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Objetivo,
Ensear una tcnica de extraccin de ADN convencional, con el objeto de observar todo el
proceso y obtener una concentracin de ADN visible.
La extraccin se compone de tres sencillo pasos:
Alcohol
Detergente
Enzima proteoltica (ablandador de carne)
Mtodo Fenol-Cloroformo.
convencional. Las muestras son incididas y transferidas a un tubo de 1.5ml que contena 500 ul
de buffer de extraccin CTAB 2X (Bromuro de cetil-trimetil-amonio). Los tejidos son macerados
dentro del tubo con un pistilo plstico y se le adiciono 12 ul de proteinasa K (Promega)
10mg/ml y se incubaron en agitacin a 55C durante toda la noche.
Separacin de ADN
En el proceso de separacin del ADN, se realizaron en total cuatro lavados, dos con PCI
(Phenol-cloroformo-alcohol Isoamilico, 25:24:1) y dos con CI (cloroformo alcohol isoamilico,
24:1).
a.