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DOSAGEM DA PROTEINRIA

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FUNDAMENTO
Em meio cido, as protenas reagem com o vermelho de pirogalol e o molibdato formando um
complexo colorido, cuja absorbncia medida em 600 nm, diretamente proporcional concentrao de
protenas na amostra analisada.
APLICAO CLNICA
A dosagem de Protenas na Urina empregada principalmente para avaliar doenas renais.
Sua determinao no lquor auxilia na abordagem laboratorial de doenas neurolgicas.
AMOSTRA
Preparo do Paciente
Instruir o paciente como coletar corretamente a urina de 24 horas.
Amostras utilizadas
Urina e Lquor.
Coletar a urina, medir o volume e conserv-la entre 2-8C.
Estabilidade e armazenamento da amostra
Na urina, o analito estvel por 8 dias entre 2-8 C.
Amostras de lquor so estveis 4 dias entre 2-8C.
Volume ideal utilizado para anlise
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise).
Volume mnimo utilizado para anlise
(Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise).
Critrios para rejeio da amostra
No usar amostras de lquor com presena de sangue.
Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material.
REAGENTE UTILIZADO
PROTEINRIA-PP

CAT. 498

MS 80022230078

GOLD ANALISA DIAGNSTICA LTDA

CNPJ 03.142.794/0001-16
Av. Nossa Senhora de Ftima, 2363
Belo Horizonte MG Brasil
Farmacutica Responsvel: Ludmilla Parreiras Campos CRF-MG 5463
Componentes do kit
Conservar entre 2-8C.
1- Padro - Contm Albumina bovina 50 mg/dL. O Padro rastrevel ao Standard Reference Material
SRM 927 do National Institute of Standards and Technology NIST.
2- Reagente de Cor Contm Tampo pH 2,3, vermelho de pirogalol 60 mol/L, molibdato sdico 40
mol/L, succinato 50 mmol/L, lauril sulfato de sdio 1 g/L.
Estabilidade
Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa no rtulo do produto e na
caixa quando conservados na temperatura recomendada, bem vedados e se evite a contaminao
durante o uso.
Sinais de deteriorao
1- Presena de partculas e turbidez indicam deteriorao dos reagentes.
2- A absorbncia do Reagente de Cor medida contra gua em 600 nm dever ser inferior a 0,290 e
superior a 0,170.
Precaues e Cuidados Especiais
1- Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos reagentes e amostra biolgica.
2- Recomendamos o uso das Boas Prticas de Laboratrios Clnicos para a execuo do teste.
3- De acordo com as instrues de biossegurana, todas as amostras deve m ser manuseadas como
materiais potencialmente infectantes.
4- Aconselhamos no pipetar diretamente do frasco do Reagente de Cor (2) para evitar contaminao.

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5- Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resolues normativas locais, estaduais e

federais de preservao do meio ambiente.
EQUIPAMENTOS
Procedimento Tcnico Manual
Espectrofotmetro (leitura em 600 nm 20 nm);
Tubos e Pipetas;
Banho-maria ou termostatizador;
Cronmetro.
Procedimento Tcnico Automatizado
Citar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento; Fazer referncia ao manual ou POP
para utilizao do mesmo.
Procedimento Tcnico Alternativo
Citar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Indicar as possveis
diferenas quando os procedimentos manuais substiturem os procedimentos automatizados.
Procedimento em Analisadores Automticos
Mencionar o manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de aplicao dos
reagentes para o sistema automtico.
Interferncias
A hematria produz resultados falsamente elevados.
A presena de detergentes na vidraria pode alterar significativamente os resultados.
PROCEDIMENTO
Procedimento Manual
A- Condies de Reao
Leitura: Comprimento de onda 600 nm (580 a 620 nm)
Medida: Acertar zero de absorbncia com o tubo Branco
Tipo de reao: Ponto final.
B-Tcnica de Anlise
Ateno:
Centrifugar as amostras para obteno de melhores resultados.
1- Identificar os tubos de ensaio e pipetar:
Tubos
gua destilada

Branco
50 L

Amostra

Padro (1)

Reagente de Cor (2)

Teste

50 L

1000 L

Padro

1000 L

50 L
1000 L

2- Homogeneizar e incubar os tubos durante 5 minutos a 37C.

