lteo (Armstrong et aI., 1983).

Deve-se considerar a qualidade dos corpos lteos quanto

a morfologia e a colorao e, em princpio,
evitar usar qualquer possvel receptora que
apresente um ou mais folculos de tamanho
grande, luteinizado ou no. Esse tipo de folculo responsvel por um perftl hormonal atpico conforme descrito por Baril et alo(1993).
Consideraes
Finais
A TE constitui-se de uma sucesso de etapas tcnicas bem definidas. Os rendimentos
parciais de cada etapa sendo satisfatrios podem levar ao nascimento de dois a seis produtos oriundos de transferncia por doadora
tratada. A complexidade do mtodo, associado a esse resultado final, relativamente modesto quanto a produo de crias, limita o
interesse econmico da TE em caprinos.
A etapas tcnicas sendo adequadas, a eficincia das mesmas fica condicionada perfeita realizao prtica. A equipe dever ter
completo controle de cada etapa da cadeia,
pois uma boa formao terica e prtica
um pr-requisito para constituio de uma
equipe de TE. Ressalta-se que o sucesso da
TE tambm, guarda relao positiva com a
condio corporal e a sade das doadoras e
receptoras. Finalmente, o desenvolvimento
de novas biotcnicas, tais como a sexagem,
a clonagem e a transgnese oferecero TE
uma maior abrangncia de suas aplicaes,
favorecendo ampliao do uso deste mtodo de reproduo em caprinos.

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Captulo 1O

Produo in vitro de Embries

Paulo Bayard Dias Gonalves, Jos Antnio Visintin,
Marcos Antnio Lemosde Oliveira, Marcelo Marcos Montagner,
LusFabiano Santos da Costa

Introduo

A produo in vitro de embries (PIV)

envolve as etapas de colheita, maturao
(MIV) e fecundao (FIV) de ocitos, bem
como cultivo ou co-cultivo (CIV) de zigotos
e estruturas embrionrias. uma biotcnica
utilizada, alternativamente, para acelerar a
produo de animais geneticamente superiores e impedir, pela aspirao in vivo de
folculos guiada por ultra-sonografia, especialmente em bovinos, o descarte precoce
de fmeas geneticamente privilegiadas portadoras de alteraes adquiridas que impedem que a reproduo ocorre de forma
natural ou at mesmo pela transferncia de
embries. Alm desses aspectos, a PIV
tambm permite o aprofundamento dos conhecimentos relativos aos processos fisiolgicos,bioqumicos e biotecnolgicosda
espcie de interesse do estudo, sem a necessidade de extrapolar resultados pertinentes a animais de laboratrio.
Este captulo tem a finalidade de abordar
as diferentes etapas da PIV e de propiciar
uma noo geral dos processos fisiolgicos
da maturao e da fecundao de ocitos necessriospara a implementaodessa biotcnica, ressaltando-se que ser dada maior n-

fase espcie bovina em conseqncia da sua

importncia econmico-zootcnica. Entretanto, alguns tpicos sero examinados com
base em estudos conduzidos com animais de
laboratrio, assim como sero citados alguns
aspectos da PIV em sunos e ovinos. Ao final
do captulo, as fases crticas para o entendimento dos mecanismos e das tcnicas bsicas conhecidas para PIV tero sido discutidas
de maneira a possibilitar sua execuo, sendo oportuno relatar que muitas etapas desse
processo ainda no so bem compreendidas
e que, por esse motivo, torna-se difcil manter um sistema de PIV que produza embries
de forma eficiente e regular.
Histrico
H mais de um sculo, foi observada, pela
primeira vez, a fecundao de um vulo de
estrela do mar com a posterior formao da
primeira clula do futuro embrio. Os invertebrados marinhos foram objetos das primeiras investigaes porque, ao contrrio dos
mamferos, a fecundao ocorre externamente ao sistema reprodutor da fmea. Nos
mamferos, ainda no final da dcada de 20,
surgiu o primeiro relato sobre a possibilidade
de se cultivar embries de coelhos desde os

195

primeiros estdios de clivagem e na dcada

seguinte foi registrada a primeira evidncia
do nascimento de lparos resultantes do cultivo in vitro de embries. Todavia, somente
na dcada de 50, marco na histria da FIV,
que foi registrado o nascimento do primeiro
animal (coelho) gerado a partir da FIY. No
que concerne aos animais de produo, apenas no final dos anos 70 que surgiu o primeiro informe sobre a MIV e FIV de ocitos
bovinos e j no incio de 80 constatava-se o
nascimento do primeiro animal dessa espcie. A PIV em bovinos recebeu grande impulso ainda no final da dcada de 80 por ter sido

verificado que poderia ser integralmente viabilizada sob condies artificiais. Nessa mesma dcada, mas sem grande repercusso,
houveram tambm relatos de nascimento de
outras espcies ruminantes como ovinos e
caprinos. Por todo potencial de aplicao que
a PIV representa para as espcies humana e
animal, como pela sua expressividade tanto
para a cincia bsica quanto para a aplicada,
tem sido muito difundida e utilizada em diversos pases, inclusive de forma destacada
no Brasil, a partir da dcada de 90. A tabela
10.1 contm uma sntese de toda evoluo
dessa biotcnica.

Tabelo 1O.1. Evoluodos Merentes etapas do produo in vilTode embries.

1f

ANO

EPISDIO

AUTORES

- Penetroode espermotozideem ocito de estrelo do mar e formoodo primeiro clulaembrionrio

1800

HermanFoi

. Desenvolvimentode embriode coelhoin vitro at o estdiode blastocisto

1929

Lewis & Gregory

. Nascimentode coelhoresultantede embrio cultivadoin vitro

1935
1955
1959
1977
1978

- Nascimento

de coelho oriundo de ocito cultivado in vitro

- Nascimento

do primeiro coelho originado de ocito fecundado in vitro

- Maturoo

e fecundao in vitro de ocito bovino

. Louise Brown, primeiro beb nascido de fecundao in vitro em humano.

Pincus & Enzmann

Chang
Chang
Iritani
&Niwa
Steptoe & Edwards

- Noscimento de bezerro proveniente de ocito fecundado in vitro, vencendo a copacitao

espermtica em bovinos

- Completoprocessode PIVem bovinos-

1982

Brockett
et01.

1987

Luet01.

Inciodosanos90

Brosil- VriosEquipes

Atual

Diversos

maturooe fecundaode ocitos,

assimcomodesenvolvimento
embrionrio

- Estabelecimentodas tcnicosde produoin vitro de embriesem bovinos

. Utilizao das tcnicosde produode embries in vitro para pesquisae multiplicaode material
gentico no produoanimal

Aplicaes e limitaes da PIV

As tcnicas de PIV tm sido utilizadas nos
diferentes seguimentos da reproduo assistida das reas humana e animal. Inicialmente,
essas tcnicas foram empregadas unicamente
na pesquisa fundamental como instrumento
para estudar fenmenos fisiolgicos relacionados aos gametas feminino e masculino. Esses estudos permitiram o melhor entendimento dos fenmenos de crescimento, matu196

rao e fecundao de ocitos, da capacitao espermtica, bem como do desenvolvimento embrionrio precoce e de seus mecanismos de regulao. Apesar do elevado nmero de trabalhosque contriburam para elucidar muitos questionamentos cientficos,
pouco se conhece sobre a regulao desses
fenmenos fisiolgicos, principalmente no
mbito molecular. Assim sendo, a PIV tem
sido importante instrumento no esclareci-