MANUALHISTOLOGIAmod

UNIVERSIDAD AUTNOMA
METROPOLITANA
MANUAL DE PRCTICAS DE
HISTOLOGA Y ANATOMA
ANIMAL
ELABORADO POR
LOS DOCTORES
ARMANDO FERREIRA NUO
Y ADRIANA MORALES OTAL
REA DE NEUROCIENCIAS
DEPARTAMENTO DE
BIOLOGA DE LA REPRODUCCIN
26
NDICE
PRLOGO
.3
CUERPO DE LA OBRA
PRCTICA
15
PRCTICA
2.11
PRCTICA
3.17
PRCTICA
4.21
PRCTICA
5.24
PROGRAMA DEL
CURSO.28
BIBLIOGRAFA
GENERAL..31
APNDICES
34
LISTA DEL MATERIAL POR EQUIPO PARA LAS PRCTICAS DEL CURSO
34
TCNICA DE HEMATOXILINAEOSINA..35
26
PRLOGO
El presente
Manual de Prcticas del Laboratorio de Histologa y
Anatoma Animal est diseado como material didctico de laboratorio

para la UEA de Histologa y Anatoma Animal, que forma parte de los
planes de estudio de la Licenciatura en Biologa Experimental, impartida
en la UAM Iztapalapa.
Bsicamente este manual tiene por objetivo que los alumnos del
curso conozcan y practiquen la tcnica de Hematoxilina-Eosina, que es
una de las tcnicas de rutina ms empleadas en histologa.
El cuaderno comprende las siguientes prcticas:
1.
Revisin, limpieza, mantenimiento e iluminacin Khler en el
microscopio de campo claro.

2.
Elaboracin de reactivos.
3.
Perfusin cardiaca.
4.
Deshidratacin e inclusin en parafina.
5.
Corte, tincin y montaje de tejidos.
26
De estas prcticas, slo las tres primeras estn diseadas para

realizarse en sesiones de dos horas. En cambio, la cuarta prctica
requerir de dos sesiones, mientras que la quinta, de tres sesiones de
dos horas cada una, ya que consideramos que es necesario que los
alumnos repitan algunos de los procedimientos de esta tcnica
histolgica, para obtener un mejor resultado en su aprendizaje. Adems,
se tiene contemplado que para la realizacin de estas prcticas, los
alumnos formen equipos de 5 a 7 personas. Cada equipo deber
entregar una semana despus de concluir la prctica correspondiente,
un reporte cientfico. Este reporte deber incluir introduccin, objetivos,
materiales, mtodos, resultados y bibliografa.
Consideramos que este manual es idneo para el curso de
Histologa y Anatoma Animal, ya que para la realizacin de estos
reportes, en lugar de proporcionarles informacin a los alumnos sobre
cada paso de la tcnica de hematoxilina-eosina, hemos optado por
indicarles en la introduccin de cada prctica, la informacin que los
alumnos debern buscar y reportar como introduccin de su reporte, con
la finalidad de que al hacerlo, comprendan mejor qu es?, cmo se
realiza? para qu? sirve cada aspecto de esta tcnica. De manera
semejante, en la seccin de materiales, se les pide a los alumnos que
enlisten todos los materiales que se emplearon en cada prctica, para la
realizacin de la parte correspondiente de esta tcnica histolgica. En la
metodologa, los alumnos debern describir la forma en que realizaron
cada
parte
de
esta
tcnica,
con
el
fin
de
corroborar
que
la
comprendieron y realizaron correctamente. En la seccin de resultados

de cada prctica, se incluye un cuestionario donde se les pregunta a los
alumnos, sobre aspectos relevantes de las diferentes partes de esta
tcnica, con el fin de que investiguen para qu sirven o que finalidad
tiene el empleo de ciertos reactivos, soluciones o mtodos histolgicos,
26
que utilizaron, as como de otros que podran haberse empleado para

mejorar esta tcnica histolgica.
Adems, en cada prctica se tiene contemplado que los alumnos
observen en microscopios pticos las clulas o tejidos histolgicos ms
representativos de este curso y las dibujen. Para ello en los resultados
de cada prctica, se les dan indicaciones especficas que debern tener
en cuenta, para la realizacin del dibujo o esquema, sobre el tamao, la
forma y el color de cada clula o tejido, mismas que debern tener en
cuenta para su identificacin.
Por ltimo, cada prctica incluye citas bibliogrficas de consulta
que se les sugiere a los alumnos para la realizacin del reporte
correspondiente.
PRCTICA No. 1
(1 sesin)
REVISIN, LIMPIEZA, MANTENIMIENTO E ILUMINACIN KHLER

EN EL MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO
INTRODUCCIN
El microscopio es un instrumento fundamental dentro de las
ciencias biolgicas y todo bilogo debe de conocer sus partes, su uso y
reconocer que partes no sirven o estn deterioradas. Asimismo, debe
saber cmo ajustarlo y darle un mantenimiento bsico, sobre todo si
tomamos en cuenta que debido a su continuo uso, los microscopios se
desajustan ensucian y descomponen. El microscopio consta de 3
26
sistemas: el mecnico, el ptico y de iluminacin. Para la elaboracin de

la introduccin de esta prctica describe qu partes del microscopio
pertenecen a cada sistema indicando su funcin. Adems anexe un
esquema del microscopio donde se muestren todas sus partes.
OBJETIVOS
a) Conocer las partes del microscopio de campo claro y su funcin
b) Aprender a realizar la iluminacin Khler
c) Saber ajustar y darle un mantenimiento bsico al microscopio
d) Reconocer las fallas que tienen los microscopios del laboratorio
MATERIAL
Proporcionado por el laboratorio. 2 Microscopios de campo claro, por
equipo. 5 cubreobjetos, 5 portaobjetos (por equipo) y aceite de
inmersin.
Proporcionado por los alumnos. Esquema de un microscopio ptico
de campo claro.
METODOLOGA
En caso de estar en mal estado los microscopios, en los
resultados los alumnos de cada equipo harn un reporte por escrito del
estado en que se encuentra el microscopio que se les proporcion
anotando los siguientes datos del microscopio. (Si son nuevos los
microscopios favor de saltarse esta parte).
1.
Marca del microscopio y nmero de inventario de la UAM.

COMENTARIOS ADICIONALES: Tacha o escribe la respuesta que
caracterice el estado del microscopio.
2.
Iluminacin: Sirve el foco Si. No

.
3.
Estado del ocular. Bueno. Regular. Malo.

Rayado
26
Con mucho cuidado limpie con alcohol al 10 % y algodn el ocular por

dentro y por fuera.
4.
Objetivos. Cuantos objetivos tiene su microscopio.

Primer objetivo: Aumento ___Estado. Bueno. Regular. Malo.
Rayado
Segundo objetivo: Aumento____Estado. Bueno. Regular. Malo.
Rayado.
Tercer objetivo: Aumento____Estado. Bueno. Regular. Malo.
Rayado
Con mucho cuidado limpie con alcohol al 10 % y algodn cada objetivo

por dentro y por fuera.
5.
Pinza de portaobjetos. Tiene? Si. No. Sirve? Si.

