcin

Sternheimer-Malbin

Delinea la estructura y contrasta los


colores del ncleo y el citoplasma

Identifica leucocitos, clulas epiteliales y cilindros

Azul de toluidina

Refuerza el detalle nuclear

Diferencia leucocitos y clulas del epitelio tubular renal

cido actico al 2%

Lisa los eritrocitos y refuerza los n


cleos de leucocitos

Distingue eritrocitos de leucocitos, levaduras, gotas de


aceite y cristales

Tinciones para lpidos:


Oil Red 0 y Sudn III

Tie los triglicridos y las grasas neu


tras de rojo-anaranjado

Identifica gotas de grasa libres y clulas y cilindros que


contienen lpidos

Gram

Diferencia las bacterias grampositivas


de las gramnegativas

Identifica cilindros bacterianos

Hansel

El azul de metileno y la eosina tien los


granulos eosinfilos

Identifica eosinfilos urinarios

Azul de Prusia

Tie estructuras que contienen hierro

Identifica grnulos amarillo-castao de hemosiderina en


las clulas y los cilindros

86

c a p t u lo 6

Cuadro 6-4

Examen m icroscpico de la orina

Reacciones de tincin esperadas para los constituyentes del sedim ento

Elementos en el
sedimento urinario

Colores distintivos usuales


de los elementos teidos

Eritrocitos

Neutro-rosa a violeta

Comentarios

cido-rosa (no teido)


Alcalino-violeta

Ncleos

Citoplasma

Leucocitos (clulas teidas Violeta


de oscuro)

Grnulos violetas

Clulas brillantes (clulas


positivas con la tincin de
Sternheimer-Malbin)

Incoloro a azul claro

Azul claro o gris

Clulas epiteliales tubula


res renales

Tono oscuro de azul-violeta

Tonos claros de
azul-violeta

Clulas del epitelio vesical

Azul-violeta

Lila

Clulas epiteliales
escamosas

Tono oscuro de anaranjadovioleta

Lila o azul

Algunas clulas brillantes exhiben movimiento


browniano

Inclusiones)' matriz
Cilindros hialinos

Rosa plido o lila

Color muy uniforme; ligeramente ms oscuro


que los filamentos de moco

Cilindros con inclusin


granular gruesa

Grnulos violeta oscuro en la


matriz violeta

Cilindros con inclusin


granular fina

Grnulos violeta oscuro finos


en matriz rosa plido o lila

Cilindros creos

Rosa plido o lila

Ms oscuro que los cilindros hialinos, pero de


un color plido uniforme; extremos rotos
caractersticos

Cilindros con inclusin


de grasa

Glbulos de grasa sin teir


en una matriz rosa

Raro; la presencia se confirma si el examen


con luz polarizada indica doble refraccin

Cilindros con inclusin


de eritrocitos

Rosa a rojo-anaranjado

Pueden verse clulas intactas en la matriz

Cilindros de sangre
(hemoglobina)

Anaranjado-rojo

Ninguna clula intacta

Bacterias

Mvil: no se tie

Los microorganismos mviles no se deterioran

Inmvil: se tie de violeta


Trichomonos vaginaiis

Azul claro-verde

Moco

Rosa plido o azul claro

Fondo

Rosa plido o lila

La motilidad est intacta en las muestras


recientes cuando se utilizan los volmenes
recomendados de la tincin; tambin se iden
tifican microorganismos inmviles

De Product Profile: Sedi-Stain. Clay Adams. Division of Bccton Dickinson 6r Company. Parsippany, NJ. 1 9 7 4 , con autorizacin.

cilindros bacterianos que pueden confundirse fcilmente


con cilindros granulosos. Para realizar la tincin de Gram
debe usarse una preparacin seca del sedimento de orina,
fijada con calor.
T in c i n d e H a n s e l

Los leucocitos polimorfonucleares que se observan en el


sedim ento urinario casi siempre son neutrfilos asocia
dos con infeccin microbiana. Sin embargo, en los casos

de reaccin alrgica inducida por frmacos que producen


inflamacin del intersticio renal se observan eosinfilos en
el sedimento. La tincin preferida para los eosinfilos
urinarios es la de Hansel, que consiste en azul de metileno y eosina Y (Lide Labs, Inc, Florissant, M issouri); sin
embargo, tambin puede usarse la tincin de Wrighl.
Para realizar la tcnica se utiliza un frotis seco de la m ues
tra centrifugada o una preparacin cilocenirifugada del
sedimento.

Copyrighted mate

c a p tu lo 6

Tincin con azul de Prusia


Com o se describi en el captulo 5, despus de episodios
de hemoglobinuria pueden observarse grnulos amarillo
castaos en las clulas epiteliales de los tbulos renales y
cilindros o flotando libres en el sedimento de orina. Para
confirm ar que estos grnulos son de hemosiderina se rea
liza la tincin azul con Prusia para hierro, que tie los
grnulos de hemosiderina de color azul.

Examen m icroscpico de la orina

Cuadro 6-5

Microscopa
El examen microscpico de la orina se realiza mejor
cuando el laboratorista conoce los tipos de microscopios
disponible, sus caractersticas principales y el uso apro
piado y mantenimiento de estos microscopios.
La microscopia ptica de campo claro es el tipo ms
com n de microscopia realizada en el laboratorio de an
lisis de orina. Otros tipos de microscopia que son tiles
para exam inar el sedimento de orina son: contraste de
fase, polarizacin, campo oscuro, fluorescencia e interfe
rencia- contraste (Cuadro 6 -5 ). El tipo de microscopio
usado depende del tipo de muestra, el ndice de refrac
cin del objeto y la capacidad de mostrar la imagen de
clulas viables sin teir. Todos los microscopios estn
diseados para aumentar el tamao de objetos pequeos
en un grado suficiente para poder analizar los detalles de
su estructura. Bsicamente, lo hacen mediante el empleo
de una variedad de lentes y fuentes de luz com o se des
cribe en la seccin siguiente.
M ic r o s c o p io

En esencia, todos los tipos de microscopios contienen un


sistema de lentes, el sistema de iluminacin y un cuerpo
que consiste en una base (o estativo), un brazo (o cuer
po) y un revlver (Fig. 6 -1 ). Los com ponentes principa
les del sistema de lentes son los oculares, los objetivos y
los tornillos de ajuste, macromtrico y micromtrico. El
sistema de iluminacin contiene la fuente de luz. el co n
densador y los diafragmas de campo e iris. Los objetos a

Tcnicas microscpicas
p a ra el anlisis d e o rin a

Tcnica

Funcin

Microscopia ptica
de campo claro

Utilizada para la microscopia del


anlisis de orina habitual

Microscopia de con
traste de fase

Realza la visualizacin de elemenios


con ndices de refraccin bajos,
como cilindros hialinos, cilindros
celulares mixtos, filamentos de
moco y Trichomonas

Microscopia de
polarizacin

Ayuda en la identificacin de colesterol en los cuerpos grasos ovales,


cilindros grasos y cristales

Microscopia de
campo oscuro

Ayuda en la identificacin de

Microscopia de
fluorescencia

Permite la visualizacin de microor


ganismos que presentan fluorescen
cia natural o los que se tien con
colorantes fluorescentes

Microscopia de
interferenaa-contraste

Produce una imagen microscpica


tridimensional y la formacin de
imgenes capa por capa de una
muestra

C itodiagnstico u rin ario


Aunque no es parte del examen habitual del sedimento
de orina, la preparacin de portaobjetos permanentes
mediante citocentrifugacin seguida por la tincin con la
tcnica de Papanicolaou proporciona un mtodo adicio
nal para detectar y m onitorizar la enfermedad renal. El
citodiagnstico urinario suele realizarse de modo inde
pendiente del anlisis de orina habitual para la deteccin
de procesos malignos de las vas urinarias inferiores. Para
la realizacin de la prueba se recomienda la primera orina
de la maana y la evaluacin se lleva a cabo en el labora
torio de citologa. El citodiagnstico urinario tambin pro
porciona informacin ms definitiva sobre los cam bios
tubulares renales asociados con el rechazo de trasplante,
las infecciones virales, micticas y parasitarias, las inclu
siones celulares, los cilindros patolgicos y los procesos
inflamatorios. El laboratorio de anlisis de orina debe de
rivar las muestras con hallazgos inusuales al laboratorio
de citologa para un examen ms extenso.

87

Trcponema pallidum

ser examinados se colocan sobre una plataforma, llamada


platina mecnica. El m icroscopio ptico de campo claro
com puesto se usa sobre todo en el laboratorio de anlisis
de orina y consiste en un sistema de dos lentes com bina
do con una fuente de luz. El primer sistema de lentes se
localiza en el objetivo y se ajusta para estar cerca de la
muestra. El segundo sistema de lentes, la lente ocular, se
ubica en el cabezal. En su trayecto, la luz pasa a travs de
la muestra hacia el ocular.
Los oculares del m icroscopio se ubican en la parte
superior del cuerpo (cabezal). Los m icroscopios del labo-

PROCEDIMIENTO

1. Transportar el microscopio con las dos manos, sujetan


do la base con una de ellas
2. Siempre mantener el microscopio en posicin vertical.
3. Slo limpiar las superficies pticas con un papel para
lentes de buena calidad y una sustancia limpiadora de
lentes comercial.
4. No utilizar los objetivos lOx y 40x con aceite
5. Limpiar la lente de inmersin en aceite despus del uso.
6. Siempre quitar los portaobjetos con el objetivo de bajo
aumento levantado.
7. Guardar el microscopio con el objetivo de bajo aumen
to en posicin y la platina centrada.

