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Director
Marco Antonio Mrquez Godoy
Ph.D., MSc. Geologa Mineraloga Aplicada
Asesoras
Ph.D. Astrid Blandn Montes
Ph.D. Denise Bevilaqua
1 TABLA DE CONTENIDO
1 TABLADECONTENIDO
2 LISTADEFIGURAS
3 INTRODUCCIN
4 OBJETIVOS
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4.1 OBJETIVOGENERAL
4.2 OBJETIVOSESPECFICOS
11
11
5 MARCOTERICOYESTADODELARTE
12
5.1 CONSTITUYENTESDELCARBN
5.1.1 COMPONENTESORGNICOSDELCARBN
5.1.2 RANGODELCARBN
5.1.3 COMPONENTESINORGNICOSDELCARBN
5.2 FORMASDEAZUFREENLOSCARBONES
5.2.1 AZUFREINORGNICO
5.2.2 AZUFREORGNICO
5.3 LAVADOFSICODELCARBN
5.4 BIODESULFURIZACINDELCARBN
5.4.1 MICROORGANISMOSINVOLUCRADOSENELPROCESO
5.4.2 MECANISMOSDEOXIDACINDESULFUROSMEDIADOSPORBACTERIAS
5.4.3 ALGUNOSFACTORESQUEAFECTANELPROCESO
5.4.4 PRODUCTOSDELAOXIDACINBACTERIANA
5.5 CARBONESDEVALLEDELCAUCAYCAUCA
13
13
15
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16
16
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19
22
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6 METODOLOGA
38
6.1 TOMADEMUESTRAS
6.2 PREPARACINDEMUESTRAS
6.2.1 PREPARACINYANLISISINICIALDELASMUESTRAS
6.3 PREPARACINENSAYOSDEBIOLIXIVIACIN
6.3.1 AISLAMIENTOYADAPTACINDELOSMICROORGANISMOS
6.3.2 ENSAYOSDEBIODESULFURIZACIN
6.3.3 PRUEBASA5LITROS
6.4 MINERALOGADELPROCESO
6.4.1 MICROSCOPAPTICADELUZPOLARIZADA(LUZREFLEJADA)
6.4.2 MICROSCOPAELECTRNICADEBARRIDOCONEDS
6.4.3 DIFRACCINDERAYOSX
6.4.4 ESPECTROSCOPADEINFRARROJOCONTRANSFORMADADEFOURIER(FTIR).
6.4.5 DETERMINACINDEFORMASDEAZUFREENELCARBNALFINALDELPROCESO
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41
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44
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45
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46
7 RESULTADOS
47
7.1 ANLISISINICIALDELASMUESTRAS
7.1.1 FORMASDEAZUFREENLOSCARBONES
7.1.2 ANLISISDEDIFRACCINDERAYOSX
7.1.3 MICROSCOPAPTICADELUZREFLEJADA
7.1.4 ANLISISPRXIMOSYCLASIFICACINDELCARBN
7.1.5 MICROSCOPAELECTRNICADEBARRIDO(SEM/EDS)
7.2 AISLAMIENTOYADAPTACINDELOSMICROORGANISMOS
7.2.1 ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANS
7.2.2 ACIDITHIOBACILLUSTHIOOXIDANS
7.3 ENSAYOSDEBIODESULFURIZACINANIVELDEERLENMEYER
7.3.1 ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANS
7.3.2 ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANS+ACIDITHIOBACILLUSTHIOOXIDANS
7.4 CARACTERIZACINMINERALGICA
7.4.1 DIFRACCINDERAYOSX(DRX)
7.4.2 ESPECTROSCOPADEINFRARROJOCONTRANSFORMADADEFOURIER(FTIR)
7.4.3 MICROSCOPAELECTRNICADEBARRIDO(SEM/EDS)
7.4.4 FORMASDEAZUFREALFINALDELPROCESO
7.5 ENSAYOSENBIOREACTORESAUNVOLUMENDE5LITROS
7.5.1 SEGUIMIENTODELPROCESO(PH,EH,%FELIXIVIADO)
7.5.2 DIFRACCINDERAYOSX(DRX)
7.5.3 ESPECTROSCOPADEINFRARROJOCONTRANSFORMADADEFOURIER(FTIR)
7.5.4 FORMASDEAZUFREALFINALDELPROCESO
7.5.5 ANLISISPRXIMOSDELCARBNDESPUSDELPROCESODEBIODESULFURIZACIN
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108
8 DISCUSIN
110
8.1 ADAPTACINDEMICROORGANISMOS
8.2 SEGUIMIENTODELPROCESOAESCALAERLENMEYER(EH,PH,O2,[SO4],FELIXIVIADO,FORMASDEAZUFRE)
8.3 MINERALOGADELPROCESO(DRX,FTIR,SEM/EDS)
8.3.1 OXIDACINDELAFRACCININORGNICADELCARBN
8.3.2 PRODUCTOSDELPROCESODEBIODESULFURIZACIN
8.3.3 PRECIPITACINDEJAROSITA
8.4 ENSAYOSA5LITROS
8.5 MODELOESQUEMTICODELMECANISMODEOXIDACINDELAPIRITA
110
111
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115
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122
9 CONCLUSIONES
125
10 RECOMENDACIONES
127
11 REFERENCIASBIBLIOGRFICAS
128
2 LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Imagen de microscopa de fuerza atmica de una clula de A. ferroox. adherida
a una superficie pirita (tomada de Sand et al., 2001)
Figura 2. Modelo del mecanismo de contacto indirecto para una clula de A. ferroox.
adherida a pirita (modificado de Sand y Gehrke, 2006).
Figura 3. Mecanismos de oxidacin bacteriana propuestos por Silverman (1967).
Figura 4. Esquema simplificado del mecanismo del polisulfuro segn Schippers y Sand
(1999)
Figura 5. Esquema simplificado del mecanismo del tiosulfato en la oxidacin de la pirita
segn Sand et al., 2001
Figura 6. Mecanismos indirectos en la biolixiviacin de sulfuros segn Schippers y Sand
(1999).
Figura 7. Estructura cristalina de la jarosita proyectada bajo el eje a. Tomada de Papike et
al., 2006
Figura 8. Distribucin del carbn en Colombia. Tomado de INGEOMINAS (2004)
Figura 9. Frentes de explotacin (a) mina La Gasosa (Sector ro Guachinte), (b) minaLa
Gloria (sector ro Asnaz)
Figura 10. Recubrimiento de caparrosa en las paredes de la mina El Vampiro II (sector
ro Asnaz)
Figura 11. Toma de muestras de drenajes cidos de mina en el sector del ro Asnaz
para el aislamiento de los microorganismos
Figura 12. Esquema de los ensayos de biodesulfurizacin a nivel erlenmeyer
Figura 13. Espectro de DRX para el carbn proveniente de la mina La Cinco
Figura 14. Espectro de DRX para el carbn proveniente de la mina El Vampiro II
Figura 15. Macerales pertenecientes al grupo de la intertinita en el carbn de la mina La
Cinco asociados a minerales como pirita y carbonatos. Py: pirita, CO3: carbonatos
Figura 16. Cristales de pirita asociados a macerales del grupo de la liptinita en el carbn
de la mina La Cinco. Py: pirita, Sp: esporinita
Figura 17. Pirita rellenando microfracturas paralelas a la estratificacin en el carbn de la
mina La Cinco. Py: pirita, In: inertinita
Figura 18. Distribucin paralela a la estratificacin de los macerales y la pirita en el
carbn de la mina El Vampiro II. Py: pirita, In: inertinita, Sp: esporinita, Vi: vitrinita
Figura 19. Pirita rellenando microfracturas en la vitrinita con varias direcciones.
Figura 20. Pirita en forma de cristales individuales y como cmulos framboidales
siguiendo la direccin de la estratificacin en el carbn de la mina El Vampiro II
Figura 21. Distribucin del dimetro promedio cristales de pirita en el carbn de la mina
La Cinco
Figura 22. Cristales de pirita diseminados en el carbn de la mina La Cinco con formas
dodecadricas y cbicas
Figura 23. Pirita rellenando estructuras celulares en la matriz del carbn
Figura 24. Microanlisis qumicos (EDS) de minerales presentes en el carbn de la mina
La Cinco a) dolomita con pequeas trazas de hierro, b) caolinita.
Figura 25. Distribucin del dimetro Promedio cristales individuales de pirita en el carbn
de la mina El Vampiro II
Figura 26. Cristales individuales de pirita en el carbn de El Vampiro II con formas
octadricas, dodecadricas (piritoedros) y columnares
Figura 27. Distribucin del dimetro promedio de los framboides de pirita en el carbn de
la mina El Vampiro II
Figura 28. Distribucin del dimetro promedio de los cristales de pirita en el interior de los
framboides
Figura 29. Cmulos framboidales y grupos de cristales de pirita con distribucin paralela a
la estratificacin en el carbn de la mina El Vampiro II
Figura 30. Framboides de pirita del carbn de la mina El Vampiro II conformados por (a)
cristales cubo-octadricos y (b) dodecadricos
Figura 31. Anlisis microqumico EDS sobre cristales de pirita.
Figura 32. a) Colonias de microorganismos compatibles con A. ferroox. b) Colonias de
microorganismos compatibles con A. thioox. c) Pruebas bioqumicas positivas para sulfato
ferroso de los microorganismos compatibles con A. ferroox.
Figura 33. Ensayos de adaptacin de las seis cepas aisladas al carbn de la mina El
Vampiro II.
Figura 34. Curvas de Eh vs. tiempo y pH vs. tiempo para la fase de adaptacin de los
microorganismos compatibles con A. ferroox.
Figura 35. Curvas de Eh vs. tiempo y pH vs. tiempo para la fase de adaptacin de los
microorganismos compatibles con A. thioox.
Figura 36. Grficas de oxgeno disuelto vs. tiempo para los ensayos realizados con A.
ferroox.
Figura 37. Grficas pH vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox.
Figura 38. Grficas Eh vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox.
Figura 39. Grficas de concentracin de sulfatos en solucin vs. tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox.
Figura 40. Grficas de porcentaje de hierro lixiviado en el tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox.
Figura 41. Grficas de oxgeno disuelto vs. tiempo para los ensayos realizados con A.
ferroox. + A. thioox.
Figura 42. Grficas pH vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 43. Grficas Eh vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 44. Grficas de concentracin de sulfatos en solucin vs. tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 45. Grficas de porcentaje de hierro lixiviado en el tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 46. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-100 Tyler)
Figura 47. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-200 Tyler)
Figura 48. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina La Cinco y las
muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando A.
ferroox.
Figura 49. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-100 Tyler)
Figura 50. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-200 Tyler)
Figura 51. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina El Vampiro II y
las muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando A.
ferroox.
Figura 52. Variacin de la diferencia en la distancia interplanar d= (021) (113) para la
jarosita en las muestras tratadas con A. ferroox.
Figura 53. Difractogramas correspondientes a los controles abiticos del carbn de la
mina La Cinco en comparacin con la muestra inicial de carbn.
Figura 54. Difractogramas correspondientes a los controles abiticos del carbn de la
mina El Vampiro II en comparacin con la muestra inicial de carbn.
Figura 55. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (-100 Tyler)
Figura 56. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (- 200 Tyler)
Figura 57. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina La Cinco y las
muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando el
consorcio A. ferroox. + A. thioox.
Figura 58. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (-100 Tyler).
Figura 59. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (pasante malla 200 Tyler).
Figura 60. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina El Vampiro II y
las muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando el
consorcio A. ferroox. + A. thioox.
Figura 61. Variacin de la diferencia en la distancia interplanar d= (021) (113) para la
jarosita en las muestras tratadas con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 62. Difractogramas correspondientes a los controles abiticos del carbn de la
mina La Cinco en comparacin con la muestra inicial de carbn.
Figura 63. Difractogramas correspondientes a los controles abiticos del carbn de la
mina El Vampiro II en comparacin con la muestra inicial de carbn.
Figura 64. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox.
Figura 65. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox.
Figura 66. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox.
Figura 67. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox.
Figura 68. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 69. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 70. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 71. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
Figura 72. Evidencias de oxidacin en la pirita para el da 4 del proceso en el carbn de la
mina La Cinco.
Figura 73. Imgenes de SEM despus de 12 das de proceso para el carbn de la mina
La Cinco.
Figura 74. Precipitacin de xidos de hierro en el interior de los granos de carbn
despus de 20 das del proceso.
Figura 75. Mapa composicional en donde se observa la variacin espacial de los
precipitados formados alrededor de los cristales de pirita en el carbn de la mina La
Cinco despus de 24 das del proceso (-100 Tyler)
Figura 76. Sulfatos de hierro precipitados en el carbn de la mina La Cinco despus de
28 das del proceso.
Figura 77. Evidencias de oxidacin de la pirita en el carbn de la mina El Vampiro II
despus de 8 das de proceso.
Figura 78. Muestras de carbn de la mina El Vampiro II despus de 16 das de
tratamiento.
Figura 79. Precipitados de jarosita en el carbn de la mina El Vampiro II despus de 24
das de proceso.
3 INTRODUCCIN
En Colombia, los depsitos carbonferos se encuentran distribuidos a lo largo de todo el
pas, encontrndose las mayores reservas en los departamentos de La Guajira, Cesar y
Cundinamarca. Tambin existe carbn de buena calidad en los departamentos de
Boyac, Norte de Santander, Crdoba y Santander, mientras que los departamentos de
Antioquia, Cauca y Valle del Cauca cuentan con menores reservas de carbn tiles para
la generacin de vapor (UPME, 2007).
El total de recursos ms reservas medidos en el pas es de 7063 millones de toneladas
(INGEOMINAS, 2004). En el ao 2006, la produccin de carbn alcanz 65.5 millones de
toneladas y las exportaciones fueron del orden de 1461 millones de dlares (UPME,
2007).
Observando las principales cifras de oferta y demanda mundial de carbn, se encuentra
que su produccin ha crecido ms del 50% en los ltimos 25 aos; el carbn es el
segundo energtico en importancia en el mundo, despus del petrleo, y es el principal
combustible empleado en la industria metalrgica: cerca del 70% de la produccin de
acero depende del carbn (INGEOMINAS, 2004).
De acuerdo a un estudio realizado por Valderrama (2000) sobre la distribucin del azufre
en las regiones carbonferas de Colombia, las zonas con mayor contenido de azufre se
encuentran en los departamentos de Cauca y Valle del Cauca.
El principal problema ambiental de estos carbones es que cuando son calcinados, su
contenido de azufre se combina con el oxgeno para formar dixido de azufre, el cual
contribuye enormemente en la polucin y generacin de lluvia cida (Prayuenyong, 2002).
Existen mtodos fsicos y qumicos utilizados para remover o reducir los compuestos de
azufre tanto inorgnicos como orgnicos del carbn. En los procesos fsicos, el carbn es
triturado, molido y lavado, alcanzndose extracciones hasta del 90%. Sin embargo,
cuando los sulfuros estn finamente diseminados en la matriz del carbn, se requieren
moliendas cada vez ms finas, lo que incrementa los costos de operacin. Adems, estos
mtodos no permiten extraer el azufre orgnico presente en el carbn (Klein, 1998).
Por otra parte, aunque los mtodos qumicos como la cloracin y extraccin con hidrxido
de sodio, cloruro de cobre y soluciones de etanol (Yaman et al., 1995) han demostrado
ser efectivos para remover tanto el azufre pirtico como orgnico del carbn, stos son
costosos, generan residuos contaminantes y afectan las propiedades coquizantes del
carbn (Eligwe, 1988; Prayuenyong, 2002)
Por lo anterior, en los ltimos aos las investigaciones han apuntado al desarrollo e
implementacin de mtodos biolgicos de desulfurizacin, capaces de remover gran parte
del azufre inorgnico (hasta el 90%) e incluso disminuir el contenido de azufre orgnico
sin afectar las propiedades de aglomeracin de los carbones coquizantes y con costos
inferiores a los procesos de desulfurizacin qumica (Murr y Mehta, 1982).
