Juan B. Lopez O.

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MANUAL DE GENETICA

PRACTICA 3
ELABORACIN DE UN CARIOTIPO

OBJETIVOS
Elaborar un cariotipo a partir de un registro fotogrfico de un determinado paciente el cual
puede presentar una anormalidad gentica evidente mediante el anlisis cromosmico.
Definir un arreglo cromosmico sistemtico (cariotipo) para la mitosis con bandas R a
analizar, respecto al tamao relativo de cada cromosoma con relacin a la longitud
genmica total haploide femenina.
Realizar una representacin diagramtica de cada uno de los cromosomas (ideograma) del
cariotipo con bandas.
Identificar la problemtica presentada por el paciente y sus repercusiones.

METODOLOGA
1.

Conteo cromosmico

El primer paso en el anlisis es determinar el nmero cromosmico del organismo

mediante el recuento de un nmero mnimo de mitosis, que est alrededor de 50, que
permitir descartar la posible variacin en el nmero cromosmico por perdidas de
cromosomas debido a problemas tcnicos, y se descartan las posibles asociaciones entre
cromosomas acrocntrico observados frecuentemente entre ellos. Para determinar el
nmero cromosmico de una especie, se requiere adems, evaluar un nmero
representativo de individuos de ambos sexos de esa especie, para descartar posibles
variaciones dentro de organismos considerados de la misma especie o detectar posibles
polimorfismos poblacionales. El nmero de organismos a analizar depende de la
disponibilidad de individuos para el estudio, an cuando idealmente se recomienda un
tamao muestral siguiendo los criterios estadsticos o dependiendo de los objetivos trazados
en la investigacin. Posteriormente se identifica una mitosis con un nmero correcto de
cromosomas es fotografiada y asignada a un estudiante para su posterior anlisis.
2.

Localizacin del centrmero

Los cromosomas metafsicos se encuentran en estructuras en forma de dadas (dos

cromtidas) unidas por el centrmero identificado por ser un estrechamiento en el
cromosoma. La identificacin del centrmero permite determinar los dos brazos que posee
un cromosoma: p o brazo corto y q o brazo largo.

Versin preliminar

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3.

Clculo del ndice centrom rico (IC)

Se obtiene relacionando la longitud del brazo corto (Lp) con la longitud total de cada
cromosoma (LT,i) y se expresa en porcentaje de acuerdo a la siguiente relacin:

4.

Clculo del ndice braquial. (IB)

Se obtiene mediante la relacin de la longitud del brazo corto (Lp) respecto al brazo largo
(Lq) y, mediante la siguiente relacin:

5.

Clasificacin del cromosoma por ubicacin del centrmero

Una vez determinados IC e IB se procede a la clasificacin de los cromosomas en

metacntricos, submetacntricos, acrocntrico y subtelocntrico mediante el siguiente
criterio:
Tabla 1.
Clasificacin
cromosmica
morfolgica

IC
50-46
45-26
25-25
<15
6.

IB
1-17
1.7-3
3-7
>7

Clasificacin
Metacntrico
Submetacntricos
Acrocntrico
subtelocntrico

Apareamiento de cromosomas homlogos

Calculados IC y/o IB y asocindose con la longitud de cada cromosoma junto con la

morfologa del bandeo se pueden organizar los cromosomas homlogos. Una correlacin
que puede ayudar en el apareamiento de cromosomas homlogos y ms aun en el caso de
cromosomas con coloracin homognea es el ndice de homologa.

Este valor depende del error de la medida y la presencia o no de polimorfismos en los

cromosomas pero junto con el bandeo, pueden ayudar en el reconocimiento de los
cromosomas homlogos.
Versin preliminar

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7.

Longitud relativa (Lr)

Para proponer el cariotipo es necesario establecer un orden dentro de los cromosomas, lo

cual se logra calculando la longitud relativa de cada par homlogo, expresado en porcentaje
lo cual se obtiene al dividir el tamao del cromosoma entre la longitud total del grupo
haploide femenino (lthf), para el caso de un organismo con genoma 2n se tiene:

Para el caso de tratarse de una hembra con cromosomas sexuales XX la anterior correlacin
se aplica, por el contrario para el caso de tratarse de un macho XY, lthf se halla restando la
longitud del cromosoma Y y sumando dos veces el cromosoma X. Para el caso de trisomias
y aneuploidias somticas o sexuales se re arregla el genoma a condiciones de normalidad,
para el caso de la trisomia se elimina el cromosoma causante de la trisomia. Para el caso de
aneuploidia se multiplica por dos el cromosoma unitario en ausencia de su homologo.
Posteriormente el clculo de la longitud relativa de cada cromosoma se obtiene de la
siguiente manera

8.

