INSEMINACION ARTIFIACIAL

EN ALPACAS(Lama pacos)

A report for the Rural Industries Research and

Development
Corporation
by
Jane Vaughan
David Galloway
David Hopkins
November 2003
RIRDC Publication No 03/104
RIRDC Project No AAI-1A

 2003 Rural Industries Research and Development Corporation.

All rights reserved.
ISBN 0 642 58670 5
ISSN 1440-6845
Artificial insemination in alpacas (Lama pacos)
Publication No. 03/104
Project No. AAI-1A
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Published in November 2003

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Advertencia
La puntera primaria de este proyecto era desarrollar la tecnologa para la
inseminacin artificial en alpacas en asociacin con tarifas aceptables del
embarazo despus del AI. El proyecto fue analizado en 5 pasos para alcanzar
esta puntera:
1. Coleccin constante y confiable de semen
2. La caracterizacin del semen para permitir la seleccin de conveniente
ejaculates para la preservacin
3. El enfriarse del semen de la alpaca
4. El congelar del semen de la alpaca
5. Inseminacin artificial de hembras.
La fisiologa reproductiva de alpacas diferencia a la de otros animales
domsticos y del restos mal entendidos. Los varones se acoplan en el
recumbency del sternal por aproximadamente 20 minutos y ejaculate muchas
veces durante este perodo. Cada uno ejaculate consiste en el bajo volumen,
semen de gran viscosidad que contiene una concentracin baja de la esperma.
La fertilidad de los varones de la alpaca declina con el aumento de nmeros de
acoplamientos consecutivos. La longitud de la gestacin es cerca de 11.5
meses, los gemelos son raros y los varones alcanzan pubertad a partir de la 1
a 3 aos de la edad. Los intervalos de la generacin estn relativamente de
largo porque los varones son lentos madurarse sexual y las hembras exhiben
una gestacin extendida, as que la crianza convencional da lugar a un
aumento gentico ms lento con respecto a la otra especie domstica fibra-que
produce tal como ovejas y cabras. El desarrollo de la inseminacin artificial se
dirige que aumenta el uso de los varones superiores de la alpaca pues las
dosis mltiples del semen sern derivadas de cada uno ejaculate.
La inseminacin artificial reducir la necesidad de acoplamientos mviles del `'
y por lo tanto para reducir el riesgo de lesin y de enfermedades transportarasociadas en varones de la alpaca de la lite y para reducir perceptiblemente la
transmisin del riesgo de la enfermedad de Johne, de piojos y de otros agentes

infecciosos entre granjas de la alpaca. La inseminacin artificial tambin

permitir ms humano y la importacin econmica de genotipos superiores de
en ultramar y aumenta la eficacia de difusin de los genotipos superiores de la
alpaca alrededor de Australia. En otras industrias de la fibra, tales como
produccin de las ovejas del merino y de la cabra de Angora, la crianza asistida
se est utilizando para mejorar calidad de la fibra ms rpidamente que ser de
otra manera posible por el acoplamiento natural. El conocimiento gan sobre la
coleccin, caracterizacin, preservacin y la inseminacin del semen de la
alpaca acelerar la disponibilidad de los servicios de la inseminacin artificial
en alpacas. Esto beneficiar la industria australiana de la alpaca con una
utilizacin ms eficiente de varones gentico superiores y una difusin ms
rpida de genotipos mejorados a travs de la manada nacional. Este proyecto
fue financiado del rdito de la industria que es emparejado por los fondos
proporcionados por el gobierno federal. Este informe es una adicin a la gama
diversa de RIRDC sobre de 900 publicaciones de la investigacin, las formas
parte de nuestro programa raro y natural del R&D de las fibras, que apunta
desarrollar tecnologa de la inseminacin artificial en alpacas. La mayor parte
de nuestras publicaciones estn disponibles para la visin, descargando o
comprando en lnea con nuestro Web site:
transferencias directas

En www.rirdc.gov.au/fullreports/index.htm compras

En www.rirdc.gov.au/eshop Simon Hearn Director de manejo Rural

Industries

Research

Development

Corporation

intravenoso

Reconocimientos
Los autores quisieran agradecer a criadores Jude Anderson y Alan Cousill de la
alpaca, perno prisionero de la alpaca de Pucara, colina de Joyce y de Jeffery,
Adelyn Alpacas, Susan McGearey, granja de Marshwood y Carolyn y Allan
Jinks del perno prisionero de la alpaca de Benleigh para el uso de su alpaca se
rene. Las instalaciones de la granja fueron proporcionadas abundante por
Moore mximo.
Profesor Jock Macmillan (universidad de Melbourne, de Australia), dr Lulu
Skidmore (camello

Centro de la reproduccin, Dubai), dr Ahmed Tibary

(universidad de estado de Washington, los E.E.U.U.), dr Matthias

Gauly

(universidad de Giessen, de Alemania), dr Wilfredo Huanca (universidad de

San Marcos, Per), dr Alex Tinson (centro, al-Ain de Reseach de la
transferencia del embrin del camello), Dr Leonor von Baer (Llamas del Sur,
Chile), ms enero Atkins (Monash IVF, Australia), y nacin y Sr. Andrew del dr
Ian Lewis, del dr David Brockway (gentica Australia) proporcion consejo y
ayuda valiosos. Somos tambin agradecidos al comit australiano del tica del
animal de laboratorio de la salud animal para la ayuda durante el trabajo
experimental.
Esta investigacin fue apoyada financiando de las industrias rurales
investigacin y desarrollo

Corporacin (proyecto AAI-1A) y los Australian

Alpaca Association Inc.

Abreviaturas
IA

Inseminacin artificial

VA

Vagina artificial del sistema de pesos americano

Identificacin

chorionic
hCG

humana del gonadotrophin

GnRH

hormona de GnRH gonadotrophin-que lanza dentro del dimetro

LH

Hormona luteinising

OD

Dimetro exterior

SACO

Camelid del americano del sur

Resumen Ejecutivo
La puntera primaria de los estudios en este informe era desarrollar la
tecnologa para la inseminacin artificial en alpacas en asociacin con tarifas
aceptables del embarazo despus del AI. El proyecto fue analizado en 5 pasos
para alcanzar esta puntera: La coleccin constante y confiable de semen,
caracterizacin del semen para permitir la seleccin de conveniente ejaculates
para la preservacin, enfriarse del semen de la alpaca, congelar del semen de
la alpaca y la inseminacin artificial de hembras.
La inseminacin artificial (AI) en alpacas es el tema de la investigacin en
varios pases. El primer procura en el AI ocurri en los aos 60 en SACO en
Per (Fernandez-Baca y otros. 1966, Calderon y otros. 1968) y camellos (Elliot
1961). Desde entonces, los estudios en la coleccin del semen y la
inseminacin artificial se han realizado en alpacas y otros camelids del
americano del sur en Australia (Gunn 1999), el norte y Suramrica (Bravo y
otros. 1997, Ratto y otros. 1999b, Huanca y otros. 2001b), Gran Bretaa
(McEvoy y otros. 1992b) y Alemania (Burgel y otros. 1999). Los esfuerzos
concentrados en el AI en camellos han ocurrido en los 20 aos pasados en un
intento por mejorar calidad y la produccin de la leche y de la carne, en
respuesta a estacas ms altas en competir con de camello e inters creciente
en la conservacin de la casta (Purohit 1999a).
La fisiologa reproductiva de alpacas diferencia a la de otros animales
domsticos y del restos mal entendidos. Los varones se acoplan en el
recumbency del sternal por aproximadamente 20 minutos y ejaculate muchas
veces durante este perodo (Lichtenwalner y otros. 1996a, 1996b). Cada uno
ejaculate consiste en el bajo volumen, semen de gran viscosidad que contiene
una concentracin baja de la esperma (Sumar 1983, McEvoy y otros. 1994). La
fertilidad de los varones de la alpaca declina con el aumento de nmeros de los
acoplamientos consecutivos (Bravo y otros. 1997b). La longitud de la gestacin
es cerca de 11.5 meses, los gemelos son raros y los varones alcanzan
pubertad a partir de la 1 a 3 aos de la edad (bravo 1994). Los intervalos de la

generacin estn relativamente de largo porque los varones son lentos

madurarse sexual y las hembras exhiben una gestacin extendida, as que la
crianza convencional da lugar a un aumento gentico ms lento con respecto a
la otra especie domstica fibra-que produce tal como ovejas y cabras.
El desarrollo de la inseminacin artificial se dirige que aumenta el uso de los
varones superiores de la alpaca pues las dosis mltiples del semen sern
derivadas de cada uno ejaculate. La inseminacin artificial reducir la
necesidad de acoplamientos mviles del `' y por lo tanto para reducir el riesgo
de lesin y de enfermedades transportar-asociadas en varones de la alpaca de
la lite y para reducir perceptiblemente la transmisin del riesgo de la
enfermedad de Johne, de piojos y de otros agentes infecciosos entre granjas
de la alpaca. La inseminacin artificial tambin permitir ms humano y la
importacin econmica de genotipos superiores de en ultramar y aumenta la
eficacia de difusin de los genotipos superiores de la alpaca alrededor de
Australia. En otras industrias de la fibra, tales como produccin de las ovejas
del merino y de la cabra de Angora, la crianza asistida se est utilizando para
mejorar calidad de la fibra ms rpidamente que ser de otra manera posible por
el acoplamiento natural.
No hay servicios establecidos del AI por todo el mundo. Las razones incluyen
las dificultades de la investigacin de financiamiento y que sostiene en Amrica
latina en el pasado, la dificultad en la coleccin del semen, el mucoid
caracterstico del semen de la alpaca que imposibilita la adaptacin fcil de la
tecnologa del AI de otra especie, la caracterstica de la ovulacin inducida en
alpacas femeninos, la carencia de las tcnicas para definir excelencia
reproductiva en los alpacas masculinos, la carencia de tcnicas probadas para
almacenar el semen de la alpaca en forma enfriada o congelada y la dificultad
del paso transcervical de la pipeta de algunas hembras.
Este informe presenta nuevos datos sobre las tcnicas usadas para la
coleccin, la caracterizacin, la preservacin y la inseminacin del semen de la
alpaca. La coleccin constante y confiable de semen de la alpaca era posible
con un mannequin de madera cubierto con una piel bronceada de la alpaca y
7

cabido con una vagina artificial. Era posible entrenar a los varones virginales y
experimentados de la alpaca a acoplarse con el mannequin.
Los componentes del comportamiento de acoplamiento fueron definidos
durante el entrenamiento de varones y durante el semen la coleccin y las
caractersticas del semen que definen un ejaculate fueron establecidas. Una de
las observaciones ms importantes hechas durante el estudio era que la
calidad del semen vari considerablemente en y entre varones.
Los diluyentes numerosos fueron mezclados con semen en un intento por
prolongar la vida y mantener la salud de la esperma despus de la coleccin en
la vagina artificial. Los suplementos que contenan la yema de huevo y el
glicerol, y particularmente Triladyl (Minitub, Alemania), probaron los
suplementos ms eficaces para el semen enfriado hasta 48 horas. Inmediato
poste-deshelar la actividad de la esperma era aproximadamente 20 a el 40%
cuando cualquiera El almacenador intermediario verde/claro del camello (IMV
International Corporation, los E.E.U.U.) o Biladyl A/B (Minitub, Alemania) fue
utilizado como suplemento para el semen que congelaba.
La deposicin de Transcervical del semen en la extremidad del cuerno uterino
ipsilateral al ovario que llevaba el folculo dominante demostr ser una tcnica
simple y eficiente para la inseminacin artificial. No se alcanz ningunos
embarazos usando el AI transcervical, intrauterino del semen enfriado o
congelado-deshelado. Los resultados en este proyecto proporcionan una base
sana sobre la cual continuar desarrollando la tecnologa para la coleccin, la
preservacin y la inseminacin del semen de la alpaca.
Aunque el AI primero fue procurado en los aos 60 en camelids del americano
del sur, los una pequea cantidad de embarazos se han alcanzado que usando
desde entonces enfriado o congelado el semen reflejan las dificultades de
transferir tecnologa de crianza artificial del otro ganado domstico a los
camelids. Las idiosincrasias fisiolgicas de los alpacas machos tales como
duracin de acoplamiento extendida y bajo volumen, baja densidad, semen de

gran viscosidad conjuntamente con la variacin en calidad de ejaculates ambos

en y entre desafos proporcionados los varones a travs del proyecto entero.
Los datos recogidos durante el proyecto asistirn a los criadores y a los
veterinarios en la industria australiana de la alpaca para seleccionar padres de
los sonidos con la evaluacin de criar caractersticas del comportamiento y del
semen. Se anticipa que esta misma informacin asistir con la seleccin de
varones con el semen que es conveniente para enfriarse y/o congelar. Las
caractersticas del semen necesitan ser definidas ms a fondo en lo referente a
edad, a la estacin y al tamao alimenticio del estado y testicular.
El conocimiento ganado sobre la coleccin, la caracterizacin, la preservacin y
la inseminacin del semen de la alpaca acelerar la disponibilidad de los
servicios de la inseminacin artificial en alpacas. Esto beneficiar la industria
australiana de la alpaca con una utilizacin ms eficiente de varones gentico
superiores y una difusin ms rpida de genotipos mejorados a travs de la
manada nacional.

1. INTRODUCCIN Y REVISIN DE LA LITERATURA

1.1 Introduccin
1.1.1 Objetivos y el acercamiento tomado.
Las punteras del proyecto de investigacin eran convertirse y establecer:
1. La tecnologa para la coleccin, procesar y la preservacin del semen de la
alpaca y
2. La tecnologa para la inseminacin del semen de la alpaca.
El acercamiento que tuvo que ser tomado era uno de investigacin exploratoria.
Los protocolos se han instalado para preservacin e inseminacin artificial (AI)
del semen en otros animales domsticos por ensayo y error durante los 50
aos pasados. Los cambios todava se estn realizando al gravamen del
semen y los procedimientos de la direccin y a diluyentes en las industrias
domsticas del AI del ganado. El acercamiento con ganados ha sido probar
nuevo tcnicas en investigaciones exploratorias. Los que demuestran promesa
se sujetan a planeada experimentacin con millares de inseminaciones bajo
condiciones controladas supervisadas de cerca para embarazos. Las ventajas
significativas de la nueva tecnologa se pueden establecer estadstico basaron
en los resultados de ensayo.
Relativamente poco trabajo se ha realizado en la coleccin, la caracterizacin,
la preservacin y la inseminacin del semen de la alpaca. Se ha hecho qu se
repasa en este captulo.
Una gran cantidad de alpacas no iban a estar disponibles en Australia para los
experimentos controlados con diversa coleccin y no manejaban mtodos,
diversos diluyentes y las tcnicas de congelacin y diferentes acercamientos a
la inseminacin. El estado actual del conocimiento en tecnologas de la
inseminacin artificial en alpacas tambin no fue avanzado suficientemente
para los experimentos controlados de la escala grande. Por lo tanto hemos
estudiado intensivo una pequea cantidad de animales para descubrir qu
trabajaron y qu no trabaj.

10

1.1.2 Fondo de la industria

La produccin de la fibra de alpacas presenta muchas atracciones a los
criadores anticipados en Australia a pesar de ya producir 636 millones de
toneladas de las lanas de la oveja grasienta anualmente (centro de
investigacin cooperativo para la lana superior de la calidad, la comunicacin
personal). La fibra de la alpaca es suave, fina y ligera y siente 2-3 micrones
ms fino que las lanas. Los animales son plantigrade (comparado con las
ovejas que son digitigrade) y separar tu peso sobre una mayor rea superficial
de la tierra (Ordoez 1994). No requieren la cola el atracar o el mulesing pues
tienen un perino sin pelo. Ellos defaecate en pilas comunales del dung de
modo que

las cargas gastrointestinales del parsito son ms bajas y la

necesidad para el mojada antihelmntico es mucha

reducido (Carmichael

1999). Alpacas es alimenticio ms eficiente que ovejas y requiere menos

protena y energa (una alpaca 65kg requiere la misma cantidad de
alimentacin del mantenimiento que una oveja 40kg; San Martin y otros. 1989).
Alpacas no requiere cercar sofisticado y no guarda a su descendiente contra
depredadores tales como perros y zorros (Sumar 1983).
La industria australiana de la alpaca se est esforzando para llegar a ser
comercialmente viable produciendo grande

cantidades de fibra de la alta

calidad. Hay actualmente 35.500 alpacas en Australia (J. Rothque, asociacin

australiana de la alpaca, comunicacin personal). Estos animales son rapados
anualmente y su fibra es procesado para el hilado, la ropa y el lecho. La
manada nacional tiene un dimetro medio de la fibra de 28

micrones (B.

McGregor, recursos naturales y ambiente del departamento, comunicacin

personal). el 84% de el clip 1999/2000 australiano de la alpaca tena micrones
mayor que de un dimetro 25, el 27% del clip era el blanco y cada animal
produjeron un promedio del pao grueso y suave bordeado 1.25 kilogramos
(Holt, 2001). El australiano La cooperativa de la alpaca actualmente paga a
AU$45/kg la fibra limpia dimetro de la fibra menos de 20 micrones, pero
solamente AU$5/kg limpian la fibra para la fibra con un dimetro de 27.1-32
micrones.

11

Los criadores deben poner la presin mxima de la seleccin en varones y

combinar esto con rpido y amplio difusin de los genotipos apropiados para
alcanzar la meta de producir la fibra de la alta calidad. el uso creciente de los
varones de la alpaca con genotipos superiores va la inseminacin artificial
permitira una reduccin ms rpida en el dimetro de la fibra, densidad
creciente de la fibra por el control animal y mayor del color de la fibra en la
manada nacional de la alpaca. Los productores beneficiaran con calidad
mejorada y la cantidad creciente de fibra de la alpaca en sus manadas. Muchos
granjeros de la alpaca no poseen a varn conveniente para criar como el
australiano

la industria de la alpaca se basa en los centenares de

caractersticas cada uno con menos de 20 animales. El semen no est todava

disponible para la inseminacin artificial confiable, rentable (Burgel y otros.
1999). Los granjeros que no poseen a varn actualmente utilizan a varones
seleccionados posedos por otros criadores para mejorar la calidad de la fibra
de sus animales.
Por lo tanto, la industria australiana de la alpaca confa pesadamente en mvil
del o acoplamientos del acoplado del para diseminarse a travs de los
genotipos nacionales de la manada de la alpaca percibidos para ser superior
para producir la fibra fina. Este mtodo implica una alpaca, generalmente el
varn, siendo transportado a la granja donde est ocurrir el acoplamiento. El
encargado de la granja determina la poca del acoplamiento en acoplamientos
mviles y pluma-acoplamientos on-farm.
La inseminacin artificial (AI) en alpacas es el tema de la investigacin en
varios pases. El primer procura en el AI ocurri en los aos 60 en SACO en
Per (Fernandez-Baca y otros. 1966, Calderon y otros. 1968) y camellos (Elliot
1961). Desde entonces, los estudios en la coleccin del semen y la
inseminacin artificial han sido

realizado en alpacas y otros camelids del

americano del sur en Australia (Gunn 1999), el norte y del sur Amrica (Bravo
y otros. 1997, Ratto y otros. 1999b, Huanca y otros. 2001b), Gran Bretaa
(McEvoy y otros. 1992b) y Alemania (Burgel y otros. 1999). Los esfuerzos
concentrados en el AI en camellos han ocurrido en los 20 pasados aos en un
intento por mejorar calidad y la produccin de la leche y de la carne, en
12

respuesta a estacas ms altas en competir con de camello e inters creciente

en la conservacin de la casta (Purohit 1999a).
La fisiologa reproductiva de alpacas diferencia a la de otros animales
domsticos y del restos mal

entendido. Los varones se acoplan en el

recumbency del sternal por aproximadamente 20 minutos y ejaculate muchas

veces durante este perodo (Lichtenwalner y otros. 1996a, 1996b). Cada uno
ejaculate consiste en el bajo volumen, alto

semen de la viscosidad que

contiene una concentracin baja de la esperma (Sumar 1983, McEvoy y otros.

1994). La fertilidad de los varones de la alpaca declina con el aumento de
nmeros de los acoplamientos consecutivos (Bravo y otros. 1997b).

La

longitud de la gestacin es cerca de 11.5 meses, los gemelos son raros y los
varones alcanzan pubertad a partir de la 1 a 3 aos de la edad (bravo 1994).
Los intervalos de la generacin estn relativamente de largo porque los
varones son lentos madurarse sexual y las hembras exhiben una gestacin
extendida, as que la crianza convencional da lugar a un aumento gentico ms
lento adentro comparacin a la otra especie domstica fibra-que produce tal
como ovejas y cabras.
El desarrollo de la inseminacin artificial se dirige que aumenta el uso de los
machos superiores de la alpaca como las dosis mltiples del semen sern
derivadas de cada uno ejaculate. La inseminacin artificial reducir la
necesidad de acoplamientos mviles del `' y por lo tanto para reducir el riesgo
de lesin y de enfermedades transportar-asociadas en varones de la alpaca de
la lite y para reducir perceptiblemente la transmisin del riesgo de la
enfermedad de Johne, de piojos y de otros agentes infecciosos entre granjas
de la alpaca. La inseminacin artificial tambin permitir ms humano y la
importacin econmica de genotipos superiores de en ultramar y aumenta la
eficacia de difusin de los genotipos superiores de la alpaca alrededor de
Australia. En otras industrias de la fibra, tales como produccin de las ovejas
del merino y de la cabra de Angora, la crianza asistida se est utilizando para
mejorar calidad de la fibra ms rpidamente que ser de otra manera posible
por el acoplamiento natural.

