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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERA
DE MATERIALES

CURSO: Organizacin y Funcin Celular


DOCENTE: Dra. Priscilla Seijas Bernab
ALUMNO: Varela Vargas Jorge Eduardo
TURNO: Martes en las Tardes
GRUPO: 3-B
CICLO: III
FECHA: 10-06-14

HORA: 4:00-6:00 p.m.

TRUJILLO-PER

2014
DEMOSTRACIN DE SMOSIS Y DILISIS
1.-OBJETIVOS
Llevar a cabo procesos de smosis y dilisis.
Realizar ensayos de laboratorio para comprobar los procesos de smosis y dilisis efectuados en la prctica.

2.-FUNDAMENTO
smosis.- Es un proceso fsico-qumico que hace referencia al pasaje de un disolvente, entre dos
disoluciones
que
estn
separadas
por
una
membrana
con
caractersticas
de
semipermeabilidad. Estas disoluciones poseen diferente concentracin.
-Es aquel flujo de molculas de agua a travs de una membrana semipermeable, desde un medio que posee
menos concentracin de solutos disueltos hacia un medio que contiene mayor cantidad de solutos disueltos.
Presin osmtica.-Es provocada por solutos de mayor tamao que el poro, que al no poder pasar la
membrana van a generar un gradiente de concentracin que va a arrastrar agua para igualar las
concentraciones a ambos lados de la membrana. Este principio es el que se utiliza principalmente en la
dilisis peritoneal.
La cantidad de solutos que se transfieran va a depender de estos factores:
La cantidad de lquido que se ultra filtre
La concentracin de soluto en el disolvente
Las propiedades de la membrana
Dilisis.- La dilisis es el proceso de extraccin de los productos de desechos y del exceso de agua en el
cuerpo. Al paso de los solutos (iones y molculas pequeas) acompaados de agua a travs de una membrana
semipermeable, quedando retenidas las partculas de mayor tamao. Este movimiento de solutos ocurre de
regiones de mayor concentracin a regiones de menor concentracin.
Hay dos mtodos de dilisis: la hemodilisis y la dilisis peritoneal.

En la hemodilisis; se extrae la sangre del cuerpo y se bombea al interior de un aparato que filtra las
sustancias toxicas, devolviendo a la persona la sangre purificada. La cantidad de lquidos devueltos se pueden
ajustar.

Figura N01: Esquema de la hemodilisis

En la dilisis peritoneal; se infunde dentro de la cavidad abdominal un lquido que contiene una mezcla
especfica de glucosa y sales que arrastra las sustancias toxicas de los tejidos. Luego se extrae el lquido y se
desecha.

Figura N02: Diagrama esquemtico de la dilisis peritoneal

3.-EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS


Equipos:

Estufa y Olla para bao Mara

Figura N03: Estufa


Materiales:

2 segmentos de intestino delgado de vaca

Figura N04: Intestino de vaca

2 Zanahorias por mesa

Figura N05: Zanahorias

Embudo

Figura N06: Embudo

1 m de pabilo o pita delgada


1 Frasco o vaso plstico trasparente
1 Botella de agua

Reactivos y mezclas:

Solucin de yodo o lugol

Figura N07: Lugol

Solucin de glucosa 30% y solucin de almidn 1%.

Figura N08: Glucosa y Almidn

4.-METODOLOGA
*Fenmeno osmtico en zanahorias
Procedimiento:

Se llen dos vasos de agua del grifo y aadimos a uno de ellos una (o dos) cucharadas sopera de sal.
Se introdujo una zanahoria en cada uno de los vasos (las zanahorias deben ser de parecido tamao).
Se esper al menos 24 horas.
Se transcurri ese tiempo, se observ y anoto los resultados.

*Determinacin del proceso de dilisis, usando como membrana semipermeable un segmento intestino
delgado de vaca.
Procedimiento:

Se amarro bien uno de los extremos de la membrana, usando la pita o cordn.

Figura N09: Amarrando uno de los


extremos del intestino de vaca con una pita.

