CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA (TLC)

Nombres
E-mail
Murillo Diaz Alejandro
mfredy@unicauca.edu.co
Ortega Moncayo Harold Andrs
ortegaharold@unicauca.edu.co
Hoyos Brian
Lab. Qumica Orgnica, Ing. Ambiental, Facultad de Ing. Civil, Universidad del
Cauca
Grupo No:

Fecha de realizacin de la prctica:

01/09/2014

Fecha de entrega de informe:

08/09/2014

RESUMEN
En el anterior laboratorio se trabaj la cromatografa de capa fina o capa delgada, el cual es
un proceso muy utilizado para realizar anlisis cualitativos, debido a que este proceso se
caracteriza por separar los compuestos en base a su polaridad.
Se observ que en las placas para cromatografa el comportamiento de cada muestra
tiende a la separacin de estas mismas, debido al contacto que cada una de ellas tiene con
los diferentes disolventes.
De lo anterior se puede concluir que cada una de las muestras tomadas en las placas de
cromatografa tiene diferente valor de polaridad al ser expuestas a diferentes disolventes
como el acetato de etilo y el etanol a diferentes concentraciones.

RESULTADOS
En primera instancia se tomaron dos placas para cromatografa debidamente adecuadas a
las cuales se les agrego un punto de la muestra sobre una lnea de lpiz trazada
previamente, que contiene 1mg de fluorescena y 1 mg de azul de metileno en 5ml de
etanol al 96%, mediante un capilar para cromatografa, luego se introdujo una de las
placas en el vaso precipitado que contiene 2 ml de acetato de etilo tapndolo con un vidrio
reloj y se dejo que el disolvente ascendiera por capilaridad hasta la parte superior de la
placa para cromatografa, y posteriormente retirarla del vaso.

Se observ que en un punto de la evaporacin la muestra de fluorescena se separa del azul

de metileno dejando un recorrido el cual se observ claramente mediante la luz ultravioleta,
despus se procedi a medir estas distancias.
Las distancias fueron las siguientes:
Fluorescena: 4,3 cm
Azul de metileno: 0 cm
Disolvente (acetato de etilo): 4,5
Teniendo las distancias se procedi a realizar el clculo (Rf):
Distancia recorrida por la muestra
Rf =
Distancia recorrida por el disolvente
Para la fluorescena:
4,3 cm
Rf =

= 0,955
4,5 cm

Para el azul de metileno:

O cm
Rf =

=0
4,5 cm

Posteriormente se introdujo la otra placa para cromatografa con la muestra previamente

dicha en el vaso precipitado que contiene acetato de etilo: Etanol, tapndolo con un vidrio
reloj, dejndola desarrollar hasta que el disolvente empecer ascender por capilaridad hasta
la parte superior de la placa y retirarla del vaso precipitado.
Se observ que en punto de la evaporacin la muestra de azul de metileno se desplaz
ligeramente mientras que la muestra de fluorescena se desplaz una mayor distancia, las
cuales se pudieron evidenciar claramente con la luz ultravioleta, luego se procedi a medir
las distancias.
Las distancias fueron las siguientes:
Azul de metileno: 0,5 mm
Fluorescena: 4,3 cm
Disolvente (Acetato de etilo: Etanol): 4,5 cm
Teniendo las distancias se procedi a realizar el clculo (Rf)
Para la fluorescena:

4.3 cm
Rf =

= 0.955
4,5 cm

Para el azul de metileno:

0,05 cm
Rf =

= 0.01
4,5 cm

Por otra parte se tomaron otras dos placas para cromatografa debidamente adecuadas a las
cuales se les agrego un punto de una muestra sobre la lnea de lpiz trazada previamente,
que contiene 2 mg de naranja de metilo y 1mg de azul de metileno en 4 ml de etanol al 95%
mediante un capilar para cromatografa. Luego se introdujo una de las placas en el vaso
precipitado que contena 2 ml de etanol al 80% tapndolo con un vidrio reloj, se dej que el
disolvente ascendiera por capilaridad hasta la parte superior de la placa para retirarla
posteriormente del vaso.
Se observ que en un punto de la evaporacin la muestra de azul de metileno se desplaz
una distancia menor con respecto a la distancia que recorri la muestra de naranja de
metilo, las cuales se observaron claramente mediante la luz ultravioleta, despus se
procedi a medir estas distancias.
Las distancias fueron las siguientes:
Azul de metileno: 0,15 cm
Naranja de metilo: 4,4 cm
Disolvente (Etanol al 80%): 4,6 cm
Teniendo las distancias se procedi a realizar el clculo (Rf).
Para el azul de metileno:
0,15 cm
Rf =

