UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

RENCUENTO DE
HETEROTROFOS
MICROBIOLOGIA ACUATICA

2015-I
ALUMNA:HERNANDEZ CUEVA LIZ
CODIGO : 110057- H
DOCENTE: FRANCIA ARANA OLGA

F A C U LT A D D E C I E N C I A B I O L O G I C A S

RECUENTO DE MICROORGANISMOS
HETEROTROFOS
I. INTRODUCCIN:
Las bacterias heterotrficas (hetertrofas) se definen como aquellas bacterias
que usa compuestos del carbono orgnico como fuente de energa y el carbono
para su crecimiento, en contraposicin con las bacterias autotrficas que
utilizan los compuestos inorgnicos como fuente de energa y el C02, como
fuente de carbono. Esta definicin de bacteria hetertrofa es amplia e incluye
tanto a las bacterias saprofticas como a las patgenas. Por lo tanto, tanto las
bacterias que causan como las que no causan enfermedades son hetertrofas.
Un organismo hetertrofo es aquel que obtiene sus elementos alimenticios y
estructurales de otros organismos y tambin en la mayora de los casos
obtiene su energa de esta manera. Algunos de estos elementos
son; carbono y nitrgeno de la materia orgnica-glcidos, lpidos, protenas y
cidos nucleicos. Al grupo hetertrofo pertenece el reino animal, los hongos y
gran parte de las bacterias y de las arqueas.
En el organismo hetereotrofo las sustancias nutritivas son materias orgnicas
ricas en energa carbohidrato, lpido, protena, pues los seres hetertrofos
son incapaces de transformar materia inorgnica en orgnica. Estos
organismos por tanto, dependen de la materia orgnica viva o muerta
sintetizada por los organismos auttrofos, o de otros seres hetertrofos.

II.- OBJETIVOS
Conocer el procedimiento de recuento de hetertrofos mediante el
mtodo de la placa fluida.
Conocer el nmero de microorganismos heterotrficos viables que
contiene una muestra de agua.
Contribuir con el procesamiento del proyecto social.

III.- FUNDAMENTO:
Historia de la tcnica de recuento en placas En los Estados Unidos se han
usado mtodos para detectar y enumerar las bacterias en el agua desde el
inicio de la microbiologa sanitaria a principios del siglo XX. Adems de
enumerar las bacterias indicadoras (coliformes totales y fecales, Escherichia
coli), se ha usado un procedimiento del recuento de bacterias para calcular la
densidad general de la poblacin bacteriana en el agua.

El mtodo de placa difusa (MPD) Este mtodo, que es un procedimiento

alternativo al RHP, evita la tensin del calor del agar licuado temperado usado
en el mtodo de placa fluida. Las colonias de bacterias crecen en la superficie
del agar en lugar de estar contenidas en el agar, como sucede en el
procedimiento de placa fluida, lo cual favorece la reproduccin de bacterias
aerobias que no se podran desarrollar bien o no se desarrollaran del todo si
estuvieran contenidas en el agar. Por lo general, cuando se aplica un perodo
de incubacin no mayor de 3 das, se produce un mejor desarrollo de la
pigmentacin en las colonias de bacterias, independientemente del medio
usado. Las placas se pueden preparar previamente y almacenar hasta por una
semana mientras que el escape de agua por placa no exceda los 2 3 g. El
volumen mximo de muestra que se puede examinar es 1,0 ml, pero
generalmente es recomendable examinar un volumen de 0,1 ml a 0,5 ml.
Cuando se dispone de medios de crecimiento ms ricos, el crecimiento
disperso de colonias de algunos tipos de bacterias puede ser un problema, pero
esto no sucede si se usa el medio R2A (2).
El mtodo de placa fluida para el anlisis del RHP de las muestras de agua
presenta algunas desventajas que limitan la recuperacin de las bacterias.
Como usa agar licuado a una temperatura de 44 a 46 C, las bacterias en la
muestra de agua estn expuestas a la presin del calor, lo cual puede hacer
que los microorganismos no sean viables. Adems, como se emplea un medio
rico en nutrientes, es probable que las bacterias fisiolgicamente estresadas o
daadas no se desarrollen debido a alguna forma de inhibicin metablica.
Tanto la presin del calor como el medio de crecimiento rico producen una
recuperacin reducida de las bacterias. Otra desventaja es que mediante este
mtodo slo se puede analizar un mximo de 1,0 ml de muestra.

IV. MATERIALES:

Muestra: Agua de Pileta comunal del distrito de San Francisco de

Paredones.
Pipetas de 1 ml 10 ml
Placas
Frascos
Botellas
Agar Plat Count

V. PROCEDIMIENTOS:
Se realiz el mtodo de placa fluida
1. Homogenizar la muestra (agitar 25
veces la muestra de agua antes de
verter en placa)

2. Con una pipeta estril aplicar la cantidad de

muestra respectiva para cada dilucin.
Para la dilucin 10-1 se toma 0.1 ml de la
muestra original y se vierte en placa
Para la dilucin 10-2 se diluye 0.5ml de la
muestra en 50ml de agua destilada estril
luego se vierte 1ml de la dilucin en placa
Para la dilucin 10-3 se diluye 0.5ml de la
muestra en 50ml de agua destilada estril
luego se vierte 0.1ml de la dilucin en
placa.
3. Inmediatamente verter el medio de cultivo (Agar de recuento-Agar
Plate-Count).
4. Mover las placas homogneamente para que la muestra se extienda
por toda la
placa. Luego dejar que se solidifique el medio.
5. Incubar a temperatura ambiente y a 37C x 24 a 48 horas
6. Luego se midi el pH de la muestra de agua.

V. RESULTADOS:
Para el recuento se toma las
placas cuyo nmero de
colonias este en entre 30-300 y
se multiplica por el factor de
dilucin.
PLACAS INCUBADAS A TEMPERATURA
AMBIENTE

PLACAS INCUBADAS A 47 C

pH:
8

TAmbie
nte

37C

Dilucin

UFC

UFC

10-1

493

638

10-2

50

79

64,5

65 x103

10-3

16

UFC/ml

VI.- CONCLUSIONES:
-

Teniendo en cuenta los objetivos de la prctica se logr determinar la

presencia de hetertrofos en el agua.

Se logr determinar la calidad higinica del agua no es apta para el

consumo humano ya que sobrepasa el nivel mximo de concentracin
de hetertrofos que establece la norma.

Se logr determinar la alcalinidad en la que se encontraba la muestra de

agua.

VII.-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:

Madigan, M., J. Martinko y J. Parker, BROCK BIOLOGIA DE LOS

MICROOORGANISMOS-8va Edicin-Ed. Prentice May-1064pp.

Donald J. Reasoner, Ph.D. Recuento heterotrfico en placas Divisin de

Contaminantes Microbiolgicos, WSWRD, NRMRL Agencia de Proteccin
Ambiental de los Estados Unidos Cincinnati, Ohio 45268. Tomada el 12
de junio del 2015 de
http://www.bvsde.paho.org/bvsala/e/fulltext/recuento/recuento.pdf