88

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

Control de la
distancia interpupilar

Cuerpo (brazo)
Tornillo de centrado
del condensador

Ocular

Revlver
Objetivo

Tornillo
de enfoque
micromtrico
Tornillo
de enfoque
macromtrico
Perillas de ajuste de
la platina mecnica

Anillo de control de
apertura del diafragma
del condensador
Condensador
Tornillo de centrado
Anillo de control del
diafragma de campo
Restato

Figura 6-1 Partes del microscopio


binocular

ratorio clnico son binoculares, lo que permite realizar el


exam en con am bos ojos para proporcionar una visin
ms com pleta. Para lograr las condiciones ptimas de
visualizacin, los oculares pueden ajustarse en forma ho
rizontal para adaptarse a las diferencias de la distancia
interpupilar entre los operadores. Un tornillo de ajuste de
dioptra en los oculares puede girarse para com pensar las
variaciones de visin entre los ojos de los operadores. Los
oculares estn diseados para aumentar ms el tamao
del objeto que ya ha sido incrementado por los objetivos.
Los m icroscopios de laboratorio suelen contener oculares
capaces de aumentar la am plificacin 10 veces (lO x ). El
campo de visin est determinado por el ocular y es el di
metro del crculo de visin cuando se mira a travs de los
oculares. El campo de visin vara con el nmero de cam
po grabado en el ocular y la amplificacin del objetivo.
Cuanto mayor es la amplificacin, ms pequeo es el
cam po de visin. En el examen m icroscpico del anlisis
de orina, los constituyentes del sedim ento se informan
com o nmero por campo microscpico (nmero por cam
po lOx o cam po 4 0 x ).
Los objetivos estn contenidos en la pieza rotativa,
denominada revlver, localizada por encima de la platina
m ecnica. Los objetivos se ajustan para aproximarse a la
muestra y realizar la amplificacin inicial del objeto ubi
cado sobre la platina mecnica. La imagen pasa entonces
a los oculares para su m ayor resolucin (capacidad de
visualizar los detalles finos). La resolucin es la capacidad
de la lente de distinguir dos objetos pequeos que estn
separados por una distancia especfica. El poder de reso
lucin es m ejor cuando la distancia entre los dos objetos
es pequea; depende de la longitud de onda de la luz y
de la apertura numrica de la lente. Cuanto ms corta es
la longitud de onda de la luz. mayor es el poder de reso
lucin del microscopio. Los objetivos ms usados en el

laboratorio clnico tienen am plificaciones de lOx (bajo


aum ento, seco; seco dbil), 4 0 x (gran aum ento, seco;
seco fuerte), y lOOx (inm ersin en aceite). Los objetivos
usados para el examen del sedim ento de orina son I Ox y
4 0 x . El aum ento final de un objeto es el producto del
aum ento del objetivo multiplicado por el aum ento del
ocular. Si se utiliza un ocular lOx y un objetivo lOx, el
aum ento total es de 100 veces (lOOx) y en la anlisis de
orina es una observacin con bajo aumento. El ocular
lOx y el objetivo 4 0 x brindan un aum ento de 4 0 0 veces
(4 0 0 x ) y se consideran observaciones a gran aumento.
Los objetivos tienen inscrita la inform acin que descri
be sus caractersticas e incluye tipo de objetivo (plan [planacrom ticol) para cam po claro, ph para contraste de
fase), aumento, apertura numrica, longitud del brazo del
m icroscopio y espesor del cubreobjetos que debe usarse.
El nm ero de la apertura numrica representa el ndice
de refraccin del material entre el portaobjetos y la lente
exterior (aire o aceite) y el ngulo de la luz que pasa a su
travs. Cuanto mayor es la apertura num rica, m ejor es la
capacidad de reunir la luz de la lente, lo que brinda
mayor poder de resolucin. La longitud de los objetivos
sujetos al revlver vara con el aumento (la longitud se
incrementa de lOx a 100x), por esto cambia la distancia
entre la lente y el portaobjetos cuando ellos se giran.
Cuanto mayor es la apertura num rica, ms prxima est
la lente al objeto. La mayora de los m icroscopios est di
seada para ser para focal, lo que indica que stos requie
ren slo un ajuste m nim o cuando se gira de un objetivo
a otro.
La distancia entre el portaobjetos y el objetivo se con
trola por los tornillos de enfoque m acrom trico y microm trico ubicados en el brazo del cuerpo. El enfocado ini
cial se realiza con el tornillo m acrom trico, que mueve la
platina m ecnica de manera notoria hacia arriba y hacia

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

89

abajo hasta que el objeto se visualiza. A continuacin se


realiza el ajuste con el tornillo de enfocado microm trico
para agudizar la imagen. Al usar un m icroscopio parafocal, debe usarse slo el tornillo m icrom trico para el ajus
te cuando se cam bian los aumentos.
La ilum inacin en el m icroscopio moderno est pro
porcionada por una fuente de luz localizada en la base del
microscopio. La fuente de luz est provista con un res
tato que regula la intensidad de la luz. Tambin pueden
colocarse filtros sobre la fuente de luz para variar la ilu
minacin y las longitudes de onda de la luz emitida. Un
diafragma de campo en la fuente de luz controla el di
metro del haz de luz que alcanza el portaobjetos y se ajus
ta para obtener la iluminacin ptima. Entonces, un con
densador localizado debajo de la platina centra la luz en
la muestra y la controla para brindar una iluminacin
uniforme. La posicin normal del condensador est casi
por com pleto arriba con la lente frontal del condensador
cerca del portaobjetos, pero sin tocarlo. La perilla de ajus
te del condensador (cenirado) mueve el condensador
hacia arriba y abajo para centrar la luz en el objeto. La
abertura del diafragma del condensador controla la can
tidad de luz y el ngulo de rayos de luz que pasan a la
muestra y a la lente, que afectan la resolucin, el contras
te y la profundidad del campo de imagen. Si se ajusta la
abertura del diafragma al 75% de la apertura numrica
del objetivo se logra la resolucin mxima. La abertura del
diafragma no debe usarse para reducir la intensidad de la
luz porque disminuye la resolucin; para este ajuste se
utiliza el restato de la lmpara del microscopio.

ste debe quitarse en forma cuidadosa con un cepillo de


pelo de camello. Las superficies pticas deben limpiarse
con papel para lentes. Limpiar de inmediato toda lenie
contaminada con un limpiador comercial especfico. La
lente de inmersin en aceite debe limpiarse para elim inar
restos de ste despus de cada uso. Las huellas digitales y
las tinciones con aceite daan la agudeza de la imagen. Se
recomienda una limpieza profesional anual para el mi
croscopio. Las fuentes de luz se reemplazan cuando es
necesario.

Iluminacin de Khler

T ip o s d e m ic ro s c o p ia

Dos ajustes para el condensador (centrado e iluminacin)


proveen la visin ptima del cam po iluminado. stos de
ben realizarse siempre que se cam bie un objetivo. Para
centrarci condensador y obtener la iluminacin de Kohler
los pasos a seguir son:
Colocar un portaobjetos en fase y enfocar el objeto
mediante el empleo de un objetivo de bajo aumento
con el condensador levantado.
Cerrar el diafragma de campo.
Bajar el condensador hasta que los bordes del diafrag
ma de campo estn bien enfocados.
Centrar la imagen del diafragma de cam po con los tor
nillos de centrado del condensador com o se muestra
en la figura 6 -2 , parte A.
Abrir el diafragma de campo hasta que su imagen est
en el borde del campo.
Retirar un ocular y mirar hacia abajo a travs del tubo.
Ajustar el diafragma de abertura hasta que se visualice
alrededor del 75% (vase Fig. 6 -2 . parte B).
Volver a colocar el ocular.
El enfocado adicional del objeto debe realizarse median
te las perillas de ajuste y el restato en la fuente de luz.
Los procedim ientos de m antenim iento preventivos del
m icroscopio que se realizan de modo sistem tico asegu
ran un buen rendimiento ptico. El m icroscopio siempre
debe cubrirse cuando no est en uso para protegerlo del
polvo. Si cualquier superficie ptica se cubre con polvo,

de visin

de visin

%
V

Zona
iluminada1

Campo
de visin
Zona
iluminada

Figura 6-2 Centrado del condensador e iluminacin de


Khler.

M ic r o s c o p ia p tic a d e c a m p o claro

1.a microscopia ptica de cam po claro, en la que los obje


tos aparecen oscuros contra un fondo claro, es la que se
utiliza con mayor frecuencia en el laboratorio clnico.
Esta tcnica emplea el m icroscopio bsico antes descrito
con una fuente de ilum inacin que em ite la luz en el
rango de longitud de onda visible.
El uso de microscopia ptica de cam po claro para el
examen del sedimento de orina puede presentar proble
mas cuando la cantidad de luz que alcanza a la muestra
no se controla de modo correcto. Los constituyentes del
sedim ento con un ndice de refraccin bajo se pasarn
por alto cuando se sometan a luz de alta intensidad. Por
consiguiente, los sedim entos deben examinarse con luz
disminuida controlada mediante el ajuste del restato en
la fuente de luz; no se debe bajar el condensador. La tin
cin del sedimento tambin aumenta la visualizacin de
estos elem entos al usar la microscopia de cam po claro.
M ic r o s c o p ia de c o n tr a s te d e fase

Cuando los rayos de luz atraviesan un objeto se retardan


(se desfasan) en comparacin con los rayos que atravie
san el aire (m edios); por esto, disminuye la intensidad de
la luz y producen contraste. Esto se conoce com o dife
rencia de fases y es afectada por el espesor del objeto, el
ndice de refraccin y otras propiedades de absorbancia
de la luz. El m ejor contraste se obtiene cuando la luz que
no atraviesa la muestra cambia a un cuarto de longitud de

90

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

onda y se compara con la diferencia de fase de la m ues


tra. La microscopa de contraste de fa s e proporciona este
contraste.
La microscopa de contraste de fase se logra mediante
la adaptacin de un m icroscopio ptico de campo claro
con un objetivo de contraste de fase y un condensador
que se correspondan. Se colocan en el condensador y en
el objetivo dos anillos de fase que aparecen com o blan
cos de tiro '. Un anillo de fase se coloca en el condensa
dor o debajo de l, que permite que la luz slo atraviese
el rea circular clara central. Un segundo anillo cam bian
te de fase con un rea circular central que retarda la luz
en un cuarto de longitud de onda se coloca en el objeti
vo. Los anillos de fase deben corresponderse, de modo
que es importante controlar que el modo del objetivo y
del condensador sea el mismo. El dimetro de los anillos
varia con la am plificacin. La imagen logra el m ejor con
traste cuando el fondo es ms oscuro. Deben ajustarse los
anillos del contraste de fase para tener el mximo con
traste. Los dos anillos se ajustan para hacerlos concntri
cos. Los pasos de ajuste son :'
Enfocar el m icroscopio ptico de cam po claro en un
portaobjetos con la muestra.
Seleccionar un anillo de condensador de fase de bajo
aumento.
Seleccionar el anillo del objetivo correspondiente.
Retirar un ocular, insertar el telescopio de ajuste y
mirar a travs del telescopio.
Observar los anillos oscuros y claros (anillos peque
os).
Con el tornillo de ajuste en el telescopio, centrar el ani
llo claro (condensador) por encim a del anillo oscuro
(objetivo) (Fig. 6 -3 ).
Volver a colocar el ocular.
La luz pasa a la muestra a travs del crculo claro en el
anillo de fase del condensador y forma un halo de luz
alrededor de la muestra. La luz difractada entra entonces
en el crculo central del anillo de fase cambiante y todo el
resto de la luz cambia de fase un cuarto de longitud de

