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CARIOGNICOS
CONTENIDO
Pg.
INTRODUCCIN
11
1.
14
1.1.
14
1.2
JUSTIFICACIN
14
OBJETIVOS
16
2.1
GENERAL
16
2.2
ESPECFICOS
16
3.
MATERIALES Y MTODOS
17
3.1
DISEO DE LA INVESTIGACIN
17
3.2
MTODOS
17
3.3
RECOLECCIN DE INFORMACIN
18
3.4
ANLISIS DE INFORMACIN
18
RESULTADOS ESPERADOS
19
CAPITULO I
20
1.1
ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACION
20
1.2
23
1.3
23
24
25
1.4
CLASIFICACIN DE LA CARIES
27
1.5
29
1.6
MTODOS DE DIAGNSTICO
30
1.7
32
1.7.1
33
1.7.2
34
1.7.3
35
1.8
36
1. 9
39
1.10
48
51
1.12
52
1.13
STREPTOCOCCUS MUTANS
55
57
1.14
LACTOBACILLUS
65
1.15
ACTINOMYCES
70
1.11
CAPITULO II
79
2.1
79
BIOPELCULA
2.2
CARACTERISTCAS DE LA BIOPELCULA
2.3
2.4
PLACA DENTAL
CAPITULO III
3.1
80
84
86
86
3.2
3.2.1
108
3.2.2
Quinonas
109
3.2.3
Taninos
109
3.2.4
Cumarinas
110
3.2.5
110
3.2.6
Alcaloides
110
3.2.7
111
CAPITULO IV
112
4.1
TECNICAS MICROBIOLOGICAS
112
4.1.1
112
4.1.2
114
4.1.3
115
4.1.4
117
5.
DISCUSIN
118
6.
CONCLUSIONES
131
RECOMENDACIONES
133
GLOSARIO
135
BIBLIOGRAFA
140
LISTA DE TABLAS
Pg.
Tabla 1.
34
Tabla 2.
35
Tabla 3.
36
47
68
78
96
111
127
LISTA DE GRAFICAS
Pg.
Figura 1. Fisiopatologa de la caries dental
38
47
64
82
85
AGRADECIMIENTOS
Primero, quiero darle gracias a Dios por estar conmigo en cada paso que doy, por
fortalecer mi corazn e iluminar mi mente y por haber puesto en mi camino a
aquellas personas que han sido mi soporte y compaa durante toda mi carrera,
especialmente a mi familia.
Tambin me gustara agradecer sinceramente a mi director y tutor de Tesis, Fredy
Omar Gamboa Jaimes por su dedicacin, conocimientos, orientaciones, su
manera de trabajar.
Gracias a la ayuda de ellos y mi perseverancia hoy puedo decir que logre uno de
los triunfos y sueos ms grande de mi vida ser Bacteriloga de la Pontificia
Universidad Javeriana.
INTRODUCCIN
carbohidratos.
Infirri JS. Barmes De Epidemiology of oral diseases differences in national problems. Int dent J 1980; 29: 183 190.
11
sustancias
naturales
que
posean
propiedades
farmacolgicas
antibacterianas.
El uso de las plantas con fines teraputicos es de gran utilidad, ya que de ellas
son obtenidas innumerables sustancias qumicas, vegetales que pueden
considerarse frmacos y son empleados en diferentes pases. De ellas el 74 %
fue descubierto a partir de su empleo en medicina tradicional. La investigacin en
este sentido brinda la oportunidad de encontrar nuevos agentes activos desde el
punto de vista farmacolgico, a partir de una fuente de materia prima ms
econmica y natural las plantas medicinales.
en
insaturacin. Se resaltan
causantes,
interaccin
hospedero-microorganismos,
patogenicidad,
entre
otros
13
1.2 JUSTIFICACIN
Es por esto, que se busca realizar una monografa con informacin actual sobre la
actividad de extractos, fracciones, subfracciones de sustancias naturales sobre
14
base a los
profesionales en
15
2 OBJETIVOS
2.1 GENERAL
2.2 ESPECFICOS
estudios e investigaciones
odontologa.
Describir la actividad antimicrobiana de extractos y fracciones obtenidos a partir de
plantas.
Presentar detalladamente las tcnicas microbiolgicas utilizadas para conocer la
actividad antimicrobiana de plantas.
16
3. MATERIALES Y MTODOS
3.2 MTODOS
manera:
Caractersticas de la biopelcula
Tcnicas Microbiolgicas
17
18
4 RESULTADOS ESPERADOS
medicinales
tcnicas
microbiolgicas
que
presentan
actividad
19
CAPITULO I
Infirri JS, Barmes De. Epidemiology of oral diseases differences in national problems. Int Dent J 1980;29:183-190
Petersen P. The world oral health report 2003: continuous improvement of oral health in the 21st century the approach of
the Who Global Oral Health Programme. Community Dent Oral Epidemiol 2003; 31 (Suppl. 1): 3-5.
4
World Health Organization. Global oral health data bank. Geneva: World Health Organization; 2002.
5
Ministerio de Salud. III Estudio Nacional de Salud bucal (ENSAB III). Bogot: Ministerio de Salud; 1999. p. 85-147
3
20
Mltiples han sido los esfuerzos de la Ciencia Odontolgica para prevenir, tratar y
controlar una de las enfermedades que ms afecta a la colectividad de la caries
dental. Segn Downer (1994), ms del 80% de la poblacin mundial ha sufrido
esta patologa, no existen diferencias significativas en cuanto a la edad, gnero,
etnia ni condicin social. No obstante, estudios epidemiolgicos por Downer
(1994), el Departamento de Salud de los Estados Unidos (2000), Spencer et al.
(1994) y Zambrano et al. (1994) en diversos pases han demostrado una
considerable reduccin en la prevalencia de caries, especialmente en la poblacin
joven.
