Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
RESUMEN
relacionadas
con
la
calidad
del
producto
obtenido
(humedad,
1. INTRODUCCIN
El maguey de pulque tpico o maguey manso, cuyo nombre cientfico es Agave atrovirens
Karw, perteneciente a la familia de las Amarilidceas, es una planta de raz fibrosa con
tallo corto y grueso; sus hojas, cuyo nmero vara de 30 a 50, presenta longitudes desde
1m hasta 2.5 m y su ancho es de aproximadamente 30 cm, son muy gruesas y angostas
cerca de la base, y se distribuyen muy juntas en torno del tallo formando una roseta
(Loyola, 1956).
En varios vegetales como el maguey, la alcachofa y algunos tubrculos y races se
encuentran
fructooligosacridos
como
polmeros
de
reserva
energtica.
Estos
, se ha sugerido usarla
como fuente para la obtencin comercial de fructosa de alta pureza (Badui, 1999).
2. MATERIALES Y MTODOS
2.1 Obtencin y caracterizacin de la materia prima
Se obtuvieron pencas de Agave atrovirens Karw, colectadas del Municipio de Contepec
en el Estado de Michoacn. Se seleccionaron pencas de Agaves con edades entre 7 y 9
aos, aproximadamente. Para la caracterizacin de la materia prima, se tomaron 5
pencas del mismo agave, de la parte ms externa hacia el centro. Se tom una
submuestra de aproximadamente 10 g de la base de cada penca y se mantuvo en hielo
para su transporte y en congelacin a 70 C en un ultracongelador [Thermoforma, USA,
Modelo 916] hasta su uso para la determinacin de fructooligosacridos, con el fin de
evitar la hidrlisis parcial de estos por accin enzimtica o microbiolgica. Las pencas se
procesaron dentro de los dos das subsecuentes a la toma de muestra para evitar la
deshidratacin excesiva o hidrlisis total de los fructanos.
2.2 Mtodos
2.2.1
= porcentaje de humedad
%P
= porcentaje de protena
2.2.1.6 Determinacin
Determinacin
de
azcares
reductores,
glucosa
fructosa
libres
a)
2.2.1.10.2
temperaturas
Se pesaron 10 g de muestra por triplicado y se molieron con 20 mL de agua. Se procedi
a calentar las muestras a 40 C con agitacin por 15 minutos para la extraccin de
fructanos. Posteriormente se dejo enfriar a temperatura ambiente, y se centrifug a 5000
rpm por 10 minutos. Se separ el precipitado y el sobrenadante y a este ltimo se le
determin contenido de fructanos mediante el mtodo descrito en los puntos 2.2.1.4 y
2.2.1.10 respectivamente. Se repiti el
procedimiento con temperaturas de extraccin de 60, 70 y 80 C.
2.2.2.2
temperatura de extraccin.
Se preparo una solucin patrn de inulina de 150mg /100 mL como sustrato para la
reaccin enzimtica. Se tom una alcuota de 1 mL de la solucin por triplicado y se
coloco en tubos de ensaye. Se agregaron 0.9 mL de regulador de acetatos y se preincubo
a 40 C por 5 minutos. Trascurrido este tiempo se aadi a cada tubo 0.1 mL del
sobrenadante obtenido en el punto 2.2.2.1 a 40 C y se incub a 40C por 5 minutos
exactamente. Posteriormente se colocaron los tubos en un bao en ebullicin por1 minuto
y se transfiri inmediatamente a un bao con hielo por 1 minuto para inactivar las enzimas
presentes en el sobrenadante. Se procedi a cuantificar la inulina hidrolizada como
