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Examen microscpico
de la orina
OBJETIVOS DEL APRENDIZAJE
Al fin a liz a r es te captu lo, el lecto r p o d r :
Enumerar los parmetros fsicos y qumicos
incluidos en la evaluacin macroscpica de la
orina y establecer su importancia.
2
11
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15
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17
18
7
8
PA LA BRA S CLA V E
cribado de sustancias qumicas
cilindros
m icroscopia de fluorescencia
microscopia de polarizacin
ciindruria
m icroscopia de interferencia-
contraste
resolucin
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pyrighted material
82
c a p itu lo 6
E v a lu a c i n m a c ro s c p ic a
C u a d r o 6 -1
C orrelaciones de la
evaluacin m acroscpica
Prueba
Importancia
Color
Sangre
Claridad
Hematuria versus
hemoglobinuria/mioglobinuria
Confirma causa patolgica o no
patolgica que provoca turhidez
Sangre
Eritrocitos/cilindros de eritrocitos
Protenas
Cilindros/clulas
Nitrito
Bacterias/leucocitos
Esterasa leucocitaria
Leucocitos/cilindros de
leucocitos/bacterias
Glucosa
Levaduras
P re p a ra c i n y e x a m e n
d e l s e d im e n to d e o r in a
El anlisis m icroscpico est sujeto a distintas variacio
nes del procedimiento, com o los m todos para la prepa
racin del sedim ento, el volumen de sedimento realmen
te examinado, los mtodos y los equipos utilizados para
la visualizacin y la manera en que se informan los resul
tados. Addis desarroll el primer procedim iento para es
tandarizar la cuantificacin de los elem entos formes en el
anlisis microscpico de la orina en 1926.1:1 recuento de
Addis, com o se denomina, us un hemocitmetro para
contar el nmero de eritrocitos, leucocitos, cilindros y c
lulas epiteliales presentes en una muestra de 12 horas.
Los valores normales tienen una gama amplia y son de 0 a
5 0 0 0 0 0 eritrocitos, de 0 a 1 8 0 0 0 0 0 leucocitos y clulas
epiteliales, y de 0 a 5 0 0 0 cilindros hialinos.4 El recuento
de Addis, que se us sobre todo para monitorizar la evo
lucin de casos diagnosticados de enfermedad renal, se ha
reemplazado por los varios sistemas comerciales estandanzados para la preparacin, el examen y la cuantificacin
de elementos formes en muestras sin tiempo establecido.
S is te m a s c o m e rc ia le s
c a p t u lo 6
83
V olum en de la m u estra
Se centrifuga una cantidad estndar de orina, por lo gene
ral entre 10 v 15 mL, en un tubo cnico. Esto proporcio
na un volumen adecuado para obtener una muestra re
presentativa de los elem entos presentes en la muestra.
Con frecuencia se utiliza un volumen de 12 m i. porque
en esa cantidad se sumergen con facilidad las tiras reacti
vas de parmetros mltiples y los tubos de centrfuga
tapados a menudo estn calibrados a este volumen.
Si no es posible obtener una muestra de 12 mL. como
sucede con los pacientes peditricos, el volumen de la
muestra usado debe anotarse en el formulario del informe.
Esto le permite al mdico corregir los resultados, si corres
ponde. Algunos laboratorios prefieren hacer esta correc
cin antes de realizar el informe. Por ejem plo, si se centri
fugan 6 tul., de orina, los resultados se multiplican por 2.
C entrifugacin
La velocidad de la centrfuga y el tiempo en los que se
centrifugan las muestras deben ser uniformes. La centrifu
gacin durante 5 m inutos a una fuerza centrifuga relativa
(RCF) de 4 0 0 produce una cantidad ptim a de sedimen
to con la menor posibilidad de daar los elem entos. Para
corregir las diferencias en el dimetro de los cabezales de
la centrfuga, se usa la RCF en lugar de las revoluciones
por m inuto (RPM). El valor de RPM mostrado en el tacmetro de la centrifuga puede convertirse a RCF median
te el em pleo de nomogramas disponibles en m uchos ma
nuales del laboratorio o por la frmula:
RCF = 1,1 IB x l - ' x radio en centm etros x RPM2
La calibracin de la centrfuga debe realizarse en forma
sistemtica. El uso del m ecanism o de frenado para dis
84
c a p t u lo 6
C orrelaci n de resultados
Para asegurar la exactitud del informe deben correlacio
narse los resultados m icroscpicos con los resultados de
las caractersticas fsicas y qumicas. Las muestras en las
que los resultados no se correlacionan deben ser proba
das de nuevo para establecer errores tcnicos y adm inis
trativos. En el cuadro 6 -2 se observan algunas de las
correlaciones ms com unes en el anlisis de orina; sin
embargo, deben considerarse la cantidad de elementos
formes o la de sustancias qumicas, com o tambin la
posibilidad de interferencia con las pruebas qum icas y el
tiempo transcurrido desde la obtencin de la muestra.
