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Recopilacin:
Dr. Wilson Parra
Dr. Ivn Tapia
CONTENIDO
1
DENSIMETRIA.............................................................................................................6
REFRACTOMETRIA I.............................................................................................12
REFRACTOMETRIA II..............................................................................................16
POLARIMETRIA........................................................................................................19
INTRODUCCIN A LA ESPECTROFOTOMETRA............................................25
FOTOCOLORIMETRA.............................................................................................33
ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE......................................................................37
10
11
TITULACIONES FOTOMETRICAS.....................................................................51
12
ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA....................................................55
13
FLUOROMETRIA...................................................................................................58
14
TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA................................................................61
15
TURBIDEZ EN AGUA............................................................................................64
REGLAMENTO DE SEGURIDAD
Normas de laboratorio
Para el desarrollo y aprovechamiento del trabajo en el laboratorio de prcticas es importante tanto
la disciplina general como particular. Cada prctica tiene su instructivo completo en donde se
especifican objetivos, equipos, material de vidrio y algunos reactivos particulares. Este material no
debe mezclarse con el correspondiente a otra prctica. Por otra parte, cada alumno tendr un
material de uso individual, como gafas protectoras, pera de succin y material de grupo de trabajo
como lminas de aluminio, plstico de embalaje, papel filtro y otros que sern solicitados al inicio
del ciclo semestral.
Existe un material comn: bidones con agua destilada, reactivos qumicos en la estantera
correspondiente, pipetas, embudos, probetas, vidrios de reloj, varillas para agitar, esptulas,
balanzas, agitadores, algunos de los cuales sern entregados a un representante del grupo de
trabajo al inicio de la prctica. Se evitar dispersar este material por el laboratorio y, en lo referente
al material de vidrio, es preciso limpiarlo antes y despus de su utilizacin. Es de inters general
mantener el orden y la limpieza en los espacios fsicos individuales y comunes. As mismo habr
recipientes para recoger los distintos tipos de residuos generados. Al finalizar la prctica, debe
dejarse el material en las mismas condiciones como se lo recibi.
Es obligatorio cumplir con el horario de prcticas. Las sesiones de prcticas durarn tres horas y si
el estudiante debe salir por alguna razn deber solicitar permiso de ausencia al instructor o su
ayudante.
Seguridad en el laboratorio
El trabajo de laboratorio presenta caractersticas que lo diferencian de otras reas. En primer
lugar, la variedad de riesgos. Es frecuente encontrar en un laboratorio riesgos elctricos, de
incendio, biolgicos, de intoxicacin, etc. Dentro de este ltimo, la situacin es especialmente
compleja por la gran variedad de productos qumicos con los que se trabaja habitualmente.
Adems, y sobre todo en los cursos iniciales, la destreza de los alumnos en las tareas es escasa,
lo que se traduce en conductas y comportamientos de riesgo.
Conducta en el laboratorio
Existen tres reglas fundamentales para trabajar en el laboratorio: limpieza, seguridad y disciplina.
Hay que trabajar siempre con mandil o ropa protectora apropiada y llevarla abotonada.
Es preciso mantener el rea de trabajo ordenada y limpia.
Los desperdicios slidos y lquidos hay que depositarlos en contenedores apropiados.
Hay que leer detenidamente la etiqueta de los recipientes antes de usar su contenido.
No se deben cambiar las etiquetas de los reactivos ni los recipientes con productos distintos a
los que indica dicha etiqueta.
El almacenamiento de reactivos preparados en el laboratorio se llevar a cabo en recipientes
adecuados a su reactividad y sern debidamente etiquetados.
Hay que evitar usar y almacenar excesivas cantidades de reactivos qumicos.
3
Es muy importante no contaminar los reactivos de los botes con otros productos. No se debe
pipetear directamente de los mismos y en caso de slidos hay que usar esptulas recin
limpias.
No se deben calentar recipientes de vidrio aforados (pipetas, buretas, matraces aforados,
etc.), botellas pesadas ni recipientes hermticamente cerrados.
No hay que ir con prisas. Es necesario leer cuidadosamente el instructivo antes de empezar
los experimentos y seguir los consejos del profesor.
Se deben consultar las dudas existentes al profesor encargado o su ayudante y no al
compaero.
Al terminar el experimento, hay que limpiar el rea de trabajo, banquetas, balanzas, mesas,
campanas extractoras, etc.
Evacuacin
afectada.
En caso de quemaduras, aplicar crema para quemaduras o cubrir con jelonet al rea afectada, y
sobre este colocar una gasa y vendar apropiadamente.
