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BIOTECNOLOGÍA
9no. Semestre
FEBRERO 2010
UNIVERSIDAD INTERNACIONAL SEK
Biotecnología
Problema:
Dentro del Ecuador existen varios pasivos ambientales que han sido identificados, sin
embargo no se han gestionado por diferentes causas, una de ellas es la ausencia de control
por parte de las autoridades.
Antecedentes:
Uno de los ejemplos más polémicos que todavía enfrenta el Ecuador, es el daño
ambiental que provocó la empresa Estadounidense Texaco, la cual operó dentro del
Ecuador entre los años 1964 y 1992 en las provincias de Sucumbíos y Orellana.
La compañía realizó sus operaciones en Ecuador de un modo que antes utilizó
rutinariamente para petróleo y almacenamiento de desechos. Texaco perforó
aproximadamente 340 pozos en el área de concesión, y cada pozo poseía
aproximadamente dos o cinco piscinas de tierra que fueron usadas para almacenar el lodo
de la perforación, el petróleo crudo y sus derivados necesitados para el mantenimiento
del pozo. (Powers et al, 2006)
Así como el caso de Texaco existen muchos otros casos por parte de las petroleras
transnacionales que han operado en los diferentes bloques dentro de la amazonía
ecuatoriana, donde se encuentra el recurso no renovable para ser explotado y producido.
(Ver Anexo1).
Justificación:
El presente proyecto se ha desarrollado para buscar las soluciones más adecuadas que
servirían para gestionar pasivos ambientales que se encuentran en territorio amazónico
del Ecuador, los cuales han sido producto de fallas técnicas y humanas.
Ambiental, el cual incluye varios Planes que deben cumplirse dentro de un plazo
establecido (Art. 17).
Sin embargo, es importante además tomar en cuenta al Reglamento Ambiental para
Operaciones Hidrocarburíferas en el Ecuador (RAOHE) ya que todas las empresas que
operan con hidrocarburos se rigen a este reglamento. Cabe recalcar que el mismo no hace
referencia en ninguno de sus artículos la remediación de pasivos, sin embargo si recalca
en sus artículos 41 y 42 que todas las Operaciones Hidrocarburíferas están sujetas a la
presentación ante la entidad de control de Estudios de Impacto Ambiental que incluya un
Plan de Manejo Ambiental (PMA) y también a Auditorías Ambientales para la
evaluación del respectivo PMA.
Además, esta norma jurídica exige dentro de sus anexos a cumplir con diferentes límites
permisibles en caso de remediación de suelos contaminados en todas las fases de la
industria hidrocarburífera. (Anexo # 2)
Objetivo General:
• Determinar el bioproceso más factible para dar gestión a pasivos ambientales
consecuentes a derrames de crudo.
Objetivos Específicos:
• Obtener información a través de fuentes secundarias sobre métodos de
remediación biológica para gestionar suelos contaminados con contaminantes
recalcitrantes.
• Analizar diferentes métodos de remediación biológica y comparar sus resultados
para obtener discusiones y conclusiones.
Alcance:
• Determinar el método de remediación biológica más factible para gestionar
pasivos ambientales procedentes de derrames de crudo en suelos limo-arenosos y
limo arcillosos, los cuales son parte de la Amazonía ecuatoriana.
MARCO TEÓRICO:
MÉTODOS BIOLÓGICOS:
Pentaclorofenol Hexaclorobenceno
(Rápidamente degradable) (Persistente)
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Biotecnología
CONTAMINANTES RECALCITRANTES
Los suelos contaminados por hidrocarburos y que han pasado un largo periodo sin una
gestión adecuado, se conocen generalmente como suelos intemperizados. Éstos
contaminantes llegan a ser inaccesibles para microorganismos debido a las interacciones
(puentes de hidrógeno) que se producen entre los contaminantes y la materia orgánica
(Jonge y col., 1997).
Los solventes no polares y los surfactantes no iónicos deben ser tomados muy en cuenta
en casos de pre-tratamientos a suelos intemperizados contaminados con crudo, ya que se
consideran productos más amigables con el ambiente, por ende son más biodegradables
que solventes polares. Cabe recalcar que muchas de las cepas tanto comerciales como
nativas, pueden inhibirse por aplicación de surfactantes no biodegradables y
consecuentemente, el proceso de remediación biológica del suelo no sería eficiente.