21
22
1. Fosetas y fisuras
2. Superficies lisas
3. Superficies radiculares
4. Superficies adyacentes - restauraciones (caries recurrentes)
Seif R, Tomas. Cariologia (Prevencin, Diagnstico y Tratamiento Contemporneo de la Caries Dental. 1997.
Actualidades Mdico Odontolgicas Latinoamerica. Caracas - Venezuela.
9
Featherstone JD. The caries balance: the basis for caries management by risk assessment. Oral Health Prev Dent. 2004; 2
Suppl 1:259-64.
23
24
1.3.2 Cambios qumicos. La lesin incipiente es iniciada por eventos que ocurren
en la placa dental. Inmediatamente despus de la acidognesis, el pH de la placa
baja. Si se alcanzan valores de pH: 5.5 la disolucin del esmalte puede ocurrir. La
desmineralizacin de la superficie del esmalte produce una apariencia de rasgado
cuando se observa por microscopa electrnica. La subsuperficie inmediatamente
adyacente a esta se remineraliza dando un aspecto diferente de relleno a la
microscopa electrnica.
25
El ataque inicial puede ser en la varilla del esmalte, entre ellas o ambas. Los
cristales que conforman las varillas del esmalte son principalmente sujetos al
ataque en el centro de su eje principal.
magnesio y carbonato, seguido por una remocin de calcio, fsforo y otros iones
que son parte del cristal. Si una cavidad est formada eventualmente, los iones en
la subsuperficie pueden difundirse a travs de los poros, la pelcula y la placa. En
el cuerpo de la lesin aparece un proceso de desmineralizacin progresiva a lo
largo de las estras de Retzius. Cuando la lesin alcanza la unin amelodentinal,
se presenta una expansin lateral importante la cual socava el esmalte. Simultneamente con estos cambios, hay una prdida de muchas protenas solubles
de la matriz.
27
28
29
actualmente se
Se aconseja utilizar el mtodo visual siempre despus de una profilaxis, sobre una
superficie limpia, seca y bien iluminada, por un odontlogo debidamente
entrenado.
30
lesiones de tercio cervical diferentes a caries, como son las erosiones cervicales y
abrasiones por sobre cepillado.
una obturacin o una restauracin, por esto para el diagnstico del estado de
restauraciones
se
utiliza
el
mtodo
visual,
buscando
determinar
la
Teniendo en cuenta la reciente publicacin por parte del Ministerio de Salud del
Tercer Estudio Nacional de Salud Bucal (ENSAB III), es necesario comentar
algunos resultados.
10
Seif R, Tomas. Prevencin, Diagnostico y tratamiento Contemporneo de la Caries Dental. 1997. Actualidades Medico
Odontolgicas Latinoamrica. Caracas Venezuela
11
Ministerio de salud. III Estudio nacional de Salud Bucal (ENSAB III). Bogot: Ministerio de Salud; 1999. P. 85-147
32
1.7.1 Denticin Temporal (Nios de 5 Aos) .El 60.4% de los nios de 5 aos
tiene historia de caries (proporcin de personas con uno o ms dientes cariados y/
o perdidos y/u obturados por caries) en la denticin primaria a los 7 aos, la
proporcin ha aumentado a 73.8% y desciende a 13% a los 12 aos como efecto
de la exfoliacin dentaria. La historia de caries
en las nias 51% y en la zona rural con 64.2% frente a 49.9% en la urbana. (Tabla
1). Para Santaf de Bogot, el 35.6% no tiene historia de caries mientras que el
64.4% s presenta historia de caries.
La necesidad de tratamiento es de 13.7% para la poblacin en general. Desglosando estas necesidades de tratamiento, se encuentra que el primer lugar lo
ocupa la ciruga con el 10.8%, seguido por las extracciones indicadas con el 1.7%
y las endodoncias con el 1.1 %.
33
Variables
Historia de caries
Sin historia
Con historia
Prevalencias
Total
Sin
Caries
Con caries
Total
SEXO
Hombres
38.8
61.2
100
43.6
56.4
100
Mujeres
40.1
59.9
100
43.6
56.4
100
Urbana
42.8
57.2
100
50.4
49.6
100
Rural
32.0
68.0
100
33.1
66.9
100
35.8
64.4
100
40.7
59.3
100
ZONA
Santaf de
Bogot
34
Variables
Dientes
Dientes
Dientes
cariados
obturados
perdidos
SEXO
Hombres
1.3
0.7
0.1
Mujeres
1.5
0.8
0.1
Urbana
1.3
0.8
0.1
Rural
1.8
0.3
0.2
Santaf de Bogot
1.9
1.0
0.2
Incompleta
1.4
0.8
0.1
Primaria completa
2.1
0.6
0.1
ZONA
ESCOLARIDAD
Ninguno/primaria
Secundaria incompleta
pblica. El Plan Nacional de Salud Bucal de 1996 indica que "no es posible brindar
cobertura del 100% (Tabla 2). Ante este panorama, no nos queda sino volver a
mencionar la importancia de la investigacin del ms alto nivel orientada hacia la
gentica, inmunologa, microbiologa, biofsica y bioqumica, en busca de una
solucin definitiva para este evento en salud.
35
Dientes
Edad
cariados
Dientes
perdidos por
caries
Dientes
obturados
Dientes
extraccin
indicada
Promedio
Promedio
Promedio
Promedio
35 a 44
2.1
8.0
4.3
0.6
65 y Mas
0.8
17.6
1.2
0.8
Rodrguez, Adriana; Gonzlez, Octavio Alberto. Fisiopatologa de la caries dental, pathophysiology of dental caries,
Univers odont, may 2000 spl 1: 21-27.