3- Ler a absorbncia do Padro (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com o Branco em 600 nm.
4- A cor estvel durante 30 minutos.
CLCULOS
Ver Linearidade.
Concentrao do Padro = CP
CP = 50 mg/dL.
Absorbncia do Padro = AP
Concentrao do Teste = CT
Absorbncia do Teste = AT
Exemplo
Se AP = 0,412
Se AT = 0,466
CP = 50 mg/dL
FC = CP AP = 50 0,412 = 121

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CT = FC AT = 121 0,466 = 56, 4 mg/dL = 56 mg/dL

Proteinria em mg/ 24horas
Se volume urinrio de 24 horas = 1300 mL
mg/ 24 horas = mg/dL Volume urinrio de 24h em mL
100
mg/24 horas = 56 1300 = 728 mg/24h
100
Proteinria = 728 mg/24h
2- Dosagem no Lquor
Dosar as protenas do lquor empregando o mesmo procedimento da urina.
Exemplo
Se AP = 0,412
Se AT = 0,225
CP = 50 mg/dL
FC = CP AP = 50 0,412 = 121
CT = FC AT = 121 0,225 = 27 mg/dL
Protenas no lquor = 27 mg/dL
Ateno
Esta tcnica de dosagem adequada para fotmetros cujo volume mnimo de soluo para leitura
igual ou menor do que 1000 L.
O analista sempre deve fazer uma verificao da necessidade de ajuste do volume para o fotmetro
empregado no seu laboratrio.
Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados proporcionalmente, sem alterar o
desempenho do teste e os clculos. Em caso de reduo dos volumes necessrio observar o volume
mnimo de leitura fotomtrica.
Volumes da amostra menores do que 10 L so crticos em aplicaes manuais e devem ser usados
com cautela porque aumentam a impreciso da medio.
RESULTADOS
No aplicvel.
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nmero de
catlogo.
Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados.
Controle Interno
Descrever a calibrao peridica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura
ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits.
Citar a utilizao de soros controles (nvel normal cdigo --------- e patolgico cdigo -------) nas
anlises realizadas juntamente com a freqncia da utilizao dos mesmos. Descrever o procedimento
de verificao de novos lotes de controles e reagentes.
Citar POP para controle interno.
Controle Externo
Descrever os procedimentos utilizados nas avaliaes de qualidade feitas por programas de
comparao entre laboratrios ou outros controles de qualidade: PNCQ-SBAC e/ou PELM-SBPC
Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e Externo
Definir como os dados de controle so arquivados e gerenciados.
Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade.
VALORES DE REFERNCIA
Urina Crianas e adultos
Urina de 24 horas: at 150 mg/24horas
Amostra aleatria: at 15 mg/dL

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Lquor
Adultos: 15 a 45 mg/dL
Crianas e adolescentes
At 30 dias: 0 a 153 mg/dL
De 31 a 90 dias: 15 a 93 mg/dL
At 2 anos: 15 a 48 mg/dL
Acima de 2 anos: 15 a 45 mg/dL
Estes valores devem ser usados como uma orientao. recomendado que cada laboratrio
estabelea seus prprios valores de referncia.
SIGNIFICADO CLNICO
Esta dosagem utilizada na avaliao de enfermidades renais.
A eliminao de protenas pela urina um indcio de disfuno renal.
Na sndrome nefrtica h um comprometimento renal em nvel de glomrulo, onde ser observada uma
alterao capilar glomerular.
A sndrome nefrtica causada por doenas sistmicas, neoplasias, distrbios circulatrios, drogas etc,
onde ser observada uma alterao na membrana filtrante glomerular e uma fuso e perda dos
processos podais, espessamento da membrana basal que ter como conseqncia hipermeabilidade
(passagem excessiva de protenas-proteinria).
LINEARIDADE
A reao linear at 100 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra com NaCI 150mmol/L(0,85%) e
repetir a determinao. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
LIMITAES DO MTODO
Os resultados devero ser usados em conjunto com informaes disponveis da avaliao clnica e
outros procedimentos diagnsticos.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4 a Ed - Guanabara Koogan; 1998.
2- Gornall AG, Bardawill CS, David MM. J Biol Chem 1949; 177:751.
3- Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques, Philadelphia:
Lea & Febiger 1988:145-166.
4- Orsonneau JL et al. Clin Chem 1989; 35:2233-2236.
5- Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry. W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1970.
6- Watanabe N et al. Clin Chem 1986; 32:1551-1544
7- Weichselbaun TE. Am J Clin Path 1946;10:49.
8- PROTEINRIA-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica.

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