UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BIOMDICAS Y BIOTECNOLOGA
ESCUELA DE BIOLOGA
PRCTICA N 02

TITULO: RECONOCIMIENTO Y DESNATURALIZACION DE

PROTEINAS - CARBOHIDRATOS

DOCENTE: Blgo. Jorge Luis Marapara del Aguila Dr.

ALUMNO:

Del Aguila Rios, Kevin Javier

CURSO VACIONAL: BIOQUIMICA

FECHA DE EJECUCION:

04-02-15

FECHA DE PRESENTACION:

11-02-15

IQUITOS PER
2015

CARBOHIDRATOS

1. INTRODUCCIN:
Los elementos constituyentes de los organismos no se encuentran en
ellos en estado libre, si integrando las multiples molculas orgnicas
e inorgnicas que intervienen en su estructura y funcionamiento. La
complejidad de estas molculas muy variada desde la ms simples,
como el Cina formado por dos tomos distintos, hasta los polmeros
de alto peso molecular como las protenas y los polisacridos, asi
como los cidos nucleicos y los lpidos. Excepcionalmente se
encuentran elementos al estado libre cual ocurre con el oxigeno
molecular, muy activo metabolicamente, y el Nitrgeno, molcula
aparentemente inerte en la mayor parte de los organismos conocidos.
Los distintos atomos en estas moleculas se encuentran ligados e
interaccionan entre si con uniones de fuerza y propiedades muy
distintas. La intensidad de estas uniones se mide como la energia,
expresadas en kilocaloras por mol (Kcal/mol), necesarias para
romperlas y que va desde el 1Kcal/mol en las uniones mas debiles,
hasta ms de 100 Kcal/mol en las fuertes. Por lo general cuanto
mayor es la energia de unin que liga de dos tomos, menor es la
distancia entre ellos; el conocimiento de las propiedades de cada uno
de este tipo de uniones y de las caractersticas imprimen a las
molculas permiten explicar la conformacin y el comportamiento de
las celulas biolgicas.
2. OBJETIVOS
Al analizar la practica, estudiante sera capaz de:
-

Conocer los diferentes reactivos que ayudan a identificar a los

carbohidratos, lpidos y protenas en materiales biolgicos.
Demostrar la presencia de compuestos orgnicos en diversos
materiales biolgicos.

3. MATERIALES
Del Ctedra
Reactivo de Benedict
Solucin de Glucosa 1%
subgrupo
Solucin de Almidn
Solucin de Lugol
Agua destilada
Tubos de ensayo
Mecheros y gradillas

Del Alumno
50 g Almidn
2 Huevo de gallina por
50 g Azcar de mesa

4. Mtodos
Reconocimientos de carbohidratos
Dentro de los carbohidratos se presenta la glucosa como monmero, de
esta manera libre presenta un grupo funcional que con la presencia del
reactivo de Benedict y calor da color rojo ladrillo.
Reactivo de Benedict
Es una reaccin cualitativa que sirve para determinar la presencia de
azcar reductor q no es sacarosa (carece de carbono anomrico y no es
azcar reductor).
Experimento:
TUBO DE ENSAYO
Componentes
I
1ml

Solucin de glucosa

II

Azcar de mesa
Clara de huevo
Reactivo de Benedict

III

1ml

0.5ml

1ml
0.5ml

0.5ml

Mezclar por inversin el reactivo con cada uno de los componentes

Someter a la accin del calor
Observar la formacin de un precipitado rojo ladrillo (CH 2O), en bao de agua.
Reconocimiento del almidn
El fundamento de esta tcnica se basa en la especifidad del almidn cuando
est bajo la forma de micelas Hidratadas de teirse de azul por el Yodo.
La amilasa es disolucin coloidal toma color azul, la amilopectina da una
coloracin roja violceo.

TUBO DE ENSAYO
Componentes
I
II
Solucin de almidn
Clara de huevo
1ml
Reaccin de Lugol
2gotas

1ml

2gotas

Observar los primeros cambios de coloracin

Mezclar por inversin

PROCEDIMIENTO:
REACCION DE BENEDICT.
-

Procedemos a utilizar en la presente prctica 5 tubos de ensayos, correctamente

limpios.
Elaboramos el reactivo de benedict
El reactivo de benedict consta de:
Sulfato cprico
Citrato de sodio
Carbonato anhidro de sodio
Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio

1 tubo de ensayo se agreg 1ml de solucin de glucosa al 1%.