13

No hay servicios establecidos del AI por todo el mundo. Las razones incluyen:

las dificultades de la investigacin de financiamiento y que sostiene en

Amrica latina en el pasado

La dificultad en la coleccin del semen

El mucoid caracterstico del semen de la alpaca que imposibilita la

adaptacin fcil de la tecnologa del AI de la otra especie

La caracterstica de la ovulacin inducida en alpacas femeninos

La carencia de las tcnicas para definir excelencia reproductiva en los

alpacas masculinos

La carencia de las tcnicas probadas para almacenar el semen de la

alpaca en forma enfriada o congelada

La dificultad del paso transcervical de la pipeta de algunas hembras

1.1.3 Secciones del proyecto

Las punteras de este proyecto eran desarrollar y establecer la tecnologa para
la coleccin, procesar y la preservacin del semen de la alpaca y desarrollar y
establecer la tecnologa para la inseminacin del semen de la alpaca. Seis
jalones fueron identificados y los informes sobre cada uno se precisan en los
captulos siguientes.
1. Revisin de la literatura
2. Mtodos de coleccin de semen de la alpaca
3. Caractersticas del semen de la alpaca
4. Almacenaje del semen lquido de la alpaca
5. Almacenaje del semen congelado de la alpaca
6. Mtodos de entrega del semen de la alpaca en la zona reproductiva
femenina.
Los resultados divulgaron en estos captulos proporcionan la base cientfica
para la entrega de un servicio de la inseminacin artificial a la industria
australiana de la alpaca. Se anticipa que las observaciones bsicas respecto a
la fisiologa reproductiva y los mtodos del AI examinados en este proyecto
facilitarn el desarrollo de la crianza asistida en todos los camelids. Las
recomendaciones se hacen en el final de cada captulo en las direcciones que
pensamos que la investigacin adicional debe tomar. 1

14

1.2 Fisiologa reproductiva de la alpaca masculina

1.2.1 Pbertad
Los camelids masculinos se llevan generalmente con los testes descendidos
que son pequeos, suaves y difciles al palpate (Sumar 1983, ElWishy 1988,
bravo 1995, Fowler y otros. 1998). El mecanismo de la pendiente testicular no
se ha descrito (Tibary y otros. 1999b). Los niveles de la testosterona del plasma
son bsicos (60-90 pg/mL; El bravo 1995, el bravo 2002) y las adherencias
existen entre el pene y el prepucio (Sumar 1983, Johnson 1989, FernandezBaca 1993). Como varones madurarte, los testes agrandan (tabla 1.1) y los
niveles de la testosterona del plasma aumentan a ms de 1000 pg/mL (en
aproximadamente 20 meses de la edad en la mayora de alpacas; Bravo 1995,
bravo 2002). Las concentraciones de levantamiento de la testosterona permiten
que el animal crezca y poner encendido la condicin del cuerpo, desarrollar las
caractersticas sexuales secundarias y al parecer las adherencias penopreputial de la interrupcin (Sumar 1983, ElWishy 1988, Fernandez-Baca 1993,
Bravo y otros. 1994b, bravo 1995, Fowler y otros. 1998, marrn 2000). Hay
variacin en la edad de la pubertad en diversa especie del camelid (tabla 1.2).
Los tubules de Seminiferous pueden desarrollar lumina y comenzar
espermatognesis en alpacas a partir de 12 meses de la edad (Montalvo y
otros. 1979, Galloway 2000).
Sin embargo, el inicio de la madurez sexual se determina a menudo por la edad
en la cual las adherencias penile desaparecen y los varones hacen capaces de
una ereccin completa, ms bien que el tiempo en el cual se produce la
esperma viable (el cuadro 1.1; Smith 1999c). Se ha observado en los alpacas
que en 1 ao de la edad 8 12% de varones, en 2 aos de la edad 60- el 78%
de varones y en 3 aos de la edad 94- el 100% de varones han perdido las
adherencias peno-preputial (Sumar 1983, Fernandez-Baca 1993, Fowler y
otros. 1998, Smith 1999c, Bravo y otros. 2000a). La separacin comienza en la
extremidad del pene, en aproximadamente 12-15 meses de la edad en la
mayora de varones; la mitad del blano est libre en 18 meses de la edad y el
pene est totalmente libre de adherencias entre 21 y 26 meses de la edad
(Bravo y otros. 1994b, bravo 1995). La variacin en la edad en la cual se

15

pierden las adherencias peno-preputial se puede explicar parcialmente por el

plano de la nutricin (Fernandez-Baca 1993) pues hay una correlacin entre el
tamao de cuerpo y la longitud testicular del medio (Galloway 2000). La
variacin amplia en tamao testicular en cualquier un edad o tamao de cuerpo
sugiere que otros factores, probablemente genticos, sean tambin importantes
(Galloway 2000). Alpacas se considera haber alcanzado el desarrollo sexual
completo en 5 aos de la edad, en aproximadamente 63 kilogramos de peso
corporal (Sumar 1983).

1.2.2 Anatoma del Prepucio

1.2.2.1 El prepucio
Es midline de lado a lado, no-oscilante y situado triangular, aplanado en
la regin inguinal (Fowler y otros. 1998, Smith 1999c). Hay 2 pezones
rudimentarios de cualquier lado cerca de su frontera caudal. El orificio
preputial se dirige caudo-ventrally cuando est relajado (Fowler y otros.
16

1998). Los msculos bien desarrollados (los msculos preputial laterales

y los msculos preputial craneales y caudales) pueden dirigir el prepucio
remite para la ereccin y al revs para el urination (ElWishy 1988,
Johnson 1989).
1.2.2.2 Pene
Los Camelidos tiene un pene fibroelastico con una flexin sigmoidea
prescrotal que permita la contraccin del pene en el prepucio en no-erija
el estado (cuadro 1.2; Novoa 1970, Sumar 1983, ElWishy 1988, bravo
1995, Fowler y otros. 1998, Smith 1999c). Los msculos del pene del
retractor se unen al ventral convexidad de la flexin sigmoidea del pene
(Tibary y otros. 1999b).
El pene erguido es 35-40 centmetro largo en los alpacas (Sumar 1983,
Bravo y otros. 1994b) y 36-45 centmetro desean adentro llamas (Fowler
y otros. 1998). 18-25 el centmetro del pene extiende ms all del
prepucio en el estado erguido

(Johnson 1989). El tejido fino erctil

consiste en cavernosa de 2 recopilaciones en la raz del pene que

converge en un solo cavernosum de la recopilacin en el cuerpo del
pene (ElWishy 1988). La uretra se incorpora ventral en un surco del
spongiosum de la recopilacin (ElWishy 1988). Los 3 cuerpos
cavernosos del pene son rodeados por el albuginea fibroso grueso del
tunica (5-7 milmetros de grueso en camellos; ElWishy 1988).
El pene del blano es 9-12 centmetro largo (Fowler y otros. 1998). Afila
de una estructura fibrosa de 2 centmetros de dimetro proximally, a
dimetro de 1 centmetro distally, y de extremos en una sola proyeccin
cartilaginosa redondeada,

proceso urethral (Sumar 1983, ElWishy

1988). El proceso tiene 10 milmetros de largo en los alpacas, curvas en

a la direccin a la derecha (Sumar 1983) y puede desempear un papel
en dirigir el pene a travs de la cerviz durante el copulation (Johnson
1989, Bravo y otros. 1994b, bravo 1995, Fowler y otros. 1998) y semen
de dispersin en el tero (Smith 1999c). La abertura urethral del blano
est en la base del proceso cartilaginoso (Fowler y otros. 1998, Smith
1999c). Hay un divertculo urethral dorsal en el nivel de la snfisis plvica
17

que previene el paso de un catter en la vejiga (Fowler y otros. 1998,

Smith 1999c).
1.2.2.3Testiculos
Los testIculos de camelidos estn situados en un escroto no-oscilante
sin un cuello definido, formando una protuberancia del subanal
comparable a los verracos (Sumar 1983, ElWishy 1988). Normalmente,
ambos testes son pequeos y elptico, similar de tamao, trgido en la
palpacin y el movimiento libremente dentro del escroto (Sumar 1983,
bravo 1995, Fowler y otros. 1998). El de eje largo de cada testis es
oblicuo, con un caudodorsal, orientacin cranioventral (Sumar 1983).
La histologa de los testes del camelid se ha descrito (Delhon y otros.
1987) y es similar a el de la otra especie del ganado (Hafez 1993, Fowler
y otros. 1998). La espermatognesis se ha dividido en 8 etapas en los
camelids (Delhon y otros. 1987) con el desarrollo que comienza con el
spermatogonia que miente en las regiones exteriores de tubules
seminiferous y que progresa a los spermatocytes, a los spermatids y a
los spermatozoa primarios y secundarios, que mienten adyacente al
lumen de los tubules seminiferous (Galloway, indito).
Las clulas de Sertoli alinean los tubules seminiferous y contribuyen a la
produccin flida por el tubule (Hafez 1993). Las clulas de Leydig
mienten entre los tubules seminiferous y secretan la testosterona en las
venas testiculares y los recipientes linfticos (Delhon y otros. 1987,
Hafez 1993). Los tubules de Seminiferous en alpacas tienen un dimetro
del m 174-237 (Bravo y otros. 2000a), y en llamas ( SD) un dimetro
malo del m 19.8 de 223.07 (Delhon y otros. 1987). La produccin
diaria de la esperma vara entre la especie pero es cerca de 15-30
millones por gramo del tejido fino testicular (Hafez 1993). El proceso
completo de la espermatognesis en toros toma aproximadamente 60
das. El seminiferous se requieren las tomas del ciclo del epitelio 13-14
das y 4 a 5 ciclos del epitelio seminiferous. Toma de la esperma otros 8
o 9 das a viajar a travs del epiddimo. Por lo tanto, los testes pueden
tomar ms de 2 meses para recuperarse de dao resultando de lesin
18

tal como hipertermia o systemic enfermedad (Entwistle 2002). No se

sabe cunto tiempo el proceso de la espermatognesis admite alpacas.
La produccin de la esperma se correlaciona con tamao testicular en
los camelids (Tibary y otros. 1999b, Galloway 2000). Como aumento
testicular del peso y del tamao en toros, hace tan tambin la salida y la
fertilidad

diarias

(Entwistle

2002) de

la

esperma;

esto

ocurre

probablemente en alpacas tambin. El tamao testicular es altamente

hereditario en toros y tambin se relaciona con la fertilidad de sus
parientes femeninos (Entwistle 2002).
Los testes de Camelid son relativamente pequeos y la produccin de la
esperma es baja (Smith 1999c). Cada testis del adulto en la alpaca mide
aproximadamente 4-5 centmetro largo, 2.5-3 centmetros de ancho y
pesa 15-18g (tablas 1.3, 1.4), as explicando 0.02 a el 0.03% de peso
corporal (Sumar 1983, del bravo 1995), en comparacin con los testes
de los espolones (el 1.4% de peso corporal) y toros (el 0.18% de peso
corporal; Sumar 1999b). los Tres-ao-viejos camellos tienen testes 7-10
centmetro largo eso cada uno pesa 80-100 g (Novoa 1970).
Bajo condiciones normales de la espermatognesis, los tubules
seminferous y la cola de los epiddimos se dilatan con los spermatozoa y
el lquido, dando tono de los tejidos finos y resistencia sobre la palpacin
(Entwistle 2002). El tono y la resistencia pobre o la firmeza excesiva
sugiere anormalidades de testicular y/o funcin epididymal.
El tamao de testes vara entre las castas y las estaciones (ElWishy
1988, Fowler y otros. 1998). Hay un aumento en peso en la estacin de
crianza debido al desarrollo creciente del tejido fino intersticial y
dimetro creciente de los tubules seminiferous (ElWishy 1988). El peso
apareado malo de los testes adentro los camellos del dromedario son
140-165 g en la estacin nonbreeding y 164-180 g en la estacin de
crianza (ElWishy 1988). A partir de diciembre a marcha, los tubules
seminiferous son los 183m en dimetro y contienen

5-6 capas de
19

clulas de germen en varias etapas de la diferenciacin, no obstante

despus de marcha, la degeneracin ocurre, los tubules llegaron a ser
desprovistas de esperma y los tubules seminiferous disminuyen al
dimetro de 131 m (Novoa 1970).

Las concentraciones de la

testosterona del plasma tambin varan entre las estaciones (Fowler y

otros. 1998).
Cuando varn los alpacas se separan de las hembras como prctica de
gerencia en Per, concentraciones de la testosterona son 3900 pg/mL
comparados con 9000 pg/mL en la estacin de crianza. En los E.E.U.U.,
en donde acoplan a los varones todo el ao, testosterona del plasma
fluctu entre 900 y 1200 pg/mL a travs del ao (Fowler y otros. 1998).
6 Vascular ms bien que la termorregulacin muscular de los testes
puede ser importante en camelids debido a la aposicin cercana del
escroto para el cuerpo (ElWishy 1988). Se enrolla y se arrolla la arteria
testicular. El plexo del pampiniform de las venas testiculares enreda la
arteria y permite la sangre arterial que entra en el testis que se
refrescar por la sangre venosa que deja el testis va un mecanismo que
se refresca de la contracorriente (Hafez 1993). Las estructuras
musculares del escroto y de la cuerda spermatic (dartos y los msculos
del cremaster) elevan los testes, con el espesamiento asociado de la piel
scrotal, durante el tiempo fro y relajan levemente durante el tiempo
caliente (Bravo y otros. 1994b). La piel del escroto es relativamente
gruesa y puede ser una adaptacin para proteger los testes contra la
castracin accidental durante varn-varn

el luchar (Fowler y otros.

1998).
Los ductules eferentes funcionan del testis en el jefe del epiddimo
(bravo 1995).

20

Tabla 1.3. Significar (gama) el (G) testicular del tamao (centmetro) y del peso en
los alpacas, las llamas y las vicuas (adaptados de Sumar 1983, Fowler y otros.
1998 y bravo 2002).

Tabla 1.4

1.2.2.4 Epiddimos
El epiddimo es pequeo y de cerca adherente al testiculos (Smith
1999c). Consiste en una cabeza (cabeza), el cuerpo (recopilacin) y la
cola (cauda; Tibary y otros. 1999b). La cabeza es ms grande que la
cola (bravo 1995). El jefe del epiddimo miente cranioventral al testis, el
cuerpo extiende intermedio y dorsocaudally a la cola que miente dorsal
al testis (Fowler y otros. 1998). La cabeza y el cuerpo son sitios de la

21

maduracin de la esperma, mientras que la cola se asocia al almacenaje

de la esperma (ElWishy 1988). Histologa del el epiddimo es similar a la
otra especie (Delhon y otros. 1994, Smith 1999c). Movimiento Distal del
la gotita citoplsmica ocurre como trnsito de la esperma a travs del
epiddimo (Tibary y otros. 1999b). Sigue habiendo una gotita
citoplsmica distal en ms el de 60% de esperma en el segmento
terminal (ElWishy 1988,

Tibary y otros. se pierde 1999b) y cuando

alcance de la esperma los deferens del ductus (Delhon y otros. 1994).

Los deferens del ductus tienen 40 centmetros de largo y 2-3 milmetros
de ancho en la llama (Bravo y otros. 1994b, Smith 1999c)

y 45-50

centmetro desea en el camello (Bravo y otros. 2000a). Funciona de la

cola del epiddimo, a travs del anillo inguinal a la uretra apenas caudal
al cuello de la vejiga, donde hay un pequeo, poorlydefined el ampulla 24 milmetros de dimetro (Bravo y otros. 1994b, bravo 2002). El ampulla
de la carencia of/small puede explicar porqu el electroejaculation no
trabaja bien en camelids pues el ampulla no puede actuar como sitio del
almacenaje de la esperma (Bravo y otros. 2000a).
1.2.2.5 Glndulas accesorias del sexo del macho
La prstata H-se forma y se une firmemente al aspecto dorsolateral de
la uretra, cerca del trigone de la vejiga (Sumar 1983, Bravo y otros.
1994b, bravo 1995, Fowler y otros. 1998, Smith 1999c). Tiene 3 - 4
centmetros de ancho y 1-2 centmetro alto en las llamas (Fowler y otros.
1998, Smith 1999c) y 3.7 x 5 centmetros en camellos (Novoa 1970).
Los cambios estacionales en peso se correlacionan con la actividad
testicular (ElWishy 1988).
Las 2 glndulas bulbourethral son el ovoid y el lateral localizado a la
pieza terminal de la uretra plvica en el arco ischial en la raz del pene
(Sumar 1983, Johnson 1989, bravo 1995), 7-8 centmetro caudal a la
prstata en la alpaca (Smith 1999c). Miden 1 centmetro en alpacas y
hasta 2 centmetros en las llamas (Fowler y otros. 1998, Smith 1999c).
Cada glndula es cubierta en parte por el msculo y ellas del
22

bulbocavernosis

variacin estacional del objeto expuesto de tamao

(ElWishy 1988). Estas glndulas son ms probable producir el material

viscoso encontrado en el ejaculate de los camelids (bravo 1995). Las
vesculas seminales no se encuentran en los camelids (Sumar 1983,
ElWishy 1988, Johnson 1989, Bravo y otros. 1994b, Smith 1999c).
Cuadro 1.1. Diagrama de adherencias preputial de los camelids del americano del
sur (A = adherencias preputial, B = prepucio, C = pene; Fowler y otros. 1998,
pgina 384).

23

figura 1.2. Diagrama de la vista lateral de los rganos genitales masculinos del camelid
(Fowler y otros. 1998, page382).

1.2.3 Seasonality
La espermatognesis ocurre a travs del ao en todos los camelids (Arturo
1992, ElWishy 1988). Estacional

las variaciones en la produccin de la

esperma se basan en el origen geogrfico (por lo tanto nutricin, clima y otro

factores ambientales), gerencia de la manada, grado de la domesticacin y
estructura social del grupo de camelids (Novoa 1970, ElWishy 1988, McEvoy y
otros. 1994). Por ejemplo, febrero y marcha son meses de crianza mximos
para los alpacas en lluvias de siguiente del verano de Per y crecimiento
creciente del pasto (Garnica y otros. 1993, Raymundo y otros. 2000). En los
E.E.U.U.,

no

se

observ

ningunas

diferencias

estacionales

adentro

concentraciones de la testosterona del plasma, frecuencia del pulso de la LH o

24

tamao testicular en un grupo de varones supervisado por 12 meses (Smith

1999c).
Las alpacas maschos no experimentan cambios en aspecto y comportamiento
en la estacin de crianza en Per (Novoa 1970).
1.2.4 Comportamiento y copulation de acoplamiento
El comportamiento de acoplamiento se puede considerar en semanas de los
varones del camelid del americano del sur a los meses despus del nacimiento
cuando intentan montar a hembras o a otros juveniles y comenzar a juegoluchar (Fowler y otros. 1998, Smith 1999c).
La produccin del andrgeno aumenta perceptiblemente entre 18 y 24 meses
de la edad y coincide generalmente con la produccin y la libido creciente
(Smith 1999c) de la esperma. Lucha de los varones para afirmar su dominacin
encima otros varones, usando su cuello, pecho y colmillos para establecer la
superioridad (Fowler y otros. 1998). No hay evidencia que la experiencia afecta
el comportamiento de los varones de la alpaca, sin embargo, hay individual la
variacin en libido entre varones y la variacin en el nmero de hembras se
acoplaron (Pollard y otros. 1995).
Los varones en su primera estacin se comportaron de una manera similar a
sos con ms experiencia. El comportamiento de acoplamiento exhibido por
un varn del SACO se puede dividir en cortejar y fases copulatory. La fase que
corteja ocurre cuando el varn persigue a hembra y puede activamente durar
solamente algunos segundos,

mientras que algunas hembras se sientan

inmediatamente, o hasta 10 minutos, pero procuran ms de largo de 4 minutos

generalmente resultado en ningn acoplamiento (Inglaterra y otros. 1971). La
longitud de esta fase se puede influenciar por el nivel de

libido del varn

(Fowler y otros. 1998).

El comportamiento de acoplamiento de la hembra es principalmente sumiso,
pero un varn puede montar y empujar a la hembra en la cruz con sus piernas
delanteras. Los varones pueden exhibir flehmen elevando su cabeza y labio
25

despus de oler la pila del dung (Fowler y otros. 1998). 9 La fase copulatory
ocurre cuando la hembra adopta la posicin copulatory del recumbency del
sternal con las piernas remetidas debajo del cuerpo (Fernandez-Baca y otros.
1970a, Inglaterra 1971). El varn monta a horcajadas la hembra, la agarra los
hombros con sus codos, y sus metatarsos se reclinan completamente sobre la
tierra, lateral a los de la hembra (Novoa 1970). La ereccin de Penile comienza
en esta etapa permitir el intromission (Fowler y otros. 1998).
El pene puede tener un extremo del sacacorchos mientras que busca el
perino para el vulvar el abrirse (Fowler y otros. 1998, Tibary y otros. 1999b).
El colocar de nuevo de la pelvis del varn puede ocurrir para permitir el
intromission va buscar del pene (Inglaterra y otros. 1971). Cuando el
intromission est con xito realizada, la pelvis del varn est cerca de la pelvis
de la hembra (Fowler y otros. 1998). Varones demostrar tu entusiasmo con los
odos del temblor, la cola que mueve de un tirn hacia arriba y hacia abajo, las
ventanas de la nariz que dilatan y constricting y por el vocalisation (Novoa
1970). El sonido gutural caracterstico hecho por los varones durante el
acoplamiento, o

el `orgling', se divulga para ser un aspecto integral del

lanzamiento preovulatory de la LH (bravo 1994, Bravo y otros. 1994b).

Durante el copulation, el varn penetra la cerviz con su pene, y deposita el
semen durante mltiplo eyaculaciones en ambos cuernos uterinos usando los
movimientos que empujan suaves, segn lo evidenciado por la palpacin
uterina va laparotomy durante el copulation (Franco y otros. 1981, bravo 1994,
bravo 2002). Examinacin del tero 24 horas despus de que el copulation ha
revelado hemorragia, la inflamacin, el edema y la hiperemia de el endometrio,
posiblemente debido al trauma penile o a una reaccin inflamatoria al plasma
seminal (bravo y otros. 1996b, Velasquez y otros. 1999, bravo 2002b).
La inflamacin del tero puede durar 3 a 4 das y ser acoplamientos mltiples
de siguiente ms severos (bravo 2002b).
Los

camellos

masculinos

exhiben

libido

fuerte

comportamiento

extremadamente agresivo durante la parte del ao sabido como la rodera del `'
26

(ElWishy 1988). Hay un aumento dramtico en niveles del andrgeno del

plasma a partir de 1-4 ng/mL hasta 17-35 (bsico) ng/mL. En asociacin con
los andrgenos crecientes, los varones hacen agitados, agresivo, moler tus
dientes, orina sobre tu parte posteriora con la cola, espuma del latigazo en la
boca, exudan una secrecin marrn foetidsmelling de tus glndulas de la
encuesta (encontradas subcutneo de cualquier lado de

los nuchae del

ligamentum, 7 centmetros debajo de la cresta occipital) para delinear el

territorio, vuelcan su paladar suave del lado de la boca (dullah del `') con
frecuencia, expressan con gorjeos y rugen (ElWishy 1988, Arturo 1992, Abdel
Rahim y otros. 1992). Es posible tratar los camellos masculinos con GnRH al
principio de la estacin de crianza para aumentar libido y para acelerar el inicio
de criar el comportamiento (Moslah y otros. 1992).
Durante la fase del courtship del acoplamiento, el camello masculino oler los
rganos genitales, la orina y las heces del

la hembra, levanta su cabeza

detrs, el objeto expuesto flehmen, muerde a hembra, y fuerza a hembra

sentarse con su cuello antes de montar a la hembra recumbent. La ereccin del
pene no ocurre durante courtship en posicin derecha (Abdel Rahim y otros.
1992). Las piernas delanteras del varn se ponen de cualquier lado de los
hombros de la hembra, y de sus piernas traseras de cualquier lado de su
pelvis. Las piernas traseras del varn son doblado con los talones a los hocks
en la tierra, las piernas delanteras son extendidas, con la cabeza y el colmo
llevado a cabo cuello. Intromission se asocia a los gorjeos, al regate salival y al
dullah (ElWishy 1988, Abdel Rahim y otros.

1992).

Cuando los alpacas

masculinos y femeninos se guardan por separado y se permiten al copulate en

los intervalos infrecuentes, ambos sexos siguen siendo sexual activos todo el
ao (Sumar 1985). Al principio de la estacin de crianza en Per, cuando
colocan a los varones primero en un prado con las hembras, demuestran la
actividad copulatory intensa para primeros 3 das, copulating hasta 18 veces
por el da (Sumar 1983, Fernandez-Baca 1993). Sin embargo, la asociacin
continua del SACO masculino y femenino inhibe de alguna manera la actividad
de crianza de varones a punto de la cesacin completa de la actividad sexual a
pesar de las hembras receptivas (Fernandez-Baca 1993). Si entonces colocan
a los varones inactivos adentro con una nueva manada de hembras, ellos
27

reasumen la actividad sexual (Fernandez-

Baca 1993). No se sabe qu

factores son responsables del efecto inhibitorio sobre la libido masculina el

resultar de la exposicin continuada a las hembras y qu recomienza la crianza
de la actividad (Fernandez-Baca

1993), sin embargo, nutricin, gerencia y

factores ambientales (temperatura, humedad relativa,

la luz) o las seales

olfativas puede influenciar los centros del sistema nervioso central que
controlan reproductivo comportamiento (marrn 2000).
1.2.5 Fertilidad
Bajo condiciones del acoplamiento natural, del embarazo y de las tarifas
subsecuentes del parto siguiendo un solo el acoplamiento se ha divulgado
como punto bajo (Sumar 1985) y menos eficiente que la otra especie de la
granja (Wiepz y otros. 1985). Sin embargo, ha habido informes de 21 fuera de
28 (el 75%) llamas femeninas embarazadas despus de dos acoplamientos 48 horas de separado (Adams y otros. 1990), una tarifa del parto del 46% en
llamas solo-acopladas (Condorena y otros. 1988) y 34 fuera de 70 hembras
(del 49%) que conciben despus de solo acoplar natural,

sin importar el

dimetro folicular ovrico (Vaughan y otros. en prensa). Estas tarifas comparan

favorable con el concepto clasifica en el otro ganado domstico y sugiere eso
reproductivo inadecuado

la gerencia, las deficiencias alimenticias y la

endogamia contribuyen a la fertilidad baja (Parraguez y otros. 1997).

