La cromatografa es el trmino colectivo para un conjunto de tcnicas de laboratorio

para la separacin de mezclas. La mezcla se disuelve en un lquido llamado la fase

mvil, que la lleva a travs de una estructura de sujecin otro material llamado la fase
estacionaria. Los diferentes constituyentes de la mezcla de viajes a velocidades
diferentes, haciendo que se separen. La separacin se basa en la particin diferencial
entre las fases mvil y estacionaria. Diferencias sutiles en el coeficiente de particin
resultado de un compuesto en la retencin diferencial sobre la fase estacionaria y
cambiando de este modo la separacin.
La cromatografa puede ser preparativa o analtica. El propsito de la cromatografa
preparativa es para separar los componentes de una mezcla para un uso ms
avanzada. Cromatografa analtica se lleva a cabo normalmente con cantidades ms
pequeas de material y es para la medicin de las proporciones relativas de analitos
en una mezcla. Los dos no son mutuamente excluyentes.
Historia
Cromatografa, literalmente "escritura colores", fue empleada por primera vez por el
cientfico ruso-italiano Mikhail Tsvet en 1900. Sigui trabajando con la cromatografa
en la primera dcada del siglo 20, principalmente para la separacin de los pigmentos
vegetales como la clorofila, carotenos y xantofilas. Dado que estos componentes
tienen diferentes colores que dio la tcnica de su nombre. Nuevos tipos de
cromatografa desarrollados durante los aos 1930 y 1940 hicieron la tcnica til para
muchos procesos de separacin.
Tcnica de cromatografa desarrollado sustancialmente como resultado del trabajo de
Archer John Porter Martin y Richard Laurence Millington Synge durante los aos 1940
y 1950. Se establecieron los principios y tcnicas bsicas de la cromatografa de
reparto, y su trabajo alent el rpido desarrollo de varios mtodos cromatogrficos:
cromatografa en papel, cromatografa de gases, y lo que se conocera como la
cromatografa lquida de alta resolucin. Desde entonces, la tecnologa ha avanzado
rpidamente. Los investigadores encontraron que los principales principios de la
cromatografa de Tsvet podran aplicarse de muchas maneras diferentes, dando lugar
a las diferentes variedades de cromatografa se describen a continuacin. Los
avances estn mejorando continuamente las prestaciones tcnicas de cromatografa,
lo que permite la separacin de molculas cada vez ms similares 1.

1 http://lasaludfamiliar.com/caja-de-cerebro/conocimiento-10050.html

Historia[editar]
El botnico ruso Mijal Tsweet 2(Mikhail Semenovich Tsweet, 1872-1919) emple por primera
vez en 1906 el trmino "cromatografa" (que proviene del griego y que significan
respectivamente chroma "color" y graphos "escribir"). A comienzos del ao 1903, Mijail Tsweet
us columnas de adsorcin de lquidos para separar pigmentos vegetales (por
ejemplo, clorofilas). Las disoluciones se hacan pasar a travs de una columna de vidrio
rellena de carbonato de calcio, que finamente dividido de un material poroso que interacciona
de forma diferente con los componentes de la mezcla, de forma que stos se separaban en
distintas bandas coloreadas a lo largo de la columna.
Los primeros equipos de cromatografa de gases aparecieron en el mercado a mediados del
siglo XX. A su vez, la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) comenz a desarrollarse
en los aos 1960, aumentando su importancia en las dcadas siguientes, hasta convertirse en
la tcnica cromatogrfica ms empleada. Sin embargo esto se ir modificando con el paso de
los aos.

