PRACTICA 4

DESARROLLO EMBRIONARIO TARDIO EN TILAPIA ROJA:

Oreochromis sp.
INTRODUCCIN
La Tilapia presenta alta acogida comercial por su facilidad de reproduccin en
cautiverio, donde es mantenida en estanques a una temperatura que vara entre 27
y 30C. La hembra presentan cuidado paternal, los huevos son depositados en el
fondo del estanque o lago y despus de la fertilizacin por parte del macho, la
hembra los incuba dentro de su boca hasta la eclosin. Los huevos son de color
amarillo claro y presentan oscurecimiento con el incremento de la edad. A medida
que se desarrolla el embrin se observa una capa gruesa bordeando el vitelo, a la
cual se le denomina banda embrionaria. El embrin es completamente transparente
y logra diferencirsele la formacin de rganos como los ojos, la boca, el intestino,
etc. A medida que avanza la incubacin observa el sistema circulatorio del cual
bordea dorsalmente al vitelo. El embrin con el tiempo presenta movimiento y los
ojos adquieren pigmentacin. La eclosin del huevo inicia en la parte posterior de la
larva de tal manera que queda libre para desplazarse por el ambiente y alimentarse
de rotferos preferiblemente.
La larva en desarrollo presenta la formacin de su sistema esqueltico que ocurre de
dos formas principalmente y ambos contemplan la transformacin de un tejido
preexistente: osificacin intramembranosa drmica y osificacin endocondral. El
proceso de osificacin intramembranoso se caracteriza por formacin de tejido seo
sin usar como molde un cartlago. El tejido mesenquimal circundante forma por
diferenciacin osteoblastos, los que sintetizan la matriz sea. Estos al quedar
atrapados se transforman luego en osteocitos, los que forman parte de la trabcula
sea en formacin. La osificacin intramembranosa es caracterstica de los huesos
planos como los de la bveda craneana. El proceso de osificacin endocondral se
caracteriza por la diferenciacin de clulas mesenquimticas en cartlago que luego
son reemplazadas por hueso.
Con la ayuda de algunas sustancias qumicas podremos identificar la disposicin de
estructuras cartilaginosas y calcificadas del embrin y larva de la tilapia. El reactivo
Azul Alcian tie los glucosaminoglicanos del cartlago y el Rojo de Alizarina el calcio
presente en los huesos. Esta gradacin en la acumulacin de calcio seo se hace
visible con este proceso de tincin. Se muestran a continuacin los cambios
morfolgicos externos ms notables durante la organognesis de Tilapia, al igual
que el tejido cartilaginoso y seo utilizando tcnica de tincin.

Laboratorio Embriologa Comparada

37

Laboratorio Embriologa Comparada

38

Laboratorio Embriologa Comparada

1.Morfologa externa de embriones y larvas de Tilapia.

Regi
n
ceflic
a

39

Laboratorio Embriologa Comparada

R
eg
i
n

Plcoda
tica
Lente
Capsula
ptica

Vitelo

Plcoda
olfatoria

Corazn

Plcoda
olfatoria

Aleta
pectoral
Somitas

Corazn

R R Capsula ptica
ee
Lente
gg
i i
Plcoda

tica
nn

Vitelo
Somitas

Apertura del
conducto
pronfrico

Apertura del
conducto
pronfrico

Primordio de
Aleta caudal
Aleta caudal

2. Caractersticas morfolgicas del desarrollo continuo de peces (Gilbert, S.F. 2005).

40

Laboratorio Embriologa Comparada

41

Laboratorio Embriologa Comparada

42

Laboratorio Embriologa Comparada

3. Visualizacin de tejido seo y cartilaginosos en tilapia con tincin de Rojo de

Alizarina y Azul de Alcian.

43

Laboratorio Embriologa Comparada

4. Anatoma externa de peces: disposicin de aletas

OBJETIVOS
1. Identificar los cambios morfolgicos externos que presentan los peces durante
su desarrollo embrionario y larval.
2. Aprender uno de los procedimientos de tincin empleados en embriologa para
la identificacin de cartlago y hueso
3. Reconocer la osificacin como un proceso gradual durante el desarrollo
embrionario.