2 tubo de ensayo se agreg 1ml de solucin de sacarosa 1%
3 tubo de ensayo se agrega 1ml de clara de huevo.
A cada tubo se le aadi 0.5 ml de reactivo de Benedict mezclando por
inversin y se someti a la accin del calor a bao mara.
RESULTADOS.
1 TUBO: solucin de glucosa + reactivo de Benedict + temperatura.
-

Al realizar la prctica, notamos que la solucin de glucosa era de color

transparente y el reactivo de Benedict era de un color celeste.
Al mezclar ambas sustancias obtuvimos una sustancia de color celeste claro.
Posteriormente procedimos a calentar la mezcla y notamos que en menos de 1
minuto la sustancia qumica cambiaba de color y paso de celeste claro a un color
naranja o marrn anaranjado, indicando as la presencia de glcidos, en
este caso la presencia de GLUCOSA.

2 TUBO: sacarosa + reaccin de Benedict + temperatura.

Al realizar la prctica, notamos que la sacarosa era de color transparente y el

reactivo un color celeste.
Al mezclar ambas sustancias obtuvimos una sustancia de color celeste claro y al
calentar la mezcla notamos que no hubo cambio de color ya que la sacarosa no
es un azcar reductor, porque no tiene un grupo aldehdo libre y eso hace
que la sacarosa mantenga su color.

3 TUBO: clara de huevo + reaccin de Benedict + temperatura.

-

En este procedimiento sucedi lo mismo que en el segundo tubo, solo que la

clara de huevo con Benedict al someterlo a temperatura se solidifico.

Imagen de la reaccin.

RECONOCIMIENTO DE ALMIDON.
-

El fundamento de esta tcnica se basa en la especificidad del almidn cuando

est bajo la forma de micelas hidratadas de teirse de azul por el yodo.
La amilosaes disolucin coloidal toma color azul o violeta intenso, la
amilopectina da una coloracin rojo violceo.
Se utilizaron dos tubos en el cual:
1 tubo se agreg 1ml de solucin de almidn.
2 tubo se agreg 1ml de clara de huevo.

 A cada tubo se aadieron 2 gotas de reactivo de Lugol, se mezcl por inversin

y se observ los primeros cambios de coloracin.

RESULTADOS.
1 TUBO: Lugol + almidn, El lugol es una solucin de yodo metlico y yoduro de
potasio que sirve para identificar polisacridos. Ya con esta descripcin, cuando se
agreg a la solucin de almidn, el Lugol, esta se tio de un color violeta intenso.
Esto es debido a que los tomos de yodo se introducen en las espirales (amilosa),
por lo tanto no es una verdadera reaccin qumica si no que se forma un compuesto
de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, dndole esa
coloracin.
2 TUBO: lugol + clara de huevo, no se observ reaccin puesto que no hay
presencia de almidn

Prctica de Laboratorio N 03.

TEMA:RECONOCIMIENTO Y DESNATURALIZACION DE
PROTENAS
I.

INTRODUCCIN:
1.1.- DEFINICIN:
***COMPOSICIN QUMICA Y CLASIFICACIN DE LAS
PROTENAS***

Las protenas son los materiales que desempean un mayor nmero de funciones en las
clulas de todos los seres vivos. Por un lado, forman parte de la estructura bsica de los
tejidos (msculos, tendones, piel, uas, etc.) y, por otro, desempean funciones
metablicas y reguladoras (asimilacin de nutrientes, transporte de oxgeno y de grasas
en la sangre, inactivacin de materiales txicos o peligrosos, etc.).
Son macromolculas orgnicas, constituidas bsicamente por carbono (C), hidrgeno
(H), oxgeno (O) y nitrgeno (N); aunque pueden contener tambin azufre (S) y fsforo
(P) y, en menor proporcin, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc.
Estos elementos qumicos se agrupan para formar unidades estructurales
llamadosAMINOCIDOS, a los cuales podramos considerar como los "ladrillos de los
edificios moleculares proteicos".