Prctica N:
1
1.1
DENSIMETRA
OBJETIVOS
Familiarizarse con diversos mtodos densimtricos para el anlisis cuantitativo de diversas
sustancias.
Conocer cmo se debe trabajar con un picnmetro.
Conocer el uso de la balanza de Westphal
Conocer el uso de los densmetros, alcoholmetros, aermetros etc.
Determinar la densidad de varias soluciones
Determinar la concentracin de una muestra en solucin, midiendo la densidad relativa por
varios mtodos:
a) Picnomtrico.
b) Balanza de Westphal.
c) Densmetros
d) Balanza hidrosttica
1.2
TEORA
Fundamento
Se determina la densidad relativa de la muestra mediante los mtodos
indicados. Por medio de curvas de calibracin experimentales y tablas de
densidad en funcin de la concentracin de soluciones acuosas de analito
seleccionado, se calcula su contenido.
Para el rango de concentracin estudiado, existe una relacin lineal entre densidad y
concentracin. Aprovechando esta particularidad se encuentra la concentracin de una muestra
por interpolacin grfica y matemtica.
Consulta
1.3
METODOLOGA
Materiales y Reactivos
Probetas de 2000 ml
Balanza de Westphal
Picnmetro
Bao termosttico
Balanza analtica
Diversos densmetros y aermetros
Balones aforados de 250ml
Balones aforados de 100ml
Vasos de precipitacin de 50ml
Agua destilada
Soluciones de sacarosa: 2, 4, 8 y 12% P/V
Soluciones de etanol (2, 4, 8, 12 %V/V)
Termmetros
Buretas de 25ml
Gradilla con tubos de Nessler
Procedimiento
1.3.2.1 Mtodo del picnmetro:
Determinar el peso del picnmetro vaco con exactitud de 0,1mg. (El picnmetro debe estar
limpio y seco).
Llenar el picnmetro con agua destilada, asegurndose que el capilar est lleno de agua y que
no existan burbujas de aire.
Introducir el picnmetro en el bao trmico por 3 minutos.
Secar completamente las paredes exteriores y determinar su peso en la balanza analtica.
Llenar el picnmetro con la muestra, y repetir el procedimiento anterior.
Adaptar la balanza analtica segn las indicaciones dadas para que funcione como balanza
hidrosttica.
Pesar el inmersor de vidrio en el aire (con 0.1mg)
Pesar el inmersor sumergido en agua destilada
Pesar el inmersor en cada solucin de sacarosa y en la muestra.
8
1.4
TABLAS DE DATOS
Tabla 2-1 Determinacin del peso del picnmetro con agua, al vaco y con las diferentes
soluciones
Wpic. vaco
(g)
Wpic.+ agua
(g)
Wpic.+ sol. 2%
(g)
Wpic.+ sol. 4%
(g)
Wpic.+ sol. 8%
(g)
Wpic.+ muestra
(g)
1
2
3
4
Tabla 2-2 Determinacin de la densidad del agua y las soluciones dadas con la Balanza
Westphal
agua
sol. 2%
sol. 4%
sol. 8%
sol. 12%
muestra
T (C)
1
2
3
x
Tabla 2-3 Densidad de las diferentes soluciones con los densmetros
Solucin
Lectura
Agua
2,0%
4,0%
8,0%
12,0%
Muestra
1
2
3
4
x
1.5
CLCULOS Y RESULTADOS
W3 W1 W3 W1
W2 W1
W
t1 Dtt21 . Ht1 2O
W = W2 - W1
Tabla 2-4 Datos calculados de densidades para los estndares y la muestra, obtenidos con
el mtodo del picnmetro.
Solucin
1
2
3
4
Muestra
20
20
20 , g/cm3
% P/P
%P/V
%V/V
Tabla 2-5 Datos calculados de densidades para las soluciones de NaCl y, concentracin de
la muestra obtenida con la balanza de Westphal
Estndar
1
2
3
4
Muestra
20
20
20 , g/cm3
% P/P
%P/V
%V/V
Tabla 2-6 Mtodo de los densmetros: densidades relativa y absoluta para las soluciones de
sacarosa y muestra; expresar las concentraciones en porcentajes
Estndar
D 20 ( g / cm3 )
(tablas )
1
2
3
10
%P/P
%P/V
%V/V
4
Muestra
Clculo estadstico:
1.5.5.1 Mtodo del picnmetro
Calcular: (para la muestra)
% P / P n 1
20 n 1
1.5.5.2
% P/P
B. W
Hidrom.
