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RESUMEN
En los ltimos aos se ha demostrado que las bacterias contienen un nmero de estructuras del
citoesqueleto. Los elementos citoplasmticos bacterianas incluyen homlogos de los tres tipos
principales de protenas eucariotas citoesqueleto (actina, la tubulina y protenas de filamentos
intermedios) y un cuarto grupo, el grupo MinD-Par, que parece ser nica para las
bacterias. Las estructuras del citoesqueleto desempean un papel importante en la divisin
celular, la polaridad celular, la regulacin de la forma celular, la particin de plsmido, y otras
funciones. Las protenas se auto-ensamblan en estructuras filamentosas in vitro y forman
estructuras ordenadas intracelulares in vivo. Adems, hay una serie de elementos filamentosos
bacterianas que pueden resultan ser del citoesqueleto en la naturaleza. Esta revisin pretende
resumir e integrar la in vivo e in vitro aspectos de estos sistemas y para evaluar las probables
futuras orientaciones de este campo de investigacin activa.
INTRODUCCIN
Es realmente impresionante que en un plazo de 5 aos, una "verdad" de larga data acerca de una
de las principales formas de vida del planeta se ha volcado. Aunque haba habido indicaciones
anteriores de estructuras organizadas dentro de las clulas bacterianas ( 18 , 139 , 209 ),
incluyendo la demostracin por Bi y Lutkenhaus que el homlogo de la tubulina FtsZ forma una
estructura similar a un anillo en el sitio de divisin ( 15 ), el perodo de rpido antelacin
comenz con el descubrimiento por Jones et al. en 2001 que los homlogos de actina
bacterianas en Bacillus subtilisse organizan en estructuras helicoidales extendidos que juegan un
papel clave en la regulacin de la forma celular (95 ). Desde entonces, la sentencia de que las
bacterias no han de largo alcance estructura interna ha sido sustituida por la realizacin de que
el interior de la clula bacteriana contiene un gran nmero de elementos del citoesqueleto
organizados, probablemente con un grupo mucho mayor de los componentes del citoesqueleto
asociado todava sea descubierto. Especialmente impresionante es la gran cantidad de
implicar el citoesqueleto. En su caso, remitimos al lector a los ltimos comentarios sobre estos
temas.
Higo. 1.
Comparacin estructural de las protenas del citoesqueleto eucariotas y procariotas.Estructuras de
protenas fueron descargados de la Protein Data Bank (PDB) (http://www.rcsb.org/pdb/ ) y alineados
utilizando el servidor EMBL-EBI Dal (http://www.epi.ac.uk/dali/ ). Protena ...
para
la
viabilidad
celular
prdida
de
viabilidad
de E. coli MreB clulas pueden ser suprimidos por la modesta sobreexpresin del gen de la
divisin celular esencial FtsZ ( 107 , 188 ). Se sugiri que esto refleja la necesidad de ms FtsZ
debido al mayor volumen de las clulas MreB empobrecida esfricas ( 107 ). Es posible que los
viables MreB cepas mutantes que han sido aislados contienen elevados niveles de FtsZ celulares
debido a mutaciones supresoras secundarias.
crescentus ,
y Rhodobacter
sphaeroides se
ha
descrito
( 53, 60 , 95 , 108 , 187 , 191 ). En todos los casos las protenas se organizan en estructuras
filamentosas helicoidales que se enrollan alrededor de la clula en forma de barra, como se
muestra por microscopa de inmunofluorescencia y microscopa de fluorescencia de clulas que
expresan fusiones de las protenas a la protena verde fluorescente (GFP) o uno de sus
derivados, tales como protena fluorescente amarilla (YFP) (. Fig 2A y B ). Las estructuras en
espiral extendidas se encuentran en la superficie inferior de la membrana citoplasmtica y se
extiende a lo largo de toda la longitud de la clula. En algunos casos, las estructuras se
componen de dos hlices entrelazadas (Fig. (Figura 2B2B ).
Higo. 2.
Localizacin y funciones de la protena MreB-actina como. (A a D) localizacin celular de
MreB marcado con GFP o YFP. (A a C) E.coli MreB localiza en bobinas extendidas (A),
dobles hlices entrelazadas (B), y las estructuras en forma de banda (C). (Reproducido ...
Localizacin y funciones de la protena MreB-actina como. (A a D)
localizacin celular de MreB marcado con GFP o YFP. (A a C) E. coli MreB
localiza en bobinas extendidas (A), dobles hlices entrelazadas (B), y las
estructuras en forma de banda (C). (Reproducido de la referencia 187 , con
autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional de Ciencias,
EE.UU.) (D) C. crescentus MreB localiza en una estructura similar a una
banda en el sitio de divisin en las clulas predivisional. (Reproducido de la
referencia 60 con permiso del editor. Copyright 2004 Academia Nacional de
Ciencias, EE.UU.) (E) la segregacin de cromosomas en E. coli MreB
supresin cepa (Y.-L. Shih, sin publicar). Los defectos incluyen mltiples
cromosomas desordenados y particin cromosoma desigual en las clulas
hijas (1 clula), la produccin de clulas anucleadas (celulares 2), y la
fragmentacin cromosmica presumiblemente debido a guillotinar del
nucleoide (3 celdas). El ADN bacteriano (rojo) est manchado con DAPI;
membrana (verde) se tie con FM4-64 [ N - (3-triethylammoniumpropyl) 4 (6
(4 (dietilamino) fenil) hexatrienilo) piridinio dibromuro]. (F) organizacin
partir
de
organismos
tales
crescentus y Rhodobacter sphaeroides , donde se han realizado casi todos los estudios
biolgicos, se comporta de manera similar a la T. maritima protena.
Es probable que MreB y sus homlogos regulan la forma de las clulas en forma de barra
mediante la organizacin de las enzimas biosintticas murena en un patrn helicoidal que est
orientado a lo largo del eje largo de la clula, lo que lleva al patrn de murena sntesis que es
responsable de la forma de barra . Esto fue sugerido inicialmente por estudios con vancomicina
marcado con fluorescena. Vancomicina bloques de la reticulacin de las cadenas recin
sintetizadas glicano-pentapptidos en el sculo de murena por la unin covalente al
terminal D alanina del pentapptido murena precursores biosintticos ( 12 , 17 , 27 ). Marcado
con fluorescena vancomicina por lo tanto, se ha utilizado como un marcador para el patrn
celular de murena biosntesis.Los estudios mostraron que la vancomicina los precursores
inmediatos de murein madura en B. subtilis ( 27 ) se organizan en un patrn en espiral que se
extiende a lo largo del eje largo de la celda y se asemeja a los patrones de distribucin de MreB
y Mbl (Fig. (Fig.2G).2G ). El patrn en espiral vancomicina era dependiente de la presencia de
la MreB homlogo Mbl ( 27 ). En las especies que carecen de unaMBL gen, es probable que
MreB u otro homlogo MreB lleva a cabo esta funcin. De acuerdo con estos resultados, los
estudios de la deposicin de murena en E. coli clulas (32 ) tambin sugieren un patrn en
espiral de nueva incorporacin en el sculo de murena (Fig. (Fig.2H2H ).