AMINOCIDOS
Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce. Los aminocidos se caracterizan
por poseer un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (-NH2).
Los aminocidos son las unidades elementales constitutivas de las molculas
denominadas Protenas. Son pues, y en un muy elemental smil, los "ladrillos" con los
cuales el organismo reconstituye permanentemente sus protenas especficas
consumidas por la sola accin de vivir. Los alimentos que ingerimos nos proveen
protenas. Pero tales protenas no se absorben normalmente en tal constitucin sino que,
luego de su desdoblamiento ("hidrlisis" o rotura), causado por el proceso de digestin,

atraviesan la pared intestinal en forma de aminocidos y cadenas cortas de pptidos.

Esas sustancias se incorporan inicialmente al torrente sanguneo y, desde all, son
distribuidas hacia los tejidos que las necesitan para formar las protenas, consumidas
durante el ciclo vital.
Se sabe que de los 20 aminocidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o
esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semiindispensables". Son estos 10
aminocidos los que requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana
alimentacin y, con ms razn, en los momentos en que el organismo ms los necesita:
en la disfuncin o enfermedad. Los aminocidos esenciales ms problemticos son el
triptfano, la lisina y la metionina. Es tpica su carencia en poblaciones en las que los
cereales o los tubrculos constituyen la base de la alimentacin. Los dficit de
aminocidos esenciales afectan mucho ms a los nios que a los adultos.
Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (aminocido esenciales) no ser posible
sintetizar ninguna de las protenas en la que sea requerido dicho aminocido. Esto puede
dar lugar a diferentes tipos de desnutricin, segn cual sea el aminocido limitante.

LOS PPTIDOS Y EL ENLACE PEPTDICO

Los pptidos estn formados por la unin de aminocidos mediante un enlace peptdico.
Es un enlace covalente que se establece entre el grupo carboxilo de un aminocido y el
grupo amino del siguiente, dando lugar al desprendimiento de una molcula de agua.
As pues, para formar pptidos los aminocidos se van enlazando entre s formando
cadenas de longitud y secuencia variable. Para denominar a estas cadenas se utilizan
prefijos convencionales como:

Oligopptidos : Si el n de aminocidos es menor de 10.

Dipptidos

: Si el n de aminocidos es 2.

Tripptidos

: Si el n de aminocidos es 3.

Tetrapptidos :Si el n de aminocidos es 4.

Polipptidos o cadenas polipeptdicas: Si el n de aminocidos es mayor de 10.

Cada pptido o polipptido se suele escribir, convencionalmente, de izquierda a

derecha, empezando por el extremo N-terminal que posee un grupo amino libre y
finalizando por el extremo C-terminal en el que se encuentra un grupo carboxilo libre,
de tal manera que el eje o esqueleto del pptido, formado por una unidad de seis tomos
(-NH-CH-CO-), es idntico a todos ellos. Lo que vara de unos pptidos a otros, y por
extensin, de unas protenas a otras, es el nmero, la naturaleza y el orden o secuencia
de sus aminocidos.

Si la hidrlisis de una protena produce nicamente aminocidos, la protena se

denomina simple. Si, en cambio, produce otros compuestos orgnicos o inorgnicos,
denominados grupo prosttico, la protena se llama conjugada.

PROPIEDADES DE LAS PROTENAS

Estado nativo

Estado desnaturalizado

Desnaturalizacin: Consiste en la prdida de la estructura terciaria, por romperse los

puentes que forman dicha estructura. Todas las protenas desnaturalizadas tienen la
misma conformacin, muy abierta y con una interaccin mxima con el disolvente, por
lo que una protena soluble en agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y
precipita.
La desnaturalizacin se puede producir por cambios de temperatura, (huevo cocido o
frito), variaciones del pH. En algunos casos, si las condiciones se restablecen, una
protena desnaturalizada puede volver a su anterior plegamiento o conformacin,
proceso que se denomina renaturalizacin.
El mayor grupo lo constituyen las enzimas, que son los biocatalizadores de todos los
procesos qumicos que tienen lugar en los seres vivos. Las enzimas, en su gran mayora,
son especficas para cada reaccin, de ah su gran nmero. Como son catalizadores,
actan disminuyendo la energa de activacin, combinndose con los reaccionantes para
producir un estado intermedio con menor energa de activacin que el estado de
transicin de la reaccin no catalizada. Una vez formados los productos de la reaccin,
la enzima se recupera.
Especificidad.
Cada una lleva a cabo una determinada funcin y lo realiza porque posee una
determinada estructura primaria y una conformacin espacial propia; por lo que un
cambio en la estructura de la protena puede significar una perdida de la funcin
biolgica.
Punto isolectrico.
Es un campo electrico de corriente electrica; la proteina en su punto isolectrico:
-