Anillo del
condensador

onda. L is variaciones de contraste en la imagen de la


muestra debido a los diversos ndices de refraccin en el
objeto se observan com o rayos de luz que emergen jun
tos. lo que refuerza la visualizacin y el detalle. La m i
croscopa tic contraste de fase es particularmente venta
josa para identificar los cilindros hialinos o los cilindros
celulares m ixtos con baja refraccin, filamentos de m oco
y Trichomonas. Este tipo de microscopa elimina la nece
sidad de fijar o teir las clulas viables.
M ic r o s c o p a d e p o la r iz a c i n

El uso de luz polarizada es til para la identificacin de


cristales y lpidos. Ambas sustancias tienen la capacidad
de rotar el trayecto del haz de luz polarizada en forma
unidireccional para producir colores caractersticos en los
cristales y formacin de la cruz de Malta en los lpidos.
Estos elem entos observados con m icroscopa de luz pola
rizada son birrefnngentes, una propiedad que indica que
el elem ento puede refractar la luz en dos dim ensiones a
9 0 entre si.
La lmpara de cuarzo de halgeno en el m icroscopio
produce rayos de luz de m uchas ondas diferentes. Cada
onda tiene una direccin caracterstica y una vibracin
perpendicular a su direccin. La luz normal o no polari
zada vibra en intensidad igual en todas las direcciones. La
luz polarizada vibra en el m ism o plano o direccin. Cuan
do la luz pasa a travs de una sustancia birrefringente, se
divide en dos haces, uno rota 9 0 respecto del otro. Las
sustancias istropas, com o las clulas de la sangre, no tie
nen esta propiedad refractiva y la luz las atraviesa sin
cam bios. Una sustancia que rota el plano de luz polariza
da 9 0 en el sentido de las agujas del reloj se dice que
tiene birrefringencia positiva. Por el contrario, una sus
tancia que rota el plano en el sentido contrario a las agu
jas del reloj tiene birrefringencia negativa.
La luz polarizada se obtiene usando dos filtros de pola
rizacin. La luz que emerge de un filtro vibra en un plano
y un segundo filtro, colocado en ngulo de 9 0 . bloquea
toda la luz entram e, salvo la rotada por la sustancia birre
fringente. Los filtros estn en direcciones opuestas, que se
denomina configuracin cruzada Entre los filtros polarizadores cruzados, los cristales birrefringentes se visuali
zan en patrones caractersticos (Fig. 6 -4 ).
Los microscopios pticos de cam po claro pueden adap
tarse a microscopios de polarizacin. Deben instalarse dos
filtros polarizadores en una configuracin cruzada. El pri
mer filtro, el filtro polarizador, se coloca en el portafiltro

Muestra
birrefringente

Anillo del objetivo


de fase
Centrado de los anillos del microscopio de fase

Figura 6-3 Ajuste dei anillo de contraste de fase.

Fuente
de luz

Onda
rolada

Filtro
Onda separada
Filtro polanzador
polarizador 90u por la muestra con orientacin a 90:

Figura 6-4 Diagrama de la luz polarizada.

Copyrighted mate

ria l

c a p t u lo 6

del condensador; el segundo, el analizador, se coloca en


el cabezal entre los objetivos y el ocular. El filtro polarizador se rota para permitir que la luz que vibra slo en
una direccin alcance el objeto. Si ste no tiene propie
dades birrefringentes, la luz no alcanzar el filtro analiza
dor y el objeto aparecer negro. Los rayos refractados de
un objeto birrefringente alcanzarn el analizador y deter
minarn que el objeto aparezca blanco o coloreado con
tra el fondo negro.
La microscopa de polarizacin se usa en el anlisis de
orina para confirm ar la identificacin de gotas de grasa,
cuerpos grasos ovales y cilindros grasos que producen un
patrn de cruz de Malta caracterstico. Por sus caracters
ticas de polarizacin, los cristales de cido Urico pueden
distinguirse de los de cistina; los cristales de oxalato de
calcio monohidratado de los eritrocitos que no presentan
polarizacin, y los cristales de fosfato de calcio se dife
rencian de las bacterias que tam poco presentan polariza
cin. Com o se descnbe en el capitulo 12, la microscopa
de polarizacin es una herramienta valiosa para la identi
ficacin de cristales en lquido sinovial.
M ic r o s c o p a d e in te r fe r e n c ia -c o n tr a s te

La microscopa de interferencia-contraste proporciona una


imagen tridimensional que muestra detalles estructurales
muy delicados porque divide el rayo de luz de modo que
los haces atraviesan reas diferentes de la muestra. Se
compara la interferencia de luz producida por las diver
sas profundidades de la muestra y se visualiza una im a
gen tridimensional. La ventaja de este tipo de m icrosco
pa es que el objeto aparece claro contra un fondo oscu
ro pero sin el halo de difraccin asociado con la m icros
copa de contraste de fase. Es necesario realizar mayores
modificaciones al microscopio ptico de campo claro
para realizar esta tcnica; por consiguiente, no se usa de
manera habitual en el laboratorio de anlisis de orina.
Se dispone de dos tipos de microscopa de interferen
cia-contraste: contraste por modulacin (Hoffman) y co n
traste por interferencia diferencial (Nomarski). Los mi
croscopios pticos de campo claro pueden adaptarse para
am bos m todos. En el m icroscopio de contraste por
modulacin, se coloca una abertura dividida debajo del
condensador, un polarizador debajo de la abertura divi
dida y un filtro de amplitud detrs de cada objetivo. El
modulador tiene tres zonas de transmisin de la luz: una
oscura que transmite el 1%. una gris que transmite el
15% y una zona clara que transmite el 100% . Los rayos
de luz polarizada atraviesan una abertura dividida hacia
las diferentes reas de la muestra y hacia el modulador,
donde se convierten en variaciones de intensidad de luz
para producir una imagen tridimensional. El microscopio
de interferencia-contraste diferencial usa prismas. Entre
la fuente de luz y el condensador se coloca un filtro de
polarizacin a la salida del plano de luz polarizada. Se re
quiere un prisma de Wollaston modificado por Nomarski
de dos capas que separa los rayos individuales de luz en
pares de rayos. El prisma de Wollaston inferior est incor
porado en el condensador del microscopio. El prisma
superior se coloca entre el objetivo y el ocular y recombina los rayos. Sobre la parte superior del prisma de
Wollaston se coloca otro filtro de polarizacin que causa

Examen m icroscpico de la orina

Analizador
Rayos
recombinados

91

Imagen
tridimensional
Prisma de
Wollaston superior
Plano focal posterior
del objetivo

Objetivo
Muestra
Condensador

Divisin
de los rayos
Plano focal
del condensador
Prisma de
Wollaston inferior
Polarizador

Figura 6-5 Microscopa de interferencia-contraste diferencial


(Nomarski).

la interferencia de ondas y produce la imagen tridim en


sional (Fig. 6-5). Estos dos tipos de microscopia propor
cionan la formacin de imgenes capa por capa de una
muestra y realzan el detalle para las muestras, ya sea con
ndice de refraccin bajo o alto.
Microscopia de campo oscuro

La microscopia de cam po oscuro es una tcnica usada en el


laboratorio clnico para realzar la visualizacin de m ues
tras que no pueden verse con facilidad con el m icrosco
pio ptico de campo claro. A menudo se utiliza para las
muestras sin teir y, en particular, para identificar la espi
roqueta Treponema pallidum.
El m icroscopio ptico de cam po claro se adapta con
facilidad para la microscopia de cam po oscuro mediante
el reemplazo del condensador por un condensador de
cam po oscuro que contiene un disco opaco. El disco blo
quea directamente la luz que ingresa al objetivo y el
cam po de visin es negro. Cuando los rayos de luz atra
viesan la muestra en ngulos oblicuos, la luz se dispersa,
se difracta o se refleja fuera de la muestra y se captura por
la lente objetivo. La muestra aparece brillante contra el
fondo negro o campo oscuro (Fig. 6-6).
Microscopa de fluorescencia

La microscopa de fluorescencia es una tcnica de uso cada


vez ms difundido en el cam po mdico actual. Se usa
para detectar bacterias y virus dentro de clulas y tejidos
a travs de una tcnica conocida com o inmunofluorescencia. La fluorescencia es la propiedad por la que algu
nos tomos absorben la luz a una longitud de onda par
ticular y como consecuencia emiten luz de una longitud
de onda ms larga, denominada vida de la fluorescencia.
La aplicacin prctica en el laboratorio es que permite la
visualizacin de sustancias naturalmente fluorescentes o
teidas con un fluorocromo o fluorforo (colorantes fluo
rescentes) para producir una imagen. La muestra se ilu
mina con luz de una longitud de onda especfica. Las sus
tancias fluorescentes absorben la energa y emiten una luz
con longitud de onda ms larga que se visualiza con el

92

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

alteraciones y elem entos mltiples. Ellos deben aprender


a confiar en sus observaciones despus de mirar el nm e
ro recomendado de campos. Los elementos celulares tam
bin son distorsionados con facilidad por las variaciones
de concentraciones, el pH y la presencia de metabolitos
en la orina, lo que hace ms difcil la identificacin.
No hay una definicin clara acerca de los valores nu
mricos normales reales. Com o se m encion, los m to
dos de preparacin del sedim ento determinan la concen
tracin real del sedim ento y. por consiguiente, el nmero
de elem entos que pueden estar presente en un campo m i
croscpico. Los valores normalmente listados incluyen de
0 a 2 -3 eritrocitos por cam po 4 x . de 0 a 5 -8 leucocitos
por cam po 4 0 x y de 0 a 2 cilindros hialinos por cam po
lOx Incluso estas cifras deben tomarse en el contexto de
otros factores, com o el estrs y la actividad fsica recien
tes, la contam inacin menstrual y la presencia de otros
constituyentes del sedim ento. Para lograr una m ejor pers
pectiva, a continuacin se describen cada uno de los
constituyentes del sedimento con referencia a las figuras
que acompaan el texto.

E ritrocitos
campo oscuro

i i
i i
i i

i
i
i

i
i
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i
i
i

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i i
i i

v
Rayos de luz

Figura 6-6 Microscopa de campo oscuro.