Se aadi al sistema aproximadamente la mitad de la solucin de glucosa y la mitad de solucin de almidn.


Se cerr el sistema (intestino) con un cordn, pita o con una banda de goma, de forma que luego pueda
abrirla.

Figura N10: Despus de aadir al sistema la mitad de glucosa


y de almidn cerramos el intestino con una pita.

Se mezcl la solucin dentro de la bolsa y enjuago con agua la superficie externa de la bolsa; se anot el
color inicial de la solucin dentro de la bolsa.
Se aadi varias gotas de solucin de yodo o lugol a un vaso (beaker) con 300 ml de agua hasta obtener un
color dorado.
Se coloc el sistema dentro del agua por 30 minutos.
Se sac el sistema y se coloc en un vaso (beaker) vaco. Se anot el color de la solucin dentro del sistema y
se compar con la solucin en el primer vaso.

5.-RESULTADOS
En el primer recipiente observamos que la zanahoria solo en agua aument su tamao, este fenmeno de la smosis
se le denomina Endsmosis ya que las partculas de agua ingresan a la zanahoria. Y esto hace que la zanahoria
aumente de tamao.

Figura N11: La zanahoria luego haber estado 24 horas


en un recipiente con agua
En el segundo recipiente observamos que la zanahoria con la solucin (agua + sal) disminuyo su tamao, este
fenmenos de la smosis se le denomina Exsmosis ya que las partculas de agua salen por efecto de la sal, y esto
hace que la zanahoria se arrugue y disminuya su tamao.

Figura N12: La zanahoria luego de permanecer por 24 horas


en un recipiente con agua y sal .

En la dilisis la glucosa sale al agua y el almidn se queda adentro del sistema que es el intestino delgado de vaca.

6.-CONCLUSIONES
En este experimento vimos las diferencias que hay entre la osmosis y la dilisis por ejemplo: la smosis es el paso de
las molculas de disolventes a travs de la membrana, de un lugar menos concentrado a otro ms concentrado, en
este caso hemos utilizado las membranas de la zanahoria. En cambio la dilisis es la transferencia de disolventes a
travs de una membrana semipermeable de un lugar ms concentrado a otro menos concentrado, aqu hemos
empleado el intestino delgado de la vaca.

7.-CUESTIONARIO
Al paso del agua a travs de las membranas semipermeables se conoce como SMOSIS. Lo pudo
observar en la prctica (S/No) SI
A qu se deben los fenmenos observados?
A la presin osmtica hace que la cantidad de lquido se ultra filtre, la concentracin de soluto en el
disolvente y las propiedades de la membrana.
Qu puedes decir sobre la concentracin osmtica del citoplasma de las clulas de la zanahoria?

La zanahoria en el medio hipertnico se arrug, mientras que la que estaba en medio hipotnica se dilat un
poco.

Se habran obtenido los mismos resultados si se hubiera empleado un alga marina en el experimento?

Aumentara mucho la presin de turgencia, ya que el alga, pasara a ser medio hipertnico respecto al medio
(posee ms sustrato que el medio) entonces el agua tendera a entrar desmesuradamente, y aumentara la
presin la clula, lo que seguramente sera contrarrestado por la pared celular del alga, evitando
temporalmente que se produzca la lisis (ruptura del organismo).

8.-REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/manuales/materiales_tic/biomoleculas/Osmosis.htm
http://transportedemembrana.blogspot.mx/2011/04/osmosis.html

http://es.wikipedia.org/wiki/Dilisis_(bioqumica)
http://es.wikipedia.org/wiki/smosis
http://es.wikipedia.org/wiki/Dilisis
http://html.rincondelvago.com/osmosis-en-las-celulas.html