T c n ic a s d e e x a m e n d e l s e d im e n to
naterial
c a p t u lo 6
liw
Elementos
Caractersticas Caractersticas
microscpicos fsicas
qumicas
Excepciones
Eritrocitos
Turbidez
+ Sangre
Color rojo
Leucocitos
Nmero
Hemolisis
Turbidez
+ Protena
Nmero
+ Nitrito
Lisis
+ Leucocitos
Clulas epite
liales
Nmero
Turbidez
Cilindros
Bacterias
Turbidez
+ Protena
Nmero
pH
Nmero y
tipo
+ Nitrito
+ Leucocitos
Cristales
Turbidez
PH
Color
85
Nmero y
tipo
El pasaje de lpidos (triglicridos, grasas neutras y colesterol) a travs de la membrana glomerular da por resulta
do la aparicin de gotas de grasa libres, y clulas y cilin
dros que contienen lpidos en el sedimento urinario. Las
tinciones para lpidos, Red Oil O y Sudn III, y la microscopia de polarizacin pueden usarse para confirm ar la
presencia de estos elem entos. Los triglicridos y las gra
sas neutras se tien de rojo anaranjado en presencia del
colorante, mientras que el colesterol no se tie, pero pro
duce polarizacin. Los tres lpidos suelen presentarse en
forma simultnea en el sedim ento, por lo tanto, se puede
usar cualquiera de las tinciones o la polarizacin para su
confirm acin.
T in c i n d e G r a m
i
Tincin
Accin
Funcin
Sternheimer-Malbin
Azul de toluidina
cido actico al 2%
Gram
Hansel
Azul de Prusia
86
c a p t u lo 6
Cuadro 6-4
Elementos en el
sedimento urinario
Eritrocitos
Neutro-rosa a violeta
Comentarios
Ncleos
Citoplasma
Grnulos violetas
Tonos claros de
azul-violeta
Azul-violeta
Lila
Clulas epiteliales
escamosas
Lila o azul
Inclusiones)' matriz
Cilindros hialinos
Cilindros creos
Rosa a rojo-anaranjado
Cilindros de sangre
(hemoglobina)
Anaranjado-rojo
Bacterias
Mvil: no se tie
Azul claro-verde
Moco
Fondo
De Product Profile: Sedi-Stain. Clay Adams. Division of Bccton Dickinson 6r Company. Parsippany, NJ. 1 9 7 4 , con autorizacin.
Copyrighted mate
c a p tu lo 6
Cuadro 6-5
Microscopa
El examen microscpico de la orina se realiza mejor
cuando el laboratorista conoce los tipos de microscopios
disponible, sus caractersticas principales y el uso apro
piado y mantenimiento de estos microscopios.
La microscopia ptica de campo claro es el tipo ms
com n de microscopia realizada en el laboratorio de an
lisis de orina. Otros tipos de microscopia que son tiles
para exam inar el sedimento de orina son: contraste de
fase, polarizacin, campo oscuro, fluorescencia e interfe
rencia- contraste (Cuadro 6 -5 ). El tipo de microscopio
usado depende del tipo de muestra, el ndice de refrac
cin del objeto y la capacidad de mostrar la imagen de
clulas viables sin teir. Todos los microscopios estn
diseados para aumentar el tamao de objetos pequeos
en un grado suficiente para poder analizar los detalles de
su estructura. Bsicamente, lo hacen mediante el empleo
de una variedad de lentes y fuentes de luz com o se des
cribe en la seccin siguiente.
