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PRUEBAS PRELIMINARES

Adecuacin del material


La idea es trabajar con una cantidad no muy grande para que no necesitemos mucha
cantidad de reactivos, por lo menos la cantidad suficiente para realizar de una vez la
caracterizacin y para darles los distintos tratamientos as que propongo triturar el
equivalente a 200 gramos de cscara de naranja, trabajar 150 gramos para obtener los
jarabes glucosados y 50 gramos para la caracterizacin.
Caracterizacin del material
Como se haba dicho vamos calcular humedad y materia seca inicialmente, si se puede
calcular pH y acidez sera muy chvere complementarlo, esto se har con los 50 gramos
restantes, es mucho lo s, pero es mejor que sobre y no que falte.
Deslignificacin
Los 150 gramos sern divididos en 3 partes, cada una de 50 gramos las cuales sern
sumergidas en NaOH 0.1 N, utilizaremos beackers de 500 o 600 mililitros para facilitar la
agitacin y que no se aglomeren las cosas. Necesitaremos por lo menos 750 mililitros de
NaOH para que las muestras queden sumergidas. Pasados 15 minutos vamos a adicionar
0,816 gramos de sulfato de calcio a cada muestra, agitamos y lo dejaremos reposar
durante 3 horas ms, obtendremos algo as:

Finalmente separaremos por decantacin, cabe decir que continuaremos trabajando con
los slidos (solamente les retiraremos lignina) y no con el lquido que filtraremos.
Hidrlisis
Adicionaremos 50 mililitros de cido sulfrico al 5% por cada 100 gramos de cscara,
partiendo de que arrancamos con 150 gramos de cscara eso equivaldra a 75 mililitros
de cido, podemos pedir 80 mililitros.
Las condiciones en la autoclave sern 125C y 15 psi, de igual forma en 3 beackers
estar el material. El proceso durar 15 minutos, se ver algo as:

Separaremos los jarabes obtenidos por centrifugacin, 2500 rpm por un periodo de tiempo
de 5 minutos, obtendremos algo como esto:

Fermentacin
Muchachos esta etapa es muy importante, nos garantizar el poder obtener al final un
mosto con una buena cantidad de etanol as que pilas.
Preparacin del mosto
En cuanto al mosto, tendremos que mirar el pH inicial del jarabe ya que debemos ajustar
el pH entre 4,5 5,0. En la metodologa que consultamos se aconseja con NaOH 5N
imagino que a tal concentracin no es mucho el que se necesita aplicar en comparacin
con NaOH 1N.

Necesitaremos como nutriente fosfato de amonio (NH4)3PO4 0,25% p/v, as que


utilizaremos 2,5 gramos por cada litro de material fermentable, como obviamente no
tendremos un litro de jarabe sino mucho menos (como mnimo unos 80 ml de jarabe)
necesitaremos muy poco inicialmente as que estara bien pedir 1,5 gramos.
Preparacin del inculo
Decid hacer la preparacin del inculo as porque como ya ven, no obtendremos mucho
jarabe fermentable as que sera ilgico utilizar jarabe para activar pudiendo utilizar azcar
comercial, lo haremos as:
Se prepara un medio de activacin con 40 gramos de sacarosa, 250 ml de agua a 35C
para 175 gramos de levadura. Una vez activada la levadura inocularemos una
concentracin aproximada de 0,5 a 1 gramo de levadura por litro de material fermentable
(0,1% de levadura activa p/v), inoculando a la mitad del lquido fermentable recolectado.
Para realizar la fermentacin lo podemos hacer en un beacker de 250 ml en
anaerobiosis recordando que debemos mantenerlo en agitacin a 200 rpm por lo
menos durante 5 horas controlando el pH y la temperatura de la fermentacin alcohlica.
Debemos muestrear cada 90 minutos durante 7 horas y posteriormente a las 24 horas.
Qu cosas muestrear? pH, temperatura, grados Brix, grados de alcohol y lo que alguno
de ustedes considere necesario.
Destilacin
Con el mosto final resultante de la fermentacin haremos microdestilacin en un equipo
tradicional de laboratorio.
Esta experiencia consiste en la separacin de una mezcla, a nosotros nos interesa el
etanol, su punto de ebullicin es 78,37C as que con esto sabremos a qu temperatura
empezaremos a obtener etanol en el destilado.