En la orina, los eritrocitos aparecen com o discos b ic n


cavos, lisos, sin ncleos, que miden alrededor de 7 fim
de dimetro (Fig. 6-8). Deben identificarse con objetivo de
gran aum ento (4 0 x ) que logra un aum ento total de 4 0 0 x .
Los eritrocitos se suelen informar com o el nmero pro
medio observados en 10 cam pos 4 0 x .

uso de filtros especiales, denom inados filtro de excitacin


y filtro de emisin. El filtro de excitacin selecciona la luz
de longitud de onda de excitacin proveniente de una
fuente de luz. El filtro de emisin selecciona una longitud
de onda especfica de luz emitida por la muestra para tor
narse visible. Los filtros se eligen para que coincidan las
longitudes de onda de excitacin y de emisin del fluorforo utilizado para marcar la muestra. Un espejo dicroi
co refleja la luz que excita la muestra y transmite la luz
emitida al filtro de em isin, que es reunida con el objeti
vo y representada por el detector (Fig. 6 -7 ). La sustancia
fluorescente puede observarse en el m icroscopio de fluo
rescencia com o un objeto brillante contra un fondo oscu
ro con gran contraste cuando se utiliza una fuente de luz
ultravioleta. Se requieren fuentes de luz poderosas y sue
len ser lmparas de mercurio o de xenn.9

C o n s titu y e n te s d e l s e d im e n to
El sedimento de orina normal puede contener una varie
dad de elem entos formes. Incluso la aparicin de canti
dades pequeas de los que suelen ser importantes en
patologa, com o eritrocitos, leucocitos y cilindros , pueden
ser normales. Asimismo, muchas veces la orina no co n
tiene nada ms que alguna clula epitelial rara o filamen
tos de m oco. Los estudiantes a menudo tienen dificultad
en adaptarse a esto, porque en el m bito de las clases
suele hacerse hincapi en los sedim entos que contienen

Ocular

Filtro de barrera

m u

Objetivo
Muestra
Condensador

Lmpara
de mercurio

Ondas de
luz incidentes

Colector

Filtro de excitacin

Espejo deflector

Luz ultravioleta
e n Luz visible

Figura 6-7 Microscopa de fluorescencia.

y righted material

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

93

i
Figura 6 - 10 Levaduras. La presencia de formas brotantes
ayuda a diferenciarlas de los eritrocitos (400x).

Figura 6-8 Eritrocitos normales (400x).

En orinas concentradas (hiperestenuria) los eritrocitos


se retraen por la prdida de agua y pueden aparecer erenados o con formas irregulares (Fig. 6 -9 ). En orinas dilui
das (hipostenuria) las clulas absorben agua, se hinchan
y se lisan con rapidez, liberan su hemoglobina y dejan
slo la m embrana celular. Estas clulas vacas grandes se
denominan clulas fantasm a y pueden pasarse por alto
con facilidad si las muestras no se examinan con luz re
ducida.
De todos los elementos del sedim ento, los eritrocitos
son los ms difciles de reconocer por los estudiantes.
Esto se debe a que estas clulas carecen de estructuras
caractersticas, presentan tamaos variados y se asemejan
m ucho a otros constituyentes del sedimento. Con fre
cuencia, los eritrocitos se confunden con clulas de leva
duras, gotas de aceite y burbujas de aire. Las levaduras
normalmente muestran brotacin (Fig. 6 -1 0 ). Las gotas
de grasa y las burbujas de aire son muy refringentes cuan
do se mueve el tornillo microm trico arriba y abajo (Fig.
6 -1 1 ); tambin pueden aparecer en un plano diferente
que los otros constituyentes del sedim ento (Fig. 6 -1 2 ). El
aspecto rugoso de los eritrocitos crenados puede parecer
se a los granulos observados en los leucocitos; sin em bar
go, son m ucho ms pequeos que estos ltimos. Si la
identificacin sigue siendo dudosa, el agregado de cido

o
* 4
O
4
a

o o
O o

actico a una porcin del sedimento lisa los eritrocitos y


permanecen intactos las levaduras, las gotas de aceite y
los leucocitos. Tambin pueden ser tiles las tinciones
supravitales.
Los estudios se han centrado en la morfologa de los
eritrocitos urinarios com o ayuda para determinar el sitio
de sangrado renal. Los eritrocitos que varan en tamao,
presentan protrusiones celulares o se fragmentan se de
nominan dismorfos (Fig. 6 -1 3 ) y se asociaron sobre todo
con el sangrado glomerular. Tambin deben considerarse
el nmero y el aspecto de las clulas dismorfas, porque la
concentracin de orina anormal afecta el aspecto de los
eritrocitos y se encuentran nmeros pequeos de clulas
dismorfas en la hematuria de origen no glomerular.1011
Los eritrocitos dism orfos tambin se demostraron des
pus de la actividad fsica extenuante, lo que indica el ori
gen glomerular de este fenm eno.12 La clula dismorfa
que se asocia ms estrechamente con el sangrado glom e
rular parece ser el acantocito, con protrusiones mltiples,
que puede ser difcil de observar con el m icroscopio pti
co de campo claro.I3 H En los sedim entos que contienen
eritrocitos dismorfos es necesario realizar otro anlisis
con preparaciones teidas con la tcnica de Wright en la
que las clulas se observan hipocrm icas y se esboza
m ejor la presencia de burbujas y protrusiones celulares.

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F ig u ra 6-9 Eritrocitos microcticos y crenados (400x).

F ig u ra 6 - 11 Clulas epiteliales escamosas y gotas de aceite


teidos con KOVA (400x).

Copyright

I i d it.

94

c a p tu lo 6

Examen m icroscpico de la orina

a *

Figura 6 - 12 Burbuja de aire. Ntese que no hay ningn ele


mento forme en foco (lOOx).

vidad fsica extenuante. Estas alteraciones no son patol


gicas y desaparecen con el reposo.'-' La posibilidad de
contam inacin menstrual tambin debe ser considerada
en las muestras de mujeres.
Com o se m encion, la presencia de eritrocitos o su
ausencia en el sedimento no siempre puede correlacio
narse con el color de la muestra o el resultado positivo de
la prueba qumica para sangre. La presencia de hem oglo
bina que ha filtrado por el glomrulo produce orina roja
con un resultado positivo de la prueba qumica para san
gre en ausencia de hematuria microscpica. Del m ism o
modo, una muestra que en el examen m acroscpico pa
rece normal puede contener un nmero pequeo de eri
trocitos. pero significativo desde el punto de vista patol
gico cuando se realiza el examen microscpico.
L e u c o c ito s

Im p o r t a n c i a clnica

La presencia de eritrocitos en la orina se asocia con el dano de la membrana glomerular o la lesin vascular dentro
del aparato genitourinario. El nmero de clulas presen
tes indica la magnitud del dao o de la lesin. Las histo
rias clnicas de los pacientes a menudo mencionan la pre
sencia de hematuria macroscpica versus microscpica.
Cuando hay hematuria macroscpica, la orina parece
turbia con color rojo a marrn. Los anlisis m icroscpi
cos pueden informarse como cantidad de eritrocitos
mayor de 100 por campo 4 0 x o segn lo especificado en
el protocolo del laboratorio. La hematuria m acroscpica
se asocia con frecuencia con dao glomerular avanzado,
pero tambin se observa cuando hay dao de la integri
dad vascular de las vas urinarias causado por traumatis
m o, infeccin aguda o inflamacin y trastornos de la coa
gulacin.
La observacin de hematuria microscpica puede ser
fundamental para el diagnstico tem prano de trastornos
glomerulares y procesos malignos del tracto urinario y
para confirmar la presencia de clculos renales. La pre
sencia de eritrocitos adems de cilindros hialinos, granu
losos y de eritrocitos puede observarse despus de la acti

Los leucocitos son ms grandes que los eritrocitos; en pro


medio, miden alrededor de 12 Jim de dimetro (Fig. 6-14).
Los leucocitos que predominan en el sedimento de
orina son los neutrfilos, m ucho ms fciles de identifi
car que los eritrocitos porque contienen grnulos y n
cleos multilobulados (Figs. 6 -1 5 y 6 -1 6 ). Sin embargo, se
identifican con microscopa de gran aumento y tambin
se informan com o el nm ero promedio observado en 10
campos 4 0 x . Los neutrfilos se lisan con rapidez en ori
nas alcalinas diluidas y comienzan a perder los detalles
nucleares.
Los neutrfilos presentes en orina hipotnica absorben
agua y se hinchan. El movim iento browniano de los gr
nulos dentro de estas clulas grandes produce un aspee
to centellante y las clulas se denominan brillantes
Cuando se tien con el mtodo de Sternheimer-Malbin
estas clulas grandes toman una coloracin azul plido
opuesto al color violeta observado en los neutrfilos. No
tienen ninguna importancia patolgica.

Resumen sobre el examen microscpico


de eritrocitos
Aspecto:

Discos bicncavos sin ncleos


Crenados en orinas hipertnicas
Clulas fantasma en orinas hipotnicas
Dismorfos en caso de dao de la
membrana glomerular

Causas de error en
la identificacin:

Clulas de levadura
Gotas de grasa
Burbujas de aire

Informe:

Nmero promedio por 10 campos


40x

Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:

Color
Reaccin con tira reactiva para sangre

0
O

I
O
Figura 6-13 Errtroctos dismorfos (400x).

Copyrighted mater

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

95

m
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fe

Figura 6 - 14 Eritrocitos y un leucocito (400x).

concentrado y teido. El sedimento puede concentrarse


por medio de la centrifugacin habitual sola o por citocentrifugacin. La tincin preferida para los eosinfilos es
la de Hansel (Fig. 6 -1 7 ); sin em bargo, tambin puede
emplearse la tincin de Wright. Se determina el porcen
taje de eosinfilos en 1 00 a 5 0 0 clulas. Los eosinfilos
normalmente no se observan en la orina; por consiguien
te, el hallazgo de ms de 1% de eosinfilos se considera
significativo.16

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C lu las m o n o n u c le a re s

Figura 6 - 15 Leucocitos. Ntense los ncleos multilobulados


(400x).

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Figura 6 - 17 Eosinfilos teidos con la tcnica de Hansel


(400x).

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Figura 6 - 16 Grupos de leucocitos (400x).