Disminuye la solubilidad.
Disminuye la actividad biologica.

II.

OBJETIVOS

Conocer los diferentes reactivos que ayudan a identificar a los carbohidratos,

lpidos y protenas en materiales biolgicos.
Demostrar la presencia de compuestos orgnicos en diversos materiales
biolgicos.

III.

MATERIALES

3.1.- Del Catedra

Solucin de Glucosa
1%
Hidrxido de Sodio
Sulfato de Cobre
Acido pcrico
Alcohol 70 %
Nitrato de plata.
Tubos de Ensayo
Pipetas Graduada

Gradilla Metlica
Probeta Graduada
Mecheros

3.2.- Del Alumno

50 g Almidn
2 Huevo de gallina
por subgrupo.
50g Azcar de mesa
Leche.

IV.

EXPERIMENTACION Y RESULTADOS

1. Preparar un set de 3 tubos de ensayo para observar la reaccin ante la presencia de

Hidrxido de Sodio y Sulfato de Cobre. Los tubos contienen de 5 ml de clara de
huevo, leche y almidn, segn cuadro adjunto:

Clara de huevo
Leche
Almidn

NaOH
Aprox. 1 ml
Aprox. 1 ml
Aprox. 1 ml

CuSO4
Aprox. 2 ml
Aprox. 2 ml
Aprox. 2 ml

Resultado
Violeta
Morado
Celeste

La solucin de ovoalbumina tomo un color violeta, por lo que nos muestra que
la reaccin de Biuret es positiva; porque:
Las cadenas de protenas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas
adoptando una forma esfrica. Se denominan protenas globulares. Al someterla
a NaOH y una solucin de CuSO4. En este caso utilizamos Hidrxido de sodio,
este no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario
para que tenga lugar la reaccin de biuret. El sulfato cprico reacciona con la
protena presente en la en la solucin de albmina de huevo, y esta se torna de
color violeta.

La solucin de lactosa tomo un color morado reaccionaron

positivamente a reaccin, porque el OH del carbono carbonilo (que no
participa en el enlace o-glucosdico) est libre, al igual que en ala
glucosa; y tambin porque tienen presencia de glucosa y porque son
azucare reductores.

La solucin de almidn tomo un color celeste, quiere decir que no reaccion

positivamente para benedit aunque el OH del ltimo carbono carbonilo de cada
molcula de almidn est libre, este glcido es muy grande en comparacin con
los anteriores, y la cantidad de OH libres no es suficiente para que la prueba d
positivo.

2. Preparar un set de 4 tubos de ensayo que contengan 5 ml de clara de huevo, luego

agregar un reactivo por tubo.
cido pcrico

Color Amarillo

Sulfato de cobre

Celeste lechoso

Alcohol al 70 %

Un anillo blanco en la

Clara de huevo

superficie
Nitrato de plata

Un anillo blanco en la
superficie

Se observa que se torna

amarillo porque la
ovoalbulina tiene un
pH bsico, y porque el
mismo Acido pcrico
presenta un anion.

Ante la presencia del

etanol hay una ligera
precipitacin, por que se
forma
puente
de
hidrogeno.

La clara del huevo en

presencia de Alcohol
etlico sufre un cambio
qumico, ya que su
estructura qumica se
ve alterada. Dicho
cambio se le llama
desnaturalizacin y es
debido a la presencia de
protenas en la clara de

La sales de ciertos
metales pesados son
precipitados
(cuagulados) por la
albumina,
porque
acelera y reaccionan
mas rpido.

huevo.