Existen muchos reportes sobre el buen desempeo de microorganismos como
Acidithiobacillus ferrooxidans y Acidithiobacillus thiooxidans para la reduccin del azufre
pirtico en el carbn, mientras que se ha observado que otro tipo de bacterias como
Sulfolobus acidocaldarius, remueve muy bien tanto el azufre orgnico como el inorgnico
(Durusoy, 1997). Adicionalmente, se ha encontrado que los microorganismos capaces de
10
11
4 OBJETIVOS
4.1
Objetivo general
4.2
Objetivos especficos
Determinar los cambios mineralgicos en las diferentes etapas del proceso mediante
un seguimiento peridico del mismo.
12
13
5.1
14
Grupo de la Vitrinita
Es el maceral ms abundante en los carbones subituminosos y bituminosos. Su contenido
de oxgeno es mayor en comparacin con los dems grupos macerales.
Proviene de los troncos y races de los rboles. Su reflectancia es intermedia entre la
liptinita y la inertinita y en carbones de bajo rango es posible diferenciar la textura celular
(Bustin et al., 1985).
Tabla 1. Clasificacin general de los macerales. Tomado de Ward, 1984
GRUPO MACERAL
MACERAL
SUB-MACERAL
VITRINITA
Telinita
Colinita
Detrovitrinita
Telocolinita
Gelocolinita
Desmocolinita
Cropocolinita
LIPTINITA
INERTINITA
Esporinita
Cutinita
Resinita
Alginita
Liptodetrinita
Fluorinita
Bituminita
Exsudatinita
Suberinita
Micrinita
Macrinita
Semifusinita
Fusinita
Esclerotinita
Inertodetrinita
Grupo de la Liptinita
Este grupo maceral posee baja reflectancia, es rico en hidrgeno y produce fluorescencia
bajo luz ultravioleta. Est compuesto por restos de esporas, polen, cutculas de las hojas y
de las resinas generadas por el metabolismo de las plantas (Bustin et al., 1985).
Grupo de la Inertinita
Su principal caracterstica es la alta reflectancia. A pesar de provenir de los mismos
materiales que dan origen a la vitrinita, los procesos sufridos por la materia orgnica
(oxidacin, quemas, accin bacteriana, etc.) hacen que sus caractersticas fsicas y
qumicas sean sustancialmente diferentes. Mientras la vitrinita posee un alto contenido de
oxgeno, los macerales del grupo de la inertinita son ricos en carbono y pobres en
hidrgeno y oxgeno (Bustin et al., 1985).
15
Fuente: http://www.oviedo.es/personales/carbon/carbon_mineral/carbon%20mineral.htm
Existe una amplia asociacin de minerales que pueden estar presentes en el carbn,
entre los cuales se encuentran las arcillas (caolinita, ilita, montmorillonita, haloisita, etc.),
sulfuros (pirita, marcasita, esfalerita, calcopirita, etc.), carbonatos (calcita, siderita,
dolomita, aragonito, etc.), xidos (hematita, magnetita, rutilo, etc.), hidrxidos (boehmita,
goethita), sulfatos (baritina, yeso, anhidrita, coquimbita, jarosita, etc.), fosfatos (apatito,
goyazita, etc.), sales (halita, silvina, etc.) y cuarzo (Prayuenyong, 2002; Thomas, 2002).
16
5.2
17
Pirita Framboidal
Como pirita framboidal se denomina a los agregados esfricos en forma de frambuesa
de 2-50 m de dimetro, compuestos por grupos de pequeos cristales individuales de
0.5 2m usualmente en arreglos geomtricos (Folk, 2005)
Cada agregado posee entre 102 y 105 microcristales equidimensionales (Butler et al.
2000) con forma de cubos, octaedros o piritoedros, aunque la forma suele permanecer
constante dentro de un mismo framboide (Butler y Rickard, 2000).
Wilkin et al., (1996), entre otros, han descrito la correlacin entre el radio de los
microcristales y dimetro del framboide (densidad de nucleacin), as como las
condiciones de potencial redox (Eh) en las cuales stos se forman. De esta forma, en
un depsito dado, framboides pequeos poseen microcristales pequeos y framboides
grandes tienen proporcionalmente microcristales ms grandes.
Actualmente, existe una gran controversia en cuanto al origen de este tipo de pirita.
Algunos autores plantean un origen asociado a la descomposicin de materia orgnica
e incluso un origen orgnico para los framboides, en donde los cristales estaran
conformados por colonias bacterianas fosilizadas como pirita (Schieber, 2002; Folk,
2005).
Por otra parte, otros autores han sintetizado estos framboides en ausencia de
microorganismos (Wilkin y Barnes, 1996; Wilkin y Barnes, 1997; Butler, 2000) mediante
la oxidacin de monosulfuros de hierro (FeS) con H2S, en ambientes con poca o nula
presencia de oxgeno.
Sulfatos
Se producen principalmente por la oxidacin de la pirita en condiciones hmedas.
Constituyen una evidencia de que el carbn ha sido expuesto al aire, pues carbones
bituminosos procedentes de mantos que nunca han sido descubiertos o explotados, se
encuentran prcticamente libres de sulfatos (Prez et al., 1982).
Dentro de este grupo aninico se encuentran la barita (BaSO4), el yeso (CaSO4.2H2O), la
anhidrita (CaSO4) y un gran nmero de sulfatos de hierro, dentro de los cuales predomina
la jarosita (AFe3X(SO4)2(OH)6) (Calkins, 1994).
El azufre en la forma de sulfato es escaso en el carbn, rara vez excede unas pocas
centsimas de porcentaje, excepto en muestras altamente oxidadas o meteorizadas
(Prez, et al., 1982).
Azufre Elemental
La presencia de azufre elemental en el carbn ha sido objeto de varios estudios, la
mayora de ellos realizados a finales del siglo pasado (Yurovskii, 1974; Hackley et al.,
1990).
18
Esta forma de azufre es extrable del carbn mediante algunos solventes (etanol, acetona,
hexano y benceno) (Calkins, 1994) y su origen ha sido interpretado de dos formas
diferentes.
En 1960, Yurovskii plante la existencia de azufre elemental como una etapa intermedia
en la formacin de pirita y azufre orgnico durante la carbonificacin. Posteriormente,
Hackley et al. (1990) avalaron dicha teora y adems observaron que en muestras de
carbn inalteradas no se presentaba esta forma de azufre.
Sin embargo, estudios ms recientes indican que durante la oxidacin de la pirita y los
llamados disulfuros (wolframita, molibdenita, etc) no se genera azufre elemental como
producto intermedio o final (Sand et al., 2001; Ballester, 2005). Por el contrario, se plantea
que dichos sulfuros al oxidarse generan como principal subproducto el tiosulfato, mientras
que monosulfuros como la esfalerita, calcopirita, galena, etc., son generadores de azufre
elemental al oxidarse.
Independientemente de su origen, la poca concentracin de azufre elemental presente en
las muestras de carbn inalteradas ha llevado a que, para todo efecto prctico, el azufre
sea tenido en cuenta en su forma pirtica, como sulfato y orgnico (Valderrama, 2000).
19
5.3
5.4
Dentro de las principales ventajas con las que cuenta la utilizacin de mtodos biolgicos,
sobre otras tecnologas tradicionales (mtodos fsicos y qumicos), se encuentran las
siguientes (Ortiz, 1992; Yannopoulos, 1990):
20
En 1947, Colmer y Hinkle presentaron uno de los primeros estudios acerca de los
drenajes cidos presentes en varias minas de carbn. Los autores asuman que si se
poda restringir el ingreso de agua y/o el aire a las minas, se reducira la concentracin de
los compuestos cidos disueltos en las aguas de drenaje. Igualmente, consideraban que
el cambio de color de estos lquidos (de tonos claros a mbar) era generado por la
oxidacin de sulfato ferroso a sulfato frrico.
Posteriormente, Temple y Colmer (1951) demostraron que una bacteria aislada de las
aguas cidas de estas minas era la responsable de dicha oxidacin. Su afirmacin tena
como base la interdependencia del crecimiento bacteriano y la oxidacin del hierro
ferroso, la fijacin de carbono durante el proceso y las condiciones de acidez de la
solucin.
Los autores encontraron que, al igual que la bacteria Acidithiobacillus thiooxidans, la cepa
hallada operaba bajo condiciones cidas y no era posible diferenciarlas bajo el
microscopio. Sin embargo, se diferenciaba de ella porque era incapaz de oxidar hierro
ferroso y crecer en un ambiente de azufre elemental. Debido a lo anterior, propusieron el
nombre de Thiobacillus ferrooxidans para la especie encontrada (posteriormente
nombrada Acidithiobacillus ferrooxidans (Kelly y Wood, 2000)).
Una de las primeras posibilidades de desulfurizacin del carbn mediada por bacterias fue
reportada por Zarubina et al. (1959), en donde se reporta que de un 23% a un 27% de
azufre en muestras de carbn fue lixiviado despus de 30 das.
Silverman et al. (1959) investigaron los efectos de varios factores fsicos en la velocidad
de disolucin de pirita en el carbn utilizando A. ferroox. y A. thioox. como oxidantes. Los
resultados mostraron que la oxidacin se aceleraba en muestras de pirita contenida en el
carbn, en comparacin con ensayos utilizando pirita pura.
En 1971, Ford et al. removieron el 80% del azufre pirtico de una muestra de carbn
despus de 24 das de tratamiento, empleando cultivos de A. ferroox. El contenido de
azufre fue reducido de 4% a 1.8% y de 5.47% a 2.47%, para tamaos de partcula
pasante malla 100 (Tyler) y pasante malla 200 (Tyler) respectivamente, en un periodo de
14-23 das.
Capes et al. (1973) propusieron un mtodo involucrando tratamientos combinados fsicos
y biolgicos, donde se reporta una remocin del 80% de azufre pirtico. Sin embargo, se
crey que la oxidacin biolgica por A. ferroox. no fue completa, ya que la bacteria slo
estuvo en contacto con la muestra durante 3 das.
Gupta et al. (1977) desarrollaron un proceso de biodesulfurizacin de un carbn con alto
contenido de pirita empleando un cultivo mixto de Acidithiobacillus sp. y Ferrobacillus sp.,
alcanzando una remocin de 70-90% del azufre pirtico y 20-40% del azufre total.
Dugan y Apel (1978) llevaron a cabo un proceso de remocin casi total de la pirita,
utilizando cultivos mixtos de A. ferroox. y A. thioox. (in Butler y Kempton, 1986).
Detz y Barvinchak (1979) compararon la capacidad de biodesulfurizacin de bacterias
mesfilas (A. ferroox.) y cultivos mixtos de bacterias termfilas, tales como Sulfolobus
acidocaldarius y ferrolobus. Los resultados mostraron que 86% de la pirita fue removida
en condiciones de pH entre 2 2.4, 28C y una concentracin de pulpa del 20%. Con los
cultivos mixtos de termfilos ms del 90% fue removida.
21
Kempton et al. (1980) optimizaron el proceso desarrollado por Capes et al. en condiciones
de laboratorio, encontrando un porcentaje de remocin del 88 94% de la pirita,
recirculando las mismas soluciones obtenidas previamente en el proceso (Butler y
Kempton, 1986).
Mishra et al. (1980) removieron parte de las fracciones pirtica, orgnica y como sulfato
del azufre presente en una muestra de carbn, empleando una mezcla de A. ferroox. y
bacterias acidfilas nativas.
En 1982, Andrews y Maczuga lograron lixiviar el 90% del azufre pirtico de un carbn
despus de dos semanas, empleando un cultivo mixto de A. ferroox., A. thioox. y
hetertrofos acidfilos. Los ensayos se realizaron a un pH de 2.5 y temperatura ambiente.
Posteriormente, Cwalina et al. (1983) afirmaron haber alcanzado una remocin de 5.5% 38.1% de azufre total para varios carbones norteamericanos, utilizando un cultivo de A.
ferroox. y A. thioox., por un periodo de residencia de 30 das.
La posibilidad de reducir el alto contenido de azufre de un carbn espaol mediante un
consorcio de Acidithiobacillus sp. y una cepa pura de Sulfolobus sp. fue estudiada por
separado. Blazquez et al. (1993) encontraron que el tratamiento bacteriano con
Acidithiobacillus sp. fue ms efectivo en remover el azufre pirtico, mientras que
Sulfolobus sp. present una mayor remocin del azufre orgnico.
Juszczak et al. (1995), evaluaron el proceso de biodesulfurizacin de un carbn con 6.8%
de azufre total empleando A. ferroox. para diferentes condiciones de operacin
(concentracin de Fe+2 inicial, temperatura, pH y densidad de slidos). Para el sustrato
analizado, se encontr que las condiciones ptimas del proceso se dieron para una
concentracin de slidos de 2.4% w/v, una concentracin de hierro ferroso de 15g/dm3,
30C y siete das de operacin. Los niveles de extraccin de azufre alcanzados fueron de
62% del azufre total y 54% del azufre pirtico.
En un estudio llevado a cabo sobre carbones de la India con un contenido de azufre total
de 5.5%, se compar la efectividad del proceso de biodesulfurizacin empleando una
mezcla de bacterias del gnero Acidithiobacillus, antes y despus de tratar las muestras
qumicamente con NH4OH y Na2CO3. Las muestras pretratadas presentaron una mayor
remocin de azufre (35-38%) en comparacin con el carbn crudo (5-27%). No obstante,
la fraccin orgnica, principal aportante del azufre al carbn, no pudo ser removida con
estos tratamientos (Tripathy et al., 1998).
Malik et al. (2000) desarrollaron un experimento de biodesulfurizacin para un carbn de
India en bioreactores batch a un volumen de 250 ml. Los microorganismos empleados
fueron A. ferroox. y una cepa de este mismo tipo crecida en azufre elemental. Cinco das
despus de comenzar el proceso, los microorganismos crecidos en azufre fueron
aadidos a uno de los ensayos, incrementando la tasa de solubilizacin del hierro en un
35%, en comparacin con las muestras inoculadas solamente con la cepa inicial de A.
ferroox. El 97% del azufre pirtico fue removido en presencia de microorganismos crecidos
en azufre, en comparacin con un 77% para las muestras donde solo oper la cepa
original.
En 2001, Acharya et al., evaluaron las condiciones ideales para el proceso de
biodesulfurizacin de tres carbones con diferente rango, empleando cepas nativas
compatibles con A. ferroox. Para el caso de un carbn bituminoso, despus de 30 das, se
22
23
Acidithiobacillus ferrooxidans
Anteriormente denominada Thiobacillus ferrooxidans y renombrada por Kelly y Wood en
2001.
Es una bacteria gramnegativa, con forma de bastn y tamao promedio de 0.5 a 0.6m de
ancho y 1 a 2m de largo (Rossi, 1990) (figura 1). Es quimiolitoautotrfica obligada,
obteniendo la energa necesaria para su crecimiento de la oxidacin del in ferroso (Fe2+)
a frrico (Fe3+) y compuestos reducidos de azufre tales como S2- (sulfuro), S0, S2O32(tiosulfato), SO32- (sulfito) y S4O62 (tetrationato) a cido sulfrico (H2SO4), utilizando el
oxgeno como aceptor final de electrones (Ingledew, 1986, Rossi, 1990, Kelly y Wood,
2000).
Los valores de temperatura y pH ptimos para el crecimiento de A. ferroox. estn
alrededor de 30C y 2, respectivamente. En la tabla 3 se encuentran los resultados de
varios estudios tendientes a determinar los niveles ptimos de estos dos parmetros para
el adecuado crecimiento de la bacteria.
24
Acidithiobacillus thiooxidans
Morfolgicamente tiene las mismas caractersticas de A. ferroox. y tambin es capaz de
oxidar compuestos reducidos de azufre (S2-, S0, S2O32- y S4O62-) a sulfato, pero se
diferencia de sta en su incapacidad para oxidar el in Fe2+ (Eligwe, 1988).
Este microorganismo es mucho ms efectivo para la oxidacin de azufre elemental que A.
ferroox., caracterizndose por soportar altos niveles de acidez (pH 0.5) (Rawlings, 2002) y
por disminuir el pH en el medio hasta valores inferiores a 1, como resultado de la
produccin de cido sulfrico en las reacciones de oxidacin (Leathen et al., 1953).
Su temperatura ptima de crecimiento est alrededor de 28 30C, siendo muy similar a
la de A. ferroox.
A. ferroox.
(1)
(2)
Por otro lado, en 1964 Silverman y Ehrlich propusieron la existencia de otro rol
desempeado por las bacterias en la biooxidacin de sulfuros, en donde A. ferroox.
aumentaba la velocidad de disolucin del sulfuro de hierro (pirita), mediante la secrecin
extracelular de un oxidante enzimtico. El planteamiento de dicha hiptesis implicaba la
adhesin de la bacteria a la superficie del mineral, por lo que se denomin mecanismo
directo.
