INSTRUCCIONES DE USO

MEDIOS EN PLACA LISTOS

PARA USAR
PA-254039.07

Rev.: April 2013

BD Sabouraud Glucose Agar

BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol
BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin
USO PREVISTO
BD Sabouraud Glucose Agar se utiliza para el aislamiento y el cultivo de hongos (levaduras,
mohos y dermatofitos) a partir de muestras clnicas. BD Sabouraud Agar with
Chloramphenicol, BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol y BD
Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin son medios selectivos para el aislamiento
de hongos a partir de muestras clnicas.

PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO

Mtodo microbiolgico.
Sabouraud Glucose Agar es un medio de uso general para el cultivo de dermatofitos1,2. Hoy en
da se utiliza para el aislamiento y cultivo de todos los hongos3-5. Las peptonas en Sabouraud
Glucose Agar son fuentes de factores de crecimiento nitrogenoso. La glucosa aporta una
fuente de energa para el crecimiento de microorganismos. La alta concentracin de glucosa
presenta una ventaja para el crecimiento de hongos (estables osmticamente), mientras que la
mayora de las bacterias no tolera la alta concentracin de azcar. Adems, el bajo pH es
ptimo para los hongos pero no para muchas bacterias3. Sabouraud Glucose Agar es slo
levemente selectivo frente a las bacterias.
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol BD Sabouraud Agar with Gentamicin and
Chloramphenicol y BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin son medios
selectivos para el aislamiento de hongos a partir de muestras clnicas y no clnicas. Se han
aadido agentes selectivos para inhibir las bacterias. El cloranfenicol es un antibitico de amplio
espectro que inhibe una amplia variedad de bacterias gram negativas y gram positivas, pero
puede tener un efecto inhibidor en numerosos hongos patgenos4. Se ha demostrado que los
antimicrobianos como la penicilina, la gentamicina y la estreptomicina, o una combinacin de las
mismas, son eficaces en la inhibicin de bacterias sin afectar el crecimiento fngico2-5.
Estos medios se utilizan para el aislamiento de hongos a partir de muestras clnicas o
materiales en los que se sospeche la presencia de contaminantes bacterianos. Sabouraud
Glucose Agar es uno de los medios utilizados en las pruebas de lmites microbianos en USP y
EP. 6,12

REACTIVOS
Frmulas: consultar la Tabla 1

PRECAUCIONES
. Solamente para uso profesional.
No utilizar las placas si muestran evidencia de contaminacin microbiana, decoloracin,
deshidratacin, agrietamientos o cualquier otro signo de deterioro.
Consultar los procedimientos de manipulacin asptica, riesgos bilogicos y desecho del
producto usado en el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO.

ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL

Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 C,
envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelacin y el
calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la
etiqueta en el paquete) e incubarse durante los perodos de incubacin recomendados.
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Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos pueden usarse durante una semana siempre
que se almacenen en un lugar limpio a una temperatura entre 2 y 8 C.
Tabla 1: REACTIVOS
Frmulas* por litro de agua purificada
Nombre del
producto
Ingredientes
Digerido
pancretico de
casena
Digerido pptico de
tejido animal
Glucosa
Agar
Penicilina G
Estreptomicina
Gentamicina
Cloranfenicol
pH

BD Sabouraud
Glucose Agar

BD Sabouraud
Agar with
Penicillin and
Streptomycin

BD Sabouraud
Agar with
Gentamicin and
Chloramphenicol

BD Sabouraud
Glucose Agar with
Chloramphenicol

5,0 g

5,0 g

5,0 g

5,0 g

5,0 g

5,0 g

5,0 g

5,0 g

40,0
15,0

pH 5,6 0,2

40,0
15,0
60000 UI
0,06 g

5,6 0,2

40,0
15,0

0,04
0,4
5,6 0,2

40,0
15,0

0,4
5,6 0,2

* Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO

Inocular muestras representativas con las siguientes cepas (para ms detalles, consultar el
documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO). Vase la informacin de incubacin en
la nota al pie.
Nombre del
producto

