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VIOLETA DE METILO
Comnmente denominado cristal violeta o violeta de genciana, es el nombre dado a un grupo de
compuestos qumicos empleados como indicadores de pH y colorantes. Los violetas de metilo son
mezclas de: N-tetra, N-penta y N-hexametil p-rosanilinas. Por la mezcla de diferentes versiones, el
fabricante puede crear diferentes tonos de violeta en el colorante final. Cuanto ms metilado est el
colorante, su color ser de un violeta ms oscuro:
Tetrametilo (cuatro metilos) es conocido como Violeta de metilo 2B, y encuentra usos
especficos en qumica y medicina.
Pentametilo (cinco metilos) es conocido como Violeta de metilo 6B, y es ms oscuro como
colorante que 2B.
Hexametilo (seis metilos) es conocido como Violeta de metilo 10B, o especficamente violeta
cristal. Es mucho ms oscura que la 2B, y an ms oscura que la 6Bk.
El violeta de metilo se obtiene por reaccin de condensacin de la cetona de Michler (4,4'-Bisdimetilamino-benzofenona) con N,N-dimetilanilina en presencia de clorato de fosforilo.
LUGOL
El lugol o disolucin de Lugol es una disolucin de yodo molecular I2 y yoduro potsico KI en agua
destilada. Se prepar por primera vez en 1829 y recibe su nombre en honor al mdico francs J.G.A.
Lugol.
El Lugol consiste en 20 gramos de yodo metlico y 40 gramos de yoduro potsico, disueltos en 1 litro
de agua destilada. El yoduro potsico facilita la disolucin del yodo diatmico, debido a la formacin de
iones triyoduro I3-.
No debe confundirse el lugol con la tintura de yodo, que consiste en yodo diatmico y sales de yodo
disueltos en una mezcla de agua y alcohol etlico (etanol). La disolucin de Lugol no contiene
alcohol.
En microbiologa se emplea en la tincin de Gram para retener el colorante cristal violeta. El I2 entra en
las clulas y forma con el colorante cristal violeta un complejo insoluble en agua.
ALCOHOL ACETONA
Su composicin es: Metanol: 75% Acetona: 25%
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es
soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los
Gram negativos s lo hacen. La funcin del alcohol-acetona es la quitar el colorante de las bacterias, as
si la bacteria conserva el tinte, es Gram positiva y si el tinte no se mantiene es Gram negativa.
FUCSINA BSICA
Es una mezcla de rosaniline y paraosanilina y tambin puede contener Magenta II y neofucsina. Acta
como colorante de contraste para la tincin de bacterias (pared celular).
SAFRANINA
La safranina (tambin llamada Safranina O o rojo bsico 2), es un colorante biolgico, de contraste que
se utiliza en la Tincin de Gram para proporcionar un color violeta ms intenso a las bacterias Gram+ y
tie de rosa a las bacterias G- ; en histologa y en citologa. La safranina se usa como lquido de
contraste en algunos protocolos de tincin, coloreando el ncleo celular de rojo. Tambin para detectar
cartlago, mucina y grnulos de mastocitos.
La safranina es una dimetil safranina. Hay tambin una trimetil safranina, que tiene un grupo metil
agregado en la posicin orto- del anillo ms bajo. Ambos compuestos se comportan de forma
esencialmente idntica en usos biolgicos de tincin, y muchos fabricantes de safranina no distinguen
entre los dos. Los preparados comerciales de safranina frecuentemente tienen una mezcla de ambos.
La safranina tambin se usa como indicador redox en qumica analtica.
les fija el primer colorante usado en la mezcla, mientras que las Gram- despus del lavado se
desprende el colorante y se fija el colorante de contraste de la tincin.