La

concentracin de la esperma requerida para la fertilizacin y el embarazo

acertados no se sabe, pero la deposicin intracornual del semen del semen
durante el copulation puede ser una adaptacin a superar las concentraciones
relativamente bajas de la esperma adentro ejaculates (marrn 2000).
Para reducir al mnimo el nmero de acoplamientos por el concepto se ha
recomendado para seleccionar a varones con tamao testicular grande en la
asuncin que la relacin directa entre el tamao del testis y la esperma la
produccin en el otro ganado domstico tambin ocurre en los camelids
(Sumar 1983, Smith 1999c, marrn

2000, Galloway 2000). La longitud

testicular mala (la longitud media de testes izquierdos y derechos) se

correlaciona con el peso testicular (Galloway 2000) y se puede utilizar como los
medios simples de determinar tamao testicular

en alpacas. La longitud
28

testicular mala se puede utilizar para estimar la probabilidad de la produccin

de la esperma adentro

alpacas (tabla 1.5; Galloway 2000). Bravo y otros.

(1995) describir un ensayo en con el cual las llamas masculinas los testes
pequeos (3.0 x 1.9 centmetros) alcanzaron una tarifa del embarazo del 45%,
mientras que los varones con testes ms grandes (4.8 x 3.2) alcanz una tarifa
del embarazo del 75%. Pugh (1999) observ las llamas masculinas con los
testes 3.5 x 2.9 centmetros alcanzados 21/30 de los embarazos (del 70%),
mientras que los varones con testes ms pequeos (2.5 x 2.2 centmetros)
alcanzaron solamente 12/30 (los 40%) embarazos.
Tabla 1.5. Desarrollo de la funcin testicular en alpacas con los testculos de diversos
tamaos (Galloway 2000).

El tamao de cuerpo tambin se ha correlacionado con longitud testicular mala

y sugiere que la nutricin es un factor importante en la determinacin del
tamao testicular (Galloway 2000). La capacidad del comportamiento, del
acoplamiento de Precocious (ningunas adherencias peno-preputial) y la
produccin de la esperma en aales y son tambin rasgos deseables en los
programas de la seleccin (Sumar 1983, Galloway 2000).
El nmero de acoplamientos se realiz en un da por una fertilidad de las
influencias del varn. Bravo y otros. (1997d) observado que los alpacas
masculinos criaron 2 o 4 veces por da alcanzaron una tarifa del embarazo del

29

77%, mientras que sos criados 6 veces por da alcanzaron una tarifa del
embarazo del 59%. Fue propuesto que las tarifas declinaron en respuesta al
agotamiento de las reservas de la esperma (Bravo y otros. 1997d). El nmero
de das consecutivos que los acoplamientos ocurren en tambin influencia la
fertilidad (Bravo y otros. 1997d). Tiempo de Copulation disminuido sobre das
de crianza consecutivos y el embarazado de los por ciento disminuido a partir
de la 71% el el da 1 de la crianza, hasta el 50% de Day 8 y el 0% el el da 9
(Bravo y otros. 1997d). Tres a 4 acoplamientos por el da por 4 a 5 das no
comprometen fertilidad en los alpacas masculinos (bravo 1995).
1.2.6 Longitud de Copulation
Copulacion dura generalmente 20-25 minutos, con un radio de accin de 5-65
minutos (tabla 1.6). La longitud del copulation es determinada por el varn y
afectada por la casta, la edad, la estacin y la frecuencia del uso (Tibary y
otros. 1999b). La presencia de otros camelids influenciar la longitud del
copulation (Inglaterra y otros. 1971, Johnson 1989). Estudios de la
demostracin de los acoplamientos del prado que la duracin media del
copulation en manadas de la alpaca vara basado en las interacciones
animales. Los varones en manadas sin otros varones pueden hacer un
promedio de 20 minutos comparados con 15 minutos en manadas con varios
varones; los varones que acoplan a hembras de un ao pueden hacer un
promedio de 15 minutos comparados con las hembras multiparous 22 minutos
(Escobar 1984, Pollard y otros. 1991). La interrupcin/la duracin corta del
copulation en manadas del multi-padre fue atribuida a luchar territorial
masculino normal, pues los varones son vulnerables al ataque durante el
acoplamiento (Escobar 1984). Knight y otros. (1992) que el copulation de la
duracin mxima no era siempre el primer acoplamiento cuando los varones se
realizaron ms de uno observados que se acoplaba por da pero otros ha
observado que los acoplamientos subsecuentes son ms cortos que el primer
acoplamiento del da (Pollard y otros. 1991, Bravo y otros. 1997b, Vaughan
2001). Los varios estudios han demostrado acoplamientos para ser ms largos
en otoo que sueltan (Inglaterra y otros. 1971, Knight y otros. 1992, Pollard y

30

otros. 1995). No hay correlacin entre la duracin y la tarifa de acoplamiento

del concepto (Tibary y otros. 1999b).
Tabla 1.6. Duracin del copulation en camelids.

31

1.2.7 Caractersticas de la eyaculacin

La eyaculacin ocurre temprano durante el copulation pues los embarazos se
han observado despus de acoplamientos de la duracin de los minutos 5-8
(Fernandez-Baca y otros. 1970d, Vaughan y otros. en prensa) y 8 de 26
colecciones de la esperma tena esperma en el plazo de 10 minutos del
comienzo del copulation (Lichtenwalner y otros. 1996b). Lichtenwalner y
otros. (1996a) observado que haba 121.9 pulsos urethral del 61.0 por el
copulation en un ndice de 6 por minuto al describir la naturaleza de la
eyaculacin en llamas. Haba 19 racimos (una tensin del cuerpo entero ms
4-5 pulsos urethral) por el copulation, 20 segundos desea y el equivalente a
aproximadamente 1cluster por minuto durante el copulation. Cada racimo era
equivalente a una eyaculacin distinta. Por lo tanto, haba eyaculaciones
distintas mltiples por el copulation prolongado. Haba pocos pulsos urethral
entre los racimos. Haba 22 tensiones del cuerpo entero, 816 empujes
plvicos y 53 coloca de nuevo (que ocurrieron entre los racimos;
Lichtenwalner y otros. 1996a). La emisin de la esperma ocurre en todas
partes aumentos de la concentracin del copulation y de la esperma con el
tiempo (Lichtenwalner y otros. 1996b).
Bravo y otros. (2002) observado que las contracciones urethral fueron
distribuidas uniformemente a travs del copulation, pero midi solamente un
promedio de 40 en alpacas y 63 en las llamas (gama 11-132).

1.3 Coleccin De Semen

Los varios mtodos se han utilizado para recoger el semen de camelids para
permitir el anlisis del semen caractersticas (tabla 1.8). Es difcil recoger el
semen debido a la postura de acoplamiento, la duracin del copulation, la
deposicin intrauterina del semen y la naturaleza viscosa del ejaculate (Bravo y
otros. 1994b, 2000a). El uso de las envolturas del intravaginal o los condones
y las esponjas del intravaginal interfieren con la eyaculacin normal y dan lugar

32

a una duracin ms corta del movimiento de acoplamiento, continuo del varn,

a espumejear del semen y al dao de la esperma (San Martin y otros. 1968,
Sumar 1983, Johnson 1989, McEvoy y otros. 1992b, 1994, bravo 1995). La
creacin de una fstula urethral requiri la ciruga delicada y la gerencia a largo
plazo de la herida (von Kubicek 1974). La recuperacin del semen de la vagina
despus del copulation y la aspiracin epididymal no proporcionan el
representante ejaculates (McEvoy y otros. 1994, bravo 1995). Las desventajas
del electroejaculation incluyen el requisito para la sedacin pesada o el
anestsico general, orina la contaminacin del semen, de la inhabilidad de
determinar libido, de la concentracin variable de la esperma y del bienestar
publica (Calderon y otros. 1968, Sumar 1983, Johnson 1989, McEvoy y otros.
1994, Bourke y otros. 1995c, bravo 1995, 2002, Giuliano y otros. 2002).
El uso de un vagina artificial (sistema de pesos americano) conjuntamente con
o una hembra receptiva (Gauly y otros. 1996, Huanca y otros. 2001b), un
maniqu (Garnica y otros. 1993, Bravo y otros. 1997a, b, Davalos y otros. 1999)
o montaje halfdummy (Lichtenwalner y otros. 1996b) en camelids del
americano del sur ha rendido el la mayora

tiempos representativos del

copulation y comportamiento de acoplamiento en camelids. No hay

contaminacin de la orina del semen y el gravamen del comportamiento sexual
es posible (Lichtenwalner y otros. 1996b). Por lo tanto, el mtodo del sistema
de pesos americano de coleccin del semen proporciona probablemente
muestras del semen la mayora del representante de natural acoplamiento. Un
autor ha observado que composicin del semen (ejaculate el volumen, la
concentracin de la esperma,

el porcentaje de la esperma viva) vara

perceptiblemente dependiendo de si utilizan a una hembra receptiva o a un

maniqu con el sistema de pesos americano (Davalos y otros. 1999) sin
embargo, otro ha observado que uso de un sistema de pesos americano con
un maniqu o vivir-monta a varones constantes producidos de los resultados fue
entrenado una vez (Adams y otros. 2001).
El montaje simulado se construye de un bastidor de madera en la forma de una
hembra recumbent, cubierta cerca una piel de la alpaca, con un agujero en la
parte posterior para acomodar el sistema de pesos americano (Garnica y otros.
33

1993, Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y otros. 1997a). El sistema de pesos

americano se puede construir de la pipa del PVC o del tubo de goma reforzado
(25 - 30 centmetros de largo, dimetro de 5-7 centmetro) y alinear con un
trazador de lneas del ltex (cuadro 1.3; Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y
otros. 1997a). Los varios trabajadores han observado la importancia de poner
una restriccin alrededor del trazador de lneas del ltex del sistema de pesos
americano para simular la presencia de una cerviz (cuadro 1.4; Garnica y otros.
1993, bravo 1995, Bravo y otros. 1997a, Fowler y otros. 1998).

Cuadro 1.3. Diagrama de una vagina artificial usada en los camellos del dromedario
(Bravo y otros. 2000a).

34

Cuadro 1.4. Diagrama de una vagina artificial modificada usada para recoger el semen de
los alpacas (Bravo y otros. 1997a).

El agua caliente se coloca entre el trazador de lneas interno y el tubo externo

(Garnica y otros del ltex. 1993, Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y otros.
1997a). La temperatura del sistema de pesos americano debe estar entre el C
38-40 (Von Baer y otros. 1999, Bravo y otros. 2000a) y C 45 (Garnica y otros.
1993, 1995). El sistema de pesos americano se envuelve en un cojn de la
calefaccin (bravo 1995, Bravo y otros. 1997a, Fowler y otros. 1998) o el agua
caliente es bombeado continuamente con l (Lichtenwalner y otros. 1996b)
para mantener temperatura. Acoplando entrenan a los varones para montar un
maniqu primero exponindolos a las hembras receptivas y pares de alpacas
como estmulo (Garnica y otros. 1993, 1995, Bravo y otros. 1997a, b). No todos
los varones ejaculate en un sistema de pesos americano en cada tentativa.
Completo ejaculates fueron recuperados en 108 de 132 tentativas (el 82%) en
las llamas (Aller 2001) y 203 de 272 tentativas (el 75%) en los dromedarios
(Deen y otros. 2003).
1.3.1 Anlisis bioqumico del semen
El anlisis bioqumico del plasma seminal se proporciona en la tabla 1.7. El
cido ctrico (el medio 4.3 mg/dL, se extiende 3.1-6.0 mg/dL) y las
concentraciones de la fructosa (el medio 5.0 mg/dL, se extiende 3.9-6.6 mg/dL)
en semen de la alpaca fueron encontrados para ser independiente de la edad y

35

bajar mucho compar con los toros, espolones, verracos,

sementales y

camellos del dromedario posiblemente debido a una carencia de las vesculas

seminales (Garnica y otros. 1995). Las concentraciones de la fructosa alta y del
cido ctrico se han observado en los camellos (ElWishy y otros. 1988). Las
altas concentraciones de la glucosa pueden servir como la fuente de energa
primaria para la esperma (Garnica y otros. 1995).
Los datos de los camellos de Bactrian y de los alpacas indican que el semen
del camelid contiene un factor que induzca la ovulacin. El plasma seminal
indujo la ovulacin en hembras despus de la colocacin en la vagina o el tero
sin el acoplamiento (Chen y otros. 1985, Rios y otros. 1985, Xu y otros. 1985,
Sumar 1994) o por la inyeccin intramuscular (Chen y otros. 1985, Pan y otros.
1992, Adams y otros. 2001). La composicin bioqumica del factor es
desconocido (Rios y otros. 1985) pero es diferente a GnRH (Zhao y otros.
1992, Paolicchi y otros. 1999).
tener

cierto

(Fernandez-

efecto

El comportamiento de acoplamiento puede

aumentativo

en

las

ovulaciones

semen-inducidas

Baca y otros. 1970d, Chen y otros. 1985). Contrario a estos

resultados, Anouassi y otros. (1992) encontrado eso aunque la inseminacin

del semen entero indujo la ovulacin en algunos camellos del dromedario,
ovulacin y las tarifas del embarazo eran perceptiblemente ms altas en sas
inseminadas y acopladas artificial por a vasectomised a varn.
Tabla 1.7. El anlisis bioqumico del semen del camelid (Garnica y otros. 1993, 1995,
Bravo y otros. 2000a).

36

1.3.2 Caractersticas del semen

El individuo ejaculates consiste en el bajo volumen, semen de gran viscosidad
que contiene una esperma baja

concentracin (tabla 1.8). Hay variacin

considerable en caractersticas del semen entre diversa alpaca y los varones

de la llama, que pueden plantear un problema en la obtencin de calidad
aceptable ejaculates de algunos varones (Gauly y otros. 1996, Von Baer y
otros. 1999, Raymundo y otros. 2000). Volumen del semen, esperma

la

concentracin, el porcentaje de la esperma viva, el porcentaje de la esperma

normal, y la duracin del copulation se han observado para variar entre varones
de la alpaca, sin embargo, la oscilacin y el pH no diferenciaron entre los
varones (Bravo y otros. 1997b).
El volumen de cada uno ejaculate en promedios de los alpacas 1-2 ml y se
extiende de menos de 1 ml hasta aproximadamente 7 ml (von Kubicek 1974,
Garnica y otros. 1995, Fowler y otros. 1998). Los volmenes son generalmente
ms bajos cuando el semen es recogido por el electroejaculation que con uso
de un sistema de pesos americano (Tibary y otros. 1999b).

El semen se

describe generalmente como lechoso o color crema en el color (Garnica y

otros. 1993, Bravo y otros. 1997a, b) dependiendo de la concentracin de la
esperma (Tibary y otros. 1999b).
El semen de la alpaca consiste en el 11.5% esperma y lquido seminal del
88.5% por el volumen (Garnica y otros. 1993). La gravedad especfica del
semen de la llama es 1.1 g/ml del 0.0 (Lichtenwalner y otros. 1996b). El
semen de la alpaca es muy viscoso (Garnica y otros. 1993, Bravo y otros.
1997a, b), hacindolo difcil de dirigir (e.g. el medir con una pipeta,
manchndose en una diapositiva), difcil de determinar parmetros tales como
concentracin de la esperma y motility de la esperma, y difcil de diluir (Garnica
y otros. 1993, Tibary y otros. 1999b). La viscosidad puede ser calculada
indirectamente midiendo la distancia de un volumen sabido del semen que se
dibuja hacia arriba de una diapositiva de cristal por una pipeta (Bravo y otros.
2000b). El grado de viscosidad vara entre los varones (Tibary y otros. 1999b) y
las disminuciones con el aumento del nmero de ejaculates en cualquier da
37

(Bravo y otros.

1997b). El semen licueface 23 horas (gama 8-30 horas)

despus de la coleccin (Bravo y otros. 1994b).

La concentracin de la esperma vara de aproximadamente 30.000 hasta 150
millones por el ml en los alpacas (bravo 1995, Garnica y otros. 1995, Gauly y
otros. 1996). Tales variaciones amplias se atribuyen a las diferencias en
varones, mtodos de la coleccin del semen y ejaculate el nmero (Tibary y
otros. 1999b). La concentracin es determinado despus de la licuefaccin del
semen, usando un hemocitmetro (Bravo y otros. 1997a).
El pH del semen del camelid se extiende entre 7.2 y 8.6 (Bravo y otros. 1997a,
Von Baer y otros. 1998).
El movimiento de la esperma del camelid en semen no diluido es tan oscilatorio
lo ms mejor posible descrito como la mayora de la esperma el movimiento
hacia adelante y hacia atrs y solamente 5 a 10% de la esperma individual
progresa activamente remite (Neely 1993, Bravo y otros. 1997a, 2000b). El
aumento de la esperma su motility progresivo como el ejaculate se convierte en
ms lquido (Tibary y otros. 1999b). La contractilidad muscular y el movimiento
ciliary de la zona reproductiva femenina son probablemente mecanismos ms
importantes del transporte de la esperma durante la transferencia de la
esperma del sitio de la deposicin en el tero al sitio de la fertilizacin en el
oviducto, pero el motility de la esperma es esencial para el paso con la
ensambladura y la penetracin uterotubal de las clulas del cmulo y el
pellucida del zona del ovum (Hafez 1993).
Algunos trabajadores han observado que ejaculates no se fracciona en
alpacas y llamas as que es el semen uniformar en calidad del comienzo al
final del copulation (Sumar 1983, Moscoso y otros. 1999). Otros, sin embargo,
han observado que concentracin de la esperma, porcentaje de la esperma
oscilatoria, porcentaje de la esperma viva y porcentaje de la esperma normal
creciente con tiempo durante un solo copulation en los alpacas y las llamas
(Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y otros. 2002).

38

Bravo y otros. (1997b) observ que vive la concentracin de la esperma,

volumen exclamatorio, por ciento, los por ciento normales y motility, disminuido
con el aumento del nmero de las eyaculaciones/da pero el pH no (Bravo y
otros. 1997b, bravo 2002). Volumen exclamatorio, concentracin de la
esperma, porcentaje de la esperma viva y duracin de

el copulation era

diferente en diversos das de la coleccin del semen (Bravo y otros. 1997b).

Tabla 1.8. Caractersticas del semen del camelid.

39

40

41

42

43

1.3.3 Morfologa de la esperma

La esperma consiste en una cabeza, un midpiece y una cola (Hafez 1993). La
esperma es el m 50 largo (m de la cabeza 5.3, atan el m 37) en las llamas
(tabla 1.9; Bravo y otros. 2000a). La cabeza es elptica ms bien que ovoid
(Tibary y otros. 1999b).
1.3.4 Transporte de la esperma en la zona reproductiva femenina
Pocos estudios estn disponibles en el transporte de la esperma en el siguiente
reproductivo femenino de la zona deposicin intrauterina del semen en los
camelids (Bravo y otros. 1996b). No aparece ser diferencia en los nmeros de
la esperma que viajan encima de los cuernos uterinos izquierdos y derechos
(Bravo y otros. 1996b). A pesar de que los 98% de embarazos se llevan
adentro el cuerno uterino izquierdo, las ovulaciones ocurren con frecuencia
igual de ambos ovarios (Fernandez-Baca y otros. 1973). Un alto porcentaje de
la esperma (el 77%) se encuentra en

ensambladuras uterotubal o en los

oviductos 6 horas despus de acoplar en la alpaca. Noventa y nueve por ciento

de esperma han entrado en los oviductos 12 horas despus de acoplar, y los
33% estn en el istmo en anticipacin de

fertilizacin. La concentracin

mxima de la esperma en cada istmo ocurre 18 horas despus de acoplar. las

ensambladuras uterotubal son los sitios del almacenaje de la esperma 24-30
horas poste-que se acoplan. El endometrio es

edematoso, hyperaemic e

inflamado entre 6 y 30 horas de poste-copulation (Bravo y otros. 1996b).

No se sabe nada sobre longevidad de la esperma del camelid, sin embargo, la
ovulacin ocurre aproximadamente 30 horas despus del estmulo de
acoplamiento en los alpacas (Huanca y otros. 2001a), as que la supervivencia
de la esperma es ciertamente ms largos que esto. Probablemente, el
capacitation de la esperma y la activacin acrosome ocurre durante este
perodo, posiblemente cuando alcance de la esperma el istmo (Hafez 1993).

1.4 Patologa
Los problemas comnmente divulgados en los camelids masculinos incluyen la
carencia de o la libido reducida, exclamatoria

problemas e infertilidad

44

inexplicada, pero su desconocido exacto del restos de la etiologa (Tibary y

otros. 1999b).

El desequilibrio hormonal, la tensin de calor, los factores

debilitantes de la enfermedad, del overuse, de la vejez o genticos pueden todo

contribuir (Tibary y otros. 1999b).
1.4.1 Anormalidades de los testes
Los defectos testiculares incluyendo hipoplasia, cryptorchidism y los testes
ectpicos se han divulgado en los camelids (tabla 1.10; Sumar 1983, ElWishy
1988, Johnson 1989, Bravo y otros. 1994b, Galloway 2000) y se consideran
como averas genticas, aunque esto tiene todava ser probada (Sumar 1983).
La hipoplasia testicular es el defecto testicular ms comn observado en los
alpacas (Sumar 1983). En un estudio peruano, 10% (385/3807) de todos los
varones examinados exhibi una cierta forma de hipoplasia (tabla 1.10; Sumar
1983) mientras que en un estudio australiano, varones del 5% (4/73) exhibi la
hipoplasia testicular (Galloway 2000). La hipoplasia puede ser bilateral o
unilateral, y se extiende de suave (los grados que varan de actividad
spermatogenic) a severo (las clulas de Sertoli solamente) histolgico (Sumar
1983, ElWishy 1988, Galloway 2000). Los testes de la alpaca de Hypoplastic
pesan 7-12 g y son ms firmes que normal (Sumar 1983).
Los testes de Cryptorchid son pequeos, suave, undescended los testes que
se sitan generalmente cerca del anillo inguinal interno (Sumar 1983). Los
testes izquierdos se afectan ms comunmente que los testes derechos (Sumar
1983, Perkins y otros. 1996).
Los testes ectpicos se sitan fuera del saco scrotal perineally, en el muslo o el
lateral intermedio al pene (Sumar 1983). Los testes ectpicos son pequeos (812 g en peso), flcidos y mas comunes en el lado izquierdo (Sumar 1983).

45

En una examinacin extensa del material post mortem, Sumar (1983) observ
el dimetro de 1-5 milmetro estructuras enquistadas unilaterales y bilaterales
en el jefe del epiddimo y/o en el cuerpo del testis. Se piensa que los quistes
estn derivados de los conductos paramesonephric (Sumar 1983).
Los problemas testiculares adquiridos en los camelids masculinos incluyen el
trauma testicular secundario a luchar y

edema penetrante y scrotal y

produccin y libido reducidas de la esperma secundarios a la tensin de calor

(Johnson 1989, Fowler y otros. 1998, Smith 1999c).
Los camelids del americano del sur poseen un escroto no-oscilante y aparecer
adaptado mal a la termorregulacin testicular sensible al calor (Pugh 1999).

