UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA.

CENTRO UNIVERSITARIO DEL SUR CUNSUR.

BIOQUIMICA
LICDA. NUVY BOSCH

REPORTE DE PRACTICA DE LABORATORIO #2

ESPECTROFOTOMETRIA

WALTER ALFONSO FELIPE VASQUEZ

201345022
LERSI CAROLINA AGUILAR DEL CID
KARLA ARACELY SAMAYOA MAYORGA
201341145
WALTER GABRIEL FERNNDEZ LEMUS
201344154
JANSSI ABIGAIL ORTIZ MRIDA
201344149
JOSELYN AYME HERNNDEZ GOLON
201344459
DUNIA EUNICE ABIGAIL MONTEPEQUE CABALLEROS
201344981

JESSICA ISSID AQUINO LPEZ

201219782
ESCUINTLA 3 DE MARZO DE 2015

INTRODUCCION.
En esta prctica se realiz una espectrofotometra la cual se utiliza para medir las
proporciones de luz de diferentes longitudes de onda que son absorbidas y
transmitidas por una solucin usualmente coloreada. (Thermo Spectronic
Genesys, 2001)
Durante el proceso se observ cualitativamente las longitudes de onda que van de
400 a 700 Nm, determinando donde ocurre la mxima absorcin.
Es importante observar que la absorbancia es directamente proporcional a la
concentracin de la solucin absorbente.

Grafica del espectro de absorcin del azul de

bromofenol

Serie 1

TABLA DE ESTANDAR

ABSORBANCIA

TRAMITANCIA

Preguntas
Si uso el pigmento azul de bromofenol

Ser necesario usar energa de acuerdo a su capacidad de absorcin

o dar lo mismo usar cualquier rango de longitud de onda?
Es necesario usar energa de acuerdo a su capacidad de absorcin. Porque
puede que con los otros rangos no est bien su absorcin.

Si usamos luz azul o amarilla o verde, tendr la misma absorcin?

Si tendr la misma absorcin. Porque el azul y el amarillo mezclados dan
verde y su complemento es rojo, as que los tres colores son iguales.

En qu longitud de onda espera encontrar su mnima y mxima

absorbancia? En 0.140.

Cuando el fotmetro est listo

En qu calibracin se podr lograr mayor Precisin al momento de
medir muestras con diferente concentracin de la Sustancia azul de
bromo fenol?
620nm de absorbancia.
En qu longitud de onda espera encontrar su mnima y su mxima
absorbancia?
En el de 700, donde se absorbi la mayor cantidad de energa. Cundo el
fotmetro est listo

En qu calibracin se podr lograr mayor precisin al momento de

medir nuestras con diferente concentracin de la sustancia azul de
bromofenol? En la longitud de onda de mxima absorbancia

Con los resultados anteriores explique la correlacin entre las

diferencias de la concentracin y los conceptos tericos de la LEY DE
BEER.
Como la muestra que tenamos tenia 2ml de concentracin su absorbancia
fue de 0.28 la ms alta ya que la ley de beer nos dice que la absorbancia es
directamente proporcional a la concentracin ya que si la concentracin
aumenta, aumentara la absorbancia.

RECOMENDACIONES.

Se pueden practicar con muestras slidas principalmente de dos maneras.

La primera es moler la muestra con un agente aglomerante para formar una
suspensin en un mortero de mrmol.

El segundo mtodo es triturar una cantidad de la mezcla con una sal

especialmente purificada (usualmente bromuro de potasio).

No poner objetos alrededor del aparato que puedan bloquear las entradas
de ventilacin.

BLIBLIOGRAFIA
Bioquimica 3ra Ed Mathews, C . K,. et. Al, Pearson Educacin, S. A Madrid,
2002

Bioqumica , de Harper. 16 y 17. Edicin Editorial El Manual Moderno.

2007

Robert K. Murray, Meter A. Mayes, Daryl K. Granner Victor Rodwell.

Discusin de resultados

La mejor longitud de onda para evaluar el Azul de Bromofenol es a 700nm, ya que

es all donde se obtuvo la mejor absorbancia.
La concentracin de la muestra segn la formula M= S * Ab-M/ Ab-S da como
resultado 0.1991
Calculando la absorbancia del tubo estndar y de la muestra con la expresin:
Log ( Io(100) / I (%T) ), se procede con la formula para determinar la
concentracin de la muestra.
Procedimiento

Concentracin de la muestra = 0.2 * log (100/.98) / log (100/.96)

Concentracin de la muestra = 0.1991

Objetivos:

 Adquirir conocimientos y desarrollar la habilidad para utilizar el

espectrofotmetro y los instrumentos de laboratorio.

Calcular correctamente la concentracin de sustancias en muestras

biolgicas.

Conocer la Tramitancia y Absorbancia en una solucin usualmente

coloreada.

Conclusiones:

El espectrofotmetro, es un aparato electrnico que utilizamos en el

laboratorio para medir las proporciones de luz de diferentes longitudes

de onda, absorbidas y transmitidas en la solucin de Azul de

bromofenol.

La escala de tramitancia obtenida en cada medicin, nos indico la

cantidad de energa que logro atravesar el medio absorbente y llegar al
fondo de la celda.

La escala de absorbancia obtenida en el laboratorio, no expresa la

cantidad de energa que quedo absorbida en las molculas del medio
sin lograr atravesarlo.