Los siguientes experimentos indican que el patrn helicoidal Mbl dependiente de la sntesis de
murena refleja una organizacin helicoidal de las enzimas de la biosntesis del peptidoglicano
necesarios para el crecimiento celular longitudinal. En primer lugar, la PBP2 transpeptidasa
murena biosinttica, que se requiere para la forma de varilla, se distribuye en un patrn en
espiral a lo largo del cilindro celular, similar a los patrones de distribucin de MreB y Mbl. Esto
se ha demostrado en C. Crescentus ( 35 ,38 , 53 ) y es probable que tambin lo es
en E. coli ( 30 ). En segundo lugar, el patrn de distribucin en espiral de PBP2 es dependiente
de la presencia de MreB y mrec ( 35 , 53 ), lo que implica que la MreB helicoidal y estructuras
del citoesqueleto mrec (discutidos ms adelante) juegan un papel esencial en la determinacin
de la organizacin celular de PBP2.
Mrec parece actuar como un puente entre el citoesqueleto MreB y la maquinaria biosinttica de
murena, como se muestra en los estudios de E. coli y B. subtilis ( 107 , 113 ).La protena mRed
es tambin probable que sea un componente del complejo de puente en los organismos que
contienen un mRed gen, tales como E. coli y B. subtilis .Por lo tanto, E. coli mrec interacta con
MreB y MrEd en dos ensayos de hbridos bacterianas, mientras que MreB no interacta con
MrEd ( 107 ). Esto sugiere que mrec puede intercalarse entre MreB y MrEd en un complejo
multiproteico putativo. Adems, varias lneas de evidencia sugieren que MreB, mrec, mRed,
PBP2, y tal vez otras enzimas biosintticas murena son componentes de una estructura que
media los efectos del citoesqueleto MreB de la topologa de la sntesis de murena
(Fig. (Fig.2F ).2F ). En primer lugar, la formacin de MreB normal de las estructuras del
citoesqueleto
helicoidales
requiere
la
presencia
de mrec ymRed en E. coli y B. subtilis ( 29 , 107 ). En segundo lugar, varias PBP que codifican
para enzimas biosintticas de murena se recuperaron mediante cromatografa de afinidad de
un C. crescentus extracto de clulas en una columna de mrec, lo que sugiere una relacin entre
mrec y mltiples elementos de la maquinaria biosinttica de murena en este organismo
( 35 ). En tercer lugar, C. Crescentus mrec y PBP2 ( 35 , 38 ) y B. subtilis mrec y MrEd ( 113 )
estn presentes en los patrones helicoidales que se asemejan a las de los elementos en espiral
MreB y Mbl. Se ha sugerido que roda, que se requiere para el mantenimiento de la forma de
varilla y para la actividad enzimtica de PBP2 ( 87 , 196 ), puede ser otro componente del
complejo MreBC ( 107 ).Mrec ha sido pensado para ser el enlace transmembrana en este
complejo ( 107 ), porque el anlisis de secuencia predice una organizacin transmembrana. Sin
embargo, recientemente se ha informado de que los estudios de fraccionamiento celular indican
una ubicacin para la periplsmico C. Crescentus protena mrec ( 35 ). Se necesitan ms
estudios para aclarar la localizacin celular de mrec en los diversos organismos en estudio.
La interaccin entre MreB y la estructura basada en mrec in vivo parece ser transitoria, ya que,
en contraste con MreB, la distribucin del patrn helicoidal mrec no cambia significativamente
durante el ciclo celular ( 35 ). La observacin de que la interrupcin de las estructuras
helicoidales MreB por A22 no tuvo efectos inmediatos en la localizacin de mrec y PBP2
tambin apoya la idea de que MreB no es una parte esencial del complejo mrec-PBP bsico
( 35 , 38 ).
Cromatografa de afinidad mrec identific aproximadamente 19 candidatos para ser protenas
asociadas mrec ( 35 ).Estos incluyeron ocho presuntas protenas de membrana externa, nueve
Mg 2 + niveles podran estabilizar el socio andamios para permitir que funcione en ausencia de
MreB.Estas observaciones muestran que el citoesqueleto MreB no es esencial para la
determinacin de la forma celular en B.subtilis pesar del hecho de que el agotamiento de MreB
resulta en un cambio de la forma celular.
(B) La polaridad celular . Los polos de las clulas en forma de varilla difieren en varios
aspectos del resto del cuerpo celular. Estas diferencias incluyen la localizacin polar especfico
de un nmero de protenas asociadas a la membrana ( 90 ), la presencia de flagelos polares o pili
en ciertas especies ( 185 ), la falta de volumen de negocios de murena y de protenas de
superficie etiquetados externamente en los polos celulares ( 31 , 33 ), la ausencia de zonas de
adhesin entre la membrana interna y la capa externa de la membrana-murena en los polos
( 23 , 131 ), y los cambios anatmicos (la cicatriz nacimiento bacteriana) en el polo celular
recin formada ( 130 ). MreB ha sido implicado en uno de estos aspectos de la polaridad de la
clula, la localizacin de protenas especficas a uno o ambos polos celulares.
Las protenas que juegan un papel en la regulacin de la C.Crescentus ciclo de diferenciacin
estn
dirigidos
diferencialmente
uno
ambos
polos
celulares
(revisado
en
referencia 59 ). Estos incluyen las quinasas histidina membrana, Plec, DivJ y CCKA. MreB se
requiere para la orientacin polar de estas protenas ( 60 ). Tras el agotamiento de MreB,
localizacin polar de las protenas se pierde y se convierten en difusa distribuida dentro de la
clula.
