UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

SANTA
FACULTAD DE INGENIERIA
E.A.P AGROINDUSTRIAL
DETERMINACION DE BACTERIAS AEROBIOS MESOFILOS
VIABLES

CURSO

: MICROBIOLOGIA

DOCENTE

: BLGO.MBLOGO. ETERIO ALVA

MUOZ

ALUMNA

: MUOZ ROJAS ANDREA

GISELA
CODIGO

CICLO:

: 0201212035

IV

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FACULTAD DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL

NUEVO CHIMBOTE - PER

I.

201
3

INTRODUCCION

El recuento aerbico en placa (APC) tiene propuesto indicar el nivel

de microorganismos en un producto. Los procedimientos detallados
para determinar el APC de alimentos han sido desarrollados por la
Asociacin e Qumica Analtica Oficial (AOAC) y la Asociacin
Americana de Salud Pblica (APHA). El mtodo convencional de
recuento en placa para examinar alimentos congelados, helados, precocidos o preparados, se ajusta a los Mtodos de Anlisis Oficial de la
AOAC, sec. 966.23, con un cambio relativo al procedimiento.
Segn la FDA el rango apropiado del recuento de colonias es de 25250 Adems del mtodo convencional tambin utiliza el mtodo
automatizado de recuento en placa es espiral para la examinacin de
alimentos y cosmticos, se ajusta a los Mtodos de Anlisis Oficial de
la AOAC, sec 977.27. A diferencia del ICMSF el rango apropiado del
recuento de colonias esta entre 30-300 colonias ufc/ml. Adems de
ello existe otra diferencia en el clculo de resultados como se podr
apreciar
mas
adelante.
La mayora de los alimentos (industrializados excepto, por ejemplo los
productos fermentados deben ser considerados inadecuados para el
consumo cuando se tiene un gran nmero de microorganismos, aun
cuando estos microorganismos no sean conocidos como patgenos y
no hayan alterado de manera apreciable las caractersticas
organolpticas del alimento. Pueden darse varias razones que
justifican esta conducta.
Estables a menudo indican materias primas contaminadas o
tratamientos no satisfactorios desde el punto de vista sanitario,

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mientras que los productos perecederos pueden indicar tambin

condiciones inadecuadas de tiempo/temperatura durante su
almacenamiento. La presencia de un nmero elevado de bacterias
aerobias mesofilas que crecen bien a temperatura corporal o prxima
a ella, significa que puede haberse dado las condiciones favorables a
la multiplicacin de los microorganismos patgenos de origen
humano
o
animal.
Algunas cepas de bacterias mesofilas comunes, no generalmente
consideradas como agente de enfermedades transmitidas por los
alimentos (por ejemplo, Proteus, sp, enterococos y pseudomonas
mesofilas) han sido sealas como causa de enfermedad cuando
exista un nmero elevado de clulas viables en los alimentos.
Todas las bacterias patgenas conocidas vehiculadas por alimentos
son mesofilas y en algunos casos contribuyen con su presencia a los
recuentos
en
placa
encontrados.
Cuando la alteracin de los alimentos es debida al desarrollo en ellos
de microorganismos, la causa ms frecuente de alteracin, debe
esperarse en los mismos recuentos elevados. Los niveles de
poblacin precisos para producir modificaciones organolpticas
ostensibles varan ampliamente segn el tipo de alimento y, de modo
particular, la clase me microorganismo.
En el momento en que la descomposicin puede ser detectada por el
olor, gusto o el aspecto, la mayora de los alimentos contienen ms
de 10 6 microorganismos.

II.

OBJETIVOS:
Conocer el nmero de microorganismos aerobios mesfilos que

contiene un alimento.
Familiarizarse con mtodos

directos para la obtencin de

microorganismos utilizando el mtodo de recuento de colonias

en placa.
Determinar si el producto alimenticio que se analiza est en
condiciones aptas para el consumo humano.

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Determinar cuntos microorganismos presenta la muestra que

analizamos.

III.

MATERIALES:
Material Biolgico muestra lquida:
Jugo de Soya.
Material de laboratorio:
Medio de cultivo: Agar de
reecuentro
Pipetas: (1ml y 10
ml).
11 Placas Petri.
Ansa calibrada
Estufa (29 - 31 C).
Tubo de dilucin.