2 La cromatografa. Fundamentos de tecnologa de productos fitoteraputicos. Nikolai Sharapin.

Editorrial Convenio Andrs Bello, 2000. ISBN: 9586980014. Pg. 159-190.l

Historia[editar]
Los mtodos inicos3 han sido utilizados desde 1850, cuando H. Thompson y J. T. Way,
investigadores deInglaterra, trataron diversas arcillas con sulfato de amonio o carbonato en
solucin para extraer el amonacoy liberar calcio. En 1927, la primera columna
de zeolita mineral fue utilizada para eliminar iones de calcio ymagnesio que interferan en la
solucin, para determinar el contenido de sulfato de agua. La versin moderna de la IEC se
desarroll durante la poca de la guerra del Proyecto Manhattan. Era necesaria una tcnica
para separar y concentrar los elementos radiactivos necesarios para hacer la bomba atmica.
Los investigadores eligieron absorbentes que pudieran cerrarse sobre elementos
transurnidos cargados, y que pudieran ser eliminados diferencialmente. ltimamente, una
vez desclasificado, estas tcnicas pueden utilizar nuevas resinas IE para desarrollar los
sistemas que se utilizan a menudo hoy en da para la purificacin especfica de productos
biolgicos y de sustancias inorgnicas. A principios de los '70, la cromatografa inica, fue
desarrollada por Hamish Small y sus compaeros de trabajo en Dow Chemical Company
como un novedoso mtodo de IEC utilizables en el anlisis automatizado. CI utiliza resinas
inicas ms dbiles para su fase estacionaria y una nueva neutralizacin de stripper, o
supresor de la columna para eliminar los iones quitados que se depositan en el fondo. Es una
poderosa tcnica para determinar bajas concentraciones de iones y es especialmente til en
estudios sobre el medio ambiente y la calidad del agua, entre otras aplicaciones.
La tecnologa de Dow Chemical fue adquirida por Durrum Instrument Corp. (fabricante del
Durrum D-500), que luego form una unidad de negocios separada para sus nuevos
productos CI, llamada Dionex (Dow Ion Exchange). Dionex Corporation fuer incorporada en

3 http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_de_intercambio_i
%C3%B3nico

1980 en Sunnyvale, California, y dirigida por A. Blaine Bowman, que adquiri los activos de
Dionex

Mtodos cromatogrficos.4
Mtodos variados de separacin de mezclas se conocen como cromatografa.
Segn la definicin dada por Keulemans la cromatografa es un mtodo de
separacin en el que los componentes a desglosar se distribuyen entre dos fases,
una de las cuales constituye un lecho estacionario de amplio desarrollo superficial
y la otra es un fluido que pasa a travs o a lo largo del lecho estacionario.
La cromatografa se introduce en los mtodos de separacin en 1903 y su
posterior desarroll y evolucin se produce hacia 1930. La primera persona que
defini la cromatografa fue el botnico ruso Miguel Tswett (1872-1913) en 1906 y
eligi el trmino cromatografa procedente de las palabras griegas khromatos (color)
y graphos(escrito) ya que utiliz el trmino cromatografa para describir la
separacin de pigmentos vegetales en distintas zonas coloreadas. Aunque la
mayor parte de las separaciones que se realizan actualmente son de compuestos
incoloros, el trmino inicial cromatografa se ha mantenido.

Definicin de cromatografa
En 1906 Tswett defini la cromatografa como:
Mtodo en el cual los componentes de una mezcla son separados en una columna
adsorbente dentro de un sistema fluyente.

Recientemente la I.U.P.A.C define la cromatografa de forma ms amplia como:

Mtodo usado principalmente para la separacin de los componentes de una muestra, en el
cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria,
mientras que la otra es mvil. La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido soportado

4 http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia

en un slido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una

columna, extendida en una capa, distribuida como una pelcula, etc...