MreB
tambin
se
requiere
para
la
localizacin
polar
de
protenas
en
otros
Sin embargo, no todas las protenas polares requieren MreB para su localizacin. Por lo tanto, la
asamblea de los E. coliprotenas Min en zonas asociadas a la membrana polares (188 , 205 ) y la
localizacin polar de la C. crescentusprotena TipN ( 111 ) parece ser independiente de
MreB.Estos pueden ser excepciones a la regla general de que MreB participa en la localizacin
de las protenas polares, lo que refleja el papel especial que desempean las protenas Min en el
establecimiento de la posicin del sitio celular divisin ( 175 ) y el papel especial de TipN en
marcar el polo celular y en la determinacin de la polaridad celular ( 83 , 111 ). No se sabe
cmo MreB lleva a cabo la orientacin polar de las protenas. Los filamentos helicoidales MreB
podran participar directamente en el movimiento de las protenas a los polos proporcionando
pistas para la translocacin activa de protenas de carga especficos, probablemente en
colaboracin con el portador especfico del sustrato y / o protenas motoras. Los segmentos de
los filamentos MreB pueden ser movidas hacia los polos ( 194 ) como parte del proceso de
translocacin. Alternativamente, MreB podra actuar indirectamente mediante la colocacin de
objetivos polares para la localizacin de la protena. Por ejemplo, el extremo polar del
citoesqueleto MreB podra iniciar la localizacin o la organizacin de otros componentes
polares que actan entonces como sitios de unin polares para una familia de protenas
sustrato. Los objetivos no necesitan ser protenas, ya que tanto la composicin lipdica de la
membrana especializado de los polos ( 141 ) y la presencia de un compartimento segregado
murena polar ( 33 ) podra contribuir a los sitios diana.
(C) la segregacin de cromosomas . Durante el ciclo celular normal, nucleoides hijas se mueven
rpidamente a los extremos opuestos de la clula, conduciendo a su equiparticin en las dos
clulas
hijas
( 74 ). Este
proceso
es
perturbado
cuando
MreB
est
agotado
en E. coli y C.crescentus ( 60 , 108 ). Esto se manifiesta por la produccin de clulas en las que
mltiples nucleoides se distribuyen irregularmente dentro del citoplasma (Fig. (Fig.2E,2E ,
clula 1) ( 108 ) y de clulas anucleadas (Fig. (Fig.2E,2E , clula 2) o clulas en las que un
nucleoide incompletamente se reparti guillotinado por el tabique (2E, clula 3). La posibilidad
de que los defectos de segregacin nucleoide son causadas por la forma esfrica de las clulas
agotadas-MreB ha sido excluidos por la observacin de que la expresin de determinados alelos
mutantes de MreB que no interfieren con la forma de varilla de la clula todava se asocia con
defectos de segregacin nucleoide ( 106 , 108 ).
Otra prueba de que se necesita para MreB particin normal cromosoma proviene de estudios de
la segregacin del origen y la terminal de regiones de los cromosomas recin replicados
de E. coli y C. Crescentus ( 61 , 108 ). En
las
clulas
de
tipo
salvaje,
los
recin
La sugerencia anterior de que la RNA polimerasa (RNAP) contribuye a la fuerza motriz para la
separacin de cromosomas ( 37 ) se apoya en el reciente descubrimiento de que la inactivacin
de RNAP en E. coli conduce a un defecto en la separacin nucleoide en DAPI (4 ', 6'-diamino2-fenilindol) clulas teidas, similar al efecto de agotamiento o inactivacin MreB ( 106 ). Esto
parece estar asociado principalmente con un fracaso de las regiones terminal a segregar, aunque
tambin puede haber algn efecto en el origen segregacin. De especial inters, los
experimentos de inmunoprecipitacin utilizando anticuerpo anti-MreB indicaron que MreB y
RNAP se asocian fsicamente en extractos de clulas in vitro y en experimentos de
reconstitucin ( 106 ). Estos resultados sugieren que RNAP se asocia con el citoesqueleto MreB
y trabaja junto con MreB en el proceso de segregacin cromosmica. Se ha sealado que una
fuerza significativa puede ser generada por una molcula de RNAP estacionaria durante la
transcripcin, y esto podra contribuir a ADN en movimiento durante el proceso de segregacin
( 37 , 56 ).
Un mecanismo tambin debe existir para explicar la naturaleza vectorial del proceso de
translocacin, en el que los dos recin replicados Oric regiones se mueven a extremos opuestos
de la clula. La direccionalidad podra ser proporcionado por una estructura de doble hlice del
citoesqueleto MreB (Fig. (Figura 2B)2B ) si los filamentos helicoidales eran de polaridad
opuesta. Esto proporcionara dos pistas que apuntan en direcciones opuestas, cada uno
proporcionando una carretera de un solo sentido para elOric carga. En otro modelo de la
direccionalidad sera impartida por la orientacin de los recin replicados Oricregiones como el
que sale del aparato de replicacin ( 37 ).Los dos modelos no son mutuamente excluyentes, y
otros mecanismos tambin son posibles. Una comprensin ms completa de la funcin del
citoesqueleto MreB en la segregacin cromosmica requerir una comprensin ms detallada de
la organizacin macromolecular de las matrices helicoidales MreB, la polaridad del conjunto de
filamentos y desmontaje, y la base de la MreB- Oric interaccin. En contraste con los resultados
para E. coli y C. crescentus , no est claro si MreB o uno de los otros homlogos de actina, Mbl
o MreBH, se requiere para la segregacin cromosmica en B. subtilis ( 54 , 193 ). Por lo tanto,
el agotamiento de MreB en B. subtilis en la ausencia de efectos polares de genes ro abajo no
dieron lugar a defectos significativos en la segregacin de cromosomas (54 ), y el agotamiento
de MreB o Mbl llevaron a defectos de segregacin slo leves ( 194 ). Ya sea la
Higo. 3.
Particin del plsmido R1 ParM mediada.Micrografas (A) de fluorescencia que muestra el
filamento ParM (verde) y ADN plsmido (rojo). Panel 1 muestra un filamento ParM que se
extiende entre dos plsmidos que se encuentran en los extremos de la celda. Panel 2 muestra
un plsmido ...
Particin del plsmido R1 ParM mediada. Micrografas (A) de fluorescencia que muestra el
filamento ParM (verde) y ADN plsmido (rojo). Panel 1 muestra un filamento ParM que se
extiende entre dos plsmidos que se encuentran en los extremos de la celda. Panel 2 muestra
un plsmido en cada polo celular, unido a un filamento ParM corto que se extiende hacia
midcell; esto probablemente representa una etapa intermedia de desmontaje filamento despus
de los plsmidos han sido entregados a los confines de la clula. (Reproducido de la referencia
145 con permiso de Elsevier.) (B) Despus de la replicacin del plsmido, el crecimiento de un
filamento polimrico ParM (amarillo) empuja aparte los dos plsmidos R1 progenie,
movindolas de midcell a los dos polos. (C) de la historieta que representa la regin en caja en
el panel B, que muestra detalles de la adicin de nuevas subunidades en los dos extremos del
filamento ParM. El filamento-ParM ADP se coron por subunidades ParM-ATP. El extremo
tapado se une a la parC regin centromrica del plsmido a travs de la protena Parr. El
crecimiento de filamentos ParM se produce mediante la insercin de subunidades ParM-ATP
en la interfaz entre el extremo del filamento y la ParM Parr / parC complejo. Esto se asocia con
la hidrlisis de la fraccin de ATP de la anterior subunidad ParM-ATP, convirtiendo de este
modo el penltimo subunidad a ParM-ADP.