azcares reductores por el sobrenadante mediante el mtodo descrito en el punto
2.2.1.8.2. Se repiti este procedimiento con los extractos obtenidos a 60, 70 y 80 C.
2.2.2.3 Determinacin de las condiciones de clarificacin.
Se pes 1 Kg. de muestra y se moli con 1 L de agua a 80 C. Este jugo se mantuvo a 80
C y con agitacin por 15 minutos para la extraccin de los fructanos. Posteriormente se
filtr por manta de cielo para eliminar las fracciones gruesas del jugo. Se tomaron 100 mL
del jugo filtrado y se coloc en una parrilla con un agitador magntico a 400 rpm. Se
procedi a calentar la muestra a 75C y en este momento se adicionaron 0.3 mL de una
suspensin de hidrxido de calcio (33 g/ 100mL) y se verific que el pH alcanzara 6.5,
registrado con papel indicador. Sin detener la agitacin se procedi a calentar a 80 C por
1 minuto. Posteriormente se transfiri el vaso de precipitados a otra parilla sin
calentamiento y con agitacin a 60 rpm, inmediatamente despus se adicionaron 0.1 mL
de hidrxido de calcio y 6 mL de una solucin de sulfato de aluminio (1 g/L) y se mantuvo
la agitacin por 5 minutos, tiempo despus del cual, se detuvo la agitacin y se dej
reposar el jugo por 2 horas. Posteriormente se midi la altura del precipitado formado.
Este experimento se repiti variando las cantidades de sulfato de aluminio adicionado. Se
prob la adicin de 8, 10, 12 y 14 mL y en cada caso se midi la altura del precipitado
formado.
2.2.3 Secado por aspersin del jugo de maguey
2.2.3.1 Acondicionamiento del jugo para su deshidratacin
Se extrajo el jugo de maguey y posteriormente se clarific de acuerdo a lo mencionado en
la seccin 2.2.2.3. Se midieron 500mL de jugo ya clarificado y se procedi a evaporar
dicho jugo hasta una concentracin aproximada de 20Brix, utilizando un rotavapor [Buchi,
Mxico, modelo R-200/205]. A las siguientes condiciones: Temperatura del bao de
calentamiento = 60 C; Temperatura del agua de enfriamiento = 0 C;Presin absoluta =
75 mbar. Tiempo aproximado de evaporacin = 1 hora 30 min / 500mL de jugo.
Para el proceso de evaporacin se procedi de la siguiente manera: la presin del equipo
fue disminuyendo lentamente hasta alcanzar 75 mbar de presin absoluta y el matraz que
contiene el jugo se fue sumergiendo lentamente en el bao de agua a 60 C de
temperatura, hasta que se alcanz la estabilidad del sistema. Una vez evaporado el jugo
se filtr por algodn, para eliminar partculas grandes.
2.2.3.2 Deshidratacin del jugo de maguey
El material previamente acondicionado se deshidrat aplicando el mtodo de secado por
aspersin. Se utiliz un secador por aspersin experimental (SPAGA9601, IPN, Mxico)
(Alamilla, L., 2004). Este secador opera con un aspersor tipo boquilla neumtica de doble
fluido y en flujo paralelo. El jugo de maguey se sec por aspersin a cinco diferentes
temperaturas de operacin (entrada/salida del aire de secado), las cuales se mencionan
en el cuadro 4. La alimentacin del jugo fue de 1.2 L/h y el flujo volumtrico de aire fue de
0.02 m3/s en todos los casos. Por otro lado, con el fin de realizar un anlisis comparativo
de los fructooligosacridos existentes en el Agave, se procedi a deshidratar una solucin
de inulina comercial (Raftiline GR, granulado, 92 % de inulina, 8% de glucosa, fructosa
y sacarosa y DP= 10) al 20% (p/v), a una temperatura de entrada/salida del aire de
secado de 150/125 C. La alimentacin de la solucin de inulina comercial se realiz a 1.2
L/h y con flujo volumtrico de aire de 0.02 m3/s. Los polvos obtenidos del secador por
aspersin, se conservaron en bolsas con sello hermtico para su posterior estudi.
Cuadro 4. Temperaturas de secado del jugo de maguey
Prueba
Temperatura
Temperatura
Temperatura
de entrada del
de salida del
del aire a la
aire (C)
aire ( C)
descarga( C)
90
50
70
120
104
70
150
125
76
180
150
84
200
150
70
10
Atomizer, 1978)
Se pes un gramo de polvo de maguey y se coloc en un vaso de precipitados de 40 mL.
