DEDICATORIA

Dedico

este

trabajo

aquellas

personas que me ensearon que

la mejor libertad del ser humano
est en la superacin personal e
intelectual, estas personas son
mis padres, que con la ayuda e
iluminacin de Dios, me dieron
su apoyo a diario para culminar
con xito y responsabilidad la
presente trabajo investigativo.

AGRADECIMIENTO
Por

medio

de

este

presente

trabajo

doy

conocer

mis

sinceros

agradecimientos primeramente a mis Padres quienes me han brindado todo su

apoyo y que con sus sabios consejos me supieron orientar e inculcar principios
morales, para que as siga adelante y culminen mis estudios.
Tambin al docente en curso, quien con paciencia y conocimientos nos ha
sabido guiar en el transcurso del presente trabajo investigativo y de esta
manera culminar el mismo.

OBJETIVOS
Este trabajo monogrfico pretende los siguientes objetivos:
Conocer el trmino de anticuerpos.
Saber las clases de anticuerpos que se han descubierto en el transcurso
de los ltimos aos.
Dar a conocer las reacciones de cada anticuerpo y los beneficios que
estos poseen.
De cierta manera conocer los anticuerpos monoclonales y policlonales y
los diversos estudios de laboratorio que se han llevado a cabo.

ndice

Dedicatoria....2
Agradecimiento....3
Objetivos....4
ndice...5
Introduccin......6
MARCO TERICO
CAPITULO I
ANTICUERPOS MONOCLONALES Y ANTICUERPOS POLICLONALES
Los Anticuerpos.....7
Divisin de Anticuerpos8
CAPITULO II
ANTICUERPOS MONOCLONALES
Definicin..9
Cmo se obtienen los anticuerpos monoclonales?
Aplicaciones de los anticuerpos monoclonales.....11
Perspectivas de los anticuerpos monoclonales
Sistemas de produccin masivas de los anticuerpos monoclonales..13
CAPITULO III
ANTICUERPOS POLICLONALES
Definicin..15
Uso de las propiedades de anticuerpos policlonales.17
Bibliografa..18
Anexos..19

INTRODUCCIN
El reconocimiento de un componente protector (anticuerpos) en el suero de
pacientes convalecientes de enfermedades infecciosas, marc los inicios
del desarrollo de la medicina preventiva. El uso de estos anticuerpos
protectores como fracciones de inmunoglobulinas crudas que se unen a
los antgenos represent el primer tratamiento efectivo de numerosas
enfermedades infecciosas.
Los anticuerpos, tambin denominados inmunogloblulinas (Ig), son
glucoprotenas especializadas que hacen parte de la inmunidad humoral;
son producidas por las clulas del sistema inmune llamadas clulas B, que
tienen la capacidad de reconocer otras molculas especficas llamadas
antgenos.
La respuesta inmunolgica especfica se desarrolla cuando un
organismo ha sido expuesto a uno o varios antgenos, originando una
respuesta policlonal, es decir, la produccin de anticuerpos contra un rango
amplio de estructuras presentes en los antgenos. Por el contrario, la
respuesta monoclonal se da por la seleccin de un solo clon activado de
clulas B que produce un anticuerpo para un determinante antignico
nico.

MARCO TERICO
CAPITULO I

ANTICUERPOS MONOCLONALES Y ANTICUERPOS POLICLONALES

1. Los anticuerpos.
Un anticuerpo se define como una inmunoglobulina (Ig) capaz de
una combinacin especifica con el antgeno que ha causado su
produccin en un animal susceptible. Ellos

son producidos en

respuesta a la invasin de molculas forneas en el cuerpo. Los

anticuerpos existen como una o ms unidades en forma de Y,
compuesta por cuatro cadenas polipeptdicas. Cada Y contiene dos
copias idnticas de una cadena pesada (HC, heavy chain), y dos
copias idnticas entre s de una cadena ligera (LC, light chain),
llamadas as

por sus pesos moleculares relativos que son de

aproximadamente 50kDa la cadena pesada y de cerca de 25kDa la

cadena ligera. Estas cadenas se mantienen unidas mediante enlaces
disulfuros intercatenarios. Estas cadenas pueden separarse por
reduccin de los enlaces S-S y acidificacin.
Estructura de un Anticuerpo

1.1 Divisin de anticuerpos.

Los anticuerpos pueden ser divididos en cinco clases: IgG, IgM, IgA,
IgD

e IgE, basado en el nmero de unidades Y y en el tipo de

cadena pesada. Las cadenas pesadas de IgG, IgM, IgA, IgD e

IgE, son conocidas como gamma, mu, alpha, delta y psilon. Las
cadenas ligeras de cualquier anticuerpo pueden ser clasificadas
como tipo kappa

o lambda, basadas en pequeas diferencias

estructurales polipeptdicas; sin embargo, las cadenas pesadas

determinan la subclase de cada

anticuerpo.

