Вы находитесь на странице: 1из 8

OBJETIVOS

Seleccionar

tubos

comunes

de

laboratorio

para

usarlos

como

cubetas

para

el

espectrofotmetro.
Manejar algunos de los parmetros que intervienen en el establecimiento de un mtodo
espectrofotomtrico.
Establecer las condiciones ptimas de los parmetros probados para la aplicacin del
mtodo.
INTRODUCCIN
La espectrometra es un mtodo qumico que se utiliza para cuantificar la concentracin de
analitos utilizando la luz. A los mtodos que se auxilian con la luz para llevar a cabo un anlisis
cuantitativo se le conoce como mtodos espectrofotomtricos, estos pueden tener una subclasificacin dependiendo de la longitud de onda que utilicen para

el anlisis entre los ms

conocidos estn: espectrometra de absorcin visible (colorimetra), ultravioleta e infrarrojo.


Para considerar a un mtodo espectrofotomtrico como cuantitativo primero debe de cumplir
ciertas reglas como:

El mtodo seleccionado deber ser especfico para cuantificar un analito de nuestro inters.

Que el mtodo est libre de todas las interferencias posibles al momento de hacer la
determinacin o en su defecto tratar de controlar lo ms posible estas interferencias.

Debe de tener alta precisin y alta exactitud.

El mtodo debe tener una alta sensibilidad y adems el lmite de deteccin debe de
corresponder a una concentracin baja.

Experimentalmente para el establecimiento de un mtodo espectrofotomtrico, despus de


optimizar las condiciones qumicas del sistema (pH, temperatura, control de interferentes,
concentracin adecuada de reactivos, solvente apropiado, proteccin a la luz para evitar
reacciones fotoqumicas, etc.) que garanticen que se tiene la especie de inters en condiciones
adecuadas para la medida, se establecen los siguientes parmetros:
Longitud de onda analtica, intervalo ptimo de concentraciones, curva de calibracin,
sensibilidad del mtodo analtico y lmite de deteccin.
Tubo

%T400

No.

(NiSO4)

12.4

12.6

11.9

12.5

12.5

12.3

12.5

12.5

12.4

10

12.3

RESULTADOS, CLCULOS Y PREGUNTAS


Tabla 1. Seleccin de tubos comunes para usarlos como celdas.

Explique qu son las superficies pticas equivalentes y el


dimetro interno equivalente.

La superficie ptica equivalente se refiere a que las celdas presenten una superficie homognea,
es decir que sean idnticas o similares en cualquier punto de stas. Asimismo deben tener igual
grosor en toda la circunferencia del tubo.
El dimetro interno equivalente es anlogo a la superficie ptica equivalente: el dimetro de los
tubos

deber

ser

igual

en

cada

tubo

para

que

el

paso

de

luz

sea

constante.

Tabla 2. Curva de calibracin de Fe3+ por el mtodo del NH4SCN.


Para determinar la cantidad de in

A ajustada
Tubo

Fe3+

No.

(g/mL)

A480

por

yprctico-

regresin

yterico

frrico presente en cada tubo, se


procede al siguiente clculo:

lineal
1

blanco

0.07

0.018

0.020

-0.002

0.175

0.029

0.037

-0.008

0.35

0.062

0.065

-0.003

0.7

0.116

0.120

-0.004

1.05

0.183

0.176

0.007

2.45

0.399

0.399

3.85

0.630

0.622

0.008

10

6.65

1.071 2

1.067

0.004

11

8.05

1.300

f(x)1.290
= 0.16x + 0.010.010

12

9.45

1.505

R 1.513
=1

-0.008

1.735

-0.009

8
9

56 g/mol --------------- 1M
X

(1 litro)

--------------- 0.00025 M

(1

litro)
X = 0.014 g/mol
Peso molecular Fe3+ = 56 g/mol
[FeCl3] = 0.00025 M

Curva
de0.847
calibracin
de 0.003
Fe3+ Ahora calculamos la cantidad de Fe
5.25
0.844
1.5

13
10.85(480 nm)
1.726 1
Absorbancia
adicionados de

por mililitro en el tubo no. 2 por


ejemplo:
0.014 g/mol ----------- 1000 mL
X

----------- 0.1 mL (mL

FeCl0.5
3)

-6

X = 1.4x10 g = 1.4 g entre los 20 mL de la mezcla de FeCl 3, H20 y NH4SCN


g/mL

3+

10

X = 0.07

12

detubo.
Fe3+ (g/mL)
Se realizan los mismos clculosCantidad
para cada

Para calcular los valores de A


ajustada por regresin lineal, simplemente usamos la siguiente ecuacin:
y = 0.1591x + 0.0091
Sustituyendo en x los datos de Fe 3+ (g/mL) de la tabla anterior. Ejemplo tubo 2:
y = 0.1591 (0.07) + 0.0091 = 0.020

Lmite de deteccin o concentracin mnima detectable (LDD).

