Produccin de fenilalanina

Hay 3 formas de produccin de fenilalanina

1. Extraccin de aminocidos a partir de hidrolizados de protena
2. Sntesis qumica.
3. Produccin microbiolgica

1) Hidrolizados de protena
La hidrlisis proteica se realiza normalmente en un reactor, con control de
agitacin, pH, temperatura y tiempo del proceso. El sustrato se disuelve o
resuspende en agua hasta que el pH y la temperatura se estabilizan; a
continuacin se agrega la proteasa dando inicio a la hidrlisis. A medida que sta
progresa se produce una disminucin del pH debido a la rotura de los enlaces
peptdicos. En los casos de hidrlisis enzimtica el pH debe ser mantenido en el
ptimo de la enzima mediante la adicin de base diluida. Para finalizar la hidrlisis
proteica la enzima puede ser inactivada con calor, mediante una disminucin del
pH o con una combinacin de ambos. O tambin puede ser retirada del medio
mediante filtracin y la protena finalmente precipitada.
La hidrlisis proteoltica no se desarrolla en una sola reaccin. Se trata de un
conjunto de reacciones simultneas de ruptura de enlaces, con distintas especies
cargadas en equilibrio, lo que da una gran complejidad a este tipo de procesos.
Se propone un proceso de hidrlisis constituido por tres reacciones consecutivas.
Primero, la formacin de un complejo enzima-sustrato (protena), y despus la
rotura del enlace amdico dando como resultado la liberacin de un pptido.
Finalmente, el pptido restante se separa de la enzima despus de un ataque
nucleoflico de una molcula de agua. El proceso puede reiniciarse sobre los dos
nuevos pptidos o sobre uno solo de ellos

2) La sntesis qumica

Es ms barata que la produccin microbiana pero el producto qumico es la

mezcla pticamente inactiva de los ismeros D y L.
Rutas para obtencin de fenilalanina:

Ruta del prefenato: Biosntesis de los aminocidos aromticos

Las rutas de los aminocidos aromticos L-fenilalanina a partir del cido prefnico
pueden variar de acuerdo al organismo, y en muchos casos puede operar ms de
una ruta en una especie. En esencia, tres tipos de reaccin estn implicadas:
Transaminacin, aromatizacin descarboxilativa e hidroxilaciones, pero lo que
cambia en los organismos es el orden en el que se llevan a cabo. As, en algunos
organismos se pueden producir tanto sustratos del cido arognico como del
prefnico. Muchas bacterias y plantas tienden a sintetizar la fenilalanina y la
tirosina por separado.

3.) Microorganismos que producen la fenilalanina?

Bacterias que producen fenilalanina
Escherichia coli
Tales como la cepa AJ12739 (tyra:: Tn10, tyrR) (VKPM B-8197); cepa HW1089 (N
de registro de ATCC 55371) que aloja el gen pheA34) (US n 5.354.672); cepa
mutante MWEC101-b (KR8903681): cepas NRRL B-12141, NRRL B- 12145, NRR
B- 12146 y NRRL B-12147 (US n 4.407.952) y anlogas. la cepa K-12 [W3110
(tyrA)/pPHAB (FERM BP-3566) de E. coli, la cepa K-12 [W3110 (tyrA)/pPHAD
(FERM BP-12659) de E. coli, la cepa K-12 [W3110 (tyrA)/pPHATerm (FERM BP12662), de E. coli, y la cepa K-12 [W3110 (tyrA)/pBR-aroG4,pACMAB],
denominada como AH12604 (FERM BP-3579) (patente europea EP488424B1).
Corynebacterium glutamicum
Proteus vugaris Cepa ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae Cepa ATCC 10031
Brevibacterium
Arthhrobacterium

Microbacterium.

Microorganismo ms utilizado en la industria

Corynebacterium glutamicum con un mercado de Mercado mundial
2000(ton/ao) para la produccin de fenilalanina
Es una bacteria Gram positiva del gnero Corynebacterium, asporgena (no
produce esporas) y pleomrfica (que puede presentarse con diversas formas y
tamaos). Fue descubierta en 1957 en Japn como productor natural de cido
glutmico.1
Como la mayora de los miembros del gnero Corynebacterium, requiere
vitaminas, aminocidos, purinas y pirimidinas para su crecimiento. El rango de
temperaturas para el crecimiento est entre 30-37C
Proceso de produccin de fenilalanina mediante procesos biotecnolgicos
1) Propagacin de cultivos: comienza en un tubo de ensayo o un tubo congelado o
liofilizado donde se conserva la cepa de inters, o de una colonia del
microorganismo previamente seleccionado. Se propaga en el laboratorio
progresivamente aumentando el volumen del medio de cultivo. Esterilizacin
Preparacin de medios Fermentacin Separacin Purificacin Propagacin de los
cultivos
2) Fermentacin: Se prepara el medio de nutrientes y se esteriliza. Se siembra un
tanque de inculos cuyo volumen depende de la escala industrial. Vinoculos~501000L y fermentador industrial~10-1000 m 3).
3) Separacin y purificacin: operaciones mecnicas de ruptura de clulas;
separacin de insolubles por filtracin, centrifugacin o sedimentacin;
separaciones primarias por extraccin, absorcin, adsorcin, ultrafiltracin;
purificacin por extraccin lquido-lquido, extraccin en dos fases acuosas o
cromatografa de afinidad; aislamiento y acondicionamiento del producto.
4) No tiene relacin directa con el producto pero es una etapa imprescindible por
los volmenes involucrados y para preservar el medio.