ACCION ENZIMTICA DE LA ENZIMA DE LA DESHIDROGENASA


LCTICA EN EL CATABOLISMO ANAEROBIO DE SACHAROMYCES
LEVADURAS

1.-OBJETIVO
o Demostrar la accin enzimtica de la deshidrogenasa lctica en el catabolismo anaerobio de sacharomyces
levaduras.
o Observar y conocer la reaccin de la deshidrogenasa lctica.
2.-FUNDAMENTO
El catabolismo comprende el metabolismo de degradacin oxidativa de las molculas orgnicas, cuya finalidad es a
obtencin de energa necesaria para que la clula pueda desarrollar sus funciones vitales. Debe existir una ltima
molcula que capte los electrones o los hidrgenos desprendidos en las reacciones de oxidacin .Si el aceptor de
electrones es el oxgeno molecular la ruta o el catabolismo es aerbico y si es otra molcula es catabolismo
anaerbico.
Lactato deshidrogenasa: Es una enzima que cataliza la reduccin reversible del Piruvato a lactato,
utilizando la coenzima NADH como agente reductor. Algunos autores llaman esta reaccin como la
ltima de la glucolisis; y sucede cuando la cantidad de oxigeno es limitada, como en el musculo
durante la actividad fsica. Esto la diferencia de otras formas fermentativas anaerobias del
catabolismo de los carbohidratos. La forma enzimtica ms comn tiene un peso molecular de
140,000 pero todas las de los vertebrados estn formadas por tetrmeros, con cuatro sitios
catalticos independientes de cada tetrmero.

CH 3 COCOO

NADH +

H ---------------> CH 3 CH 2 OCOO

Piruvato

+
NAD
Lactato

El lactato es el producto de la reaccin, producida en condiciones anaerobias, difunde a travs de la


membrana plasmtica para quedar en los alrededores como producto de desecho. El dolor
ocasionado por la fatiga y el rigor de las fibras musculares se debe en gran parte a la acumulacin de
lactato en el musculo.
En el hgado, el lactado es reconvertido a Piruvato gracias al lactato deshidrogenasa. Esta enzima es
utilizada por los mdicos para el diagnstico y seguimiento de un infarto de miocardio.

3.-EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS


Materiales:
o
o
o
o
o

Tubos de ensayo
Gradilla
Lactato Ringer
Levadura
Azul de metileno

4.-METODOLOGIA

Procedimiento:
Se prepar, en una fiola I de 250 ml una suspensin de Saccharomyces (levadura).Se prepar en otra fiola II
de 250 ml una suspensin de saccharomyces, se someti a ebullicin por tres minutos.
Se coloc en la gradilla tres tubos de ensayo numerados del 1 al 3.
Se agreg 5 ml de suspensin de levadura sin calentar a los tubos 1 y 3. Se agreg 5 ml de suspensin de
levadura calentada al tubo 2.
Se agreg 10 gotas de Lactato de Ringer a los tubos 1 y 2.
Se agreg 5 ml de azul de metileno diluido al 1/10000 a cada tubo de ensayo.
Se invirti los tubos
Se cubri los tubos con una capa delgada de aceote mineral.
Se dej los tubos en reposo. Se observ a los 3, 6, 9, 12, 15, 20,30 minutos, los cambios de color en cada
tubo.
Se anot las observaciones.

Figura N01: Tubo #1 con lactato ringer,


azul de metileno y levadura.

Figura N02: Tubo #2 con lactato ringer,

Figura N03: Tubo #3 con azul de

azul de metileno y levadura hervida.

metileno y levadura.

Figura N04: Los tres tubos en reposo de 3 a 30 min.


para observar sus respectivos cambios de color de cada tubo.

5.-RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el tubo 1 y 3 hemos agregado levadura sin calentar y azul de metileno, pero al tubo n 1 le aadimos lactato de
ringer lo que observamos fue que el azul de metileno de ese tubo desaparece rpido, lo que indica que sea producido
la accin enzimtica ms rpido en uno de estos dos tubos.
En el tubo n2 se agreg similar a los dos tubos anteriores, pero ms similar al tubo n1 solo que esta vez la levadura
fue hervida. Observamos que la accin enzimtica demora, por eso el azul de metileno se mantiene ms tiempo que
en el tubo 1 y 3.
Demostrando as la diferencia que existe entre estos tres tubos con sus respectivas soluciones.