extremos del filamento se acercan a los extremos de la clula. La estructura intermedia era de
esperar, un filamento que se extiende a lo largo del eje largo de la clula con ADN de plsmido
unido en ambos extremos, se ha visualizado en estudios elegantes de doble etiqueta por MllerJensen et al. (Fig. (figura 3A,3A , panel 1) ( 145 ). Los polmeros PARM luego desmonte,
proporcionando subunidades PARM para iniciar el ciclo de conjunto de filamentos que se
producir despus de la replicacin del plsmido en el sitio de replicacin midcell en la clula
hija.
polos de la clula. La escisin puede ser llevada a cabo por las protenas similares a factores
eucariotas que cortan los microtbulos y los filamentos de actina, tales como katanins y cofilins,
respectivamente ( 132 , 137 ). De acuerdo con este modelo, las estructuras intermedias
predichos, filamentos cortos Parm cada uno se extiende hacia midcell partir de un plsmido
situado en un polo celular, se han visualizado en experimentos de doble etiqueta (Fig. (figura
3A,3A , panel 2). En este punto no es posible hacer una eleccin definitiva entre estos dos
mecanismos de desmontaje alternativos, cada uno de lo que presumiblemente dejar los
plsmidos en los extremos opuestos de la clula.
El mecanismo de movimiento de los plsmidos separados de los extremos de la clula para sus
nuevos sitios de replicacin no se ha definido. Despus de haber desmontado el filamento ParM,
cada plsmido liberado debe moverse desde el extremo de la clula para el nuevo sitio de
replicacin, que se encuentra en midcell en la clula postdivision. Durante este proceso el
plsmido liberado se debe evitar que la difusin de nuevo en la otra mitad de la clula antes del
cierre septal. Aunque no se sabe cmo se logra esto, hay varias posibilidades. (I) El inicio del
desmontaje de polmero podra acoplarse a un evento en el ciclo celular para asegurarse de que
los filamentos PARM no comenzaran a desmontar antes de que ocurriera la tabicacin. (Ii) Una
trampa de la segregacin podra estar presente en los cuartos de clulas a plsmidos trampa
liberados en el polo proximal celular. La trampa podra, por ejemplo, ser proporcionado por la
maquinaria de replicacin del plsmido recin montado. Esto requerira que el aparato de
replicacin de montar en los cuartos de clulas antes de tabique formacin en midcell, tal vez en
las mismas posiciones en las que la maquinaria de divisin celular ensambla en las clulas de
rpido crecimiento ( 176 ). Un plsmido difusin del polo proximal encontrara y
comprometerse con este sitio antes de cruzar midcell. (Iii) Escisin del filamento ParM y
posterior desmontaje del filamento (de acuerdo con el segundo modelo en el prrafo anterior)
podra ser directa o indirectamente dependientes de la tabicacin, consistente con la observacin
de que los filamentos Parm no desmontan cuando es bloqueada por la tabicacin cefalexina
tratamiento (Fig. 2AR en referencia146 ). Esto garantizara que la liberacin del plsmido y la
difusin del polo no se producira hasta despus de que ocurri la tabicacin. En un modelo
simple, la escisin de filamentos podra ser un resultado directo de la formacin de
tabique. Protenas Escote incluso podran estar presentes en el borde delantero del tabique
ingrowing, donde se encuentran otras protenas funcionales ( 48 ). (Iv) Los plsmidos podran
asociarse con sitios de unin polares especficos hasta que se recibe una seal de su liberacin.
Todos los mecanismos anteriores, excepto por disrupcin mecnica del filamento ParM por el
tabique ingrowing, requerira factores de la clula husped.
MamK.
MamK es un homlogo de la actina que juega un papel en la organizacin subcelular de las
membranas magnetosomal. Esto define una nueva funcin de las protenas-actina como, el
posicionamiento de los orgnulos celulares en clulas bacterianas ( 101 ).
Magnetosomas
son
organelos
de
membrana-acotada
deMagnetospirillum
magneticum sp. AMB01 cepa que contiene cristales de hierro dentro de las estructuras de la
membrana-delimitada. Electron
cryotomography
ha
demostrado
que
las
membranas
Higo. 4.
Estructuras citoesquelticas intracelulares formados por la protena-actina como MamK (A
y B) y el crescentin homlogo de filamentos intermedios (C). (A y B) cryotomography
Electron (A) y la ilustracin de dibujos animados (B) de magnetosomas situadas bajo la
superficie de ...
Estructuras citoesquelticas intracelulares formados por la protena-actina como MamK (A y B)
y el crescentin homlogo de filamentos intermedios (C). (A y B) cryotomography Electron (A) y
la ilustracin de dibujos animados (B) de magnetosomas situadas bajo la superficie de la
membrana citoplasmtica de Magnetospirillum magneticum . MamK filamentos se extienden a
lo largo de la superficie de la matriz lineal de las estructuras de membrana-magnetosome
limitada (flechas blancas en el panel A). (La micrografa electrnica fue reimpreso de referencia
101 con el permiso de la AAAS.) (C) El tipo filamento intermedio protena crescentin (verde),
visualizado por expresar crescentin GFP-etiquetados en las clulas de tipo salvaje, forma
estructuras filamentosas (flechas blancas) a lo largo de el borde cncavo de C. Crescentus .
Membranas (en rojo) se tieron con colorante FM 4-64. (Reproducido de la referencia 8 con
permiso de Elsevier.)
Tubulina homlogos
Dos tipos de homlogo de la tubulina, ejemplificados por FtsZ y las protenas BtubA y BtubB
de Prosthecobacter dejongeii , se han identificado en procariotas. FtsZ, BtubA / B, y tubulins
eucariotas
forman
una
familia
distinta
de
GTPasas
estructuras
FtsZ.
FtsZ es esencial para la citocinesis bacteriana, y homlogos FtsZ altamente conservadas estn
presentes en casi todas las bacterias y arqueas. Homlogos FtsZ tambin estn presentes en
orgnulos eucariotas tales como plstidos, que se cree que se derivan de endosimbiontes
bacterianos (para una revisin, vase la referencia 5 ). Una variante FtsZ plsmido transmitidas
que juega un papel en la replicacin del plsmido tambin se encuentra en la virulencia
plsmido pXO1 de Bacillus anthracis ( 155 , 156) y en otros megaplasmids ( 207 ). El papel de
FtsZ en la divisin celular y orgnulos se ha revisado recientemente (47 , 133 , 172 ).
Higo. 5.