36
caries
dental
enfermedad
periodontal
que
los
restantes
37
38
39
1.
Agente (microbiota)
2.
Substrato (dieta)
3.
Husped (diente)
4.
1.
Las comunidades bacterianas asociadas con caries de raz son altamente diversas
y sufren sucesin durante la formacin de la lesin. Esto ha llevado a decir que la
40
caries radicular tiene una etiologa polimicrobiana, tipificada por la variacin en las
especies predominantes entre las muestras de diferentes lesiones. Con base en
numerosos estudios microbiolgicos realizados, se sugiere que los Streptococcus
del grupo mutans pueden causar caries radicular en humanos. Los mismos
criterios para implicar al Streptococcus mutans en caries coronal son tenidos en
cuenta para considerar esta especie como el agente etiolgico de una infeccin
mixta. A pesar de la etiologa polimicrobiana, el gnero Actnomyces, en especial
Actnomyces naeslund, genoespecies I y II (esta ltima anteriormente
denominada Actnomyces vscosus), ha sido consistentemente asociado con
caries de raz en humanos. Ellos predominan en la mayora de las lesiones, lo que
sugiere un papel importante de este gnero en la enfermedad.
2.
SUBSTRATO: ( DIETA)
41
3.
HOSPEDADOR: (DIENTE)
que
no
se
completa
la
maduracin
posteruptiva
del
esmalte,
Por otro lado, existen factores sistmicos que alteran el ecosistema oral como el
uso de algunos frmacos, radiacin ionizante y la xerostoma (manifestacin local
de algunas condiciones sistmicas).
4.
de caries,
bacterias tambin tienen cargas negativas, existe entonces una inicial repulsin
entre la superficie del diente y las bacterias de la saliva que se encuentran cerca.
Este mecanismo inicial de defensa se rompe cuando ocurre la formacin de la
placa dental.
13
Delgado Troncoso, Jorge Enrique. Factores de virulencia de los microorganismos asociados a la caries, virulence factors
of caries related microorganisms, univers odont, may 2000; 20 (spl 1) 43 48.
46
Fact
ore
Estil
od
eV
i
sS
oc
Diente
Sustrato
io
s
ico
m
on
Ec
da
Tiempo
Microorganismos
Hospedero
Microorganismo
Factor de Virulencia
Significado
Protenas de adhesin
celular (PAC);
Streptococcus
Mutans
Agregacin y adherencia
Acumulacin y adherencia de las bacterias de la
Glucosiltransferasas
Protenas fijadoras de
Actinomyces
glucanos (GBPs):
Fimbrias
Lactobacillus
Lactasa
47
1.10
DENTAL
Este aspecto es bsico en el estudio de cualquier infeccin, ya que para que una
bacteria sea capaz de generarla debe poseer factores que le permitan
establecerse en los tejidos, vencer las defensas orgnicas y producir sustancias
citolesivas, definindose entonces los determinantes bioqumicos o factores de
virulencia, como una serie de propiedades que le permitan a las bacterias
establecerse (colonizar) en un tejido, generar una afeccin, determinar el grado o
gravedad de la infeccin. Estas propiedades pueden estar presentes en los
microorganismos o producirlos metablicamente.
de
muchos
Streptococcus),
pueden
ser
factores
adherentes
determinando as la
gravedad de la afeccin.
1.
49
2.
bacteria adherirse fuertemente a las superficies que ms les favorece, bien sea
por nutrientes o por falta de defensa orgnica.
3.
permiten huir de un sitio o ir hacia uno favorable. Pocas bacterias orales son
mviles.
4.
Tambin hay
poseen las bacterias en su superficie carga negativa, que les permite adherirse a
los tejidos orgnicos de cargas positivas. Esto permite a las bacterias evitar las
fuerzas de desplazamiento a que stas pueden estar sometidas. (Muchas
bacterias bucales tienen ese tipo de mecanismo de adhesin).
5.
6.
7.
pared de los Gram negativos), son liberados con la muerte del microorganismo,
los efectos txicos
Es fcil concluir, que son muchas las formas como las bacterias pueden afectar
y engaar al organismo para sobrevivir en un ambiente sumamente hostil, con
varias condiciones para terminar con cualquier invasin.
Gamboa Martnez, Luis Fernando. Epidemiologia de la caries. Epidemioly of dental caries, univers odont, may 2000;
(supl 1): 13-17.
52
positiva
que
permiten
la
unin
de
componentes
bacterianos
cargados
viscosus.
Algunos
sealan
que
Streptococcus
sanguis
Investigaciones realizadas por Bowen, Marsh, Martin, Moore entre otros, refieren
que los microorganismos secundarios que se adhieren a las bacterias presentes
en la masa de la placa bacteriana son: Prevotella loescheii, Prevotella intermedia,
53
15
Featherstone JD. The caries balance: the basis for caries management by risk assessment. Oral Healt Prev Dent. 2004;
2 apl 1: 259 64.
54
la
caries
dental
la
endocarditis
infecciosa,
entre
otras.
Autores como, Berkowitz, Kohler, Col y Van Houte han sugerido a Streptococcus
mutans como el principal agente causante de la formacin de la caries dental. 16
16
FIGUEROA GORDON M, ALONSO GUILLERMINA. Microorganismos presentes en las diferentes etapas de la progresin
56
1.
Acidogenicidad
2.
Aciduricidad
3.
Acidofilicidad
4.
5.
6.
7.
Presencia de glucosiltransferasas
8.
9.
1.
mutans por la sacarosa y su alta capacidad para transportarla hacen que este
microorganismo sea el que probablemente contribuya ms a la acidognesis y
subsecuente formacin de caries, cuando la sacarosa es un componente significativo en la dieta de la persona. Streptococcus mutans puede fermentar tales azcares y producir cido lctico en mayor proporcin, cido actico, frmico y etanol.