6.-CUESTIONARIO:
Por qu la accin enzimtica de la deshidrogenasa lctica en el catabolismo anaerobio de
saccharomyces levaduras es ms evidente en el tubo 1?
Porque normalmente la accin enzimtica es muy lenta, as que agregamos lactato de ringer para que se acelere la
accin, adems en aquel tubo contena levadura sin hervir con azul de metileno; luego vimos el cambio de color ms
fcilmente. Cosa que en el tubo n2 no se pudo porque tena levadura hervida y eso hacia que la accin demorara.
Qu funcin tiene el azul de metileno en la prctica?
El azul de metileno se utiliza como aceptor de hidrogeno, pues posee la propiedad muy til de cambiar de color al
pasar de oxidado a reducido. La funcin del azul de metileno es de identificar la velocidad de la accin enzimtica
con la decoloracin que se produce en los tubos de ensayo.
Explique qumicamente la conversin del piruvato en lactato


CH 3 COCOO

NADH +

H ---------------> CH 3 CH 2 OCOO

Piruvato

+
NAD
Lactato

En condiciones anaerobias el piruvato se reduce a lactato por accin del NADH que se
oxida dando

+
NAD

en una reaccin catalizada por la lactato deshidrogenasa.

La transformacin del piruvato en lactato esta favorecida cuando la cantidad de oxigeno


disponible es limitada, como por ejemplo en el msculo al iniciarse el ejercicio y durante
la actividad intensa.

7.-REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
http://campus.usal.es/~delefn/java/alumnos/oregano/hues5.htm
http://www.buenastareas.com/ensayos/Reporte-De-Bioquimica-Deshidrogenasa-Lactica/7072238.html

OBSERVACIN DE PIGMENTOS FOTOSINTTICOS POR


CROMATOGRAFIA EN PAPEL
1.-OBJETIVOS
Extraer pigmentos de un extracto de tejido vegetal para identificarlos.
Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica compleja de cromatografa en papel.

2.-FUNDAMENTOS
Qu son los pigmentos?
Si es posible encontrar en el reino vegetal todos los matices y combinaciones de colores del espectro, existe un
predominio general de los colores primarios: verde, amarillo, rojo, azul. Estos colores son conferidos a los vegetales
por determinados compuestos qumicos definidos, llamados pigmentos. El color particular que presenta un
determinado rgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro o la combinacin de ellos. Se debe
tener claro que cuando un vegetal presenta un color blanco, es debido a la falta de tales pigmentos. La luz solar que
incide sobre ellas no es absorbida selectivamente como ocurre en las partes coloreadas, sino que es transmitida o
reflejada prcticamente sin sufrir modificacin.
Dnde estn los pigmentos?
Estos pigmentos se encuentran en el interior de las clulas vegetales especficamente en una organela llamada
cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plstidos que contienen pigmentos cloroflicos. Los compuestos
cloroflicos estn ligados qumicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan
retenidos en estado coloidal. Asociados con las clorofilas, existen tambin en los cloroplastos dos clases de
pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son las xantofilas y carotenoides.
Cmo se dividen los solventes?
Los pigmentos cloroflicos son insolubles en el solvente universal llamado agua. Pero s son solubles (afinidad
qumica) en solventes orgnicos como por ejemplo alcohol etlico y acetona. A los solventes que extraen
simultneamente todos los pigmentos de la hoja se los suele llamar extractantes. Existen otros solventes que
presentan afinidad por algunos pigmentos y se los llama separadores, como por ejemplo el tetracloruro de carbono y
el ter de petrleo.
En el mtodo de extraccin simple, como se desarrolla ms adelante se utilizar como extractante el alcohol etlico y
como separador el tetracloruro de carbono. Estos dos solventes orgnicos responden en forma diferente a los
pigmentos cloroflicos, como as tambin a sus diferencias fsicas que hacen que sean dos lquidos no misibles y con
diferente peso especfico.