Organizacin celular de FtsZ. (A a C) micrografas de inmunofluorescencia que muestran la
localizacin celular de FtsZ en B.subtilis clulas. (Reproducido de la referencia13 con
permiso de Elsevier.) (A) del anillo FtsZ en midcell durante el crecimiento vegetativo; (B)
que se extiende ...
Organizacin celular de FtsZ. (A a C) micrografas de inmunofluorescencia que muestran la
localizacin celular de FtsZ en B. subtilis clulas. (Reproducido de la referencia 13 con permiso
de Elsevier.) (A) del anillo FtsZ en midcell durante el crecimiento vegetativo; (B) que se
extiende estructuras helicoidales FtsZ durante la transicin del crecimiento vegetativo a la
esporulacin; (C) FtsZ anillos bipolares en una etapa posterior de la transicin. (D)
Representacin esquemtica de una porcin del anillo de cytokinetic (septasome) de E. coli .
FtsZ est anclado a la membrana celular por FtsA y ZipA, y las otras protenas septasomal
continuacin se aaden al complejo ( 63 ). Los smbolos que representan las protenas se
disponen para mayor claridad, y los dibujos animados no representa con precisin los detalles
de sus interacciones. OM, membrana externa; PG, peptidoglicano (murena); IM, membrana
interna.
La E. coli Z-anillo acta como un andamio para el montaje de por lo menos 10 protenas
adicionales en un anillo cytokinetic (tambin llamado el septasome o divisome)
(Fig. (Fig.5D)5D ) ( 63 ). La formacin del anillo cytokinetic es seguido por el crecimiento
hacia dentro del tabique despus de un retardo variable. Aunque FtsZ permanece asociado con
el borde interior del tabique ingrowing como invaginacin septal progresa, no se sabe si el
anillo Z juega un papel directo en el proceso de la constriccin. Adems de su papel en el
montaje de la maquinaria cytokinetic, FtsZ tambin puede desempear un papel en el
interruptor dependiente del ciclo celular de la sntesis de murena longitudinal a la sntesis de
murena preseptal en el sitio de divisin de futuro ( 34 , 174 ). El Z-anillo intacto y anillo
cytokinetic an no han sido aislados, y los detalles de sus estructuras no se conocen.
FtsZ es una protena de alta abundancia (reportado a estar presente en 3400 a 20.000 copias
por E. coli celular) ( 26 ,125 , 149 , 162 , 178 , 197 ). De los otros componentes del anillo
cytokinetic, FtsA y ZipA estn presentes en aproximadamente 740 y 1250 copias por
clula, respectivamente ( 66 , 178 ), mientras que los otros componentes del anillo son mucho
menos abundante, en 30 a 50 molculas por clula ( 176 ) . Los componentes de la septasome
llevan a cabo una variedad de funciones en el proceso de tabicacin, la mayora de las cuales no
se entienden bien.
Curiosamente, los estudios que utilizan la recuperacin despus de fluorescencia
photobleaching han demostrado que el anillo Z es una estructura altamente dinmico, con
molculas de FtsZ intercambio con las molculas de FtsZ en otra parte de la clula con una
media de tiempo de 30 segundos, dependiendo de las condiciones experimentales
(6 , 197 ) . No se sabe si el intercambio de molculas de FtsZ se produce a lo largo de la
longitud del polmero o slo en los extremos de los polmeros de FtsZ.Microscopa de fuerza
atmica ha indicado que los polmeros de FtsZ se someten a la fragmentacin y la reasociacin
en lugares internos ( 143 ). Por lo tanto, es posible que el intercambio se produce en sitios
internos dentro de polmeros de FtsZ, acompaados por la ruptura repetida y resellado en sitios
internos dentro de hebras de polmero. El potencial de rotura y el resellado del polmero
tambin podra proporcionar un mecanismo para la extrusin de las molculas de FtsZ durante
la contraccin del anillo Z que se produce durante la constriccin septal.
del
anillo
de
FtsZ
ha
venido
de
los
estudios
de
esporulacin
la conversin de FtsZ espirales a los anillos de FtsZ, lo que implica que las estructuras espirales
son precursores de la junta Z.
La relacin estructural entre espirales FtsZ y Z tricas no ha sido establecida. Las dos
estructuras pueden ser independientes, con las molculas de FtsZ dejando la espiral para formar
una estructura de anillo en el sitio de divisin.Por otro lado, es muy posible que el anillo Z no es
un verdadero anillo sino ms bien una estructura en espiral fuertemente comprimido derivado de
las estructuras helicoidales ms prolongados FtsZ discutidos anteriormente. Una eleccin entre
estas alternativas se requerirn estudios de mayor resolucin de Z-anillos dentro de las clulas
y / o el aislamiento y caracterizacin del propio anillo Z-.
Tambin se ha demostrado que las estructuras helicoidales FtsZ estn presentes
en E. coli clulas que sobreproducen FtsZ o FtsZ-GFP, una protena que no es completamente
funcional, pero que se utiliza como un marcador para Z-anillos y otras estructuras FtsZ en las
clulas vivas ( 129 ,199 ). Las matrices de FtsZ en espiral muestran ondas peridicas de
oscilacin con una periodicidad de 30 a 60 s (205 ). Este comportamiento oscilatorio no fue
afectado por la prdida del citoesqueleto helicoidal MreB, pero la periodicidad se interrumpi
en un minCDE mutante de delecin, en el que se perturba la colocacin sitio de divisin
( 205 ). La relacin de estas observaciones con el comportamiento de las protenas Min, que son
necesarios para la identificacin del sitio de divisin y que tambin estn organizados en
estructuras helicoidales oscilantes (discutido abajo), queda por definir.
Sin embargo, no hay evidencia de que FtsZ forma estructuras microtubulares in vitro o in vivo,
y hay diferencias significativas en la cintica de intercambio de nucletidos entre FtsZ y los
filamentos de tubulina.Tambin hay evidencia convincente de que los filamentos de FtsZ se
componen de polmeros de FtsZ-PIB tapados con una subunidad FtsZ-GTP cuya hidrlisis
conduce a un rpido desmontaje de polmero, como es el caso de los polmeros de tubulina. En
lugar de ello, el polmero parece consistir en subunidades FtsZ-GTP, y FtsZ desmontaje de
polmero in vitro parece estar regulada por un equilibrio entre las velocidades de hidrlisis de
GTP
GTP
reconsolidacin
FtsZ
lo
largo
de
la
longitud
del
filamento
( 82 , 133 , 142 ,157 , 172 ). Esta conclusin se basa en la observacin de que la hidrlisis del
GTP unido conduce a desensamblaje de los filamentos de FtsZ menos suficiente GTP est
disponible para intercambiar con el producto PIB (revisado en referencia 172 ). Aunque los
cambios en relacin GTP / GDP afectan a la tasa de desmontaje de polmero, es poco probable
que esto podra explicar la prdida de subunidades de FtsZ el anillo Z durante la constriccin
del tabique, porque la alta relacin GTP / GDP en el citosol debera proporcionar suficiente a
GTP evitar el desmontaje de filamentos espontnea. La cuestin importante del mecanismo por
el que el anillo Z se hace ms pequeo durante el crecimiento hacia dentro septal permanece
abierta.