Para su clculo, primero se obtiene la desviacin estndar S B teniendo en cuenta que n = 12 ya


S B = 6.9x10-3

que ste fue el nmero de tubos usados.


Ahora se usa la ecuacin y = yB + 3SB, en donde:

y = Medida de absorbancia producida por la concentracin mnima detectable.


yB = Medida de absorbancia del blanco u ordenada al origen = 0.0091
SB = Desviacin estndar del blanco = 6.9x10-3
Entonces se obtiene que y = yB + 3SB = 0.0091 + 3(6.9x10-3) = 0.0298
Finalmente se despeja a x de la ecuacin de la recta de regresin lineal y el resultado obtenido
ser el lmite de deteccin.
y = 0.1591x + 0.0091

b= 0.02980.0091 /0.1591=0.13
LDD=x= ya/
Tabla 3. Datos para aplicar el Mtodo de Ringbom en la determinacin de Fe 3+ por el mtodo del
SCN-.
Tubo
No.

Fe
Log Ringbom para
Absortanci
Curva
de
Fe3+
A
%T
3+

(g/mL)

[Fe3+]

480

120

blanco

0.07

-1.15

0.020

95.50

4.50

0.175

-0.76

0.037

91.83

8.17

0.35

-0.46

0.065

86.10 80

13.90

0.7

-0.15

0.120

75.86

24.14

Absortancia
(100-%T)
6
1.05
0.02

0.176

66.68

100

60

33.32

2.45

0.39

0.399

39.90 40

60.10

3.85

0.59

0.622

23.88

76.12

5.25

0.72

0.844

14.32 20

85.68

10

6.65

0.82

1.067

8.57

11

8.05

0.91-1.5

1.290
-1

5.13
-0.5

12

9.45

0.98

1.513

3.07

96.93

13

10.85

1.04

1.735

1.84

98.16

0
0

91.43
94.87
0.5

Log [Fe3+]

1.5

Para obtener el porcentaje de error fotomtrico es necesario calcular a la pendiente de la parte


recta de la curva de Ringbom. Para esto se escogen dos puntos sobre la recta, marcados con
unas X en el grfico. Ahora interpolamos esos dos puntos hacia los ejes de Absortancia y log
[Fe3+].
Punto 1

x1 = log [Fe3+] = 0

y1 = Absortancia = 32

Punto 2

x2 = log [Fe3+] = 0.75

y2 = Absortancia = 89

Convertimos los log [Fe3+] a concentracin de ion frrico y las absortancias a absorbancias para
determinar los intervalos donde se presenta el error fotomtrico mnimo:
x1 = 1

x2 = 5.62

y1 = 0.167
m , y2 = 0.959

Intervalo ptimo de concentraciones


Intervalo ptimo de absorbancias

y 2 y 1 8932
m= 2.303 =
=76
x 2x
1 0.750
76
100=3.03

2.303/ 100=
%Ep=

Grfica de tiempo vs absorbancia


0.58
0.56
0.54

0.52
Tabla 4. Estabilidad del color respecto
al tiempo.

Absorbancias (480 nm)

Tiempo
(min)

A480

0.561

30

0.515

60

0.496

90

0.485

120

0.476

0.5
0.48
0.46
0.44
0.42
0

20

40

60

80

100

120

140

Tiempo de reposo (min)


Es

estable

el

color?
No

Cul es el tiempo ptimo para hacer las lecturas? Explique porqu.


Al min 0, ya que es cuando la absorbancia obtenida se acerca ms al centro de la curva de
calibracin, lugar donde se presenta el error fotomtrico mnimo.

Tabla 5. Efecto de la concentracin de SCN - en la determinacin de Fe3+.


SCN-

Fe3+

SCN-/

(g/mL)

(g/mL)

Fe3+

870.0

0.046

87.0

4.2

20.71

0.168

232.0

4.2

55.24

0.359

870.0

4.2

207.14

0.564

2900.0

4.2

690.48

0.591

5800.0

4.2

1380.95

0.706

8700.0

4.2

2071.43

0.748

11600.0

4.2

2761.90

0.811

14500.0

4.2

3452.38

0.806

Tubo No.