Esto hace que baje el pH y se desmineralice el esmalte dental.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Han recibido diversos nombres como Antgeno I/II, protena B 10, SpaA 11, P1 12,
SR 13 MSL-1 y PAC. Pueden tener varias funciones segn la regin de la
protena: agregacin, regin amino terminal hidrofbica de la hlice a de la molcula, adherencia, en el carbono terminal de la regin amino terminal rica en
alanina. Por otro lado, pueden unirse tambin al colgeno en los tbulos
dentinales, situacin importante en el desarrollo de caries radicular. Se ha
sugerido que esta molcula posee varios receptores, lo cual implica mltiples
dominios de unin, adems de que interacta con el componente secretorio, la
albmina, aglutininas salivares y glicoprotenas.
El gen est constituido por 4695 pares de bases y codifica para una protena de
1561 residuos de aminocidos. Incluye una secuencia lder que va de los residuos
1 al 38. Los residuos 1528 a 1533 estn involucrados en la modificacin
postranscripcional que envuelve el rompimiento de los residuos del C (carbono)
terminal y la unin a la pared celular por medio probablemente de enlaces
covalentes. La regin carboxilo terminal esta compuesta por un dominio hidroflico
rico en residuos de glicina y prolina que atraviesa la pared, un motivo consenso
LPNTGV, un dominio hidrofbico que atraviesa la membrana con residuos de
leucina y alanina, un tallo cargado, compuesto principalmente por residuos de
lisina.
La parte menos conservada est alineada entre los residuos 500 y 900. En
contraste, la regin N terminal est particularmente bien conservada y corresponde a los residuos 121 a 477. Este segmento se caracteriza por repeticiones
en tndem (grupos de a dos) de 82 residuos de alanina y por este motivo se le
conoce como regin A o rica en alanina. En ella se hallan las regiones de mayor
inters que son las comprendidas entre los residuos 301 a 319, y 361 a 377,
60
8.
Glucosiltransferasas:
Como
ya
se
mencion
antes,
las
9.
enlaces a-1 ,6. Streptococcus mutans sintetiza al menos dos protenas fijadoras de
glucanos que no tienen actividad enzimtica de glucosiltransferasas, una de ellas
es secretada como una protena de 74 kDa (GBP74) que es la predominante
cuantitativamente
entre
las
obtenidas
del
sobrenadante
de
cultivos
de
Streptococcus mutans.
17
http://www.encolombia.com/odontologia/investigaciones/caries.htm.
63
FIGURA 3. Formacin de la pelcula adquirida sobre la superficie del diente por Streptococcus
mutans.
Pelcula
Pelcula
Primer
colonizador
Diente
S. mutans
S. mutans
Diente
Primer
colonizador
S. mutans
= AgI/II
= Componentes del
fluido final
Pelcula
S. mutans
GTF
Diente
S. mutans
Diente
S. mutans
S. mutans
S. mutans
S. mutans
= GBP
= Glucan
= GTF
= GBP
= Glucan
TABLA 5. Cadena de eventos que pueden llevar a infeccin por Streptococcus mutans.
64
1.14 LACTOBACILLUS
metablicos
sintetizados,
la
mayora
de
las
especies
son
bulgaricus,
Lactobacillus
lactis,
Lactobacillus
acidophilus
Morfolgicamente, algunos bacilos son bastones delgados y largos, otros son algo
parecido al colibacilo, pero al contrario de estos todos son Gram positivos. Casi
todos son inmviles, pero se han sealado excepciones. Muchos cultivos
muestran
una
forma
diplobacilar
caracterstica
menudo
reniforme.
65
las ms
importancia por los trabajos de Metchnikoff, quien como antes se dijo, crea
que la putrefaccin intestinal poda reprimirse bebiendo leche fermentada
por este microorganismo. Cuando mas tarde se demostr que Lactobacillus
bulgaricus no se implantaba en el intestino, se empleo en teraputica
experimental se inclin a favor de Lactobacillus acidophilus. Es ms difcil
de cultivar que este ligeramente ms voluminoso y algo diferente en la
fermentacin de azcares, sin embargo se relacionan estrechamente. Se
ha sealado que Lactobacillus bulgaricus raramente se desarrolla a 15 C,
muere en cultivos repetidos en caldo de lactosa peptona levadura, es
incapaz de desarrollarse en medio que contengan 2.5 por 100 de cloruro de
sodio y no crece en caldo a pH de 7.8, en tanto que
Lactobacillus
Crecimiento
15 C
45 C
NH3
Crecimiento en
arginina
caldo
4 % NaCl
Lactobacillus casei +
Lactobacillus
acidophilus
Lactobacillus
bulgaricus
Por otra parte, la relacin que tiene los Lactobacillus con la caries dental se debe a
la descalcificacin de los dientes, puede producirse por cidos orgnicos de origen
microbiano. La formacin de cidos tiene lugar rpidamente en placas dentales,
segn mediciones con microelectrodos, despus de lavarse la boca con solucin
68
19
http://www.monografias.com/trabajos15/lactobacilos/lactobacilos.shtml
69
1.15 ACTINOMYCES
a travs de fistulas. En
70
TAXONOMA
Actinomyces
israelii del
71
Para Actinomyces naeslundii han sido identificadas las genoespecies I y II, ambas
igualmente capacitadas para la colonizacin y contribucin en la formacin de las
lesiones de caries radicular, sin embargo, no se han encontrado diferencias
significativas en la distribucin que stas presentan en la boca.
ESTRUCTURA
Los Actinomyces son bacilos Gram positivos pleomrficos que constituyen gran
proporcin de la microflora oral de los mamferos. Son colonizadores tempranos
de las superficies dentales en general, ya que su estructura muestra
caractersticas como las fimbrias que favorecen su adherencia a tejidos con
contenido de colgeno como la dentina.