B. Hidros.
B. W
Hidrom.
B. Hidros.
0,0
2,0
4,0
8,0
12,0
Grficos
a) Densidad relativa vs concentracin (hidrmetros) (experimental y tablas)
b) Densidad relativa vs concentracin (B. Westphal)
c) Densidad relativa vs concentracin (Picnmetros)
De cada grafico se obtendrn las respectivas ecuaciones del tipo 0 ks C ; con las
cuales podrn calcularse las concentraciones de las muestras.
11
Clculo Estadstico
Tabla 2-8 Resultados para las muestras con todos los mtodos:
Determinacin
% P/P sacarosa
Densmetros
Picnmetro
B. Westphal
1
2
3
4
x
Calcular:
a) La media del %P/P de sacarosa para la muestra
b) Desviacin estndar n 1
c) Reportar como % P / P n 1
d) Sensibilidad y lmite de deteccin para sacarosa por densimetra, utilizando los
hidrmetros y la balanza hidrosttica.
1.6
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
1.7
BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
216-217, 243-247
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6-11.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 1116
[4]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill.
Mxico. p. 166179.
12
Prctica N:
2
2.1
REFRACTOMETRA I
OBJETIVOS
Examinar el refractmetro de Abbe, sus accesorios y forma de operacin.
Determinar el ndice de refraccin de sustancias lquidas y compararlo con tablas.
Calcular la dispersin parcial, refraccin especfica, refraccin molar y el nmero de Abb.
Identificar una sustancia mediante su ndice de refraccin.
2.2
TEORIA
Fundamento
El ndice de refraccin es una propiedad fsica caracterstica que se utiliza para identificar
substancias qumicas.
Consulta
2.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos
Procedimiento
Examinar el refractmetro, sus partes y las conexiones al bao termosttico a 25C. Hacer un
esquema del instrumento.
Colocar 2 gotas de agua destilada en el prisma inferior o de iluminacin. Cierre suavemente el
prisma superior.
13
Mover los prismas de Amici hasta obtener los 2 campos perfectamente definidos.
Llevar hasta la lnea el lmite del ngulo crtico de refraccin con 4 cifras decimales. Anotar
tambin la posicin de los prismas de Amici en el tambor (compensador).
Hacer 3 lecturas ms a fin de obtener el promedio.
Limpiar cuidadosamente los prismas con un papel absorbente suave y luego con acetona.
Determinar los ndices de refraccin de las dems substancias.
2.4
TABLA DE DATOS
nD
1
Compensador
Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano
Muestra
2.5
CLCULOS Y RESULTADOS
Sustancia
Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano
25
25
n D corregidos y n D de tablas
25
n D (exp.)
25
n D (corregidos)
D p = n F - nc
D p = n F - nc = A + (B * C)
14
25
n D (tablas)
A, B, C
D
Dc =
A
Dp
Compensador
nD - 1 ) M
RM = ( 2
nD + 2
-1
= nD
n f - nc
Tabla 3-11 Valores de dispersin parcial, refraccin especfica, refraccin molar y nmero
de Abb para varias sustancias
r (nomog )
Sustancia
Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano
RM
v (calculado)
Clculo estadstico
Tabla 3-12 Clculo estadstico de los valores de ndice de refraccin del agua
25
n D AGUA
corregidos
1
2
3
4
n-1
NOTA: Incluir fotocopias de tablas de nomogramas.
15
2.6
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
__________________
2.7
BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
647659
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 187196
[3]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161
[4]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 306317.
[5]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 370375.
16
Prctica N:
REFRACTOMETRA II
DETERMINACIONES CUANTITATIVAS
3.1
OBJETIVOS:
3.2
TEORA
Fundamento
Para el rango de concentracin estudiado existe una relacin lineal entre n y la concentracin de
NaCl, sacarosa, etanol, etc. Aprovechando esta particularidad se determina la concentracin de
una muestra por interpolacin grfica y analtica.
Consulta
Relacin del ndice de refraccin con el porcentaje de sustancia seca y con los slidos disueltos.