IV.

PROCEDIMIENTO:
a) Preparacin de la muestra:
i) Si es muestra liquida se deber guardar en refrigeracin
antes de el anlisis correspondiente, para disminuir el
metabolismos bacteriano. Y se deber medir en mililitros.
ii) Si a muestra es solida o semislida y est congelada,
debemos esperar a que se descongele a medio ambiente.
iii) Si la muestra solida o semislida se encuentra a T
ambiente, se proceder con el anlisis.
iv) Para diluir las muestras solidas es necesario licuarlas, tal
es el caso de las verduras. Y luego se pesara.

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v) Las diluciones se debern preparar de la siguiente

manera:
Para muestras liquidas:
De la muestra madre sacar 3 ml y diluirlos en 27 ml

de agua Peptonada.
Luego pasar un 1 ml a cada tubo con 9 ml de agua
Peptonada, hacer progresivamente hasta llegar a la
dilucin 10-3.

vi)Mtodo de Superficie:

1 ml de
muestra
+
9 ml de agua

pept.

10-

10-

10-3

De la

dilucin 10-, sacamos 1 ml y hacemos las

diluciones hasta 10-6.

Luego en una placa servida con Agar Plate Count,
agregamos 1 ml sobre la superficie.
Inmediatamente procedemos a expandir el mililitro sobre
la superficie con la esptula de Drigalsky.
Con fines de la prctica solo se trabaja hasta la
dilucin 10-3 y con tan solo 1 placa por dilucin.

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9 ml

10-2
10-1
1 ml de jugo de soya + 9 ml de Agua Peptonada al 0.1%

A
Se
extiende
mililitro
sobre
superficie
de
placa
con
esptula

el
la
la
la
de

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Procedimiento del mtodo a Profundidad

Hasta la dilucin
10--3

De la dilucin 10-
sacamos 1 ml y lo
pasamos al tubo
siguiente

Del tubo con la dilucin

10--2 sacamos 1 ml y lo
pasamos al tubo
siguiente

Agregamos 1ml de
cada dilucin a sus
respectivas placas
coma Agar de

Con la esptula de
Drigalsky
extendemos la
muestra sobre toda
la superficie de la

Dilucin
10--3
C

MTODO

CONTEO x TIEMPO
24 H
Total

48 H

Promedio

Total

Promedio

Incontable

----------

Por superficie
10-1

Incontable

----------

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V.

10-2

200

250

10-3

18

20

Incontable
19

143

150

147

RESULTADOS

10-1

10-2

10-3

En un recuento aproximado de las placas encontramos los

X conteo
Multiplicado x
Inversa de su [ . ]
siguientes resultados.

10-1
2000
20000

10-2
200
20000

10-3
20
20000

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Vemos que al multiplicar por la inversa de su concentracin

hallamos la misma cantidad de colonias, es decir la cantidad
que se encuentra en cada placa son equivalentes entre ellas.
Las distintas cantidades halladas se debe a las distintas
concentraciones, la explicacin a esta en la siguiente tabla.

jugo

10-1

10-2

10-3

Ya que para cada dilucin, se saca de la anterior dilucin , cada

ves es menos rico en protenas por tanto no crecern muchos
Microorganismos conforme se diluya ms.

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VI.

VII.

CONCLUSIONES

El recuento estndar en placa, permite determinar el nmero de

microorganismos contaminantes encontrados en la muestra.

Los microorganismos aerobios mesfilos son indicadores de

alteracin segn la normativa del peruano, ms no indicadores de la
calidad higinica.

La muestra de refresco casero trabajada en laboratorio no ha estado

sumamente contaminada, ya que los valores obtenidos se
encuentran dentro del rango normal para la normativa que rige en el
Per para el consumo de alimentos.

BIBLIOGRAFIA
http://nuevosenderos.blogspot.com/2010_04_01_archive.htm
l
http://www.imbiomed.com/1/1/articulos.php?
method=showDetail&id_articulo=23723&id_seccion=269&id
_ejemplar=2436&id_revista=46
http://es.scribd.com/doc/108993112/DETERMINACION-DEBACTERIAS-AEROBIOS-MESOFILOS-VIABLES
http://www.analizacalidad.com/docftp/fi189arm2004-4(2).pdf