PARED CELULAR
72
envoltura no cambia, ms tarde la formacin del septum divide a los bacilos por
fragmentacin.
la cantidad de azcares
presentes en ella vara segn la especie. Sin embargo, los azcares ms comunes
son glucosa, galactosa, ramnosa-6-deoxitalosa, fructosa, manosa, todos ellos
pueden estar solos o combinados. La glucosa y la galactosa estn presentes en
todas las especies, menos en Actinomyces bovis. El azcar ramnosa-6deoxitalosa est en todas las especies menos en
paredes del
Entre los pptidos que se encuentran ms comnmente, estn el Nacetilmurmico, N-acetilglucosamino, alanina, cido glutmico, lisina y ornitina.
Actinomyces israelii,
Actinomyces
MEMBRANA CITOPLASMTICA
FIMBRIAS
como refuerzo de los medios slidos como el agar sangre, agar infusin cerebro
corazn y "placa presempto" que es una placa de petri dividida en cuadrantes que
contiene agar Lombard-dowell (LD), agar LD esculina, agar LD yema de huevo y
agar LD bilis.
Cuando est creciendo en medio peptona - extracto de levadura con glucosa, las
especies de Actinomyces producen cido actico, frmico, lctico y succnico
como productos terminales de su metabolismo, junto con dixido de carbono y
pequeas cantidades de otros cidos. Los productos finales de la fermentacin de
la glucosa en cultivos aerobios estacionarios son el cido frmico, actico,
propinico, lctico, succnico, acetoina y dixido de carbono.
77
PEPTID
OGLUC
METABOLISMO
DE
MORFOLOGIA
GENERO
CELULAR
CATALASA
MOTILIDAD
Bacilos
Actinomyces
filamentosos,
ramificaciones
PIGMENTACIN
Ninguna;
Variable
Negativa
ocasionalmente
rosa/roja
21
CRECIMIENTO
Facultativo/
Anaerobio
ANO
LOS
DIAMIN
HIDRATOS DE
ACIDOS
OACID
CARBONO
MICOLICO
L
Fermentativo
Ausentes
Delgado Troncoso, Jorge Enrique. Factores de virulencia de los microorganismos asociados a las caries, virulence
factor of caries- related microorganisms, univers odont, may 2000; 20(supl 1) 43-48.
78
lisina,Lornitina
CAPITULO II
2.1 BIOPELCULA
22
Ada G. Prez Luyo. La Biopelcula una nueva visin de la placa dental, Revista Estomatolgica Herediana volumen 15
(N 1) Junio 2005, Lima Per.
79
Los anticuerpos, las clulas del sistema inmune y los antimicrobianos no tienen
acceso a los microorganismos ms profundos adicionalmente, se encuentran en
un estado metablico reducido lo que los hace menos susceptibles a la accin de
estos ltimos. Tambin cuando se liberan clulas de la biopelcula, stas pueden
viajar y depositarse en nuevos nichos de colonizacin manteniendo las mismas
caractersticas de una biopelcula adherida a una superficie. Finalmente, los
80
23
Marisol Betancourt, Botero, Sandra. Biopelculas una comunidad microscpica en desarrollo, Escuela de Odontologa,
Facultad de Salud, Universidad del Valle, Cali. Volumen 35 (N3) 2004.
81
MISIN
COLONIZACIN
FORMACIN
CRECIMIENTO
Formacin de un biofilm maduro
infectado con agua
Clula
plantnicas
Primera
Incrustacin
Contacto clula a
clula ms fuerte
y formacin de
micro colonia
Clulas incrustadas
1.
2.
83
3.
selectivo
en
bacterias
muy
especficas
productos
Junco P, Baca P. Mtodos de control de la placa bacteriana. Odontologa Preventiva y Comunitaria. Principios, mtodos y
aplicaciones. 3 ed. Barcelona: Masson; 2005.
84
85
CAPITULO III
25
86
Dichas plantas medicinales y los frmacos que utilizaban se siguen usando hoy
en da. La mayora de las plantas medicinales presentan efectos fisiolgicos
mltiples, debido a que poseen ms de un principio activo, stos corresponden a
compuestos qumicos propios de la planta que estn sometidos a una serie de
variables fsicas tales como: humedad del suelo, condiciones de luz, temperatura,
factores ambientales, entre otros. La estandarizacin de estas variables, as como
el control de calidad aplicado a todas las fases de su elaboracin y a los
resultados clnicos observados en estudios han permitido que la Organizacin
Mundial de la Salud (OMS) publique monografas sobre algunas de las plantas
medicinales con mayor respaldo cientfico.
Se debe destacar que los frmacos a base de plantas medicinales presentan una
inmensa ventaja respecto a los tratamientos qumicos. En las plantas, los
principios activos siempre estn biolgicamente equilibrados por la presencia de
sustancias complementarias que van a potenciarse biolgicamente entre s, no se
acumulan en el organismo y sus efectos indeseables estn limitados. Sin
embargo, a pesar de que han aumentado las investigaciones y estudios cientficos
acerca de las plantas medicinales, an no se conocen muchos de los principios
activos a los que se deben sus extraordinarias propiedades.
relacionados
con
las
sustancias
naturales,
que
complementan
En los ltimos aos se han publicado una serie de artculos, que nos permite
actualizarnos en las
Castro Arqueros, Viviana Marisel. Inhibicin del crecimiento in vitro de streptococcus mutans por papana y sanitrend.
Universidad de Chile, Departamento de Patologa, rea Microbiologa, Santiago de Chile 2005.
88
En otra investigacin realizada durante los ltimos aos fue la evaluacin del
efecto antimicrobiano in vivo de la infusin de Camellia sinensis sobre bacterias
orales.