No..
6.
Condensador Sirve? Si.

No
7.
Tornillo micromtrico. Sirve? Si. No. Se desajusta. Si.

No
8.
Si al hacer la iluminacin Khler falla algo ms del microscopio

reprtelo
aqu
..
INSTRUCCIONES PARA REALIZAR LA ILUMINACIN DE KHLER
1.
Abra el diafragma de iris y el diafragma de campo.
2.
Suba el condensador hasta el tope.
3.
Seleccione el objetivo de bajo aumento de 10X.
4.
Enfoque una preparacin con el tornillo macromtrico, para realizar el

enfoque fino use el tornillo micromtrico. Ajuste la distancia
interpupilar. Afine el enfoque por el ojo izquierdo con el dipter.
5.
Cierre el diafragma de campo hasta encontrar una luz.
26
6.
Descienda el condensador hasta ver ntido el diafragma de campo que

aparecer como un hexgono.
7.
Centre el haz de luz (hexgono) con los tornillos posteriores.
8.
Abra el diafragma hasta llenar el campo.
9.
Contraste la imagen con el diafragma de iris.
10.
Para observar sus muestras con el objetivo de 40x y 100x,
solamente afine el enfoque con el tornillo micromtrico.

11. Con un hisopo o cotonete raspe la superficie interna de la mejilla y
frtelo sobre un portaobjetos perfectamente limpio, agregue una gota
de azul de metileno al 0.2 %, coloque el cubreobjetos y observe al
microscopio. Otras muestras a observar sern proporcionadas por el
profesor.
12.
Agregue gotas de aceite de lubricacin a aquellas partes del
miscroscopio que lo requieran.

RESULTADOS
Escriba en los resultados el reporte que se solicita en la
metodologa
en caso de no ser nuevos o estar en buen estado los
microscopios.
Haga un dibujo del microscopio de campo claro con sus partes e
indique a qu componente pertenece: sealando en azul el mecnico, en
rojo el ptico y en amarillo el de iluminacin.
REPORTE DE LAMINILLAS HISTOLGICAS OBSERVADAS
En los resultados de esta prctica, conteste este cuestionario y
realice las actividades que se sealan en relacin a las caractersticas de
las clulas:
TEJIDO EPITELIAL.
1. EPITELIO BUCAL. Figura 1.
26
a) dibuje las clulas del epitelio bucal de 2 cm de dimetro visto con el

objetivo de 40 x
y al pie de la figura escriba
b) de qu forma es su citoplasma
.....................................................
c) describa cmo es su ncleo
....................................................
d) cul es su tamao en
micras................................................................
e) cul es su funcin ?
.......................................................
f) cul es la clasificacin de este epitelio o que tipo de epitelio
es......................
2. EPITELIO INTESTINAL. Figura 2.
Dibuje las clulas del epitelio bucal de 2 cm de dimetro visto con el
objetivo de 40 x y al pie de la figura escriba, de acuerdo con la tcnica
de Hematoxilina-Eosina.
a) qu forma y que color tiene su citoplasma
......................
b) describa cmo es y que color tiene su ncleo
c) cul es la funcin de este epitelio............

..
d) cul es la clasificacin de este epitelio o que tipo de epitelio
es.....................
3. EPITELIO UTERINO. Figura 3.
26
Dibuje las clulas del epitelio de 2 cm de dimetro visto con el

de Hematoxilina-Eosina.
a) qu forma y que color tiene el citoplasma de la ltima capa de
clulas .........................................
..
.
es.....................
4. EPITELIO EPENDIMARIO DE LA PIA MADRE CEREBRAL. Figura 4.
de Kluvr-Barrera.
a) qu forma y que color tiene el citoplasma de las
clulas...........
b) Describa cmo es y que color tiene su ncleo
...
.
es......................
5. EPITELIO DE VASO SANGUNEO. Figura 5.
de Hematoxilina-Eosina:
26
a) qu forma y que color tiene el citoplasma de las clulas

............
..

es.........................
6. EPITELIO GLANDULAR DE TESTCULO. Figura 6.
Dibuje las clulas del epitelio de un tbulo seminfero de 10 cm de
dimetro visto con el objetivo de 40 x y al pie de la figura describa, de
acuerdo con la tcnica de Hematoxilina-Eosina, qu nombre
(espermatogonia, espermatocito, espermtida, espermatozoide?)
forma y color tienen el citoplasma y ncleo de las clulas de:
a) la base del tbulo (nombre..citoplasma,
forma.., color.....................; ncleo,
forma)
b) la primera fila de clulas que sigue despus de las clulas de la
base del tbulo (nombre....citoplasma,
forma., color.....................; ncleo,
forma)
c) la segunda fila de clulas que sigue despus de las clulas de la
forma)
d) la tercera fila de clulas que sigue despus de las clulas de la
forma)
26
e) la cuarta fila de clulas que sigue despus de las clulas de la

forma)
f) cul es la funcin de este epitelio
glandular
g) cul es la clasificacin de este epitelio
glandular..........................
BIBLIOGRAFA SUGERIDA
1. Estrada, F. E., Peralta, Z. L., Rivas, M. P. (1982). Manual de tcnicas
histolgicas. AGT Editor, S.A. Mxico. 140 pp.
2. Lynch, M. J., Raphael, S. S., Spares, P. D., Inwood, M. J. H. (1977).
Mtodos de Laboratorio. Ed. Interamericana, S.A. 1522 pp.
PRCTICA No. 2. ELABORACIN DE REACTIVOS

(1 sesin)
INTRODUCCIN
26
En un mximo de dos cuartillas escriba en la introduccin de

manera resumida: a) en qu consisten, b) para qu sirven y c) cmo se
elaboran, los distintos reactivos y tcnicas histolgicas que se citan a
continuacin:
Reactivos.
1. Los fijadores. 2. El Buffer de Fosfatos. 3. El Formol Amortiguado, 4. El
alcohol cido, 5. La solucin de Scott.
Tcnicas histolgicas.
1. La deshidratacin de tejidos. 2. La inclusin en parafina. 3. La tincin.
4. El montaje de las laminillas.
OBJETIVO
Elaborar los reactivos que se emplearn para la realizacin de la
tcnica histolgica de Hematoxilina-Eosina y comprender su funcin de
esta tcnica.
MATERIALES
Enliste qu reactivos, qu cantidades (gr., ml) y qu materiales
(vasos, probetas, etc.), se necesitaron para elaborar los siguientes
reactivos histolgicos en la prctica:
1) Formol, 2) Solucin de Scott, 3) Alcoholes del tren de tincin al
70% y 80% 4) Amoniaco 5) Bicarbonato de sodio 6) Sulfato de
magnesio 7) Acido Clorhdrico
MTODOS
26
PREPARACIN DE LA SOLUCIN AMORTIGUADORA DE BUFFER DE