Posteriormente, Silverman (1967) redefini esta clasificacin planteando tres categoras o
mecanismos: indirecto, de contacto indirecto y de contacto directo. En el mecanismo de
contacto directo, la bacteria se adhiere al mineral y lo oxida directamente, mediante un
sistema enzimtico, sin que sea necesaria la presencia de iones frricos.
25
Por otra parte, el mecanismo de contacto indirecto propone que la bacteria, tambin
adherida al mineral, oxida el in ferroso a frrico dentro de una capa o cpsula de material
polimrico extracelular (EPS) de espesor nanomtrico, constituida principalmente por
azcares y lpidos. Finalmente, los iones frricos dentro de dicha capa son los encargados
de oxidar al mineral (figura 2).
Citoplasma
Membranacitoplasmtica
Membranaexterna
Espacioperiplasmtico
Capadeexopolmeros
Glbulodeazufre(politionato)
Compuestosdehierroenelexopolmero
Solucin
lixiviante
Clulade
Acidithiobacillus
ferrooxidans
pirita
ataque
Figura 2. Modelo del mecanismo de contacto indirecto para una clula de A. ferroox.
adherida a pirita (modificado de Sand y Gehrke, 2006).
Varios estudios han demostrado la existencia de esta capa secretada por las clulas y la
consideran como una ampliacin del radio de accin de las clulas que tiene dos
funciones principales: servir como medio de adhesin de las clulas al sustrato y como
compartimento en el que se llevan a cabo las reacciones qumicas que permiten oxidar el
mineral (Sand et al., 2001; Kinzler et al., 2003; Sand y Gehrke, 2006; Harneit et al., 2006).
En la figura 3 se encuentra una representacin esquemtica de los tres mecanismos.
26
27
Si bien la existencia o no del mecanismo de contacto directo sigue sin aclararse, a pesar
de todas las investigaciones adelantadas hasta el momento. Sobre lo que s hay un
consenso es en que la accin cataltica de las bacterias conocida como mecanismo
indirecto, en donde los iones de hierro ferroso (Fe2+) son constantemente oxidados a su
forma frrica (Fe3+), es la que ms aporta a la biolixiviacin de los sulfuros (Edwards et al.,
2001; Fowler et al., 2001; Sand et al., 2001; Rohwerder et al., 2003).
No obstante, en algunos casos, no es posible adjudicarle a este mecanismo el papel
principal en la oxidacin de varios sulfuros. Tal es el caso de los experimentos biolgicos
realizados en sulfuros de zinc (esfalerita) y plomo (galena), en donde los microorganismos
son capaces de disolver el mineral sin el suministro de hierro como fuente de energa
(Pistorio et al., 1994; Meja y Ospina, 2007).
Con el fin de dilucidar estas aparentes contradicciones, en los ltimos aos W. Sand y su
grupo de investigacin de la Universidad de Hamburgo (Alemania), han propuesto una
divisin del mecanismo indirecto en dos grupos, a partir de las diferentes rutas de
oxidacin seguidas por los sulfuros: va tiosulfato y va polisulfuro (Shippers et al., 1996;
Shippers y Sand, 1999 y Sand et al., 2001).
Estos modelos estn basados en un mecanismo de biooxidacin netamente indirecto,
donde la funcin de la bacteria es regenerar el Fe3+ y/o protones (H+) y concentrarlos en la
interfase mineral/agua o mineral/bacteria, con el fin de aumentar el ataque (degradacin).
La base de las diferencias entre los productos intermedios formados est fundamentada
en la teora de bandas de valencia y orbital molecular (Schippers y Sand, 1999).
Mecanismo va polisulfuro
Muchos sulfuros son semiconductores y, de acuerdo a la teora de orbital molecular y de
banda de valencia, los orbitales tanto de tomos simples como de molculas forman
bandas de electrones con diferentes niveles de energa. Tributsch y Bennett (1981a y b)
han investigado en detalle las propiedades semiconductoras y los aspectos
electroqumicos de algunos sulfuros y la forma en que estas propiedades influyen en el
proceso de biolixiviacin.
De acuerdo con estos estudios, sulfuros como la esfalerita (ZnS), calcopirita (CuFeS2),
covelita (CuS) y galena (PbS) pueden ser atacados, en mayor o menor grado, por un
cido. Esto se debe a que la banda de valencia se deriva de electrones pertenecientes
tanto a los tomos de azufre como a los tomos del metal.
La degradacin de los sulfuros, en este caso, est controlada por una serie de productos
intermedios (polisulfuros), quienes son transformados a azufre elemental (figura 4) y ste
a su vez es oxidado por accin biolgica a cido sulfrico.
Figura 4. Esquema simplificado del mecanismo del polisulfuro segn Schippers y Sand
(1999)
28
(3)
(4)
(5)
29
30
31
Tabla 4. Composicin de los medios de cultivo propuestos por varios autores para A.
ferroox. y A. thioox. Las cantidades estn dadas en g/L.
9K
Tuovinen
Ahonen y
Barron y
Okereke y
Componente Silverman y
y Kelly
Tuovinen
Luecking
Stevens
Lundgren
(1973)
(1989)
(1992)
(1991)
(1959)
(NH4)SO4
3.0
0.4
0.4
3.5
2.0
MgSO4.7H2O
0.5
0.4
0.4
0.06
0.25
K2HPO4
0.5
0.1
0.4
0.06
0.25
KCl
0.1
0.12
0.1
Ca(NO3)2
0.01
0.002
0.01
FeSO4.7H2O
44.25
33.3
29.8
74.5
167
H2SO4
a pH 2.3
a pH 1.9
a pH 1.5
a pH 1.9
a pH 2.4
Concentracin de sustrato y rea superficial
El rea especfica de superficie es uno de los principales factores que afectan el proceso
de oxidacin bacteriana. La velocidad de remocin y lixiviacin del mineral incrementa a
medida que aumenta el rea de superficie, es decir, cuando el tamao de las partculas
disminuye (Eligwe, 1988). En algunos casos, las partculas de carbn deben ser reducidas
a niveles muy finos (pasante malla 325 Tyler) para mejorar la accesibilidad de la pirita por
parte de las bacterias (Kargi, 1986).
La concentracin del sustrato, tambin llamada densidad de pulpa o proporcin slidolquido, influye en la oxidacin bacteriana. De esta forma, cuando la densidad de pulpa es
muy alta, los esfuerzos cortantes que se generan al colisionar las partculas entre s y con
los microorganismos, pueden inhibirlos e incluso causar daos en su pared celular
(Prayuenyong, 2002; Malik et al., 2004))
Por otra parte, una alta concentracin de slidos interfiere con el transporte de nutrientes
como el oxgeno y el CO2 hacia los microorganismos (Eligwe, 1988; Malik et al., 2004)).
Compuestos orgnicos
Compuestos orgnicos generados durante el proceso de biodesulfurizacin del carbn
(fenoles, hidroxilos y carboxilos) pueden generar un efecto inhibitorio del proceso, aunque
su efecto ha sido poco estudiado (Eligwe, 1988).
El efecto inhibitorio de estos compuestos puede ser remediado por la utilizacin de
microorganismos hetertrofos tales como T. acidophilus, T. novellus y T. perometabolis en
cultivos mixtos con los auttrofos (Eligwe, 1988; Prayuenyong, 2002).
32
Aunque frecuentemente se asume que los drenajes cidos de mina poseen valores de pH
muy bajos, la acidez de dichos efluentes presenta una gran variabilidad (2.0 8.5) que
depende principalmente del ambiente geolgico y del estado de las reacciones (Bigham et
al., 1992).
Si bien la produccin del drenaje cido de mina ocurre naturalmente cuando sustratos
ricos en azufre son expuestos a la accin del agua y el oxgeno, la minera puede
incrementar su generacin, ya que expone mayor cantidad de sulfuros al ataque de estos
agentes. Adicionalmente, algunos microorganismos (entre ellos Acidithiobacillus
ferrooxidans) pueden acelerar el proceso de generacin de drenajes cidos de mina por
su accin cataltica oxidativa (Akcil y Koldas, 2006).
Por mucho tiempo se consider que la mineraloga de los precipitados hallados en este
tipo de efluentes constaba de hidrxidos de hierro amorfos. No obstante, estudios ms
detallados sobre este tema han permitido identificar una amplia variedad de minerales y
compuestos de baja cristalinidad, como azufre elemental, minerales del grupo de la
jarosita, oxi-hidrxidos de hierro y sulfatos (Bigham et al., 1992; Ahonen y Tuovinen, 1994;
Bigham et al., 1996; Snchez et al., 2005; Jnson et al., 2006).
En 1971, Duncan y Bruynesteyn sugirieron que la formacin de sulfato bsico de hierro, a
partir de sulfato frrico, se daba de acuerdo a la siguiente ecuacin:
3Fe2(SO4)3 + 12H2O 2HFe3(SO4)2(OH)6 + 5H2SO4
(6)
(7)
33
34
libres y cristales o conformando capas sobre la superficie de los sulfuros (Zapata, 2006,
Fowler y Crundwell, 1999). En este ltimo caso, la superficie de los sulfuros se ve
afectada por la presencia de una barrera que reduce las velocidades de difusin de los
oxidantes y los metales lixiviados. Ambos fenmenos afectan negativamente la eficiencia
del proceso de lixiviacin (Rohwerder et al., 2003).
La schwertmanita (Fe8O8(OH)6SO4), es otro hidroxi-sulfato que puede formarse a partir de
la oxidacin del hierro ferroso, en medios con presencia de bacterias oxidantes de hierro.
Es una fase de baja cristalinidad, cuya formacin se ve favorecida en ambientes con pH
en el intervalo de 2.3-4.5 (Bigham et al., 1996) y concentraciones de sulfato en el intervalo
de 1000 a 3000mg/L (Bigham et al., 1994). Aunque es una fase inestable y puede
transformarse espontneamente fases como goethita y jarosita, donde dicha
transformacin ocurre principalmente a temperaturas superiores a 45C (Wang et al.,
2006).
La ferrihidrita (Fe5HO8.4H2O) puede producirse por una rpida hidrlisis del Fe3+ y es una
de las fases dominantes a pH>5 en sedimentos de drenajes efluentes, siendo de
tonalidades ms rojas que aquellos asociados a drenajes ms cidos. Generalmente, es
pobremente cristalina pero puede mostrar variaciones en su ordenamiento estructural
(Bigham et al., 1992).
La goethita (-FeO(OH)) es generalmente un producto menor en sistemas de biooxidacin
de sulfuros. Presenta gran afinidad por grupos aninicos SO4 adsorbidos en su superficie.
Trabajos experimentales han mostrado que la schwertmanita gradualmente puede
transformarse a goethita a valores de pH de 3.3 y 3.6 (Bigham et al., 1996).
En presencia de carbonato de calcio (calcita/aragonito), la condicin cida y rica en
sulfatos del medio conlleva a la generacin de yeso y bicarbonatos, como puede verse en
la reaccin 8 (Dwivedy y Mathur, 1995). Es por ello que en muchos procesos de
biooxidacin/biodesulfurizacin de sustratos que contienen carbonatos (principalmente
calcita), el yeso es un mineral frecuentemente encontrado en los precipitados (Baldi et al.,
1991; Dwivedy y Mathur, 1995; Ossa, 2004; Zapata, 2006; Garca et al., 2007).
CaCO3 + H2SO4 + H2O CaSO4.H2O + HCO3- + H+
5.5
(8)
Colombia cuenta con reservas de carbn de excelente calidad, suficientes para abastecer
el mercado interno por largo tiempo y participar con una interesante proporcin en el
mercado mundial, siendo una tercera parte de dichas reservas, carbones coquizables de
importancia en el mercado energtico, principalmente en la industria (MINERCOL, 2004).
El pas tiene doce zonas carbonferas distribuidas en la Costa Atlntica y en el interior del
pas (figura 8). Estas regiones comprenden los departamentos de La Guajira, Cesar,
Crdoba, Santander, Norte de Santander, Cundinamarca, Boyac, Antioquia, Valle del
Cauca y Cauca (MINERCOL, 2004).
La tabla 5 presenta la cantidad de recursos y reservas en millones de toneladas (MT) para
los diferentes departamentos (MINERCOL, 2001).
35
36
Tabla 5. Reservas medidas e indicadas de carbn por zonas y por tipo de carbn (tomada
de Minercol, 2001)
Zona Carbonfera
Guajira
Cesar
Crdoba
Nte. Santander
Santander
C/marca-Boyac
Antioquia
Valle y Cauca
Total
Medidas
3648
1922
381
116
57
406
89
36
6655
Indicadas
589
257
315
114
1343
225
89
2932
Tipo de Carbn
Termico
Trmico
Trmico
Trmico
Trmico, Coquizable
Trmico, Coquizable
Trmico, Coquizable
Trmico
Trmico
La zona carbonfera del Valle del Cauca se encuentra ubicada hacia el occidente del pas
sobre las estribaciones del flanco oriental de la Cordillera Occidental. Se prolonga al
occidente del ro Cauca desde Yumbo al norte, hasta El Tambo (Cauca) al sur, con una
extensin de ms de 100 km. de largo y 3,5 km. de ancho promedio. Los carbones en
esta regin son bituminosos con altos contenidos de cenizas (UPME, 2006).
Estudios ms detallados en estas zonas realizados por ECOCARBON (1996), muestran,
con base en los anlisis qumicos realizados, que los carbones a lo largo de toda la
cuenca carbonfera del Valle del Cauca y Cauca presentan grandes variaciones en cuanto
a los porcentajes totales de azufre variando desde 0.22% hasta 8.53%.
37
AZUFRE (%)
Mn Mx
0.24
0.46
0.22
0.5
0.5
1.56
5.3
8.53
8.53
5.0
38
6 METODOLOGA
Con el fin de cumplir a cabalidad con los objetivos del presente trabajo, se decidi usar
dos sustratos de carbn: uno proveniente de la zona del ro Guachinte (Valle del Cauca) y
otro proveniente de la zona del ro Asnaz (Cauca). Adicionalmente, para ambos
materiales se realizaron ensayos con dos tamaos de partcula: pasante malla 100 (-150
m Tyler mesh) y pastante malla 200 (-75 m Tyler mesh).
Para llevar a cabo el proceso de biodesulfurizacin, se seleccionaron dos tipos de inculo,
ambos con microorganismos nativos: Uno utilizando cepas compatibles con
Acidithiobacillus ferrooxidans y otro constituido por un consorcio de cepas compatibles
con Acidithiobacillus ferrooxidans + Acidithiobacillus thiooxidans.
6.1
Toma de muestras
Teniendo en cuenta que la zona del ro Guachinte (Valle del Cauca) - ro Asnaz (Cauca)
presenta los mayores contenidos de azufre en el carbn, as como el mayor nmero de
recursos y reservas, se seleccionaron cuatro minas de la zona con el fin de tomar
muestras de los frentes de explotacin.
Para garantizar el alto contenido de azufre de los carbones muestreados, se cont con el
apoyo de INGEOMINAS Regional Jamund.
La principal va de acceso a la zona es la carretera Panamericana, que une la ciudad de
Cali con Popayn y a su vez representa el principal medio de comunicacin terrestre del
suroccidente con el resto del pas.
En el sector La Ferreira, ubicado en la zona del ro Guachinte, se tomaron muestras de
las minas conocidas como La Cinco y La Gasosa. Por otra parte, para la zona del ro
Asnaz, se seleccionaron las minas La Gloria y El Vampiro II, ubicadas el sector de
Santa Brbara (Morales, Cauca) (figuras 9a y 9b).
Figura 9. Frentes de explotacin (a) mina La Gasosa (Sector ro Guachinte), (b) minaLa
Gloria (sector ro Asnaz)
39
6.2
Preparacin de muestras
40
A estos dos carbones se le hicieron los posteriores anlisis de DRX y FTIR, para lo cual
se molieron la muestras en mortero de gata hasta una granulometra pasante malla No.
200 (Tyler). Esta reduccin se hizo mediante un mortero de gata con el fin de, adems
de prevenir posible contaminacin por desprendimiento de partculas, evitar las
transformaciones de fase causadas por friccin y/o temperatura que se pueden generar
en un molino convencional, para lo cual adems se agreg acetona al inicio de la
molienda.