Hay una barrera de energa para la iniciacin y primeros pasos de la polimerizacin de tubulina,
proporcionando una barrera para la nucleacin de nuevos filamentos ( 172 ). Si esto era cierto
para la polimerizacin de FtsZ, podra proporcionar un punto de regulacin de la formacin
protofilament durante el montaje de la Z-ring o las estructuras espirales FtsZ. Tampoco se sabe
si el montaje o el desmontaje de polmeros de FtsZ dentro de las clulas intactas se modifica por
las protenas auxiliares, como es cierto para los microtbulos en las clulas eucariotas.
revisin. Se requiere regulacin temporal para asegurar que la formacin de tabique se produce
en el momento correcto en el ciclo celular, despus de que se completaron la replicacin
cromosmica y la segregacin. El control de la concentracin de protena FtsZ celular mediante
la regulacin de la transcripcin, traduccin, y / o degradacin puede jugar un papel en la
regulacin de la formacin de anillo Z en algunos casos, como, por ejemplo, durante el ciclo
celular de C. Crescentus ( 97 , 165 , 179 ). Sin embargo, en la mayora de los casos la regulacin
se lleva a cabo mediante el uso de protenas efectoras positivos o negativos que regulan el
montaje o la estabilidad de anillo Z.Una serie de protenas efectoras han sido identificados
(Tabla (Tabla 1)1 ) (revisado en las referencias 133 y 172 ), y otros probablemente an no se
han descubierto. Hasta ahora no se sabe cmo estos u otros factores reguladores de determinar
el momento de la tabicacin en la clula.
TABLA 1.
Reguladores positivos y negativos de la formacin del anillo de FtsZ
BtubA / B.
Un segundo grupo de tubulina homlogos bacterianos se ejemplifica por el BtubA y BtubB
( b acterialbaera Ulin) protenas. A diferencia de FtsZ, que est presente en casi todas las especies de
bacterias, BtubA BtubB y hasta el momento slo han sido identificados en el gnero Prosthecobacter en
la divisin Verrucomicrobia .Las protenas de Prosthecobacter dejongeii se han estudiado con cierto
detalle. BtubA y BtubB son los nicos homlogos de tubulina en este organismo, y los estudios
cristalogrficos de electrones indican que las estructuras tridimensionales de monmero BtubA y BtubA /
B heterodmero se asemejan a los de la tubulina (Fig. (Figura 1B)1B ) (183 ) . Varias lneas de evidencia,
incluyendo las similitudes en las propiedades de polimerizacin, sugieren que el sistema BtubA / B puede
proporcionar un buen sistema modelo para el estudio de ciertos aspectos de la conducta de la tubulina y
ensamblaje de los microtbulos.
se han hecho en P.dejongeii para confirmar la suposicin probable que las estructuras tubulares
intracelulares se componen de BtubA / B. Desde P. dejongeii no contiene un equivalente de la
tubulina homlogo FtsZ en el 95% del genoma que se ha completado, es concebible que
BtubA / B tambin podra desempear un papel en la citocinesis.
a mantener la forma celular y la integridad celular y nuclear mediante la proteccin contra las
agresiones mecnicas (revisado en las referencias 71 ,72 , y 104 ). Hay un nmero de subclases
de protenas eucariotas SI, basadas en anlisis de la secuencia y la distribucin celular. Estos
incluyen citoplasmtica SI protenas (queratinas, vimentina y desmina, y las protenas de los
neurofilamentos triplete) y laminas nucleares ( 71 ,72 , 104 ). Se requiere que la asociacin de
filamentos intermedios con los microtbulos para el mantenimiento de la red si (revisado en
referencia 22 ).
Crescentin.
Crescentin es la nica citoesqueleto SI homlogo hasta el momento identificado en clulas
procariotas. Es responsable de la forma de la forma de coma organismo C. crescentus ( 8 ) y fue
identificado en una pantalla para C. crescentus mutaciones de insercin de transposn que
afectaron la forma celular. La prdida del gen estructural para crescentin, Cres , conduce a un
cambio en la forma celular de coma para varilla. La asignacin de crescentin como una protena
homlogo SI se basa principalmente en su organizacin del dominio de protena
predicha. Crescentin tiene aproximadamente 25% de identidad de secuencia y 40% de similitud
con protenas eucariotas SI. Sin embargo, se seal que hay grados de similitud de secuencias
similares a la no-IF protenas que contienen extensos motivos en espiral-bobina ( 8 ). Ms
especficamente, crescentin y SI protenas comparten una organizacin de dominio predicho de
cuatro estructuras centrales espiral de la bobina con una discontinuidad en la estructura
caracterstica de repeticin heptad dentro del ltimo segmento espiral de la bobina ( 72 ).
Evidencia de que crescentin forma una estructura del citoesqueleto dentro de la clula vino de
estudios de inmunofluorescencia que muestran que crescentin est presente como una estructura
filamentosa extendida a lo largo del lado cncavo de la C. crescentus de clulas (Fig. (figura
4c)4C ) ( 8 ). Esto se confirm en clulas vivas por estudio de no funcionales fusiones
crescentin-GFP que se coexpresan con crescentin sin etiquetar y por la observacin de que la
forma curvada de la clula se pierde cuando crescentin est ausente ( 8 ). Estos resultados
sugieren que la estructura filamentosa lo largo de la curva interior de la clula es un elemento
del citoesqueleto basado en crescentin que establece o mantiene la forma de coma de la clula.
Adems de los homlogos de las protenas del citoesqueleto eucariotas, clulas bacterianas
contienen otro grupo de protenas del citoesqueleto que no tienen homologa con elementos del
citoesqueleto eucariotas.Estos pertenecen a la gran superfamilia mente / Par. Se caracterizan
por la presencia de motivos ATPasa Walker-tipo A desviadas ( 102 , 222 ) y se clasifican como
protenas del citoesqueleto en funcin de su presencia en estructuras filamentosas organizados
dentro de las clulas y, cuando examin, su capacidad de auto-ensamblan para formar a largo
filamentos polimricos in vitro. El uso de protenas de ATPasa de tipo Walker como
componentes del citoesqueleto parece ser exclusivo de las clulas bacterianas. Se distinguen de
los grandes grupos de noncytoskeletal ATPasas tipo Walker por la presencia de un Walker
desviada Un motivo (GXGGXHK [TS]) dentro de la P-loop nucletidos vinculante que se
encuentra cerca de los extremos N de las protenas ( 102 ), aunque unas pocas protenas
bacterianas noncytoskeletal tambin contienen el desviado Walker Un motivo, incluyendo NifA,
ARSA, y otros ( 102 , 222 ).