M ic r o s c o p io
Tcnicas microscpicas
p a ra el anlisis d e o rin a
Tcnica
Funcin
Microscopia ptica
de campo claro
Microscopia de con
traste de fase
Microscopia de
polarizacin
Microscopia de
campo oscuro
Ayuda en la identificacin de
Microscopia de
fluorescencia
Microscopia de
interferenaa-contraste
87
Trcponema pallidum
PROCEDIMIENTO
88
c a p t u lo 6
Control de la
distancia interpupilar
Cuerpo (brazo)
Tornillo de centrado
del condensador
Ocular
Revlver
Objetivo
Tornillo
de enfoque
micromtrico
Tornillo
de enfoque
macromtrico
Perillas de ajuste de
la platina mecnica
Anillo de control de
apertura del diafragma
del condensador
Condensador
Tornillo de centrado
Anillo de control del
diafragma de campo
Restato
c a p t u lo 6
89
Iluminacin de Khler
T ip o s d e m ic ro s c o p ia
de visin
de visin
%
V
Zona
iluminada1
Campo
de visin
Zona
iluminada
M ic r o s c o p ia p tic a d e c a m p o claro
90
c a p t u lo 6
Anillo del
condensador
Muestra
birrefringente
Fuente
de luz
Onda
rolada
Filtro
Onda separada
Filtro polanzador
polarizador 90u por la muestra con orientacin a 90:
Copyrighted mate
ria l
c a p t u lo 6
Analizador
Rayos
recombinados
91
Imagen
tridimensional
Prisma de
Wollaston superior
Plano focal posterior
del objetivo
Objetivo
Muestra
Condensador
Divisin
de los rayos
Plano focal
del condensador
Prisma de
Wollaston inferior
Polarizador
92
c a p t u lo 6
E ritrocitos
campo oscuro
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i
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i i
i i
i i
v
Rayos de luz
C o n s titu y e n te s d e l s e d im e n to
El sedimento de orina normal puede contener una varie
dad de elem entos formes. Incluso la aparicin de canti
dades pequeas de los que suelen ser importantes en
patologa, com o eritrocitos, leucocitos y cilindros , pueden
ser normales. Asimismo, muchas veces la orina no co n
tiene nada ms que alguna clula epitelial rara o filamen
tos de m oco. Los estudiantes a menudo tienen dificultad
en adaptarse a esto, porque en el m bito de las clases
suele hacerse hincapi en los sedim entos que contienen
Ocular
Filtro de barrera
m u
Objetivo
Muestra
Condensador
Lmpara
de mercurio
Ondas de
luz incidentes
Colector
Filtro de excitacin
Espejo deflector
Luz ultravioleta
e n Luz visible
y righted material
c a p t u lo 6
93
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Figura 6 - 10 Levaduras. La presencia de formas brotantes
ayuda a diferenciarlas de los eritrocitos (400x).
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Copyright
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c a p tu lo 6
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Im p o r t a n c i a clnica
La presencia de eritrocitos en la orina se asocia con el dano de la membrana glomerular o la lesin vascular dentro
del aparato genitourinario. El nmero de clulas presen
tes indica la magnitud del dao o de la lesin. Las histo
rias clnicas de los pacientes a menudo mencionan la pre
sencia de hematuria macroscpica versus microscpica.
Cuando hay hematuria macroscpica, la orina parece
turbia con color rojo a marrn. Los anlisis m icroscpi
cos pueden informarse como cantidad de eritrocitos
mayor de 100 por campo 4 0 x o segn lo especificado en
el protocolo del laboratorio. La hematuria m acroscpica
se asocia con frecuencia con dao glomerular avanzado,
pero tambin se observa cuando hay dao de la integri
dad vascular de las vas urinarias causado por traumatis
m o, infeccin aguda o inflamacin y trastornos de la coa
gulacin.
La observacin de hematuria microscpica puede ser
fundamental para el diagnstico tem prano de trastornos
glomerulares y procesos malignos del tracto urinario y
para confirmar la presencia de clculos renales. La pre
sencia de eritrocitos adems de cilindros hialinos, granu
losos y de eritrocitos puede observarse despus de la acti
Causas de error en
la identificacin:
Clulas de levadura
Gotas de grasa
Burbujas de aire
Informe:
Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:
Color
Reaccin con tira reactiva para sangre
0
O
I
O
Figura 6-13 Errtroctos dismorfos (400x).