En el segundo mtodo por cromatografa se utilizar como extractante la acetona y como separador el ter de
petrleo. Este mtodo se trata de una separacin ms fina de los pigmentos, y se basa en la absorcin y solubilidad
diferenciales de varias sustancias entre las que se incluyen los pigmentos. Un soporte inerte como papel de filtro para
la corrida y unos granos de carbonato de calcio para deshidratar la muestra, son los componentes necesarios para
desarrollar la tcnica.

Fotosntesis: se define como las reacciones que se presentan en las clulas vegetales a travs de las cuales se
producen carbohidratos a partir de agua y dixido de carbono en presencia de la energa luminosa del sol.
La ecuacin de la fotosntesis se escribe de la siguiente manera:
6 CO2 +6 H 2 O

En este proceso el

C6 H 12 O+6 O

CO2

, que la clula vegetal fija para elaborar la glucosa se reduce al tomar tomos de hidrogeno

de la molcula de agua, a diferencia de las bacterias sulfurosas purpureas que emplean el sulfuro de hidrogeno
2 H2 S
como agente reductor en el primer caso como subproducto hay desprendimiento de oxgeno y en el
segundo azufre, que procede de los agentes reductores, dadores de hidrgenos. Por lo tanto en la fotosntesis de los
CO2
vegetales, los hidrgenos que reducen el
a carbohidratos vienen de la molcula del agua.
La fotosntesis se lleva a cabo en los cloroplastos y comprende dos fases o procesos: una rpida reaccin en la luz o
fase luminosa y otra ms lenta reaccin a la oscuridad o fase oscura (ciclo de Calvin).

Cromatografa en papel: Se basa en la diferencia de velocidad al desplazarse los distintos pigmentos sobre una
banda de papel poroso. Los pigmentos deben estar previamente disueltos en un disolvente. Los ms solubles se
desplazarn ms deprisa y los menos solubles ms despacio, apareciendo sobre el papel diferentes bandas de color.
Para comprobarlo se ha utilizado un extracto de hoja de espinaca disuelto en etanol y otro de hoja de lombarda
disuelto en acetona. De abajo arriba, con el extracto de espinaca se observan las siguientes bandas: clorofila a (verde
claro), clorofila b (verde oscuro), xantofilas (amarilla) y carotenos (anaranjada). Con el de lombarda: clorofilas
(verde), xantofilas (amarilla) y antocianinas (morada).

FiguraN01: Cromatografa en papel

3.-MATERIALES Y REACTIVOS

Matraz Erlenmeyer
Placa Petri
Embudo de vidrio
Mortero de porcelana
Papel filtro
Pipeta
Tijera
Regla
Navaja

Reactivos:
Agua destilada
Alcohol etlico
Material biolgico:
Hojas de espinaca (spinacia oleracea)

4.-METODOLOGIA
Procedimiento:

Se cort las hojas de espinaca en trozos pequeos


Se trituro en un mortero de porcelana las hojas de espinaca, una vez
obtenido una pasta verde, se aadi alcohol etlico, esto es con el
propsito de disolver los pigmentos contenidos en las hojas de
espinaca.

Figura N02: Trituracin de las hojas de espinaca Figura N03: Luego de haber obtenido
en un mortero de porcelana.

una pasta verde se le agrego alcohol.

La disolucin obtenida se filtra y se recogi en un matraz .Se volvi a adicionar alcohol a las hojas en el
mortero. Se continu con la trituracin, se filtr de nuevo y se recogi el lquido en el mismo vaso de
precipitacin.
.

Figura N04: Triturando las hojas de espinaca

Figura N05: Obtenida la disolucin

con alcohol.

se filtra con un papel filtro.

Se filtro con un embudo y papel filtro y se recogi el filtrado en una placa Petri.

Se cort una tira de papel filtro de 1x10 cm, se marc con un lpiz una lnea a un centmetro de distancia de
cada borde.

Figura N06: Recogiendo el filtrado en matraz

Figura N07: luego de haber echado el

Erlenmeyer.

filtrado en una placa Petri se coloco


las dos tirillas de papel filtro.