Para la cantidad de Fe

3+

56 g/mol --------------- 1M
X

A480

en todos los tubos:


Peso molecular Fe 3+ = 56 g/mol

(1 litro)

--------------- 0.00025 M

(1 litro)

X = 0.014 g/mol
0.014 g/mol ----------- 1000 mL
X

----------- 3 mL (mL adicionados de FeCl 3)

X = 4.2x10-5 g = 42 g entre 10 mL (totales) = 4.2 g/mL


Para la cantidad de SCN- en el tubo 2:

[FeCl 3] = 0.00025 M

0.8

58 g/mol --------------- 1M

Absorbancias (480 nm)

0.6

Peso molecular SCN - = 58 g/mol

(1 litro)

--------------- 0.5 M 0.4(1 litro)

[NH 4SCN] = 0.5 M

0.2

X = 29 g/mol
29 g/mol ----------- 1000 mL

0
0

500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000

Relacinde
de
SCN-/
Fe3+
----------- 0.03 mL (mL adicionados
NH
4SCN)

X = 8.7x10-4 g = 870 g
entre 10 mL (totales) = 87 g/mL

Grfica de A vs pH
1

Tabla 6. Efecto del pH.

0.8

Tubo
No.
1

pH

A480

De qu manera influye el pH en el sistema colorido?


0.6

pHs cidos se mantiene el sistema colorido. Conforme


Absorbancias (480 Anm)
0.4
Blanco

0.893

0.913

0.924

0.007

0.004

aumenta el valor de pH, el sistema pierde la capacidad de


0.2 de la radiacin y se obtienen absorbancias muy bajas.
absorcin
0

Cul
0 1es 2el 3pH 4 recomendado
5 6 7 8 para que se efecte la
3+
reaccin Fe y el SCN? pH = 3

pH

Tabla 7. Efecto de algunos aniones en la reaccin Fe 3+ - SCN-.


Anin

A480 inicial

A480 final

Fluoruro

0.847

0.346

Oxalato

0.823

0.069

Tartrato

0.811

0.798

Fosfato

0.810

0.701

Cul es el efecto de los diferentes aniones sobre la reaccin entre el in frrico y el


tiocianato?

Disminuyen los valores de absorbancia. En orden creciente de interferencia se tienen a los


aniones: oxalato, fluoruro, fosfato y tartrato. Este ltimo presenta una interferencia muy
pequea.

A qu se debe este efecto?


Los fosfatos, fluoruros y oxalatos aun en pequeas cantidades interfieren formando complejos
estables con los iones frricos.

Tabla 8. Condiciones ptimas para la determinacin de Fe 3+ con NH4SCN.


Parmetro

Valor ptimo

pH

Tiempo

Concentracin de SCNLmites de concentracin con %Ep


mnimo
Aniones que interfieren (en orden
creciente)
Lmite de deteccin del mtodo
(LDD)

870 g/mL
1-5.62 g/mL
Oxalato, fluoruro, fosfato y
tartrato
0.13

DISCUSIN DE RESULTADOS
Para la seleccin de tubos, se eligieron a aqullos que presentaban caractersticas visualmente
similares, como: mismo dimetro, mismo grosor y con boquilla gruesa y pronunciada. Todas
estas caractersticas nos facilitan las lecturas de porcentaje de transmitancia, ya que si no fuera
de esta manera, los valores nos variaran ms del 2% de diferencia establecida. De igual manera,
el paso de luz es constante o casi constante cuando se realiza una seleccin de tubos de la
forma antes descrita.
El lmite de deteccin, que se define como aquella concentracin que proporciona una seal
instrumental significativamente diferente de la seal del blanco, obtenido en este experimento
fue de 0.13. Existe una relacin entre el LDD y la sensibilidad. La palabra sensibilidad se utiliza
como sinnimo de lmite de deteccin bajo, por lo que se puede decir que nuestro mtodo
espectrofotomtrico es sensible gracias a que se obtuvo un lmite de deteccin pequeo.
Existe un valor de porcentaje de error fotomtrico mximo, el cual es del 5%. El %Ep que
obtuvimos fue del 3.03% por lo que nos encontramos dentro del intervalo permitido de error.
CONCLUSIONES

Para un buen establecimiento de un mtodo espectrofotomtrico es necesario elegir inicialmente


tubos con superficies pticas equivalentes y dimetros similares, al igual que controlar variables
como pH, tiempo, concentracin de analitos y presencia de interferencias.
Las condiciones ptimas para el buen funcionamiento del mtodo espectrofotomtrico realizado
son pHs cidos (de 0 a 3), tiempo mnimo de reposo (menos del minuto), concentracin de SCN de 870 g/mL y evitar la presencia de aniones como fluoruros, oxalatos y fosfatos.
BIBLIOGRAFA

Torres Cartas Sagrario, Gmez Benito Carmen. Tcnicas instrumentales. Manual de


Laboratorio. Editorial Universidad Politcnica de Valencia. pp. 60-61.