INFORME DE LIPIDOS

AO DE LA PROMOCIN DE LA INDUSTRIA

RESPONSABLE Y DEL CAMBIO

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO
DEL PER

INFORME DE
LIPIDOS

FACULTAD

AGRONOMIA

CURSO

BIOQUIMICA

DOCENTE
GMEZ VILLANES, Narciso
SEMESTRE

INTEGRANTE
:
SALDAA, Fiorela

Ing.

TERCERO B
DIONISIO

FLORES OBREGON,
Pamela
LAUREANO INGA, Cesar
MEDRANO GARCIA, Darlis
TAYPE MALPARTIDA,
Sherly

Huancayo Per
BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

2015

INTRODUCCION GENERAL

Del termino griego LIPOS (grasa) lpido est referido a cualquier sustancia
apolar natural insoluble en agua. En este grupo se encuentran triglicridos
(grasas), ceras, esteroles, fosfolpidos y glicolipidos.
Desempean funciones biolgicas importantes como;
Almacenamiento de carbono y energa.
Aislantes elctricos y fsicos.
Precursores de sustancias como sales biliares, hormonas esteroides
y vitaminas.
En seres humanos est en complejo con protenas, carbohidratos; rara vez en
estado libre. Acumulable en forma de grasa, y debido a los cidos grasos es
que se puede llegar a determinar sus propiedades .

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

EXPERIMENTO N 1: HIDROLISIS DE LAS GRASAS POR

LA LIPASA PANCREATICA

INTRODUCCION
La lipasa es producida mayoritariamente por las clulas acinosas del pncreas
y es vertida al duodeno con el jugo pancretico, con la funcin fisiolgica de
hidrolizar las grasas en el intestino delgado para facilitar su absorcin. Por el
contrario su concentracin en la sangre es muy escasa
La lipasa pancretica a diferencia de otras asterasas es activa cuando el
sustrato se encontraba en estado de emulsin, y siendo su actividad nula en
sustratos en estado disuelto, a este fenmeno se denomina ACTIVACION
INTERFACIAL

1.1. COMPETENCIAS
Medir la actividad de la lipasa pancretica por titulacin acido base.
Apreciar el efecto de las sales biliares.
1.2. FUNDAMENTO TEORICO DE LA COMPETENCIA
La actividad enzimtica se evala por el incremento de incubacin
de cidos grasos liberados en el transcurso de la hidrolisis de grasas
dados por la lipasa pancretica.
La concentracin de cidos grasos libres se determina mediante
valoraciones con

NaOH 00,5.

Dando resultante: mayor acidez producida, genera mayor gasto

del titulante y aumento de actividad enzimtica.

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

Todo esto esta potenciado debido a que ala emulsionar las sales
biliares, transforma la grasa en pequeas micelas

1.3. MATERIALES Y REACTIVOS

Aceite neutralizado: a 100 ml de aceite vegetal (maizol) se adiciona 3
gotas de fenolftalena, luego se aade

NaOH 00,5.

gota a gota hasta

obtener una coloracin rosa plido.

Buffer fosfato 0,1M pH 8,0: En 400ml de agua destilada agregar 0,95g
de

KH 2 PO 4 +7,5 g

K 2 HPO 4 . Disolver, medir el pH, completar el

volumen de 500ml de solucin.

Sales biliares 1% en buffer
pancreatina 1% en buffer
Agua destilada
Pipetas de 10ml
Tubos de ensayo
Bao mara
Calculadora

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

1.4. PROCEDIMIENTO

B1

B2

ml Aceite neutralizado

ml Buffer fosfato 0,1M pH 8,0

ml Sales biliares 1% en buffer

ml Agua destilada

TUBOS N

o
r

C
nocedo
es de
la

propiedades
de
la
pancreatina, y antes de agregar a los tubos de ensayo, debemos
asegurarnos que no hay acides en el medio. Para lo cual
emulsionamos bien cada tubo, hasta obtener el color rosado
plido persistente. Para esto agregar NaOH 00,5 hasta que
aparezca el color.

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

Luego se agregan 5ml de pancreatina 1% (en buffer) a cada tubo

(los cuatro tubos). Incubar por 1 hora a 37C en bao mara.

Antes de titular, agregar unas gotitas de indicador a cada tubo y al

blanco ( B 1 B2 . Titular cada tubo con NaOH 00,5 hasta que
el color rosado
nuevamente.

del

indicador

fenolftalena

se

obtenga

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

1.5. RESULTADOS
Meq Acidos Grasos=N NaOH V NaOH (ml)
Anotar el resultado en ml, restando los resultados de los tubos

B 1 B2 a

los tubos 1 y 2 respectivamente. Expresar la acides de cidos grasos

liberados en miliequivalentes de acuerdo a la siguiente formula e
interprete sus resultados.