Para la caracterizacin mineralgica y petrogrfica de los carbones seleccionados, se
realizaron dos tipos de pulido para observar en el microscopio de luz reflejada: de
fragmentos de carbn y de granos.
Los primeros son tiles para establecer cmo son las relaciones entre la fraccin mineral
y los diferentes macerales, mientras que los segundos permiten hacer la caracterizacin
petrogrfica del carbn.
Para construir los pulidos de trozos de carbn se realiz una inspeccin visual del material
extrado de la mina y se seleccionaron los fragmentos que presentaban la mayor cantidad
de sulfuros en su superficie. Posteriormente, los fragmentos fueron recortados de forma
perpendicular a la estratificacin, usando una cortadora de disco, hasta obtener
monedas de aproximadamente 2cm de dimetro y 1cm de alto. Finalmente, se realiz su
montaje en una resina epxica y fueron desbastados y pulidos mediante cortadora de
disco, papel de lija de agua No. 1500 y almina (1mm, 0.3mm y 0.05mm).
Por otro lado, la elaboracin de los montajes de granos, que permiten la caracterizacin
petrogrfica de los diferentes carbones muestreados, se llev a cabo con tamaos de
partcula comprendidos entre la malla 20 (0.939 mm) y la malla 30 (0.558 mm). El
procedimiento seguido para su pulido final fue el mismo empleado para los montajes de
trozos descrito anteriormente.
Las secciones pulidas fueron analizadas mediante microscopa ptica de luz plana
polarizada, modo luz reflejada, utilizando un microscopio ptico marca Leitz Laborolux
11POL, con objetivos de aumento de 10X y 20X en aire y 32X y 50X en aceite, con el fin
de identificar las fases presentes, haciendo nfasis en las texturas y asociaciones de la
pirita con los macerales del carbn.
Las medidas de reflectancia de la vitrinita, tiles para establecer el rango del carbn,
fueron hechas en secciones pulidas con aceite de inmersin, usando un microscopio Leitz
Wetzlar MPV-Combi con un objetivo de 50X y un estndar de 0.517% de reflectancia.
Adicionalmente, con el fin de complementar las observaciones hechas mediante el
microscopio ptico y determinar la microqumica de las fases minerales, las muestras
fueron analizadas mediante microscopa electrnica de barrido (SEM: Scanning Electron
Microscopy) en un equipo marca JEOL JSM 5910 LV, utilizando un detector EDS (Energy
Dispersive X ray Spectrometer) Oxford modelo 7324, para hacer anlisis microqumicos.
Para el anlisis con SEM/EDS las muestras fueron previamente metalizadas con grafito,
utilizndose un voltaje de aceleracin de 25kV, con un tiempo de colecta de 120
segundos.
Finalmente, anlisis por difraccin de rayos X (DRX) tambin fueron hechos como
complemento a las tcnicas anteriores. Para esto, la muestra fue molida utilizando
41
acetona en un mortero de gata hasta un tamao de partcula pasante malla 200 (Tyler
mesh). Los anlisis para DRX se hicieron utilizando un difractmetro marca Panalytical
referencia X'Pert Pro MPD, con una radiacin de Cu K, con voltaje y corriente de 45 kV y
40 mA respectivamente. El rango de barrido fue de 3 - 70, con un paso de 0.026 y
configuracin - 2.
6.3
Figura 11. Toma de muestras de drenajes cidos de mina en el sector del ro Asnaz
para el aislamiento de los microorganismos
Con el fin de garantizar la compatibilidad de los microorganismos empleados con A.
ferroox. y A. thioox., se hizo un crecimiento en medio slido de los mismos, as como una
serie de pruebas bioqumicas.
La siembra en medio slido fue llevada a cabo siguiendo la metodologa descrita en
Garca et al.(1992).
Una vez obtenidos los cultivos a partir de colonias individuales, se procedi a realizar las
pruebas bioqumicas descritas en el manual de Bergey (Staley et al., 1998).
Este mtodo consiste en el monitoreo del crecimiento por oxidacin en compuestos
reducidos de azufre y/o hierro, dependiendo de la especie, en condiciones cidas. Dentro
de los sustratos que hacen parte de la serie bioqumica especfica para identificar los
quimiolitotrofos de inters, se encuentran: el tetrationato, tiocianato, tiosulfato, azufre
elemental y sulfato ferroso.
En general, el concepto de positivo se asume como un buen crecimiento de dichos
microorganismos puros, el cambio de color o la precipitacin de compuestos insolubles.
42
43
Tabla 11. Programacin de ensayos para la adaptacin de las cepas compatibles con A.
thioox.
Ensayo Medio 9K Azufre Tamao partcula
% slidos
Inculo
No.
ml
g
Malla Tyler
(peso/volumen)
ml
1
90
1
3/8 10
5
10
2
90
0.7
10 30
5
10
3
90
0.6
30 100
5
10
4
90
0.5
100 200
5
10
5
90
0.5
< 200
5
10
6
90
0.3
< 200
7
10
7
90
0.3
< 200
10
10
8
90
0.3
< 200
10
10
A. ferroox.
A. ferroox. + A. thioox.
C-100
-100
Control
C-200
-200
Control
C-100
-100
Control
C -200
-200
Control
-100
-200
-100
Rplica
Rplica
Rplica
EL VAMPIRO II
LA CINCO
EL VAMPIRO II
LA CINCO
C-100
-100
Control
-200
Rplica
C-200
-200
Control
-100
Rplica
C-100
-100
Control
-200
Rplica
C-200
-200
Control
-100
Rplica
-200
Rplica
44
6.4
45
46
47
7 RESULTADOS
7.1
48
49
De esta forma, se observa que el carbn de la mina La Cinco posee una mayor cantidad
de arcillas (caolinita) y cuarzo en comparacin con el carbn de la mina El Vampiro II.
Por otra parte, los picos asociados a la pirita poseen una intensidad predominante sobre
todos los dems minerales en el carbn de El Vampiro II, indicando que este mineral es
la fase cristalina ms abundante.
Si bien a travs de los anlisis de formas de azufre se detect la presencia de sulfatos en
ambos carbones, dichos minerales no pudieron ser identificados mediante DRX,
principalmente por su baja concentracin (<0.5%) y eventualmente debido a efectos de
baja cristalinidad en sus fases.
Finalmente, es importante anotar que la presencia de calcita solamente fue observada en
el carbn de El Vampiro II, lo cual tiene implicaciones importantes para el proceso de
biodesulfurizacin, como el incremento del pH durante el proceso y la precipitacin de
yeso.
Py
Py
CO3
60m
60m
50
Py
Py
Sp
Sp
60m
60m
Figura 16. Cristales de pirita asociados a macerales del grupo de la liptinita en el carbn
de la mina La Cinco. Py: pirita, Sp: esporinita
In
Py
60m
51
Py
In
Py
Sp
Vi
Sp
60m
60m
Py
60m
aa
Py-f
Py-f
Py-c
60m
60m
52
53
30
25
20
15
10
0
0
10
11
12
Figura 21. Distribucin del dimetro promedio cristales de pirita en el carbn de la mina
La Cinco
Si bien existe una amplia variacin en el dimetro promedio de los cristales de pirita (0.58
11.6 m), la mitad de ellos est por debajo de 3m y menos del 2% superan las 10m
de dimetro.
Independientemente de su tamao, los cristales poseen formas similares, caracterizadas
por un buen desarrollo de caras cristalinas, predominando las formas dodecadricas
(piritoedros) sobre las cbicas (figuras 22a y 22b).
Al igual que lo observado con el microscopio ptico de luz reflejada, parte de este mineral
se encuentra rellenando estructuras celulares (figura 23), siendo mucho ms difcil
diferenciar los macerales con esta tcnica, ya que su composicin qumica es similar.
Finalmente, mediante microanlisis qumicos puntuales, se pudo determinar la presencia
de dolomita y caolinita (figuras 24a y 24b). Dichos minerales ya haban sido identificados
54
Figura 22. Cristales de pirita diseminados en el carbn de la mina La Cinco con formas
dodecadricas y cbicas
Elemento
C
O
Mg
Ca
Fe K
Wt%
48.76
120.43
2.35
168.12
2.29
At.%
25.50
47.28
0.61
26.35
0.26
Elemento
Wt%
At%
O
Al
Si
S
K
Fe
41.32
19.50
26.88
3.71
0.47
2.48
58.24
16.29
21.58
2.61
0.27
1.00
55
30
25
20
15
10
0
1
10
11
12
Figura 25. Distribucin del dimetro Promedio cristales individuales de pirita en el carbn
de la mina El Vampiro II
En cuanto a los framboides, la forma ms comn de pirita en este carbn, se encontr
que la mayora de ellos posee tamaos inferiores a 15m y solo unos pocos (2%)
alcanzan dimetros superiores a 40m (figura 27).
Por lo anterior, se decidi separar el anlisis estadstico de los cristales que conforman
dichos framboides en dos grupos, teniendo como base el tamao de los mismos.
De esta forma, se encontr que en los framboides ms grandes (>15m) el tamao de los
cristales oscila entre 0.8m y 1.8m; mientras que en los framboides de menor tamao
(<15m) el intervalo de variacin de tamaos es mucho menor, ubicndose tan solo entre
0.3m y 0.65m (figura 28).
56
40
30
20
10
0
0
10
20
30
40
Figura 27. Distribucin del dimetro promedio de los framboides de pirita en el carbn de
la mina El Vampiro II
35
30
25
20
15
10
5
0
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
1.4
1.6
1.8
2.0
Figura 28. Distribucin del dimetro promedio de los cristales de pirita en el interior de los
framboides
57
Al igual que para el microscopio de luz reflejada, fue posible apreciar la disposicin del
sulfuro de hierro en bandas paralelas a la estratificacin, lo cual se cumple tanto para los
cmulos de framboides como para los grupos de cristales de mayor tamao (figuras 29a y
29b).
Figura 29. Cmulos framboidales y grupos de cristales de pirita con distribucin paralela a
la estratificacin en el carbn de la mina El Vampiro II
Los cristales que conforman los framboides tienen formas cubo-octadricas y
dodecadricas, predominando un mismo tipo de forma en cada framboide individual
(figuras 30a y 30b).
Figura 30. Framboides de pirita del carbn de la mina El Vampiro II conformados por (a)
cristales cubo-octadricos y (b) dodecadricos
Al realizar microanlisis qumicos sobre los cristales de pirita presentes en ambas
muestras (La Cinco y El Vampiro II), usando el detector EDS (Energy Dispersion
Spectrometer), se encontr que su composicin es muy pura, detectndose nicamente
hierro y azufre, en una relacin siempre cercana a la de su forma estequiomtrica (1:2),
sin la presencia evidente de elementos en solucin slida dentro de este mineral (figuras
31a y 31b), por lo menos no al nivel de deteccin del EDS.
58
b
Elemento
Wt%
At%
Elemento
Wt%
At%
S
Fe
53.27
46.73
66.50
33.50
S
Fe
53.47
46.53
66.69
33.31
Total
100.0
Total
100.0
Figura 31. Anlisis microqumico EDS sobre cristales de pirita. a) carbn de la mina La
Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
Por otro lado, al igual que para la muestra de la zona del ro Guachinte, se comprob la
presencia de carbonatos (calcita y dolomita) rellenando microfracturas y capas de arcilla
(caolinita) con una distribucin paralela a la estratificacin.
7.2
59
En los medios slidos, las colonias presentaban formas circulares y abultadas, con una
coloracin roja para las cepas compatibles con A. ferroox. y amarilla-crema para las
compatibles con A. thioox.
En cuanto a las pruebas bioqumicas, los microorganismos compatibles con A. ferroox.
fueron positivos para sulfato ferroso, azufre elemental, tiosulfato y tetrationato; mientras
que fueron negativos para tiocianato.
Por otro lado, los microorganismos compatibles con A. thioox. fueron positivos para
tiosulfato, azufre elemental y tetrationato; mientras que fueron negativos para sulfato
ferroso y tiocianato.
La nomenclatura empleada para las cepas aisladas nativas se encuentra en la tabla 15.
Tabla 15. Nomenclatura empleada para las cepas nativas aisladas
Cepas compatibles con
Cepas compatibles con
A. ferroox.
A. thioox.
A.f. 04B
A.t. 04B
A.f. 05B
A.t. 05B
A.f. 06B
A.t. 06B
Una vez obtenidos los microorganismos aislados, se hizo la adaptacin de los mismos al
carbn de acuerdo a la metodologa propuesta (tablas 10 y 11) para disminuir
paulatinamente la fuente de energa (sulfato ferroso o azufre elemental) e incrementar el
porcentaje de slidos en el medio de cultivo (figura 33). Dicho proceso de adaptacin fue
hecho empleando como sustrato el carbn de la mina El Vampiro II, por su mayor
contenido de azufre.
Las grficas de Eh y pH vs. tiempo, obtenidas para monitorear las ocho fases del periodo
de adaptacin, se encuentran graficadas en las figuras 34 y 35.
Figura 33. Ensayos de adaptacin de las seis cepas aisladas al carbn de la mina El
Vampiro II. a) microorganismos compatibles con A. ferroox. b) microorganismos
compatibles con A. thioox.
60
A partir de la tercera etapa se observ que con la disminucin del tamao de partcula y el
suministro de sulfato ferroso del sistema, los microorganismos requeran de mayor tiempo
para alcanzar los mismos valores de Eh y pH (650 mV y 1.6 respectivamente).
Adicionalmente, se observ que a partir del sexto ensayo, en donde el tamao de
partcula era el ms fino (-0.074 mm) y el porcentaje de slidos fue incrementado de 5% a
7% peso/volumen, el Eh cay durante los dos primeros das por debajo de 250 mV y el pH
alcanz valores cercanos a 4.0. En los ensayos siete y ocho, en los cuales se redujo an
ms la concentracin de sulfato ferroso en el medio y se increment el porcentaje de
slidos a 10%, se present el mismo comportamiento para los valores de Eh y pH.
Teniendo en cuenta el comportamiento de las tres cepas aisladas con su respectiva
rplica, se seleccion a la A.f.04B para llevar a cabo los ensayos de biodesulfurizacin.
Dicha cepa fue la que increment con mayor rapidez el Eh del sistema en el menor tiempo
para la mayora de los ensayos de adaptacin (figura 34).
7.3
61
A .f. 04B
A .f. 04B 2
A .f. 05B
A .f. 05B 2
A .f. 06B
A .f. 06B 2
C O N T R O L Eh
C O N T R O L pH
Figura 34. Curvas de Eh vs. tiempo y pH vs. tiempo para la fase de adaptacin de los
microorganismos compatibles con Acidithiobacillus ferrooxidans
62
A .t. 04B
A .t. 04B 2
A .t. 05B
A .t. 05B 2
A .t. 06B
A .t. 06B 2
C O N T R O L Eh
C O N T R O L pH
Figura 35. Curvas de Eh vs. tiempo y pH vs. tiempo para la fase de adaptacin de los
microorganismos compatibles con Acidithiobacillus thiooxidans
63
6.5
6.5
O2 (ppm)
O2 (ppm)
Tanto para las muestras inoculadas como en los controles estriles, la concentracin de
oxgeno disuelto se mantuvo relativamente constante alrededor de 6.2 ppm. Dicho valor
garantiza la disponibilidad de oxgeno para la actividad metablica de los
microorganismos, ya que se ha reportado que para 31C y un pH de 2.5, la concentracin
de oxgeno crtica para el crecimiento de A. ferroox. es de 0.368 ppm (Gmez y Cantero,
2005).
6.0
Control La Cinco-100
6.0
Control La Cinco-200
La Cinco-100
5.5
10
15
Tiempo (das)
20
El Vampiro II-100
5.5
La Cinco-200
25
30
El Vampiro II-200
0
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 36. Grficas de oxgeno disuelto vs. tiempo para los ensayos realizados con A.
ferroox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II.
En las figuras 37 y 38 se presentan las grficas de Eh y pH vs. tiempo para el proceso de
biodesulfurizacin empleando el carbn de la mina La Cinco y El Vampiro,
respectivamente.