BD Sabouraud
Glucose Agar

BD Sabouraud
Agar with
Penicillin and
Streptomycin

BD Sabouraud
Agar with
Gentamicin and
Chloramphenicol

BD Sabouraud
Agar with
Chloramphenicol

Cepas de prueba
**Candida
Crecimiento de
bueno a
Crecimiento de bueno a excelente
albicans
ATCC 10231
excelente
**Saccharomyces
Crecimiento de
Crecimiento de bueno a excelente
bueno a
cerevisiae
excelente
DSM 1333
Crecimiento de
** Aspergillus
Crecimiento de bueno a excelente
bueno a
brasiliensis
excelente
ATCC16404
** Penicillium
Crecimiento de
bueno a
Crecimiento de bueno a excelente
roquefortii
ATCC 9295
excelente
Crecimiento de
***Trichophyton
Crecimiento de bueno a excelente
bueno a
mentagrophytes
excelente
ATCC 9533
*Staphylococcus
Sin inhibicin
Inhibicin completa.
aureus
ATCC 25923
*Escherichia coli
Sin inhibicin
Inhibicin completa.
ATCC 25922
Sin inocular
mbar claro
Incubacin: *48 h 35-37 C / **</= 5 days, 20-25 C, atmsfera aerobia

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PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados:
BD Sabouraud Glucose Agar,
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol,
BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol, o
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin, todos suministrados en placas
Stacker de 90 mm. Controladas microbiolgicamente.
Materiales no suministrados
Medios de cultivo auxiliar, reactivos y el equipo de laboratorio que se requiera.
Tipos de muestras
Los productos descritos en este documento son medios de aislamiento para hongos y pueden
utilizarse (alternativamente o en combinacin de dos de dichos medios) para todas las muestras
clnicas (vase tambin CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL
PROCEDIMIENTO). Los medios tambin se pueden utilizar en muchas reas de microbiologa
industrial y en el control de la higiene.
Procedimiento de anlisis
Extender las muestras tan pronto como sea posible despus de recibirlas en el laboratorio. La
placa de extensin se utiliza principalmente para aislar cultivos puros de las muestras que
contienen flora mixta. Si, por el contrario, el material se cultiva directamente empleando una
torunda, hacerla girar en una seccin pequea cercana al borde, extendiendo luego a partir de
esta rea inoculada.
Si las muestras estn formadas por raspados de piel, cabello o uas, colocar el material en
el centro de la superficie del medio. Si es posible, las partculas ms grandes deben
presionarse levemente sobre la superficie mediante pinzas estriles para proporcionar
contacto con el medio.
Para la deteccin de dermatofitos, tambin se incluye BD Dermatophyte Agar o BD
Mycosel Agar.
Si se utiliza BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol, BD Sabouraud Agar with
Gentamicin and Chloramphenicol o BD Sabouraud Agar with Penicillin and
Streptomycin, utilizar adems una placa de BD Sabouraud Glucose Agar.
Tambin debe inocularse un medio no selectivo tal como BD Columbia Agar with 5%
Sheep Blood para proporcionar una indicacin de los patgenos bacterianos presentes en
la muestra.
Si se utiliza para la deteccin de levaduras (por ejemplo, la especie Candida) en las muestras
clnicas, incubar durante 48 horas a 30 35 C. Si se sospechan hongos filamentosos, incluidos
los dermatofitos, incubar hasta un mximo de una semana a 25 30 C. Los dermatofitos a
veces necesitan tres semanas o ms para producir crecimiento. Si se utiliza para control de la
higiene, incubar durante un mximo de 7 das a 20 25 C. Si la incubacin es ms prolongada
que 3 das, proporcionar la humedad adecuada. Las placas pueden sellarse con cinta de
plstico adhesiva para evitar la deshidratacin. Para obtener detalles acerca de la temperatura
de incubacin para crecimiento, consultar las referencias5,7-10.
Resultados
Despus de una incubacin suficiente, las placas pueden mostrar colonias aisladas en las reas
extendidas y crecimiento confluente en reas de inoculacin densa.
Examinar la posible presencia de colonias fngicas con color y morfologa habituales en las
placas. Realizar pruebas bioqumicas y procedimientos microscpicos y serolgicos para
confirmar los resultados 6-9.
Dado el gran nmero de hongos patgenos existentes, no se dan detalles acerca de su
apariencia en este documento. Consultar las referencias2,3, 5-9.