Tabla 1. Propiedades fisicoqumicas de inmunoglobulinas humanas

Tabla 2. Propiedades fisicoqumicas de inmunoglobulinas de ratn

CAPITULO II

2. ANTICUERPOS MONOCLONALES
2.1 Definicin:

Los

anticuerpos

monoclonales

(AcMc)

estn

asociados a Innumerables acontecimientos, siendo los ms

Importantes: su obtencin, sus diferencias con los anticuerpos
policlonales (AcPc) su produccin a gran escala, por ltimo. las
perspectivas que ellos nos ofrecen en la moderna medicina
y en la Investigacin.
Son inmunoglobulinas homogneas secretadas por un slo clon
celular (clulas B y plasmticas), en las

que todas sus

reacciones con un antgeno (Ag) definido son siempre las

mismas.

2.2 Cmo se obtienen los Anticuerpos Monoclonales?

Fue en 1975 cuando George Khler y
demostraron

que

la

hibridizacIn

Csar Milstein

(fusin)

de

linfocitos

inmunes de ratn con clulas de mieloma originaban clulas

hbridas

las

cuales

podan

secretar

inmunoglobulinas

homogneas de especificidad predefinida los (anticuerpos

monoclonales).
La

tecnologa

convencional

de

produccin

de AcMc en

animales, consta de una serie de etapas que van desde la

seleccin del animal donante de linfocitos y su esquema de
inmunizacin, hasta

la

adecuada

conservacin

de los

hbridos seleccionados.
Estas etapas deben ser objeto de un cuidadoso anlisis previo,

el cual, garantice la obtencin exitosa del AcMc deseado.

De forma general esta tecnologa se encuentra basada en los

siguientes aspectos:

Los linfocitos inmunizados sintetizan su DNA por dos

vas:

endgena

o del

Salvamento. Estas

Novo y exgena o

clulas

de Bazo

del

mueren en

periodos cortos cuando se encuentran en cultivo.

La

lnea

de

hipoxantinguanidin

mieloma

fosforribosil

utilizada
-

en

transferasa

negativas (HGPRT) caracterstica por la cual no

sintetizan DNA por la va exgena, realzndose
nicamente la sntesis por la va endgena. Estas
clulas en

cultivo se mantienen viables y se

reproducen rpidamente.

2.3 APLICACIONES DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.

En la actualidad los AcMc presentan aplicaciones muy tiles
en la Inmunologa. Bioqumica, Histologa. Biologa celular y
otras especialidades.
Definicin de sub-poblaciones celulares.
Tipificacin

de

antgenos

de

tejido

grupo

sanguneo.
Diagnstico y tratamiento de enfermedades
infecciosas y parasitarias.
Deteccin de los niveles circulantes de hormonas
y otros factores sricos.

Demostracin de daos tisulares.

Deteccin de txicos, mutgenos y drogas.
Fabricacin de antivenenos.
Diagnstico, seguimiento y tratamiento de tumores

malignos.
Facilitacin de trasplante de rganos y tejidos.
2.4 PERSPECTIVAS DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.
La aplicacin de AcMc Murinos (fusin de linfocitos y mielomas
de ratn). Se ha visto limitada cuando stos son administrados
en los seres humanos de manera repetitiva. Provocndose
respuestas colaterales indeseadas.

Es as que las investigaciones se han intensificado en la

produccin de AcMc Humanos con objeto de superar estos
problemas y

penetrar

as.

En el conocimiento de los

mecanismos de la respuesta humoral humana,

su relevancia

en el caso del cncer, en las enfermedades autoinmunes y en

los procesos alrgicos.
No obstante, la tecnologa de obtencin de AcMc Humanos
est menos desarrollada

que para el caso de los AcMc

Murinos, siendo el principal problema, la dificultad de obtener

los linfocitos inmunes. En la actualidad, la produccin de
AcMc Humanos

se viene realizando por las siguientes

opciones:Procedimientos de inmunizacin y estimulacin in vitro

de Linfocitos humanos. Fucionados con una lnea de mieloma
humana.

 Con Linfocitos humanos transformados con el virus

Epstein Barr (EBV) fusionados con una lnea de mieloma
humana.
Con Linfocitos B humanos fundidos con lneas de mieloma
de ratn o rata (Heterohibridonas).
Otra alternativa para evitar los problemas asociados al uso
teraputico de los AcMc Murinos, son los Anticuerpos
Quimricos,

los

cuales

se

obtienen

base

de

manipulaciones genticas. De forma general se construyen

por el ensamblado de secuencia de genes, que codifican las
regiones variables de las cadenas ligeras y pesadas de un
Ac de ratn, con las regiones constantes de las cadenas de
inmunoglobulina humana. Posteriormente, se procede a la
transfeccin de esos genes a un determinado mieloma.