46

La termorregulacin se puede complicar por la grasa scrotal excesiva en los

varones obesos (Pugh 1999). La infertilidad debido a la tensin de calor es
generalmente temporal, y la fertilidad vuelve generalmente 45-60 das despus
de la tensin inicial (Johnson 1989, Pugh 1999).
Las anormalidades de Penile incluyen el hypospadia, el pene del sacacorchos,
el frenulum persistente y el dao penile secundarios al enredo del pelo. Las
anormalidades de Preputial incluyen los rasgones preputial, el prolapso, las
restricciones, los hematomas, las adherencias, la infestacin parsita y la
hinchazn secundarios a la irritacin o a la ruptura de la uretra (Johnson 1989,
carril 1999, Smith 1999c, Tibary y otros. 1999b).
1.4.2 Anormalidades de la esperma
Las varias anormalidades se han divulgado en esperma del camelid, con
variaciones en frecuencia entre especie (tabla 1.11). Todas las anormalidades
de la esperma encontradas en el otro ganado domstico se pueden encontrar
adentro

camelids (Tibary y otros. 1999b). Las anormalidades principales

incluyen tailless, pequeo, grande, el pyriform, afilar y las cabezas dobles

(Bravo y otros. 1997a, b, Flores y otros. 2002). Los midpieces anormales de la
esperma incluyen midpieces gruesos, gotitas prximas y hojas mitochondrial
desiguales o ausentes (Lichtenwalner y otros. 1996b, Von Baer y otros. 1999).
Las anormalidades de la cola incluyen las colas dobladas, dobles, en espiral,
enroscadas (Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y otros. 1997a, b, Giuliano y
otros. 2002).
Bravo y otros. (1997b) divulgado que el porcentaje de las cabezas y de las
colas anormales de la esperma aument con la frecuencia de la coleccin del
semen en cualquier da, sin embargo, las anormalidades de la esperma no
cambiaron en diversos das de la coleccin. No se sabe que qu efecta las
anormalidades de la esperma tienen en la fertilidad (Tibary y otros. 1999b).
Flores y otros. (2002) observ un alto nmero de la esperma anormal adentro
ejaculates recogi 45 y 90 das despus de acoplar anterior. Haba dos veces

47

tanta esperma tailless que las cabezas adentro ejaculates recogido despus de
90 das de resto sexual comparados con 45 das.
TABLA 1.11

48

49

1.5 Inseminacin Artificial

1.5.1 Licuefaccin, dilusin, extensin y el congelar del semen
La tabla 1.12 enumera los varios mtodos que se han utilizado para licuefacer,
para diluir, para extender y para congelar el semen del camelid, y sus tarifas
respectivas del xito. La primera dificultad en la manipulacin del semen de la
alpaca lo est quitando del sistema de pesos americano y est licuefaciendo el
ejaculate. El semen licueface naturalmente 23 horas (gama 8-30 horas)
despus de la coleccin (Bravo y otros. 1994b). Varios mtodos de licuefaccin
del semen, tal como el uso de las enzimas (Callo y otros. 1999, Bravo y otros.
2000a, b) y el revolvimiento mecnico (un Niasari-Naslaji, la comunicacin
personal), han sido trialled con un cierto xito para simplificar la direccin y
para permitir la dilusin, extensin y el congelar del semen. El Collagenase, el
fibrinolysin, el hyaluronidase y el trypsin todos se han utilizado para reducir la
viscosidad del semen del SACO (Bravo y otros. 2000b). El Collagenase tena al
parecer el menos efecto en matar a la esperma, no obstante todas las enzimas
daaron la parte anterior del acrosome en 6 8% de esperma (Bravo y otros.
2000b).
La viabilidad adecuada de la esperma se debe mantener durante el semen que
dirige y que procesa para alcanzar embarazos. La longevidad de la viabilidad
de la esperma es mejorada probablemente mediante almacenaje en el C 4-5
comparado con temperaturas ms altas debido a la actividad metablica
reducida (Simson 2001). Cuando el semen fue almacenado en el C 35, el
motility disminuy casi linear con tiempo de almacenaje: despus 30 de los
minutos 42% la esperma era motile, despus de esperma de 1 hora el 33%
eran motile, despus de 2 horas de esperma 16% eran motile, despus de 3
horas de esperma del 5.5% eran motile y despus de 6 horas la esperma del
solamente 1.8% segua siendo motile (Raymundo y otros. 2000). En caballos,
el refrescarse rpido del semen a partir del C el 37 al C 20 no afecta al
contrario motility de la esperma, sin embargo, las tarifas que se refrescan a
partir del C el 20 al C 4-8 son ms crticas. La recomendacin actual es
refrescar el semen en un ndice de 0.5 a 1.0 C por minuto para maximizar el
motility (Simson 2001). La esperma conserva un motility mejor cuando est

50

almacenada en el C 4-6 compar con el C 0-2 usando los suplementos a

base de leche (Batellier y otros. 2001).
La tensin Oxidative es una de las causas primarias de la deterioracin de la
esperma (Batellier y otros. 2001). El retiro del aire oxgeno-rico mejora
supervivencia de la esperma en el oC 4 (Katila 1997).
Los suplementos del semen contienen los compuestos que protegen la
esperma fuera de la zona reproductiva y durante el enfriarse y el congelar
(Simson 2001). Las lipoprotenas, tales como sas encontradas en yema y
leche de huevo, protegen la esperma contra choque fro estabilizando las
membranas celulares. La energa es proporcionada a la esperma por la adicin
de substratos metabolizables tales como glucosa, fructosa o lactosa. Los
antibiticos se pueden agregar a los suplementos del semen al crecimiento
bacteriano del control (Simson 2001). La presin osmtica (300-400 mOsm/L) y
el pH de suplementos necesitan ser controlados para maximizar la
supervivencia de la esperma (Simson 2001).
La dilusin del semen con el suplemento vara con la concentracin de la
esperma del ejaculate. Ms las muestras diludas del semen pueden ser 1:1
diluido (v/v) mientras que ms muestras concentradas pueden ser 1:2 diluido o
1:3 con el suplemento. Puede ser ventajoso agregar el suplemento de 1-2 ml al
sistema de pesos americano antes de la coleccin del semen a la preservacin
de la esperma de la ayuda durante el copulation prolongado (pers de NiasariNaslaji. comm.).
Los factores de la esperma que son importantes para la fertilizacin incluyen
motility progresivo, metabolismo normal, y las membranas celulares intactas,
las enzimas acrosomal y los nucleoproteins (Simson 2001). Estos factores se
deben preservar durante congelar acertado del semen. El congelar puede
daar la esperma alterando la estructura de la membrana, el choque osmtico,
la deshidratacin, la toxicidad de la sal, la formacin de hielo intracelular, la
fluctuacin en volumen celular/el rea superficial o el desequilibrio metablico
(Simson 2001). El bravo (2002) demanda que el almacenador intermediario de
51

Tris combinado con la yema de huevo es la combinacin ms prometedora

para mantener viabilidad de la esperma durante la dilusin, refrigeracin,
congelando y deshelando del semen.
Los trabajadores numerosos han procurado el semen del camelid que
congelaba usando una dilusin de 2 pasos con glicerol, y retardan congelar en
el vapor del nitrgeno lquido (Bravo y otros. 1996c, Valdivia y otros. 1999,
Bravo y otros. 2000a). El deshelar de paja est en un bao de agua en el C
37-40 por los perodos que se extienden a partir de segundos a los minutos
(tabla 1.12).
El plasma seminal es al parecer importante en las respuestas inmunolgicas y
fisiolgicas normales a la inseminacin, al capacitation y a la reaccin
acrosome (Rigby de la esperma en 2001 elctrico). Sin embargo, los
embarazos se han establecido en las yeguas inseminadas con el semen
plasma-libre enfriado, extendido (leche desnatada, suplemento de la glucosa) y
seminal (Rigby y otros. 2001). La presencia de una cantidad pequea de
plasma seminal o de la adicin de una solucin del electrlito (eg. El medio de
Tyrode) podra optimizar motility de la esperma despus de la centrifugacin,
de la extensin y de enfriarse del semen en los caballos (Rigby y otros. 2001).

52

53

54

55

56

57

1.5.2 poca de la inseminacin en lo referente a la induccin de la

ovulacin
La ovulacin y la inseminacin sncronas se requiere para alcanzar altas tarifas
del concepto. En una cierta especie, las altas tarifas del concepto ocurren
cuando la esperma est en el oviducto momentos antes de la ovulacin (Hafez
1993). Si la esperma se coloca en la zona demasiado temprano, perdern
viabilidad antes de la ovulacin, y si la esperma se coloca en la zona despus
de la ovulacin, el ovum pueden perder viabilidad antes de que la fertilizacin
pueda ocurrir (Hafez 1993). A un estudio temprano, la parte ms elevada de
ova fertilizado dio lugar cuando la inseminacin artificial intrauterina en alpacas
era 35 a 45 horas despus de que la induccin de la ovulacin que usaba
cualquiera a vasectomised el hCG masculino o intramuscular (Calderon y otros.
1968). Ms recientemente, el AI que 24-36 horas despus de la induccin de la
ovulacin han dado lugar al concepto aceptable clasifica (la tabla 1.13;
Pacheco 1996, Quispe 1996, Apaza y otros. 1999).
1.5.3 Nmeros de la esperma requeridos por dosis del IA
La concentracin de la esperma requerida para la fertilizacin y el embarazo
acertados no se sabe en los camelids (marrn 2000). Las ovejas requieren
120-125 millones de espermas frescas usando el AI transcervical para
aceptable

el

concepto

clasifica,

pero

solamente

20

millones

congelados/deshelaron la esperma cuando se utiliza el AI intrauterino (marrn

2000). Los embarazos han dado lugar a alpacas y a llamas inseminando 8-26
millones de espermas transcervically (la tabla 1.13; Quispe 1996, Aller y otros.
1999b). Deposicin del semen de Intracornual del semen durante el copulation
en camelids puede ser una adaptacin para superar las concentraciones
relativamente bajas de la esperma (marrn 2000).
1.5.4 Mtodo de entregar la esperma en el tero
Bravo y otros. (1997a) compar las tcnicas del AI transcervical y laparoscopic
en alpacas usando el semen fresco, no diluido y alcanz tarifas similares del
concepto. Transcervical AI aparecera ser un procedimiento ms simple,
menos-invasor, no obstante tiene limitaciones de la capacidad rectal/plvica de
permitir la estabilizacin manual transrectal de la cerviz al pasar la pipeta del AI
58

a travs de la cerviz, y la dificultad de localizar el OS externo de la cerviz

durante este procedimiento. El bravo (2002) describe la necesidad de la
paciencia y de la destreza de pasar una pipeta a travs de la cerviz en el tero.
Laparoscopic AI requiere el alojamiento de la hembra en un cajn, la sedacin
con o sin un anestsico general, y el equipo laparoscopic costoso.

59

60

1.5.5 Induccin de la ovulacin

Los mtodos de inducir la ovulacin en alpacas se han discutido a fondo a otra
parte (Vaughan 2001).

Inyecciones intramusculares del buserelin de 8 g

(Bourke y otros. 1992b, 1995a), 500-750 iu de hCG (Adn y otros. 1989) y LH

del magnesio 2-5 (Taylor y otros. 2000, Huanca y otros. 2001) se ha utilizado
para inducir constantemente la ovulacin aproximadamente 30 horas despus
de la inyeccin.

1.6 Conclusiones y Punteras en el Actual Proyecto

La revisin precedente ha descrito la fisiologa reproductiva de los camelidos
masculinos, con particular referencia a alpacas en lo posible. La revisin
concluy con una seccin en el conocimiento actual de la preservacin del
semen y de la inseminacin artificial en camelidos. La puntera primaria de
este proyecto era desarrollar la tecnologa para la inseminacin artificial en
alpacas en asociacin con tarifas aceptables del embarazo despus del AI. El
proyecto fue analizado en 5 pasos para alcanzar esta puntera:
6. Coleccin constante y confiable de semen
7. La caracterizacin del semen para permitir la seleccin de conveniente
ejaculates para la preservacin
8. El enfriarse del semen de la alpaca
9. El congelar del semen de la alpaca
10. Inseminacin artificial de hembras.
Cada uno de los jalones es representado por un captulo separado (captulos 2,
3, 4, 5 y 6 respectivamente) en este informe.
61

2. COLECCIN DE SEMEN DE LA ALPACA

2.0 Construyeron y fueron cubierto al mannequin de madera del resumen A con una alpaca
bronceada piel y cabido con una vagina artificial. stos fueron modificados hasta que eran
satisfactorios para la coleccin constante y confiable de semen de alpacas. Entrenaron a los
varones para acoplarse con el mannequin. Los componentes del comportamiento de
acoplamiento fueron definidos. Aplicacin de la fuerza centrfuga a la vagina artificial despus
de que la eyaculacin fuera requerida para maximizar la produccin de semen.

2.1 Introduccin
Los varios mtodos de coleccin del semen se han procurado en camelids y se
han descrito (seccin 1.3).

El trabajo previo ha demostrado que el

electroejaculation es difcil para el operador y agotador para el animal.

Electroejaculation bajo anestesia no es apropiado para la coleccin rutinaria del
semen para la inseminacin artificial. La experiencia limitada con el masaje de
los rganos genitales internos ha indicado que esto no era tambin un
acercamiento conveniente para la alpaca (DBG indito). La colocacin de una
vagina artificial dentro de un mannequin para recoger los permisos del semen
que acoplan comportamiento en los varones de la alpaca similares a se
considerado durante el acoplamiento natural y produce probablemente
ejaculates que se asemejan a sos producidos durante el acoplamiento natural.
Este mtodo de coleccin del semen tambin permite la evaluacin de la
capacidad de acoplamiento fsica. La coleccin de semen con la vagina artificial
era el nico mtodo estudiado.

2.2 Materiales y Mtodos

2.2.1 Construccin de un mannequin
Construyeron a un mannequin de madera construido para contener una vagina
artificial segn las dimensiones en el cuadro 2.1 CA. Los pedazos seccionados
transversalmente fueron hechos de la madera de 5 capas y cubiertos con los
listones anchos de la madera dura de 35 milmetros. La seccin de la
cabeza/del cuello fue hecha de un pedazo slido de madera del pino. El
inclinarse, veeshaped el estante fue colocado entre el `A de las costillas' y el `B'
para llevar a cabo el sistema de pesos americano (cuadro 2.2 a). Cubrieron al

62

mannequin en la espuma de alta densidad y una piel bronceada de la alpaca

(cuadro 2.2 b).
Figure 2.1 (a-c). Dimensions of the wooden alpaca mannequin.

63

Figure 2.2a. Alpaca mannequin from beneath showing shelf on which the
artificial vagina is placed.

Figure 2.2b. Completed alpaca mannequin sitting on non-slip mat.

64

2.2.2 Construccin de una vagina artificial

Una vagina artificial diseada para el uso en ovejas fue utilizada para recoger
el semen en el proyecto actual (cuadro 2.3; Pty pacfico Ltd, Victoria del
veterinario). Un trazador de lneas del ltex (300 milmetros desean x dimetro
de 50 milmetros; Pty Ltd, Victoria de los guantes industriales de Deco) fue
colocado dentro del sistema de pesos americano y asegurado en cada extremo
con dos vendas elsticos #34 heridas sobre 4 veces cada uno (cuadro 2.4).
Una cerviz artificial construida de la espuma tubular (identificacin de 28
milmetros, 40 milmetros OD, 30 milmetros de largo; El caucho de Clark,
Victoria) primero fue colocado sobre el cono de la coleccin aproximadamente
5-10 centmetro del extremo estrecho y asegurado en lugar con una venda
elstico. El cono de la coleccin con el tubo unido de la coleccin de 15 ml
(Falcon, Becton Dickinson) despus fue colocado sobre un final del sistema
de pesos americano y cubierto en espuma de alta densidad. El sistema de
pesos americano y el cono enteros fueron envueltos en un cojn elctrico del
calor (40 centmetros x 30 centmetros; 230 V, 50 W) cul fue sostenido en
lugar usando 2 vendas elsticos. La vagina artificial fue asegurada sobre el
estante del mannequin que usaba las correas de Velcro.
Los conos de la coleccin hechos de diversos materiales fueron examinados
para establecer qu cono era lo ms menos posible txico a la esperma. Los
tubos que recogen cnicos unidos al extremo del cono se hacen del
poliestireno rgido (Falcon, Becton Dickinson), un producto que se ha probado
para ser no-citotxico y no-pyrogenic (O' Leary, Critchlow y otros. 1989).
Cientos y cincuenta ml de agua caliente (oC aproximadamente 60) fueron
puestos entre el sistema de pesos americano y el trazador de lneas del ltex
va la vlvula en el aire AV. fueron bombeados en el sistema de pesos
americano en un colmo de presin bastante para borrar el lumen del sistema
de pesos americano pero todava para permitir la penetracin fcil por un dedo.
Una cantidad pequea de lubricante non-spermicidal (KY, Johnson y
Johnson) fue puesta alrededor de la abertura externa del sistema de pesos
americano antes de la atadura al mannequin.

65

El cono de la coleccin y el tubo de la coleccin fueron protegidos contra

contacto directo con el cojn de la calefaccin usando un tubo de alta densidad
de la espuma para prevenir la exposicin del semen ejaculated a las
temperaturas supraphysiological (es decir oC mayor que 38) que podran
acelerar muerte de la esperma. La temperatura dentro del tubo de la espuma
cerca del punto del contacto con el sistema de pesos americano era el oC
aproximadamente 35 y hacia el sitio de la cerviz estaba en la gama del oC 22 a
25, como medido el usar de un termopar.

Figure 2.3. Dimensions of the artificial vagina used with alpacas.

66

Figure 2.4. Artificial vagina prior to placement inside the wooden

mannequin. The blue foam cone is placed over the collection cone
and tube then the AV is wrapped up in the electric heat pad.

2.2.3 Entrenamiento de los varones de la alpaca para montar al

mannequin y para utilizar el artificial vagina
Diversos varones de la alpaca exhiben diversos niveles de la libido y de la
experiencia sexual, y diversos mtodos por lo tanto requeridos de
entrenamiento para acoplar al mannequin. Dos mtodos de confianza de
entrenar a un varn para montar y para acoplar a un mannequin cabido con un
sistema de pesos americano para permitir con xito la coleccin del semen
eran convertido. El entrenamiento de varones y la coleccin de semen fueron
realizados despus de las pautas precisada en el cdigo de la prctica
australiano para el cuidado y el uso de los animales para los propsitos
cientficos 1997 y recibieron la aprobacin del comit australiano del tica del
animal de laboratorio de la salud animal.
El rea seleccionada para los varones del entrenamiento fue abrigada de los
elementos, tena una superficie conveniente (alfombra del exterior para
asegurar el pie antideslizante y para reducir la cantidad de contaminantes
introducidos adentro al sistema de pesos americano durante el intromission),

67

estaba libre de las distracciones para el varn (eg. perros, fuertes ruidos) y
cerca de una fuente de alimentacin (cuadro 2.5).
El comportamiento de acoplamiento del varn fue observado y descrito en
cinco varones una vez que fueran entrenados para montar al mannequin.
La duracin de acoplamiento fue medida, al minuto ms cercano, a partir del
tiempo que el varn mont a mannequin hasta que el varn primero estaba
parado para arriba o se retir su pene del sistema de pesos americano para
ms de un minuto. Cuando el semen era recogido para procesar los
acoplamientos fueron terminados en aproximadamente 20 minutos, si la alpaca
todava fue montada para evitar la deterioracin del semen en el ambiente
artificial de la vagina. La relacin entre la duracin de acoplamiento dentro de
ese perodo minucioso 20 y el intervalo en medio ejaculates fue examinada en
un varn.
Un mtodo de quitar el semen del sistema de pesos americano fue ideado.
2.2.4 Statistical analyses
Descriptive statistics were obtained using Minitab for Windows Release 12.1
and Microsoft Excel 97. A linear regression was performed on mating duration
(y) vs interval between collections (x).
Statistical significance was set at P < 0.05 and results presented as means +
SEM.

68

2.3 Resultados
2.3.1 Construccin de un mannequin
Durante los primeros tiempos del proyecto, modificaron al mannequin varias
veces de optimizar postura del varn cuando est montado en el mannequin.
Los cuadros 2.1 y 2.2 demuestran el diseo final alcanzado.
2.3.2 Construccin de una vagina artificial
La temperatura del sistema de pesos americano del grado ptimo extendi a
partir del 48 al oC 52. Los alpacas masculinos eran renuentes penetrar
Sistema de pesos americano cuando la temperatura del sistema de pesos
americano era menos de el oC 45 el oC o ms de 55.
En los primeros tiempos del proyecto cuando no se utiliz ninguna cerviz
artificial los alpacas masculinos constantemente retir y reinsert el pene y
apareca

incmodo.

Cuando

la

cerviz

fue

agregada

el

sistema,

comportamiento que serva vino asemejarse a eso considerada en servicio

natural.
69

Los conos de la coleccin hechos de diversos materiales fueron investigados

para establecer qu cono era lo ms menos posible txico a la esperma (tabla
2.1). Los conos del polietileno dieron los mejores resultados en trminos de
actividad de la esperma en la examinacin inicial. Fueron construidos de Krutex
Gloves sensible estupendo (Kruuse, Dinamarca) usando a sellador del calor.
Una forma cnica produjo menos dobleces del plstico en el sitio de la cerviz y
los 41 artificiales por lo tanto menos trauma a la extremidad del pene (segn lo
evidenciado por los erythrocytes en el semen).
Los varones penetraran solamente un sistema de pesos americano cabido con
un trazador de lneas del ltex, no un trazador de lneas del polietileno. Este
sistema de la preparacin de la vagina artificial era la coleccin establecida de
150 del excedente ms tentativas.
Tabla 2.1.

Diversos conos de la coleccin trialled con la vagina artificial. El material conocido del

fabricante del cono lubric % activos esperma Guantes industriales Pty de Deco del cono de la coleccin
de las ovejas Ltd, Victoria ltex no 0 Condn Ansell, ltex s 0 de Chekmate de Victoria Condn Ansell,
ltex no 0 de Chekmate de Victoria Condn femenino la Female Health Company, Illinois poliuretano s
0 Productos alegres del bolso alegre de Australia, NSW polietileno ningn 0-80* Krutex modificado
estupendo

guante sensible

Kruuse, polietileno de Dinamarca ningn 0-80*

* Otros factores eran

responsables de esperma baja que la actividad en alguno ejaculates. La actividad de la esperma fue
preservada mejor usando estos conos de la coleccin.