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CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Los medios presentados en este documento son medios estndar para el aislamiento y cultivo
de hongos para todo tipo de muestras clnicas y no clnicas4-11.
Debido al amplio intervalo de temperaturas de crecimiento de los hongos, puede ser necesario
inocular varias placas con el mismo medio e incubarlas a diferentes temperaturas. Consultar la
seccin Procedimiento de anlisis y las referencias correspondientes5, 7-10.
Dado que BD Sabouraud Glucose Agares presenta selectividad dbil, crecern bacterias en el
medio, en especial despus de un periodo de incubacin prolongado. Si se sospecha
contaminacin bacteriana de las muestras, materiales o reas objeto de investigacin, deben
utilizarse medios con una selectividad mayor, por ejemplo BD Sabouraud Agar with
Chloramphenicol, BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol o BD
Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin para el cultivo de la muestra.
Nocardia y Actinomyces son bacterias filamentosas (no son hongos!) y, por lo tanto, no crecen
en todos los medios Sabouraud con inhibidores bacterianos.

REFERENCIAS
1. Sabouraud, R. 1892. Contribution a l'etude de la trichophytie humaine. Etude clinique,
microscopique et bacterioloqique sur la pluralit des trichophytons de l'homme. Ann.
Dermatol. Syphil. 3: 1061-1087.
2. Haley, L.D., J. Trandel, and M.B. Coyle. 1980. Cumitech 11, Practical methods for culture
and identification of fungi in the clinical microbiology laboratory. Coordinating ed., J.C.
Sherris. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Ajello, L., L.K. Georg, W. Kaplan, and L. Kaufman. 1963. CDC laboratory manual for
medical mycology. PHS Publication No. 994, U.S. Government Printing Office, Washington,
D.C.
4. MacFaddin, J.F. 1985. Media for isolation-cultivation- identification-maintenance of medical
bacteria. vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore.
5. Sutton, D.A. 2003. Specimen Collection, transport, and processing: mycology. In: Murray,
P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
6. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 2009. The U.S. Pharmacopeia 32/The national formulary
27--2009. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Md. USA
7. Larone, D.H. 2002. Medically important fungi: a guide to identification. 4th ed. American
Society for Microbiology, Washington, D.C.
8. Summerbell, R.C. 2003. Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton, and agents of
superficial mycoses. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H.
Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
9. Kwon-Chung, K.J., and J.E. Bennett. 1992. Medical mycology. Lea & Febiger, Philadelphia.
10. Pfaller, M.A., and R.A. Fromtling (section ed.). 2003. Mycology. In: Murray, P. R., E. J.
Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
11. Brun, S., et al. 2001. Evaluation of five commercial Sabouraud gentamicin-chloramphenicol
agar media. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20: 718-723.
12. Council of Europe, 2008. European Pharmacopoeia, 6.1. European Pharmacopoeia
Secretariat. Strasbourg/France.

ENVASE/DISPONIBILIDAD
BD Sabouraud Glucose Agar
N de cat. 254039
Medios en placa listos para usar, 20 placas
N de cat. 254083
Medios en placa listos para usar, 120 placas
BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol
N de cat. 254091
Medios en placa listos para usar, 20 placas

PA-254039.07

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BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol

N de cat. 254041
Medios en placa listos para usar, 20 placas
N de cat. 254096
Medios en placa listos para usar, 120 placas
BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin
N de cat. 254451
Medios en placa listos para usar, 20 placas

INFORMACIN ADICIONAL
Para obtener ms informacin, dirjase a su representante local de BD.

Becton Dickinson GmbH

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D-69126 Heidelberg/Germany
Phone: +49-62 21-30 50
Fax: +49-62 21-30 52 16
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