Eosinfilos

La presencia de eosinfilos urinarios se asocia sobre todo


con la nefritis intersticial inducida por frmacos; sin em
bargo, cantidades pequeas de eosinfilos pueden obser
varse en las infecciones urinarias y el rechazo del tras
plante renal. Para realizar la com probacin de eosinfilos
urinarios se necesita la evaluacin del sedimento de orina

Los linfocitos, los m onocitos, los macrfagos y los histiocitos pueden estar presentes en nmeros pequeos y, por
lo general, no pueden identificarse en el anlisis m icros
cpico de preparaciones en fresco de la orina. Dado que
los linfocitos son los leucocitos ms pequeos, pueden
parecerse a los eritrocitos. Es posible observar cantidades
mayores de estas clulas en las fases tempranas del recha
zo del trasplante renal. Los m onocitos, los macrfagos y
los histiocitos son clulas grandes y suelen contener
vacuolas o inclusiones. Las muestras que contienen can
tidad aumentada de clulas m ononucleares que no pue
den identificarse com o clulas epiteliales deben enviarse
para la com probacin por citodiagnstico.
El inters principal en la identificacin de los leucoci
tos es la diferenciacin de las clulas m ononucleares y los
neutrfilos en vas de desintegracin de las clulas epite
liales de los tbulos renales (ETR). Estas ltimas suelen
ser ms grandes que los leucocitos y con forma ms
polidrica, con un ncleo localizado de m odo excntrico.
Cuando los leucocitos estn en movimiento ameboide
puede ser difcil distinguirlos de las clulas epiteliales
debido a su forma irregular. Si es necesario, puede usar
se la tincin supravital o el agregado de cido actico para
realzar el detalle nuclear (Fig. 6 -1 8 ).
Habitualmente, en la orina normal se encuentran
menos de cinco leucocitos por campo 4 0 x ; sin embargo,
nmeros ms altos pueden estar presentes en la orina de
las mujeres. Aunque los leucocitos, com o los eritrocitos,
pueden ingresar en la orina a travs del traumatismo glo
merular o capilar y tambin son capaces de migrar por
movimientos ameboides a travs de los tejidos a los sitios

96

c a p tu lo

Examen m icroscpico de la orina

Figura 6-18 Leucocitos con realce nuclear obtenido por


agregado de cido actico (400x).

Figura 6 - 19 Sedimento que contiene clulas escamosas, de


transicin y clulas del epitelio de los tbulos renales (ETR)
(400x).

de infeccin o inflamacin. El aumento de leucocitos en


orina se denomina piura c indica la presencia de infeccin
o inflamacin en el aparato genitourinario. Las infecciones
bacterianas, com o pielonefritis, cistitis, prostatitis y uretritis, son causas frecuentes de piura. Sin embargo, la piura
tambin est presente en trastornos no bacterianos, como
glomerulonefritis, lupus eritematoso, nefritis intersticial y
tumores. Es importante el informe de la presencia de bac
terias en las muestras que contienen leucocitos.

C lu las e p ite lia le s escamosas

Clulas epiteliales
No es raro encontrar clulas epiteliales en la orina, por
que ellas provienen de los revestimientos del aparato ge
nitourinario. A m enos que estn presentes en cantidades
grandes o con formas anormales, representan el despren
dim iento normal de clulas viejas. En la orina se obser
van tres tipos de clulas epiteliales: escamosas, de transi
cin (uroteliales) y de los tbulos renales (Fig. 6 -1 9 ). Se
clasifican segn su sitio de origen dentro del sistema
genitourinario.

Las clulas escamosas son las clulas ms grandes en con


tradas en el sedimento de orina. Contienen citoplasma
abundante, irregular y un ncleo prominente del tamao
de un eritrocito (Figs. 6 -2 0 y 6 -2 1 ). A menudo son las
primeras estructuras observadas cuando el sedim ento se
examina con bajo aumento. Al menos se suelen observar
algunas clulas epiteliales escamosas en el sedimento y
pueden servir com o buena referencia para enfocar el
microscopio (Fig. 6 -2 2 ). Despus del examen del nm e
ro apropiado de cam pos, las clulas epiteliales escamosas
se informan como raras, escasas, moderadas o abundan
tes. Se informan com o cantidad observada por campo
lOx o 4 0 x de acuerdo con el protocolo del laboratorio.
No es difcil identificar las clulas escamosas. Sin em
bargo, de vez en cuando aparecen plegadas, que pueden
parecerse a cilindros, y comenzarn a desintegrarse en la
orina que no es reciente. En sedimentos que contienen
cantidades grandes de clulas escamosas puede ser ms
difcil diferenciar elem entos patolgicos ms pequeos,
com o eritrocitos y leucocitos, y deben examinarse de
modo cuidadoso (Figs. 6 -2 3 y 6 -2 4 ).

I Resumen sobre el examen microscpico


1 de leucocitos
Aspecto:

Ms grandes que los eritrocitos


Neutrfilos multilobulados y con granulos
Clulas brillantes en la orina hipotnica
Clulas mononudeares con abundante
citoplasma

v ;

Causas de e rro r en Clulas epiteliales de los tbulos renales


la identificacin:
Informe:

N m ero prom edio p o r 10 campos 40x

Correlaciones con
el anlisis de
orina completo:

Esterasa de leucocitos
N itrito
Densidad
pH

Figura 6-20 Clulas epiteliales escamosas teidas con KOVA


(400x).

Copyrighed mafc

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

97

v
c.

% vV.w;

la

Figura 6 - 2 1 Sedimento teido con fenazopiridina que mustra clulas epiteliales escamosas y cristales de fenazopiridina
formados tras la refrigeracin (400x).

Las clulas epiteliales escamosas se originan de los re


vestimientos de la vagina y la uretra femenina y de la por
cin inferior de la uretra masculina. Representan el des
prendimiento celular normal y no tienen importancia
patolgica. Cantidades aumentadas se observan con ma
yor frecuencia en la orina de m ujeres. Las muestras que
se obtienen por la tcnica del chorro medio contienen
m enos contam inacin de clulas escamosas.
Una variacin de la clula epitelial escamosa es la clu
la clave que tiene importancia patolgica. Las clulas
clave son indicativas de infeccin vaginal por la bacte
ria Gardnerella vagmclis. Aparecen com o clulas epitelia
les escamosas recubiertas por cocobacilos Gardnerella.
Las bacterias deben recubrir la mayor parte de la superfi
cie celular para ser considerada como una clula clave"
y deben extenderse ms all de los bordes de la clula.
Esto confiere a la clula un aspecto granuloso e irregular.
La com probacin sistemtica de clulas "clave" se realiza
mediante el exam en de una preparacin en fresco de la
secrecin vaginal para determinar la presencia de clulas
caractersticas. Sin embargo, en el sedim ento urinario
puede haber cantidades pequeas de clulas 'clave. Los
m icroscopistas deben estar aleas para determinar su

R g u ra 6 . 2 J Grupo de c|u!as e p,telales escamosas (400x).

presencia, dado que el anlisis de orina puede ser la pri


mera prueba realizada en el paciente.
C lu la s d e l e p ite lio d e tra n s ic i n ( u ro te lia le s )

Las clulas epiteliales de transicin son ms pequeas


que las clulas escamosas y aparecen en varias formas:
esfricas, polidricas y con proyecciones apendiculares
(Figs. 6 -2 5 y 6 -2 6 ). Estas diferencias se producen por la
capacidad de estas clulas de absorber cantidades gran
des de agua. Las clulas en contacto directo con la orina
absorben agua, se tornan esfricas y m ucho ms grandes
que las polidricas y las clulas con proyecciones apendi
culares. Todas las formas tienen ncleos distintos, con
ubicacin central. Las clulas de transicin se identifican
y se cuentan mediante objetivo 4 0 x . Com o las clulas
escamosas, las de transicin se suelen informar com o ra
ras, escasas, moderadas o abundantes de acuerdo con el
protocolo del laboratorio.
Las formas redondeadas de las clulas epiteliales de
transicin son difciles de distinguir de las clulas del
ETR. La presencia del ncleo central en lugar de excn
trico y la tincin supravital pueden ayudar para la dife
renciacin.

Figura 6-22 Clulas epiteliales escamosas identficables con

bajo aumento ( I OOx).

Figura 6-24 Grupo de clulas epiteliales escamosas con for


mas plegadas (400x).

98

c a p t u lo

Examen m icroscpico de la orina

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Figura 6-25 Clulas epiteliales de transicin esfricas teidas


con KOVA (4C0x).

Figura 6-27 Sincicio de clulas epiteliales de transicin


(400x).

Las clulas epiteliales de transicin se originan del


revestimiento de la pelvis renal, los clices, la uretra y la
vejiga y de la porcin superior de la uretra masculina. Por
lo general, estn presentes en escasa cantidad en la orina
normal, que representa el desprendimiento celular nor
mal. Pueden observarse cantidades aumentadas de este
tipo de clulas dispuestas en forma individual, en pares o
en grupos ( sincicios) despus de la realizacin de procedi
mientos urolgicos como el cateterismo y no tienen
importancia clnica (Fig. 6 -2 7 ). Un aum ento de las clu
las de transicin con morfologa anormal, com o vacuolas
y ncleos irregulares, puede ser indicativo de malignidad
o de infeccin viral. En estos casos, la muestra debe
enviarse para el examen citolgico.

Las clulas epiteliales de los tbulos renales (ETR) varan


en tamao y forma, que dependen de la zona de los tbu
los renales en la que se originan. Las clulas del tbulo
contorneado proximal (TCP) son ms grandes que otras
clulas ETR. Tienden a tener una forma rectangular y se
las denomina clulas cilindricas o clulas contorneadas.
El citoplasma es granular y las clulas ETR a menudo se

asemejan a cilindros. Deben examinarse de modo m eti


culoso para determinar la presencia de un ncleo, ya que
en los cilindros no deben observarse ncleos. En la figu
ra 6 -2 8 se observa el ncleo y los grnulos. sta es una
clula del TCP que ha absorbido glbulos de grasa y
podra confundirse con facilidad con un cilindro granu
loso o graso.
Las clulas del tbulo contorneado distal (TCD ) son
ms pequeas que las del TCP y son redondas u ovala
das. Pueden confundirse con leucocitos y clulas epite
liales de transicin esfricas. La observacin del ncleo
redondo y excntrico ayuda a diferenciarlas de las clulas
de transicin esfricas (Fig. 6 -2 9 ).
Las clulas del conducto colector del ETR presentan
forma cbica y nunca son redondas. Adems del ncleo
excntrico, la presencia de al m enos un borde recto las
diferencia de las clulas esfricas y polidricas de transi
cin (Fig. 6 -3 0 ). Dado que las clulas del ETR a menudo
estn presentes com o resultado de la destruccin del teji
do (necrosis), el ncleo no se visualiza con facilidad en el
sedimento no teido.
Las clulas del conducto colector que aparecen en gru
pos de tres o ms se denom inan fragmentos renales; stos

Figura 6 -26 Clulas epiteliales de transicin con proyeccio


nes apendiculares (400x).

Figura 6-28 Clula del epitelio de los tbulos renales. Las


clulas columnares del tbulo contorneado presentan granulos
y glbulos de grasa adheridos (400x).

