Factores fisicoqumicos sobre el crecimiento microbiano.

Introduccin.
El crecimiento de cualquier organismo est delimitado por las condiciones del
medio en el cual se desarrolla, las cuales puede ser la temperatura a la que se
expone, el tiempo que duran expuestas al calor, la concentracin de sales y el
potencial de hidrogeno.
Es importante conocer los efectos ambientales ya que permiten explicar la
distribucin de los microorganismos en la naturaleza y permite realizar mtodos
que controlen su crecimiento, se conocen cuatro factores que tienen una funcin
destacada en el control del crecimiento microbiano, estos factores son la
temperatura, el pH, la disponibilidad del agua y el oxgeno. Estas condiciones
afectan su desarrollo en algunas bacterias pero en otras solo afecta la velocidad
en la que se desarrollan, esto por la capacidad que tienen de adaptarse al medio
donde se encuentran, ya sea por la formacin de una capa de proteccin adicional
al peptidoglicano o polisacrido dependiendo del tipo que sea gram positiva o
negativa, o por la expresin de ms genes de resistencia al estrs. La temperatura
es uno de los factores ms importantes que afectan al crecimiento y a la
supervivencia de los microorganismos, a temperaturas muy fras o muy calientes
los microorganismos no crecern. [1] ya que ejerce dos tipos de efectos opuestos
sobre los organismos vivos, conforme se eleva la temperatura las reacciones
qumicas y enzimticas de la clula son ms rpidas y el crecimiento se acelera,
pero a temperaturas por encima de la ptima para su crecimiento algunas
protenas del organismo puede sufrir daos irreversibles los cuales pueden
afectarlo. El pH es otro factor que interviene en el desarrollo de los
microorganismos, cada organismo tiene un rango de pH dentro del cual es posible
el crecimiento y normalmente posee un pH optimo bien definido, la mayora crece
en un margen de pH de 2-3 unidades, la mayora de los ambientes tienen un pH
entre 5 y 9, los organismos que se encuentran dentro del pH optimo son los ms
comunes y solo algunas especies pueden crecer por debajo de pH 2 y por encima
de 10, estos organismos son conocidos como extremofilos a pH bajos se le llama
acidfilos y a pH alto alcalfilos. El factor crtico ms importante para el carcter
acidfilo es la estabilidad de la membrana citoplasmtica, cuando el pH es neutro
la membrana citoplasmtica de las bacterias se disuelve y las clulas se lisan [1]
debido a que necesitan grandes cantidades de iones hidrogeno, en cuanto a los
alcalfilos, se destaca que estos se encuentran en hbitats muy bsicas como son
los lagos sdicos y suelos carbonatados, dentro de estas se han encontrados
organismos procariotas de la especie Bacillus, pero tambin se ha encontrado que
estos son halfilos en su general pertenecientes al dominio Archea. En la
naturaleza la disponibilidad del agua es un factor muy importante que determina el
crecimiento de los organismos vivos. La disponibilidad del agua no solo est en
funcin de la cantidad de agua que hay en el ambiente sino que tambin depende
de la concentracin de solutos, como sales, azucares u otras sustancias que

puedan estar presentes en el agua; debido a que el agua se difunde de una regin
con alta concentracin de agua a una regin con menor concentracin agua, las
regiones con alta concentracin de agua contienen una baja concentracin de
solutos mientras que las regiones con baja concentracin de agua contienen una
alta concentracin de solutos, es muy importante conocer la concentracin de
solutos para la preparacin de un medio de cultivo. En la mayora de los casos el
citoplasma celular tiene una concentracin de solutos mayor que el medio por lo
que el agua tiende a entrar dentro de la clula dicindose balance de agua
positivo, mientras que cuando la clula se encuentra en un ambiente con baja
actividad de agua, existe una tendencia del agua a salir de la clula [1]. La
presencia de oxigeno molecular (O 2) para los seres humanos es indispensable
para vivir pero no para todas las especies resulta ser necesario ya que el oxgeno
es poco soluble en agua y una vez que se encuentra dentro del agua este es
consumido rpidamente por las especies que lo requieren para su actividad
metablica. Los microorganismos se clasifican en relacin a la a cantidad que
necesitan de oxgeno y dividen aerobios, que se subdividen en estrictos que son
los que necesitan el oxgeno, los facultativos que para estos el oxgeno no es
necesario pero crecen mejor con el oxgeno y los microaerfilos, estos necesitan
el oxgeno pero en bajas concentraciones; el otro grupo son los anaerobios que a
la vez se subdividen en aerotolerantes, para los cuales el oxgeno no es
necesario, pero que no crecen mejor en oxgeno, y los estrictos para los estrictos
el oxgeno es daino inclusive letal[1].
Materiales y mtodos.
1. Determinacin de la temperatura optima de crecimiento de algunas
bacterias.
Se sembraron tres series de tubos de agar nutritivo inclinados con las bacterias
E. coli, Serratia marcescens, bacillus sp., samonella sp., y Pseudomona
aeruginosa, dejando un tubo testigo sin sembrar.
De los tubos sembrados una serie se incubo a temperatura de refrigeracin,
otra serie a temperatura ambiente y la serie restante a una temperatura de
37.5C por un lapso de 24 horas. Ya que transcurrieron las 24 horas se
compararon los tubos de las series sembradas con el tubo testigo sin sembrar
y se identific el crecimiento bacteriano en los tubos, el crecimiento se indic
con cruces para representar a que temperatura crecieron mejor para asi
determinar la temperatura ptima para el crecimiento de las bacterias