En general, los comportamientos de estas curvas son similares en el sentido en que para
ambas el pH incrementa en la primera parte del proceso para luego disminuir hasta
establecerse en valores de pH cidos, mientras que los valores de Eh van en general en
aumento a lo largo del tiempo, como es de esperase en un sistema en donde las bacterias
se encuentran permanentemente oxidando el Fe2+ producido y manteniendo las
concentraciones de Fe3+ altas, incrementando el potencial de oxidacin del sistema.
El pH de las muestras inoculadas se estabiliza rpidamente en valores cercanos a 1.7
1.9, mientras que para los controles la presencia de carbonatos eleva el pH del sistema a
valores cercanos a 5.0.
En cuanto a los valores de Eh respecto al tiempo, se observa un rpido incremento del
potencial de xido-reduccin en los medios bacterianos, seguido de una estabilizacin
alrededor de 650 mV. Por el contrario, los controles abiticos nunca superaron valores de
300 mV.
64
Control La Cinco-100
Control La Cinco-200
pH
pH
La Cinco-100
El Vampiro II-200
La Cinco-200
2
10
15
20
25
30
10
Tiempo (das)
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 37. Grficas pH vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. a) carbn
de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
700
700
b
600
600
Control La Cinco-100
Control La Cinco-200
La Cinco-100
400
500
Eh (mV)
Eh (mV)
500
La Cinco-200
El Vampiro II-100
400
300
300
200
200
100
100
0
10
15
Tiempo (das)
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 38. Grficas Eh vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. a) carbn
de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
La variacin en la concentracin de sulfatos disueltos en el tiempo se encuentra graficada
en la figura 39. Es posible observar que en el carbn de la mina La Cinco, las
concentraciones son similares para ambos tamaos de partcula (1500 ppm) e incluso son
ligeramente mayores para el carbn ms grueso.
Estos valores contrastan fuertemente con los observados en el carbn de El Vampiro II,
en donde los sulfatos disueltos alcanzan concentraciones de 7500 ppm, nuevamente sin
que se aprecien grandes diferencias entre ambos tamaos de partcula.
Finalmente, la lixiviacin de hierro en el sistema con respecto al tiempo se encuentra
graficada en la figura 40. De acuerdo con las grficas, en ambos carbones se alcanzaron
porcentajes de lixiviacin similares, siendo mayor para el tamao de partcula ms fino.
Para el carbn de la mina La Cinco la lixiviacin fue de 35% y 51% para las mallas -100
y -200 (Tyler), respectivamente. Por otra parte, en el carbn de la mina El Vampiro II las
lixiviaciones fueron de 45% y 60% para los mismos tamaos de partcula.
65
8000
Control La Cinco-100
8000
Control La Cinco-200
La Cinco-100
6000
La Cinco-200
6000
4000
2000
4000
2000
El Vampiro II-200
0
0
10
15
20
25
30
10
15
Tiempo (das)
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 39. Grficas de concentracin de sulfatos en solucin vs. tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El
Vampiro II
100
Control La Cinco-200
80
100
80
El Vampiro II-100
La Cinco-100
La Cinco-200
40
20
40
20
-20
-20
0
10
El Vampiro II-200
60
%Fe lixiviado
60
%Fe lixiviado
Control La Cinco-100
15
Tiempo (das)
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 40. Grficas de porcentaje de hierro lixiviado en el tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El
Vampiro II
66
Control La Cinco-100
a
6.5
Control La Cinco-200
6.5
La Cinco-100
El Vampiro II-100
El Vampiro II-200
O2 (ppm)
O2 (ppm)
La Cinco-200
6.0
5.5
6.0
5.5
10
15
20
25
30
10
Tiempo (das)
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 41. Grficas de oxgeno disuelto vs. tiempo para los ensayos realizados con A.
ferroox. + A. thioox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
En cuanto al pH, se observa una rpida acidificacin del medio en el tiempo, tanto para el
carbn de la mina La Cinco como el de El Vampiro II (figura 42). Despus de 10-12
das, el pH se estabiliza alrededor de 1.3, siendo ms bajo que el observado para los
ensayos hechos empleando nicamente A. ferroox. (1.7-1.9).
Por otra parte, los controles mantienen valores de pH menos estables en el tiempo, pero
siempre por encima de 5.5.
Estas variaciones en el pH de los controles se corresponden en el tiempo con las
variaciones observadas para el potencial de xido-reduccin, el cual oscila entre 100 mV
y 300 mV.
a
Control La Cinco-100
pH
pH
Control La Cinco-200
La Cinco-100
La Cinco-200
El Vampiro II-100
1
0
10
15
Tiempo (das)
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 42. Grficas pH vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. + A. thioox.
a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
Para las muestras inoculadas, el Eh asciende rpidamente y se estabiliza por encima de
600 mV, con un comportamiento similar al de los ensayos realizados con A. ferroox.
(figura 43).
67
700
600
600
Control La Cinco-100
500
500
Control La Cinco-200
La Cinco-100
400
Eh (mV)
Eh (mV)
700
La Cinco-200
400
El Vampiro II-200
300
300
200
200
100
100
0
10
15
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Tiempo (das)
Figura 43. Grficas Eh vs. tiempo para los ensayos realizados con A. ferroox. + A. thioox.
a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la mina El Vampiro II
La concentracin de sulfatos en solucin para ambos carbones es sustancialmente mayor
a la encontrada para los ensayos con A. ferroox., lo cual se debe principalmente al hecho
de que para los consorcios se agreg azufre elemental al medio de cultivo, el cual es
oxidado por las bacterias a sulfato. Si se considera que todo el azufre aadido se
transforma en sulfato, la concentracin de sulfatos sera de aproximadamente 6000 ppm
en el medio.
El carbn de la mina La Cinco presenta concentraciones de sulfatos de 7300 ppm y
8300 ppm para los tamaos de partcula grueso (-100 Tyler) y fino (-200 Tyler)
respectivamente (figura 44a).
15000
Control La Cinco-200
12500
12500
La Cinco-100
La Cinco-200
10000
b 15000
Control La Cinco-100
7500
5000
2500
10000
7500
5000
2500
El Vampiro II-200
0
0
10
15
Tiempo (das)
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 44. Grficas de concentracin de sulfatos en solucin vs. tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. + A. thioox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la
mina El Vampiro II
Por otra parte, para estos mismos tamaos de partcula, las concentraciones son de
13000 ppm y 14200 ppm en los ensayos realizados con el carbn de El Vampiro II
(figura 44b).
68
100
100
80
80
60
40
%Fe removido
%Fe removido
60
Control La Cinco-100
Control La Cinco-200
20
40
20
El Vampiro II-200
La Cinco-100
La Cinco-200
-20
-20
0
10
15
20
25
Tiempo (das)
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 45. Grficas de porcentaje de hierro lixiviado en el tiempo para los ensayos
realizados con A. ferroox. + A. thioox. a) carbn de la mina La Cinco, b) carbn de la
mina El Vampiro II
7.4
Caracterizacin mineralgica
De acuerdo con la metodologa propuesta, la fase slida de las muestras extradas cada
cuatro das fue analizada mediante tcnicas de DRX, FTIR y SEM/EDS.
Teniendo en cuenta la gran cantidad de muestras obtenidas (192) puesto que cada
ensayo fue realizado por duplicado (con excepcin de los controles abiticos), se
seleccion una de las rplicas para la caracterizacin mineralgica.
Si bien las barras de error presentes en las grficas indican una poca variabilidad en la
concentracin de sulfatos en el lquido y en la lixiviacin de hierro, se seleccion la
muestra que presentaba los mayores valores para estos parmetros al final del proceso.
Una vez separada la fraccin slida de las muestras extradas cada cuatro das
(aproximadamente 1g), sta se dej secar a temperatura ambiente y posteriormente se
analiz mediante las tcnicas anteriormente mencionadas.
69
Ka
Qz
Ja
Ka
Ka
Ja
Do
Ka
Ja
Ka
Qz
Qz
Ka
Qz
Da 28
Da 24
Da 20
Da 16
Da 12
Da 8
Da 4
Py
Py
Py
Py
Da 0
Figura 46. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-100 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ja: jarosita
Ja
Ka
Ja
Ja
Ja
Qz
Do
Ja
Ja
Ja
Ja
Ja Ja
Da 28
Da 24
Da 20
Da 16
Da 12
Ka
Ka
Qz
Da 8
Py
Do
Py
Ka
Da 4
Py
Py
Qz
Py
Qz
Ka
Qz
Da 0
Figura 47. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-200 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ja: jarosita
70
Ja
Ka
Ja
Ja
Ja
Qz
Do
Ja
Ja
Ja
Ja
Ja Ja
Qz
Da 28 A. ferroox.
-200
Ka
Da 28 A. ferroox.
-100
Ka
Py
Do
Py
Ka
Ka
Py
Py
Qz
Py
Ka
Qz
Ka
Qz
Da 0
Figura 48. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina La Cinco y las
muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando A.
ferroox.
Para el carbn de la mina El Vampiro II se observan caractersticas similares a lo
descrito para el carbn proveniente de la zona del ro Guachinte, principalmente en lo
relacionado a la disminucin de los picos asociados a la pirita y la precipitacin de jarosita
durante el proceso (figuras 49 y 50).
En el tamao de partcula ms pequeo se observa una rpida disminucin del contenido
de pirita, as como una mayor precipitacin de jarosita y yeso (figura 50).
Este ltimo mineral se forma como resultado de la disolucin de los carbonatos,
especialmente la calcita (CaCO3), y una posterior precipitacin del calcio en forma de
sulfato hidratado. En efecto, se puede apreciar que para ambos tamaos de partcula los
picos asociados a este carbonato desaparecen en las etapas iniciales del proceso,
71
Ja
Gy Ka
Ja
Ja
Gy
Ja
Qz
Gy
Py
Ja
Ja
Ja
Ja
Py
Ja Ja
Da 28
Da 24
Da 20
Da 16
Da 12
Da 8
Ka
Py
Ka
Da 4
Py
Ca
Py
Py
Py
Do
Py
Py
Py
Qz
Da 0
Figura 49. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-100 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ca: calcita, Ja: jarosita, Gy: yeso
Gy
Ja
Ka
Gy
Ja
Ja
Ja
Qz
Do
Gy
Ja
Ja
Ja
Ja
Ja Ja
Da 28
Da 24
Da 20
Da 16
Da 12
Da 8
Ka
Ka
Py
Py
Ca
Do
Da 4
Py
Py
Py
Py
Py
Py
Py
Qz
Da 0
Figura 50. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. (-200 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ca: calcita, Ja: jarosita, Gy: yeso
En este caso, la intensidad de los picos correspondientes a la jarosita es mayor que para
el carbn de la mina La Cinco, lo cual se debe principalmente a que este ltimo posee
menos pirita y por lo tanto hay menor disponibilidad de hierro para formar el mineral en el
sistema.
72
Gy
Ja
Ka
Gy
Ja
Ja
Ja
Qz
Gy
Ja Do
Ja
Ja
Gy Ja
Ja
Ja Ja
Da 28 A. ferro o x.
-200
Da 28 A. ferro o x.
-100
Ka
Ka
Py
Py
Py
Ca
Py
Py
Do
Py
Py
Py
Qz
Da 0
73
0.060
Najarosita
0.055
0.050
)
3
1
(1
)
1
2
0
(
=)
(
d
0.045
Hidronioiojarosita
0.040
0.035
Kjarosita
0.030
0.025
0.020
Amoniojarosita
0.015
0
10
15
20
25
30
Tiempo(das)
LaCinco100
LaCinco200
ElVampiro100
ElVampiro200
74
Por otra parte, el decrecimiento de los picos de la pirita sigue siendo ms acelerado en el
material ms fino (-200 Tyler), en donde para el da 12 no se observa este mineral en los
espectros (figura 56).
Qz
Ka
Ja
Ja
Do
Qz
Qz
Da 28 A. ferroox.
-200
Ka
Ka
Da 28 A. ferroox.
-100
Py
Do
Py
Ka
Ka
Py
Py
Qz
Py
Ka
Qz
Ka
Qz
Da 0
Gy
Py
Gy
Ka
Ja
Py
Py
Gy ka
Gy
Da 28 A.ferroox.
-200
Qz
Ja
Ja
Ka
Ka
Ka
Da 28 A.ferroox.
-100
Py
Py
Ca
Py
Do
Py
Py
Py
Qz
Da 0
75
Ka
Qz
Ka
Ka
Ja
Lo
Do
Ka
Ka
Qz
Ka
Ka
Da 28
Da 24
Lo
Lo
Da 20
Da 16
Da 12
S
Qz
Da 8
Py
Py
Py
Da 4
Py
Py
Qz
Py
Qz
Ka
Qz
Da 0
Figura 55. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (-100 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ja: jarosita, Lo: lonecreekita
Ka
La
Ja
Qz
Ka
Ka
Qz
Ja
Ka
Ka
Ja
Ja
Qz
Ka
Ka
Da 28
Da 24
Lo
Da 20
Da 16
S
Da 12
Da 8
Qz
Da 4
Py
Do
Py
Py
Py
Py
Qz
Py
Qz
Da 0
Figura 56. Espectros de DRX para el carbn original de la mina La Cinco y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (- 200 Tyler)
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ja: jarosita
Por primera vez, se observa la aparicin de dos nuevas fases minerales, identificadas
como laumontita (CaAl2Si4O124(H2O)) y lonecreekita (NH4Fe(SO4)2.12H2O).
El primero, es un mineral perteneciente al grupo de las zeolitas que se puede formar en
ambientes de meteorizacin, diagnesis, metamorfismo y condiciones hidrotermales
(Gottardi, 1985). Esta fase mineral fue detectada en el sistema solamente para la fraccin
ms fina desde las etapas tempranas del proceso.
76
Ka
La
Qz
Ka
Qz
Ja
Ja
Ka
Ka
Ja
Ka
Qz
Ka
Qz
Ka
Da 28 A.f. + A.t.
-200
Lo
Qz
Ka
Ka
Da 28 A.f. + A .t.
-100
Py
Do
Py
Ka
Ka
Py
Ka
Py
Qz
Py
Ka
Qz
Ka
Qz Da 0
Figura 57. Espectros de difraccin para la muestra de carbn de la mina La Cinco y las
muestras despus del proceso de biodesulfurizacin (-100 y -200 Tyler) usando el
consorcio A. ferroox. + A. thioox.
En cuanto al carbn proveniente de la zona del ro Asnaz, se observa una disminucin
de la intensidad de los picos asociados a la pirita, los cuales no desaparecen por
completo en el material ms grueso despus de 28 das (figura 58), pero s lo hacen para
el da 12 cuando el tamao de partcula es el ms pequeo (figura 59).
La precipitacin de hidroxisulfatos de hierro, se da nuevamente en forma de lonecreekita y
jarosita.
La lonecreekita predomina a lo largo del proceso para el mayor tamao de partcula,
mientras que la jarosita solo se forma hasta el da 24, exhibiendo picos de muy baja
intensidad (figura 58).
77
La
Gy
Ka
Gy
Ka
Qz
Ja
Gy
Py
Ja
Ja
Py
Py
Da 28
Lo
Lo
Da 24
Lo
Da 20
Da 16
Gy
Da 12
Da 8
Ka
Ka
Py
Da 4
Py
Ca
Py
Py
Py
Do
Py
Py
Py
Da 0
Figura 58. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (-100 Tyler). Ka: caolinita, Py:
pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ca: calcita, Ja: jarosita, Gy: yeso, La: laumontita, Lo: lonecreekita
En contraste, para la fraccin fina (figura 59) se observa la aparicin temprana de jarosita,
con una intensidad de los picos que aumenta en el tiempo y es sustancialmente mayor a
la observada para la fraccin gruesa.
Gy
La
Gy
Ka
Ja
Gy Ka
Qz
Ja
Gy
Gy
Gy
Ja
Ka
Gy
Ja
Ja
Ka
Da 28
Da 24
Da 20
Da 16
S
Da 12
Ka
Ka
Py
Py
Ca
Py
Py
Py
Da 8
Py
Da 4
Do
Py
Py
Py
Da 0
Figura 59. Espectros de DRX para el carbn original de la mina El Vampiro II y sus
posteriores muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. (-200 Tyler).
Ka: caolinita, Py: pirita, Qz: cuarzo, Do: dolomita, Ca: calcita, Ja: jarosita, Gy: yeso, La: laumontita
78
La comparacin de los espectros de DRX para la muestra original y los dos tamaos de
partcula analizados, se encuentra en la figura 60. Se observa una mayor precipitacin de
jarosita y yeso en la fraccin fina del carbn (-200 Tyler).