70

2.3.3 Entrenamiento de los varones de la alpaca para montar al

mannequin y para utilizar el artificial vagina
2.3.3.1: Mtodo 1 de machos que han acoplado previamente a hembras
Colocaron al mannequin en la yarda media de tres usados rutinariamente para
acoplarse y adyacente a una yarda de hembras receptivas. Colocaron a un
varn y a una hembra receptiva cada uno en las 2 yardas externas y permitido
para acoplarse naturalmente. Funcionaron al aprendiz-varn ms all del grupo
de hembras receptivas para estimularlo sexual. A lo despus colocaron en la
yarda media y se permitieron montar y acoplar al mannequin (Cuadro 2.6).
Este mtodo fue utilizado para recoger el semen de los varones que realizaban
servicios naturales regulares mientras que apareca que bastante estmulo
sexual fue provedo por las hembras receptivas y los pares de acoplamiento
cerca para motivar al aprendiz-varn para acoplar al mannequin. La respuesta
de estos varones estaba generalmente inmediato.
Para entrenar a un varn para acoplar al mannequin en ausencia de hembras
receptivas y/o los pares de acoplamiento de

los alpacas, el proceso del

entrenamiento descrito arriba fueron repetidos varias veces sobre varios das.
entonces colocaron al aprendiz-varn en la yarda con el mannequin con las
hembras receptivas en un adyacente

yarda, pero sin los acoplamientos

naturales que ocurren cerca. Este proceso fue repetido varias veces encima
varios das. Entonces se permiti al aprendiz-varn acoplarse con el
mannequin en ausencia de

hembras receptivas y pares naturalmente de

acoplamiento. Se prohibi al aprendiz-varn ninguna acoplamientos natural

durante el entrenamiento.
2.3.3.2: Mtodo 2 de machos virginales
Varones que no haban realizado previamente un acoplamiento natural
diferenciado en su buena voluntad de acoplar maniqui debido a las variaciones
en libido y conocimiento natural de cmo acoplar a una hembra. Era posible
entrenar a un varn virginal para acoplar a un mannequin permitiendo que l
observe a varn experimentado el acoplar de a mannequin como en el mtodo
1 y despus permitir al varn virginal en la yarda con el mannequin despus
quitar al varn experimentado. Sin embargo, no todos los varones virginales
71

saban al copulate con

mannequin despus del estmulo sexual visual y

auditivo solamente.
Se permiti al varn aprendiz-virginal por lo tanto montar a una hembra y a un
compaero receptivos una vez naturalmente.

En un da subsecuente,

colocaron al aprendiz-varn en una yarda con un mannequin, al lado de una

yarda contener a hembras receptivas. El aprendiz-varn mont a mannequin y
ejaculated el semen en Sistema de pesos americano. Quitaron a las hembras
receptivas

despus

de

primer

acoplar

acertado.

El

varn

exhibido

comportamiento copulatory similar a un acoplamiento natural demostrado por

un varn experimentado despus de 2-3 acoplamientos de el mannequin. Este
mtodo era acertado en virgen del entrenamiento 2 los varones de 4 aos.
Una vez que entrenaran a un varn para ejaculate en un sistema de pesos
americano contenido dentro de un mannequin, la presencia de requirieron a
las hembras receptivas y/o los pares de acoplamiento no ms (cuadro 2.7). No
todos los varones entrenaron al mannequin acoplado bien en cada tentativa. En
algunos das, los varones inquietaron excesivamente y eran renuentes para
penetrar el sistema de pesos americano o renuente permanecer en el sistema
de pesos americano y no podido ejaculate adecuadamente. Si esto ocurrida, la
temperatura del sistema de pesos americano fue comprobada para asegurarlo
era bastante caliente, y/o el varn era

reclinado por 2 a 3 das antes de

intentar otra vez.

Figure 2.6. Yard set-up when training a male to mate a mannequin.

72

Figure 2.7. Male mating mannequin in absence of receptive females.

2.3.3.3 Que Acopla El Comportamiento De Los Alpacas Masculinos

El tiempo de reaccin de la entrada a la yarda con el mannequin al montaje fue
encontrado para ser una medida objetiva del keenness del varn de acoplarse
(libido). El comportamiento de varones mont en el mannequin que serva la
vagina artificial fue observado. Las facetas siguientes del comportamiento
durante el acoplamiento fueron identificadas:

Movimientos que buscan del pene mientras que la posicin de la pelvis

era 15 a 30 centmetros detrs del mannequin.

Movimiento del cuerpo adelante al intromission del aumento.

El empujar plvico con los hindlimbs que se mueven para traer el cuerpo
ms lejos adelante.

Episodios de contracciones rtmicas de los msculos traseros plvicos y

superiores del miembro.

Depresiones rtmicas de la cola.

Extensin de la cola.

El colocar de nuevo

73

Moviendo la parte posteriora del cuerpo generalmente con el pene que

sale parcialmente, entonces movindose adelante otra vez al punto de la
penetracin mxima.

Barbilla que se reclina sobre la cabeza del mannequin.

La cabeza baj al hombro del mannequin.

Vocalisation continuamente o intermitentemente a travs del copulation.

Los varones aparecieron al vocalise ms en alta voz cuando las
hembras receptivas eran prximas.

La duracin de acoplamiento se extiende a partir del 5 a 45 minutos.

Enla mayora de los acoplamientos fue interrumpido y se anim al varn

que desmontara entre 15 y 20 minutos. Esto era considerada necesario
en la etapa actual del proyecto para evitar que los spermatozoa
ejaculated sean expuestos a los cambios en temperatura y para evitar
un contacto ms largo con la vagina artificial y recogiendo el recipiente
(vase la seccin 3.2.2).

No se estableci ninguna asociacin clara entre el patrn de la actividad de

acoplamiento y las caractersticas del semen.
2.3.3.4 Que Acopla La Duracin
La relacin entre la duracin y el intervalo de acoplamiento en medio ejaculates
fue examinada en un varn (cuadro 2.8). Haba una tendencia (P = 0.143) para
acoplamientos ms largos cuando el intervalo entre los acoplamientos
aument.
2.3.3.5

Retiro del semen de la vagina artificial despus de acoplar

El semen de la alpaca era generalmente bajo en volumen y arriba en

viscosidad y tendi para espumejear y palillo al trazador de lneas del ltex y
cono durante la eyaculacin en el sistema de pesos americano (cuadro 2.9).
Despus del retiro del sistema de pesos americano del mannequin, la cerviz
artificial fue quitada del cono y del agua de la coleccin vaciados del
compartimiento. El semen fue movido en el tubo de la coleccin unido al cono

74

de la coleccin haciendo pivotar el sistema de pesos americano en la longitud

del brazo en un movimiento circular vertical para 10-15 rotaciones para permitir
que la fuerza centrfuga empuje el semen viscoso espumoso en el tubo de la
coleccin.

Figure 2.8. Linear regression of mating duration (min) and interval between
collection of ejaculates in one male (y = 0.717x + 12.08, R2 = 0.104, P = 0.143,
n = 22).

Figure 2.9. An artificial vagina with frothy semen stuck on the latex liner.

75

2.4 Discusin
El uso de un mannequin y de un sistema de pesos americano de recoger el
semen de alpacas requiri una comprensin de las idiosincrasias asociadas al
comportamiento de acoplamiento natural de alpacas (vase la seccin 1.2.4).
El mannequin y los sistemas de pesos americanos fueron preparados de una
manera que permiti que el varn montara, penetrara el sistema de pesos
americano y ejaculate de una forma que se asemeja de cerca a acoplamiento
natural. Por lo tanto razonablemente fue asumido que ejaculates producido
durante el acoplamiento en un sistema de pesos americano era similar a sos
producidos en un acoplamiento natural. Cada tentativa fue hecha de maximizar
el nmero de la esperma viva recogido de varones. La gama de temperaturas
ptima de la vagina artificial fue divulgada previamente como 38 al oC 45
(Garnica y otros. 1993, 1995, Von Baer y otros. 1999, Bravo y otros. 2000a).
Las observaciones en el proyecto actual sugieren que la temperatura sea una
poco ms alta que esto para los patrones del comportamiento ptimos.
Semejantemente una cerviz simulada se considera necesaria, encontrando eso
conviene con la investigacin peruana (Sumar, comunicacin personal).
Los conos de la coleccin hechos de ltex se utilizan rutinariamente en AVs
diseado para el domestic del non-camelid ganado. Aunque el ltex puede ser
txico a la esperma (Critchlow y otros. 1989), la eyaculacin es un proceso
rpido en estas especies as que el semen no est generalmente en contacto
con el ltex para ms que algunos minutos despus de coleccin. Sin embargo,
los camelids ejaculate para un promedio de 20 minutos, por lo tanto los conos
de la coleccin hechos de diversos materiales fueron examinados para
establecer qu cono era lo ms menos posible txico a la esperma. Los conos
del polietileno proporcionaron la mayora de la esperma viva. Los varones
penetraran solamente un sistema de pesos americano cabido con un trazador
de lneas del ltex, no un trazador de lneas del polietileno.
Diversos varones de la alpaca exhiben diversos niveles de la libido y de la
experiencia sexual, y diversos mtodos por lo tanto requeridos de
entrenamiento para acoplar al mannequin. Dos mtodos de confianza fueron

76

desarrollados para entrenar a un varn para montar y para acoplar a un

mannequin cabido con un sistema de pesos americano para permitir con xito
la coleccin del semen.
El entrenamiento de varones no era difcil y se poda alcanzar en 1 a 5 das.
Sumar (indito) ha demostrado que los varones entrenados recuerdan su
entrenamiento para mientras un ao despus de su servicio pasado.
Las facetas del comportamiento de acoplamiento observadas eran similares a
sas registradas por otros trabajadores (vase la seccin 1.2.4). No todos los
varones entrenaron para montar al mannequin acoplado bien en cada tentativa.
En algunos das, los varones inquietaron excesivamente y eran renuentes
penetrar el sistema de pesos americano o renuente permanecer en el sistema
de pesos americano y no podido ejaculate adecuadamente.
Los varones que realizan rutinariamente acoplamientos naturales pueden no
intercambiar hacia adelante y hacia atrs fcilmente entre hembras receptivas y
un mannequin (Gauly, comunicacin personal).
La repugnancia para servir el sistema de pesos americano tambin se ha
observado en las llamas (Aller 2001) y los camellos (Deen y otros. 2003) donde
20 a el 25% de tentativas de acoplamiento no pudieron producir un completo
ejaculate. Ms observaciones son necesarias establecer las relaciones entre el
comportamiento y las caractersticas de acoplamiento del semen. Puede haber
ventaja en la registracin del patrn del comportamiento de la porcin en
varones como base para reconocer comportamiento anormal o la probabilidad
de la calidad pobre del semen.
Los mtodos de la coleccin se convirtieron en esta coleccin confiable
permitida captulo de semen que se puede utilizar para estudiar las
caractersticas del semen (captulo 3) y la preservacin del semen (captulos 4
y 5). Ms investigacin es necesaria asegurar el estmulo sexual mximo y las
respuestas de la eyaculacin en cada coleccin procuran para la produccin
rutinaria del semen en un programa de la inseminacin artificial. Esto puede
77

requerir modificaciones al trazador de lneas del sistema de pesos americano,

temperatura del sistema de pesos americano y configuracin y adaptacin de la
cerviz a los requisitos de varones individuales.

78

3. CARACTERISTICAS DEL SEMEN DE LA ALPACA

3.0 sumarias Las caractersticas del semen que definen un ejaculate fueron
establecidas. Estos parmetros eran el volumen (ml), la actividad (por ciento de
esperma que demuestra cualquier tipo de movimiento), la concentracin (millones por
el ml), nmeros totales de la esperma en un ejaculate, por ciento vivos, viscosidad, pH
y morfologa de la esperma. Un mtodo prctico de gravamen del semen fue
desarrollado. La calidad del semen vari considerablemente en y entre varones.

3.1 Introduccin
El semen del camelid del americano del sur ha sido caracterizado por varios
laboratorios en el sur y Norteamrica y Europa en una pequea cantidad de
varones. El semen fue recogido por medio de una vagina artificial, y de
parmetros del semen del color, viscosidad, volumen, pH, porcentaje de la
esperma viva, esperma la concentracin, la morfologa y la actividad fueron
descritas conjuntamente con la duracin del copulation (Lichtenwalner y otros.
1996b, Bravo y otros. 1997a; ver la seccin 1.3.2). Estos parmetros han sido
tiles para el trabajo de diagnstico, detectando a varones con disturbios
significativos de la funcin reproductiva y de la fertilidad disminuida cuando los
valores son lmites normales del exterior bien. Proporcionan la informacin
importante para la seleccin de los varones del reproductivo-sonido para el uso
en el AI. Estos parmetros, sin embargo, no son siempre tiles para identificar
fertilidad suboptimal en ganado domstico tal como toros (Rodriguez Martinez y
otros. 2001). La variacin en calidad y fertilidad del semen entre ejaculates
del mismo varn puede tambin obstaculizar la prediccin de la fertilidad.
En trabajo del AI de la rutina en ganados y ovejas, los estndares de la calidad
del semen para la aceptacin y el rechazamiento de padres y ejaculates para el
AI se fijan en trminos de concentracin de la esperma, de su motility y de la
morfologa. Hay una necesidad clara de estandardizar el gravamen del semen
en camelids por todo el mundo.
Los mtodos simples, econmicos son necesarios para la examinacin de
fresco y el semen del deshielo del poste para identificar a varones con fertilidad
suboptimal suave y severa y a seleccionarlos o rechazo ejaculates para los
propsitos del AI. Un tal parmetro identificado en semen de bvidos congelado

79

en Australia es el porcentaje morfolgico de normal los spermatozoa postedeshielan inmediatamente (Phillips y otros. 2001). Un microscopio del contraste
de la fase de la buena calidad con la alta energa (por lo menos ampliacin
X.400) y las manchas y los borrones de transferencia correctamente
preparados son necesarios.
Mtodos complejos de evaluar el semen que tienen una relacin significativa a
la fertilidad y permiten la eliminacin de toros secundario-frtiles, incluye la
evaluacin de ayuda de computadora de los patrones del motility de la
esperma, de la separacin de la esperma del swimup, del estado del
capacitation, de las reacciones acrosome inducidas, de los anlisis espermaque atan del pellucida del zona y de la fertilizacin in vitro. Estos mtodos de la
evaluacin del semen requieren habilidad en el uso del equipo costoso y no
sern considerados ms lejos en este estudio. Las punteras de este captulo
eran definir un mtodo estandardizado y objetivo de caracterizar el semen de la
alpaca describiendo parmetros cuantitativos del semen. Esto proporcionar
una base para los centros o los individuos de crianza artificiales australianos
para determinar calidad del semen y la fertilidad de los varones de la alpaca.

3.2 Materiales y mtodos

3.2.1 Animales y equipo usados para caracterizar el semen
Veinticuatro ejaculates fue recogido a partir de un varn para definir
caractersticas del semen. Ejaculates a partir de tres varones fueron recogidos
para examinar la variacin entre varones.
El equipo usado para caracterizar el semen de la alpaca en este proyecto se
enumera en la tabla 3.1. Un microscopio con la ampliacin (x 100, x 200 y
X.400) de los objetivos del contraste de la fase y de immersin en aceite
(x1000 la observacin clara permitida de la ampliacin) de la esperma para la
morfologa y vive/absolutamente los estudios. Combinado con una etapa
caliente (oC 37), el movimiento de la esperma fue observado y descrito

80

3.2.2 Caractersticas del semen

La mayora de ejaculates fue recogida directamente en los suplementos del
semen para facilitar la preparacin del semen para el AI (vase los captulos 4
y 5). Muchas caractersticas del semen fueron influenciadas por la presencia de
suplementos. Por lo tanto un nmero limitado de ejaculates fue examinado para
definir las caractersticas.
La hoja del expediente de datos usada est en el apndice 1.
3.2.2.1 Volumen del semen
El volumen del semen fue determinado colocando el semen en un tubo
graduado de la coleccin despus de la terminacin de la eyaculacin. La
fuerza centrfuga fue aplicada haciendo pivotar la vagina y el cono artificiales
con el tubo unido en la longitud de los brazos en un movimiento circular varias
veces de recoger tanto cuanto sea posible del ejaculate en el tubo.
3.2.2.2

Viscosidad del semen

81

Para medir viscosidad del semen, el semen de 10 L fue elaborado en una

micropipeta, despus el semen de 5 L fue colocado en una diapositiva de
cristal y tir hacia arriba segn lo descrito por Bravo y otros. (2000b). El hilo de
rosca del semen fue tirado lentamente hasta que se rompi. El punto en el cual
el hilo de rosca del semen se rompi, fue medido al milmetro ms cercano
usando una regla y la distancia registradas como viscosidad del `'.
3.2.2.3 Porcentaje de de la esperma viva
La mancha de la Nigrosin-eosina (Hancock 1957) fue utilizada para calcular
nmeros de la esperma viva y muerta. La esperma viva con las membranas
intactas del plasma no toma la mancha, mientras que la esperma muerta tiene
permeable membranas y rojo de la mancha con eosina.
La mancha de la Nigrosin-eosina fue mezclada con semen en un coeficiente de
1:2 (semen: mancha) en una diapositiva de cristal usando una micropipeta de
10 L (esto puede ser realizada inmediatamente despus que se ha medido la
viscosidad). Un subsample de la mancha y del semen despus fue extendido
por una diapositiva de cristal y secado al aire. El borrn de transferencia del
semen fue examinado bajo alta energa (X.400 o x de immersin en aceite
1000). Cientos espermas fueron examinadas para mancharse y el porcentaje
vivo de la esperma calculaba.
3.2.2.3

Actividad de la esperma

Una gota del fresco ejaculate fue examinada bajo resbaln de la cubierta en
una etapa caliente en la ampliacin X.400.
3.2.2.4

Concentracin de la esperma

El nmero de la esperma por el ml de semen era calculado diluyendo una parte

alcuota de semen y la cuenta de la esperma en un Neubauer mejor el
hemocitmetro (Pty Ltd, Alemania de la marca de fbrica), una diapositiva de
cristal grabada al agua fuerte con los cuadrados del rea sabida y profundidad
entre la tira y la diapositiva. El semen fue diluido (x 50) para contar agregando
el L 10 del ejaculate al L 440 regar ms 50 el trypsin del L 2.5%. La mezcla
era vortexed por 10 segundos. Los 2 compartimientos del hemocitmetro
fueron llenados de semen y de izquierdo diluidos, mezclados para estar
82

parados por 5 minutos en un ambiente hmedo de modo que la esperma se

hundiera al fondo de cada compartimiento y eran ms fciles de observar
debajo del microscopio. Toda la esperma en los 25 cuadrados centrales de
ambos compartimientos fue contada, incluyendo la esperma que menta en las
lneas ms bajas e izquierdas de cada cuadrado, y un medio calculado (cuadro
3.1).

El nmero malo de la esperma en los 25 cuadrados centrales se

multiplic por 0.5 dio la concentracin de la esperma en millones de esperma

por el ml.
Clculo de la dilusin al contar toda la esperma en los 25 cuadrados
centrales:
El nmero de la esperma en la central 25 ajusta x 104 (volumen del
compartimiento = 1 milmetro x largo 1 milmetro x amplio 0.1 milmetros altura
= 0.1 mm3; para convertir a la esperma por el ml multiplicarte por 104) x 50
(semen del L de la tarifa 10 de la dilusin en agua de 490 L) = #sperm en la
central 25 ajusta sperm/mL de x 0.5 x 106
Diversas dilusiones se pueden utilizar para satisfacer ejaculates de una
concentracin ms alta o ms baja. Semejantemente puede no ser necesario
contar los 25 cuadrados. Un total por lo menos de la esperma 200 debe ser
contado.
Clculo de la dilusin al contar menos de 25 cuadrados:
Concentracin (x 106 sperm/mL) = nmero total de la esperma x nmero 1000
del de 250 de x 50 (tarifa de la dilusin) x de los cuadrados contados. Un solo
cuadrado pequeo es 0.004 mm3 (1s/250o de un milmetro cbico).

83

Figure 3.1. Etchings on a haemocytometer that allow calculation of sperm

concentration. Sperm in the middle 25 squares are counted, including sperm
lying on the lower and left lines of each square.

3.2.2.6 Morfologa del esperma

Observacin y clculo de la esperma normal y de la esperma que exhiben
anormalidades morfolgicas de la cabeza, el mediados de-pedazo y/o la cola
fueron realizados usando la misma diapositiva segn lo preparado para las
cuentas vivas/de los muertos en alta energa (de immersin en aceite, x 1000).
Para los gravmenes rutinarios 100 la esperma fue contada y clasific como
tener morfologa normal o anormal.
3.2.2.7 pH
El pH era calculado usando el papel del pH. Longitud testicular mala de
3.2.2.8 La longitud testicular
Mala es la longitud mala del eje ms largo de los testes izquierdos y derechos
medidos a el milmetro ms cercano, y fue medido usando los calibradores
segn Galloway (2000).
3.2.2.9 que acopla la duracin
La duracin de acoplamiento fue medida al minuto ms cercano segn lo
descrito en el captulo 3.

1 milmetro

1 milmetro

Profundidad del

compartimiento 0.1 milmetros (No escalar)

3.2.3

Anlisis estadsticos

La estadstica descriptiva fue obtenida usando Minitab para el lanzamiento

12.1 de Windows y el Excel de Microsoft 97. Las regresiones cuadrticas
fueron realizadas en (a) la concentracin de la esperma (y) contra das entre la
coleccin de ejaculates (x) y (b) el volumen del semen contra das entre la
coleccin de ejaculates. Regresiones lineares fueron realizados encendido: (a)
concentracin de la esperma contra la duracin de acoplamiento, (b)
concentracin de la esperma contra el semen volumen, (c) volumen del semen
contra la duracin de acoplamiento, (d) viscosidad del semen contra la duracin
de acoplamiento, (e) acoplamiento la duracin contra das entre la coleccin

84

de ejaculates, (f) viscosidad del semen contra el volumen del semen, semen
del (G) la viscosidad contra la concentracin de la esperma y (h) la viscosidad
del semen contra das entre la coleccin de ejaculates.

La significacin

estadstica fue fijada en P < 0.05 y los resultados presentados como significa +
SEM.

3.3 Resultados
3.3.1 Caractersticas del semen
Las caractersticas de la demostracin de las tablas 3.2 y 3.3 del semen
recogieron de varones con longitud testicular mala > 4

centmetro. Los

testculos grandes no significaron necesariamente buena calidad del semen

como se muestra por el semen variado caractersticas entre varones. El varn
#1 tena calidad mejor del semen que los varones #2 o #3, que tena actividad
baja de la esperma y porcentajes crecientes de las anormalidades de la cabeza
y de la midpiece-cola de la esperma. examinacin morfolgica de diagnstico
de la informacin proporcionada semen sobre los tipos y porcentajes de la
esperma anormal.
Tabla 3.2. La longitud y las caractersticas testiculares del semen recogieron con una
vagina artificial de tres alpacas masculinos encendido el mismo da.

85

86

3.3.1.1

Volumen del semen

El semen de la alpaca que fue recogido en un sistema de pesos americano

seco (sin el suplemento) era generalmente viscoso y espumoso y pegado a las
paredes del ltex. La espuma del semen era rica en esperma y fue incluida en
el ejaculate si es posible. Al caracterizar un ejaculate no se agreg ningunos
suplementos al sistema de pesos americano de antemano como ste interfiri
con la valoracin del volumen exacto y de la concentracin. No era posible
restar simplemente el volumen del suplemento del semen del total ejaculate el
volumen si estuvo agregado al sistema de pesos americano antes del
copulation como porcin de suplementos del semen que cualquiera funcion
del sistema de pesos americano durante la colocacin del sistema de pesos
americano en el mannequin, evaporado durante la coleccin u orientado el
sistema de pesos americano ms bien que funcion en el tubo de la coleccin.
3.3.1.2

Viscosidad del semen

El semen de la alpaca era generalmente viscoso, haciendo el retiro del semen

del sistema de pesos americano difcil. Viscosidad a partir 5 a 18 milmetros
variados.
3.3.1.3

Porcentaje de la esperma viva

El porcentaje de la esperma viva adentro ejaculates extendido a partir de la 0

hasta la esperma viva del 90%. Buena calidad del semen

apareca tener

esperma viva ms del de 70%.