27
Eguizbal Marly A. Moroni Nakata. Hilda. Actividad antimicrobacteriana in vitro del extracto etanolico de propleo
peruano sobre Streptococcus mutans y Lactobacillus casei. Odontol. San Marquina 2007; 18-20, departamento
Acadmico de Ciencias Bsicas; Facultad de Odontologa; Universidad Nacional Mayor de San marcos. Lima Per.
89
28
Mohemi Nakata, Hilda, Elba Martnez Cadillo, Margot Gutirrez, Donald Ramos Perfecto, Mara e. Nez Lizarraga,
Jonny Burga Snchez, Javier Tello, Isabel Trevejo. Efecto antimicrobiano en vivo de la infusin de carmelia sinensis sobre
bacterias orales, odontologa Sanmarquina 2007; 12-14.
90
91
el
de las
29
Hilda Moromi Nakatay, Elba Martnez Cadillo. Efecto del t verde en la formacin de la placa bacteriana por
Streptococcus Mutans, odontologa sanmarquina. Departamento Acadmico de Ciencias Bsicas. Facultad de
Odontologa Universidad nacional Mayor de San marcos. Lima Per.
92
Naranjo C. Jimnez a. Estudiantes pre y posgrado facultades de Ciencias Odontologicas, Medicina Universidad Nacional
de Colombia. Actividad Antimicrobiana del Lquido de la cascara de la nuez del maraon Anacardium occidental (LCNM)
sobre Streptococcus mutans.
93
se disolvieron despus de
Despus se compararon los extractos crudos y el acetato de etilo (FA) que mayor
porcentaje de inhibicin presentaron frente a las bacterias en estudio, para la
identificacin de los metablitos secundarios por pruebas cualitativas como:
Fehling (aldehdos), Mtodo Legal (lactosas insaturadas y cetonas), Mtodo
cloruro frrico (fenoles y taninos).
94
95
Metabolitos
M1
M2
M3
M4
M5
M1FA
M2FA
M3FA
Aldehidos
Lactonas
insatuaradas
Fenoles
Cetonas-metil
cetonas
triterpenos
Flavonoides
Taninos
Glucsidos
Esteroide
Neira Gonzlez, Adriana Mara. Estudio fotoqumico y actividad antibacterial de Psidium guinwnse Sw (choba) frente a
Streptococcus Mutans, agente causal de caries dentales. Revista Cubana Plant Med 2005; 10 (3-4).
96
Uno de los extractos con mayor actividad antimicrobiana es el acetato de etilo, fue
fraccionado
por
cromatografa
en
columna
de
gel
utilizando
n-hexano,
97
Ju-hee Songa, Kee-wan Changa, Seong-kyu Hanb. In vitro effects of a fraction separated from Polygonum cuspidatum
root on the viability, in suspension and biofilms, and biofilim formation of Mutans Streptococci. Journal of
Ethnopharmacology 112 (2007) 419-425.
98
33
Alvarado Parada Andrea Carolina, Tllez Alfonso Nohem y Gamboa Fredy. evaluacin de la actividad inhibitoria de
Extractos, fracciones y subfracciones obtenidas de la planta Isertia Laevis sobre bacterias de importancia en caries dental.
Grupo de fotoqumica (Departamento de qumica), Departamento de microbiologa y Centro de Investigacin Odontolgicas.
Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, D.C.
99
tuvieron una
34
Tllez-Corral Mayra, Perdomo-Giraldo Margarita, Tllez Nohem y Gamboa Fredy. Evaluacin de la actividad
antimicrobiana de la fraccin activa Isertia laevis obtenida a partir de dos metodologas de extraccin sobre Streptococcus
mutans ATCC 25175 y Streptococcus sobrinus.Departamento de Qumica y Grupo de Fotoqumica. Departamento de
Microbiologa y Centro de Investigaciones Odontolgicas Facultad de Ciencias. Pontificia Universidad Javeriana Bogot,
D.C.
100
Se concluye que los extractos P70 del cacao fermentado, la fraccin de polmero
de epicatecina, t verde y las semillas de de uva roja fueron bacteriostticos que
evitaron la produccin de cido cuando fueron agregadas las concentraciones
mnimas a los cultivos Streptococcus mutans, desarrollados en un medio
qumicamente definido complementado con glucosa o con sacarosa,
tambin
Otra de las investigaciones realizadas son los efectos in vitro de extractos crudos
de la planta Qat sobre el crecimiento, colonizacin y las glucosiltransferasas del
Streptococcus mutans.
El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos in vitro de los extractos crudos
de Qat sobre el crecimiento del Streptococcus mutans y la colonizacin
dependiente de la sacarosa, actividad y produccin de glucosiltransferasa (GTF).
Para la realizacin se utilizaron tres variedades de Qat. Los extractos de Qat crudo
en solucin acuosa liofilizada fueron aplicados a los diferentes ensayos a
35
Smullen G.A. Koutsou H.A. Foster A. Zumb D.M. Storey. ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE LOS EXTRACTOS
VEGETALES QUE CONTIENEN POLIFENOLES CONTRA EL Streptococcus mutans. Biomedical Sciences Research
Institute, University of Salford, Manchester 2007.
101
aument la
36
Nezar Noor Al-Hebshi, yunn Nielsen y Nils Skaug. Efectos in vitro de extractos crudos de la planta Qat sobre el
crecimiento, colonizacin y la glucosiltransferasas del Streptococcus mutans. Department of Oral SciencesOral
Microbiology, Faculty of Dentistry, University of Bergen, Norway, Acta Odontologica Scandinavica, 2005; 63: 136142.
102
diterpnico,
cupresnico
caurenoico.