De existir poner ejemplos. (mnimo 5)
Discusin del diseo y funcionamiento del refractmetro de inmersin:
3.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos
Refractmetro de inmersin
Refractmetro de Abbe
Baos termostticos
Baos de agua
Termmetros
Agua destilada
Soluciones de NaCl: 2%, 4%, 8%, 12% P/V
Soluciones de etanol: 2%, 4%, 8%, 12% V/V
Muestras de etanol, NaCl, sacarosa
17
Procedimiento
3.4
TABLA DE DATOS
Lecturas
1
n20(exp.)
n20(tablas)
0.0
2.0
4.0
8.0
12.0
Muestra
* Para cada serie de soluciones
3.5
CLCULOS Y RESULTADOS
(corregido)
0.0
2.0
4.0
8.0
12.0
18
Clculo estadstico
Tabla 3-15 Clculo estadstico de la concentracin de NaCl o etanol en la muestra
LECTURA
%P/V (NaCl)
%V/V (Etanol)
1
2
3
n-1
% DE ERROR
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
__________
3.7
BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
216217, 243247.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 187196.
[3]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161
[4]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 306317.
[5]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 1116.
19
Prctica N:
4
4.1
POLARIMETRA
OBJETIVOS
Examinar el diseo y operacin de los polarmetros.
Determinar si una sustancia es dextrgira o levgira o si es pticamente inactiva.
Medir el ngulo de rotacin y evaluar la rotacin especfica de los azcares.
Estudiar la relacin entre la longitud del tubo del polarmetro y la concentracin con el ngulo de
rotacin y la rotacin especfica.
Familiarizarse con los mtodos cuantitativos polarimtricos.
Determinar el contenido de lactosa en una muestra de leche en polvo.
4.2
TEORA
Fundamento
Las substancias que tienen la propiedad de hacer girar la luz polarizada en un plano son
denominadas ptimamente activas, pueden ser determinadas cualitativa o cuantitativamente por
medio de mediciones polarimtricas.
Inactivo
Dextro
Levo
Al precipitar las protenas de la leche por la adicin de sales de metales pesados en medio
cido, se separa la lactosa que permanece en solucin. Midiendo el ngulo de rotacin de esta
solucin es posible determinar el contenido de lactosa en la muestra.
Consulta
20
4.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos
Polarmetro
Agua destilada
Solucin de sacarosa al 0,5; 1,0;
1,5; 3,0% (100mL)
Tubos polarimtricos de 1 y 2dm.
Termmetros
Balanza analtica
Embudos
Vasos de precipitacin
Procedimiento
4.3.2.1
PREPARACION DE LA MUESTRA
Preparar soluciones de lactosa en agua destilada de 0.5; 1.0; 1.5 y 3.0 % P/V.
Pesar 5 gramos (0.001) de leche en polvo, disolver con 20ml de agua caliente.
Agregar 20ml de cido sulfrico al 20% y 5ml de solucin de Tungstato de Sodio al 10%, colocar
5-6 gotas de NH3. Filtrar y aforar con agua destilada a 100ml, determinar el ngulo de rotacin
con un tubo polarimtrico de 2dm.
4.3.2.2
Utilizando un tubo polarimtrico de 1 y 2dm, medir los ngulos de rotacin de las soluciones de
lactosa al 0.5%; 1.0%; 1.5% y 3.0 % P/V, as tambin de la solucin obtenida del tratamiento de la
leche.
Realizar 5 lecturas y obtener el promedio.
Medir la temperatura de la solucin.
Medir la densidad de las soluciones de sacarosa
21
4.4
TABLAS DE DATOS
%P/V
--0,5%
1,0%
1,5%
3,0%
Muestra
T (C)
sol
sol
%P/V
T (C)
--0,5%
1,0%
1,5%
3,0%
Muestra
4.5
CLCULOS Y RESULTADOS
100 *
l *C
( l en dm ; C en % P / V )
Tabla 5-18 Valores de rotacin especfica observada con el tubo de 1dm para la lactosa
St
(%P/V)
0,0
0,5
1,0
1,5
3,0
Tabla 5-19 Valores de rotacin especfica observada con el tubo de 2dm para la lactosa
St
(%P/V)
0,0
0,5
1,0
1,5
3,0
22
Concentracin (% P/V)
0,5
1,0
1,5
3,0
[ ] exp
exp
[ ] tablas
Concentracin (% P/V)
0,5
1,0
1,5
3,0
[ ] exp
exp
[ ] tablas
= 0 + b [%P/V]
Tabla 5-22 Comparacin de los valores de experimentales y ajustados
Concentracin (%P/V)
Blanco
0,5
1,0
1,5
3,0
(exp erimental )
23
( ajustado )
CM =
t
] D : No cambia con la concentracin.
100 . a
[ ] tD . l
[ ] tD : corregido a T de laboratorio
%( P / P ) lact . =
Plactosa
x100
Pmuestra
%ERROR =
[ ] tablas - [ ] exp .
[ ] tablas
. 100 =
Clculo Estadstico:
Tabla 5-23 Clculo estadstico
Grupo No.