3.3.1.4

Actividad de la esperma

El porcentaje de la esperma activa se extendi a partir de la 0 hasta el 80%. La

actividad de la esperma fue determinada lo ms mejor posible bajo fase
contraste en la ampliacin x 200 o X.400. Una descripcin de varios campos
fue hecha, observando la proporcin de esperma que se movan de cualquier
manera. Los tipos de actividad de la esperma observados eran movimiento
delantero progresivo (motility), oscilacin y movimiento vibratorio. El tipo de
movimiento dependi en parte de la distribucin de los spermatozoa en la
fraccin del gel. El gel restringi el movimiento de la esperma encajada en l.
La esperma en las partes ms flidas de la gota demostr el movimiento
87

delantero activo tpico (motility). Por lo tanto, fue determinado que los
spermatozoa activos de los por ciento deben ser el gravamen rutinario
incluyendo todos los tipos de actividad (tabla 3.2). Cuando se diluye el semen y
se dispersa el gel, el por ciento motile es apropiado. El semen de la alpaca
no exhibi el movimiento de la onda (accin total de la esperma vista con el ojo
desnudo).
3.3.1.5 Concentracin de la esperma
La concentracin de la esperma en semen vari extensamente a partir 22.5 a
875 millones de espermas por el ml de semen.

La concentracin de la

esperma en semen determin color del semen y se extendi de gris a lechoso

a color crema como nmeros de la esperma por el ml de semen creciente.

3.3.1.6 Morfologa de la esperma

Las anormalidades de la esperma observadas en el proyecto actual incluyeron
las cabezas anormalmente formadas, las cabezas tailless, las gotitas
citoplsmicas (unidas a la parte prxima o distal del mediados de-pedazo), los
mediados de-pedazos anormales y las colas anormales (doblados o arrollados;
Tablas 3.2, 3.4 y 3.5). Los porcentajes de la esperma anormal fueron dados
como el porcentaje de la esperma total en el ejaculate. La esperma individual
pudo haber tenido ms de una anormalidad. Los alpacas masculinos con los
testculos grandes, una historia de la buena fertilidad y las cuentas altas de la
actividad de la esperma tenan 70 a 80 % morfolgico de los spermatozoa
normales (tabla 3.4). La anormalidad ms frecuente encontrada era cabezas
tailless seguidas por las gotitas prximas. La examinacin detallada del
laboratorio de la morfologa proporcion ms informacin en la gama de la
calidad del semen que fue encontrada en el proyecto (tablas 3.4 y 3.5).

3.3.1.7

pH

En el proyecto actual, el pH del semen de la alpaca se extendi a partir del 7.5

a 8.
Tabla 3.4. Gravmenes rutinarios de la morfologa sobre el semen de criar los alpacas
masculinos con una historia de la buena fertilidad. Las cuentas de 100 o ms
spermatozoa fueron hechas en la ampliacin de x 600 usando borrones de transferencia
eosina-manchados nigrosin.

88

3.3.2 Relaciones entre parmetros del semen y entre los parmetros del
semen y gerencia de acoplamiento
Haba una relacin positiva entre (y) el volumen del semen (ml) y (x) la
duracin de acoplamiento (minutos; y = 0.036x - 0.166, R2 = 0.24, P = 0.021, n
= 22; Cuadro 3.2).
Las regresiones cuadrticas de la concentracin de la esperma (millions/mL) y
del intervalo entre la coleccin de ejaculates (los das; y = -20.6x2 + 159.7x
+107.5, R2 = 0.25, P = 0.146, n = 18; El cuadro 3.3) y el volumen del semen
(ml) e intervalo entre la coleccin de ejaculates (los das; y = - 1.99x2 + 0.12x +
0.19, R2 = 0.105, P = 0.39, n = 20; Cuadro 3.4). Esto sugiri que las
concentraciones de la esperma y los volmenes mximos del semen fueran

89

producidos cuando el intervalo entre las colecciones de ejaculates era 3 a 4

das que cuando ejaculates fueron recogidos en intervalos ms cortos o ms
largos.
Los coeficientes de la regresin para las ecuaciones siguientes acercaron a
cero:
Concentracin de la esperma (millions/mL) y duracin de acoplamiento (minuto;
y = 2.55x +288.3, R2 = 0.0014, P = 0.877, n = 19, cuadro 3.5).
Concentracin de la esperma (millions/mL) y volumen del semen (ml; y =
299.64x + 288.51, R2 = 0.10, P = 0.205, n = 16; Cuadro 3.6).
Viscosidad del semen (milmetro) y volumen del semen (ml; y = 2.042x + 9.72,
R2 = 0.028, P = 0.525, n = 17; Cuadro 3.7).
Viscosidad del semen (milmetro) y concentracin de la esperma (million/mL; y
= 0.0076x + 8.03, R2 = 0.22, P = 0.068, n = 16; Cuadro 3.8).
La viscosidad del semen (milmetro) y el intervalo entre la coleccin de
ejaculates (los das; y = 0.840x + 7.97, R2 = 0.141, P = 0.125, n = 18; Cuadro
3.9).
Viscosidad del semen (milmetro) y duracin de acoplamiento (minuto; y =
0.216x + 7.49, R2 = 0.041, P = 0.407, n = 19; Cuadro 3.10).
La duracin de acoplamiento (minuto) y el intervalo entre la coleccin de
ejaculates (los das; y = 0.717x + 12.08, R2 = 0.104, P = 0.143, n = 22; Cuadro
3.11).

90

91

92

93

94

95

3.4

Discusin

Las caractersticas del semen de la alpaca encontradas en el estudio actual

eran similares a sas encontradas por otra trabajadores (vase la seccin
1.3.2, la tabla 1.8). Haba gran variacin en y entre varones con respecto al
volumen, a la concentracin, a la viscosidad, a la morfologa, a la actividad y a
los por ciento del semen vivos. El trabajo proporcion la base para la definicin
de la calidad del semen y la seleccin de los varones convenientes para el
semen

preservacin. El semen necesita ser recogido y ser examinado de

muchos ms alpacas clnico normales de la fertilidad sabida para definir los

lmites de las caractersticas del semen que indican la funcin reproductiva
normal y la alta fertilidad. De la otra especie se sabe que solamente el semen
de la alta calidad es conveniente para enfriarse y congelar.
Hay 2 ediciones que estn en conflicto relacionadas con la duracin de
acoplamiento que puede afectar calidad del semen. El primer es que el
volumen de cada uno ejaculate, y por lo tanto suma nmeros de la esperma,
aumenta con el aumento de la duracin del copulation (cuadro 3.2) y que el
acoplamiento de la duracin de un varn que acopla a un mannequin debe
estar de duracin similar a el de un acoplamiento natural para maximizar la
probabilidad de la coleccin ptima del semen (vase

Seccin 1.2.6). La

segunda edicin es la dificultad de controlar el ambiente dentro del sistema de

pesos americano con la posibilidad de una reduccin en calidad del semen
durante el copulation prolongado. La temperatura artificial de la vagina
disminuy en un cierto plazo a pesar de la presencia de un cojn del calor
alrededor del exterior. Semejantemente, prolongado el contacto del semen con
el trazador de lneas del ltex puede ser perjudicial a la supervivencia de la
esperma (Aller 2001). Grado ptimo

la duracin de acoplamiento es un

compromiso entre estos efectos de oposicin sobre calidad del semen.

Cuando ejaculates fueron recogidos cada 3 o 4 das all eran una tendencia
para una concentracin ms alta de la esperma por ejaculate y mayor volumen
del semen (cuadros 3.3 y 3.4). A pesar de que los resultados no eran
estadstico significativos, y debido a los apremios del tiempo en el proyecto,

96

estos resultados dirigieron el trabajo divulgado en captulos subsecuentes para

obtener los nmeros mximos de la esperma para la dilusin y el proceso del
semen. No haba relacin entre la concentracin y el volumen del semen,
viscosidad de la esperma del semen y volumen del semen, viscosidad del
semen y concentracin de acoplamiento de la duracin o de la esperma y
duracin de acoplamiento de el individuo ejaculates. Aparecera que la emisin
de la fraccin del gel del semen est dispersada a travs del proceso y no hay
fraccionamiento de componentes seminales durante la eyaculacin.
Los trabajadores anteriores tambin han indicado que restos de la composicin
del semen constante a travs de la eyaculacin (Sumar 1983, Moscoso y otros.
1999), sin embargo, otros han observado esa concentracin de la esperma, el
porcentaje de la esperma activa, el porcentaje de la esperma viva y el
porcentaje de la esperma normal aumentaron con tiempo durante un solo
copulation (Lichtenwalner y otros. 1996b, Bravo y otros. 2002).
Los varones usados en el proyecto actual tenan longitudes testiculares malas
> 4 centmetros. La longitud testicular mala da una indicacin de la probabilidad
de tubules spermatogenic produciendo los spermatids alargados (tabla 1.5;
Galloway 2000) y por lo tanto la capacidad de un varn de producir la esperma.
La longitud testicular mala tambin se correlaciona altamente con el peso
testicular (r = 0.88, n = 68; Galloway 2000) y por lo tanto cuantitativo
produccin de la esperma (evidencia de la otra especie). Caractersticas de la
demostracin de las tablas 3.2 y 3.3 del semen

recogido de varones con

longitud testicular mala > 4 centmetros. Los testculos grandes no significaron

necesariamente buena calidad del semen como se muestra por caractersticas
variadas del semen entre varones. Consideraban al varn #1 para tener buena
calidad del semen cuando los valores normales para las caractersticas del
semen fueron extrapolados de la otra especie. Los varones #2 y #3 tenan
actividad baja de la esperma y porcentajes crecientes de la cabeza de la
esperma y anormalidades de la midpiece-cola que sugieren la presencia de
una degeneracin testicular. Las razones de la calidad pobre del semen y de la
degeneracin testicular en alpacas requieren estudio adicional.

97

En especie tal como espolones y toros, la esperma se considera como rpida y

progresivo-motile si nadan ms de una longitud de cuerpo de la esperma por
segundo. La esperma con el movimiento rpido, progresivo se piensa a
asociarte a fertilidad, mientras que esperma que crispa, circunda lentamente o
ser no-progresivo se excluyen generalmente de las estimaciones del motility
(Evans 2001). En cambio, los spermatozoa activos de los por ciento deben
ser el gravamen rutinario para el movimiento exhibido en semen de la alpaca
mientras que el trmino incluye todos los tipos de actividad de la esperma. El
trmino motility se reserva lo ms mejor posible para el gravamen cuando el
gel no est interfiriendo con el movimiento y la esperma de hecho se est
moviendo activamente adelante. En algunas muestras viscosas del semen de
la alpaca 59 examinado pronto despus de la coleccin, motility segn lo
definido para la otra especie pueden ser el 0%, pero la actividad puede ser el
70% que sugiere buena calidad del semen.
La determinacin subjetiva del motility de la esperma, por la alta energa (x 200
o X.400) fase-pone en contraste generalmente la microscopia con una etapa
precalentada, es el mtodo ms ampliamente utilizado de determinar calidad
del semen en la poste-coleccin domstica del ganado de ejaculates
inmediatamente y el poste-deshelar del semen congelado (Rodriguez-Martinez
y otros. 2001). El mtodo es rpido y simple, sin embargo, no hay fuerte
relacin entre el motility del semen y la fertilidad subjetivo determinados del
campo en ganados cuando los valores del motility son los 50% o mayores
(Hafez 1993, Stalhammar y otros. 1994). Dado esta observacin y dificultad en
describir el movimiento en alpacas, otros mtodos de la esperma de determinar
necesidad de la calidad del semen de ser convertido.
La examinacin rutinaria del semen proporcion una gua a la conveniencia
para la inseminacin artificial. Exacto

la determinacin del nmero de la

esperma por el ml de semen es tan importante que hay mucha variacin entre
los varones y ejaculates, pero fue obstaculizado por la presencia de
espumejear del semen durante

coleccin. La espuma era esperma-rica y

necesita ser utilizada en cada uno ejaculate para maximizar el nmero total de
la esperma disponible para la transformacin posterior. Concentraciones de la
98

esperma descritas en alpacas en gama de la literatura de diez de millares de

sperm/mL (Raymundo y otros. 2000) hasta centenares de

millones de

sperm/mL (Bravo y otros. 2002). El clculo de la concentracin de la esperma

permite cuantificable dilusin con los suplementos del semen para producir
nmeros sabidos de la esperma por dosis del AI. El trabajo adicional es
requerido para definir las influencias de la altitud, estacin, nutricin, edad y
gentica en la produccin de la esperma y para ejaculate la concentracin, y la
gama de las concentraciones de la esperma encontr debajo de del sudeste
Condiciones ambientales australianas.
La examinacin morfolgica de diagnstico de la esperma de la alpaca da una
gua adicional a gravamen de la calidad del semen. En alpacas masculinos
normales y anormales en el material limitado disponibles, las anormalidades
predominantes en el semen eran cabezas tailless y gotita citoplsmica prxima.
Su origen y significacin y la relacin de las caractersticas morfolgicas del
semen a la conveniencia para procesar y a la fertilidad requieren estudio
adicional. Es a menudo necesario examinar el semen durante tiempo con las
examinaciones seriales del semen antes de una diagnosis y su relacin a la
fertilidad puede ser determinada. Las anormalidades de la esperma observadas
en el proyecto actual (tablas 3.2, 3.4 y 3.5) tambin han sido observadas en
camelids por otros trabajadores (vase la seccin 1.4.2, la tabla 1.11).
La morfologa gruesa de la esperma puede ser un parmetro confiable del
campo de ejaculate calidad porque es lo menos influenciado por el proceso de
la coleccin o congelar-deshelando (Perry y otros. 2002). Se ha encontrado en
toros que el porcentaje de la esperma normal en un ejaculate correlaciona
perceptiblemente con fertilidad en las pruebas de pre-acoplamiento y el semen
congelado-deshelado (Phillips y otros. 2001). La morfologa de la esperma viva
correlaciona mejor con potencial de la fertilidad que con morfologa total de la
esperma de un ejaculate (Hafez 1993) y se puede utilizar eliminar toros con
semen de la mal calidad para AI (Rodriguez-Martinez y otros. 2001). La
fertilidad en toros no se compromete generalmente hasta que el porcentaje de
la esperma anormal excede de 20 hasta el 30% (Hafez 1993, Perry y otros.
2002) pero el nivel es desconocidos en alpacas.
99

Haba variacin extrema en calidad del semen en y entre los alpacas

masculinos y todos los resultados requerir la confirmacin adicional con la
coleccin y la caracterizacin de muchas ms muestras del semen de una
variedad de varones. Los niveles aceptables mnimos de los parmetros del
porcentaje viven esperma, esperma normal del porcentaje, actividad, la
esperma por necesidad del ml de ser determinado de permitir la seleccin de
conveniente ejaculates para la transformacin posterior y la preservacin o el
descarte de inadecuado ejaculates. El espumejear del semen en el sistema de
pesos americano durante la coleccin necesita reducido al mnimo para
maximizar el nmero total de la esperma disponible para caracterizacin y
proceso. La crianza de la evaluacin de la validez y de la caracterizacin del
semen en alpacas debe promover fertilidad de la manada y el uso de menos,
de varones mejores on-farm, y de la seleccin de los varones ms
convenientes para el proceso del semen.

100

4. ALMACENAR EL SEMEN LQUIDO DE LA ALPACA

4.0 Summary Extenders containing egg yolk and glycerol, and in
particular Triladyl
(Minitub, Germany), proved the most effective extenders for chilled
semen up to 48 hours. Other extenders were unsatisfactory in
comparison to Triladyl. Neither centrifugation of semen to remove

4.1 Introduccin
El almacenaje acertado del semen en un estado lquido confa en la reduccin
de muerte y de la degeneracin de la esperma durante almacenaje para poder
alcanzar embarazos despus del AI 1-3 das despus de que el semen se
recoge. las ventajas de almacenar el semen recogieron del ganado domstico
en forma lquida ms bien que en forma congelada incluir el requisito de
nmeros ms bajos de la esperma por dosis del AI (4-8 millones de espermas
por dosis en toros pero dosifican desconocido en alpacas), almacenaje barato y
uso fcil del campo. La desventaja principal es que el semen lquido tiene una
vida til limitada comparada con el semen congelado, que tiene vida de
almacenaje ilimitada.
Los suplementos del semen son soluciones usadas al estiramiento del `' que
cada uno ejaculate ms lejos sin la reduccin de fertilidad, y realzar
supervivencia de la esperma fuera del varn. Por ejemplo, un espoln ejaculate
conteniendo 2000 millones la esperma por el ml puede ser extendida para
producir 30-60 dosis del AI de semen. De la concentracin de la alpaca los
spermatozoa observados en el captulo 3, dosis de la alpaca por ejaculate son
probables ser considerablemente ms bajos que esto.
Los suplementos del semen contienen generalmente los ingredientes que son
beneficiosos a la supervivencia de la esperma: una fuente de la energa (eg.
glucosa, fructosa), compuestos a proteger contra choque fro durante enfriarse
(eg. lipoprotena de la yema de huevo, de la casena de la leche) y de congelar
(eg. glicerol) y antibiticos para reducir la transferencia de patgeno (vase la
seccin 1.5.1). Los suplementos se protegen a menudo (eg. el cido ctrico,

101

TRIS) y contiene los elementos que estabilizan sistemas de la enzima y

neutralizan los productos txicos producidos por la esperma.
El plasma seminal proporciona un medio del transporte para la esperma y los
substratos metablicos para mantener la esperma viabilidad. Sin embargo,
algunos componentes del plasma seminal pueden impedir la direccin de la
esperma (colmo

la viscosidad), reduce actividad de la esperma, acelera

muerte de la esperma, reduce la concentracin de la esperma, obstaculiza

mezclarse la esperma con los suplementos o reacciona al contrario con los
suplementos. Mtodos que se pueden utilizar para quitar o modificar el plasma
seminal incluyen la centrifugacin, vortexing, nadan-para arriba tcnicas y la
adicin de enzimas.
Los objetivos en este captulo eran examinar la capacidad de diversos
suplementos del semen de proteger el semen enfriado y de observar los
efectos de la centrifugacin y de la agitacin rpida en actividad de la esperma.

4.2 Materiales y mtodos

4.2.1 Prolongar vida de la esperma:
adicin de suplementos El semen de la alpaca fue recogido a partir de 5
varones que usaban un sistema de pesos americano cabido dentro de un
mannequin segn lo descrito adentro Captulo 2.
Una seleccin de los suplementos comerciales del semen (tabla 4.1 y apndice
2) fue mezclada con el semen en

dilusiones de 1:1 hasta 4:1 en las

temperaturas que se extienden a partir del oC el 33, (temperatura del tubo de la

coleccin en el extremo de la eyaculacin) al oC 22 (temperatura ambiental). El
semen extendido entonces fue enfriado en un bao de agua al oC 4 segn lo
descrito en las secciones 4.2.2.1 y 4.3.2.1. Cuando sea de dos etapas la
extensin fue utilizada, la segunda fraccin fue agregada en el oC 4. Las
muestras extendidas del semen fueron recalentadas al oC 37 antes de la
esperma

la actividad era el usar determinado fase-pone en contraste la

102

microscopia (ampliacin de x 200; Olympus CX 41 microscopio, Pty Ltd de

Olympus Australia)

4.2.2 El enfriarse del semen extendido

4.2.2.1 El enfriarse de del semen extendido al oC 4
Cinco mtodos de refrescar el semen extendido en un tubo de la coleccin de
15 ml (tubo del halcn del poliestireno, Becton Dickson) fueron examinados:
1. A partir del oC el 33 a la temperatura ambiental
2. A partir del oC el 33 usando el tipo comercial I (transporte del
expedidor del semen del poliestireno del semen de Equipak Sistema,
Pty pacfico Ltd, Victoria del veterinario)
3. A partir del oC el 33 usando el tipo comercial II (expedidor vivo del
semen, Pty pacfico Ltd, Victoria del expedidor del semen del poliestireno
del veterinario)
4. A partir del oC el 33 en refrigerador 5. a partir de bao de agua de 18
oC en refrigerador despus de enviar al laboratorio en el tipo comercial
II. del expedidor del semen.

103

4.2.2.2 Transporte del semen de la alpaca del sitio de la coleccin al

laboratorio
Disean a los expedidores comerciales del semen del poliestireno (expedidor
vivo del semen, Pty pacfico Ltd, Victoria del veterinario) para mantener la
temperatura interior del expedidor en el oC 4 por varios das. Utilizaron a los
expedidores para transportar el semen entre los sitios de la coleccin y el
laboratorio. Los tubos de la coleccin que contenan el semen fueron envueltos
en algodn en el oC 33 despus colocados en el expedidor debajo de un
ladrillo congelado del hielo y de una hoja del poliestireno. La temperatura del
semen fue registrada dentro del expedidor sobre 4.5 das.
4.2.3 Retiro del plasma seminal
Veinte ejaculates recogido a partir de 2 varones de la alpaca estaban partidos y
seguido un-centrifugados o fueron centrifugados a las velocidades que varan a
partir de la 100-1000 g por 5 a 30 minutos. El mantenimiento en un cierto plazo
el motility progresivo delantero fue utilizado para comparar las muestras que
tenan y no haban sido centrifugadas.
4.2.4 Reduccin de viscosidad del semen
La agitacin mecnica rpida por vrtice (Snijders presionar-a-mezcla el
modelo 34524, servicios australianos del mezclador del vrtice del instrumento)
fue utilizada para mezclar el semen de la alpaca con el suplemento por 30
segundos.

4.3 Resultados
4.3.1 Prolongar vida de la esperma:
Adicin de suplementos El semen no diluido, crudo no sobrevivi por perodos
largos. Toda la esperma era inactiva en el plazo de aproximadamente 60
minutos despus de la coleccin cuando estaba sostenida entre el oC 25 y 33.
Los suplementos que contuvieron la yema de huevo y glicerol (suplemento rojo
de las ovejas, suplemento verde del camello, Triladyl y Biladyl A&B) permitieron
a ms esperma sobrevivir enfrindose para ms de largo. Triladyl (Minitub,
Alemania) provey de los resultados ms prometedores cuando 4:1 diluido

104

semen. Cincuenta por ciento de esperma exhibieron actividad activa, rpida,

progresiva 24 horas despus de la coleccin, que declin hasta el 45% en 48
horas (tabla 4.2). Los tres suplementos que no contuvieron ningn producto
animal (Andromed, Biociphos ms y Bioxcell) y los tres suplementos que
contenan la protena de leche, casena (suplemento de los bvidos, llano y
Tejas A&M de Kenney), con tal que los resultados decepcionantes y eran
fracasados en prolongar la esperanza de vida del semen guardada en el oC 4
en comparacin con Triladyl. El porcentaje de la esperma viva y de la
actividad de la esperma fue reducido mucho 24 horas despus de la coleccin,
de la extensin y de la dilusin.

105

4.3.2 El enfriarse del semen extendido

4.3.2.1 El enfriarse del semen extendido al 4C
Colocacin de una muestra del semen en un bao de agua en su temperatura
existente (eg. La temperatura del sistema de pesos americano, la temperatura
ambiente o la temperatura dentro del transporte de siguiente del expedidor
comercial del semen al laboratorio), siguieron por la colocacin del bao de
agua en un refrigerador proporcionaron un mtodo linear de enfriar el semen y
fueron acompaadas por la reduccin mnima en la actividad de la esperma
(cuadro 4.1). Llev generalmente 1.5 a 2 horas el semen desapasible de la
temperatura ambiente al oC 4. Los otros mtodos de enfriarse del semen eran
no lineares, miraron como demasiado rpido o mayor reduccin demasiado
lenta y exhibida en la actividad de la esperma (cuadro 4.1).
4.3.2.2Transporte

del semen de la alpaca del sitio de la coleccin al

laboratorio
El tipo comercial II (expedidor vivo del semen, Pty pacfico Ltd, Victoria del
expedidor del semen del poliestireno del veterinario) no redujo temperatura del
semen de la alpaca a 4oC (cuadro 4.2), as que sobre la llegada en el
laboratorio, tubos del semen fue colocado en un bao de agua en la misma
temperatura que el interior del envase de envo, entonces puesto en un
refrigerador para enfriar el semen a 4oC.