Se
evalu
la
actividad
de
hexano
inhibieron
significativamente
la
adherencia
de
Se concluye
en la
37
R. Yatsudaa, P.L. Rosalena, J.A. Curya, R.M. Murata, V.L.G. Rehderb, L.V. Melob, H. Kooc. Efectos de las plantas del
gnero Mikania sobre el crecimiento y la adherencia celular de los Streptococcus Mutantes. Journal of Ethnopharmacology
97 (2005) 183189.
103
Baccharis dracunculifolia
sobre la sntesis de
tuvieron
38
Da Silva leitao Denisee Pimenta, a ademar da silva filho, b ana cristina morseli polizello, a jairo kenupp bastos, b and
augusto Cesar cropanese spadaro. Comparative evaluation of in vitro effects of Brazilian green propolis and bacteris
dracunculifolia extracts on cariogenic factors of streptococcus mutans. Biol Pharm. Bull 27(11)1834 1839 (2004) vol. 27
No. 11.
104
105
glucosiltransferasa.
nicamente
la
Andrographis
paniculata,
Cassia
alata
Jittra limsong a, Benjavongkulchai b, Jintakorn Kuvatanasuchati. Inhibitory effect of some herbal extracts on adherence os
streptococcus mutans, Journal of ethnopharmacology 92 (2004) 281 289.
106
40
Almeida R.m. Murataa, R. Yatsudab m.h. dos Santos c, t.j. nagemd, s.m. alencare, h. Koof p.L. rosalena, antimicrobial
activity of rheedia brasiliensis and 7 epiclusianone Streptococcus Mutans. Phytomedicine vol 15(2008) bull 886 -891.
107
3.2
PLANTAS
de organismos
vulgaris),
la
manzanilla
(Matriarca
chamomilla)
la
guayaba
Los lugares y el nmero de grupos hidroxilo (OH) en el anillo parecen que estn
relacionados directamente con la toxicidad frente a los microorganismos, de forma
que un aumento en la hidroxilacin esta ligado a una mayor toxicidad. El
mecanismo parece
3.2.2 Quinonas. Las quinonas son anillos aromticos con dos funciones. Son
ubicuas en la naturaleza y causantes del color marrn que se produce en las
frutas cuando son daadas. Poseen una alta reactividad, formando complejos con
los aminocidos hidroflicos de las protenas, la mayora de las veces inactivando
la protena y anulando su funcin. Debido a esto, el potencial antimicrobiano de
este grupo es amplio. Un ejemplo es la hipericina, una atraquinona aislada de la
planta de San Juan (Hypericum perforatum), antiguamente utilizada como
antidepresivo.
tienen
propiedades
antiinflamatorias,
antitrombticas
3.2.5
3.2.6 Alcaloides.
D. Domingo y M. Lpez-Brea. Plantas con accin antimicrobiana. Sociedad Espaola de quimioterapia, Volumen 16 (N4):
385-393, Servicio de Microbiologa, Hospital Universitario de la Princesa, Madrid.
110
Grupo Qumico
Fenoles simples
Compuesto
Planta
Actividad
Timol
General
Streptococcus
aureus,
Streptococcus
Quinonas
cido antenico
Terpenoide
Ocimion basilicum
Salmonella
Hipericina
VIH
Bacterias y virus
Virus
Taninos
Flavonas
Alcaloides
vidrio,
Catequina
Camellia sinensis
Streptococcus mutans
Isoflavina
Millettia thonningii
Schistosoma
Quercitina
Coca
Piperina
Piper nigrum
Hongos, Lactobacillus
Mescalina
General
111
CAPITULO IV
Existe una variedad de mtodos que pueden ser utilizados para medir la
susceptibilidad in vitro de los microorganismos patgenos antimicrobianos, el de
uso ms comn en los laboratorios de microbiologa es la difusin en agar
estandarizado para microorganismos de crecimiento rpido y algunos de
crecimiento fastidioso. Para un resultado confiable con este test se debe trabajar
con una metodologa estandarizada y la medicin del halo de inhibicin debe
correlacionarse con la Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) de cepas con
susceptibilidad o resistencia conocida a varios antimicrobianos.
es necesario a veces
microorganismos (ausencia de turbidez) hasta llegar a una dilucin a partir del cual
comienza a haber un aumento de turbidez (desarrollo bacteriano). Definimos la
Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) como la concentracin mnima de un
antibitico que inhibe el desarrollo de una bacteria. No obstante si hacemos
subcultivos en placas con agar de los pocillos donde no hay turbidez podemos
observar:
a)
b)
Se han realizado una serie de investigaciones que utilizan las diferentes tcnicas
sobre
y el
42
116
4.1.4 Mtodo de difusin en pozo. En este mtodo, para cada caja de petri se
agregan 20 mililitros (ml) de agar Tripticasa Soya (TSA) o agar Muller Hinton,
inoculado previamente con el microorganismo a evaluar. Al solidificarse el agar,
se abren pozos de un dimetro de 0.5 mm con ayuda de una pipeta pasteur
esterilizada. Posteriormente se agregan las sustancias a evaluar en cantidades de
10, 20 o 40l. Las cajas de petri se incuban a 37C por 24 a 72 horas. Al cabo de
este tiempo se evidencia la actividad antimicrobiana, por medio de la presencia de
halos de inhibicin alrededor de los pozos43.
43
Ros J.L. Recio. M.C. & Villar A. Screening methods for natural products with antimicrobial activity: A review of the
literature. 1988. Jornal of Ethnopharmacology. Volumen 23: 127-149
117
5. DISCUSIN
Los extractos comerciales con una concentracin (1-2 mg/ml) extrados de la uva
roja, te verde y la endrina podran no ser muy efectivos contra el Streptococcus
mutans. De aqu el cuestionamiento acerca de que las sustancias que son de
origen popular, no siempre se obtienen en diluciones que se puedan comprobar de
manera homognea, resultando en una efectividad muy variable, por tanto a nivel
cientfico este tipo de variaciones siempre dejaran la fitoterapia a la sombra de la
alopata y no permitindole salir de la baja categora de pseudociencia.