C lu la s e p ite lia le s d e los t b u lo s renales

Copyrighted material

c a p tu lo

6 Examen m icroscpico de la orina

99

Figura 6-29 Clulas del epitelio de los tbulos renales.


Clulas ovales del tbulo contorneado distal. Ntense los
ncleos excntricos (400x).

Figura 6 -3 1 Fragmento de clulas de epitelio de los tbulos


renales observado con microscopia de fase (400x).

con frecuencia se observan com o lminas grandes de


clulas. Las clulas de los TCP y TCD no se ven como
lminas grandes de clulas (Fig. 6-3 1 ).
Las clulas ETR deben identificarse y cuantificarse con
gran aumento. De acuerdo con el protocolo del laborato
rio, pueden informarse com o raras, escasas, moderadas o
abundantes o com o el nmero real por campo 4 0 x . La
clasificacin de las clulas del ETR respecto del sitio de
origen no se considera una parte del anlisis habitual del
sedimento y a menudo se requieren tcnicas de tincin
especiales. La presencia de ms de dos clulas ETR por
campo 4 0 x indica lesin tubular y estas muestras deben
enviarse para la comprobacin citolgica.17

De las clulas epiteliales, las del ETR son las ms impor


tantes en clnica. La presencia de cantidades aumentadas
indica necrosis de los tbulos renales, con la posibilidad
de afectar la funcin renal global.
Las condiciones que producen necrosis tubular son:
exposicin a metales pesados, toxicidad inducida por fr
m acos, toxicidad por hemoglobina y mioglobina, infec
ciones virales (hepatitis B), pielonefritis, reacciones alrgi
cas, infiltraciones malignas, intoxicaciones por salicilato y

rechazo agudo de trasplantes alognicos. Tambin pueden


verse clulas ETR com o efectos secundarios de trastornos
glomerulares. Los fragmentos renales son una indicacin
de lesin tubular grave con ruptura de la membrana basal.
U s clulas cbicas nicas son particularmente notables en
los casos de intoxicacin por salicilato.
Com o una de las funciones de las clulas ETR es la re
absorcin del filtrado glomerular, no es inusual que co n
tengan las sustancias del filtrado. Las clulas ETR absor
ben la bilirrubina presente en el filtrado com o resultado
del dao heptico, com o sucede en las hepatitis virales, y
aparece un color amarillo intenso. Com o se describi en
el capitulo 5, la hemoglobina presente en el filtrado es
absorbida por las clulas ETR y convertida en hemosiderina. Por consiguiente, despus de episodios de hem o
globinuria (reacciones postransfusionales, hem oglobinu
ria paroxstica nocturna, etc.), las clulas ETR pueden
contener grnulos de hemosiderina de color amarillo cas
tao caractersticos. Los grnulos tambin pueden obser
varse en forma libre, flotando en el sedimento. La confir
macin de la presencia de hemosiderina se realiza m e
diante la tincin del sedimento con azul de Prusia. Los
grnulos de hemosiderina que contienen hierro se tien
de azul (Fig. 6 -3 2 ).

Figura 6-30 Clulas del epitelio de los tbulos renales cuboides del conducto colector (400x).

Figura 6-32 Granulos de hemosidenna teidos con azul de


Prusia.

Im portancia clnica

100

c a p tu lo

Examen m icroscpico de la orina

Figura 6-33 Cuerpo graso oval (400x).

Figura 6-35 Cuerpo graso oval observado con microscopa


ptica de campo claro y de luz polarizada. Ntese la formacin
de la cruz de Malta (400x).

C u e rp o s grasos ovales

Las clulas ETR absorben lpidos que estn presentes en


el filtrado glomcrular; por esto, aparecen muy refringentes y el ncleo puede ser ms difcil de observar. Estas
clulas ETR que contienen lpidos se conocen com o cuer
pos grasos ovales (Fig. 6 -3 3 ). Suelen observarse ju nto
con las gotas de grasa libres flotantes.
La identificacin de los cuerpos ovales grasos se confir
ma mediante la tincin del sedimento con Sudn III u Oil
Red O para grasas y el examen del sedimento con micros
copa de luz polarizada. Las golas estn compuestas por
triglicridos, grasas neutras, y colesterol. Las tinciones pa
ra grasas tien triglicridos y grasas neutras y producen
gotas rojo-anaranjadas (Fig. 6-3 4 ). El examen del sedi
mento con luz polarizada produce la aparicin de las for
maciones caractersticas de cruz de Malta en las gotas que
contienen colesterol (Fig. 5-3 5 ). Los sedimentos negativos
para grasas despus de la tincin deben verificarse
mediante el empleo de luz polarizada para el caso de que
slo el colesterol est presente. Asimismo, debe realizarse
la tincin de los sedimentos negativos en la observacin
con luz polarizada. Los cuerpos grasos ovales se informan
com o el nmero promedio por campo 4 0x .
Las gotas de grasas libres flotantes tambin se tien o
polarizan la luz de acuerdo con su com posicin; puede

observarse que flotan en la parte superior de la muestra.


Debe tenerse precaucin para no confundirlas con almi
dn y partculas cristalinas que tambin producen la
polarizacin de la luz. Debe considerarse la contam ina
cin de la muestra con m edicaciones y lubricantes vagi
nales usados en la recoleccin de la muestra cuando slo
se observan gotas de grasa libres flotantes.
La lipicluria se asocia con mayor frecuencia con dao
al glomrulo causado por el sndrome nefrtico (vase
Captulo 8 ). Tambin se observa en la necrosis tubular
grave, la diabetes mellitus y en casos de traumatismos
que causan la liberacin de grasa de la mdula sea de los
huesos largos. En las enfermedades por alm acenam iento
de lpidos, pueden verse histiocitos grandes cargados de
grasa, que se diferencian de los cuerpos ovales grasos por
su gran tamao.
Clulas ETR que contienen vacuolas grandes, pero no
repletas de lpidos. pueden verse ju n to con clulas de los
tbulos renales norm ales y cuerpos grasos ovales en los
casos de necrosis tubular aguda. Conocidas com o clu
las en burbuja", stas parecen representar clulas lesiona
das en las que el retculo endoplasm tico se dilata antes
de la muerte celular.1*

Bacterias

F ig u ra 6-34 Cuerpo graso oval teido con Sudn III (400x).

L\s bacterias normalmente no estn presentes en la orina.


Sin embargo, a m enos que las muestras se recolecten en
condiciones estriles (cateterism o), puede haber bacterias
com o resultado de secreciones vaginales, uretrales, geni
tales externas o contam inacin del recipiente de recolec
cin. Estas bacterias contam inantes se multiplican con
rapidez en muestras que perm anecen a temperatura
ambiente durante periodos prolongados, pero carecen de
importancia clnica. Pueden producir resultados positi
vos de la prueba para nitrito y con frecuencia tambin
muestran un pH m ayor de 8 . valores que indican que la
muestra es inaceptable.
Las bacterias pueden tener forma de cocos (esfricas) o
bacilos (bastones). Por su tamao pequeo, deben obser
varse e informarse mediante el em pleo de ptica de gran
aumento. Se informan com o escasas, moderadas o abun-

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c a p tu lo

dantes por campo 4 0 x . Para ser consideradas significati


vas para causar infeccin urinaria, las bacterias deben
estar acompaadas de leucocitos. Algunos laboratorios
slo informan las bacterias cuando se observan en las
muestras recin emitidas ju n to con leucocitos (Fig. 6-3 6 ).
La presencia de microorganismos mviles en una gota de
orina reciente, recolectada en condiciones estriles, se co
rrelaciona bien con un cultivo de orina (urocultivo) posi
tivo. Tambin es til observar la movilidad de las bacte
rias para diferenciarlas de los fosfatos y uratos amorfos
que tienen aspecto similar. El uso de la microscopa de
fase ayuda para la visualizacin de las bacterias.
La presencia de bacterias puede ser indicativa de infec
cin urinaria baja o alta. En el caso de muestras que con
tienen cantidades aumentadas de bacterias y leucocitos,
de m odo sistemtico se solicita una muestra para la reali
zacin de un urocultivo cuantitativo (recuento de colo
nias). Las bacterias que con mayor frecuencia se asocian
con infecciones urinarias son los miembros de la familia
Enterobacteriaceae (bacilos gramnegativos); sin embargo,
algunos microorganismos con forma de cocos, com o Sta
phylococcus y Enterococcus tambin causan infecciones
urinarias. El examen m icroscpico no permite identificar
el gnero y la especie que causa la infeccin urinaria.

Levaduras
Las levaduras aparecen en la orina com o estructuras ova
les pequeas, refringentes, que pueden contener un brote
o no. En las infecciones intensas pueden aparecer ramifi
cadas, es decir, la forma micelial (Fig. 6 -3 7 ). Las levadu
ras se informan com o raras, escasas, moderadas o abun
dantes por campo 4 0 x . La diferenciacin entre levaduras
y eritrocitos a veces puede ser difcil. Com o se muestra en
la figura 6 -1 0 , es til la observacin cuidadosa de las
levaduras brotantes.
Las levaduras, sobre todo Candida albicans , se observan
en la orina de pacientes diabticos, inm unocom prom etidos y m ujeres con candidiasis vaginal. La orina acida que
contiene glucosa de los pacientes con diabetes provee un
medio ideal para el crecim iento de las levaduras. Como
sucede con las bacterias, una cantidad pequea de leva
duras que ingresa en una muestra com o contaminante se
multiplica con rapidez si la muestra no se exam ina en
forma inmediata. Una infeccin verdadera por levaduras
debe acompaarse de la presencia de leucocitos.

Examen m icroscpico de la orina

101

Figura 6-36 Bacterias y leucocitos teidos con KOVA (400x).

infeccin de la uretra masculina y la prstata es asintomtica.


Los huevos del parsito de la vejiga Schisfosoma hacmaobium aparecern en la orina. Sin embargo, este parsito
rara vez se observa en los Estados Unidos.
La contaminacin fecal de una muestra de orina tam
bin puede dar com o resultado la presencia de huevos de
parsitos intestinales en el sedimento de orina. El conta
minante ms com n son los huevos del parsito Enterobius vermicularis.