Dividimos las protenas MinD / para en dos subgrupos.Protenas del subgrupo mente estn
involucrados en la colocacin de los sitios de divisin bacteriana y plastidios, mientras que las
protenas del subgrupo ParA se dedican principalmente a la particin de ADN. Homlogos
Mente en eubacterias y plastidios tienen una secuencia de seis aminocidos altamente
conservada llamada la caja de la mente (GLRNLD) que no est presente en las protenas del
subgrupo Par ( 224 ).
de polo a polo de las protenas Min implica la redistribucin cclica de las protenas dentro de
un marco citoesqueleto cuenta que se extiende a lo largo de la longitud de la clula
( 187 ). En B. subtilis , que carece de un homlogo de minas, nonoscillating MinCD zonas
polares estn presentes en ambos extremos de la clula ( 135 , 136). Formacin de
la B. subtilis zonas polares est regulada por la protena divIVA, que no est relacionado con la
ma y parece utilizar un mecanismo de localizacin diferente ( 42, 43 ). Algunas bacterias,
como C. crescentus , carecen de homlogos de protenas min, y no se sabe cmo se lleva a cabo
la seleccin del sitio de divisin en estos organismos.La organizacin del citoesqueleto de las
protenas Min hasta el momento se ha informado de la E. coli ( 187 ) yNeisseria
gonorrhoeae ( 201 ) las protenas.
Higo. 6.
Organizacin helicoidal de las protenas MinD / para citoesqueleto. (A a D) MinD marcado
con fluorescencia (A y B), la ma (C), y MinC (D).(Reproducido de la referencia 187 , con
autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional de Ciencias, EE.UU.) (A ...
Organizacin helicoidal de las protenas MinD / para citoesqueleto. (A a D) MinD
marcado con fluorescencia (A y B), la ma (C), y MinC (D). (Reproducido de la
referencia 187 , con autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia Nacional
de Ciencias, EE.UU.) (A y B) la distribucin helicoidal de la mente cuando
coexpressed con la ma. (A) una estructura helicoidal brillante mente est presente
en un extremo de la clula, lo que representa una zona polar Mind (flecha blanca).
En los estudios originales que describen la organizacin helicoidal del sistema Min, las
estructuras de la mente en espiral se ven claramente slo en las clulas que expresan la mente y
MinE o expresar las tres protenas Min. Esto sugiri que MinE podran ser necesarios para la
organizacin o la estabilidad de los arrays helicoidales.Desde entonces, sin embargo, las
estructuras helicoidales MinD que se extienden entre los dos extremos de la clula se han
visualizado en ausencia de mina o MinC (L. Ma y L. Rothfield, observaciones no
publicadas). De acuerdo con la conclusin de que la mente es el elemento estructural bsico de
las estructuras del citoesqueleto Min, MinC y el mo estn presentes en estas estructuras slo
cuando la mente tambin est presente ( 187 ).
En ausencia de la ma, la mente enrollada ni MinD estructura / MinC parece extenderse entre los
dos extremos de la clula. Sin embargo, la ma provoca la drstica redistribucin de la mayor
parte de la mente, la ma, y MinC molculas a las bobinas helicoidales en un extremo de la
clula (la zona polar) (Fig. 6A a D ) ( 187 ). Adems de su presencia en la zona polar, en
muchas clulas mina tambin est presente en una segunda estructura, el anillo de minas.El
anillo MinE representa una extensin de la estructura helicoidal minCDE polar, en el que una
alta concentracin de MinE da la apariencia de un anillo (Fig. (Fig.6C).6C ). Las zonas polares
y E-anillos experimentan oscilaciones repetitivas de polo a polo en el que las estructuras se
repetitivamente montarse y desmontarse en polos alternativos con un perodo de ~ 90 s por ciclo
( 78 , 167 , 168 , 177 ), como se explica ms adelante .
( 198 ). Sorprendentemente, la adicin de vesculas de fosfolpidos bicapa limitada hace que los
filamentos de la mente para aumentar en gran medida en el nmero y la longitud y a la libre
asociado en haces de filamentos, en consonancia con la idea de que los protofilamentos de la
mente citoesqueleto helicoidal se auto-ensamblan en la superficie de la membrana
citoplasmtica.
La adicin de MinE aumenta significativamente el alcance de la agrupacin (Fig. (figura
7A)7A ) ( 198 ). Esto implica aumento de las interacciones de lado a lado de los protofilamentos
importa, ya sea debido a la ma reticulacin oa los cambios conformacionales inducidos por la
ma. MinE existe como un dmero antiparalelo, con el dominio N-terminal de cada una de las
dos subunidades que se extienden desde lados opuestos de la estructura dmero ( 100 ). Desde el
dominio N-terminal contiene los sitios de minas que interactan con la mente ( 127 ), lo que
proporciona un mecanismo plausible por el que dmeros mina puede reticular filamentos MinD
adyacentes para formar los haces Mind (198 ). La capacidad de las minas con objeto de inducir
la agrupacin de filamentos mente pudiera explicar el aumento en el nmero protofilament que
est implcito en la alta concentracin de la mente y la ma dentro de las bobinas helicoidales de
las zonas polares (Fig. 6A y C ).
Higo. 7.
En la polimerizacin in vitro de las protenas del citoesqueleto de la superfamilia de mente /
Par.(A) La formacin de haces de filamentos MinD en presencia ma, ATP, y vesculas de
fosfolpidos. Un extremo del haz es notablemente desgastado debido a la presencia de la
ma. (Reproducido ...
En la polimerizacin in vitro de las protenas del citoesqueleto de la superfamilia de mente /
Par. (A) La formacin de haces de filamentos MinD en presencia ma, ATP, y vesculas de
fosfolpidos. Un extremo del haz es notablemente desgastado debido a la presencia de la ma.
(Reproducido de la referencia 198 , con autorizacin de la editorial. Copyright 2003 Academia
Nacional de Ciencias, EE.UU.) (B) Formacin de un para pTP228 (PARF) haz de filamentos en
presencia de parB pTP228 (PARG) y ATP. ParB pTP228 (PARG) estimula la formacin del
extremo deshilachado (s) del para pTP228 (PARF) paquete. (Reimpreso de referencia 11 con
permiso de Macmillan Publishers Ltd.) (C) Formacin de filamentos Soj en presencia de ADN y
ATP. (Reproducido de la referencia 116 con permiso de Macmillan Publishers Ltd.)
largo de la longitud de los filamentos para promover la agrupacin, mina tambin se puede unir
a un extremo del haz de filamentos. Esto puede explicar el hecho de que el anillo MinE se forma
solamente en un extremo (el extremo medial) de la estructura helicoidal que comprende la zona
polar MINDE (Fig. 6C y H ). El deshilachado podra representar una etapa en la reaccin
desmontaje filamento que es inducida por MinE in vitro ( 198 ) y por el anillo de minas en vivo
( 186 ). Deshilachado similar se produce en un extremo (el extremo ms) de los haces de
microtbulos durante el desmontaje de los microtbulos ( 7 ). No se sabe si la mente la
paquetizacin y efectos deshilachado puede ser disociado de la variacin de la concentracin de
la ma.
