Introduccin a la Ingeniera de Procesos

MP
Cobre-roca
Uva

Op.1
Op.3

Op.n

Ctodo
Vino

Op.2

Tres etapas en la Ingeniera de Procesos

Anlisis: ciencias bsicas, ciencias de la ingeniera
Sntesis: tecnologa
Diseo: todo armnico que logra el objetivo final: MP P

Introduccin a la Ingeniera de Procesos

Insumos
Servicios, energa
P

MP
Cobre-roca
Uva

Op.1
Op.3

Op.n

Ctodo
Vino

Op.2

Residuos:
Lquidos
Slidos
Gaseosos

Productos
secundarios

Introduccin a la Ingeniera de Procesos

Insumos
Servicios, energa
MP
Cobre-roca
Uva

Op.1

Op.3

Op.n

P
Ctodo
Vino

Op.2

Productos secundarios

Residuos:
Lquidos
Slidos
Gaseosos

Insumos
Servicios, energa
MP
Residuo

P
Residuo estable
Op.1

Op.n

Op.3

Op.2

Residuos:
Lquidos
Slidos
Gaseosos

Productos secundarios

Bioprocesos
Industria
FarmaceuticaPenicilina
Bioenergaetanol
Alimentosvino
Medio ambientaltratamiento biologico de aguas residuales
Tres etapas en la Ingeniera de Procesos
Anlisis: ciencias bsicas (Biologa celular), ciencias de la
ingeniera (cintica, balance de materia)
Sntesis: tecnologa
Diseo: todo armnico que logra el objetivo final: MP P

Biologa celular
Celula
Microorganismo (bacteria, levadura)
Tejido (Vegetal, animal)
Estructura/Funcionamiento
Macromoleculas
Acidos nucleotidos (ADN)
Proteinas (Aminoacidos)ENZIMAS

Enzima: Macromolcula de
naturaleza proteica que cataliza
reacciones de transformacin.
Aumenta significativamente la
velocidad a la que se verifica la
reaccin, haciendo esto a
temperaturas moderadas.

Enzima

Energa de Activacin, Ea

Aumento de velocidad de reaccin

Combustion del Metano

Energia de Activacion Ea

Como crees que

sera el grafico
de la derecha si
el sistema fuera
calentado

Reaccin sin enzima

t del enlace
Reaccin

25C

100C

Hidrlisis de protenas
Hidrlisis de polisacridos
Hidrlisis de RNA
Hidrlisis de DNA

400 aos
4.7x106 aos
4 aos
140000 aos

5.5 semanas
160 aos
9 das
22 aos

Enzimas y Ea

Accin Enzimtica: Energa de Activacin Ea

Ea sin enzima
Ea con enzima

G0

Microambiente acido
Orientacin
Participacin directa
Debilitamiento de enlaces

La Ea de la hidrlisis de la urea baja de 30 a 11

kcal/mol con la accin de las enzimas, acelerando
la reaccin 1014 x
El aumento de temperatura necesario para
producir la reaccin no catalizada seria de 529C

Logarithmic scale of kcat and knon values for some representative reactions at 25 C. The length of each
vertical bar represents the rate enhancement by ADC=arginine decarboxylase; ODC=orotidine 5-phosphate
decarboxylase; STN = staphylococcal nuclease;GLU =sweet potato -amylase; FUM =fumarase; MAN=
mandelate racemase; PEP =carboxypeptidase B; CDA =E. coli cytidine deaminase; KSI=ketosteroid
isomerase; CMU =chorismate mutase; CAN= carbonic anhydrase.
Fuente: Wolfenden R. and Snider M.J. 2001. The depth of chemical time and the power of enzymes as catalysts. Acc. Chem. Res. 2001, 34,
938-945.

Bio-Proceso
E
Fe

Fs

Fe Se Fs Ss rV =

d(SV )
dt

Fe Se = Fs Ss = 0

S
rV = S

dV
dS
+V
dt
dt

dS
=r
dt

Para una enzima, la velocidad en el

tiempo cae debido a:
Disminuye la concentracin de reactivo
(sustrato)
La reaccin inversa se hace importante al
aumentar la [P]
El producto puede inhibir a la enzima
Cambios de pH o temperatura pueden
modificar a la enzima en el curso de la
reaccin
Al disminuir la [S] puede disminuir la
saturacin de la enzima

Cintica enzimtica
Hexosa
Lysosima

k1
E + S

ES
k-1

k2

E + P
X
a tiempo corto [P]
es muy pequea

Ley de accin msica

La ley de accin msica fue enunciada por primera vez por Waage and
Guldberg en 1864, y establece que la velocidad de una reaccin qumica
es proporcional a la cantidad de sustancias reaccionando.
Especficamente, el cambio de la cantidad de producto es proporcional al
producto de las concentraciones (actividades) de los reactantes. Por
ejemplo:

Hipotesis
Equilibrio rpido
Estado estacionario
Michaelis-Menten o de equilibrio rpido
Briggs-Haldane o de estado estacionario

k1
E + S

ES
k-1

k2

E + P

Michaelis-Menten o de equilibrio rpido

k1
[E] + [S]

[ES]

k2

[E] + [P]

k-1

d [ P]
v=
= k 2 [ ES ]
dt
d[ES]
= k1[E][S] k1[ES] k 2 [ES]
dt

[ E ] = [ E0 ] [ ES ]

Michaelis-Menten o de equilibrio rpido

k1
E + S

ES

k2

E + P

k-1

k
[ E ][S ]
Km = 1 =
k1
[ ES ]

[ E0 ][S ]
[ ES ] =
Km +[ S ]

d [ P]
v=
= k 2 [ ES ]
dt

v=

[ E ] = [ E0 ] [ ES ]

k 2 [ E0 ][S ]
K m +[ S ]

v max = k 2 [ E0 ]

[ ES ] =

[ E 0 ][S ]
k 1

k1

+ [S ]

v max [ S ]
v=
Km +[ S ]

Briggs-Haldane o quasi estado estacionario

time

Briggs-Haldane o quasi estado estacionario

k1
[E] + [S]

[ES]
k-1

d[S ]

= k2 [ ES ]
dt
d[ES]
= k1[E][S] k1[ES] k 2 [ES]
dt

[ E ] = [ E0 ] [ ES ]

[ S ](0) = [ S 0 ]
[ ES ](0) = 0

Condicin inicial

k2

[E] + [P]

Briggs-Haldane o quasi estado estacionario

d[ES]
= k1[E][S] k1[ES] k 2 [ES]
dt
d [ ES ]
0
dt

[ ES ] =

k1 [ E ][S ]
k 1 + k 2

[ ES ] =

[ E ] = [ E0 ] [ ES ]

v=

[ E 0 ][S ]
k 1 + k 2
+ [S ]
k1

d [ P]
= k 2 [ ES ]
dt

v=

k 2 [ E 0 ][S ]
d [ P]
=
k 1 + k 2
dt
+ [S ]
k1

Briggs-Haldane o quasi estado estacionario

v=

k 2 [ E 0 ][S ]
d [ P]
=
k 1 + k 2
dt
+ [S ]
k1

k 1 + k 2
Km =
k1

v max = k 2 [ E0 ]

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

Briggs-Haldane o quasi estado estacionario

=

[ E0 ]
[S 0 ]

v [S ]
d[S ]
= max
con [ S ](0) = [ S 0 ]
dt
K m + [S ]
v max t = [ S 0 ] [ S ] + K m ln

[S 0 ]
[S ]

QSS solution

Michaelis-Menten
Km: constante de Michaelis-Menten.
Vmax cambia si se cambia la [E0], pero la adicin de mas S no la afecta.
Cunado k2 <<<k1 i.e Km=Km, un valor bajo de Km sugiere que la
enzima E tiene una alta afinidad por el sustrato S.
El valor [S]=Km corresponde a un valor de velocidad de reaccin igual
a Vmax/2.

v max = k 2 [ E0 ]

k 1 [ E ][S ]
Km =
=
k1
[ ES ]

Km =

k 1 + k 2
k1

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

Cintica enzimtica
max

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

max

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Grafico doble de recprocos
Lineweaver-Burk plot

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

linealizacin

Km 1
1
1
=
+
v vmax vmax [ S ]

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Edie-Hofstee plot

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

v = vmax

v
Km
[S ]

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Hanes-Wolf plot

v=

vmax [ S ]
K m + [S ]

[S ] K m
1
=
+
[S ]
v
vmax vmax

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
max

Regresin no lineal

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

max

Cintica enzimtica
Graficar datos
Linealizar
Determinar parametros vmax, Km
Regresion no lineal
Analisis de errores

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Grafico doble de recprocos
Lineweaver-Burk plot

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

linealizacin

K 1
1
1
=
+ m
v vmax vmax [ S ]

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Grafico doble de recprocos
Lineweaver-Burk plot

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

vmax S
v K + S
m

error relativo =
2
linealizacin
(
)
v

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Regresion no lineal

RMSE =

[S]

vmax S
v K + S
m

Determinacin experimental de los parmetros de una

cintica enzimtica tipo Michelis-Menten
Edie-Hofstee plot

vmax [ S ]
v=
K m + [S ]

v = vmax

v
Km
[S ]

Cintica enzimtica
vmax [ S ]
v=
K m + [S ]
max

14.0
12.0

v [mM/h]

10.0

max

8.0
6.0
4.0
2.0
0.0

0.0

5.0

10.0

15.0
S [mM]

20.0

25.0

30.0

Ejercicio 1
S[mM]

v[mM/h]

25.50
22.51
19.51
16.51
13.76
11.30
7.90
4.46
2.31
1.00
0.42
0.18
0.08

11.99
11.99
11.99
11.99
10.04
9.61
8.80
4.97
3.62
1.62
0.70
0.27
0.13