FOSFATOS
Solucin A Fosfato de sodio monobsico (0.1 M)
Fosfato de sodio monobsico (Na2HPO4, PM 137.99)
PM 137.99 X 0.1 = 13.79 g de Fosfato de sodio monobsico aforados a
1 litro de agua destilada.
Solucin B Fosfato de sodio dibsico (0.1 M)
Fosfato de sodio dibsico (Na2PO4 dihidratado; PM 141.96 x 0.1
PM 141.96 x 0.1= 14.196 g de Fosfato de sodio dibsico aforados a 1
litro de agua destilada.
Solucin de uso. Mezclar Solucin A (810 ml) + Solucin B (190 ml).
Solucin A ....................................................................... 810 ml.
Solucin B........................................................................ 190 ml.
Total de Solucin Amortiguada. ..........................................1000 ml.
FORMOL AMORTIGUADO
100 ml de Formol puro + 900 ml de solucin final de buffer fosfato
recin elaborada.
SOLUCIN AMONIACAL
1 ml de amoniaco o hidrxido de amonio + 99 ml de alcohol 80 %
SOLUCIN SCOTT
2 gr bicarbonato de sodio + 20 gr sulfato de magnesio + 1000 ml de
agua destilada
Disolver sales por separado con agua destilada antes de aadir toda.
ALCOHOL CIDO
1 ml de cido Clorhdrico + 99 ml de Alcohol al 70 %
RESULTADOS
Describa para cada uno de los reactivos mencionados, cul es su
funcin y para que se utilizan.
26
Describa cmo se prepararon los siguientes reactivos histolgicos:

1) El Formol amortiguado, 2) La Solucin de Scott, 3) Los Alcoholes del
tren de tincin al 70% y 80% y 4) El Alcohol-cido, 5) Solucin Amoniacal
En los resultados de esta prctica, conteste este cuestionario y
realice las actividades que se sealan en relacin a las caractersticas de
las clulas:
TEJIDO CONJUNTIVO LAXO. CLULAS SANGUNEAS.
1. Eritrocito. Figura 1.
a) Dibuje un eritrocito de 2 cm de dimetro visto con el objetivo de
40 x
y al pie de la figura escriba, con la Tcnica de Wright.
b) de qu color es su
citoplasma..
c) Describa cmo es su
ncleo..
d) cul es su tamao en
micras.
e) cul es su funcin?
2. Neutrfilo. Figura 2.
a) Dibuje un neutrfilo de 2 cm de dimetro, sealando su ncleo,
citoplasma y grnulos con los colores y formas que tiene en la
preparacin a 40 x
Con la Tcnica de Wright, describa y seale en el dibujo:
26
citoplasma.
c) de qu color son sus
grnulos.
d) de qu color es su
ncleo..
e) de qu forma es su
ncleo.
f) cul es su tamao en
micras...
g) cul es su funcin?
.
h) escriba 2 caractersticas que lo distingan de las dems clulas
sanguneas que se observan en la preparacin
3. Linfocito. Figura 3.
a) Dibuje un linfocito de 2 cm de dimetro, sealando su ncleo y
citoplasma, conservando los colores y formas que tiene en la
preparacin a 40 x
citoplasma....
c) de qu color es su
ncleo..
d) de qu forma es su
ncleo....
e) cul es su funcin?..
....
f) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas
sanguneas de la preparacin al linfocito y al monocito.
26
4. Monocito. Figura 4.
a) Dibuje un Monocito de 2 cm de dimetro sealando su ncleo y
preparacin.
b) de qu color y forma es su citoplasma
..
c) de qu color es su
ncleo...
d) de qu forma es su
ncleo...
e) cul es su tamao en
micras..
f) cul es su funcin?
....
g) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas
sanguneas de la preparacin al Monocito.
5.
Plaquetas. Figura 5.
a) Dibuje 10 Plaquetas de 1 cm conservando los colores y formas
que tiene
en la preparacin a 40 x.
b) cul es su funcin?
..
6. Fibroblastos. Figura 6.
a) Dibuje 5 fibroblastos de 2 cm sealando su ncleo y citoplasma,
conservando los colores y formas que tiene en la preparacin a 40
x
Con la tcnica de Hematoxilina-Eosina, describa y seale en el
dibujo:
26
b) de qu color y forma es su citoplasma ..

c) de qu color es su ncleo ..
d) de qu forma es su ncleo ..
e) cul es su tamao en micras.
f) cul es su funcin?
....
g) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas de
la preparacin.
7. Cartlago hialino. Figura 7.
Dibuje el cartlago hialino, sealando donde esta el pericondrio,
los
condroblastos, los condrocitos y la matriz del cartlago hialino.
8. Condroblasto. Figura 8.
a) Dibuje un condroblasto de 2 cm sealando su ncleo y
citoplasma,
x
dibujo:
b) de qu color y forma es su citoplasma .
..
c) de qu color es su ncleo
...
d) de qu forma es su ncleo
.
....
f) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas de
la preparacin.
26
9. Condrocito. Figura 9.
a) Dibuje un condrocito de 2 cm sealando su ncleo y citoplasma,
x
dibujo:
..
...
.
....
la preparacin.
1. Di Fiore, S. H. Mariano, S. H. (1986). Nuevo Atlas de Histologa
Normal. Sptima edicin. Argentina. Ed. El Ateneo. 330 pp.
2. Ham. A. W. y Cormack, D. H. (1992). Tratado de Histologa. Octava
edicin. Ed. Interamericana. Mxico. 1026 pp.
3. Junqueira, L. C. y Carneiro, J. (1986). Histologa Bsica. Cuarta
Edicin Barcelona, Espaa. Salvat Editores. 506 pp.
4. Lynch, M.J., Raphael, S.S., Spares, P.D., Inwood, M.J.H. (1977).
Mtodos de laboratorio. Ed. Interamericana, S.A. 1522 pp.
26
PRCTICA No. 3. PERFUSIN CARDIACA

(1 sesin)
INTRODUCCIN
a) Describa brevemente la tcnica de perfusin tisular por va
intracardiaca para la fijacin de tejidos.
b) Describa en qu casos se recomienda emplear esta tcnica de
fijacin.
c) Cul es su importancia en histologa?
MATERIAL
Enliste todos
los materiales, animales y reactivos que se
emplearon para realizar esta tcnica.