1
2
3
4
%P/P lactosa
24
S S( b ) ks C
S m S ( b ) 3 ( b )
y/x
Cm
(y
i 1
y i ) 2
n2
S m Sbl
Ks
Clculo Estadstico:
[ ] exp
% Error
Marca de la leche analizada
Contenido de lactosa en % p/p
% p/p n-1
Sensibilidad de calibracin
Lmite de deteccin
4.6
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
4.7
BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 201211.
[2]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 318339.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 375388.
[4]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6-11.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 471 490.
[6]. WINGROVE, A. y CARET, R. (1981). Qumica Orgnica. Harla. Mxico. p. 205211,
218223.
[7]. WEAST Robert; CRC Handbook of Physics 49th (1968)
25
Prctica N:
INTRODUCCIN A LA ESPECTROFOTOMETRA
5.1
OBJETIVOS
Examinar y operar un espectrofotmetro UV - VIS
Conocer los procedimientos para evaluar el desempeo del espectrofotmetro
Determinar las posibles causas de error en una medicin espectrofotomtrica
5.2
TEORA
Fundamento
Dentro de los requerimientos para el buen desempeo de un Laboratorio de Qumica Analtica,
ocupa un lugar preferencial el tipo de instrumento utilizado en la deteccin y cuantificacin de los
parmetros que se analizan y el control de su ptimo funcionamiento. El espectrofotmetro UV Vis. constituye el instrumento ms utilizado en el Laboratorio, ya que la mayora de las
determinaciones se llevan a cabo colorimtrica o espectrofotomtricamente. Aunque los aparatos
de medicin que existen en el mercado son sometidos a controles de calidad por sus fabricantes,
el intenso uso y el envejecimiento deterioran su rendimiento, dando lugar a errores analticos de
origen instrumental que, aunque sea parcialmente, se pueden detectar y corregir.
En el laboratorio se debe llevar un registro de todo el instrumental, donde deben constar todos los
controles que se realizan, los desperfectos que se producen, las reparaciones que se efectan, los
responsables del servicio tcnico, etc. de manera de constituirse en una documentacin vlida que
respalde el accionar profesional.
NOMENCLATURA ESPECTROFOTOMETRICA
Rango Espectral: Intervalo de longitudes de onda en el cual el instrumento puede realizar
medidas de absorbancia o transmitancia. Abarca habitualmente el UV y el visible.
Exactitud de Longitud de Onda: diferencia entre la longitud de onda que indica el seleccionador
y la longitud de onda real. Es el corrimiento de longitud de onda y se mide en nm.
Precisin de longitud de onda: Es la capacidad del instrumento de reproducir la longitud de onda
elegida. Se mide tambin en nm.
Estabilidad de lectura, deriva y ruido: Es la variacin del cero electrnico del instrumento en
funcin del tiempo. La deriva es una inclinacin hacia una lectura ms alta o ms baja durante un
perodo de tiempo y el ruido es la falta de estabilidad.
Abs
Abs
Tiempo
Tiempo
26
Abs
Abs
Tiempo
Tiempo
Longitud de onda
Figura 2: A: longitud de onda seleccionada
DE: ancho de rendija
BC: ancho de banda
Luz parsita: es toda radiacin electromagntica de longitud de onda distinta a la seleccionada por el
monocromador que alcanza el detector y por lo tanto queda registrada por el instrumento.
Consulta
Precisin y exactitud
Seales y ruido: relacin entra seal y ruido, fuentes de ruido en los anlisis
instrumentales.
Linealidad, repetibilidad o repetitividad.
27
5.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos
Espectrofotmetro UV - VIS
Balones aforados
Pipetas
Cubetas limpias
Agua destilada
Dicromato de potasio
Azul de bromotimol
Nitrato de cobalto
Cianohemoglobina
cido Sulfrico 0.37N
cido perclrico 0.001 N
P- Nitrofenol
Nitrito de sodio
PROCEDIMIENTO
5.3.2.1
El mtodo ms exacto consiste en reemplazar la lmpara del instrumento por una fuente de
energa radiante que emita fuertes lneas a determinadas longitudes de onda. Son tiles
para este fin: a) Lmpara de vapor de mercurio (313, 365, 405, 436 y 546 nm) y b) Lmpara
de hidrgeno y de deuterio (486 y 656 nm.)
Un segundo mtodo consiste en la utilizacin de filtros de tierras raras como el xido de Holmio (361,
418, 453, 536 y 636 nm.) y el Didimio ( 573, 586, 685, 741 y 803 nm.).