E sperm atozoides
Los espermatozoides se identifican con facilidad en el
sedimento de orina por sus cabezas ovaladas, ligeramen
te adelgazadas, y flagelos largos, com o colas (Fig. 6 -3 8 ).
La orina es txica para los espermatozoides; por consi
guiente, raras veces muestran movilidad com o la obser
vada al examinar una muestra de semen.
En ocasiones, se encuentran espermatozoides en la
orina de hombres y m ujeres despus de relaciones sexua
les, masturbacin o emisin nocturna. Raras veces son de
importancia clnica, salvo en los casos de esterilidad mas
culina o eyaculacin retrgrada en la que el esperma se
expele en la vejiga en lugar de hacerlo en la uretra. Cuan-

Parsitos
El parsito hallado con mayor frecuencia en la orina es
Trichomonas vaginalis. El trofozoto de Trichomonas pre
senta forma de pera con flagelo y membrana ondulante.
Se identifica con facilidad en preparaciones en fresco del
sedimento de orina por su movimiento rpido en el cam
po microscpico. Su presencia se informa com o raros, es
casos, moderados o abundantes por campo 4 0 x .
Cuando no se mueve, Trichomonas es ms difcil de
identificar y puede asemejarse a leucocitos, clulas de tran
sicin o ETR. El uso de microscopa de fase puede realzar
la visualizacin del flagelo o de la membrana ondulante.
T. vaginalis es un patgeno transmitido por contacto
sexual asociado sobre todo con inflamacin vaginal. La

-r
4m
94fi

Pv:

fio
\y

, y -4 '

v rn T

Figura 6-37 Levadura que muestra la forma micelial (400x).

102

c a p t u lo 6

Examen m icroscpico de la orina

Clulas ETR

Clulas escamosas
Aspecto:

Clulas ms grandes del sedimento


con citoplasma abundante, irregu
lar y ncleo prominente

Causas de e rro r en
la identificacin:

Rara vez encontradas, las clulas


plegadas pueden simular cilindros

Informe:

Raras, escasas, moderadas o abun


dantes p o r campo I Ox

Correlaciones con el
anlisis de orina
completo:

Oaridad

Aspecto:

Rectangular, cilindrica, redonda, oval o


cbica con un ncleo excntrico posi
blemente teida de b iliru bina o car
gada de hemosiderina

Causas de erro r en la
identificacin:

Clulas de transicin esfricas


Cilindros granulosos

Informe:

N m ero prom edio p o r 10 campos 40x

Correlaciones con el
anlisis de orina com
pleto:

Esterasa leucocitaria y nitrito


(pielonefritis)
C olor
Clandad
Protena
B ilirubina (hepatitis)
Sangre

Clulas de transicin
Aspecto:

Esfricas, polidricas o con proyec


ciones apendiculares, con ncleo
central

Causas de e rro r en
la identificacin:

Las formas esfricas se asemejan a


las clulas ETR

Informe:

Raras, escasas, moderadas o muchas

Correlaciones con el
anlisis de orina
completo:

Raras, escasas, moderadas o abundantes p o r campo 40x


Claridad: sangre, si hay un proceso
maligno asociado

Cuerpos grasos ovales


Aspecto:

Clulas ETR muy refringentes

Causas de erro r en la
identificacin:

Confirmar con tincin para grasas y


microscopa de luz polarizada

Informe:

N m ero prom edio p o r campo 40x

Correlaciones con el
anlisis de orina com
pleto:

Claridad
Sangre
Protena
Gotas de grasa libre/cilindros grasos

do hay aumento de la cantidad de semen puede regis


trarse una prueba positiva en tira reactiva para protenas.
Los protocolos de laboratorio vanan con respecto a
informar o no la presencia de espermatozoides en una
muestra de orina. Los laboratorios que no informan su
presencia citan la falta de importancia clnica y las posi
bles consecuencias legales. Los laboratorios que apoyan el
informe de espermatozoides citan la posible importancia
clnica y la posibilidad mnima de consecuencias legales.19

Figura 6-38 Espermatozoides (400x).

M oco

El m oco es un material proteico producido por las gln


dulas y las clulas epiteliales del tracto genitourinario
inferior y las clulas ETR. El anlisis inmunolgico m os
tr que la protena de ..w.-Hf
es el constituyeme
principal del moco.
El m oco aparece a la microscopa com o estructuras
similares a filamentos con ndice de refraccin bajo (Fig.
6 -3 9 ); para su observacin se requiere dism inuir la luz de

Figura 6-39 Filamentos de moco (400x).

Captulo 6

la m icroscopa ptica de campo claro. Debe tenerse cui


dado de no confundir grupos de moco con cilindros hia
linos. La diferenciacin puede hacerse al observar el as
pecto irregular de los filamentos de moco. Su presencia
se informa com o raros, escasos, moderados o abundantes
por cam po lOx.
El m oco se observa ms en las muestras de onna de
m ujeres. Su presencia no tiene importancia clnica cuan
do se encuentra en orinas de m ujeres o de varones.

Examen m icroscpico de la orina

103

2. Entrelazado de fibrillas de protenas para formar una


red fibrilar laxa (en este mom ento, los constituyentes
urinarios pueden incluirse en la red)
3. Ms fibrillas de protena se entrelazan para formar una
estructura slida
4. Posible adherencia de constituyentes urinarios a la
matriz slida
5. Separacin de las fibrillas de proteina de las clulas
epiteliales
6. Excrecin de cilindros

C ilin d ro s

Los cilindros son los Unicos elem entos encontrados en el


sedim enio urinario que son exclusivos del rin. Se for
man dentro de la luz de los tbulos contorneados dista
les y los conductos colectores y proporcionan una imagen
m icroscpica de las condiciones dentro de la nefrona. Su
forma es representativa de la luz tubular, con lados para
lelos y extrem os algo redondeados; pueden contener ele
mentos adicionales presentes en el filtrado.
El examen del sedimento para la deteccin de cilindros
se realiza con objetivo de bajo aumento. Cuando se em
plea el mtodo de cubreobjetos, el examen debe realizarse
con bajo aumento a lo largo de los bordes del cubreobje
tos. Es esencial la observacin con luz de baja intensidad,
porque la matriz de los cilindros tiene un ndice de refrac
cin bajo. Similar a muchos otros constituyentes del sedi
mento, la matriz de los cilindros se disuelve con rapidez
en orina alcalina y diluida. Una vez detectados, los cilin
dros deben identificarse de acuerdo con su composicin
mediante piica de gran aumento. Ellos se informan com o
el nmero promedio por 10 campos lOx.

C o m p o s ic i n y fo r m a c i n d e cilin d ros
El constituyente principal de los cilindros es la protena
de Tamm-Horsfall, una glucoprotena segregada por las
clulas ETR de los tbulos contorneados distaes y los con
ductos colectores superiores. Otras protenas presentes en
el filtrado urinario, com o albmina e inmunoglobulinas,
tambin se incorporan en la matriz de los cilindros. En
condiciones normales, la protena de Tamm-Horsfall se
excreta en una proporcin relativamente constante. 1.a
proporcin de excrecin parece aumentar en condiciones
de estrs y actividad fsica, que puede determinar la apa
ricin transitoria de cilindros hialinos. La protena se gelifica con ms rapidez en condiciones de estasis del flujo
urinario, acidez, y presencia de sodio y calcio. Tambin
es importante la cantidad de glucosilacin de la prote
n a s 0 1.a protena de Tamm-Horsfall se encuentra en la
orina normal y en la anormal y, com o se m encion, es un
constituyente principal del m oco. No se detecta por los
mtodos de tira reactiva para protena. Por consiguiente,
el aum ento de proteina en orina asociada con frecuencia
con la presencia de cilindros se debe a enfermedades
renales subyacentes.
Los estudios realizados con m icroscopio electrnico de
barrido proporcionaron un anlisis secuencial de la for
macin de la protena de Tamm-Horslall de la matriz:21
1. Agregacin de la proteina de Tam m -H orsfall en fib rilla s
in d ivid u a le s de protena adheridas a las clulas ETR

Cuando se forman los cilindros, el flujo urinario den


tro del tbulo disminuye a medida que se bloquea la luz.
La deshidratacin acompaante de las fibrillas de protei
na y la tensin interna pueden determinar el aspecto
arrugado y contorneado de los cilindros hialinos.** El an
cho de los cilindros depende del tamao del tbulo en el
que se forman. Los cilindros anchos pueden ser la conse
cuencia de la distensin tubular o, en caso de estasis
extrema de la orina, se pueden desarrollar en los conduc
tos colectores. La form acin de cilindros en la unin del
asa ascendente de Henle y el tbulo contorneado distal
puede producir estructuras con un extrem o adelgazado
stos se conocen com o cilindroides, pero tienen igual
importancia que los cilindros. De hecho, la presencia de
cilindros urinarios se denomina cilindrua. El aspecto de
los cilindros tambin est influenciado por los materiales
presentes en el filtrado en el momento de su formacin y
el lapso de tiempo que permanecen en el tbulo. Cual
quier elem ento presente en el filtrado tubular, com o clu
las. bacterias, granulos, pigmentos y cristales, puede in
cluirse o adherirse a la matriz de los cilindros. Los tipos
de cilindros encontrados en el sedimento representan si
tuaciones clnicas diferentes y se describirn por separa
do en esta seccin.

C ilin d ros h ia lin o s


El cilindro observado con mayor frecuencia es el tipo hia
lino que consiste casi por com pleto de proteina de
Tamm-Horsfall. La presencia de cero a dos cilindros hia
linos por campo lOx se considera nonnal, com o tambin
lo es el aum ento de la cantidad despus de la actividad
fsica extenuante, la deshidratacin, la exposicin al calor
y el estrs em ocional.15 El aum ento patolgico se observa
en la glom erulonefriiis aguda, la pielonefritis, la enferm e
dad renal crnica y la insuficiencia cardaca congestiva.
Los cilindros hialinos aparecen incoloros en los sedi
mentos sin teir y tienen un ndice de refraccin similar
al de la orina; por lo tanto, pueden pasarse por alto con
facilidad si las muestras no se examinan con luz de baja
intensidad (Figs. 6 -4 0 y 6 -4 1 ). La tincin de Sternhemer-Maibin produce un color rosa de los cilindros hiali
nos. Pueden verse m ejor si se emplea m icroscopia de fase
(Figs. 6 -4 2 y 6 -4 3 ).
La morfologa de los cilindros hialinos es vanada; co n
sisten en formas cilindroides con lados paralelos norm a
les y extrem os redondeados y formas arrugadas o contor
neadas que indican el envejecim iento de !a matriz del ci
lindro (Fig. 6-44). Tambin puede observarse la presencia
de una clula o un grnulo ocasional adherido (Fig. 6 -4 5 ).
pero no cam bia la clasificacin de los cilindros.