106

4.3.3 Retiro del plasma seminal

Las ventajas observadas de la centrifugacin del semen de la alpaca
incluyeron:

Concentracin del esperma en una pelotilla en el fondo del tubo;

proporcionando una ventaja permitiendo un aumento en nmeros de
la esperma por dosis del AI sin volumen de aumento de la dosis.

Capacidad de quitar plasma seminal del ejaculate.

Los problemas observados encontrados con la centrifugacin incluyeron:

Dificultad de quitar el plasma seminal de la pelotilla de la esperma

como la naturaleza viscosa del semen tendi para dibujar la pelotilla
de la esperma para arriba dentro de la pipeta simultneamente con el
plasma seminal.

La dificultad de la determinacin de la velocidad ptima y la poca de

la centrifugacin para cada uno ejaculate.

Era posible determinar una velocidad y el tiempo que satisfizo a

varones individuales por ensayo y error usando algunos diferentes
ejaculates. La variacin en viscosidad del semen entre los 2 varones
usados en el ensayo fue marcada (hilo de rosca de 7 milmetros
contra el hilo de rosca de 2 milmetros) y esto fue relacionada con la
facilidad con la cual la centrifugacin poda concentrar la esperma en
107

el fondo del tubo. Un semen ms viscoso requerido ms de largo

centrifugacin a una velocidad ms alta.

La temperatura del semen que controlaba durante la centrifugacin

en una centrifugadora no frigorificada no era posible. El semen que
mantiene en una temperatura constante durante la direccin realza
probablemente supervivencia de la esperma.

No fue determinado si la centrifugacin caus dao a la estructura

celular de la esperma (eg. acrosome).

La esperma centrifugada fue cogida para arriba en ruina despus de

hacer girar.

No fue determinado si el de gran capacidad del suplemento agregado

a las muestras viscosas antes de la centrifugacin era perjudicial a la
supervivencia de la esperma. El semen de Un centrifuged apareca
mantener una actividad mejor y los por ciento viven comparado con
la esperma centrifugada.

4.3.4 Reduccin de viscosidad del semen

La agitacin mecnica usando un vrtice por 30 segundos para mezclar el
semen de la alpaca con el suplemento dio lugar a muerte de toda la esperma.

4.4 Discusin
Los suplementos numerosos fueron examinados en un intento por prolongar la
almacenaje-vida del semen de la alpaca enfriada al

4C. La seleccin de

suplementos fue basada en uso previamente acertado en los camelids o la otra

especie domstica. Cuando el porcentaje de la actividad de la esperma era
bajo despus de 24 horas en varios ejaculates con el mismo suplemento,
ensayos cesados y un suplemento nuevo seleccionado. Muchos suplementos
yema de huevo-basados huevo fueron examinados y los resultados indicaron
que ese Triladyl (Minitub, Alemania) provey de los resultados ms
prometedores cuando 4:1 diluido semen. Cincuenta por ciento de esperma
exhibieron actividad rpida, progresiva 24 horas despus de la coleccin, que
declin hasta el 45% en 48 horas. Esto que encuentra conviene con otros
trabajadores (bravo 2002). El uso de la casena de la leche o los suplementos

108

a base de protenas vegetales era menos eficaces en la actividad de la

esperma que mantena.
La adicin del glicerol apareca realzar supervivencia de la esperma en semen
enfriado. La viabilidad adecuada de la esperma se debe mantener durante el
semen que dirige y que procesa para alcanzar embarazos. La longevidad de la
viabilidad de la esperma es mejorada probablemente mediante almacenaje en
el oC 4 a 5 comparado con temperaturas ms altas debido a la actividad
metablica reducida (Simson 2001). En caballos, el refrescarse rpido del
semen a partir del oC el 37 al oC 20 no afecta al contrario motility de la
esperma, sin embargo, las tarifas que se refrescan a partir del oC el 20 al oC 48 son ms crticas. La recomendacin actual en caballos es refrescar el semen
en un ndice del oC 0.5 a 1.0 por el minuto para maximizar el motility (Simson
2001). La colocacin inmediata del semen extendido en un bao de agua de la
temperatura comparable al semen, seguido por la colocacin en un
refrigerador, permiti una declinacin linear en temperatura al oC 4 sobre 1.5 a
2 horas en el proyecto actual.
La pregunta si o el plasma no seminal debe ser quitado del ejaculate es difcil a
contestar. Las ventajas pueden incluir quitar los efectos deletreos del plasma
seminal, realzando mezclarse con el suplemento y concentrar la esperma. Las
desventajas podran incluir dao a la esperma (eg. daos acrosome durante la
centrifugacin), la reduccin en actividad de la esperma y el retiro del plasma
seminal viscosa que puede esperma de la descompostura de mquina del `' y
reducir gastos energticos hasta que la esperma incorpora la zona reproductiva
femenina. En el proyecto actual, las diversas duraciones y velocidades de la
centrifugacin fueron examinadas sin ningn realce evidente en la calidad de la
preservacin del semen. Los varios trabajadores se han esforzado para reducir
la viscosidad del semen del camelid usando las enzimas (Callo y otros. 1999,
Bravo y otros. 2000a, b) o agitacin mecnica (un Niasari-Naslaji,
comunicacin personal) para permitir una direccin y una extensin ms fciles
del semen. En el ensayo actual, la agitacin mecnica usando un vrtice por 30
segundos para mezclar el semen de la alpaca con el suplemento dio lugar a
muerte de toda la esperma. Los efectos que las enzimas tienen en el semen de
109

la alpaca no se han estudiado detalladamente. La influencia del gel en semen

del ser humano y del semental en calidad y resistencia de la esperma al
proceso no se ha estudiado detalladamente. Los autores del proyecto actual
son de la opinin que la fraccin del gel del semen de la alpaca podra realzar
supervivencia de la esperma reduciendo tarifa metablica de la esperma y
eligi trabajar con el presente del gel.
El trabajo adicional se requiere determinar el sistema ptimo para el semen que
extiende y que se enfra. La influencia de la poca de la adicin del suplemento
(en el sistema de pesos americano o la poste-coleccin) se trata parcialmente
en el captulo siguiente. El grado de dilusin del semen, la temperatura del
almacenaje (temperatura ambiente contra la refrigeracin) y la longitud del
almacenaje tambin necesitan la atencin.

110

5. CONGELANDO Y SEMEN DE LA ALPACA EL

DESHELAR
5.0

Inmediatos

sumarios

poste-deshielan

la

aproximadamente 20 a los 40% cuando cualquiera

actividad

de

la

esperma

eran

el almacenador intermediario del

camello (IMV International Corporation, los E.E.U.U.) o el Biladyl verde/claro A/B (Minitub,
Alemania) fue utilizada como suplemento para el semen que congelaba. Todava hay
mucho trabajo que necesita ser hecho para congelar el semen de la alpaca de una manera
acertada.

5.1 Introduccin
Las ventajas de poder congelar el semen de la alpaca incluyen la opcin del
almacenamiento de larga duracin y

flexibilidad creciente del uso. Sin

embargo, el almacenaje es ms costoso que para el semen enfriado y l es

probable que nmeros ms altos de la esperma por dosis sean requerido
debido a una fertilidad ms baja despus del cryopreservation, como
observado en el otro ganado domstico (Watson 2000). Generalmente, 4050% de esperma no sobreviven

el cryopreservation y los que sobreviven

demostracin deterioraron la funcin en comparacin con esperma fresca

incluso con los protocolos optimizados (Watson 2000).
Los protocolos que congelan deben maximizar el nmero de la esperma viva
con el poste funcional de la capacidad que deshiela para optimizar tarifas de
fertilidad. El desarrollo de la tecnologa que congela en alpacas se basa en la
informacin derivada de los xitos alcanzados en la otra especie. Sin embargo,
variaciones en la fisiologa y la bioqumica de la esperma y la anatoma y la
fisiologa del transporte de la esperma en el medio reproductivo femenino de la
zona que simple la extrapolacin de la tecnologa que congela acertada a
partir de una especie a otra no es posible (Holt 2000).
El semen necesita ser refrescado cuidadosamente entre el oC 15 y 5 antes del
cryopreservation como temperatura

los cambios inducen tensiones en las

membranas de la clula (Watson 2000). Las membranas del plasma de la

esperma contienen un arsenal de los phospholipids, de las protenas y de los
111

esteroles que responden a los cambios de temperatura por alteraciones en su

estado fsico de la fase (Holt 2000). La esperma puede experimentar
transiciones de la fase del lpido dentro de la gama del oC 17 y 36 (dependiente
de la especie), no obstante no se adaptan para alterar el contenido del lpido en
temperaturas ms bajas. Un cambio importante de la fase ocurre entre el oC 15
y 5 (Watson 2000). El choque fro del `' describe el dao debido a refrescarse
rpido sobre 0 oC, e implica la interrupcin fsica de la membrana del plasma
(Holt 2000). Hay dos fuentes de lesin que pueden daar las clulas durante
congelar. El primer es la formacin de los cristales de hielo intracelulares que
pueden interrumpir arquitectura intracelular. Este dao es generalmente un
resultado de congelar rpido. La segunda fuente de lesin es las interacciones
del agua-solute que ocurren durante la cristalizacin del hielo de la solucin
que congela, generalmente durante congelar lento. Cuando los cristales de
hielo forman se hacen del agua pura tan all son un aumento de
acompaamiento de la presin osmtica en el no congelado fraccionan
(Watson 2000).
Cuanto ms baja es la temperatura, ms pequea es la fraccin no congelada
y ms alto fuerza osmtica de la solucin restante. Mientras que la solucin
que congela llega a ser hyperosmotic, el agua se retira por dentro de las
clulas, causando la contraccin. El deshelar implica una revocacin de estos
efectos y la afluencia del agua puede causar la interrupcin de la membrana de
la clula (Holt 2000).
El ndice de congelacin ptimo por lo tanto es un compromiso entre congelar
rpido y lento para reducir al mnimo efectos de estas dos fuentes de lesin.
Las clulas de la esperma se congelan generalmente sobre la gama del oC 1560 por minuto mientras que estas tarifas aparecen proporcionar las mejores
tarifas de la supervivencia (Watson 2000).
Hay diversos grupos de compuestos cryoprotectant. Glicerol, glicol de
etileno, DMSO y el metanol es ejemplos de penetrar cryoprotectants porque
impregnan en el citoplasma de la clula. Presionando el punto de congelacin,
estos compuestos pueden ayudar al revs a los efectos del hyperosmolarity de
112

la solucin durante congelar. Es importante observar que el glicerol es tambin

txico a la esperma y afectar los ndices de la concentracin y de congelacin
usados (Holt 2000, Watson 2000). Hay variacin marcada de la especie en
tolerancia del glicerol (eg. los marsupiales toleran 10 20% gliceroles,
comparados con los verracos el 3%;

Johnston y otros. 1993, Holt 2000)

posiblemente debido a las diferencias gentico resueltas en membrana

caractersticas. La adicin de cryoprotectants tales como glicerol y de DMSO al
semen aplica la tensin osmtica a la membrana del plasma de la esperma que
es reducida por la adicin y el retiro stepwise del

cryoprotectant (Watson

2000).
Un segundo grupo de cryoprotectants no impregna las clulas y no incluye las
azcares (eg. raffinose y lactosa), polmeros (eg. pyrollidone polivinilo) y
compuestos amphipathic (eg. el betaine, el glutamine y el proline del glycine) y
pueden necesitar ser combinado con el glicerol para el mejor efecto. Las
azcares pueden alterar efectos de la solucin durante congelar mientras que
los compuestos amphipathic podran obrar recprocamente con los lpidos y las
protenas (Holt 2000) de la membrana.
La mayora de los protocolos de la preservacin del semen utilizan el glicerol,
que primero fue utilizado hace ms de 50 aos (Polge y otros. 1949). La yema
de huevo se agrega a los protocolos del cryopreservation como protectant
contra choque fro. Una lipoprotena de la baja densidad en la yema de huevo
poda modular el comportamiento de la transicin de la fase de las membranas
de la clula de la esperma por una accin desconocida.
La adicin del surfactant a los diluyentes de la yema de huevo se ha observado
para mejorar el motility de la esperma del postthaw, la integridad acrosomal, la
supervivencia y la fertilidad (Holt 2000). La adicin de un almacenador
intermediario puede ser ventajosa mientras que los componentes tales como
yema de huevo pueden afectar la solucin pH. Citrato de sodio, tris

(tris

(hidroximetlicos) aminomethan) o almacenadores intermediarios zwitterionic

tales como TES (Ntris (

) cido sulphonic hidroximetlico de methyl-2-

aminoethane). Tris titulado con TES (medios de PRUEBA) tiene xito amplio
113

de muchas especies salvajes (Holt 2000). Los objetivos de este captulo eran
desarrollar los mtodos de extender el semen en un diluyente conveniente,
congelando el semen extendido y la obtencin aceptable poste-deshiela ndices
de actividad de la esperma.
5.2 Materiales y mtodos
5.2.1 Coleccin del semen
El semen fue recogido a partir de 8 alpacas masculinos usando un
sistema de pesos americano cabido dentro de un mannequin segn lo
descrito adentro Captulo 2.
5.2.2 Extensin del semen
El semen fue recogido para congelar con o sin el suplemento del semen
colocado dentro del cono del sistema de pesos americano.

Los

suplementos acondicionados para el comercio (tabla 5.1 y apndice 2)

fueron comparados dentro ejaculates y entre diversos varones.
La extensin de un solo paso del semen implic la adicin del
suplemento al sistema de pesos americano antes de la eyaculacin
comenzado y/o al ejaculate inmediatamente despus de la eyaculacin
haba cesado. El extendidos ejaculate fueron colocados en un bao de
agua de 37 oC que fue enfriado en un refrigerador al oC 4 durante 90
minutos (cuadro 5.1).
La extensin de dos etapas del semen implic la adicin del nonglycerolated la porcin del suplemento al sistema de pesos americano
antes de que la eyaculacin comenzara y/o al ejaculate inmediatamente
despus de la eyaculacin estaba

terminado. El parcialmente

extendidos ejaculate entonces fueron colocados en un bao de agua de

37 oC que fue enfriado en un refrigerador al oC 4 durante 90 minutos. El
semen parcial-extendido entonces fue extendido completamente en 4
que el oC por gota a gota la adicin del glycerolated la porcin del
suplemento en un cociente de 1:1 con non-glycerolated la porcin. El
equilibrio del semen y glycerolated el suplemento fue permitido para

114

ocurrir sobre 15-30 minutos. La concentracin final del glicerol era el

aproximadamente 7% en todos los casos.

115

5.2.3 El congelar del semen

5.2.3.1 Que congela en el Francs-tipo paja del plstico
Las muestras enfriadas, extendidas del semen fueron cargadas
manualmente usando una jeringuilla en la paja plstica de 0.25, 0.5 o 2
ml Frenchtype (Pty pacfico Ltd, Melbourne, Australia del veterinario). La
paja ms pequea fue sellada usando el polvo del PVC y la paja de 2 ml
fue sellada usando bolas del lacre del metal. El cargamento y el lacre
los procedimientos ocurrieron en un refrigerador del tapa-cargamento
(Waeco, Alemania; Cuadro 5.2) para mantener la esperma en el oC 4 y
para reducir al mnimo variaciones de la temperatura durante el
cargamento.
La paja semen-llenada fue cargada sobre un estante de alambre dentro
del refrigerador. El estante entonces fue colocado en una caja plstica
que contena el nitrgeno lquido de 2 centmetros y su vapor en el fondo
y una tapa puso encendido la tapa (cuadro 5.3). El estante de alambre
fue colocado en las alturas que diferenciaban (gama 2-25 centmetro)
sobre la superficie del nitrgeno lquido por diversos perodos (5-30
minutos) antes de hundir la paja plstica en el nitrgeno lquido.

116

5.2.3.2 que congela el semen en pelotillas

El semen enfriado fue cado en las depresiones pequeas hechas en
hielo seco para formar pelotillas del semen de 0.25-0.5 ml. Las pelotillas
fueron quitadas del hielo seco 3-5 minutos despus de congelar y
almacenadas en los cubiletes plsticos (Pty pacfico Ltd, Melbourne,
Australia del veterinario) en nitrgeno lquido.

Cuadro 5.2. el refrigerador del Tapa-cargamento cargaba el semen en el Francstipo paja plstica en el oC 4.

Cuadro 5.3. Caja plstica (con la tapa quitada) que contiene el nitrgeno lquido
de 2 centmetros en el fondo, y un estante de alambre que lleva a cabo 0.5 ml de
Francs-tipo paja plstica en una altura de 10 centmetros sobre la superficie del
nitrgeno lquido.

117

5.2.4 Protocolos el deshelar del semen

El semen congelado en paja plstica fue deshelado en

un bao de

agua de 37 C por 60 segundos. El semen congelado en pelotillas fue

colocado en un bolso de polietileno estril y sumergido en un bao de
agua de 37 oC hasta que la pelotilla haba deshelado.
5.2.5 Poste-deshielan la actividad de la esperma
Una gota del semen deshelado fue puesta sobre una diapositiva de
cristal precalentada en 37C y una tira fue colocada en tapa. El
porcentaje de la esperma activa era estimado por la microscopia del
contraste de la fase (Pty Ltd de Olympus CX41, de Olympus Australia)
en la ampliacin de x 200.

5.3 Resultados
5.3.1 Extensin del semen
La adicin de 1 ml de suplemento dentro del cono en el nivel de la cerviz
artificial apareca producir una supervivencia mejor de la esperma comparada
sin la adicin del suplemento pues haba contacto reducido entre la esperma y
las superficies del sistema de pesos americano y la mayor proteccin de la
esperma contra choque fro el sistema de pesos americano fue quitado una vez
del mannequin y de la manta elctrica.
El mtodo de opcin para la extensin del semen en el proyecto actual era una
colocacin que consista en del procedimiento de 2 pasos de 1 ml de
almacenador intermediario verde del camello (IMV International Corporation,
los E.E.U.U.) o de 1 ml de Biladyl A (Minitub, Alemania) en el cono plstico del
sistema de pesos americano antes de eyaculacin. Ms suplemento fue
agregado despus de la eyaculacin cesada de modo que hubiera
aproximadamente un cociente de 1:1 al lado del volumen del semen y del
suplemento.

118

Despus de enfriarse por 90 minutos al oC 4, glycerolated el almacenador

intermediario claro del camello o Biladyl B, respectivamente, fue agregado
lentamente al semen enfriado en un coeficiente de 1:1 (v/v). La concentracin
final de la esperma en semen extendido era por lo tanto un cuarto la
concentracin del semen crudo.
5.3.2 El congelar del semen
El Francs-tipo paja plstica con 0.5 ml de capacidad fue utilizado lo ms con
xito posible para congelar el semen extendido.
Las condiciones que congelaban ptimas eran colocar la paja 10 centmetros
sobre la superficie del nitrgeno lquido por 30 minutos.
5.3.3 Poste-deshielan la actividad de la esperma
Inmediato poste-deshelar la actividad de la esperma estaba entre 10 y el 40%
cuando o el almacenador intermediario verde/claro del camello (IMV
International Corporation, los E.E.U.U.) o Biladyl A/B (Minitub, Alemania) fue
utilizado como suplemento para el semen que congelaba (tabla 5.2). El resto de
los suplementos enumerados en la tabla 5.1 producida poste-deshielan
actividades de 0 a el 10%. La paja del semen de ejaculates con poste-deshiela
actividad que los 20% mayor que fueron almacenados en nitrgeno lquido
hasta que un nmero conveniente de la paja estaba disponible para el AI al
grupo de hembras. El semen congelado en pelotillas en hielo seco exhibi el
aproximadamente 10% menos actividad que la esperma congelada en paja
plstica cuando el semen era de iguales ejaculate con la misma extensin y
protocolo que se enfra.
Tabla 5.2. Inmediatos malos poste-deshielan la actividad del semen ampliada con el
almacenador intermediario verde y claro del camello (IMV International Corporation, los
E.E.U.U.) o Biladyl A y B (Minitub, Alemania).

119

5.4 Discusin
Para maximizar los nmeros de la esperma normal, viva, activa presente
despus de deshelar el semen congelado, es necesario optimizar cada paso en
los procesos de la coleccin, extensin, congelando y deshelando del semen.
Las fluctuaciones en temperatura ambiental y temperatura del sistema de
pesos americano deben ser mimimised durante

la coleccin del semen,

adicin de suplementos debe ocurrir lentamente para permitir mezclarse

adecuado con semen, el refrescarse y el congelar del semen extendido se
deben realizar en una manera controlada para reducir al mnimo la formacin
fra del cristal del choque y de hielo en clulas de la esperma. La esperma debe
conservar la capacidad de alcanzar y de penetrar el oocyte, lazo a y de
penetrar el pellucida del zona, de experimentar la reaccin acrosome, de
fundirse al oolemma y de permitir que la transferencia del chromatin para
fertilizar el huevo. El daos en cualquier paso haran la esperma estril (Holt
2000).
La esperma refrescada y calentada de nuevo se comporta como si fueran
habilitados en una cierta especie (Watson 2000). Una minora de esperma
exhibe la progresin delantera vigorosa y la demostracin de la mayora al
grado variable de debilitacin que puede contribuir a la fertilidad pobre durante
AI (Watson 2000).
Poste-deshelar la actividad del semen de la alpaca fue utilizado como indicador
del xito de congelar en el proyecto actual. Estudios anteriores han demostrado
que poste-deshelar la actividad de la alpaca y semen de la llama se extiende a
partir del 15 hasta el 60% (Bravo y otros. 1996c, Valdivia y otros. 1999, Von
Baer y otros. 1999, Bravo y otros. 2000a; Tabla 1.12) y un estudio reciente en
los camellos considerados el congelar a ser acertado cuando haba por lo
menos 20% espermas progresivamente motile despus de deshelar (Deen y
otros. 2003). Por lo tanto, en la paja actual del estudio del semen de ejaculates
con poste-deshielan actividad que los 20% mayor que fueron almacenados en
nitrgeno lquido hasta que un nmero conveniente de la paja estaba
disponible para el AI al grupo de hembras.