MTODOS
Describa la tcnica de perfusin de tejidos tal y como se realiz en
el laboratorio con la rata.
RESULTADOS
1. Explique por qu razn se corta la cartida o el ventrculo derecho
durante la perfusin, sealando qu pasara si esto no se realizar?
2. Tomando en cuenta la circulacin sangunea, indique por qu razn se
introduce la aguja en el ventrculo izquierdo.
3. Mencione cul es la funcin de la bomba de perfusin?
4. Describa otro mtodo de perfusin de tejidos que no emplee la bomba
de perfusin.
26
5. Mencione 3 signos que se observan en el animal que indican que la

perfusin se ha completado adecuadamente.
6. Indique por qu razn se emplea en la perfusin el formaldehido
amortiguado con fosfatos y no formaldehido al 10 %?
TEJIDO CONJUNTIVO LAXO.
1. Adipocito o clula grasa. Figura 1.
a) Dibuje 5 adipocitos de 2 cm sealando su ncleo y citoplasma,
x
dibujo:
...
..
...
e) cul es su tamao en micras..
.
f) cul es la funcin de esta clula..
..
g) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas de
la preparacin.
2. Hueso. Figura 2.
Dibuje el hueso, sealando donde esta el periostio, los
osteoblastos, los osteocitos, adipocitos y la matriz del hueso.
26
3. Osteoblasto. Figura 3.
a) Dibuje un osteoblasto de 2 cm sealando su ncleo y
citoplasma,
x
dibujo:
..
...
.
....
la preparacin.
4. Osteocito. Figura 4.
a) Dibuje un osteocito de 2 cm sealando su ncleo y citoplasma,
x
dibujo:
..
...
.
....
26

la preparacin.
5. Osteoclasto. Figura 5.
a) Dibuje un osteoclasto de 2 cm sealando su ncleo y
citoplasma,
x
dibujo:
..
...
.
....
la preparacin.
6. Adipocito. Figura 6.
a) Dibuje un adipocito de 2 cm de la medula sea, sealando su
ncleo y citoplasma, conservando los colores y formas que tiene en la
preparacin a 40 x
dibujo:
..
...
.
26
....
la preparacin.
26
PRCTICA No.4
DESHIDRATACIN E INCLUSIN EN PARAFINA
(2 sesiones)
INTRODUCCIN
Describa lo siguiente:
a)
Qu es la deshidratacin y la inclusin en parafina?.
b)
Cul es la finalidad de la deshidratacin y la inclusin
en parafina en la realizacin de las tcnicas histolgicas? (Si no

encuentra la informacin en un libro consulte a un histotecnlogo).
MATERIAL
Enliste materiales y reactivos que se emplearon para realizar
esta tcnica.
MTODOS
Describa la tcnica de deshidratacin considerando los tiempos
que debe realizarse en cada cambio.
Describa la tcnica de inclusin en parafina tal y como se realiz
en el laboratorio.
RESULTADOS
1) Explique cul es la funcin del xilol en este proceso.
2) Mencione cul es la funcin de la parafina en esta tcnica
histolgica.
3) Qu otras substancias se pueden emplear en lugar de parafina
para incluir.
26
4) Por qu razn el tejido que se incluye debe de acomodarse

hasta el fondo en la mejor posicin?
5) Qu le pasa al bloque de parafina si al incluir el tejido se vierte
la parafina en momentos diferentes con temperaturas diferentes?
6) Qu pasa si la parafina empleada para la inclusin no es muy
fina o pura?
1. Msculo Esqueltico. Figura 1.
a) Dibuje 5 fibras de Msculo Esqueltico de 2 cm sealando su
preparacin a 40 x
dibujo:
...
c) de qu color son sus ncleos
..
d) donde se localizan sus ncleos
...
e) cul es su tamao en micras de cada fibra..
.
f) cul es la funcin de esta clula..
..
g) escriba 2 caractersticas que distingan al msculo
esqueltico.
2. Msculo Liso. Figura 2.
26
a) Dibuje 5 fibras de Msculo Liso de 2 cm sealando su ncleo y

preparacin a 40 x
dibujo:
..
...
d) ) donde se localizan sus ncleos
.
e) cul es la funcin de esta clula .
....
la preparacin observada.
3. Msculo Cardiaco. Figura 3.

a) Dibuje 5 fibras de Msculo Cardiaco de 2 cm sealando su
preparacin a 40 x
dibujo:
..
...
d) ) donde se localizan sus ncleos
.
e) cules son y cul es la funcin de los discos intercalares
26

la preparacin.
(Si no encuentran esta bibliografa entonces consultar a un
histotecnlogo)
PRCTICA No. 5
CORTE, TINCIN Y MONTAJE DE TEJIDOS.
(3 sesiones)
INTRODUCCIN
Describa brevemente (mximo 2 cuartillas):
26
a) En qu consiste y qu estructuras intracelulares tie la tcnica

ordinaria de Hematoxilina-Eosina (H-E).
b) Cul es el colorante acidfilo y cul es el basfilo, de qu color se
observan esas estructuras celulares.
c) Menciona la importancia de cada uno de los colorantes.
MATERIAL
Enliste todos los materiales y reactivos que se emplearon para
realizar esta prctica.
MTODOS
Describa brevemente cmo se realizaron los cortes en microtmo
de rotacin manual, cmo se llev a cabo la tincin y el montaje del
tejido seleccionado?
1)
Describa en que casos se utiliza el microtmo de rotacin manual

y en cuales el criostato.
RESULTADOS
Esquematiza con un dibujo un ejemplo de un corte teido con la
tcnica de Hematoxilina-Eosina.
Explica qu sucedera si llegase a faltar tiempo o excederse de
tiempo en algn colorante, en algunos de los alcoholes o en el xilol?
Puede corregirse?, cmo se realiza para cada uno de los casos?
Explica que tipos de montaje se conocen y cmo debe de llevarse
a cabo un buen procesamiento de montaje de tejidos (mtodo utilizado
en el laboratorio).
Menciona 5 ejemplos de errores que no deben de cometerse
durante el montaje de tejidos.
26

1. Cerebelo. Figura 1.
Dibuje el cerebelo de rata mostrando y sealando en el dibujo las
siguientes partes (Tcnica de tincin Klver-Barrera):
a) Clulas ependimarias
b) Capa molecular
c) Capa granular
d) Materia gris y materia blanca.
2. Clulas de Purkinje. Figura 2.
a) Dibuje una Clula de Purkinje de 2 cm sealando su ncleo y
citoplasma,
x
Con la tcnica de Klver- Barrera, describa y seale en el dibujo:
..
...
.
e) cul es la funcin de esta clula? .
....
la preparacin.
3. Oligodentrocitos. Figura 3.
a) Dibuje un Oligodentrocito de 2 cm sealando su ncleo y
citoplasma,
26

x
Con la tcnica de Klver-Barrera, describa y seale en el dibujo:
..
...
.
e) cul es la funcin de esta clula?.
....
la preparacin.
4. Astrocito Fibroso. Figura 4.
a) Dibuje un Astrocito Protoplsmico de 2 cm sealando su ncleo
y citoplasma, conservando los colores y formas que tiene en la
preparacin a 40 x
..
...
.
e) cul es la funcin de esta clula? .
....
la preparacin.
5. Neuronas piramidales. Figura 4.
26
a) Dibuje tres Neuronas piramidales de 2 cm cada una sealando

su ncleo y citoplasma, conservando los colores y formas que tiene en la
preparacin a 40 x
..
...
.
e) cul es la funcin de esta clula .
....
la preparacin.
(Si no encuentran esta bibliografa entonces consultar a un
histotecnlogo)
26
PROGRAMA DE LA UNIDAD DE ENSEANZA APRENDIZAJE:

HISTOLOGA Y ANATOMA ANIMAL
Objetivo General
Al trmino de la UEA el alumno podr:
1. Identificar las principales caractersticas tisulares animales.
2. Examinar la participacin de los tejidos en los distintos rganos y
sistemas y
3. Discutir los principios en que se basan las metodologas y las
tcnicas utilizadas para el anlisis anatmico.
Objetivos Particulares
El estudiante ser capaz de:
1. Reconocer los diferentes trminos y niveles de organizacin
biolgica empleados en los estudios anatmicos.
2. Identificar los procesos ontogenticos y filogenticos que
participan en la conformacin del plan corporal general de los
metazooarios.
3. Identificar las principales estructuras celulares y determinar su
importancia en la fisiologa de las asociaciones celulares.
26
4. Contrastar las ventajas y desventajas de las variantes en los

mtodos de estudio de la histologa.
Temario de la UEA: HISTOLOGA Y ANATOMA ANIMAL.
1. Introduccin a la organizacin tisular de los animales
1.1. Trminos y planos anatmicos referenciales: frontal,
horizontal, sagital, transversal, oblcuo.
1.2. Niveles de organizacin: patrones estructurales. Nivel
Celular, Pluricelular, Tejidos, rganos, Sistemas, Aparatos.
1.3. Metodologa histolgica. Obtencin del material histolgico.
Fijacin. Lavado. Deshidratacin. Aclaramiento. Infiltracin.
Inclusin. Corte y Microtoma. Tincin. Montaje. Observacin.
2. Procesos bsicos del desarrollo
2.1. Ontogenticos
2.1.1. Diferenciacin Celular. Concepto. Fecundacin.
Segmentacin y capas embrionarias: endodermo,
ectodermo y mesodermo. Formacin de tejidos a partir de
las capas embrionarias
2.1.2. Filogenticos. Clasificacin de los tejidos por su origen
embrionario. Tejidos de origen ectodrmico, mesodrmico,
endodrmico.
2.2. Plano corporal general. Plano frontal o coronal, sagital,
horizontal, transverso, oblicuo.
3. Tejidos fundamentales
1.1 Epitelial
3.1.1. Tipos: I. Monoestratificado
a) cbico, b) columnar, c)
pseudoestratificado
3.1.2. Estratificado. a) plano, b) columnar, c) polimorfo.
3.1.3. Epitelio Glandular a) exocrino b) endocrino c) mixto.
Epitelios secretores y no secretores. Derivados epiteliales.
Piel, pelo, uas.
3.2.
Conectivo
3.2.1. Tejido conectivo o conjuntivo. Origen y Tipos: a) laxo, b)
denso,
c) adiposo, d) cartilaginoso, e) seo f) Sangre.
3.2.1.1. Tejido Conjuntivo Laxo. Componentes a) matriz
extracelular
b) fibras extracelulares, c)
protenas
extracelulares.
3.2.1.2. Tejido Conjuntivo Laxo. d) clulas fijas: fibroblastos,
mesenquimales, adiposas, macrfagos. e) clulas libres:
26
monocitos, linfocitos,
plasmticas,
eosinfilos,
mastocitos o clulas cebadas.
3.2.1.3. Tejido Conjuntivo Denso. Caractersticas y tipos a)
regular y b) irregular.
3.2.1.4. Tejido Adiposo. Caractersticas y Tipos a) unilocular, b)
multilocular.
3.2.1.5. Cartilaginoso. Caractersticas y tipos a) elstico, b)
fibroso.
3.2.1.6. seo. Caractersticas y funcin de las clulas seas:
Osteocitos, osteoblastos, osteoclastos. Componentes
seos: matriz, periostio, endostio, sistema de Havers.
3.2.1.7. Sangre y clulas sanguneas. Leucocitos neutrfilos,
eosinfilos y basfilos. Linfocitos. Monocitos. Plaquetas y
eritrocitos. Matriz lquida o plasma. Caractersticas y
funcin.
3.3.
Muscular. Tipos
3.3.1. Liso: a) unitario, b ) multiunitario
3.3.2. Estriado: a) esqueltico, b)
citoplsmicas y funcin.
cardiaco.
Caractersticas
3.4.
Nervioso
3.4.1. Neurona y sus partes: ncleo, pericarion, dendritas, axn,
cuerpos de Nissl, aparato de Golgi. Distribucin y diversidad
de las neuronas. Sustancia blanca y gris. La fibra nerviosa.
Vaina de Schwann o de mielina. Ndulos de Ranvier.
Neurilema. Terminaciones nerviosas.
3.4.2. Tipos de Neuronas: unipolares, bipolares y multipolares.
Neuronas de Golgi tipo I y II. Clulas satlites, clulas de
Schawnn, clulas de Purkinje. Caractersticas y ubicacin.
Ejemplo de ncleos neuronales.
3.4.3. Neurogla:
Oligodendrocitos,
astrocitos
citoplsmicos,
astrocitos
fibrosos,
microglia.
Meninges:
Piamadre,
Duramadre y Aracnoides.
4. Histologa sistmica
4.1 Sistema tegumentario
4.2 Sistemas de soporte
4.3 Sistemas de movimiento
4.4 Sistemas de transporte
4.5 Sistemas de coordinacin: nervioso, endocrino y
neuroendocrino
26
CRITERIOS Y REQUISITOS PARA LA EVALUACIN DE LOS REPORTES DE

PRCTICAS DEL CURSO HISTOLOGIA Y ANATOMIA ANIMAL.
PROF. DR. ARMANDO FERREIRA.
1. NO SE RECIBIRN LOS REPORTES DE PRCTICAS SI NO TIENEN LAS
SIGUIENTES CARACTERSTICAS:
A. SI NO ESTAN ENGARGOLADOS.
B. SI NO ESTAN ESCRITOS A MQUINA
C. SI NO CONTIENEN TODOS LOS
NOMBRES
DE
LOS
INTEGRANTES A MQUINA.
2. SE LES BAJAR UN PUNTO SOBRE LA CALIFICACIN DE 10 DEL
REPORTE CUANDO:
A. POR CADA DA QUE SE ATRASEN YA QUE DEBERN ENTREGAR
LOS REPORTES LOS JUEVES.
26
B. POR NO INCLUIR AL PRINCIPIO DE CADA REPORTE ESTA LISTA

DE CRITERIOS Y
LA FOTOCOPIA DEL MANUAL DE LA
PRCTICA CORRESPONDIENTE.
3. SE
LES
BAJAR
0.1
DE
PUNTO
CADA
VEZ
QUE
EN
LA
INTRODUCCIN O EN LOS RESULTADOS DE CADA PRCTICA NO

INCLUYAN, AL CONCLUIR EL PRRAFO, LA CITA DEL LIBRO,
ARTICULO O PGINA DE INTERNET DE DONDE OBTUVIERON LA
INFORMACIN
SOLICITADA.
LAS
CITAS
PUEDEN
HACERSE
ESCRIBIENDO ENTRE PARENTESIS EL NOMBRE DEL AUTOR(ES) Y EL