El contenido se vaci en un vaso de 500 mL con 100 mL de agua destilada desde una
11
altura de 15 cm del nivel del agua y se tomo el tiempo para que el polvo se hidratara
completamente y no se observara polvo seco en la superficie del agua.
2.2.5.4 Determinacin de la cantidad de fructanos en el producto deshidratado.
Se pesaron 200 mg de polvo y se disolvieron en 10 mL de agua destilada. Se elabor una
dilucin 1:5 y se determinaron fructooligosacridos como en los puntos 2.2.1.4 y 2.2.1.10.
2.2.5.5
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
3.1
% Base hmeda
% Base seca
HUMEDAD
87.41 0.8
-----
CENIZAS
0.43 0.02
3.39
EXTRACTO ETEREO
0.21 0.01
1.67
PROTEINAS
0.32 0.01
2.51
FIBRA INSOLUBLE
3.35 0.08
26.63
FIBRA SOLUBLE
0.36 0.02
2.86
7.92 0.09
62.94
12
13
reactivos utilizados para elaborar las curvas. Se calcularon los factores kf y kg de las
curvas utilizando slo los puntos donde la curva mantena la relacin lineal. El factor kg
que se obtuvo fue de 3.06 (g /100 mL / unidad de absorbancia) y el factor kf fue de 0.28
(g/100 mL/unidad de absorbancia). El factor Q calculado de la relacin entre kg y kf fue de
10.99 (adimensional).
3.2.3 Validacin de la curva tipo.
En el cuadro 6 se presentan los resultados de la validacin de la curva tipo.
0.00
0.02
0.04
0.06
0.08
0.10
0.12
0.14
A
515
nm
100
C
0.00
0.08
0.15
0.23
0.29
0.37
0.42
0.45
Muestra de Sacarosa
A
Conc. de
Fa
515n
ADR
m
determinada
55 C
0.00
0.04
0.08
0.12
0.15
0.19
0.24
0.26
0.00
0.02
0.04
0.06
0.08
0.10
0.11
0.12
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.07
0.07
DP*
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.05
0.05
0.00
N/A
0.01
1.9
0.02
1.9
0.03
2.0
0.04
1.9
0.05
2.0
0.06
2.1
0.07
2.3
DP prom =
1.97
+/- 0.08
DP= grado de polimerizacin; ARD= Azcares reductores totales; Fa= Fructosa aparente;
G= Glucosa; F= Fructosa
La validez de la curva tipo se corrobor debido a que se hizo un escalamiento del mtodo
original descrito por Ting, en el cual, se usaban volmenes 10 veces mayores a los que se
usaron en el desarrollo de este trabajo. Para comprobar que el mtodo no presentara
errores por dicha modificacin se procedi a analizar una muestra de sacarosa hidrolizada
de acuerdo a lo descrito en la seccin de mtodos. Se determino la concentracin de
azcares reductores totales, glucosa y fructosa de soluciones de concentracin conocida.
Con los datos obtenidos se obtuvo el grado de polimerizacin medio para comprobar que
este tena una exactitud adecuada. El grado de polimerizacin medio es mucho ms
sensible a los errores del mtodo debido a que se trata de la relacin entre la fructosa y la
glucosa calculada, por lo que al corroborar que el grado de polimerizacin sea
14
15
Cuadro 7.