120

El semen almacenado como pelotillas no fue utilizado para inseminar a

hembras debido a el ms pobre poste-deshiela actividad.Una ventaja de
congelar el semen en una forma granulada es que permite el mojado-deshelar
o colocacin de pelotillas en una solucin el deshelar formulada para el
propsito. Esto permite que el semen deshiele mientras que simultneamente
reduccin de la concentracin cryoprotectant. Una desventaja del semen que
congela en pelotillas es la inhabilidad de identificar pelotillas individuales.
Las pelotillas necesitan ser almacenadas en un cubilete etiquetado. La
naturaleza heterognea de ejaculates dentro y entre animales y las especies se
ha observado para afectar la proporcin de esperma que sobreviven
cryopreservation probablemente debido a la existencia de la resistencia
variable a la tensin osmtica entre las clulas (Watson 2000). La naturaleza
viscosa del semen de la alpaca imposibilita incluso mezclarse del semen con el
suplemento, asegura la heterogeneidad marcada de la solucin para ser
cryopreserved y puede explicar a pobres poste-deshiela tarifas del motility en
los camelids comparados con especie con menos semen viscoso.
Otros factores que pueden influenciar el xito de la esperma de la alpaca que
congela incluyen temperatura ambiental en el da de la coleccin, tiempo entre
la coleccin de ejaculate y la colocacin en un bao de agua, intervalo en
medio ejaculate colecciones. El gravamen apropiado de la viabilidad de la
esperma y de la capacidad de la fertilizacin de la esperma despus de
congelar y de deshelar todava se est aclarando en los ganados (RodriguezMartinez y otros. 2001). Las pruebas ines vitro disponibles incluyen IVF,
evaluacin de los patrones del motility de la esperma, nadan-para arriba la
separacin de la esperma, estado del capacitation, inducido

reacciones

acrosome y anlisis esperma-que atan del pellucida del zona. Estos mtodos
de la evaluacin del semen requieren habilidad en el uso del equipo costoso y
no eran considerados ms lejos en este estudio.
Hay una necesidad de desarrollar un mtodo simple, exacto de predecir
fertilidad

del

campo

del

semen

congelado-deshelado

en

camelids.
121

Histricamente, poste-deshelar la prueba de la incubacin se ha utilizado

determinar el semen despus de deshelar. Este mtodo es desperdiciador de
tiempo e implica la incubacin del semen en un bao de agua en a
temperatura constante (30, oC 37 o 38) por cierto tiempo (2 a 6 horas). La
evaluacin morfolgica de cryopreserved el toro que la esperma proporciona la
informacin en la capacidad de la esperma de sobrevivir congelando y
deshelando (Gravance y otros. 1998). El porcentaje de la esperma morfolgico
normal poste-deshiela inmediatamente

los correlativos con el concepto

subsecuente clasifican en los ganados (Phillips y otros. 2001).

Este procedimiento simple es altamente repetible a travs de la paja y de las
hornadas dentro de toros. Este mtodo puede ser aplicable al semen de la
alpaca y debe ser investigado cuando se ha desarrollado un suplemento
conveniente y un ensayo de acoplamiento grande se puede emprender para
comparar tarifas del embarazo con poste-deshiela morfologa del semen.
La duracin corta del proyecto actual imposibilit otras investigaciones en la
extensin y el cryopreservation del semen. Hay muchos aspectos incluyendo
los cuales necesitar ser investigado ms lejos:

Que define los varones que tienen semen que congele constantemente
bien y la variacin que existe entre varones a este respecto

Definir del ejaculates antes de procesar que tenga buen freezability

El maquillaje bioqumico de las secreciones que contribuyen a la

viscosidad del semen

Las ventajas relativas de agregar el surfactant/otros compuestos al

suplemento para reducir espumejear del semen en el sistema de pesos
americano, y para facilitar una interaccin ms eficiente con las
membranas del plasma de la esperma (el IE permite mejor mezclarse
del semen con el suplemento)

Tipos de suplemento ms adecuados a los alpacas.

La seleccin de una protena con excepcin de la yema de huevo a
proteger contra fro-da una sacudida elctrica.

122

Adicin de almacenador intermediario para controlar fluctuaciones de la

yema de huevo y la absorcin del bixido de carbono.

Sincronizacin de la adicin del glicerol porcentaje final del glicerol.

El semen extendido.

Tiempo del equilibrio del glicerol y del semen antes de congelar

Si hay una necesidad de diluir la concentracin del glicerol despus de

deshelar para reducir sus efectos txicos sobre esperma.

El uso de cryoprotectants con excepcin del glicerol e.g. DMSO, glicol

de etileno, no-impregnando compuestos semen.

Que congela en paja/pelotillas de diversos volmenes.

Duracin de enfriarse y de congelar.

Altura de congelar sobre el nitrgeno lquido

Temperatura y duracin el deshelar

Dado que la opcin de cryoprotectant se parece haber sido una cuestin de

ensayo y de error en casi todas las investigaciones (Holt 2000),
necesidades de mucho todava trabajo de ser hecho para perfeccionar
congelar del semen de la alpaca.

123

6. INSEMINACIN ARTIFICIAL DE ALPACAS

6.0 La ovulacin sumaria fue inducida con xito entre 24 y 30 horas despus de
intramuscular inyeccin del buserelin. La deposicin de Transcervical del semen en la
extremidad del cuerno uterino ipsilateral al ovario que llevaba el folculo dominante
demostr ser una tcnica simple y eficiente para inseminacin artificial. No se alcanz
ningunos embarazos usando el AI transcervical, intrauterino de

semen enfriado o

congelado-deshelado.

6.1 Introduccin
La poca ptima del acoplamiento aparecera ser 6 a 8 das despus de la
aparicin de la onda nueva durante el atrasado crecimiento o fase madura
temprana del crecimiento dominante del folculo (Adams y otros. 1989, Bravo y
otros. 1991, Sumar y otros. 1993, Vaughan 2001). ste es el tiempo que los
folculos estn considerados muy probablemente al ovulate un oocyte
considerado capaz de la fertilizacin. Se ha demostrado en la investigacin
anterior que el crecimiento folicular es similar a partir del da 0 al da 10
despus de la aparicin de la onda nueva, sin importar subsecuente

el

intervalo del interwave en alpacas, con una mayora de folculos que crecen o
que mantienen tamao durante los primeros 8 das despus de la aparicin
(Vaughan 2001) y de ese embarazo se asocia al acoplamiento en presencia de
un folculo oestrogenic en los camelids (Skidmore y otros. 1996, Chaves y
otros. 2002, Vaughan 2001).
Los captulos anteriores precisaron mtodos de coleccin, de caracterizacin y
de preservacin del semen de la alpaca. Los objetivos en este captulo eran
combinar los resultados de esos experimentos con el conocimiento de la hora
de acoplamiento ptima de inseminar artificial a hembras para alcanzar
embarazos.

6.2 Materiales y mtodos

6.2.1 Ultrasonography
Refrenaron a las hembras en recumbency del sternal en un cajn purpose-built
(Vaughan 2001). Ultrasonography transrectal los examinaron usando un Aloka
124

SSD-500 con arsenal linear de 7.5 megaciclos transductor (Aloka Co. Japn)
para permitir la seleccin de animales con un folculo dominante nuevoemergente con un dimetro de 7 a 10 milmetros, 6 a 8 das despus de la
aparicin de la onda nueva. Los ovarios de cada hembra fueron examinados
por ultrasonography transrectal a la hora del AI. Siete das despus de la
induccin de la ovulacin, el ultrasonography fue utilizado para identificar la
presencia de un luteum de la recopilacin en el mismo ovario que haba
sostenido previamente el folculo dominante, para confirmar la ovulacin.
Las hembras que tenan ovulated fueron examinadas para el embarazo por
ultrasonido otra vez aproximadamente 20 das despus del AI.
6.2.2 Induccin de la ovulacin
Ocho microgramos del buserelin (2 ml Receptal, Pty Ltd del veterinario de
Hoechst Roussel) fueron inyectados para inducir intramuscular la ovulacin.
6.2.3 Preservacin del semen
6.2.3.1 enfri el semen
Triladyl (Minitub, Alemania) prob el suplemento ms eficaz para el semen
enfriado como la actividad de la esperma era el aproximadamente 45% en
24 horas (vase el captulo 4), fue seleccionado tan como el suplemento
para el ensayo enfriado del AI del semen. El semen fue recogido de un
varn (captulo 2) extendido en Triladyl y sostenido en el oC 4 para 24
horas (vase el captulo 4).
El semen enfriado fue dibujado de un tube del halcn (Becton Dickinson)
dentro de un Francs-tipo paja de 0.5 ml entonces cargada en un arma de
la inseminacin de 0.5 ml (IMV arma del AI, IMV International Corporation;
El cuadro 6.1) con el extremo del enchufe del algodn de la paja insert
primero. Una envoltura (Universal AI Sheath, IMV International Corporation)
entonces fue colocada sobre el eje entero del arma del AI para sostener la
paja dentro del arma.
Inseminaron a ocho hembras 24 horas despus de la coleccin del semen.
125

6.2.3.2 Congelado-deshel el semen

El almacenador intermediario verde/claro del camello (IMV, los E.E.U.U.) y
Biladyl A&B (Minitub, Alemania) fueron utilizados para extender

semen

antes de congelar y del almacenaje en el nitrgeno lquido (captulo 5). la

esperma Congelado-deshelada exhibi la actividad de 20 a del 40% (vase
el captulo 5).
Despus de deshelar el semen en un bao de agua de 37 oC por 60
segundos, cada Francs-tipo paja de 0.5 ml fue secado a fondo con la toalla
de papel. Un centmetro de la paja, incluyendo el enchufe del PVC, fue
cortado, entonces la paja fue cargado en un arma de la inseminacin de 0.5
ml (IMV arma del AI, IMV International Corporation; El cuadro 6.1) con el
extremo del enchufe del algodn de la paja insert primero. Una envoltura
(Universal AI Sheath, IMV International Corporation) entonces fue colocada
sobre el eje entero del arma del AI para sostener la paja dentro del arma.
Inseminaron a nueve hembras con el semen que que haba sido extendido y
congelado en el buffer verde/claro del camello (IMV, los E.E.U.U.) e
inseminaron a siete hembras con el semen que haba sido extendido y
congelado en Biladyl (Minitub, Alemania).
6.2.4 Tcnica de la inseminacin
Refrenaron a la hembra seleccionada en recumbency del sternal. La cola fue
sostenida apartada y el perino fue limpiado con la toalla de papel y el alcohol.
Una mano pequea, gloved, lubricada fue puesta en el recto y utilizada para
estabilizar la cerviz. El extremo del arma del AI fue pasado a travs de la vulva,
de la vagina y de la cerviz en el cuerno uterino ipsilateral al ovario que contena
el folculo dominante. Cuando el arma fue colocado en la extremidad del cuerno
uterino, el mbolo en el arma del AI fue empujado para depositar el semen de
la paja en el tero. El arma del AI entonces fue retirado, el perino limpiado
limpio con la toalla de papel y la hembra lanzada.
La inseminacin artificial fue realizada 24 horas (y 30 horas en que suplemento
verde/claro el usar del camello) despus de la induccin de la ovulacin,
aproximadamente 4 a 6 horas antes de la poca predicha de la ovulacin.
126

La inseminacin artificial fue realizada despus de las pautas precisada en el

cdigo de la prctica australiano para el cuidado y el uso de los animales para
los propsitos cientficos 1997 y recibi la aprobacin del comit australiano del
tica del animal de laboratorio de la salud animal.

6.3 Resultados
Las nueve hembras que recibieron dos inseminaciones no tenan ovulated en
24 horas despus de la induccin de la ovulacin, pero tenan todas ovulated
por 30 horas despus de la induccin de la ovulacin. Demostraciones de la
tabla 6.1 que los resultados de usar de los ensayos de la inseminacin artificial enfriaron
y que congelado-deshelaron el semen. No se obtuvo ningunos embarazos usando el
semen enfriado o congelado inseminado en 24 a 30 horas despus de la induccin de la
ovulacin.

127

6.4 Discusin
La ovulacin fue inducida con xito entre 24 y 30 horas despus de la inyeccin
intramuscular de

buserelin. Estos resultados son constantes con otros

trabajadores (vase la seccin 1.5.5; Bourke y otros. 1992b, 1995a, Huanca y

otros. 2001a). Deposicin de Transcervical del semen en la extremidad del
cuerno uterino

ipsilateral al ovario que llevaba el folculo dominante

demostrado ser una tcnica simple y eficiente para el AI, sin embargo, no se
alcanz ningunos embarazos usando el semen enfriado o congeladodeshelado en la corriente proyecto.
La ovulacin y la inseminacin sncronas se requiere para alcanzar altas tarifas
del concepto. En una cierta especie, las altas tarifas del concepto ocurren
cuando la esperma est en el oviducto momentos antes de la ovulacin (Hafez
1993). La fertilidad con cryopreserved el semen en ganado domstico puede
ser alta proporcionando la inseminacin se hace 4 horas antes de la ovulacin
(Watson 2000). La fertilidad con semen fresco se mantiene sobre un perodo
mucho ms largo. Si la esperma se coloca en la zona demasiado temprano,
perdern viabilidad antes de la ovulacin, y si la esperma se coloca en la zona
despus de la ovulacin, el ovum pueden perder viabilidad antes de que la
fertilizacin pueda ocurrir (Hafez 1993).

128

La inseminacin artificial fue realizada 24 horas despus de la induccin de la

ovulacin, aproximadamente 4 a 6 horas antes de la poca predicha de la
ovulacin. A un estudio temprano de la alpaca, la parte ms elevada de ova
fertilizado dio lugar cuando la inseminacin artificial intrauterina con semen
fresco era 35 a 45 horas despus de que la induccin de la ovulacin que
usaba cualquiera a vasectomised el hCG masculino o intramuscular (Calderon
y otros. 1968). Ms recientemente, el AI 24-36 horas despus de la induccin
de la ovulacin en alpacas ha dado lugar a tarifas aceptables del concepto con
el semen fresco y congelado (tabla 1.13; Pacheco 1996, Quispe 1996, Apaza y
otros. 1999).
Bravo y otros. (1997a), usar el semen fresco, no diluido compar las tcnicas
de transcervical y AI laparoscopic en alpacas y tarifas similares alcanzadas del
concepto. Transcervical AI aparecera ser un procedimiento ms simple,
menos-invasor, no obstante tiene limitaciones de la capacidad rectal/plvica de
permitir estabilizacin manual transrectal de la cerviz al pasar la pipeta del AI a
travs de la cerviz, y la dificultad de localizar el OS externo de la cerviz durante
este procedimiento. El bravo (2002) describe la necesidad de la paciencia y de
la destreza de pasar una pipeta a travs de la cerviz en el tero. Laparoscopic
AI requiere el alojamiento de la hembra en un cajn, la sedacin con o sin un
anestsico general, y el equipo laparoscopic costoso.
La carencia de embarazos despus de la inseminacin de aproximadamente
300 millones de siguientes de la esperma la extensin y el congelar en Biladyl
A/B, indica que otros estudios estn requeridos para aumentar el porcentaje de
la esperma activa poste-deshielan, para refinar la sincronizacin del AI en lo
referente a la ovulacin, para determinar los nmeros de la esperma (enfriada y
congelada) requeridos para el concepto y el mtodo ptimo de la entrega de la
esperma en la zona reproductiva femenina para asegurar el alto concepto
clasifica. Mientras que otros trabajadores han obtenido embarazos usando el
semen fresco y enfriado extendido, han alcanzado pocos embarazos usando el
semen congelado-deshelado (vase la tabla 1.13). Bravo y otros (2000)
divulgaron uno de los mejores resultados hasta ahora con semen deshelado
congelado con 5 jvenes nacidos a 19 hembras inseminadas. Semen

las
129

caractersticas poste-deshielan en ese estudio eran similares a sas divulgadas

aqu. Otros trabajadores han tenido poco xito en trminos de embarazos con
semen enfriado o congelado en los alpacas o las llamas (Aller 2001). Algunos
resultados al parecer buenos se divulgan en la literatura en diversa especie del
camelid (tabla 1.13). Los detalles de las tcnicas exactas usadas estn faltando
a veces. Los autores divulgan raramente resultados negativos y as que el
cuadro total de la fertilidad con semen congelado-deshelado en camelids sigue
siendo confuso.
Hay una relacin significativa entre el nmero de la esperma por la dosis del
semen y la fertilidad (Rodriguez Martinez y otros. 2001) pero puede ser
posibles reducir el nmero de la esperma por dosis con tcnicas de la
refinacin de la coleccin, del proceso y del AI, y por lo tanto aumenta el
nmero de dosis por ejaculate. Hay un nmero del umbral de la esperma
viable por la AI-dosis para los varones individuales, debajo de quienes poca
esperma viable inseminada, mayor es el riesgo que la fertilidad ser
comprometido (Foote y otros. 1993).
Un suficiente nmero de la esperma completamente competente que es capaz
de alcanzar la fertilizacin a la hora de la ovulacin se requiere en el oviducto
para alcanzar el embarazo (Watson 2000). Doscientos millones cryopreserved
la esperma colocada en la cerviz, 20 millones cryopreserved la esperma
colocada en el tero o 1 milln cryopreserved la esperma colocada en el
oviducto son necesario alcanzar la fertilidad ms del de 50% en las ovejas
(maxwell 1986, Maxwell y otros. 1993). La fertilidad declina exponencial cuando
se reduce el nmero o la calidad de la esperma. La inseminacin quirrgica se
ha combinado con el uso del semen congelado-deshelado en una cierta
especie de depositar colmo de la esperma en la zona reproductiva para
asegurar a una mayor proporcin del alcance de la esperma los oviductos y
para alcanzar una fertilidad ms satisfactoria (Watson 2000). Semen de
Intracornual la deposicin del semen durante el copulation en camelids puede
ser una adaptacin para superar las concentraciones relativamente bajas de la
esperma (marrn 2000).

130

La induccin de la ovulacin, conjuntamente con la inseminacin intrauterina

transcervical sincronizada fue alcanzada usando el semen enfriado y
congelado-deshelado. No se obtuvo ningunos embarazos. Por lo tanto los
estudios estn ms lejos necesario para aumentar los nmeros de la esperma
normal, viva, activa entregada a los cuernos uterinos alrededor de la poca de
la ovulacin.

7. DISCUSIN GENERAL
Este informe presenta nuevos datos sobre las tcnicas usadas para la
coleccin, la caracterizacin, la preservacin y la inseminacin del semen de la
alpaca. Las conclusiones hechas durante los estudios en este proyecto pueden
ser resumido como sigue:

El constante y la coleccin confiable de semen de la alpaca eran

posibles con un mannequin de madera cubierto con una piel bronceada
de la alpaca y cabido con una vagina artificial.

Era posible entrenar a los varones virginales y experimentados de la

alpaca a acoplarse con el mannequin.

Los componentes

del comportamiento de acoplamiento fueron

definidos.

Que aplica la fuerza centrfuga a la vagina artificial despus de que la

eyaculacin fuera requerida para maximizar la produccin de semen.

Las caractersticas del semen que definen un ejaculate fueron

establecidas.

La calidad del semen vari considerablemente en y entre varones.

Los suplementos de que contenan la yema de huevo y el glicerol, y

particularmente Triladyl (Minitub, Alemania), probaron los suplementos
ms eficaces para el semen enfriado hasta 48 horas.

131

La centrifugacin ni del semen para quitar plasma seminal ni la agitacin

rpida para reducir viscosidad realz al parecer la supervivencia del
semen enfriado. El inmediato poste-deshiela la actividad de la esperma
era aproximadamente 20 a el 40% cuando o el almacenador
intermediario verde/claro del camello (IMV International Corporation, los
E.E.U.U.) o Biladyl A/B (Minitub, Alemania) fue utilizado

como

suplemento para el semen que congela.

La ovulacin fue inducida con xito entre 24 y 30 horas despus de la

inyeccin intramuscular de buserelin.

La deposicin de Transcervical del semen en la extremidad del cuerno

uterino ipsilateral al ovario que llevaba el folculo dominante demostr
ser una tcnica simple y eficiente para la inseminacin artificial.

El ningunos embarazos fue alcanzado usando el AI transcervical,

intrauterino del semen enfriado o congelado-deshelado.

Los resultados en este proyecto proporcionan una base sana sobre la cual
continuar desenredando los misterios de la coleccin, de la preservacin y de
la inseminacin del semen de la alpaca. Aunque el AI primero fue procurado en
los aos 60 en camelids del americano del sur, los una pequea cantidad de
embarazos se han alcanzado que usando desde entonces enfriado o
congelado el semen reflejan las dificultades de transferir tecnologa de crianza
artificial del otro ganado domstico a los camelids.
Las idiosincrasias fisiolgicas de los alpacas masculinos por ejemplo

la

duracin de acoplamiento extendida y el bajo volumen, baja densidad, semen

de gran viscosidad conjuntamente con la variacin en calidad de ejaculates
ambos en y entre desafos proporcionados los varones a travs del proyecto
entero. Como ejemplo de algunas de las frustraciones hechas frente durante el
proyecto, no todos los varones que fueron entrenados para montar al
mannequin se acoplaron bien en cada tentativa. En algunos das, los varones
montaron a mannequin y semen excelente ejaculated de la calidad. En otros
das, los varones inquietaron excesivamente y eran renuentes penetrar el
sistema de pesos americano o eran renuentes permanecer en el sistema de

132

pesos americano y no podido ejaculate adecuadamente. Esto la variacin en

comportamiento de acoplamiento redujo el nmero de ejaculates conveniente
para la transformacin posterior y poda ser crtica en el xito de la
preservacin del semen. Los datos recogidos durante el proyecto asistirn a
los criadores y a los veterinarios en la industria australiana de la alpaca para
seleccionar padres de los sonidos con la evaluacin de criar caractersticas del
comportamiento y del semen. Se anticipa que esta misma informacin asistir
con la seleccin de varones con el semen que es conveniente para enfriarse
y/o congelar. Las caractersticas del semen necesitan ser definidas ms a
fondo en lo referente a edad, a la estacin y al tamao alimenticio del estado y
testicular.
Todava hay mucho trabajo que necesita ser hecho para congelar el semen de
la alpaca de una manera acertada. Este proyecto ha contestado a algunas
preguntas pero ha pedido muchos ms. Permutaciones y combinaciones del
sistema de pesos americano

la configuracin, los tipos de suplemento, la

longitud de enfriarse, el medir el tiempo de la adicin del glicerol, el tiempo del

equilibrio del glicerol y el semen, por ciento de glicerol agregado al semen
extendido final, altura de congelar sobre tiempo del nitrgeno lquido y el
deshelar y la temperatura del semen son algunos de los muchos aspectos que
se tratarn en la investigacin futura. Muchos de estos parmetros han sido
descubiertos por ensayo y error en la otra especie.
Protocolos para que pruebans el extender, el enfriarse, el congelar y necesidad
el deshelar sean modificados y con la experimentacin controlada que implica
nmeros ms grandes de animales que posible en el proyecto actual. Dos
acercamientos a la investigacin futura se sugieren por experiencia ganada en
el proyecto actual:

A plane el programa de investigacin graduado basado en los

resultados de este informe, y lo condujo como una universidad/empresa
conjunta de la industria. La infraestructura de una institucin es
necesaria incluyendo capacidad del tener una multitud experimental de
alpacas y con las instalaciones y el experto del laboratorio supervisin
disponible.

Los

costes

importantes

incluiran

la

compra

el
133

mantenimiento de animales, poste ayuda del estudiante graduado, y

ayuda del proyecto.

El apoy financieramente en la investigacin de la granja donde la

alpaca grande y bien manejada que cra granjas se utiliza para contener
y para manejar grupos experimentales de animales. Las caractersticas
Cooperating proveeran la infraestructura de animales, gerencia de la
multitud incluyendo la alimentacin y direccin animal. Investigacin los
trabajadores visitaran sobre una base prevista en un laboratorio mvil.
Entrenaran a los varones para

los propsitos y los grupos

experimentales de hembras se prepararon para las inseminaciones

sincronizadas. Los costes importantes

ser ayuda de la investigacin

para las caractersticas que participan (e.g. agistment subvencionado

para la multitud, el trabajo experimentales del suplemento), los costes
del recorrido y la ayuda del proyecto.
El conocimiento ganado sobre la coleccin, la caracterizacin, la preservacin y
la inseminacin del semen de la alpaca acelerar la disponibilidad de los
servicios de la inseminacin artificial en alpacas. Esto beneficiar la industria
australiana de la alpaca con una utilizacin ms eficiente de varones gentico
superiores y una difusin ms rpida de genotipos mejorados a travs de la
manada nacional.

134

Apendices

135

136

137

138

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