5.-RESULTADOS
Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o zonas, que corresponden a los
distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. Segn su grado de solubilidad con el ter de
petrleo se reconocen estas bandas y en este orden:
Clorofila b
Clorofila a
Xantofila
Carotenos

4
3
2

Figura N08: 1) Clorofila b

2) Clorofila a

3) Xantofila

4) Carotina

6.-CONCLUSIONES
Hemos aprendido que el pigmento obtenido de las hojas de espinaca al colocar el papel filtro este se iba poniendo de
diferentes tonalidades de acuerdo como transcurra el tiempo.
Se extrajo el pigmento de la espinaca y se obtuvo el valor de Rf del pigmento que es de 0,32.

Figura N09: Fibra de la hoja de espinaca vista en el microscopio.

7.-CUESTIONARIO
Qu importancia tiene la cromatografa en anlisis biolgicos?
Es la tcnica de anlisis qumico utilizada para separar sustancias puras de mezclas complejas. Esta tcnica
depende del principio de adsorcin selectiva
Permite separar (o fraccionar, en lenguaje de laboratorio) los componentes de una mezcla de substancias
biolgicas. Para fraccionar e identificar molculas pequeas, como aminocidos o azcares.

Cul es el rol de los pigmentos accesorios en la fotosntesis?


Los pigmentos son sustancias qumicas que reflejan ciertas longitudes de onda (colores) de luz, pero otras no.
Los pigmentos reflejan diferentes longitudes de onda, esto da a las flores una variedad de combinacin de
colores. Adems, los cambios estacionales en la sntesis relativa de los diferentes pigmentos da cuenta de los
cambios de color en las hojas durante el otoo.
Los pigmentos en la fotosntesis son :

Clorofila b.- Es un pigmento accesorio que ayuda a las plantas que absorben la luz utilizada en energa.
Mientras que la clorofila b casi no es tan abundante como la clorofila a, las estructuras moleculares de las dos
son algo similares. La clorofila b es de color amarillo, principalmente absorbe la luz roja y violeta y es ms
soluble que la clorofila a.
Carotenoides.- Son una clase de pigmentos accesorios que se producen en todos los organismos fotosintticos
como las algas y algunos tipos de hongos y bacterias. Los carotenoides son a menudo los pigmentos
principales en las frutas y las flores. Estos pigmentos accesorios son hidrfobos, o solubles en grasas; existen
en las membranas lipdicas y generalmente no son fabricados por la mayora de los animales, pero son
obtenidos a travs de la dieta de los animales y se utilizan de muchas maneras en el metabolismo. Los
carotenoides son de color rojo, amarillo o naranja y sobre todo absorben la luz azul.
Xantofilas.- son otra clase de pigmentos accesorios. Estos pigmentos accesorios contienen oxgeno y oxidan
esencialmente a los carotenoides. Similares a los carotenoides, las xantofilas son solubles en grasa, sin
embargo, estos pigmentos accesorios no absorben la energa tan bien como los carotenoides. Las xantofilas
son de color rojo y amarillo y sobre todo absorben la luz azul.

Antocianinas.- Son una clase de pigmentos accesorios que son solubles en agua y permanecen en la vacuola,
un compartimiento cerrado dentro de una clula, de una planta. Estos pigmentos accesorios son inspidos,
inodoros y estn en todos los tejidos de las plantas superiores, incluyendo races, flores, hojas, frutos y tallos.
Las antocianinas son de color prpura, rojo y azul, en funcin de su pH, o la medida de la acidez o basicidad
y principalmente absorben la luz azul, verde y azul-verde.

Calcule el valor de Rf del pigmento?


El Rf del pigmento de la espinaca es de 0,23.

8.-REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
http://clubensayos.com/Ciencia/PIGMENTOS-FOTOSINTETICOS-PRACTICA/379257.html
http://www.botanica.cnba.uba.ar/Trabprac/Tp6/Pigmentos.htm
http://xilocopa.blogspot.com/2010/06/identificacion-de-pigmentos.html
http://html.rincondelvago.com/cromatografia_1.html
http://www.ehowenespanol.com/cuales-son-cuatro-pigmentos-accesorios-necesarios-llevar-cabo-fotosintesis-info_232623/

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