2. Efecto letal de la temperatura sobre el crecimiento bacteriano.

Dos cajas de Petri que contenan como medio de cultivo agar nutritivo se
dividieron en cinco porciones y fueron etiquetadas con la leyenda tiempo 0, 10, 20,
30 y 65min, de las cuales una se utiliz para sembrar E. coli y la otra B. subtillius.

Con ayuda de un asa estril se sembr de forma estriada sobre el rea de tiempo
0min, una pequea muestra, enseguida la muestra se coloc en bao mara a una
temperatura de 60C, despus cada 10 min se tom una pequea muestra y fue
sembrada en su rea correspondiente hasta llegar a los 65 minutos, una vez que
fueron sembradas se incubaron a temperatura ambiente.
3. Influencia de la presin osmtica sobre el crecimiento bacteriano.
Se prepararon tres series de seis tubos con caldo nutritivo con NaCl a diferentes
concentraciones 0.85%, 3.5%, 7%, 10%, y 15% y se dej un tubo control si NaCl.
Por separado se prepararon tres series de seis tubos con caldo nutritivo a los que
se les adiciono sacarosa a diferentes concentraciones 3.0%, 7.5%, 15% y 30%.
De las tres series que contenan NaCl se dej una sin sembrar, la segunda serie
se sembr con 0.1ml de E. coli y otra serie con 0.1ml de S. aureus. Se mezclaron
perfectamente hasta homogenizar y se colocaron en una gradilla y se llevaron a
incubacin a una temperatura de 35C por 24 horas. Los controles se colocaron
en refrigeracin. Una vez que concluyo la incubacin se sacaron los tubos y se
tom una muestra de cada uno de ellos y se coloc en el espectrofotmetro, ya
calibrado y ajustado con el blanco, con los datos obtenidos se realiz un registro y
posteriormente una curva de crecimiento.
4. pH.
Resultados.
1. Determinacin de la temperatura optima de crecimiento de algunas
bacterias
E. coli

Salmonella
sp.

Bacillus
sp.

Serratia
marcenses

0C
29.5C

+
++

Nulo
+++

nulo
+

37.5C

+++

++

+++

nulo
++
coloracin
rosa
+++
Ligera
coloracin
rosa

Pseudomon
a
aeuroginosa
nulo
++

+++
coloracin
verde

.
2. Efecto letal de la temperatura sobre el crecimiento bacteriano.
Tiempo
Temperatura
E. coli
B. subtillis

0min
60C
+++
+++

10min
60C
++
+++

20min
60C
++
+++

30min
60C
+
+++

65min
60C
+
+++

El crecimiento de en E. col fue afectado a los 30 minutos de haber sido expuesto a

una temperatura de 60C de forma muy notable mientras que en la placa
sembrada con B. subtillius no se observ ninguna afeccin por el tiempo que duro
expuesta la bacteria a la temperatura de 60C.
3. Influencia de la presin osmtica sobre el crecimiento bacteriano.
Sacarosa
Concentraci
n
Bacteria
s

Blanco control
E. coli
S. aureus

3%

7.5%

Absorbancias nm.
0.008
0.014
1.798
1.417
1.790
1.403
>2
1.899
>2
1.885

15%

30%

0.016
0.821
0.805
1.756
1.740

0.037
0.348
0.311
0.903
0.866

2.5
22
1.79
1.5

1.89

1.74

1.4

0.87

0.81
0.5

0.31
0
0.03

7.4999999999999997E-2

0.15

0.3

E. coli

NaCl
Concentraci
n
bacterias

Blanco control
E. coli
S. aureus

0.85%

3.5%

Absorbancias nm
0.007
0.009
1.330
1.991
1.323
1.982
1.654
1.621
1.647
1.612

7%

10%

15%

0.011
0.612
0.601
1.895
1.884

0.013
0.108
0.095
1.749
1.736

0.017
0.082
0.065
1.005
0.988

2.5
2
1.65
1.32
1.5

1.98
1.61

1.88

0.99

0.6

0.5

0.1

E. coli

4. pH.

1.74

S. aureus

0.07