Gy
La
Gy
Ka
Ja
Gy ka
Qz
Ja
Gy
Gy
Ja
Ja
Gy
Ja
Ja
Ja
Da 28 A.f. + A.t.
-200
Ja
Py
Ka
Ka
Ka
Py
Py
Ca
Da 28 A.f. + A .t.
-100
Py
Py
Py
Do
Py
Py
Py
Qz
Da 0
79
0.060
Najarosita
0.055
0.050
)
3
1
(1
)
1
2
0
(
=)
(
d
0.045
Hidronioiojarosita
0.040
0.035
Kjarosita
0.030
0.025
0.020
Amoniojarosita
0.015
0
10
15
20
25
30
Tiempo(das)
LaCinco100
LaCinco200
ElVampiro100
ElVampiro200
Ka
Qz
S
S
Do
S
Da 28 A.f.+A.t.
-200
S
Ka
Qz
Da 28 A.f.+A.t.
-100
Ka
Py
Do
Py
Ka
Ka
Py
Py
Qz
Py
Ka
Qz
Ka
Qz
Da 0
80
Gy
Py
Gy
Ka
S
ka
Ja
Py
Py
S
Gy
Da 28 A.f.+A.t.
-200
S
Qz
Ka
Ka
Ka
Da 28 A.f.+A.t.
-100
Py
Py
Ca
Py
Do
Py
Py
Py
Qz
Da 0
81
Tabla 16. Asignacin de las bandas correspondientes a los espectros FTIR para las
muestras de carbn
Pico (cm-1)
3600 - 3800
3400
3200
Asignacin
OH asociados a caolinita
Vibracin de tensin del grupo OH
Vibracin de tensin (stretching) del enlace N-H
2920
2850
1697
1600
1438
1436
1408
1375
1250
1163
1090
1090
1180-1195
1070-1090
1008 y 1032
1004-1017
935
Caolinita
912
Caolinita
876
670
Calcita
Vibracin de flexin fuera del plano de enlaces
aromticos CH aislados
Vibracin de flexin fuera del plano de tres
enlaces aromticos CH adyacentes
Vibracin de flexin fuera del plano de cuatro
enlaces C-H adyacentes
Vibracin fuera del plano asociada a la
esporinita (grupo de la liptinita)
Vibracin de tensin (stretching) asociada al
Cuarzo
Yeso
630
875
810
750
692
693
536
510
471
420
Fuente
Saikia et al., 2007
Xuguang, 2005
Lazaroff et al., 1982
Saikia et al., 2007
Xuguang, 2005
Munkhtsetseg, 2007
Xuguang, 2005
Munkhtsetseg, 2007
Saikia et al., 2007
Pietrzak y Wachowska, 2003
Saikia et al., 2007
Xuguang, 2005
Saikia et al., 2007
Iglesias et al., 1998
Lazaroff et al., 1982
Saikia et al., 2007
Munkhtsetseg, 2007
Saikia et al., 2007
Sharma y Wadhwa, 1997
Farmer, 1987
Sharma y Wadhwa, 1997
Lazaroff et al., 1982;
Baruah et al., 2003
Saikia et al., 2007
Farmer, 1987
Lazaroff et al., 1982
Sharma y Wadhwa, 1997
Farmer, 1987
Sharma y Wadhwa, 1997
Farmer, 1987
Iglesias et al., 1998
Munkhtsetseg, 2007
Guo y Bustin, 1998
Munkhtsetseg, 2007
Guo y Bustin, 1998
Saikia et al., 2007
Guo y Bustin, 1998
Guo y Bustin, 1998
Nayak y Singh, 2007
Schiavon, 2007
Lazaroff et al., 1982
Addler y Kerr, 1965
Saikia et al., 2007
Lazaroff et al., 1982; Addler
y Kerr, 1965
Saikia et al., 2007
Saikia et al., 2007
Sharma y Wadhwa, 1997
82
C=O
Da0
CH3
CH2
C=C
Ka
Qz
CH Qz
Py
Ka/Qz
Ka
CH2
CH3
Da4
Ka
Ka
Qz
Da8
Da12
Da16
Da20
Da24
Da28
Ja
Ka
CH2
CH3
OH
3500
Ka
Qz
SO42
3000
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 64. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. Ka: caolinita, SO4: sulfatos, Ja: jarosita, Qz: cuarzo, Py: pirita
C=O
Da0
CH3
CH2
C=C
Ka/Qz
Ka
Ka
CH2
CH3
Da4
Py
Ka CH Qz
Qz
Ka
Qz
Da8
Da12
Da16
Da20
Ja
Da24
Da28
Ka
CH2
CH3
OH
3500
3000
2500
2000
1750
1500
Ka
Qz
SO42
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 65. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. Ka: caolinita, SO4: sulfatos, Ja: jarosita, Qz: cuarzo, Py: pirita
83
Para ambos tamaos de partcula, pero con mayor notoriedad en el tamao de partcula
ms fino (<74m), se observa una disminucin de las bandas 3600-3800 cm-1, 912 cm-1 y
935 cm-1 asociadas a la caolinita, 690 cm-1 asociada al cuarzo y 471 cm-1 y 536 cm-1,
ambas asociadas a silicatos como el cuarzo y las arcillas.
Por otra parte, las bandas 700-900 cm-1, 1250 cm-1, 1375 cm-1, 1438 cm-1, 1600 cm-1,
1697 cm-1, 2850 cm-1 y 2920 cm-1, correspondientes a la fraccin orgnica del carbn, no
presentan cambios apreciables en el tiempo, indicando que los microorganismos
solamente actan sobre la fraccin mineral o inorgnica.
Tambin se presenta un notorio incremento en la intensidad de la banda ubicada
alrededor de 3400 cm-1, la cual est asociada a los grupos OH de minerales como arcillas
y sulfatos. Esto concuerda con la aparicin de bandas correspondientes a la jarosita en
1188 cm-1, 1083 cm-1, 630 cm-1 y 510 cm-1 que aumentan su intensidad en el tiempo,
caracterstica que se acenta ms en el material ms fino (figura 65), similar a lo
observado en los espectros de DRX.
La banda 420 cm-1, correspondiente a la pirita, presenta una disminucin apreciable en
ambos grupos de espectros; sin embargo, se considera de poca representatividad para
evaluar la oxidacin bacteriana del mineral por su cercana al lmite de deteccin del
equipo (400-4000cm-1).
Para el carbn de la mina El Vampiro II, los espectros FTIR presentan una morfologa
general similar a lo observado para el carbn de La Cinco. Las bandas asociadas al
componente orgnico del carbn, no presentan cambios a lo largo del proceso, mas s
aquellas correspondientes a minerales como sulfatos, caolinita y cuarzo (figuras 66 y 67).
C=O
Da0
Ka
CH 3
CH 2
C=C
Ka
Ka
Da4
CH
Qz
Py
Ka/Qz
Ka
Qz
Da8
Da12
Da16
Da20
Da24
Gy
Da28
CH2
CH3
OH
3500
CH 2
CH 3
3000
Ja
Ka
Qz
SO42
SO42
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 66. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. Ka: caolinita, SO4: sulfatos, Ja: jarosita, Qz: cuarzo, Py: pirita,
Gy: yeso
84
C=O
Da0
C=C
Ka
Ka
CH3
CH2
CH
Qz
Py
Ka/Qz
Ka
Ka
Qz
Da4
Da8
Da12
Da16
Da20
Da24
Gy
Da28
Ja
CH2
CH3
OH
3500
CH2
CH3
3000
Ka
Qz
SO42
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 67. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. Ka: caolinita, SO4: sulfatos, Ja: jarosita, Qz: cuarzo, Py: pirita,
Gy: yeso
Las bandas asociadas al cuarzo (471 cm-1, 536 cm-1 y 690 cm-1) y a la caolinita (36003800 cm-1, 912 cm-1, 935 cm-1, 471 cm-1 y 536 cm-1) disminuyen su intensidad en el tiempo
para ambos tamaos de partcula. En el caso de las bandas 1008 cm-1 y 1032 cm-1,
ambas asociadas a silicatos como arcillas y el cuarzo, se observa una superposicin de
las mismas con bandas de sulfatos (1188 cm-1, 1083 cm-1 y 1090 cm-1).
El yeso, mineral que fue detectado mediante DRX para las muestras biooxidadas
(solamente en este carbn), aparece representado en la banda 670 cm-1.
Si bien la calcita tambin fue detectada mediante DRX en la muestra de carbn inicial,
esta tcnica no permite diferenciarla con claridad ya que las bandas 1436 cm-1 y 876 cm-1
asociadas a este mineral, se encuentran superpuestas con otras asociadas a
componentes orgnicos del carbn (CHx).
7.4.2.2 Acidithiobacillus ferrooxidans + Acidithiobacillus thiooxidans
Para las muestras de carbn tratadas con el consorcio de microorganismos nativos, los
espectros FTIR presentan muy poca variacin en el tiempo en comparacin con lo
observado para el tratamiento bacteriano empleando A. ferroox.
En el carbn de la mina La Cinco (figuras 68 y 69) se insinan las mismas bandas
observadas en el caso del tratamiento con A. ferroox., asociadas a la jarosita (1188 cm-1,
1083 cm-1 y 630 cm-1), pero tambin aparecen las bandas a 3200 cm-1 y 1408 cm-1,
85
C=O
Da0
CH3
CH2
C=C
Ka CH
Qz
Qz
Py
Ka
Ka
CH2
CH3
Da4
Da8
Da12
Da16
Da20
Ja
Da24
Da28
Ka
Qz
NH4+
OH
3500
CH2
CH3
NH4+
3000
2500
2000
1750
1500
SO42
Ka
Qz
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 68. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
En cuanto a las muestras de carbn de la mina El Vampiro II, las caractersticas de los
espectros FTIR son similares a las descritas anteriormente para el carbn proveniente de
la zona del ro Guachinte, en cuanto a la disminucin de la intensidad de las bandas
asociadas a los silicatos (cuarzo y caolinita) y la aparicin de bandas de hidroxisulfatos
frricos (figuras 70 y 71).
86
C=O
CH3
CH2
C=C
Da0
Ka
Ka CH
Qz
Qz
Py
Ka
OH
CH2
CH3
Da4
Ka
Qz
Da8
Da12
Da16
Da20
Ja
Da24
Da28
NH4+
CH2
CH3
NH4+
3500
3000
2500
2000
1750
1500
SO4
Ka
Qz
SO42
Ka
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 69. Espectros FTIR para el carbn de la mina La Cinco (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
C=O
Da0
CH3
CH2
C=C
Py
Ka CH Qz
Ka
Ka
Ka
Qz
CH2
CH3
Da4
Da8
Da12
Da16
Da20
Gy
Da24
Ja
NH4+
Da28
OH
3500
CH2
CH3
NH4+
3000
2500
2000
1750
1500
SO42
Ka
Qz
Ka
SO42
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 70. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-100 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox.
87
C=O
Da0
C=C
Ka
Ka
CH 3
CH 2
Ka
Py
CH Qz
Ka
Qz
Da4
Da8
Da12
Da16
Da20
Gy
Da24
Ja Ka
Qz
NH4+
Da28
OH
3500
CH2
CH3
NH4+
3000
2500
2000
1750
1500
SO4
Ka
SO4
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 71. Espectros FTIR para el carbn de la mina El Vampiro II (-200 Tyler) y las
muestras biooxidadas con A. ferroox. + A. thioox. Ka: caolinita, SO4: sulfatos, Ja: jarosita, Qz:
cuarzo, Py: pirita, Gy: yeso
88
Figura 73. Imgenes de SEM despus de 12 das de proceso para el carbn de la mina
La Cinco. a) Grano de carbn en donde se observa un grano de pirita con golfos de
corrosin y huellas semi-circulares alrededor que podran representar espacios
previamente ocupados por cristales y/o framboides (-100 Tyler), b) Grano de carbn sin
pirita rodeado completamente por sulfatos de hierro (-200 Tyler)
Adems de la jarosita (cuya presencia fue detectada previamente mediante DRX y FTIR),
con el microscopio electrnico de barrido se hallaron xidos/hidrxidos de hierro (figura
74), los cuales no fueron detectados en el anlisis inicial de la muestra, por lo que se
considera que su origen puede estar relacionado al proceso de biodesulfurizacin.
Adicionalmente, estas fases deben ser de carcter amorfo o de baja cristalinidad, ya que
no se observaron por DRX.
Algunos de estos xidos/hidrxidos se encuentran como capas paralelas a la
estratificacin del carbn (figura 74a), posiblemente reemplazando las microfracturas
rellenas de pirita que existan en el sustrato. No obstante, tambin se presentan como
masas irregulares sin una orientacin especfica (figura 74b).
89
Elemento
W%
At%
C
O
Fe
4.99
25.99
69.02
12.69
49.59
37.72
Total
100.0
Fe
Si
90
Mientas el rea ocupada por los cristales contiene hierro y azufre nicamente, los bordes
de los mismos estn conformados por oxgeno, azufre y hierro, asociados a los
precipitados de jarosita previamente detectados mediante DRX y FTIR. Adicionalmente,
se puede observar que estos cristales estn dentro de la matriz del carbn y cerca de una
zona rica en arcillas, por la presencia de silicio y oxgeno.
Frecuentemente, la textura de estos precipitados es semejante a un entramado de
pequeas fibras, sin que se puedan diferenciar caras cristalinas individuales (figura 76).
Elemento
O
S
K
Fe
W%
42.70
21.25
4.43
31.62
Total
100.0
0
At%
66.53
16.52
2.82
14.12
91
Para el da 16, es comn observar fragmentos de carbn prcticamente sin pirita (figura
78), algunos de ellos con huellas circulares similares a espacios previamente ocupados
por framboides.
b
Elemento
O
S
K
Fe
W%
45.34
10.42
1.85
42.38
At%
71.9
7.87
1.53
18.8
92
Figura 81. Cristales de yeso euedrales con forma tabular en las muestras de El Vampiro
II despus de 24 das de proceso. a) Grano de carbn sin pirita y con cristales de yeso (100 Tyler), b) Cristal de yeso con caras cristalinas bien definidas (-200 Tyler)
Finalmente, las imgenes obtenidas para los controles abiticos despus del proceso de
biodesulfurizacin, permiten establecer que la pirita (tanto en masas irregulares como
cristales y cmulos framboidales) no sufri oxidacin (figura 82).
93
Figura 82. Muestras correspondientes a los controles abiticos al final del proceso (28
das) sin evidencias de oxidacin. a) Granos de pirita y framboides intactos en el carbn
de la mina La Cinco, b) Pirita framboidal y masiva en el carbn de El Vampiro II sin
oxidacin
94
Elemento
O
Si
S
Fe
W%
33.12
1.54
0.82
64.52
Total
100.0
At%
62.63
1.66
0.77
34.95
95
Al
Si
Fe
Figura 88. Mapa composicional para un framboide de pirita con evidencias de oxidacin e
la parte central despus de 12 das de tratamiento (-200 Tyler)
96
Elemento
O
Al
Si
S
K
Fe
W%
27.09
2.53
2.93
16.37
8.07
43.01
Total
100.0
0
At%
50.12
2.77
3.09
15.11
6.11
22.80
97
98
Tabla 17. Formas de azufre para los carbones de las minas La Cinco y El Vampiro II
antes y despus del proceso de biodesulfurizacin con A. ferroox.
Ssulfato
Spirtico
SOrgnico
STotal
oxidacindepirita
remocindeazufre
Muestra
(%)
(%)
(%)
(%)
(%)
(%)
*
LaCinco100
0.21
1.20
1.14
2.55
*
LaCinco200
0.24
1.27
1.10
2.61
CC100
0.32
1.12
1.16
2.60
6.67
1.96
CC200
0.33
1.23
1.14
2.70
3.15
3.45
LaCinco100
0.50
0.40
1.13
2.03
66.67
20.39
LaCinco200
1.10
0.18
1.06
2.34
85.83
10.34
*
Vampiro100
0.38
3.45
1.90
5.73
*
Vampiro200
0.35
3.41
1.77
5.53
CV100
0.67
3.35
1.83
5.85
2.90
2.09
CV200
0.70
3.30
1.72
5.72
3.23
3.44
Vampiro100
0.70
0.80
1.83
3.33
76.81
41.88
Vampiro200
1.02
0.13
1.72
2.87
96.19
48.10
(*)
muestra inicial. CC: control carbn mina La Cinco. CV: control carbn mina El Vampiro
Para las muestras inoculadas, las diferencias en la cantidad de azufre total al comienzo y
final del proceso no son significativas para el carbn de la mina La Cinco, alcanzando
remociones de 10% y 20% para las mallas gruesa y fina respectivamente. No obstante,
los porcentajes de oxidacin de la pirita fueron muy superiores a estos valores (67% y
86% respectivamente), por lo que se corrobora que el azufre y el hierro vuelven a
precipitarse en la fraccin slida en forma de jarosita.
