INSTITUTO POLITCNICO

NACIONAL
ESCUELA SUPERIOR DE
INGENIERA
QUMICA E INDUSTRIAS EXTRACTIVAS
LABORATORIO DE QUIMICA DE LOS
HIDROCARBUROS.

Prctica nmero tres.

Cromatografa

Integrantes:
Firma:
Mendoza Prez Daniela Sofia.
Jos Manuel Alcntara Domnguez
Jervin Misael islas Chvez
Daniela Sofia Mendoza Prez
Diana Ramrez.
Grupo: 2IM33
Profesor de Laboratorio: Lourdes Ruz
Centeno.

Fecha de entrega: 4/05/2015.

ndice.
1. Objetivo general y objetivos especficos..3
2. Introduccin terica.....4
3. Diagrama de bloques (actividad experimental)...8
4. Material y equipo utilizado..10
5. Calculo del Rf..10
6. Observaciones (actividad experimental) .....12
7. Conclusiones....13
8. Bibliografas.15

Objetivos especficos.
2

El alumno debe:
Definir el concepto de cromatografa y aplicarlo en la purificacin de compuestos.
Indicar en que consiste la cromatografa de absorcin y la de particin
Explicar el concepto de polaridad en cromatografa
Establecer la relacin y diferencia que existe entre la cromatografa en placa fina y
la preparativa.
Seleccionar el disolvente o mezcla de ellos para efectuar el desarrollo de la
cromatografa.
Emplear adecuadamente el sistema revelador en caso de trabajar con sustancias
incoloras
Purificar compuestos orgnicos mediante placas preparativas.
Determinar el Rf de las sustancias separadas.

Mtodos Cromatogrficos
3

La separacin de mezclas de compuestos en las sustancias puras y su

cuantificacin revisten gran importancia dentro del trabajo de laboratorio qumico.
Solamente as puede analizarse adecuadamente la pureza de un compuesto o la
composicin de una mezcla de diversos componentes. No slo el control de
calidad, los anlisis de alimentos o del medio ambiente, sino tambin el control y la
optimizacin de reacciones y procesos qumicos se basan en la determinacin
analtica de las cantidades de material. Una tcnica importante para la separacin
de materiales analtica y preparativa es la cromatografa. El principio de la
cromatografa, en la forma en que se usa en la actualidad, lo descubri el botnico
Michael Tswett (1872 - 1919). Public en 1906 un procedimiento relativo a la
separacin y aislamiento de pigmentos verdes y amarillos vegetales de las hojas
por cromatografa de absorcin.
La cromatografa de capa fina es la herramienta inicial para la caracterizacin y la
separacin de muchos compuestos orgnicos. Esta tcnica analtica es esencial
para la identificacin, separacin y purificacin de sustancias con actividad
biolgica til. Que permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacin. Comparar muestras. Si
dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas. Si, por el contrario,
corren distinto entonces no son la misma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen
los reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cundo la reaccin ha acabado.
Al igual que otras cromatografas, consiste de una fase estacionaria y una fase
mvil y el principio es el mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase
estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando una distancia que es
inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria.
Segn el tipo de interaccin que se establece entre los componentes de la fase
mvil y la fase estacionaria.
a. Absorcin (Estacionaria = Slido polar capaz de adsorber a los componentes
de la mezcla mediantes interacciones de tipo polar)
b. Particin (Separacin por solubilidad de los componentes de la mezcla en
las fases estacionaria y mvil, ambas liquidas)
c. Intercambio Inico (Estacionaria= Slido con grupos funcionales ionizables
cuya carga se pueden intercambiar con los iones de la fase mvil)
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un
gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de
vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible.
El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de
molculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores
4

fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua,

un solvente orgnico o una mezcla de ambos.
El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centmetro del
borde en uno de los extremos de la placa, se deja secar, se coloca la placa en un
envase (tanque de desarrollo) que ya contiene una pequea cantidad del solvente,
se tapa y se deja correr por un rato. El solvente subir por capilaridad e ir
arrastrando las molculas, las cuales se movern segn la afinidad que muestren
por la fase estacionaria. Si la mezcla de muestras que se est analizando presenta
color, se vern los distintos colores migrando a distintas velocidades. Si son
incoloras hay que someter la placa a algn tratamiento con una sustancia
desarrolladora (developer) para poder determinar la presencia de sustancias sobre
el silicato. El tipo de desarrollador depender del tipo de molculas que se
analizan. Lo anterior se puede visualizare en la figura 1.

Figura 1.
Solventes ms comunes de menos a ms polar:
Tetracloruro de carbono

Acetonitrilo

Tolueno

Acetato de etilo

Benceno

Acetona

Cloroformo

Etanol

Hexano

Dioxano

Ciclohexano

Metanol

Adsorbentes ms comunes:
Gel de slice
Oxido de Aluminio o Almina
Celulosa
Poliamidas
Reveladores ms comunes:
Luz UV
Introduccin de la placa en vapores de yodo
Rocio con una solucin de agua/H2SO4 1:1, despus calentar
intensamente hasta carbonizar los compuestos.
Factores que influyen en la separacin:
T: Entre <, ms se absorbe en la fase estacionaria.
Corrientes de aire
Contaminantes (deben limpiarse con una mezcla de cloroformo y metanol)
Pureza de los disolventes
Determinacin del Rf
La retencin se puede explicar en base a la competencia que se establece entre
el soluto a separar y la fase mvil por adsorberse a los centros activos polares de
la fase estacionaria. As, las molculas de soluto se encuentran adsorbidas en la
fase estacionaria y a medida que se produce la elucin van siendo desplazadas
por la fase mvil. La retencin y la selectividad en la separacin dependen de los
valores respectivos de las constantes de los diferentes equilibrios qumicos que
tienen lugar, que estn en funcin de:
La polaridad del compuesto, determinada por el nmero y naturaleza de los
grupos funcionales presentes. Los solutos ms polares quedarn ms retenidos
puesto que se adsorben ms firmemente a los centros activos de la fase
estacionaria, mientras que los no polares se eluirn con mayor facilidad.
Naturaleza del disolvente. As, para un mismo compuesto, un aumento en la
polaridad del disolvente facilita su desplazamiento en la placa. La relacin entre
las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la placa
se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas
condiciones cromatografas determinadas (adsorbente, disolvente, tamao de la
cubeta, temperatura, etc.).
Debido a que es prcticamente imposible reproducir exactamente las condiciones
experimentales, la comparacin de una muestra con otra debe realizarse eluyendo
ambas en la misma placa. Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresin: Rf =
6

distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente (Y).
Como se muestra en la figura 2.

Fig
ura 2.

RF ( Rate factor ) =

( DM ) Distancia recorrida por el compuesto

( DF )Distancia recorrida por el disolvente

Dejar secar y sumergir la

placa sin que pase las
aplicaciones.

Dejar comer el disolver

hasta una altura de unos
0.3 m antes de la
superficie cubierta por la
silica.

Sacar la placa de la
cmara y dejarla secar
unos minutos antes de
revelarla.

REVELADO DE PLACAS.

Aplicando
luz
ultraviolet
a.

Se debe contar
con una
lmpara de luz
ultravioleta,
solo debe
iluminar la
placa.

Vainilla
en
solucin
acida

Con yodo
metlico.

Las placas con las

muestras se
introducen en la
cmara, despus de
unos minutos se
hacen visibles las
manchas

Se emplea un
rociador el cual
contiene solucin
de 0.5 g de
vainilla disuelta
en 80% de H2S04
concentrado y
20% etanol.

Con
acido
sulfrico
al 50%

Se aplica
como
anteriormente
se dijo, al
ltimo se
coloca en un
plato caliente.

Cromatografa en
placa.

Documentarse en
bibliografa
proporcionada.

Seleccionar el equipo
de acuerdo a la figura
328 a 337

Preparar las cromato

placas, sumergir en
mezcla preparada.

Disolver con cloroformo en

vasos de precipitados de 100
ml, 10 mg tres muestras
impuras.

PREPARACION DE LAS
MUESTRAS
Separar y dejarlos
secar.

Calentar en la
estufa durante
media hora.

Al hacer los
aplicadores se siguen
las instrucciones de la
figura 329

Colocar en la
cmara
cromatografa un
volumen de una
mezcla de
disolventes (hexano
80% acetato de etilo
20%) y taparlo.

PREPARACION DE
LA CAMARA
CROMATOGRAFICA
9

Preparar tres ms de
referencia.

APLICANDO LAS
MUESTRAS Y
DESARROLLO DE
LA PLACA.

Aplicar con el micro

capilar una gota de
referencia y otra de
muestra.

Dejar secar y
sumergir la placa
sin que pase las
aplicaciones.

Calculo del Rf
Fs= 4.6 cm

Rfa=

a
Fs

Rfb=

b
Fs

a= 4.2 cm
b= 1.0 cm

Rfa=

4.2
=0.9130 cm
4 .6

10

Rfb=

1. 0
=0.2173 cm
4.6

Materiales:

Cromatoplaca: Hoja de vidrio de 20 x 20 cm, recubierta con el soporte o

sorbete.
Eluyente: Solvente o mezcla de solventes.
Cubeta: Contiene al eluyente y a la cromatoplaca.
Micro capilar.
Mechero de bunsen

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Observaciones
Al momento de introducir los dos portaobjetos en la mezcla (90 g de silica gel,10 g
de CaSO4 y 50 ml) se debian meter cuidadosamente ya que si no se seguia esta
instruccin correctamente la linea que separaba a la capa de mezcla con la parte
superior de la placa se obtenia desalineada.
Despues de sacar los portaobjetos de la mezcla y separarlos se observo una capa
muy fina color blanco en la parte suprior de estas placas.
Cuando se aplicaron con los capilares las gotas de muestras en los portaobjetos
me logre percatar que estas gotas se expandieron un poco, enseguida se metieron
a los frascos con hexano y metanol y por medio de la absorcion el que nos
funciono fue el frasco del metano.
Posteriormente se midio el Rf.
En el siguiente experimento al momento de agregar las dos sustancias en la
columna con absorbente en este caso silica gel,cloroformo y la muestra color azul
se logro observar como se separaron los componentes de la mezcla, teniendo
como resultados color blanco,azul y amarillo.
Mendoza Prez Daniela Sofia.

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Conclusiones.
En sntesis, al momento de realizar las cromatoplacas al introducirlas en el hexano
y metano, en esta caso el metano fue el que funciono al momento que corri por
nuestras placas esto quiere decir que como el metano es una sustancia polar, es
como si se repelaran y es por eso que nuestro disolvente comenz a subir.
Cuando se realiz lo de la columna absorbente mientras se agregaba mas
cloroformo la columna separaba con ms facilidad los componentes de nuestra
mezcla. En conclusin estos dos tipos de cromatografas ya sea de placa o de
columna absorbente nos ayudaron a separar los componentes de nuestras
mezclas utilizadas.
Mendoza Prez Daniela Sofia.

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Bibliografas.

McMurry,John, Qumica organica;Tr Mara del Carmen Rodrguez Pedroza,

Mxico: CENGAGE Learning,2012.
Leroy G. Wade, Qumica orgnica; Pearson, 2012 664 P.

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