En caso de no contar con estos filtros o sus soluciones se recomienda usar el mtodo del punto
Isosbstico. Esta es una caracterstica que presentan ciertas sustancias con ismeros estables cuyos
espectros en solucin equimolecular cida y alcalina se cortan en una longitud de onda caracterstica.
La importancia del mtodo resulta en que el punto isosbstico es independiente de la concentracin
absoluta de la sustancia y de la temperatura entre 4 y 45 C. La experiencia consiste en determinar los
espectros de absorcin-emisin de alguna de las sustancias que luego se mencionan, en sus formas
cidas y alcalinas. El punto isosbstico se define grficamente tal como muestra la figura siguiente.
Espectro del rojo Congo
Realizar el espectro de barrido de las soluciones cidas y alcalinas de las siguientes soluciones:
a) Dicromato de Potasio (29.5 mg/l) Pto. Isosbstico: 339, 445 nm.
Abs. referencia
100
Abs. hallada
Este factor se puede utilizar siempre que el error en la medida de absorbancia no supere el
10 % ya que en este caso es imprescindible recurrir al servicio tcnico.
5.3.2.3
Tomar una alcuota, por ejemplo la solucin de Dicromato de Potasio empleada en el punto anterior, en
10 porciones y medir los valores de absorbancia de cada una cuidando de colocar la cubeta en la
misma orientacin. Hallar la media, la desviacin estndar y el coeficiente de variacin. El valor de CV
deber ser inferior a 1 % para cubetas paralelas y 2 % para tubos de fotocolorimetra. Puede realizarse
la misma experiencia con soluciones de Nitrato de Cobalto para la zona de los 510 nm o con soluciones
de Sulfato de Cobre a 650 nm.
5.3.2.4
Control de la linealidad fotomtrica.
El mtodo ms prctico consiste en preparar diluciones de determinadas sustancias y ver la respuesta
del instrumento. Se recomienda medir la linealidad a ms de una longitud de onda, sobre todo de
aquellas sustancias utilizadas en los mtodos de deteccin Qumica.
a)
b)
c)
d)
e)
Grfico A
Grfico B
29
Grfico C
Grfico D
La deriva y el ruido deben comprobarse y registrarse al menos una vez al mes por medio de
la medicin de las variaciones de ABS cada 30 segundos, durante 15 minutos, tanto para un
blanco de agua de 0,000 UA como para una solucin de Dicromato de ABS
aproximadamente a 0,400 UA a 340 nm. Un instrumento que tenga alto ruido o deriva no
debe usarse para ensayos cinticos y cuando se usa para mtodos colorimtricos punto
final con Estndares debe tenerse cuidado con el intervalo de tiempo entre la primera y la
ltima lectura de absorbancia.
5.3.2.6
Control de cubetas.
5.3.2.7
Se puede medir introduciendo en el aparato una muestra que tenga una transmitancia del 0 %; por lo
tanto, cualquier radiacin detectada e indicada en el lector corresponder a luz espuria.
Ajustar cuidadosamente el 100 % T con agua destilada a 340 nm. Luego medir la transmitancia
aparente de una solucin de NO2 Na (50g/l). El valor mximo admisible de T es de 1.0 %.
30
5.4
TABLA DE DATOS
Tabla 6-25 Espectros de absorcin de las formas cida y bsica del indicador
*Longitud de onda ()
Absorbancia
Forma cida
Forma bsica
320
325
330
335
340
345
350
...
550
*Variar la longitud de onda en intervalos de 5 nanmetros y de 1 nanmetro o menos cerca al punto isosbstico
Absorbancia
Determinacin
x1
x2
x3
x4
x5
x6
Absorbancia
x7
x8
x9
x10
x
n-1
CV
Solucin de Dicromato
Tiempo (seg.)
Absorbancia
0
15
30
45
...
900
0
15
30
45
...
900
Absorbancia.
1
2
3
4
Rango
Tabla 5-5 Control de linealidad fotomtrica
Estndar
Absorbancia
0
1
2
3
4
5
y = ax + b
Coeficiente de correlacin (r2 y
r)
31
R2 =
R=
5.5
CALCULOS y RESULTADOS
Clculos de control
Abs.referencia
100
Abs.hallada
Clculo estadstico
S n 1
(x
i 1
x) 2
N 1
Realizar el grfico respectivo con una solucin de dicromato de potasio con 0.400 UA y segn resultados marcar un X donde
corresponda
2
Precisin determinada en diferentes posiciones del carro porta cubetas
32
CV
5.6
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
5.7
BIBLIOGRAFA
[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 153161, 318
333.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 5259, 142155, 160164.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 211, 103115, 146149, 151155, 163167, 177
181.