(Volke et al, 2003)
Varios han sido los proyectos que utilizaron bacterias nativas, obteniendo resultados
favorables (26-35 %) en 90 días de cultivo (Chaineau y col, 1995), encontraron un 75%
de degradación de HTPs en un suelo contaminado (2,000 ppm). Sin embargo en varios
proyectos piloto se han obtenido resultados con un alto porcentaje de eficiencia,
aplicando procesos de composteo.
Por otra parte, la bioestimulación, la cual es otro tratamiento que va de la mano con la
bioaumentación; consiste en la adición de nutrientes, sustratos o tensoactivos que estimulen
el crecimiento y actividad metabólica de los microorganismos degradadores presentes en la
zona impactada (Nuñez et al, 2002), incorporando una fuente de Nitrógeno, una fuente de
Fósforo y minerales que mejoran apropiadamente el PH, para mantener activa la flora
bacteriana activa que va a biodegradar el contaminante (SolBio, 2009).
MARCO METODOLÓGICO:
Cada porción de suelo tratado se mezcló con cuatro aditivos (bagazo de caña, de
zanahoria, estiércol de caballo y composta) con el objeto de incrementar el contenido de
nutrientes y de microorganismos en los sistemas de composteo utilizados (biopilas
alargadas). Las tres biopilas con suelo tratado, más una biopila control con suelo sin tratar
(30 kg/biopila), se mantuvieron protegidas de la intemperie durante 206 días y se
realizaron muestreos periódicos para determinar la eficiencia de cada tratamiento en la
biodegradación de los hidrocarburos (HTP) presentes en el suelo. (Volke et al, 2003)
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Estos agentes se seleccionaron con el criterio de que fueran residuos biodegradables sin
valor agregado y con facilidad para su obtención. Cada uno, se adicionó al suelo en
proporción tal que, de acuerdo al contenido de C, N, P y K de cada uno, se obtuviera un
balance de nutrientes apropiado (C/N= 30, C/P=100 y C/K=200). (Volke et al, 2003)
Biopilas:
Cada biopila se preparó con 9 kg (peso seco) de suelo pretratado, adicionado con 1.125
kg (peso seco) de cada agente de volumen. Se prepararon 3 biopilas diferentes, con el fin
de evaluar el efecto de cada pretratamiento, más una biopila control con suelo sin tratar.
Una vez que se mezcló el suelo con los agentes de volumen, y el azúcar (sacarosa)
necesaria para ajustar la relación C/N a 28, el material de cada biopila se colocó en
recipientes de plástico (capacidad para 50 kg) y se adicionó agua suficiente para obtener
una humedad cercana al 50%. Las biopilas se identificaron como sigue: 1) control (suelo
sin tratar); 2) electroquímico (tratamiento electroquímico); 3) surfactante (tratamiento
con surfactante); 4) tolueno (tratamiento con tolueno).
El peso total final para cada biopila fue de alrededor de 30 kg (peso húmedo). Todas las
unidades experimentales (recipientes con el material a compostear) se mantuvieron a
temperatura ambiente (en un invernadero) durante siete meses. Por otra parte, cada
unidad experimental fue periódicamente (cada 30 días) adicionada con bagazo de
zanahoria (5% del peso de la pila), con la finalidad de mantener un cierto contenido de
materia orgánica de fácil asimilación y de esta forma asegurar la actividad y diversidad
de la población microbiana.
Conteo de microorganismos:
Muestra de suelo: 3 g.
Diluciones: 1:10 (volumen: 30 mL) w
Repeticiones por dilución: 3
Tiempo de incubación: AST: 2 días;
PDA 5 días w Temperatura: 30 °C
Criterio para el conteo de colonias: 20-200 por caja.
Las muestras tomadas en campo, fueron tomadas de suelos intemperizados, que eran
parte de pasivos ambientales. Se incubaron a 30°C por un periodo de 24 a 48 horas hasta
observar desarrollo bacteriano.
Las colonias que crecieron en Medio de Cultivo Selectivo fueron aisladas en Agar
Nutritivo. Para determinar la pureza de las colonias se prepararon placas y se utilizó
tinción de GRAM (Montero, 2005). De las colonias puras se realizaron descripciones
macroscópicas y microscópicas para poder determinar pruebas bioquímicas para su
identificación (Garrity, 2001).