104

c a p tu lo

Examen m icroscpico de la orina

------------------------------------ -----Resumen sobre otras estructuras

ZM

Bacterias
Aspecto:

Estructuras pequeas, con forma de


cocos o de bacilos

Causas de e rro r en
la identificacin:

Fosfatos y uratos amorfos

Informe:

Escasas, moderadas o abundantes


p o r campo 40x; puede requerirse
la presencia de leucocitos

Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:

Informe:

Raros, escasos, moderados o abun


dantes p o r campo

Correlaciones con el anli


sis de orina completo:

Esterasa leucocitana
Leucocitos

Espermatozoides

pH
N itrito
Esterasa leucocitaria
Leucocitos

Aspecto:

Cabeza oval fusiforme con cola


larga y delgada

Causas de e rro r en la
identificacin:

Ninguna

Informe:

Presentes, basado en el protocolo


del laboratorio

Correlaciones con el anli


sis de orina completo:

Protena

Levaduras
Aspecto:

Estructura pequea ovalada, refnngente con brotes, micelio o ambos

Causas de e rro r en
la identificacin:

Eritrocitos

Informe:

Raras, escasas, moderadas o abundan


tes p o r campo 40x; puede reque
rirse la presencia de leucocitos

Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:

Glucosa
Esterasa leucocitaria
Leucocitos

Moco
Aspecto:

Filamentos aislados o agrupados


con ndice de refraccin bajo

Causas de e rro r en la
identificacin:

Cilindros hialinos

Informe:

Raro, escaso, moderado o abun


dante por campo lOx

Correlaciones con el anli


sis de orina completo:

Ninguno

Trichomonas
Aspecto:

Forma de pera, mvil, flagelada

Causas de e rro r en
la identificacin:

Leucocitos, clulas epiteliales de los


tbulos renales

C ilin dros de e ritro c ito s

Mientras que el hallazgo de eritrocitos en la orina indica


sangrado en un rea dentro del tracto genitourinario, la
presencia de cilindros de eritrocitos es m ucho ms espe
cfica, ya que muestra el sangrado dentro de la nefrona.
Los cilindros de eritrocitos se asocian sobre todo con el

Figura 6-40 Cilindro hialino vistos con bajo aumento con


grnulos amorfos y moco ( I OOx).

dao al glom rulo (glom erulonefritis), que permite el


pasaje de clulas a travs de la membrana glomerular; sin
embargo, cualquier dao a la estructura capilar de la ne
frona puede causar su form acin. Los cilindros de eritro
citos asociados con dao glom erular suelen acompaarse
de proteinuria y eritrocitos dismorfos. Tambin se obser
varon cilindros de eritrocitos en individuos saludables
tras la participacin en deportes de contacto vigorosos.

Figura 6 -4 1 Glmdros hialinos y uratos adheridos a seudocilindros de moco.

Copyrighed ma

c a p tu lo

Examen m icroscpico de la onna

105

Figura 6-42 Cilindro hialino (400x).

Figura 6-43 G lindro hialino observado con microscopia de


fase (4G0x).

Figura 6-44 Cilindro hialino contorneado (4G0x).

Los cilindros de eritrocitos se detectan con facilidad


con bajo aum ento por su color rojo anaranjado. Son ms
frgiles que otros cilindros y pueden existir com o frag
mentos o tener una forma ms irregular com o resultado
do clulas muy compactadas que se adhieren a la matriz
proteica (Figs. 6 -4 6 y 6 -4 7 ). F.l examen con gran aum en
to se realiza para determinar la presencia de una matriz
del cilindro, que permite diferenciar la estructura de un

Figura 6-45 Cilindro hialino que contiene granulos ocasiona


les (400x).

Figura 6-46 Cilindros de eritrocitos. Ntese la presencia de


eritrocitos hipocrmicos y dismorfos libres (400x).

Figura 6-47 G lm dros de eritrocitos teidos con KOVA


observados con microscopa de fase (400x).

grupo de eritrocitos. Debido a las im plicaciones serias del


diagnstico de los cilindros de eritrocitos, tambin debe
confirmarse la presencia real de eritrocitos para evitar el
informe inexacto de cilindros de eritrocitos inexistentes.
Es muy improbable que los cilindros de eritrocitos se pre
senten en ausencia de eritrocitos libres y una prueba
positiva para sangre en tira reactiva (Fig. 6 -4 8 ).

Copyrighted ma

106

c a p t u lo

Examen m icroscpico de la orina

Cuando un cilindro de eritrocitos envejece comienza la


lisis celular y el cilindro adquiere un aspecto ms hom o
gneo, pero retiene el color rojo anaranjado caracterstico
por la hem oglobina liberada (Fig. 6 -4 9 ). Estos cilindros
pueden distinguirse com o cilindros de sangre, que indi
can mayor estasis del flujo de orina. Sin embargo, como

todos los cilindros que contienen sangre tienen la misma


importancia clnica, esto no se considera necesario.
Ambos tipos de cilindros se informan com o el nmero de
cilindros de eritrocitos por campo lOx.
En presencia de hemoglobinuria masiva o mioglobinuria, pueden observarse cilindros homogneos rojo anaran
jado o rojo castao. Los cilindros granulosos, castaos y
de aspecto sucio que representan productos de degrada
cin de la hemoglobina, com o metahemoglobina, tambin
pueden estar presentes (Fig. 6 -5 0 ). A menudo se asocian
con necrosis tubular aguda causada por los efectos txicos
de la hemoglobinuria masiva que puede llevar a la insufi
ciencia renal. Estos cilindros deben estar presentes junto
con otros hallazgos patolgicos, com o clulas ETR y una
prueba positiva para sangre en tira reactiva.
C ilin dros de leu co cito s

Figura 6-49 Cilindro que contiene el pigmento hemoglobina.


Tambin puede compararse con los eritrocitos y las levaduras
(40Qx).

La aparicin de cilindros de leucocitos en la orina signi


fica infeccin o inflam acin dentro de la nefrona. Estos
cilindros se relacionan, casi siempre, con pielonefritis y
son un marcador primario para distinguir pielonefritis
(infeccin urinaria alta) de las infecciones urinarias bajas.
Sin embargo, tambin estn presentes en inflamaciones
no bacterianas, com o nefritis intersticial aguda, y pueden
acompaar a los cilindros de eritrocitos en la glomerulonefritis.
Los cilindros de leucocitos se visualizan con bajo au
mento pero para su identificacin debe usarse el objetivo
de gran aumento. Lo frecuente es que los cilindros de leu
cocitos estn compuestos de neutrfilos; por consiguien
te, pueden adquirir un aspecto similar a los granulosos, y,
a menos que haya habido desintegracin, habr ncleos
multilobulados (Fig. 6 -5 1 ). Puede ser necesaria la tincin
supravital para demostrar los ncleos caractersticos (Fig.
6 -5 2 ); esto es particularmente til para diferenciar los
cilindros de leucocitos de los de ETR. La observacin de
leucocitos libres en el sedim ento tambin es esencial. U s
bacterias estn presentes en casos de pielonefritis, pero
no lo estn en la nefritis intersticial aguda; sin embargo,
en muestras teidas de manera adecuada puede haber
cilindros de eosinfilos.
Los cilindros muy com pactados con leucocitos pueden
tener bordes irregulares. Estas estructuras deben exami-

Figura 6-50 Cilmdro granuloso de color marron y aspecto


sucio (400x).

Figura 6 -5 1 Cilindro de leucocitos en proceso de desmtegracion (400x).

Figura 6-48 Cilindros de eritrocitos desintegrados. Ntese la


presencia de eritrocitos libres para confirmar la identificacin.

ip . V ,
* CO

Copyrighted material

captulo

Examen m icroscpico de la orina

107

o
V

Y*

Figura 6-52 Cilindro de leucocitos teido cor KOVA (400x).

narse para determinar si el cilindro contiene matriz; es


frecuente que los leucocitos formen grupos, y stos no
tienen la misma importancia que los cilindros (Fig. 6-5 3 ).
C ilin dros b a c te ria n o s

Los cilindros bacterianos que contienen bacilos tanto


dentro de la matriz proteica com o unidos a ella se obser
van en la pielonefritis.21 Pueden ser cilindros bacterianos
puros o m ixtos con leucocitos.
La identificacin de los cilindros bacterianos puede ser
difcil, porque los cilindros que estn com pactados con
bacterias pueden parecerse a los cilindros granulosos. Su
presencia debe ser considerada cuando se observan en el
sedimento cilindros de leucocitos y m uchos leucocitos
libres y bacterias. La confirm acin de cilindros bacteria
nos se realiza m ejor mediante la tincin de Gram en el
sedimento seco o del c i tocen tri fugado.
C ilin dros d e clulas e p ite lia le s

Los cilindros que contienen clulas ETR representan la


destruccin tubular avanzada, que produce estasis urina
ria ju n to con la ruptura de los revestimientos tubulares.
Sim ilar a las clulas ETR, estos cilindros se asocian con
toxicidad por metales pesados y sustancias qumicas o

Figura 6-53 Grupo de leucocitos. Ntese la ausencia de


matnz de los cilindros.

Figura 6-54 Cilindro de clulas del epitelio tubular renal


(400x).

inducida por frmacos, infecciones virales y rechazo de


aloinjertos. Tambin acompaan a los cilindros de leuco
citos en casos de pielonefritis.
Com o se describi, las fibrillas de proteina de TammHorsfall que constituye la matriz de los cilindros perma
necen adheridas a las clulas ETR que las producen; por
consiguiente, es esperable la observacin de una clula
tubular ocasional adherida a un cilindro hialino. Cuando
el dao tubular est presente, algunas clulas pueden ser
incorporadas en la matriz del cilindro, pero la mayora es
tar adherida en forma notable a la superficie del cilindro.
Debido a la formacin de cilindros en el tbulo contor
neado distal, las clulas visibles en la matriz del cilindro
son ms pequeas, redondas y ovales (Fig. 6 -5 4 ). Pueden
ser difciles de diferenciar de los leucocitos, en especial si
ya hubo degeneracin. La tincin y el uso de microscopia
de fase pueden ser tiles para realzar el detalle nuclear
necesario para la identificacin (Figs. 6 -5 5 y 6 -5 6 ). Tam
bin pueden adherirse fragmentos de tejido epitelial en la
matriz de los cilindros. Se observan clulas ETR teidas
con bilirrubina en casos de hepatitis (Fig. 6 -5 7 ).
C ilindros grasos

Se observan cilindros grasos ju n to con cuerpos ovales


grasos y gotas de grasa libres en trastornos que causan

Figura 6-55 Cilindro de clulas del epitelio tubular renal tei


do con KOVA (400x).

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