Se utiliza el trmino general de lecho para definir las distintas formas en que
puede encontrarse la fase estacionaria. Las separaciones cromatogrficas se
consiguen mediante la distribucin de los componentes de una mezcla entre la
fase fija y la fase mvil. La separacin entre dos sustancias empieza cuando una
es retenida ms fuertemente por la fase estacionaria que la otra, que tiende a
desplazarse ms rpidamente en la fase mvil. las retenciones mencionadas
pueden tener su origen en dos fenmenos de interaccin que se dan entre las dos
fases y que pueden ser :
1.-La adsorcin, que es la retencin de una especie qumica por parte de los puntos
activos de la superficie de un slido quedando delimitado el fenmeno a la
superficie que separa las fases o superficie interfacial.
2.- La absorcin, que es la retencin de una especie qumica por parte de una
masa, y debido a la tendencia que esta tiene a formar mezcla con la
primera, absorcin pura, o a reaccionar qumicamente con la misma, absorcin con
reaccin qumica, considerando ambas como un fenmeno msico y no superficial.

Aspectos histricos de la cromatografa

Aunque procesos parecidos ocurren en la naturaleza cuando disoluciones pasan a
travs de arcilla, rocas, etc... la cromatografa como tal adquiere importancia
cuando en 1850 el qumico F.F.Runge, que trabajaba con tintas, descubri que los
cationes orgnicos se separaban por migracin cuando se depositaba una
disolucin que los contena sobre un material poroso, como papel.
En 1906 el botnico ruso Tswett utiliz la cromatografa en columna para separar
extractos vegetales coloreados, y a este proceso le di el nombre de
cromatografa. Pero el mayor desarrollo se produce en 1930 con Lederer cuando
consigue separar los colorantes de la yema de huevo. Posteriormente los
qumicos Khun, Kamer y Ruzucca desarrollan la cromatografa en el campo de la

qumica orgnica e inorgnica, y obtienen el premio Nobel por sus trabajos en

1937, 1938, 1939 respectivamente.
A partir de 1940 los mtodos cromatogrficos adquieren extensin mundial de
forma que en 1940 Tiselius divide los mtodos cromatogrficos en cromatografa
por anlisis frontal, desarrollo por elucin y desarrollo por desplazamiento, obtuvo el
premio Nobel por sus trabajos en 1948.
Al mismo tiempo la cromatografa se aplicaba en el campo de la bioqumica, y as
Martin consigue separar algunos aminocidos acetilados.

Aspectos histricos de los distintos tipos de

cromatografa.
Cromatografa en papel
Fue desarrolla por Martin. Tiene como soporte un papel de celulosa. Adquiri una
gran extensin por su sencillez y presenta la ventaja de poder utilizar miligramos y
microgramos, adems presenta la opcin de utilizar tanto la tcnica descendente
( en columna, etc...) como la tcnica ascendente.

Cromatografa en capa fina

Fue originada por los trabajos de los investigadores rusos Izmailov y Schraiberen
en 1938 al separar mezclas de tinturas farmacuticas. En este tipo de
cromatografa la fase estacionaria se extiende sobre un soporte inerte, la dificultad
que presentaba el mtodo era el crear una capa homognea, sin ningn tipo de
rugosidad. La cromatografa en capa fina tuvo valor limitado hasta que Stahl
estandariz el mtodo para elaborar capas finas por mtodos mecnicos.

Cromatografa de intercambio inico

Esta tcnica apareci durante la II Guerra Mundial y en principio tena la finalidad
de separar las tierras raras y los elementos de transicin. En 1938 Taylor y Urey
utilizan este mtodo para separar istopos de Litio y Potasio utilizando resinas de
zeolita. En 1939 Samuel logra sintetizar resinas de intercambio inico.

Cromatografa de gel-filtracin
Fodin y Porath en 1958 descubren que usando como fase estacionaria geles se
consigue separar polmeros sintticos de alto peso molecular.

Cromatografa de afinidad.
Ideada por Porath en 1967, usando como fuente un pptido o protena unida
covalentemente a un ligando y se utiliza para la separacin de molculas
proteicas.

Cromatografa de gas.
Es una de las tcnicas ms utilizadas e importantes, de forma que ha
revolucionado el campo de la qumica analtica.