AO. EJEMPLO RELACIONADO CON LA FORMA EN QUE ESTA CITADA
LA BIBLIOGRAFIA DEL PUNTO 4.
FIJACION. Es un procedimiento cuya finalidad, al aplicarlo
es detener la vida de las clulas e impedir las
modificaciones post morten que pueda sufrir la clula
(procesos
autolticos),
manteniendo
la
estructura
morfolgica de clulas y tejidos sin que ocurran cambios
notables
en
ellos.
(Estrada
y
cols,1982;
http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/plantilla.asp?
zona=biblioteca).
O BIEN, SE ESCRIBE ENTRE PARENTESIS EL NMERO CON QUE
APARECE CITADA EN SU PRCTICA LA BIBLIOGRAFIA CONSULTADA.
EJEMPLO:
FIJACION. Es un procedimiento cuya finalidad, al aplicarlo
es Detener la vida de las clulas e impedir las
modificaciones post morten que pueda sufrir la clula
(procesos
autolticos),
manteniendo
la
estructura
morfolgica de clulas y tejidos sin que ocurran cambios
notables en ellos. (1, 3).
4. LAS REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS DEBERN SER INCLUIDAS AL
FINAL DEL REPORTE, NUMERNDOLAS Y CON LOS SIGUIENTES
DATOS:
AUTOR (ES), FECHA, NOMBRE DEL ARTCULO O LIBRO, EDITORIAL,
PAIS
Y
PGINAS
CONSULTADAS
O
BIEN
EL
LINK
26
CORRESPONDIENTE. DEBEN CITAR MS LIBROS QUE LINKS DE

PGINAS DE INTERNET.
EJEMPLOS:
1.
Estrada, F.E., Peralta, Z.L., Rivas, M.P. (1982). Manual de
tcnicas histolgicas. De. AGT Editor, S.A. Mxico. Pags. 10-12.
2.
Lynch, M.J., Raphael, S.S., Spares, P.D., Inwood, M.J.H. (1977).
Mtodos de laboratorio. De. Interamericana, S.A. Espaa. Pags.
345-356.
3.
http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/plantilla.asp?
zona=biblioteca.
5. LOS ALUMNOS DEBERN REALIZAR LAS PRCTICAS DE ACUERDO A
LAS INDICACIONES CONTENIDAS EN EL FORMATO DEL MANUAL Y
SE LES BAJARN PUNTOS CUANDO LA PRCTICA EST INCOMPLETA
POR NO HACERLO.
6. LOS ESQUEMAS DE LAS CLULAS DEBERN CONTENER:
A. UN MARCO O RECUADRO
B. UN PIE DE FIGURA INDICANDO EL NMERO DE LA FIGURA, EL
NOMBRE DE LA CLULAS (LINFOCITO Y ADIPOCITO O
EPITELIO SIMPLE ESCAMOSO), EL NOMBRE DE LA ESPECIE
(RATA,
HUMANO,
ETC.),
(HEMATOXILINA-EOSINA,
EL
NOMBRE
DE
KLUVER-BARRERA,
LA
TINCIN
ETC),
EL
AUMENTO DEL MICROSCOPIO CON EL QUE SE HIZO EL

DIBUJO (10X o 60x o 100x)
C. SEALAR CON FLECHAS EN EL DIBUJO LO QUE SE DESCRIBE
EN EL PIE DE FIGURA. EJEMPLO
NCLEO
MEMBRANA PLASMTICA
26
ANTICUERPOS
FIGURA 2. DIBUJO DE PLASMOCITO DE RATA, TEIDO CON

HEMATOXILINA Y EOSINA A 100x EN EL QUE SE OBSERVA SU
NCLEO EXCENTRICO, MEMBRANA PLASMTICA Y ANTICUERPOS
QUE PRODUCE.
BIBLIOGRAFA GENERAL DEL CURSO

1. Banks, W.J. (1986) Histologa Veterinaria Aplicada. Ed. El Manual
Moderno. Mxico. 730 pp.
2. Bloom, W. y Fawcett, W.D. (1978). A Textbook of Histology. W.B.

Saunders. (QM 551). 970 pp.
3. Burkitt, H., Young, B., Heath, J., Wheater, W. 2000. Histologa Funcional.
Texto y Atlas en color. Churchill Livingstone. Madrid, Espaa. 414 pp.
4. Di Fiore, S. H. Mariano, S. H. (1986). Nuevo Atlas de Histologa Normal.

Sptima edicin. Argentina. Ed. El Ateneo. pg. 330.
5. Estrada Flores, E., Uribe Aranzbal, M. C. (2002) Atlas de Histologa de
Vertebrados. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 221 pp.
6. Fawcett, D.W. (1995) Tratado de Histologa. 11 edicin. Ed.
Interamericana. 1026 pp. (QM551 F3).
7. Gartner, LP. Y Hiatt, JL. (2003). Atlas Color de Histologa. Editorial Mdica
Panamericana. 4 Edicin. Buenos Aires 450 pp.
8. Geneser, F. (2000) Histologa. Editorial Mdica Panamericana. Buenos
Aires, 814 pp.
edicin. Ed. Interamericana. Mxico. pg. 1026.
26
10.
Junqueira, L. C. y Carneiro, J. (1986). Histologa Bsica. Cuarta

Edicin Barcelona, Espaa. Salvat Editores. pg. 506.
11.Kessel, R. 1998. Basic Medical Histology. Oxford University Press. New
York, USA. 550 pp.
12.Lynch, M.J., Raphael, S.S., Spares, P.D., Inwood, M.J.H. (1977). Mtodos
de laboratorio. Ed. Interamericana, S.A. pg. 1522.
13.Paniagua, R., Nistal, M. 1983. Introduccin a la Histologa Animal
Comparada. Labor Universitaria. Barcelona, Espaa. 438 pp.
14.Presnell, J.K., Schreibman, M.P. (1997). Animal Tissue Techniques. The
Johns Hopkins University Press. Baltimore & London. 572 pp.
15.Ross, MH., Kaye, GI., Paulina,W. (2005). Histologa: texto y atlas a color
con biologa celular y molecular. Editorial Mdica Panamericana. 4
Edicin. Buenos Aires 864 pp.
16.Uribe Aranzbal, M. C., Garca-Lorenzana M. (2001). Nuevos Retos de la
Docencia y la Investigacin en Histologa. Universidad
Autnoma
Metropolitana. 234 pp.
17.Warren, A. (1970) Textbook of Comparative Histology. Ed. Oxford.
18.Young, B., Heath, J. 2001. Wheaters Functional Histology. Churchil
Livingstone. London, England. 413 pp.
BIBLIOGRAFA UBICADA EN LA SECCIN DE ENCICLOPEDIAS DE LA

