UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO

DEPARTAMENTO DE NUTRIO
BROMATOLOGIA

O uso da Espectrofotometria na anlise de Alimentos

Andra Carla Pergentino

Camila Leal
Emily Monteiro
Rayonara Oliveira
RECIFE
2015

1. O que Espectrofotometria
A Espectrofotometria toda tcnica analtica que usa a luz para medir as
concentraes das solues atravs da interao entre a luz e a matria.
uma das mais valiosas tcnicas analticas; sendo a mais usada em
investigaes biolgicas e fsico-qumicas.
por meio desta tcnica que pode-se, por exemplo, identificar
componentes desconhecidos de uma soluo atravs de seus espectros
caractersticos.

A tcnica espectroscpica baseia-se no aumento de energia em funo

do aumento da frequncia da radiao incidida. Uma espcie qumica, ao
absorver energia na forma de ftons, fica com seus eltrons excitados;
ocorrendo uma transio do orbital de baixa energia para um outro orbital de
maior energia. Essa transio de energia promove a formao de uma nova
espcie qumica: o cromforo (substncia que vai conferir a cor).
A espectrofotometria est baseada na lei de Lambert-Beer. Esta diz que
a absorbncia diretamente proporcional a concentrao da soluo da
amostra.

A
leitura da

espectrofotometria feita em um aparelho chamado espectrofotmetro

(aparelho que permite comparar a radiao absorvida ou transmitida por uma
soluo que contm quantidade desconhecida de soluto; para uma quantidade
conhecida da mesma substncia); tendo como principais componentes a fonte
de luz, o monocromador, a cubeta e o detector.

A fonte de luz composta por uma lmpada de deutrio (responsvel

pela emisso de luz UV) e uma lmpada de tungstnio (responsvel pela
emisso de uma luz visvel).
O monocromador uma das partes que, nos espectrofotmetros mais
modernos, foi substitudo por um dispositivo eletrnico que transforma a luz
incidida em vrios comprimentos de onda em um s comprimento de onda (luz
monocromtica).
A cubeta, por sua vez, o recipiente onde vai ser colocada a amostra a
ser analisada. Podem ser de quartzo, vidro ou acrlico; sendo a de quartzo a

recomendada uma vez que os outros materiais absorvem a UV; causando a

reflexo da luz visvel.
E por fim, o detector um dispositivo responsvel pela captao da
frao de luz que passa pela amostra; transferindo-a para um computador
acoplado ao aparelho.

2. Tipos de Espectrofotometria
Divide-se em: espectrofotometria astronmica, de absoro atmica e
infravermelho.
Na Espectrofotometria astronmica os astrnomos utilizam redes de
difrao, a fim de estudar o espectro de energia da radiao eletromagntica
dos astros coletada nos telescpios. A rede de difrao o artefato que
substitui o antigo prisma ptico na pesquisa cientfica. Sua qualidade medida
pelo poder de separao de duas linhas de absoro ou de emisso do
espectro eletromagntico de uma estrela, isto , pela sua resoluo espectral.
A espectrofotometria de absoro atmica, por sua vez, usada para
determinar (de forma qualitativa ou quantitativa) a presena de metais.
Consiste em determinar a presena e quantidade de um determinado metal em
uma soluo; usando como princpio a absoro de radiao ultravioleta por
parte dos eltrons.
Estes eltrons ao sofrerem um salto quntico (aps excitao por uma
chama de gs acetileno a 3000C) devolvem a energia recebida para o meio.
Dessa forma, voltam sua camada orbital de origem. A energia devolvida na
forma de fton de luz absorve a radiao ultravioleta emitida pela fonte
especfica (ctodo) do elemento qumico em questo.
Por fim, na espectrofotometria, no Infravermelho os compostos
orgnicos tambm absorvem radiaes na regio do infravermelho (IV) do
espectro. Esta radiao infravermelha no tem energia suficiente para excitar
os eltrons; provocando transies eletrnicas.

Estas transies eletrnicas fazem com que os tomos ou grupos de

tomos vibrem com maior rapidez e com maior amplitude em torno das
ligaes covalentes que os unem.
As vibraes so quantizadas e, quando ocorrem, os compostos
absorvem energia IV em certas regies do espectro. Nestas vibraes, as
ligaes covalentes comportam-se como se fossem pequenas molas unindo os
tomos.
Quando os tomos vibram, s podem oscilar com certas frequncias, e
as ligaes sofrem vrias deformaes. Quando a ligao absorve energia, ela
sofre alteraes e, ao retornar ao estado original, libera essa energia, que
ento detectada pelo espectrmetro.
As molculas podem vibrar de muitos modos. Dois tomos unidos por
uma ligao covalente podem efetuar vibraes de estiramento dessa ligao,
como se fosse uma mola que estica e retorna ao tamanho original.
Trs tomos tambm podem efetuar diferentes vibraes de estiramento
e alterao dos ngulos de ligao, em vrios planos do espao. No entanto,
as vibraes de estiramento so as mais importantes.
A radiao infravermelha outra espcie de radiao eletromagntica
cujo espectro comea num dos limites do espectro da luz (o vermelho) e se
estende at a zona das ondas hertzianas (radar, televiso, rdio).
caracterizada por um comprimento de onda compreendido entre cerca de 800 e
105 nm.
Nas molculas, os tomos e os grupos atmicos esto em contnuo
movimento, uns em relao aos outros (vibraes moleculares). Quando
sujeitas a radiao com energia semelhante a correspondente a essas
vibraes (radiao infravermelha), as molculas podem alterar o seu estado
de vibrao (excitao); absorvendo a radiao correspondente diferena de
energia entre o estado inicial e o estado excitado.

Como no possvel a uma molcula vibrar de qualquer modo, a

absoro da radiao ocorre apenas para determinados valores da energia
(valores estes que so caractersticos das molculas).
Assim, atravs da comparao dos valores de energia da radiao
infravermelha para os quais h absoro, possvel identificar as molculas ou
os tipos de molculas presentes nas amostras.
A espectrofotometria infravermelho oferece um mtodo rpido de anlise
qumica que fornece, em segundos, resultados de mltiplas propriedades em
amostras no preparadas.

3. Aplicaes da Espectrofotometria
Em anlise de alimentos, as aplicaes de absoro UV so:

Conservadores;
Antioxidantes;
Caracterizao de leos e gorduras;
Grau de oxidao de leos e gorduras;
Vitaminas: A, B, C, E e K;
Pesticidas;
Micotoxinas;
Pectina e polissacardeos.
Aplicao de absoro visvel em anlise de alimentos

Pigmentos naturais;
Corantes artificiais.
Aplicao de colorimetria em anlise de alimentos

Protenas;
Aminocidos;
Vitaminas: A,B,C,D e E;
Carboidratos;
Metais;
Pesticidas;
Antioxidantes;
Caracterizao de leos e gorduras;

Grau da oxidao de leos e gorduras.

REFERNCIAS
1) http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/componentes.html
2)
http://pt.wikipedia.org/wiki/EspectrofotometriaFundamentos
tericos e prticos em anlise de alimentos
Autor: Cecchi, Helosa Mscia
2 edio revista