La mente MTS puede ser sustituido por el totalmente ajeno hidrofbico de anclaje de membrana
43-amino-cido de citocromo b 5 sin interferir con su orientacin a la E. colimembrana y la
formacin de las estructuras del citoesqueleto helicoidal asociadas a la membrana ( 204 ).Sin
embargo, la mente que contiene el citocromo b 5 de anclaje de membrana pierde la capacidad
para formar zonas polares en E. coli clulas en la presencia de minas ( 204 ).Esto puede indicar
que la gran hidrofbica citocromo b 5dominio de unin a la membrana puede impedir la
redistribucin de la mente asociada a la membrana mediante el aumento de la fuerza de su
asociacin a la membrana.
Algunos homlogos putativos MinD no contienen un MTS reconocible. El significado de esto
es desconocida, puesto que los estudios biolgicos o bioqumicos de la funcin de la mente se
han llevado a cabo slo con unas pocas especies.
afinidades
de
las
protenas
por
los
dems
para
la
membrana
( 81 , 98 , 105 ,138 ). Durante el montaje de la zona polar, MinD recluta MinC y el mo, la
conversin de la mente zona polar helicoidal para una zona polar MinDCE. La unin de MinC y
el mo puede tener lugar despus de mente ha polimerizado en la superficie de la membrana,
aunque las interacciones primarias con la mente tambin podran ocurrir en el citosol ( 204 ),
con la mente-MinC y / o complejos mente-mina de pasar a la concurrente membrana con mente
asamblea polmero.
Conjunto de anillo (b) MinE . Cuando los extremos de crecimiento de los polmeros MinD
acercan midcell, adems de la mente-ATP disminuye y la ma se rene en los extremos de los
los protofilamentos helicoidales para crear una extensin MinE enriquecida de las estructuras en
espiral (el anillo E) (Fig. 6C y H ). La capacidad de la mina para outcompete MinD
probablemente refleja el agotamiento de la piscina frente al citoplasma de la mente que se
produce durante el crecimiento de la zona polar ( 36 ). Se cree que el anillo E de jugar dos
papeles. En primer lugar, se bloquea la extensin de la zona polar pasado midcell actuando
como un tapn para evitar una mayor adicin de subunidades mente.Este fue sugerida por la
observacin de que la mina mutaciones que previenen la formacin del plomo anillo E al
crecimiento de las zonas polares ms all de su lmite normal cerca de midcell ( 186 ). En
segundo lugar, el anillo E se activa la actividad de la mente ATPasa en la vanguardia de los
polmeros-Mind ATP ( 79 ).
(C) desmontaje zona polar . La activacin de la mente ATPasa conduce a la conversin de la
mente-ATP-ADP a la mente, que se libera a partir de finales del polmero MinD debido a su
baja afinidad por la membrana (Fig. (Fig.6G).6G ). Esto resulta en un acortamiento progresivo
de la estructura polar MinDCE enrollado hasta que desaparece junto con el anillo E
(Fig. (Fig.6H).6H ). Los estudios in vitro muestran que la mente-ADP es liberado de vesculas
de fosfolpidos en el medio acuoso cuando la mente ATPasa es activado por las minas
(76 , 110 ). Si esto imita con exactitud el desmontaje de las estructuras en espiral polares en
vivo, implicara que el desarmado est acompaada por la liberacin de las protenas en el
citoplasma, como se sugiere por microscopa de fluorescencia de la mente marcada en las
clulas intactas ( 168 ).
Me quede en la pagina 18
CONCLUSIONES Y RESUMEN
Los avances de los ltimos 5 aos han sido extraordinarios.Quizs el hallazgo ms inesperado
ha sido el gran nmero de protenas que se organizan en estructuras ordenadas de largo alcance
dentro de la clula. Sin embargo, con slo unas pocas excepciones, como el / PARF sistema de
segregacin plasmdica ParM y el sistema de seleccin del sitio divisin minCDE, no sabemos
prcticamente nada sobre cmo los elementos del citoesqueleto llevan a cabo tales funciones
celulares fundamentales como la segregacin de los cromosomas de la clula y ms plsmidos,
la constriccin del anillo de FtsZ, la diferenciacin de los polos de la clula, o el
establecimiento de la polaridad celular, y sabemos que slo un poco ms acerca de los detalles
de la determinacin de la forma celular. Adems, los mecanismos subyacentes a la sorprendente
plasticidad de algunas de las estructuras del citoesqueleto son todava del todo entendidas mal o
no. Esto incluye la remodelacin del citoesqueleto de MreB durante el ciclo celular, el
comportamiento oscilatorio y otros reordenamientos intracelulares de las protenas de Par, y la
reorganizacin general de elementos del citoesqueleto que deben ocurrir durante y despus de la
divisin celular. La comprensin de estos problemas importantes e intrigantes en biologa
celular bacteriana probablemente requerir, en muchos casos, una identificacin ms completa
de la que las protenas y complejos de protenas estn asociadas con cada una de las estructuras
del citoesqueleto primarios.Informacin adicional de este tipo ya est surgiendo para los
sistemas MreB / mrec / PBP, MinC / mente / el mo, y FtsZ / septasome. Es probable, como en
los sistemas eucariotas, que la integracin de esta informacin revelar las estructuras del
citoesqueleto ms complejas que estn actualmente previsto. Basndose en los progresos hasta
la fecha, podemos ser muy optimistas sobre los avances que se esperan durante los prximos
aos.
.....
AGRADECIMIENTOS
Reconocemos la ayuda de Vitaliy Gorbatyuk en la construccin de protenas figuras
tridimensionales, y reconocemos Luyan Ma y Denis Wirtz permiso para citar informacin no
publicada. Damos las gracias a Mara Osborn en busca de ayuda y consejo importante y Stuart
Austin, Miguel de Pedro, Jeff Errington, Kenn Gerdes, Giovanna Rosati, Christine JacobsWagner, Dyche Mullins, Denis Wirtz, Andrew Wright, y otros colegas til para los debates.
El trabajo del laboratorio de LR fue apoyado por el NIH subvencin GM R37-06032.