33
Prctica N:
6 FOTOCOLORIMETRA
6.1
OBJETIVOS
Realizar determinaciones colorimtricas mediante el empleo de tubos de Nessler y el colormetro
de Duboscq.
Determinar el funcionamiento del espectrofotmetro
Establecer la longitud de onda de mxima absorbancia del KMnO 4 en solucin.
Obtener los siguientes grficos:
A vs c
A vs (para el estndar tres)
A vs (para todos los estndares a 530 y 620 nm ; dos grficos)
%T vs c
6.2
TEORIA
Fundamento
El manganeso presente en el suelo se extrae mediante una fusin con KHSO 4, luego por
oxidacin con peryodato de potasio, el color resultante del permanganato de potasio obtenido se
compara con estndares y se determina su absorbancia a una longitud de onda de 526 nm donde
se produce su mximo de absorcin
Consulta
6.3
METODOLOGA
Materiales y Reactivos
Tubos de Nessler
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Bao de agua
KMnO4 0.1 N
34
KIO4
KHSO4
H2SO4 0.25N
H3PO4 0.25N
Mezcla cida (H2SO4 + H3PO4)
Agua estabilizante (mezcla
cida+0.1gKIO4)
Procedimiento
6.3.2.1
ESTNDARES
REALIZACINDE LECTURAS:
6.3.2.3
MUESTRA
6.4
TABLAS DE DATOS
Estndares
0
1
2
3
4
Tabla 6-2 Valores de absorbancia y transmitancia para los estndares y muestra a diferentes
longitudes de onda
St.
A530
T530
A620
Espectrofotmetro
T620
Espectrofotmetro
0
1
2
3
4
M
35
Tabla 6-3 Valores de absorbancia y transmitancia para el estndar tres a diferentes longitudes
de onda
nm
420
470
530
620
670
6.5
Estndar 3
%T
CALCULOS Y RESULTADOS
Absortividad molar
Tabla 6-4 Clculo del coeficiente de absortividad molar y absortividad especifica a cada
longitud de onda
Estndar 3
(nm)
420
470
530
620
660
Absortividad molar
(mol.L-1.cm-1)
Absortividad especfica
(mg.L-1.cm-1)
St.
(535nm)
Absortividad Molar
0
1
2
3
4
Estndar
g Mn/ml
g
KMnO4/ml
ppm Mn
0
1
2
3
4
5
36
ppm
KMnO4
ppm MnO2
CONCENTRACIN
COLORIMETRO
DE
DUBOSCQ
ESPECTROFOTMETRO
Mn (%)
Mn (ppm)
KMnO4 (ppm)
MnO2 (ppm)
Mn (meq/100g suelo)
Mn (Kg/Ha suelo)
Clculo Estadstico
Promedio
Desviacin estndar n 1
% Mn 3 n-1
Grupo
1
2
3
4
Promedio
Desviacin estndar
Resultado
6.6
% Mn
x1
x2
x3
Espectrofotmetro
x4
x
n 1
x 2 n 1
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
6.7
BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 463
471
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 13.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6678, 84, 142147.
[4]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 103115.
37
Prctica N:
7 ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE
7.1
OBJETIVOS
7.2
TEORA
Fundamento
Tres molculas de ortofenantrolina (1-10 fenantrolina) reaccionan con los iones ferrosos
formando un complejo de color anaranjado que obedece a la Ley de Beer y cuya mxima
absorcin se produce a 510nm. Se utiliza tambin cido ascrbico para reducir el Fe 3+ a Fe2+, o en
su defecto se puede utilizar gotas de clorhidrato de hidroxilamina. Pueden interferir los iones
Cobre, cinc y nquel.
Consulta
7.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos
Espectrofotmetro
Balones aforados
Pipetas
Cubetas limpias
Agua destilada
Fe (NH4)2(SO4)2. 6H2O (Sal de Mohr)
Buffer de pH 4-5 (pesar 16,5g de NaOAc, aadir 11,4ml de HOAc y aforar 100ml)
Solucin de cido ascrbico 10% sulfito de sodio 5% (no pesar en papel aluminio el sulfito)
Solucin de ortofenantrolina 0.25%
Procedimiento
7.3.2.1
38
St.
0
1
2
3
4
5
ml Soln.
Patrn
0,0
0,6
1,3
2,5
5,0
10,0
ml Ac.