REACTIVOS Y MATERIALES
Estereoscopio (2 por grupo)

Caja de Petri pequea (2 unidades)

Azul Alcian

Pinzas suaves

Etanol (70%)

Punzn

Rojo de Alizarina

Pincel

Agua destilada

Glicerina (20 y 100%)

Huevos de tilapia en diferentes estados de desarrollo

44

Laboratorio Embriologa Comparada

PROCEDIMIENTO

A. OBSERVACIN DE LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS EMBRIONARIO Y POST

EMBRIONARIO

Para esta seccin de la prctica cada grupo recibir un conjunto de huevos y

alevinos de Tilapia vivos y otro conservados en alcohol, que se encuentran en
diferentes estados de desarrollo.
1. Observe las caractersticas morfolgicas primero en aquellos que se encuenran
vivos. Describa su locomocin y calcule la frecuencia cardiaca uno de los
estados.
2. Observe el grado de desarrollo de cada uno de los embriones y larvas
suministrados y realice el esquema correspondiente.
3. Describa detalladamente las caractersticas morfolgicas (tamao proporcional,
color, forma, etc.) y reconozca en que estadio(s) se hacen visibles, permanecen
constantes, cambian desaparecen.
Caractersticas a identificar:
Vitelo, corion, regin ceflica y caudal, vesculas primarias de formacin del cerebro
(prosencfalo, mesencfalo, rombencfalo), plcodas (ptica, tica y olfatoria),
somitas, conducto excretor (pronfrico), cromatforos puntiformes (melanforos) y su
ubicacin, cmara ptica y lente ptico, corazn embrionario, aletas: caudal,
pectoral, plvica, anal, dorsal.

B. TEJIDO ESQUELETICO DE EMBRIONES Y LARVAS EN TILAPIA ROJA:

Observacin y tincin de tejido cartilaginoso y seo.

1. De cada uno de los estadios de desarrollo suministrado tome un espcimen y

colquelo en un

recipiente de vidrio con tapa hermtica.

2. Adicione azul de Alcian hasta cubrir por completo y deje actuar por dos horas y
media.
3. Lave cuidadosamente los embriones y las larvas con etanol al 70% durante 10
minutos.

45

Laboratorio Embriologa Comparada

4. Adicione Rojo de Alizarina y deje actuar por dos horas. Despus de este tiempo
lave la muestra con agua destilada por dos horas. Durante estas dos horas:
a. Observe de manera comparativa los especimenes al finalizar la tincin y
describa lo observado (utilice esquemas). Establezca a partir de qu estado
empieza la formacin del sistema seo, explique.

b. Identifique al menos un evento de reemplazo de clulas cartilaginosas por

clulas seas. Cmo lo puede evidenciar? Describa lo observado.

c. Tome un estadio donde identifique claramente la presencia de calcio en las

aletas, realice el esquema correspondiente. Observe en ese mismo especmen la
epidermis y describa con esquemas lo encontrado.

5. Los embriones y las larvas pueden aclarase un poco para luego ser
conservadas. El procedimiento consiste en adicionarles glicerina al 20% (diluida
en etanol al 70%) durante tres das y luego reemplazar dicha solucin con
glicerina la 100%.

46

Laboratorio Embriologa Comparada

ANEXO 1. CRANEO DE PECES OSEOS

pm: premaxilar
ro:rostral
na: nasal
la: lacrimal
su:suborbitales
pf:prefrontal
fr:frontal
pa:parietal
pp: postparietal
pe: postemporal

an: angular
de:dentario
op:opercular
gu: gular
pr:preopercular
ma:maxilar
so: subopercular
sm:submaxilar
io:interopercular
rb: radios branquiosteos
qu:cuadrado
sa:surangular
an:angular

Tomado de: Ziswilwe V. 1980. Vertebrados: Zoologa especial

47