El consorcio seleccionado fue conformado por seis cepas de los géneros Bacillus,
Pseudomonas, Aeromona, Burkholderia y Brevibacillus, con capacidad degradadora de
hidrocarburos y actividad emulsificante. Se estableció el tratamiento de 50 m3 de suelo
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Biotecnología
Para la bioestimulación se utilizó: Urea (46% N) y Fertilizante 18:48:0 (18% N, 46% P).
Se consideró una relación óptima Carbono:Nitrógeno:Fósforo de 100:10:1 en base a
ensayos previos realizados por este grupo de investigadores.
Actividad Degradadora de
Actividad
Cepa Hidrocarburos
Emulsificante (U.E)
(McFarland)
Bacillus mycoides SA2 1 2.390
Pseudomonas
6 2.316
fluorecens
Burkholderia gladioli 10 1.393
Bacillus lentus 5 1.707
Bacillus mycoides SA3 3 1.705
Bacillus mycoides SA
7 1.358
1
Cabe recalcar que diferentes proyectos de este tipo, después de varias investigaciones de
aislamiento de microorganismos para degradar hidrocarburos, han concluido que el
microorganismo Bacillus sp., aislado demuestra tener una alta capacidad para degradar
hidrocarburos en suelo contaminado, favoreciendo este proceso en consorcio con los
microorganismos autóctonos del suelo. (Gómez W et al, 2009)
Costos:
Bioremediación $ 20 - $ 60
(SolBio, 2009)
Discusión y Resultados:
Compostaje:
Por los resultados obtenidos en el proyecto pilos, se puede sugerir el uso del composteo
como un método semieficiente para la biodegradación de HTP en suelos contaminados,
además de la posibilidad del empleo de desechos domésticos, alimenticios, agrícolas
(estiércoles) y lignocelulósicos, lo cual implica una opción económica y factible para las
condiciones del país.
Bioestimulación y Bioaumentación.
bioestimulación
Conclusiones:
Bibliografía:
http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ARCHIVOS/documentos/congresos/algal20
08/memorias-cd/archivos%20pdf/biotec-ambiental/B_Orales/BO-04.pdf
• Powers, et al., Análisis Crítico del Caso Texaco: Sumisión 2., El MANEJO DE
DESECHOS DE TEXACO EN ECUADOR FUE ILEGAL Y VIOLO LOS
ESTANDARES DE LA INDUSTRIA. Disponible en:
http://www.etechinternational.org/new_pdfs/chevron_texaco/CustomaryPractices
Annex_Submission2_FINALSpan.pdf
ANEXOS
ANEXO # 1
ANEXO # 2:
(RAOHE 1215)
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Biotecnología
ANEXO # 3:
Subprogramade
Subprograma deGestión
Gestióndede
Informaciónsobre
Información sobrepasivos
pasivos
ambientalesyysociales
ambientales sociales
Programade
Programa de
Mejoramiento Subprogramade
Subprograma de
Mejoramiento fortalecimiento
fortalecimiento
deCapacidades
de Capacidades institucional
institucional
Institucionales
Institucionales
Subprogramade
Subprograma de
Remediación de sitios
Remediación de sitios
contaminados
Programade
Programa de contaminados
Reparaciónde
Reparación de
Pasivos
Pasivos Subprogramade
Subprograma de
Ambientales
Ambientales recuperaciónecológica
recuperación ecológicade
de
sitiosremediados
sitios remediados
Plande
Plan de
Reparación
Reparación Subprogramade
Subprograma
la reducción
deApoyo
de
Apoyoaa
factores
la reducción de factores
Ambientalyy
Ambiental Programade
Programa de deriesgo
de riesgopara
paralalasalud
salud
parahogares
para hogaresafectados
afectados
Social
Social Reparaciónde
Reparación de
Pasivos
Pasivos Subprogramade
Subprograma de
Sociales
Sociales Promoción compensatoria
Promoción compensatoria
dealternativas
de alternativas
productivas parahogares
productivas para hogares
afectados
afectados
Subprogramade
Subprograma deApoyo
Apoyo
compensatorioaa
compensatorio
iniciativaspara
iniciativas paralala
recuperacióndel
recuperación del
patrimonio cultural
patrimonio cultural
tangibleeeintangible
tangible intangible
afectado
afectado
(PRAS, 2009)