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RECUENTO DE LEUCOCITOS

CUENTA DE LEUCOCITOS
OBJETIVO
Aprender a realizar y aplicar la metodologa para un recuento de Leucocitos por milmetro
cbico de sangre e interpretar el resultado.
FUNDAMENTO
Para el conteo de leucocitos, se usan mtodos sistemticos que son ms rpidos y
precisos, y los mtodos manuales.
Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:
Dilucin de la sangre
Muestreo de la sangre diluida en un volumen
Recuento de clulas en ese volumen
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que
corresponden a los campos 1, 3,7 y 9.
Para su dilucin, se hace lo mismo que para los hemates pero empleando la pipeta de
blancos, de modo que la solucin que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el
lquido de Turk. El lquido de Turk es hipotnico de modo que se destruyen los hemates y
as no entorpecen en el recuento.
El lquido de Turk consta de cido actico glaciar 2ml, violeta de genciana disolucin de
1% 1ml y agua destilada en cantidad suficiente para 1000ml. Deber filtrarse a menudo
para evitar levaduras y hongos.
En un principio es un poco difcil distinguir los leucocitos de los restos de membranas de
los hemates hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son ms
refringentes (ms brillantes) al moverlo con el microscopio que los restos de hemates. Se
debe observar la presencia de la membrana citoplasmtica y de la membrana nuclear (a
veces ms) como lneas finas y brillantes. Esto se observa fcilmente moviendo el
microscopio hacia delante y hacia atrs

MATERIAL
Pipeta de Thoma para glbulos blancos (perla blanca)
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Boquilla blanca
Tubo de goma
Tubos de ensayo
Papel parafilm
Cmara de Neubauer
Cubrehematimetro
Microscopio
Gasas

SUSTANCIAS
Alcohol al 70%
Sangre venosa
Liquido de Turk

PROCEDIMIENTO

1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica


puncin venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA
2. Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar
una dilucin de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre
se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente

4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk)


y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

5. Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un


rotador automtico o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

6. Montar la laminilla de vidrio en la cmara para recuento. Debe estar limpia y seca.
7. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota
pequea cerca de un extremo de la cmara para que por capilaridad se llene
exactamente.

8. Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten

9. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar en los


4 cuadrados angulares.
10. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera
las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeo de recuento y no se
consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.
OBSERVACIONES

Cmara de Neubauer, 40x


Enfocando uno de los cuadros laterales, se aprecian claramente los 16 cuadros pequeos donde
se tienen que contar los leucocitos que hay en ellos. Se debe de tener cuidado de no confundir
los restos de eritrocitos hemolizados con los leucocitos, que deben de aparecer como puntos
purpuras o negros, como los que estn a las 9

RESULTADOS
Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como
concentraciones, que en este caso seran nmero de clulas por unidad de volumen de
sangre, que es 1mm3
Despus de contar los glbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total
de ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente clculo:
N de leucocitos x mm3 = altura x dilucin x rea
N de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000
N de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50
N de leucocitos x mm3 = N de leucocitos contados x 50
En el anlisis hecho, los resultados de la cuenta de clulas quedaron as por casilla:

El nmero de leucocitos fue de 111, que al multiplicarse por 50 daba como resultado 5
550/mm3, lo que indica un ndice normal, sin embargo apenas y supera el mnimo, pues el
paciente era un hombre, de 41 aos de edad.
VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3)
Hombres y Mujeres:..5 000-10 000

CONCLUSIN
Los leucocitos son las clulas sanguneas que dentro del organismo participan
desarrollando diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunolgica
especfica o inespecfica.
Existen dos grandes tipos de estos glbulos:
Polimorfonucleares:
Basfilos
Eosinfilos
Neutrfilos
Mononucleares:
Linfocitos (clulas T y clulas B)
Monocitos
El recuento leucocitario representa el nmero de leucocitos en un litro de sangre
completa. La cuantificacin o recuento de leucocitos es muy importante para el
diagnstico de enfermedades.
Un bajo nmero de glbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
Insuficiencia de la mdula sea (por ejemplo: debido a infeccin, tumor o cicatrizacin
anormal).
Enfermedades vasculares del colgeno (como el lupus eritematoso sistmico).
Enfermedad del hgado o el bazo.
Radioterapia o exposicin a la radiacin.
Un alto nmero de glbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
Anemia.

Tumores de la mdula sea.

Enfermedades infecciosas.

Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia).

Leucemia.

Estrs emocional o fsico intensos.

Dao tisular (por ejemplo, quemaduras).


Es muy importante comentarle al mdico acerca de cualquier medicamento que se est
tomando, incluyendo productos de venta libre. Ciertos frmacos pueden interferir con los
resultados del examen, como Sulfonamidas, Alopurinol, cido acetilsaliclico (aspirina),
cloroformo, corticosteroides, epinefrina, heparina, quinina o triamtereno

La cmara de Neubauer o hemocitmetro es una lmina portaobjeto gruesa, en cuyo


centro se hayan dos superficies cuadriculadas iguales, separadas del resto de la lmina
por surcos y dos barras transversales algo ms elevadas.
Una laminilla cubreobjetos pticamente plan, que al colocarse sobre las barras elevadas
de la lmina forma una cmara entre el cubreobjetos y la superficie cuadriculada, teniendo
una altura de 0.1mm

En la cmara de Neubauer las reas de recuento de eritrocitos y leucocitos son


diferentes, como se muestra en la imagen.