Muestra
Reductores
Glucosa
Fructosa
Penca 1
Penca 2
Penca 3
1.61 0.02
1.21 0.33
1.42 0.11
0.39 0.26
0.63 0.04
0.63 0.10
1.23 0.25
0.58 0.37
0.80 0.01
ART
Glucosa
Fructosa
0.003 0.001
0.001 0.002
0.003 0.004
DP
Glucosidos
16
Reductores
2.46 0.13
1 0.03
1.39 0.29
Glucosa
Fructosa
0.01 0.00
0.00 0.00
0.55 0.45
2.46 0.13
0.99 0.03
0.84 0.18
DP
< 30
< 30
3.6 1.3
FOS
2.22 0.01
0.90 0.03
1.30 0.32
17
Fructosa
96.38 2.02
0.00 0.00
DP
263.6
158
N/A
FOS
87.1 4.08
00
Se puede observar que el mtodo es efectivo para la determinacin de FOS, debido a que
se detecta 87 % de la muestra que se coloc como prueba. Este porcentaje puede
deberse a que la cantidad de enzimas utilizadas no fueron suficientes para hidrolizar por
completo a la inulina, en las condiciones en las que se prob el mtodo, sin embargo, el
mtodo es til para la determinacin correcta de hasta 0.48 g/ 100 mL de FOS en la
solucin. Para concentraciones mayores es necesario diluir la muestra debido a que la
hidrlisis no sera completa y la absorbancia no estara dentro del intervalo de la curva
tipo para la determinacin.
En cuanto al grado de polimerizacin, se reporta que la inulina de Dalia tienen un grado
de polimerizacin de 29 a 30 (Moerman, 2004) por lo que puede verse que para grados
de polimerizacin tan altos, el mtodo no tiene la exactitud que se comprob con la
sacarosa (3.5 %), debido a esto, la conversin de azcares reductores a inulina se lleva a
cabo considerando el grado de polimerizacin lmite de una molcula con el mayor grado
de polimerizacin, por lo que los azcares reductores se multiplican por 0.9 para obtener
los FOS.
En el caso de la determinacin de glucsidos (cuadro 11) puede observarse que en la
inulina se detecta 5 % de estos azcares, esto se puede deber a los azcares de bajo
peso molecular presentes en la inulina de dalia que pueden ser sacarosa, cestosa y
nistosa (Moerman, 2004)
Cuadro 11. Determinacin de glucsidos en inulina de Dalia y Maltodextrina (g/ 100
mL jugo)
Muestra
Reductores
Inulina de
4.91 1.5
Dalia
Maltodextrina 91.89 2.34
Glucosa
Fructosa
DP
2.65 1.64
2.26 0.87
2.2 0.76
Glucsidos y
azcares
libres
4.68 1.492
96.77 2.26
- 2.88 0.11
82.70 2.11
Esto se debe a que la maltasa es capaz de hidrolizar los enlaces (2-1) presentes en los
FOS de bajo peso molecular as como los de la sacarosa. La maltodextrina se compone
nicamente de glucosa y puede observarse que se hidroliza casi por completo con las
enzimas utilizadas y en las condiciones establecidas para el mtodo. Aunque la hidrlisis
no es total, la cantidad que puede detectar el mtodo es de 0.44 g/ 100 mL de solucin, lo
cual de la misma manera que en el caso de la determinacin de FOS, es suficiente para el
anlisis, debido a que soluciones muy concentradas requieren ser diluidas a una
18
concentracin menor a 0.12 g / 100 mL jugo para poder ser detectadas mediante
absorbancia en la curva tipo. En la fructosa se obtienen valores negativos probablemente
debido a que los errores del mtodo son mucho mayores a los detectados con la
sacarosa, cuando la concentracin de glucosa es mucho mayor a la concentracin de
fructosa (como en este caso, que el polmero se compone de glucosa solamente).