BIBLIOTECA DE LA UAMI.
CLASIFICACIN: QM557.
1. Eroschenko, V.P. (1993). Di Fiores Atlas of Histology. Ed. Lea & Febiger.
330 pp.
2. Gartner, L.P. & Hiatt, S.L. (1990) Color Atlas of Histology. Williams &
Wilkins. Baltimore. 450 pp
3. Geneser, F. (1992). Atlas color de Histologa. Ed. Panamericana. Madrid.
814 pp.
4. Gerrit Bevelander. (1967). Outline of Histology. Mosby Company. USA.
5. Kelemen, E.; Calvo, N.; Fliedner (1979). Atlas of human hematopoietic
development. Ed. Springer-Verlag, Berlin. QM569. 266 pp.
6. Wheater, P.R.; Bukkit, H.G.; Daniels, V.G. (1979). Functional histology. Ed.
Churchill Livingston. QM551. 448 pp.
BIBLIOGRAFA DE APOYO
1. Alberts, B.; Bray, D.; Lewis, J.; Raff, M.; Roberts, K.; Watson, J.D. (1994).
Biologa Molecular de la Clula. Ed. Omega. 2a Ed. 1392 pp.
2. Karp, G. (1992) Biologa Celular. Ed. McGraw-Hill. 864 pp
26
3. Pough, F.H.; Heiser, J.B.; McFarland, W.N. (1996). Vertebrate Life.

Prentice-Hall. QL605. 720 pp.
4. Ruitenberg, E.J. & Peters, P.W.S (1986). Laboratory Animals. Ed. Elsevier
Science Publishers. 364 pp.
5. Winn Kapit, Elson, L.M. (1997). Anatoma cromodinmica. Fernndez
Editores. Mxico. 384 pp.
6. Young, J.Z. (1980) La vida de los mamferos. Anatoma y Fisiologa. Ed.
Omega. QL 703. pp.
BIBLIOGRAFA PARA EL CURSO DE LABORATORIO
1. Di Fiore, S. H. Mariano, S. H. (1986). Nuevo Atlas de Histologa Normal.
Sptima edicin. Argentina. Ed. El Ateneo. 330 pp.
3. Junqueira, L. C. y Carneiro, J. (1986). Histologa Bsica. Cuarta Edicin
Barcelona, Espaa. Salvat Editores. 506 pp.
4. Lynch, M.J., Raphael, S.S., Spares, P.D., Inwood, M.J.H. (1977). Mtodos
de laboratorio. Ed. Interamericana, S.A. 1522 pp.
PGINAS DE INTERNET SUGERIDAS PARA CONSULTA
1. http://escuela.med.puc.cl/paginas/cursos/segundo/histologia/histologiaw
eb/IndiceConectivo.html
eb/IndiceEpitelial.html
eb/IndiceMuscular.html
eb/IndiceNervioso.html
5. http://www.meddean.luc.edu/lumen/MedEd/Histo/frames/Histo_frames.ht
ml
6. http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/plantilla.asp?zona=modepite
7. http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/link/link.asp?
url=http://www.geocities.com/bio135a/indexEpit.htm
8. http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/plantilla.asp?zona=biblioteca
9. http://web.udl.es/dept/medicina/citoweb/pregrau/hemato/ppal.htm
10.http://pathy.med.nagoya-u.ac.jp/atlas/doc/atlas.html
11.http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HEMEHTML/HEMEIDX.html#1
12.http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/veterinaria/2003893/
13.http://www.kumc.edu/instruction/medicine/anatomy/histoweb/
14.http://www.med.uiuc.edu/histo/small/atlas/slides.htm
15.http://www.monografias.com/trabajos11/intecnic/intecnic.shtml
16.http://www.slideshare.net/lulus2923/mtodos-de-estudio-en-histologa
26
APNDICES
LISTA DEL MATERIAL POR EQUIPO PARA LAS PRCTICAS DEL
CURSO.
Prctica No. 2.
1 Tijeras.
1 Trapo para limpiarse las manos
1 Paquete de etiquetas adheribles de 4 cm x10 cm aprox.
1 Rollo de Masking Tape de 1 pulgada de ancho.
1 Pinzas de diseccin
1 Aguja de diseccin
1 Marcador de tinta indeleble
1 Litro de alcohol etlico del 96 %
Prctica No. 3.
26
1
1
10
1
1
1
1
1
1
1
1
10
2
50 ml
1
1
1
Paquete de hojas o navajas de afeitar

Navaja Cutter
Paquetes de gasa.
Paquete de cotonetes
Paquete de algodn
Caja de cubreobjetos
Caja de portaobjetos
Paquete de 1/2 Kg de parafina punto de fusin 56-58 oC
Botella de glicerina de 100 ml
Pincel
Carrete de hilo blanco de camo.
Bolsas de plstico para tirar basura
Envases vacos tetrapack
de cloro para limpiarse las manos de colorantes.
Para todas las prcticas
Bata blanca
libro de histologa
caja de lpices de 12 colores para iluminar
TINCIN DE HEMATOXILINA-EOSINA
Nota: los tiempos han sido adaptados para que en una sesin de dos
horas, cada alumno tia, por lo menos, dos laminillas en un total de 30
min por laminilla.
1. Desparafinar los cortes en:
Xilol I ------------------------------ 2 minutos
Xilol II ------------------------------ 1 minuto
2. Hidratar los cortes en baos decrecientes de alcohol
Alcohol absoluto 100 I
---------1 minuto
Alcohol absoluto 100 II --------- 1 minuto

Alcohol de 96
I ---------------- 1 minuto
Alcohol de 96 II ----------------- 1 minuto

Alcohol de 80
I ----------------- 1 minuto
Alcohol de 80 II ----------------- 1 minuto
26
Alcohol de 70
I ------------------1 minuto
Alcohol de 70 II ------------------1 minuto

Agua corriente ---------------------- 1 minuto
Agua destilada (1 bao) ---------- 1 minuto.
3. Colorear con la solucin de Hematoxilina
En este paso es conveniente respetar el tiempo de coloracin que
recomienda cada tipo de solucin de hematoxilina. Dependiendo de
la frmula de preparacin el tiempo puede variar de 3 a 20 minutos.
La hematoxilina de uso ms frecuente es la
Hematoxilina alumnica de Harris ------- 3 a 5 minutos
(Verificar al microscopio color de los ncleos).
4. Lavado en agua destilada (1 bao) ------ 1 minuto
5. Diferenciar, para eliminar el exceso de colorante.
Alcohol-cido, hasta que los ncleos y los componentes basfilos de las
clulas sean los nicos que permanezcan teidos
Lavar en agua corriente
----------------- 1 minuto
6. Virar al color azul, empleando soluciones de sustancias alcalinas

como:
Agua amoniacal o
Solucin de bicarbonato de sodio al 2% o
Carbonato de litio al 1%.
1 bao ------- de 1 minuto con alguna de las tres soluciones.
Lavar en agua destilada (1 bao) -------------- 1 minuto.
7. Colorear con una solucin alcohlica o acuosa de
Eosina ------------------------------------------ 3 a 5 minutos
26
8. Deshidratar en baos crecientes de alcohol etlico