Para la malla ms fina por ejemplo (-200 Tyler), aunque la pirita fue disuelta en un 86%, el
contenido de sulfatos en el carbn pasa de 0.24% a 1.1% para valores de pH de 1.8-1.9,
por lo que se puede decir que el trabajo de los microorganismos es exitoso pero en lugar
de quedarse en solucin, el azufre se reprecipita en el sistema.
Por otra parte, para el carbn de la mina El Vampiro II, tanto la remocin de azufre total
como el porcentaje de oxidacin de la pirita son mayores que para el carbn de la mina
La Cinco. En este caso, se alcanzan porcentajes de disolucin del sulfuro de 77% y 96%
para los tamaos de partcula grueso y fino respectivamente. No obstante, el azufre
tambin se precipita en forma de sulfatos (jarosita y yeso segn lo observado con DRX y
FTIR) y la remocin de este componente en el carbn es de apenas 42% (tamao grueso)
y 48% (tamao fino).
Lo anterior significa que si bien hay una clara oxidacin de la pirita por parte de los
microorganismos en ambos sustratos de carbn, gran parte del azufre se est
reincorporando a la fraccin slida del sistema en forma de sulfatos, algo no deseable en
el proceso, ya que es precisamente este elemento el que se pretende extraer del carbn.
Finalmente, es importante destacar que existe una mayor reduccin del azufre pirtico en
las muestras de menor tamao de partcula (<74m), posiblemente debido a que poseen
mayor rea superficial que puede entrar en contacto con el medio lixiviante y los
microorganismos.
99
LaCinco200*
0.24
1.27
1.10
2.61
CC100
1.22
1.16
1.12
3.50
3.33
37.25
CC200
1.30
1.24
1.06
3.60
2.49
41.18
LaCinco100
0.30
0.43
1.17
1.90
64.17
25.49
LaCinco200
0.48
0.19
1.14
1.81
85.04
30.65
*
Vampiro100
0.38
3.45
1.90
5.73
Vampiro200*
0.35
3.41
1.77
5.53
CV100
1.46
3.33
1.85
6.64
3.48
15.88
CV200
1.86
3.28
1.74
6.88
3.81
24.41
Vampiro100
0.40
0.70
1.85
2.95
79.71
48.52
Vampiro200
0.80
0.16
1.74
2.70
95.31
51.18
(*)
muestra inicial. CC: control carbn mina La Cinco. CV: control carbn mina El Vampiro
100
7.5
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos para los ensayos a nivel erlenmeyer
correspondientes a los anlisis qumicos (porcentaje de hierro lixiviado y sulfatos en
solucin) como mineralgicos (DRX, FTIR), pero sobre todo a partir de las formas de
azufre al final del proceso, se escogieron los parmetros para llevar a cabo el proceso en
reactores agitados a un volumen de 5 litros.
De esta forma, el tamao de partcula seleccionado fue el ms fino (<74m), ya que
present las mayores extracciones de azufre pirtico en ambos sustratos, adems de la
lixiviacin de hierro y concentracin de sulfatos en solucin.
Igualmente, la cepa tomada para estos ensayos fue el consorcio de microorganismos
nativos (A.f.04B + A.t.06B) por su mayor capacidad para reducir el pH del medio y facilitar
la disolucin de los sulfatos generados por la oxidacin de la pirita.
La velocidad de agitacin en los reactores se seleccion de tal forma que no se produjera
depositacin del carbn en el fondo de los reactores, pero a su vez que no fuera tan alta
como para afectar a los microorganismos. De esta forma, se hizo un ensayo previo con 5
litros de agua, 500 g de carbn (-200 Tyler) y se encontr que por debajo de 350 r.p.m,
haba precipitacin de slidos en el reactor, por lo que se seleccion un valor tentativo
alrededor de 400 r.p.m. y se hizo un anlisis estadstico de la concentracin de partculas
en diferentes puntos del tanque para verificar una correcta homogenizacin de los slidos
en el mismo.
Se tomaron muestras de 1ml en 5 puntos del reactor, se dejaron secar para obtener la
fraccin slida y se pesaron para determinar la densidad de slidos en cada punto
muestreado. Los resultados obtenidos se presentan en la figura 92 y, de acuerdo a la
distribucin de los datos, se concluy que la velocidad de agitacin propuesta era
adecuada para el proceso.
Finalmente, los ensayos en reactores a volumen de 5 litros, se llevaron a cabo por un
periodo de 28 das con las siguientes condiciones:
Tamao de partcula: pasante malla 200 Tyler (<74m) para ambos carbones (La Cinco
y El Vampiro II)
Microorganismos: A.f.04B + A.t.06B
Concentracin de slidos: 10% peso/volumen
Medio de cultivo: 9K modificado (el mismo empleado para los ensayos a escala
erlenmeyer)
Temperatura: 30 5 C
Velocidad de agitacin: 400 10 r.p.m.
La saturacin de oxgeno se garantiz con medidas peridicas de O2
Parte de la finalidad de este ensayo es evaluar, a nivel general, el comportamiento del
proceso a un mayor volumen, sin que ello signifique que se trata de un escalado del
proceso, ya que ello requiere del anlisis detallado de parmetros cinticos y qumicos
que garanticen que las condiciones de operacin de los reactores son las mismas que
existan en los erelenmeyer.
Adems de evaluar el proceso de biodesulfurizacin en los reactores, se quiso determinar
si al controlar el pH del medio durante el ensayo, se minimizaba el fenmeno de
101
precipitacin de sulfatos (principalmente la jarosita). Por otra parte, es posible que cuando
el pH del medio se reduce a valores cercanos a 1.0, los microorganismos compatibles con
A. ferroox. se vean inhibidos para llevar a cabo sus funciones metablicas, ya que se ha
encontrado que trabajan mejor en valores de pH cercanos a 1.8 - 2.0 (Torma, 1977;
Karamanev y Nikolov, 1988; Drobner et al., 1990).
Muestra
1
5
4
2
3
1
2
3
4
5
Peso
muestra
(g)
0.097
0.102
0.103
0.099
0.100
%slidos Promedio
Desv.
g/L
(g/L)
Estndar
485
510
515
495
500
501
10%
102
La CincopH no controlado
pH
pH
1
0
10
15
Tiempo (das)
20
25
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 93. Grficas de pH vs. tiempo para los ensayos en reactores a 5 litros. sin control
de pH. a) carbn de la mina La Cinco; b) carbn de la mina El Vampiro II
En cuanto al comportamiento del potencial de xido-reduccin (Eh), es posible notar
diferencias entre los procesos llevados a cabo con y sin control del pH. En primer lugar, el
Eh de los controles abiticos es sustancialmente mayor cuando el pH del medio se
mantiene alrededor de 1.6-1.7, alcanzando valores cercanos a 450 mV, mientras que
cuando el pH no se controla, el potencial se mantiene por debajo de 300 mV (figura 94).
En segundo lugar, para los ensayos inoculados, se observa una tendencia del Eh a
mantenerse estable alrededor de 650 mV en ambos tipos de carbn. No obstante, el
tiempo que tardan ambos ensayos (con y sin control de pH) en alcanzar este valor es
sustancialmente menor cuando el pH no se controla que cuando se mantiene constante
(figura 94).
En cuanto a la proporcin de hierro lixiviada en el tiempo (figura 95), es posible observar
que para ambos sustratos, aproximadamente el 70-80% del hierro asociado a la pirita fue
puesto en solucin.
103
En este caso, el proceso en el cual no se hizo control del pH parece ser ms eficiente, ya
que se alcanzan lixiviaciones del 75% del hierro en apenas 7 das, mientras que cuando el
pH se controla con NaOH, este mismo porcentaje de lixiviacin slo se alcanza despus
de 14 das (el doble del tiempo).
a
a
700
b
Control La CincopH no controlado
600
600
La CincopH no controlado
500
La CincopH controlado
500
Eh (mV)
Eh (mV)
700
400
300
400
300
200
200
10
15
20
25
30
10
Tiempo (das)
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 94. Grficas de Eh vs. tiempo para los ensayos en reactores a 5 litros. a) carbn
de la mina La Cinco; b) carbn de la mina El Vampiro II
100
100
b
80
80
60
%Fe lixiviado
%Fe lixiviado
60
40
La CincopH no controlado
La CincopH controlado
20
40
20
-20
-20
0
10
15
20
25
Tiempo das
30
10
15
20
25
30
Tiempo (das)
Figura 95. Grficas de porcentaje de hierro lixiviado vs. tiempo para ambos tipos de
carbn. a) carbn de la mina La Cinco; b) carbn de la mina El Vampiro II
104
Qz
Ka
Qz
Ka
Ka
Lo
Ja
Ka
Ka
Qz
Ka
Qz
Ka
Ja
Da 28
pH controlado
Ka
Qz
Ja
Da 28
pH no controlado
Py
Py
Do
Ka
Ka
Py
Py
Qz
Ka
Py
Qz
Ka
Qz
Da 0
Figura 96. Difractogramas para el carbn de la mina La Cinco antes y despus del
proceso de biodesulfurizacin en reactores de 5 litros
Qz
Qz
An
An
Hm
Hm
Qz
Qz
Qz
Cenizas carbn
biodesulfurizado
Qz
Qz
Hm
Ka
Hm
Hm
An
Ka
Ka
Py
Hm
An
Hm
Hm
Hm Hm
Cenizas carbn
crudo
Py
Do
Ka
Ka
Py Qz
Ka Py
Qz
Ka
Py
Qz
Ka
Carbn
crudo
Qz
Figura 97. Difractogramas del carbn de la mina La Cinco y las cenizas del mismo antes
y despus de 28 das de proceso en reactores de 5 litros
Es posible observar que la amorficidad del espectro del carbn desaparece en las cenizas
y los picos de las fases minerales son ms definidos y agudos, especialmente aquellos
105
asociados al cuarzo, el nico mineral que est presente en las tres fases analizadas.
Tanto en las cenizas del carbn crudo como biodesulfurizado, los picos asociados a
minerales como caolinita, pirita y dolomita desaparecen y dan lugar a la formacin de
fases como hematita (Fe2O3) y anhidrita (CaSO4). Estos ltimos minerales, especialmente
la hematita, son menos abundantes en las cenizas del carbn biooxidado (figura 95), ya
que el hierro disponible para generar la nueva fase mineral es menor.
Para el carbn de la mina El Vampiro II, la precipitacin de minerales como jarosita y
yeso es mucho mayor que para el de la zona del ro Guachinte, lo cual se manifiesta en la
intensidad de los picos de los difractogramas (figura 98).
En este caso, fases minerales como pirita, calcita y dolomita desaparecen en las muestras
biodesulfurizadas y no se observan cambios apreciables en el cuarzo y la caolinita.
Si bien la precipitacin de sulfatos es comn a ambos tratamientos (con y sin control de
pH), hay mayor formacin de estas fases en el proceso donde se mantiene constante el
pH alrededor de 1.6-1.7.
Gy
Ja
Ka
Gy
La
Ja
Ka
Ja
Gy Ka
Qz
Ja
Gy
Ja
Ja
Ja
Ja
Ja
Gy
Gy
Da 28
pH controlado
Ka
Ka
Ka
Ka
Py
Py
Qz
Py
Ca
Da 28
pH no controlado
Py
Py
Py
Do
Ka
Ka
Ka
Ka
Py
Py
Py
Da 0
Figura 98. Difractogramas para el carbn de la mina El Vampiro II antes y despus del
proceso de biodesulfurizacin en reactores de 5 litros
Los espectros de difraccin correspondientes a las cenizas carbn antes y despus de ser
biooxidado, se encuentran en la figura 99.
Al igual que para el carbn de la mina La Cinco, en las cenizas desaparecen todas las
fases minerales, a excepcin del cuarzo y se generan minerales como hematita y
anhidrita.
La hematita es menos abundante en la muestra biodesulfurizada, ya que la principal
fuente de hierro para la formacin de este mineral (pirita), ha sido lixiviada en gran
medida.
106
Por otra parte, la anhidrita parece ser ms abundante en las cenizas del carbn tratado
biolgicamente, indicando una mayor cantidad de calcio en las muestras biooxidadas.
Para las muestras originales, el calcio est asociado a minerales como calcita y dolomita,
mientras que para las muestras tratadas biolgicamente este elemento se encuentra en el
yeso. Si bien este ltimo mineral se precipita a partir de los carbonatos previamente
descritos, es posible que tambin haya formacin adicional de yeso a partir del nitrato de
calcio presente en las sales basales del medio de cultivo.
An
Hm
Qz
Hm
Qz
An
Cenizas carbn
biodesulfurizado
An
An
An
An
Hm
An
Hm
An
Ka
Py
Ka
Py
Py
Ca
Do
Ka
Cenizas carbn
crudo
An Hm
Py
Qz Py
Hm
Hm
An
Ka
Hm
Ka
Py
Ka
Qz
Ka
Py
Py
Py
Carbn
crudo
Figura 99. Difractogramas del carbn de la mina El Vampiro II y las cenizas del mismo
antes y despus de 28 das de proceso en reactores de 5 litros
107
obstante, aquellas asociadas a sulfatos como yeso y jarosita poseen gran intensidad en
las muestras biooxidadas, especialmente en la que se control el pH del medio.
C=O
Da0
CH 3
CH 2
C=C
Ka
Ka
Py
Ka
CH2
CH3
Da28
pHnocontrolado
CH Qz
Ka
Qz
Da28
pHcontrolado
Ja
NH4+
CH2
CH3
NH4+
SO42
SO42
Ka
OH
3500
Ka
Qz
3000
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 100. Espectros FTIR para la muestra de carbn original de la mina La Cinco y los
tratamientos bacterianos despus de 28 das en reactores de 5 litros
C=O
Ka CH
KaQz
CH 3
CH 2
C=C
Da0
Py
Qz
Ka
Da28
pHnocontrolado
Ka
Qz
CH 2
CH 3
Gy
Da28
pHcontrolado
NH 4
CH 2
CH 3
Ka
OH
3500
3000
Ka
Qz
SO 42
NH 4+
Ja
SO 42
2500
2000
1750
1500
1250
1000
750
500
1/cm
Figura 101. Espectros FTIR para la muestra de carbn original y los tratamientos
bacterianos despus de 28 das en reactores de 5 litros
108
LaCincopHnocontrolado
0.51
0.18
1.07 1.76
85.25
31.78
LaCincopHcontrolado
0.69
0.22
1.12 2.03
81.97
21.32
*
ElVampiroII
0.48
3.42
1.80 5.70
ElVampiroIIpHnocontrolado 0.81
0.12
1.75 2.68
96.49
52.98
ElVampiroIIpHcontrolado
1.00
0.27
1.77 3.04
92.11
46.67
(*)
muestra inicial
109
Tabla 20. Anlisis prximos del carbn de la mina La Cinco antes y despus de los
procesos de biodesulfurizacin en reactores a un volumen de 5 litros
Muestra
Muestra
Muestra
biooxidada
biooxidada a
Propiedad
Inicial
sin control de
pH 1.6-1.7
pH
Humedad residual (%)
2.0
2.3
2.4
Cenizas (%)
18.0
15.1
15.8
Materia Voltil (%)
38.5
38.3
39.9
Carbono Fijo (%)
41.5
44.3
41.9
Azufre Total (%)
2.56
1.76
2.13
Poder calorfico-base bruta (cal/g)
6451
6617
6437
Para el carbn de El Vampiro II se observan las mismas caractersticas descritas
anteriormente para el sustrato del Valle del Cauca
Tabla 21. Anlisis prximos del carbn de la mina El Vampiro II antes y despus de los
procesos de biodesulfurizacin en reactores a un volumen de 5 litros
Muestra
Muestra
biooxidada a
biooxidada
Muestra
Propiedad
pH 1.6-1.7
Inicial
sin control de
pH
Humedad residual (%)
2.6
3.3
2.9
Cenizas (%)
16.5
12.0
12.4
Materia Voltil (%)
38.1
38.3
39.7
Carbono Fijo (%)
42.8
46.4
45.0
Azufre Total (%)
5.7
2.68
3.04
Poder calorfico-base bruta (cal/g)
6341
6572
6458
110
8 DISCUSIN
Para todos los ensayos realizados, con excepcin de los controles abiticos, las tcnicas
de caracterizacin mineralgica y qumica arrojaron evidencias de oxidacin de la pirita
presente en los carbones de las zonas del ro Guachinte y ro Asnaz.