3.3.5 Determinacin de pH, % slidos solubles ( brix) y acidez titulable en las
muestras
Cuadro 12. Determinacin de pH, % slidos solubles (Bx) y acidez titulable en las
muestras
Muestra
pH
Bx
Penca 1
Penca 2
Penca 3
5.03 0.03
5.34 0.03
5.13 0.02
9 0.09
5 0.03
8 0.05
Acidez Titulable
(% cido mlico)
0.33 0.00
0.5 0.00
0.55 0.06
19
3.4
2.5
2.4
2.3
2.2
2.1
2
1.9
1.8
1.7
1.6
1.5
30
40
50
60
70
80
90
Temperatura C
20
0.35
Actividad enzimtica (U)
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
30
40
50
60
70
80
90
Temperatura C
21
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0.07
0.09
0.11
0.13
0.15
Dimetro
promedio
13.33
22
Dimetro
Sauter
16.73
CV
0.39
120/104
17.65
20.55
0.43
150/125
16.24
26.48
0.55
180/150
14.70
18.73
0.38
200/150
19.43
21.08
0.34
Se midieron 600 partculas en cada Temperatura entrada/salida
Es importante hacer notar que si bien es cierta dicha tendencia, a temperaturas
intermedias (120/104 C y 150/125 C), no hay diferencia importante en el tamao medio
de partcula, y a temperaturas altas existe variacin del dimetro, puesto que a una
temperatura de 180C/150C el dimetro disminuye y a 200C/150C la partcula se
expande. Estos aumentos en tamao de partcula, se deben a que durante el secado,
este material tiende a expandirse, colapsarse, encogerse y volverse a inflar, como ocurre
en algunos otros materiales (Walton, 2000). En cuanto el coeficiente de variacin, si ste
es cercano a 0.1 la dispersin es baja, por el contrario si es cercana a 0.5, la dispersin
es muy amplia (Walstra, 2003). Para todos los casos de estudi, se observ que la
dispersin de partculas es cercano a 0.5, lo cual implica que independientemente de la
temperatura, se presenta una amplia dispersin de tamaos de partculas. Es probable
que esta dispersin se deba principalmente a caractersticas relacionadas directamente
con el diseo del aspersor, ms que a la temperatura de secado del material. El anlisis
de la distribucin se muestra por medio de un histograma de distribucin de tamao de la
partcula (Figura 6).
350
Distribucin
Distribucin
del Tamao
del Tamao
mediomedio
de la Partcula
de la Partcula
300
90
250
120
150
180
200
Frecuencia
200
150
100
50
0
2.40625
7.87375
13.34125
18.80875
24.27625
29.74375
35.21125
40.67875
46.14625
51.61375 y mayor...
-50
Clase
23
y de acuerdo a la clasificacin
reportada por Walton (2000), las partculas en este caso tienden a ser formadoras de
coraza (costra), as mismo se puede decir que tienen una superficie plstica o flexible, ya
que pueden inflarse y colapsarse con una costra reformada o continuar expandindose
(Master,1979), sin presentar rompimiento completo de la partcula, como es el caso de
las partculas deshidratadas a 180C/150C. As mismo en
las condiciones de
24
Humedad (%b.s)
12
10
8
6
4
2
0
0
50
100
150
200
250
Temperatura (C)
25
25
0.5
20
0.4
15
0.3
10
0.2
0.1
0
0
50
100
150
200
D Sauter(m)
0.6
Densidad empacada
(g/mL)
30
0
250
Temperatura (C)
Sauter
800
700
600
500
400
300
200
100
0
30
25
20
15
10
26
5
0
DSauter (m)
Humectabilidad (seg.)
Reductores
Glucosa
41.83 0.63
39.49 0.41
40.27 4.49
9.68 0.15
11.47 0.25
11.12 4.16
27
Fructosa
DP
FOS
32.15 0.48
28.02 0.66
29.15 0.33
4.3 0.0
3.4 0.11
3.8 1.0
38.61 0.58
36.69 0.34
37.36 4.45
36.98 1.30
35.51 3.71
entrada/ salida C
DIF
90/50
120/104
DIF
150/125
DIF
ND
180/150
DIF
ND
DIF
DIF
DIF
ND
ND
DIF
DIF
DIF
DIF
DIF
DIF
DIF
200/150
DIF= Diferencia significativa (p 0.05),
ND
ND
28
IMPACTO:
El maguey representa una atractiva fuente de fructooligosacridos (FOS), importantes
como polmeros de reserva energtica en la planta. Estos componentes resultan de
inters en la Industria alimentaria, debido a sus atributos funcionales y sus efectos
benficos en la prevencin de enfermedades cardiacas, el cncer, colesterol, obesidad,
osteoporosis y diabetes, entre otras. El propsito de sta investigacin fue obtener un
producto deshidratado con alto contenido de fructooligosacridos, a partir del jugo de
maguey (Agave atrovirens Karw) mediante un proceso de secado por aspersin
29