Esquema general de clasificacin cromosmica

Los cromosomas de una especie cualquiera pueden ser organizados en grupos. En el caso
del genoma humano se han clasificados en los siguientes grupos (tabla 2).
Tabla
2.
Esquema
general
de
clasificacin
cromosmica

Grupo A
Grupo B
Grupo C
Grupo D
Grupo E

Grandes cromosomas
metacntricos o
submetacntricos
Cromosomas submetacntricos
Cromosomas submetacntricos
de tamao medio
Cromosomas subtelocntricos
de tamao medio con satlites
cromosomas submetacntricos

Versin preliminar

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Grupo F
Grupo G

relativamente cortos
Cromosomas metacntricos
relativamente cortos
Cromosomas subtelocntricos
cortos con satlites

El estudiante podr contar adems con ejemplos de cariotipos de trabajos anteriores como
una gua para el desarrollo del cariotipo.
9.

Idiograma

Se construir un patrn de bandas manteniendo la proporcin de longitud de cada

cromosoma en el genoma, bosquejando la problemtica cromosmica y posibles
polimorfismos entre otros. Un ideograma para el caso de cromosomas humanos segn
diferentes patrones de bandeos se muestra en la figura 1.

Figura 1. Ideograma con bandas del set haploide humano (ICSN 1978)

BIBLIOGRAFA
Arrighi, F.E., Hsu, T.C. 1971. Localization of heterochromatin in hu man chromosomes.
Cytogenetic. 10:81-83.
Caspersson, T., Zech, L., Johansson, C. 1970. Differential binding of alkylating
flurocromes in human chromosomes. Exp. Cell Res. 60:315-319.

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Commite on Human Citogenetic Nomenclature. 1978. An internatio-nal system for
human cytogenetic nomenclature (1978) ISCN (1978). Cytogenet. Cell Genet.
21:309-404.
Dutrillaux, B. y Leujene, J. 1971. Sur une nouvelle technique d'analyse du caryotype
humain. C.R. Acad. Sci. Pars. 273:2638-2640.
Goodpasture, C. y Bloorn, S.E. 1975. Visualization of nucleolar orga-nizer regions in
mammalian chromosomes using silver staining. Chro-mosoma 53:37-50.
Levan, A., Fredga, K. y Sandbersg, A. 1964. Nomenclature for cen-tromeric position
chromosomes. Hereditas 52:201-220.
Matsui, S. I. y Sasaki, M. 1973. Differential staining of Nucleolus Orga-nizer in
mammalian chromosomes. Nature 246:148-150.
Moorhead, P.S. Nowell, P.C., Melman, W.J. y Battips, D.M. 1960. Chromosome
preparations of leucocytes cultured from human periphe-rral blood. Exp. Cell. Res.
20:613-616.
Nowell, P.C. 1960. Phytohemaglutinin: An initiator of mitosis in cultures of normal
human leukocytes. Cncer Res. 20:462-466.
Seabright, M. 1971. A rapid banding technique for human chromosomes. The Lancet.
Octubre, 971-972.

Summer A.T. 1972. A simple technique for demonstrating centromeric heterocromatin.

Exp Cell. Res. 75:304-306.
Tjio, J.H. &: Levan, A. 1956. The chromosome number of man. Heredi-tas. 42:16.
Seabright, M. 1971. A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet 2:971972.
Beiguelman, B. 1982. Citogenca humana. El Guanabara. Ro de Ja neiro.
Frota Pessua, O., Guiomaraes, P. y Otto, P.A. 1978. Gentica huma na. 3 ed. Francisco
Alves. Ro de Janeiro.
Popescu, P., Dutrillaux, B. & Hayes, H. (eds.) 2000. Techniques in Animal
Cytogenetics. Heildelberg. New York: Springer-Verlag-INRA editions.

Versin preliminar

Juan B. Lopez O. 3
MANUAL DE GENETICA
Rooney, D.E. y Czepokowski, B.H. 1986. Human Cytogenetics. A Prac-tical Approach.
IRL Press. Oxford. USA.
Saez, F. y Cardozo, H. 1973. Monografas cientficas biologa. Citogen-tica bsica y
biologa de los cromosomas. OEA, No. 23.
Swanson, P.C., Merz, T. y Young, W. 1981. Cytogenetics: The Chro mosome in
Divisin, Inherence and Evolution. Prentice Hall. London.
Therman, E. y Millard, S. 1993. Human Chromosomes: Structure, Be-havior and Effects.
3 ed. Springer-Verlag. New York. USA.
Thomson, J.S. y Thomson S.L. 1975. Gentica Mdica. Salvat. Barce lona.
Verna, R.S. y Babu, A. 1989. Human Chromosomes: Manual of Basic Techniques.
Pergamon Press. New York. USA.

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