B I O T E C N O L O G I A V E G E TA L

Cultivos duales
planta-microorganismo

Biotecnologa Aplicada a la interaccin Planta-Microorganismo

Cultivos duales o monoxnicos:
cultivo de dos organismos conjuntamente en un cultivo in vitro.
Vegetales creciendo junto a:

-Microorganismos Fitopatgenos:
Bacterias
Mollicutes
Hongos
Nematodos
- Bacterias fijadoras de Nitrgeno
-Bacterias Promotoras del
Crecimiento Vegetal ( PGPB)
-Hongos micorrcicos
-Virus

VENTAJAS DE LOS CULTIVOS MONOXNICOS EN COMPARACIN

CON EL DESARROLLO DE LA INTERACIN PLANTA -MICROORGANISMO

EN EL AMBIENTE

BIOTECNOLOGA CON CULTIVOS MONOXNICOS

Ejemplo de trabajos relacionados con los microroganismos:

-

Aislamiento en cultivo puro

Cultivo, mantenimiento y almacenamiento de aislamientos
Comprobacin de compatibilidad planta-microorganismo
Estudios bsicos de interaccion planta-microorganismo
Receptores
Organognesis
Fitohormonas
etc

EJEMPLO DE INTERACCIN PLANTA - PATGENO

Ultrastructure of calli from resistant and susceptible chestnut inoculated with Phytophthora cambivora.
A Casares, A Gonzalez, R S Tames. Journal of Phytopathology (1994). 142(1): 19-26

Esporangio del Oomycete Phytophthora cambivora

en medio de cultivo V8

Apertura del esporangio y liberacin de esporas

Espora germinada

Phytophthora cambivora es uno de los

hongos que produce la enfermedad de la
tinta en el castao ( Castanea sativa).

EJEMPLO DE INTERACCIN PLANTA - PATGENO

Callo de C. sativa
colonizado por
P. cambivora

Espora(e) de P. cambivora germinada sobre el callo de C.

sativa

Avance intra e intercelular de las hifas (h) de P. cambivora.

h
h

SIMBIOSIS MICORRCICA

Caracteristicas de los hongos micorrcicos

Colaboran en la absorcin de agua y nutrientes para la planta.

Protegen a las races contra patgenos y algunas condiciones

ambientales adversas.

Producen reguladores del crecimiento y otros metabolitos

secundarios.

Colaboran activamente en el mantenimiento de la estructura del

suelo.

Ayudan al establecimiento, la estructura y la composicin de

las comunidades vegetales.

SIMBIOSIS MICORRCICA
Partculas del suelo

Porosidad ocupada por aire y agua.

Raiz micorrizada
con un
hongo ectomicorrcico

Raz normal

Las hifas de los hongos micorrcicos pueden

tomar el agua y los nutrientes disueltos en zonas
de la porosidad del suelo que no pueden alcanzar
las races normales.

MICORRIZAS ARBUSCULARES

vesculas

EJEMPLOS DE SETAS DE HONGOS ECTOMICORRCICOS

Amanita muscaria
Pisolithus tinctorius

Scleroderma verrucosum
Hebeloma crustuliniforme

AISLAMIENTO Y CULTIVO DE HONGOS ECTOMICORRCICOS

Aislamiento

Repicado

CULTIVO DE HONGOS ECTOMICORRCICOS

Cuantificacin del crecimiento

por medio de anlisis de imagen

MICORRIZACION CONTROLADA IN VITRO

Abedul

Paxillus filamentosus

MICORRIZACION CONTROLADA IN VITRO

Raz

Hongo
micorrcico

Micorrizas

MICORRIZACION CONTROLADA IN VITRO

inoculacin en placa de Petri

7 das

15 das
Abedul micorrizado con
Scleroderma verrucosum

PRODUCCIN DE INCULO

- MICELIO:
MEDIO DE CULTIVO
SUSTRATO: TURBA/VERMICULITA
GEL DE ALGINATO

- ESPORAS

MICORRIZACION CONTROLADA EN VIVERO

Tallo
de
Pinus sp
Esporocarpos
de
Tuber borchii

(a)

Deteccin de hongos
ectomicorrcicos por
medio de PCR-RFLP

(b)

1000

1000

500

500

100

100

(c)

(d)

1000

1000

500
500

100

100

Figura 7.4.1.A: RFLPs de los hongos: (a) Hebeloma mesophaeum, (b)

Hebeloma

crustuliniforme,

(c)

Scleroderma

verrucosum,

(d)

Scleroderma polyrhizum; M= 100 bp ladder marker; Enzimas de

restriccin: 1= Eco R1, 2=Hinf I, 3= Hae III, 4= Uncut.