Copyrighted mater
c a p t u lo 6
95
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C lu las m o n o n u c le a re s
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Eosinfilos
Los linfocitos, los m onocitos, los macrfagos y los histiocitos pueden estar presentes en nmeros pequeos y, por
lo general, no pueden identificarse en el anlisis m icros
cpico de preparaciones en fresco de la orina. Dado que
los linfocitos son los leucocitos ms pequeos, pueden
parecerse a los eritrocitos. Es posible observar cantidades
mayores de estas clulas en las fases tempranas del recha
zo del trasplante renal. Los m onocitos, los macrfagos y
los histiocitos son clulas grandes y suelen contener
vacuolas o inclusiones. Las muestras que contienen can
tidad aumentada de clulas m ononucleares que no pue
den identificarse com o clulas epiteliales deben enviarse
para la com probacin por citodiagnstico.
El inters principal en la identificacin de los leucoci
tos es la diferenciacin de las clulas m ononucleares y los
neutrfilos en vas de desintegracin de las clulas epite
liales de los tbulos renales (ETR). Estas ltimas suelen
ser ms grandes que los leucocitos y con forma ms
polidrica, con un ncleo localizado de m odo excntrico.
Cuando los leucocitos estn en movimiento ameboide
puede ser difcil distinguirlos de las clulas epiteliales
debido a su forma irregular. Si es necesario, puede usar
se la tincin supravital o el agregado de cido actico para
realzar el detalle nuclear (Fig. 6 -1 8 ).
Habitualmente, en la orina normal se encuentran
menos de cinco leucocitos por campo 4 0 x ; sin embargo,
nmeros ms altos pueden estar presentes en la orina de
las mujeres. Aunque los leucocitos, com o los eritrocitos,
pueden ingresar en la orina a travs del traumatismo glo
merular o capilar y tambin son capaces de migrar por
movimientos ameboides a travs de los tejidos a los sitios
96
c a p tu lo
Clulas epiteliales
No es raro encontrar clulas epiteliales en la orina, por
que ellas provienen de los revestimientos del aparato ge
nitourinario. A m enos que estn presentes en cantidades
grandes o con formas anormales, representan el despren
dim iento normal de clulas viejas. En la orina se obser
van tres tipos de clulas epiteliales: escamosas, de transi
cin (uroteliales) y de los tbulos renales (Fig. 6 -1 9 ). Se
clasifican segn su sitio de origen dentro del sistema
genitourinario.
v ;
Correlaciones con
el anlisis de
orina completo:
Esterasa de leucocitos
N itrito
Densidad
pH
Copyrighed mafc
c a p t u lo 6
97
v
c.
% vV.w;
la
Figura 6 - 2 1 Sedimento teido con fenazopiridina que mustra clulas epiteliales escamosas y cristales de fenazopiridina
formados tras la refrigeracin (400x).
98
c a p t u lo
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Jf
Copyrighted material
c a p tu lo
99
Figura 6-30 Clulas del epitelio de los tbulos renales cuboides del conducto colector (400x).
Im portancia clnica
100
c a p tu lo
C u e rp o s grasos ovales
Bacterias
Copyrighted material
c a p tu lo
Levaduras
Las levaduras aparecen en la orina com o estructuras ova
les pequeas, refringentes, que pueden contener un brote
o no. En las infecciones intensas pueden aparecer ramifi
cadas, es decir, la forma micelial (Fig. 6 -3 7 ). Las levadu
ras se informan com o raras, escasas, moderadas o abun
dantes por campo 4 0 x . La diferenciacin entre levaduras
y eritrocitos a veces puede ser difcil. Com o se muestra en
la figura 6 -1 0 , es til la observacin cuidadosa de las
levaduras brotantes.
Las levaduras, sobre todo Candida albicans , se observan
en la orina de pacientes diabticos, inm unocom prom etidos y m ujeres con candidiasis vaginal. La orina acida que
contiene glucosa de los pacientes con diabetes provee un
medio ideal para el crecim iento de las levaduras. Como
sucede con las bacterias, una cantidad pequea de leva
duras que ingresa en una muestra com o contaminante se
multiplica con rapidez si la muestra no se exam ina en
forma inmediata. Una infeccin verdadera por levaduras
debe acompaarse de la presencia de leucocitos.
101
E sperm atozoides
Los espermatozoides se identifican con facilidad en el
sedimento de orina por sus cabezas ovaladas, ligeramen
te adelgazadas, y flagelos largos, com o colas (Fig. 6 -3 8 ).
La orina es txica para los espermatozoides; por consi
guiente, raras veces muestran movilidad com o la obser
vada al examinar una muestra de semen.