2.5 SISTEMAS

DE

PRODUCCIN

MASIVAS

DE

LOS

ANTICUERPOS MONOCLONALES.
Los sistemas de produccin AcMc se han catalogado de acuerdo
a la cantidad de Ac que se obtienen, en pequea, mediana y gran
escala; estos sistemas pueden ser elaborados in vivo y en vitro
respectivamente.
In vivo se produce a partir de ascitis tumoral de ratones o ratas,
procedimiento por el cual se obtienen pequeas cantidades
(alrededor de 30 mg por raton). Es lgico pensar que para un
escalado hasta niveles de Kg., que son necesarios para estudio

de tratamiento e imgenes de grandes grupos de pacientes

afectados de cncer, se consumiran decenas de miles de
ratones, lo cual, elevara los costos tanto econmicos, como de
trabajo.
Como una alternativa se tiene el cultivo celular in vitro, donde las
clulas pueden mantenerse inmovilizadas o en suspensiones
homogneas, requirindose siempre una contante perfusin de
medio frasco, el cual, permitir la viabilidad de las clulas por
tiempos prolongados. Para este fin, se han propuesto los
siguientes mtodos:
Cultivo estacionario en botella roller.
Encapsulacin en Alginato de sodio.
Perfusin en fibras huecas.
Bioreactores de burbujeo.
Bioreactores de agitacin constante.
Los cuales han permitido obtener grandes cantidades de Ac en
forma ms econmica y menos trabajosa, y que en la actualidad
estn siendo consideradas.

3. ANTICUERPOS POLICLONALES
3.1 Definicin: Anticuerpos policlonales son anticuerpos derivados de
diferentes lneas de clulas B, los linfocitos encargados de la
respuesta ante elementos ajenos (antgenos) mediante anticuerpos.
Los anticuerpos policlonales son una mezcla de inmunoglobulina,
secretados en contra de un antgeno especfico, cada una
reconociendo diferentes epitopes.
Habitualmente se obtienen de lo que se denomina un antisuero.
Obtenido de la inyeccin reiterada de un antgeno en un animal, con
el fin de generar una respuesta inmune. De este animal se toma una
muestra de sangre y de esta muestra es obtenido el suero que
finalmente es purificado para obtener la variedad de anticuerpos
policlonales de inters.

Los anticuerpo policlonales son tiles en la deteccin de protenas

que tienen niveles de expresin ms bajos, pues ms de un
anticuerpo puede unirse a una nica protena, aumentando con
ello, la seal producida. Los policlonales generados contra la
secuencia completa de protenas recombinantes se recomiendan
especficamente para inmunoprecipitaciones y otras tcnicas que
implican la conformacin nativa de la protena. Al llevar a cabo
una inmunoprecipitacin, unin maximizada del anticuerpo es
necesaria para garantizar la precipitacin de la diana y cualquier
potencial asociado, a pesar de que las regiones diana pueden ser
bloqueadas por estos asociados.
Una caracterstica de grandes molculas antignicas es que ellas
inducen la activacin de

muchas clulas B productoras de

anticuerpos en el animal inmunizado. Esta mezcla de anticuerpos

policlonales resultantes puede entonces reconocer una variedad
de eptopes

sobre el

caracterstica de

uso

antgeno, el
especial

cual

puede

ser una

en algunos procedimientos

experimentales (Figura 5). Debido a que esta mezcla de

anticuerpos policlonales reacciona con mltiples eptopes sobre la
superficie del antgeno, ellos pueden ser ms tolerantes de
cambios menores en el antgeno, por ejemplo, polimorfismo,
heterogeneidad de glicosilacin o ligera desnaturalizacin, que
los anticuerpos monoclonales (homogneos).

3.2 USO
DE
LAS
POLICLONALES.

PROPIEDADES

DE

ANTICUERPOS

Los anticuerpos policlonales frecuentemente reconocen

mltiples eptopes hacindolos ms tolerantes a pequeos
cambios en la naturaleza del antgeno. Son frecuentemente
la

opcin

preferida

para

la

deteccin

de

protenas

desnaturalizadas.

Pueden ser generados en una variedad de especies,

incluyendo conejos, cabras, ovejas,asnos, gallinas y otros,
dndole

al

usuario

muchas

opciones

en

el

diseo

experimenta.

Los anticuerpos policlonales son a veces usados cuando la

naturaleza del antgeno en una especie no estudiada no se
conoce.

Los anticuerpos policlonales se une a mltiples eptopes

y as ellos generalmente proveen una deteccin ms
robusta.

Bibliografa
1. Sindelar RD. Pharmaceutical biotechnology. An introduction for
pharmacists and pharmaceutical Scientists. 1st ed. Amsterdam: Harwood
Academic Publisher; 1997. p.288-9.
2. Rojas W, Cano LE. Inmunologa. 12a edicin. Medelln: Corporacin para
Investigaciones Biolgicas; 2001. p.155-6.
3. Gavilondo JV. Anticuerpos monoclonales. Teora y prctica. La Haba- na:
Elfos Scienticiae; 1995. p.47-51.
4. Bona CA, Bonilla FA. Textbook of immunology. Second edition.
Amsterdam: Harwood Academic Publisher; 1990.
5. Bruggemann M, Caskey HM, Teale C, Waldmann H, Williams GT, Surani
MA, Neuberger MS. A repertoire of monoclonal antibodies with human
heavy chains from transgenic mice. Proc Natl Acad Sci USA. 1989;86:670913.

Anexos