= 0.032
4,6 cm

Para la naranja de metilo:

4,4 cm
Rf =

= 0,95
4,6 cm

Finalmente se introdujo la otra placa para cromatografa con la muestra previamente dicha
en el vaso de precipitado que contiene 2 ml de etanol al 20%, tapndolo con un vidrio reloj,
se dej desarrollar hasta que el disolvente ascendiera por capilaridad, pero en este caso se
observ que en un punto de la evaporacin el disolvente detuvo su avance, posteriormente
se retir la placa del vaso.

Se observ que la muestra se azul de metileno quedo en el mismo punto donde se aplic a
diferencia de la muestra de naranja de metilo que se desplaz a una distancia considerable,
estas distancias se observaron claramente al momento de exponerlas a la luz ultravioleta,
luego se procedi a medir las distancias.
Las distancias fueron las siguientes:
Azul de metileno: 0 cm
Naranja de metilo: 2,6 cm
Disolvente (Etanol al 20%): 2,8 cm
Teniendo las distancias se procedi a realizar el clculo (Rf):
Para el azul de metileno:
0 cm
Rf =

= 0 cm
2,8 cm

Para la naranja de metilo:

2,6 cm
Rf =

= 0,95
2,8 cm

ANALISIS DE RESULTADOS
Se puede decir que el factor ms influyente en la separacin de los componentes en este
tipo de cromatografa es la polaridad de estos, ya que al realizar la cromatografa las
sustancias ms polares interaccionan con el soporte (Placa para cromatografa) y su
velocidad de desplazamiento ser menor, esto quiere decir que al exponer las placas a la luz
ultravioleta, el componente ms polar (Azul de metileno) se encontrara en el lugar ms
cercano a la lnea que se ha dibujado y por el contrario los componentes menos polares
(Fluorescena, naranja de metilo y azul de metileno) se desplazaran ms rpidamente y
estarn ms alejados de la lnea base.
La polaridad del disolvente tambin se considera un factor influyente en la cromatografa
ya que afecta la velocidad de ascenso de la muestra o sustancia a lo largo de la placa. A
mayor polaridad del disolvente, mayor es el grado de ascenso de la sustancia por la placa o
medio absorbente.
Sometidas a unas determinadas condiciones experimentales, la muestra puede recorrer
cierta distancia a lo largo de la placa, pero esta distancia se puede ver afectado por factores
externos como lo es la misma placa para cromatografa ya que puede afectar el valor de
retencin obtenido para las muestras (Fluorescena, naranja de metilo y azul de metileno),

puesto que el factor de retencin se basa en la afinidad relativa de la sustancia o muestra

para el absorbente en comparacin con el disolvente, adems el espesor y la uniformidad de
la placa pueden variar especialmente si estn hechas a mano, que es muy frecuente.
En el factor de retencin se puede decir que los valores de polaridad no son exactos sino
una aproximacin a estos ya que las distancias recorridas por las muestras (Fluorescena y
naranja de metilo) se midieron con una regla a simple vista, dando como resultado unos
valores de (Rf) no adecuados o no correspondientes a la literatura, pero siendo un proceso
que se realiz debidamente en el laboratorio para probar la polaridad de las muestras
(Fluorescena, naranja de metilo y azul de metileno) y de los diferentes disolventes
(Acetato de etilo, acetato de etilo ms etanol, etanol al 80% y etanol al 20%).