TUBO 1

-> 3 gotas de fenolftalena (NaOH -> 6,95)

TUBO B 1

-> 3 gotas de fenolftalena (NaOH -> 1,55)

ECUACIONES:

1 B1

(6,95ml 1,55ml)

0,05 ->

0,27ml

0,05 ->

0,0525ml

2 - B2

(2,75ml 1,70ml)

MESA

B1

1
2
3
4
5

0,7ml
1,55ml
1,40ml
1,05ml
1ml

B2

4ml
0,5ml
6,95ml
1,70ml
6,70ml BIOQUIMICA
1,20ml
6,70ml
0,75ml
4,45ml
1ml

2
2ml
2,75ml
1,40ml
AGRONOMIA
1,25ml
1,55ml

INFORME DE LIPIDOS

Meq g Ac. G

Meq g Ac. G

0,165

0,075

0,27

0,0525

0,265

0,05

0,282

0,025

-0,1725

0,0275

MESA

1 -> Con sales biliares

2 -> Sin sales biliares

1.6. CUESTIONARIO
1.- Qu lipasas conoce y donde actan?

- Lipasa pancretica:
*pncreas
* Sustrato: TG
* Producto: cidos grasos y glicerol
- Lipasa gstrica:
*estomago
* Sustrato: TG
* Producto: cidos grasos y glicerol
- Lipasa lingual:

* Glndulas linguales
* Sustrato: triglicridos
* Producto: cidos grasos y 1,2 diacilgliceridos

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

- Fosfolipasa:

*pncreas, tripsina
* Sustrato: fosfolpidos
* Producto: cidos grasos y lisofosfolipidos

- Hidrolasa, esteres del colesterol

*pncreas
* Sustrato: esteres
* Producto: colesterol
2.- Cul es la funcin de la colipasa en la emulsin de los
triacilgliceridos?
- Los triacilgliceridos al cataliza la hidrlisis de los steres de glicerol
con cidos grasos de cadena larga, precisa de otra protena denominada
colipasa. Acta sobre los enlaces ster de los carbonos 1 y 3. El 2monoacilglicrido resultante isomeriza lentamente a 3-monoacilglicrido,
lo que permite la posterior hidrlisis del tercer cido graso por la lipasa.
Para que la enzima acte, el sustrato debe estar emulsionado con sales
biliares u otros emulgentes.

3.- Qu funcin cumple las sales biliares? Indique su composicin.

- Las sales biliares de la secrecin biliar en el duodeno forman micelas
que van a servir para transportar lpidos.
-Las sales biliares son molculas anfipticas, tienen un lado polar
hidroflico y otro hidrofbico, forman vesculas con el centro hidrofbico
donde transportan los lpidos insolubles como el colesterol y en la pared
transportan fosfolpidos que tiene un polo hidroflico hacia fuera y otro
hidrofbico hacia adentro.

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

10

EXPERIMENTO N 2: DETERMINACION DEL INDICE DE

ACIDEZ

INTRODUCCION

ACIDEZ:

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

11

INDICE DE ACIDEZ:

El

ndice de acidez se
define como los
miligramos de NaOH o
KOH necesarios para
neutralizar los cidos
grasos libres presentes
1 gramo de aceite o
grasa, y constituye una
medida del grado de
hidrlisis de una grasa.

en

2.1. COMPETENCIAS
Conocer el ndice de acidez y la acidez de aceites de origen vegetal.
2.2. MATERIALES Y REACTIVOS

Solucin alcalina de

NaOH O , 1 Normal

Alcohol etlico 96
cloroformo o ter dietilico
Bureta de 10ml
Probeta de 100ml
Vaso de precipitacin de 150ml
Balanza

analtica
Agitador
magntico

2.3.
PROCEDIMIENTO

BIOQUIMICA AGRONOMIA

12

INFORME DE LIPIDOS

Mezclar en un vaso de
precipitacin
10ml
de
cloroformo y 20 de alcohol
etlico 96.

Agregar 10 gotas de
solucin
alcohlica
de
fenolftalena al 1%.
Aadir la solucin alcalina de
NaOH O , 1 N
gota a gota
agitando
energticamente
hasta que aparezca un leve tinte rosado, que persista durante 30
segundos.

En un vaso de precipitacin previamente tarado, pesar

10g de aceite agregar la mezcla de alcohol cloroformo
neutralizado mezclar bien la grasa con los disolventes
Valorar inmediatamente con la solucin alcalina
NaOH O , 1 N , agitando constantemente hasta que
aparezca una coloracin rosada de igual intensidad a la
obtenida en la neutralizacin de la muestra alcohol
cloroformo, es decir que persista durante 30 segundos.

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

13

2.4. RESULTADOS
I . A .=

N 0.004 1000
G
I.A.
-> ndice de acidez
N
->
Milmetros
de
NaOH O , 1 N empleados en el
ensayo
G

-> Peso de la muestra

RESOLVIENDO:
I . A .=

0,40 ml 0.004 1000

10

I . A .=0,16

a=

N 0.0282100
G

A
N
0,0282
G

-> Acidez % en cido oleico

-> Milmetros de NaOH O , 1 N empleados en el ensayo
-> Factor correspondiente al cido oleico
-> Peso de la muestra

RESOLVIENDO:

BIOQUIMICA AGRONOMIA

INFORME DE LIPIDOS

14

a=

0,40 0.0282 100

10

a=0,1128

CONCLUSIONES

Tanto la manteca como el aceite de cocina estn por debajo del nivel
permisible para consumo humano.
Todos los aceites y las grasas tienen cidos grasos libres y algunos
los tienen en grandes cantidades. La causa de la existencia de
cidos grasos libres es la actividad enzimtica de las lipasas.

BIBLIOGRAFA
Bioqumica - Horton, H. Robert; Moran, Laurence A; Ochs Raymond S;
Rawn, J. David; Scrimgeour K. Gray - Mxico, D.F: Prentice-Hall
Hispanoamericana, 1995
Qumica - Sienko, Michell J; Plane, Robert A - Madrid: Aguilar, 1967
COLBY, D, S, 1987 copendio de bioqumica. Manual moderno S.A.
mexico D.F. mexico

BIOQUIMICA AGRONOMIA