No obstante, la eficiencia del proceso claramente depende de factores como el tipo de
carbn (contenido de azufre, minerales presentes en la fase inorgnica, forma de
ocurrencia y granulometra de la pirita), el tamao de partcula, el medio de cultivo, los
microorganismos empleados, etc.
A continuacin se presenta la discusin de los resultados obtenidos en cada una de las
etapas de evaluacin del proceso.
8.1
Adaptacin de microorganismos
Teniendo en cuenta que una adecuada adaptacin de las cepas al sustrato es vital para la
eficiencia del proceso, es importante resaltar la ventaja de trabajar con microorganismos
nativos. Las bacterias tienen un cierto grado de afinidad intrnseco al material, lo cual
facilita el proceso de biodesulfurizacin si previamente se hace un adecuado trabajo de
familiarizacin con las condiciones de operacin deseadas (frecuencia de agitacin,
temperatura, tamao de partcula, porcentaje de slidos en el medio, etc.).
De acuerdo al trabajo de Aller et al. (2001), el proceso de biodesulfurizacin es mucho
ms efectivo cuando se emplean consorcios de microorganismos provenientes del carbn
mismo, en comparacin con aquellos obtenidos de drenajes cidos de mina, aunque
stos provengan de una mina de carbn. No obstante, en su trabajo se encontr que,
adems de bacterias como A. ferroox. y L. ferroox., en las muestras nativas haban
microorganismos posiblemente asociados al gnero Bacillus, pero no caracterizados por
completo.
Si estos microorganismos influyen positivamente en el proceso de biodesulfurizacin, no
es posible concluir que la cepa procedente de la mina de carbn sea menos efectiva, ya
que realmente la diferencia estara asociada a una simbiosis de los microorganismos
implicados. Dicha comparacin slo podra ser posible si se garantiza que en todos los
ensayos inoculados existen los mismos microorganismos, preferiblemente en la misma
proporcin al comienzo del proceso.
La caracterstica ms importante durante el proceso de adaptacin de las seis cepas
aisladas (tres de ellas compatibles con A. ferroox. y las otras tres con A. thioox.) al carbn
de la mina El Vampiro II, fue el incremento inicial del pH en el medio.
Este incremento puede estar relacionado con la presencia de carbonatos en el sustrato
(calcita, dolomita), los cuales fueron detectados mediante DRX. Es bien conocido que
estos compuestos consumen cido (iones H+) en el sistema y aumentan el pH de la
solucin, inhibiendo o retardando la actividad bacteriana (Silverman, 1961).
Otra posible explicacin para este incremento de pH est relacionada con el grado de
adaptacin al sustrato alcanzado por los microorganismos. La fase de retardo, tambin
conocida como fase lag, se presenta comnmente en los microorganismos que no estn
adaptados al sustrato impuesto y consiste bsicamente en un incremento inicial del pH
111
8.2
Seguimiento del proceso a escala erlenmeyer (Eh, pH, O2, [SO4], Felixiviado,
formas de azufre)
Las grficas de pH vs. Tiempo, para los diferentes ensayos inoculados, claramente
demuestran la influencia de los carbonatos presentes en ambos carbones. Sin embargo,
los microorganismos rpidamente neutralizan este efecto, acidificando el medio hasta
valores de 1.8 y 1.3, para los ensayos llevados a cabo con A. ferroox. y el consorcio A.
ferroox.+ A. thioox., respectivamente.
Por otra parte, el potencial de xido-reduccin asciende a valores cercanos a 650 mV e
incluso hasta 680 mV en todos los ensayos, con excepcin de los controles abiticos, en
donde se mantiene estable por debajo de los 300 mV. Esto significa que, en presencia de
las bacterias, hay una constante transferencia de electrones en el sistema, principalmente
en lo referente a la continua transformacin de Fe+2 a Fe+3, la principal funcin de los
microorganismos compatibles con A. ferroox. (Kodali et al., 2004; Rossi, 1990)
En el caso de los ensayos llevados a cabo con el consorcio de microorganismos, si bien al
comienzo del proceso se tenan proporciones igual de cada uno (50% A. ferroox. y 50% A.
thioox.), no se determin la evolucin de la densidad poblacional de cada uno con el
112
tiempo, la cual puede variar de acuerdo a la adaptabilidad de cada uno de ellos a las
condiciones impuestas.
No obstante, a partir del comportamiento del Eh y el pH, es posible inferir que ambas
cepas estaban presentes en el sistema sin verse inhibidas. El comportamiento de A.
ferroox. en este caso, es evidente en los niveles de potencial redox, los cuales se
mantienen por encima de 650 mV, an cuando el pH del medio decrece a valores
cercanos a 1.2, bastante inferiores al ptimo (1.8 - 2.0) reportado en la literatura para este
tipo de microorganismos. (Torma, 1977; Smith et al., 1988; Drobner et al., 1990;
Karamanev y Nikolov, 1998).
Por otra parte, la mayor acidificacin del medio en el caso de los consorcios, en
comparacin con los ensayos llevados a cabo con A. ferroox. nicamente (1.2 y 1.8
respectivamente), da indicios de que las cepas compatibles con A. thioox. estn actuando
satisfactoriamente en el proceso y tampoco se ven claramente inhibidas por los altos
valores de Eh del sistema.
En cuanto al hierro lixiviado y los sulfatos en solucin, es posible decir que estos
parmetros son importantes para evaluar de forma cuantitativa la extraccin de estos
compuestos del carbn, pero de ninguna forma se pueden tomar como nica base para
determinar cul de los procesos llevados a cabo es el ms eficiente, en cuanto al nivel de
oxidacin de la pirita. Para ello, es necesario complementar el anlisis con la
cuantificacin de las formas de azufre en el sustrato.
En el caso del tratamiento con A. ferroox., el porcentaje de hierro lixiviado para los
tamaos de partcula grueso y fino fue de 30% y 50% para el carbn de la mina La
Cinco, y de 40% y 60% para el carbn de El Vampiro II. No obstante, el nivel de
oxidacin de la pirita fue sustancialmente mayor, alcanzando valores de 67% y 86% para
el carbn de la mina La Cinco y de 77% y 96% para el carbn de El Vampiro II.
Para las muestras tratadas con el consorcio nativo (A. ferroox. + A. thioox.), los niveles de
lixiviacin de hierro para las fracciones gruesa y fina, fueron de 60% y 80% para La
Cinco y de 70% y 85% para el Vampiro II, respectivamente.
Estos valores son mucho ms parecidos al porcentaje de oxidacin de la pirita, siendo de
64% y 85% para La Cinco y 80% y 95% para El Vampiro II.
De esta forma, es claro que la eficiencia de los microorganismos en cuanto a la oxidacin
del sulfuro es mucho mayor de lo que muestran las grficas de hierro y sulfatos, las
cuales se ven afectadas por el fenmeno de precipitacin de sulfatos (principalmente
jarosita).
De acuerdo con el diagrama de Pourbaix mostrado en la figura 102, se puede observar
que la jarosita se puede formar a valores de pH inferiores a 1.8 y potenciales de xidoreduccin superiores a 710 mV, siendo este potencial el referido a un electrodo estndar
de hidrgeno.
La conversin del valor del potencial de xido-reduccin (Eh) obtenido con un electrodo
Ag/AgCl (como el empleado en este caso) al valor de Eh correspondiente al electrodo
estndar de hidrgeno (SHE por sus siglas en ingls), est dado por la expresin: Eh
(SHE) = E + ER (Nordstrom, 1978), donde E es el potencial obtenido con el electrodo
Ag/AgCl y ER es el potencial estndar del electrodo de referencia, es decir, la diferencia
113
Especies
Disueltas
Figura 102. Diagrama pe-pH para el sistema Fe-S-K-O-H a 25C (pe=Eh(mv)/59.2 log de
actividades totales de Fe+2=-3.47; Fe+3=-3.36 -2.27; SO4-2=-2.32; K+=-3.78). Las lneas
punteadas indican campos de meta-estabilidad. Las reas rayadas muestran una
ampliacin de los campos de estabilidad de la K-jarosita y la ferrihidrita si son
seleccionados coeficientes de solubilidad menores. Tomado de Bigham et al. (19962).
Teniendo en cuenta dichos valores de ep, as como el pH de los ensayos empleando A.
ferroox. (1.8-1.9) y el consorcio A. ferroox. + A. thioox. (1.2-1.3), al observar el diagrama
del pourbaix de la figura 102, se tiene que la jarosita es una fase ms estable para las
condiciones de Eh y pH alcanzadas usando A. ferroox. que aquellas correspondientes al
consorcio nativo, lo cual permitira explicar por qu este mineral es menos abundante en
las muestras de carbn que fueron biooxidadas con el consorcio.
114
115
Finalmente, al comparar los resultados obtenidos para los ensayos inoculados con sus
respectivos controles abiticos, es evidente que la oxidacin de la pirita est directamente
relacionada con la presencia de los microorganismos, ya que en los controles los valores
de pH y Eh del medio permanecen por encima de 5.0 y debajo de 300 mV
respectivamente.
8.3
116
(9)
(10)
117
118
119
limitante para que el proceso contine satisfactoriamente durante la mayor parte del
tiempo.
Por otra parte, para los ensayos con el mayor tamao de partcula (-100 Tyler), los DRX
indican que, an en ausencia de jarosita, la pirita no se lixivia completamente. Esto
claramente demuestra que es el tamao de partcula, ms que la precipitacin de sulfatos,
el principal factor que limita el proceso de biodesulfurizacin.
Todos estos anlisis concuerdan con lo propuesto por Kargi (1986), quien a partir de
anlisis tericos de la oxidacin de pirita pura, con diferente granulometra, concluy que
el lmite de difusin, causado por la depositacin de productos de oxidacin de la pirita en
su superficie, puede ser reducido disminuyendo el tamao de partcula del carbn. Es
decir, en una partcula de carbn lo suficientemente pequea, la tasa de
biodesulfurizacin no se ve afectada por la precipitacin de sales frricas y est
bsicamente controlada por la tasa de reaccin intrnseca.
Aunque el autor no desarrolla una explicacin detallada para este aspecto, posiblemente
lo que sucede es que cuando el tamao de partcula se reduce, es necesario que se
produzca mucho ms jarosita en el sistema para recubrir todas las partculas e inhibir el
proceso.
A partir de las imgenes de SEM, para las diferentes etapas del proceso, es posible
avalar dicha teora, pues se pudo observar que a lo largo del tiempo existan partculas
completamente rodeadas por los sulfatos precipitados, al lado de otras en donde este
fenmeno an no haba ocurrido.
Acerca del fenmeno de precipitacin de jarosita en los sistemas analizados, es
importante discutir algunos puntos, principalmente en lo referente a la identificacin de los
factores que conducen a la generacin de esta fase mineral.
Es claro que el pH del medio influy de manera directa en la generacin de esta fase
mineral, pues en las muestras tratadas con A. ferroox., donde el pH se estabiliz
alrededor de 1.7-1.9, se precipit ms jarosita que en aquellas biooxidadas con el
consorcio de microorganismos nativos, donde el pH final alcanz valores de 1.2-1.3.
De acuerdo con la literatura, valores de pH superiores a 1.8 se consideran crticos para la
formacin jarosita (Klein, 1998). De otro lado, se ha encontrado que el rango ptimo de
operacin para la oxidacin de sulfato ferroso por parte de A. ferroox. con la mnima
precipitacin del mineral, es de 1.6-1.7 (Daoud y Karamanev, 2006).
Esto explica por qu se favorece la precipitacin de jarosita en los procesos que
emplearon A. ferroox., pero no aquellos en donde se utiliz el consorcio de
microorganismos nativos.
Para este ltimo caso, una mayor reduccin del pH posiblemente evitara la precipitacin
del mineral, pero traera consigo la inhibicin de los microorganismos compatibles con A.
ferroox., los cuales de por s ya estn operando a valores de pH inferiores a los
reportados como ptimos para sus funciones (tabla 3).
Adems del pH, la presencia de iones como el amonio (NH4+) y el potasio (K+), que hacen
parte de las sales basales del medio de cultivo, puede jugar un papel importante en la
generacin de jarosita (Gmez y Cantero, 2005).
120
8.4
Ensayos a 5 litros
121
122
Uno de los principales cambios observados fue el incremento del poder calorfico de los
carbones biooxidados, as como un menor contenido de cenizas, ambas caractersticas
directamente relacionadas con la reduccin del componente inorgnico.
Por otra parte, el aumento del contenido de materia voltil en el carbn para este tipo de
procesos se ha asociado con la precipitacin de minerales como la jarosita (Acharya et
al., 2001). Esto concuerda con lo observado en los anlisis prximos, pues las muestras
tratadas con un control de pH son las ms ricas en esta fase mineral y a su vez poseen
mayor contenido de materia voltil.
8.5
bacteria
Fe2(SO4)3 + H2O
(11)
(12)
(13)
(14)
(15)
123
(16)
(17)
(19)
(20)
(21)
4S3O32- S8 + 4SO32-
(22)
(23)
(24)
(25)
(26)
(27)
124
La reaccin general, puede ser expresada de la siguiente forma (Nemati et al., 1998):
3 Fe3+ + A+ + 2HSO4- + 6H2O AFe3(SO4)2(OH)6 + 8H+
(28)
Fe 3+
Fe 2+
TIOSULFATO
S2O 3 2
Fe 2+
SULFATO+2H+
TRITIONATO
S3 O 6 2
Ciclode
oxidacin
delapirita
1.5O 2
CIDODISULFANO
MONOSULFNICO
HSSSO3
TIOSULFATO
+0.5O 2 +2H+
PENTATIONATO+
H2 O
Fe 3+
AZUFRE(S8 )
+
4SO 3 2
TETRATIONATO
S4 O 6 2
SULFATO+
2H+
PENTATIONATO(S5 O 6 2)
+
TIOSULFATO(S2O 3 2)
Figura 103. Ciclo oxidativo para la degradacin de la pirita mediante lixiviacin bacteriana
y/o qumica. Las lneas punteadas indican que el tiosulfato puede entrar nuevamente en el
ciclo. Modificado de Schippers et al. (1996)
La disposicin de los diferentes cationes que pueden ingresar en el sitio A de la
estructura, es lo que condiciona la presencia de K-jarosita e hidroniojarosita en las
muestras biodesulfurizadas. Por otra parte, aunque claramente haba presencia de
amonio en el sistema, este no dio lugar a la formacin de amoniojarosita sino que se
incorpor a la lonecreekita, bajo la siguiente reaccin propuesta:
Fe3+ + A+ + 2HSO4- + 12H2O NH4Fe(SO4)2.12H2O + 2H+
(29)
125
9 CONCLUSIONES
El proceso de biodesulfurizacin llevado a cabo para dos carbones con alto contenido
de azufre, constituye un trabajo pionero en el pas, pues si bien se han adelantado
estudios similares para menas de oro y sulfuros prcticamente puros (Muoz, 2002,
Ossa, 2004; Zapata, 2006; Meja y Ospina, 2007; Arroyave, 2008), el empleo de
microorganismos acidfilos no haba sido aplicado anteriormente en sustratos de
carbn.
126
127
10 RECOMENDACIONES
Para todos los ensayos de biodesulfurizacin en los que se emple el consorcio nativo
(A. ferroox. + A. thioox.), se parti de una mezcla compuesta por volmenes de
inculo iguales para cada cepa, pero no se evalu la evolucin de cada una de las
especies en el tiempo.
El seguimiento poblacional de los microorganismos durante el proceso, permitira
definir si las proporciones iniciales se mantienen (50%-50%) o si alguna de ellas se ve
ms favorecida para reproducirse, de acuerdo a las condiciones de operacin
impuestas.
128
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