En ocasiones, se encuentran espermatozoides en la
orina de hombres y m ujeres despus de relaciones sexua
les, masturbacin o emisin nocturna. Raras veces son de
importancia clnica, salvo en los casos de esterilidad mas
culina o eyaculacin retrgrada en la que el esperma se
expele en la vejiga en lugar de hacerlo en la uretra. Cuan-
Parsitos
El parsito hallado con mayor frecuencia en la orina es
Trichomonas vaginalis. El trofozoto de Trichomonas pre
senta forma de pera con flagelo y membrana ondulante.
Se identifica con facilidad en preparaciones en fresco del
sedimento de orina por su movimiento rpido en el cam
po microscpico. Su presencia se informa com o raros, es
casos, moderados o abundantes por campo 4 0 x .
Cuando no se mueve, Trichomonas es ms difcil de
identificar y puede asemejarse a leucocitos, clulas de tran
sicin o ETR. El uso de microscopa de fase puede realzar
la visualizacin del flagelo o de la membrana ondulante.
T. vaginalis es un patgeno transmitido por contacto
sexual asociado sobre todo con inflamacin vaginal. La
-r
4m
94fi
Pv:
fio
\y
, y -4 '
v rn T
102
c a p t u lo 6
Clulas ETR
Clulas escamosas
Aspecto:
Causas de e rro r en
la identificacin:
Informe:
Correlaciones con el
anlisis de orina
completo:
Oaridad
Aspecto:
Causas de erro r en la
identificacin:
Informe:
Correlaciones con el
anlisis de orina com
pleto:
Clulas de transicin
Aspecto:
Causas de e rro r en
la identificacin:
Informe:
Correlaciones con el
anlisis de orina
completo:
Causas de erro r en la
identificacin:
Informe:
Correlaciones con el
anlisis de orina com
pleto:
Claridad
Sangre
Protena
Gotas de grasa libre/cilindros grasos
M oco
Captulo 6
103
C ilin d ro s
C o m p o s ic i n y fo r m a c i n d e cilin d ros
El constituyente principal de los cilindros es la protena
de Tamm-Horsfall, una glucoprotena segregada por las
clulas ETR de los tbulos contorneados distaes y los con
ductos colectores superiores. Otras protenas presentes en
el filtrado urinario, com o albmina e inmunoglobulinas,
tambin se incorporan en la matriz de los cilindros. En
condiciones normales, la protena de Tamm-Horsfall se
excreta en una proporcin relativamente constante. 1.a
proporcin de excrecin parece aumentar en condiciones
de estrs y actividad fsica, que puede determinar la apa
ricin transitoria de cilindros hialinos. La protena se gelifica con ms rapidez en condiciones de estasis del flujo
urinario, acidez, y presencia de sodio y calcio. Tambin
es importante la cantidad de glucosilacin de la prote
n a s 0 1.a protena de Tamm-Horsfall se encuentra en la
orina normal y en la anormal y, com o se m encion, es un
constituyente principal del m oco. No se detecta por los
mtodos de tira reactiva para protena. Por consiguiente,
el aum ento de proteina en orina asociada con frecuencia
con la presencia de cilindros se debe a enfermedades
renales subyacentes.
Los estudios realizados con m icroscopio electrnico de
barrido proporcionaron un anlisis secuencial de la for
macin de la protena de Tamm-Horslall de la matriz:21
1. Agregacin de la proteina de Tam m -H orsfall en fib rilla s
in d ivid u a le s de protena adheridas a las clulas ETR
104
c a p tu lo
ZM
Bacterias
Aspecto:
Causas de e rro r en
la identificacin:
Informe:
Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:
Informe:
Esterasa leucocitana
Leucocitos
Espermatozoides
pH
N itrito
Esterasa leucocitaria
Leucocitos
Aspecto:
Causas de e rro r en la
identificacin:
Ninguna
Informe:
Protena
Levaduras
Aspecto:
Causas de e rro r en
la identificacin:
Eritrocitos
Informe:
Correlaciones con
el anlisis de orina
completo:
Glucosa
Esterasa leucocitaria
Leucocitos
Moco
Aspecto:
Causas de e rro r en la
identificacin:
Cilindros hialinos
Informe:
Ninguno
Trichomonas
Aspecto:
Causas de e rro r en
la identificacin:
Copyrighed ma
c a p tu lo
105
Copyrighted ma
106
c a p t u lo
ip . V ,
* CO
Copyrighted material
captulo
107
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Y*
Copyrighted material