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MICROPROPAGACIN DE NUDOS Y YEMAS OBTENIDOS EX VITRO

I.

INTRODUCCION:
El desarrollo de una metodologa de micropropagacin a partir de
meristemos apicales es importante para conocer el comportamiento
in vitro de esta variedad y apoyar la multiplicacin de plantas lite
de sexo femenino seleccionadas en campo por sus caractersticas
fenotpicas especiales; adems se puede realizar una cuidadosa
seleccin del material gentico, manejar grandes volmenes de
plntulas en espacios reducidos y mantener un stock de plantas
libres de enfermedades.
La micropropagacion de yemas y nudos se realiza mediante un
protocolo descrito a continuacin y que consta de 4 fases, las cuales
son necesarias, para una buena desinfeccin y desarrollo de la
prctica.
FASE DE DESINFECCION: Se proceden a lavar los nudos y/o yemas
con ayuda de desinfectantes alcohol 70% e hipoclorito de sodio 0.4%
y enjuagar con abundante agua
FASE DE ESTABLECIMIENTOS DE YEMAS Y/O NUDOS: En esta
fase se observa la adaptacin del explanto al nuevo medio, puede o
no establecerse, asi como puede sufrir contaminacion a pesar de
haber sido desinfectado previamente.
FASE DE MULTIPLICACION: El explanto sembrado comienza a
brotar meristemas apicales de los nudos gracias a los nutrientes que
absorbe del medio MS.
FASE DE ENRAIZAMIENTO: Durante esta fase el explanto empieza
a enraizar en el medio de cultivo y elonga sus races para poder
tener mayor alcance de los nutrientes presentes y asi abastecerse
con lo suficiente para lograr desarrollarse.

II.

MATERIALES Y METODOS:

III.

RESULTADOS:
Los resultados obtenidos despus de 15 dias de cultivo se muestran
en la tabla 01. A pesar de la fase de desinfeccin previa al sembrado
del explanto, se pudo observar a los pocos das de sembrado el
establecimiento de colonias de bacterias y hongos (Ver figura 1), los
cuales impidieron desarrollarse al explanto de camote, solo 3

lograron establecerse libres de contaminantes y ya se observa el


crecimiento de brotes en los nudos (Ver figura 2).

NUDOS DE CAMOTE
BACTERIAS

26.67%

HONGOS

53.33%

SANOS

20.00%

TOTAL
15
100%
TABLA 1: Se muestran los
resultados evaluados en funcin
de 15 brotes de camote.

FIGURA 1: Se muestran los ejemplares de nudos de camote


contaminados por hongos y bacterias, el 80% del total sufri
contaminacin y por lo tanto no crecieron como se esperaba.

FIGURA 2: Se muestran los ejemplares de nudos de camote que


se establecieron en el medio y no fueron contaminados, El frasco
de la derecha se observa un poco turbio debido a que el nudo
empez a enraizar en el medio.

IV.

CONCLUSIONES
Se concluy que a pesar de las condiciones aspticas que
adoptemos en el desarrollo de la prctica, muchas veces la
contaminacin viene dada en el tallo del explanto, en este caso
en el nudo, por lo que a pesar de desinfectar previamente los
ejemplares resultaron contaminados.
A pesar de las muestra contaminadas aproximadamente el 20
del total logro desarrollarse, cabe destacar que no todos los
explantos fueron extrados de una sola planta madre.
La fase de enraizamiento parece estar empezando en 1 de los
3 brotes que lograron establecerse y se puede apreciar
tambin el crecimiento de meristemos en los nudos.

V.

DISCUSIONES

Una forma de obtener plantas libres de patgenos es a travs


del cultivo in vitro de meristemos que se fundamenta en el
hecho de que la distribucin de los microorganismos (virus,
bacterias y micoplasmas) en los tejidos de la planta no es
uniforme

su

concentracin

tiende

disminuir

progresivamente hacia el pice del tallo (Jimnez 1998).

Jimnez (1998) indica que los pices y meristemos que son


empleados como material inicial para el cultivo in vitro, son
reas de sntesis de auxinas por lo que la concentracin
endgena es alta y que normalmente cuando se emplean
pices no se adicionan auxinas al medio de cultivo aunque
estos pueden estimular el crecimiento, pero cuando se
emplean meristemos es frecuente que no exista suficiente
auxina endgena siendo necesaria la adicin exgena.

VI.

REF. BIBLIOGRAFICA
Jimnez E. 1998. Cultivo de pices y meristemos. En J. Prez
(Ed.), Propagacin y mejora gentica de plantas por
biotecnologa (pp. 45-56).
Jimnez C. 1999. Induccin de embriognesis somtica en
papayo (Carica papaya Linnaeus) cultivar PT-101-B. Tesis
Bilogo.Universidad Nacional Agraria La Molina. Lima,Per. 82
pp.