Alcohol de 96 I --------------------------------1 minuto
Alcohol de 96 II -------------------------------1 minuto
Alcohol absoluto 100 I -------------------------1 minuto
Alcohol absoluto 100 II ------------------------1 minuto
9. Diafanizar o aclarar empleando xilol
Xilol I ------------------------------------------- 1 minuto
Xilol II ------------------------------------------ 1 minuto
10.
Montaje con blsamo de Canad o Entellan
FIJADORES
FORMOL AL 10 % EN SOLUCIN SALINA
Formaldehdo al 40 % ........................................................... 100 ml.
Cloruro de sodio........................................................................ 9 gr.
Agua destilada....................................................................... 900 ml.
El llamado formol puro comercial, es gas formaldehdo al 40 % en
agua. Algunas de las alteraciones que produce, pueden amortiguarse
diluyndolo en suero fisiolgico en vez de agua, y entonces lo llamamos
formol salino. Para esto tambin puede utilizarse una solucin de
buffer de fosfato.
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS (Buffer)
BUFFER FOSFATO
Solucin A Fosfato de sodio monobsico (0.1M)
Fosfato de sodio monobsico (Na2HPO4, PM 137.99)
26
PM 137.99 X 0.1 = 13.79 g de Fosfato de sodio monobsico
aforados a
1 litro de agua destilada.

Solucin B Fosfato de sodio dibsico (0.1 M)
Fosfato de sodio dibsico (Na2PO4 dihidratado; PM 141.96 x 0.1
PM 141.96 x 0.1= 14.196 g de Fosfato de sodio dibsico aforados a 1
litro de agua destilada.
Solucin de uso. Mezclar Solucin A (810 ml) + Solucin B (190 ml).
Solucin A ....................................................................... 810 ml.
Solucin B........................................................................ 190 ml.
Total de Solucin Amortiguada. ......................................1000 ml.
FORMOL AMORTIGUADO. Mezclar
Formaldehdo al 40 % ........................................................... 100 ml.
Solucin Amortiguada de Buffer Fostato (A+B).. 900 ml
TOTAL DE FORMOL AMORTIGUADO. 1000 ml
BOUIN (PARA FIJAR GNADAS).
Solucin acuosa saturada de cido pcrico..................................... 75 ml.
Formol........................................................................................ 25 ml.
Antes de usar, agregar 0.5 ml de cido actico por cada 10 ml de
solucin.
ALCOHOL CIDO (para definicin de ncleos y eliminar exceso de
colorantes).
El alcohol cido se utiliza en histologa y citologa para eliminar el exceso
de tincin y definir los ncleos despus de la tincin con hematoxilina en
el
mtodo
de
Hematoxilina-Eosina.
Para
producir
una
tincin
Hematoxilina-Eosina de buena calidad con visin detallada y ntida de

los ncleos, es fundamental diferenciar correctamente determinadas
hematoxilinas, para lo cual el alcohol cido resulta una solucin muy
eficaz. Disponible con cido clorhdrico al 1 % o al 0,5 % en alcohol
26
reactivo al 70 %, este alcohol cido puede mejorar sensiblemente la

reproducibilidad de los resultados de tincin y contribuir a alcanzar la
estandarizacin.
CIDO
CLORHDRICO
..1 ml
ALCOHOL
AL
70
%.
99 ml
SOLUCIONES PARA EL AZULAMIENTO EN LA TCNICA H-E.
AGUA AMONIACAL
AMONACO
1 ml
ALCOHOL
AL
80
99 ml
SOLUCIN DE CARBONATO DE LITIO AL 1 %
CARBONATO
DE
LITIO
1 gr
AGUA
DESTILADA
..
99 ml
SOLUCIN DE BICARBONATO AL 1 %
BICARBONATO
DE
SODIO
..
2 gr
AGUA
DESTILADA
99 ml
SOLUCIN DE SCOTT
26
..
BICARBONATO
DE
SODIO
2 gr
SULFATO
DE
MAGNESIO
.20 gr
AGUA
DESTILADA
100 ml
26
..

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UNIVERSIDAD AUTNOMA

Manual de Prcticas del Laboratorio de Histologa y

Anatoma Animal est diseado como material didctico de laboratorio

Revisin, limpieza, mantenimiento e iluminacin Khler en el

microscopio de campo claro.

Deshidratacin e inclusin en parafina.

Corte, tincin y montaje de tejidos.

De estas prcticas, slo las tres primeras estn diseadas para

comprendieron y realizaron correctamente. En la seccin de resultados

que utilizaron, as como de otros que podran haberse empleado para

REVISIN, LIMPIEZA, MANTENIMIENTO E ILUMINACIN KHLER

sistemas: el mecnico, el ptico y de iluminacin. Para la elaboracin de

Marca del microscopio y nmero de inventario de la UAM.

Iluminacin: Sirve el foco Si. No

Estado del ocular. Bueno. Regular. Malo.

Con mucho cuidado limpie con alcohol al 10 % y algodn el ocular por

Objetivos. Cuantos objetivos tiene su microscopio.

Con mucho cuidado limpie con alcohol al 10 % y algodn cada objetivo

Pinza de portaobjetos. Tiene? Si. No. Sirve? Si.

Condensador Sirve? Si.

Tornillo micromtrico. Sirve? Si. No. Se desajusta. Si.

Si al hacer la iluminacin Khler falla algo ms del microscopio

Abra el diafragma de iris y el diafragma de campo.

Suba el condensador hasta el tope.

Seleccione el objetivo de bajo aumento de 10X.

Enfoque una preparacin con el tornillo macromtrico, para realizar el

Cierre el diafragma de campo hasta encontrar una luz.

Descienda el condensador hasta ver ntido el diafragma de campo que

Centre el haz de luz (hexgono) con los tornillos posteriores.

Abra el diafragma hasta llenar el campo.

Contraste la imagen con el diafragma de iris.

Para observar sus muestras con el objetivo de 40x y 100x,

solamente afine el enfoque con el tornillo micromtrico.

Agregue gotas de aceite de lubricacin a aquellas partes del

miscroscopio que lo requieran.

en caso de no ser nuevos o estar en buen estado los

a) dibuje las clulas del epitelio bucal de 2 cm de dimetro visto con el

c) cul es la funcin de este epitelio............

Dibuje las clulas del epitelio de 2 cm de dimetro visto con el

a) qu forma y que color tiene el citoplasma de las clulas

d) cul es la clasificacin de este epitelio o que tipo de epitelio

e) la cuarta fila de clulas que sigue despus de las clulas de la

PRCTICA No. 2. ELABORACIN DE REACTIVOS

En un mximo de dos cuartillas escriba en la introduccin de

PREPARACIN DE LA SOLUCIN AMORTIGUADORA DE BUFFER DE

Describa cmo se prepararon los siguientes reactivos histolgicos:

b) de qu color y forma es su citoplasma ..

PRCTICA No. 3. PERFUSIN CARDIACA

los materiales, animales y reactivos que se

emplearon para realizar esta tcnica.

5. Mencione 3 signos que se observan en el animal que indican que la

f) escriba 2 caractersticas que distingan de las dems clulas de

Qu es la deshidratacin y la inclusin en parafina?.

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