CONCLUSIONES
De la anterior prctica se puede concluir que la polaridad de los disolventes es un factor que
contribuye a que los compuestos de la mezcla se desplacen ms rpidos o ms lentos en la
cromatografa. Los disolventes ms polares desplazan con ms facilidad los compuestos
retenidos en la fase estacionaria, mientras que los disolventes menos polares se tardan en
desplazar los compuestos de la mezcla.
Al trabajar en las dos primeras placas con acetato de etilo, que es un compuesto apolar se
obtiene un mayor desplazamiento debido a que este mismo componente no se encuentra tan
retenido en la fase estacionaria, en este caso el compuesto que se desplaza es la
fluorescena.
Para las otras dos placas los resultados que se obtienen son los esperados tericamente ya
que como disolvente se utiliza el etanol, que tiene un ndice de polaridad ms alto que el
acetato de etilo por eso se observa que en las placas que se le aade el etanol al 20% y al
80% de agua la mancha redujo su desplazamiento prcticamente a la mitad ya que el agua
es un compuesto totalmente polar y con este tipo de compuestos las manchas deberan
quedar en la parte ms baja de la placa para cromatografa.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. La fluorescencia y la fosforescencia son propiedades que tienen ciertas

caractersticas de absorber energa y transformarla en luz. La principal diferencia
entre un material fluorescente y uno fosforescente es el tiempo que tardan los
materiales emitiendo la luz. El proceso de fluorescencia tarda slo unas milsimas
de segundo, mientras que un material fosforescente puede durar emitiendo luz
durante varios minutos. Otra diferencia es que en el caso de la fluorescencia, la luz
se debe a una causa externa y si esta desaparece, desaparece la luz mientras que en

el caso de la fosforescencia la luz permanece durante algn tiempo aunque la causa

haya desaparecido y puede ser permanente si la causa de la luz es de origen
qumico. En este caso se present la fluorescencia ya que necesitamos exponer las
placas a la luz ultravioleta para poder observar los puntos fluorescentes y si
retirbamos las placas de la luz ultravioleta desapareca la luz emitida por los
puntos.

2. Si los compuestos no son visibles ni con luz natural ni con luz UV, hace falta hacer
un proceso de revelado qumico, rociando sobre la placa un producto revelador. El
revelador es una sustancia capaz de reaccionar qumicamente con los compuestos,
dando productos de reaccin que adsorben en la zona visible, y por lo tanto
presentan color, siendo puntos observables con lmparas de Wood. Este paso es
aconsejable hacerlo en cabinas de extraccin de gases y con elementos de
proteccin personal.
3. GC-MS es una poderosa herramienta que permite la separacin y la identificacin
simultanea de mezclas complejas. Por medio de la GC-MS los componentes de la
mezcla problema son separados, detectados, identificados y cuantificados. El uso de
la espectrometra de masas en la deteccin cromatografa permite identificar de
modo casi inequvoco los componentes individuales de la mezcla. El adecuado
manejo de los equipos a travs del software y de los datos obtenidos durante el
anlisis instrumental, permite una completa y apropiada interpretacin de los
resultados, disminuyendo as el tiempo.
En la cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una
columna que contiene a la fase fija. La separacin cromatogrfica en HPLC es el
resultado de las interacciones especficas entre las molculas de la muestra en
ambas fases, mvil y estacionaria. A diferencia de la cromatografa de gases, la
cromatografa de lquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid
chromatography) no est limitada por la volatilidad o la estabilidad trmica de la
muestra. La HPLC es capaz de separar macromolculas y especies inicas,
productos naturales lbiles, materiales polimricos y una gran variedad de otros
grupos poli funcionales de alto peso molecular. Con una fase mvil lquida
interactiva, otro parmetro se encuentra disponible para la selectividad, en adicin a
una fase estacionaria activa.
La relacin que tienen con la cromatografa es que todas estas tcnicas buscan la
separacin, identificacin y deteccin de compuestos de mezclas.

4.

Papel de celulosa:
(C6H10O5)n

Gel de slice:
SiO2 nH2 O

BIBLIOGRAFIA
(1) Pasto, D.J.; Determinacin de Estructuras Orgnicas, Ed Reverte S.A, Mxico,
1981, P 30-39.
(2) Durst, H.D.; Gokel, G.W.; Qumica Orgnica Experimental, Ed Reverte S.A,
Estados Unidos, 1985, P 78-79.
(3) Guarnizo, A.; Martnez, P.N.; Experimentos de Qumica Orgnica, Ed ELIZCOM
S.A.S, Colombia, 2009, P 101 109.