118
organismo tienen que reunir unas condiciones ideales de uso teraputico, los
antibiticos utilizados deben ser txicos contra el microorganismo no contra el
paciente. Un buen antibitico debe tener una toxicidad selectiva alta (esto
involucra en parte la cantidad de Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI)), una
importante accin in vitro con una aproximacin exacta o similar en vivo.
El Qat (celastrus edulis) posee como principios activos dos poderoso alcaloides
psicotrpicos: la catina que poseen un alto efecto estimulante, a tal punto que la
Agencia Mundial Antidopaje, prohbe la catina en dosis mayores a 5 mg/mm, una
medida que bien podra estar cerca de una Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI)
razonable, la catina o catinona que segn la DEA figura dentro de la lista de
sustancias controladas en Estados Unidos ya que sirve como sustrato de una
poderoso medicamento.
119
Esto sera comparable con los resultados generados en el experimento del artculo
Uso del dispositivo de Robbins modificado y tincin fluorescente para analizar
extractos vegetales para ver la inhibicin de la formacin de biopelculas por parte
del Streptococcus mutans en el cual se muestra como cierto nmero de extractos
dentro del que se incluye el de t verde, tambin result efectivo en la inhibicin
de la formacin de biopelculas.
No queda muy claro si el uso de etanol en vez de etil acetato dentro de los
procedimientos del
Podra observarse tambin que el carcter alcaloideo del te verde y del Qat,
podran tener alguna relacin al fin y al cabo dentro de la fitoterapia, se reconocen
los alcaloides como principios activos importantes dentro de los tratamientos de
ciertas enfermedades, pero no es claro si esta relacin tenga algo que ver o no en
cuanto a lo relacionado con la enfermedad cariognica.
En cuanto al estudio con el Qat se dejo ver que no existieron resultados diversos
al tratar varias especies de la planta, lo que podra ser til en caso de que requiera
adaptar una determinada especie a las condiciones de cultivo en un rea fuera de
120
45
121
Estos guacos no deben ser confundidos con bejucos del gnero Aristolochia que
son marcadamente hepatotxicos, reciben el mismo nombre en algunos casos.
Pero se debe tener cuidado con la ingestin o con abuso de forma masiva de los
extractos de esta planta. Ya que en algunos guacos, las cumarinas alcanzan hasta
el 11% en especies de Mikania, lo cual puede ser relativamente riesgoso por las
actividades anticoagulantes de estas sustancias.
122
Coimbra, R. "Guaco: formas farmacuticas, usos e posologia." Notas de fitoterapia. Rio de Janeiro: L.C.S.A., 1942, 130.
123
Streptococcus mutans
La Harrisonia perforata tiene efectos similares a las dos plantas anteriores pero
tiene sus fallas en disminuir la actividad de la lectina. Si bien se da esta deteccin,
no puede dejar de considerarse dentro del grupo de las anticariodentales.
125
Un compendio muy bsico que relaciona las plantas y/o extractos que fueron
analizados en los artculos con respecto a su accin anticariognica se muestra a
continuacin:
126
Planta
Microorganismo
Concentracin
Mnima
Inhibitoria
(MIC)
(mg/ml)
Extractos de propanona
Streptococcus mutans
Extractos de t verde
Streptococcus mutans
Streptococcus mutans
Streptococcus mutans
Streptococcus mutans
Streptococcus mutans
0.5
Extracto de endrina
Streptococcus mutans
Qat
Streptococcus
mutans
UA159
Mikania laevigata
Streptococcus mutans
Baccharia dracunculifolia
Streptococcus mutans
Andrographis paniculata
0.0125 - 0.4
Streptococcus
mutans TPF-1
Cassia alata
Camellia sinensis
Psidium guayaba
Harrisonia perforata
Streptococcus
mutans
ATCC 25175
Streblus asper
Rheedia brasiliensis
Streptococcus mutans
127
0.025
Ntese que no se han tocado acciones sobre otros agentes antimicrobinos, tales
como los Lactobacillus y los Actinomyces, centrndose casi exclusivamente en los
efectos sobre el Streptococcus mutans.
La fitoterapia
47
Masatomo Hirasawa, Naoto Shouji, Tomotake Neta, Kazuo Fukushima and Kazuko Takada. Three kinds of antibacterial
substances from Lentinus edodes (Berk.) Sing. (Shiitake, an edible mushroom). Available online 8 March 1999.
128
formal dentro de un estudio pero de los que si se tienen indicios que no han sido
probados ante la rigurosidad cientfica como el extracto etanlico de propleo
peruano que merece seguir siendo estudiado ya que tiene una accin
antibacteriana que promete avances. Podemos incluir tambin las infusiones de la
Camellia sinensia o t verde el cual ya incluso es envasado comercialmente, del
cual ya se ha comprobado que remueve la microflora mixta salival.
130
6 CONCLUSIONES
distintos
lotes
de
especies
subespecies
132
de
similares
RECOMENDACIONES
133
134
GLOSARIO
plantas,
etc),
no
tienen
ncleo
ni
orgnulos
internos.
136
137
Metaboliza
la
sacarosa
para
producir
polisacridos
extracelulares
(Sustancia laxa que facilita su adhesin a las caras libres de las piezas
dentarias) e intracelulares (Metabolismo energtico). En estado de salud,
un recuento de estas bacterias en boca ser de menos de 100.000 UFC.
139
BIBLIOGRAFA
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mutans
por
papana
sanitrend.
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Chile,
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of
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