Ascrbico
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
ml Buffer
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
ml
Ortofenantrolina
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
ml H2O
Vol. Final
12,5
11,9
11,2
10,0
7,5
2,5
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
7.3.2.2
Las muestras disponibles contienen alrededor de 3-6 ppm de Fe (*), hacer los clculos necesarios para
tomar un volumen adecuado de muestra y que las mismas presenten una absorbancia que se
encuentre en la mitad de la curva de calibracin. Las muestras deben recibir el mismo tratamiento que
los estndares, una vez hecho esto determinar la A y %T en los 2 equipos, tanto de los estndares
como en las muestras.
(*)Para los clculos considrese un contenido promedio de 4,5 ppm en las muestras.
7.4
TABLA DE DATOS
St.
g Fe / ml
Espectrofotmetro
Absorbancia
Transmitancia
0
1
2
3
4
5
M
7.5
CALCULOS y RESULTADOS
Solucin patrn
Clculo de la cantidad de sal de Mohr necesaria para preparar la solucin
patrn de 1000g/ ml de hierro.
Concentracin de hierro
Clculo de la concentracin de hierro en los estndares (un solo clculo modelo)
Curva de calibracin
Ajuste de los datos a una recta del tipo: y= a + b x
39
Estndar
Absorbancia
(Shimadzu)
Experimental
Corregido
0
1
2
3
4
5
Clculo del coeficiente de cada estndar, sacar la media de estos valores adems de y su
media.
Muestra
Clculo de la cantidad de hierro en la muestra por los siguientes mtodos:
Interpolacin grfica
Interpolacin analtica (Recta ajustada A = A0 + KsC)
Clculo de las concentraciones utilizando y comparando con el estndar ms cercano
St
g Fe/ml
Molaridad
Fe
___
___
Espectrofotmetro
(l / mg cm) (l / mol cm)
1
2
3
4
x
Clculo estadstico
Clculo de la sensibilidad y lmite de deteccin para el mtodo.
REPORTAR:
% de Fe en el agua potable
Coeficiente
Coeficiente
Reportar todos los resultados como
% de Fe en agua 2 N 1
Mtodo
% Fe
(agua potable)
Espectrofotmetr
o
40
Ks
LD
7.6
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_______________
7.7
BIBLIOGRAFA
[1]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 164170.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 165186, 337347.
41
Prctica N:
OBJETIVOS
Estudiar las aplicaciones de la ley de Beer.
Conocer los mtodos de anlisis de mezclas absorbentes de dos o ms componentes.
Realizar la determinacin simultnea de una mezcla de soluciones de Dicromato y permanganato
de potasio.
8.2
TEORA
Fundamento
La absorbancia total de una solucin a cualquier longitud de onda es igual a la suma de las
absorbancias de los componentes individuales de la solucin. Esta relacin en principio permite
determinar las concentraciones de los componentes individuales de una muestra incluso si existe
solapamiento total de sus espectros, gracias a esto es posible analizar simultneamente una
mezcla de dicromato y permanganato de potasio.
A total = A K2Cr2O7 + A KMnO4
Consulta
8.3
METODOLOGA
Materiales y reactivos:
-
Balones aforados de 50 ml
Bureta de 25 ml
Balanza
Espectrofotmetro
Acido sulfrico 0,5M
Agua estabilizante
KMnO4 4,0 x 10-3M en cido sulfrico 0,5M (estabilizada con KIO4)
K2Cr2O7 1,00 x 10-2M en cido sulfrico 0,5M
Procedimiento
8.3.2.1 PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES:
Preparar las soluciones siguientes por disolucin a volumen exacto a partir de las soluciones originales:
Solucin A: En un baln de 50,0ml preparar una solucin 4,0 x 10 -4M de KMnO4 en cido sulfrico
0,5M.
Solucin B: Diluir una porcin de la solucin A con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin C: Diluir una porcin de la solucin B con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin D: En un baln de 50,0 ml preparar una solucin de 1,00 x 10 -3 M K2Cr2O7 en cido
sulfrico 0,5M.
Solucin E: Diluir una porcin de la solucin D con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin F: Diluir una porcin de la solucin E con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin G: En un baln de 50,0 ml preparar una solucin que sea 2,0 x 10 -4 M de KMnO4, 5,0 x
10 4 M de K2Cr2O7 y afrese con solucin 0,5M en cido sulfrico.
Solucin problema: diluir la solucin problema a 50,0 ml.
Medir la absorbancia de cada una de las soluciones anteriores, de A hasta G, y la de la disolucin
42
8.4
CLCULOS
Solucin
Vol. Inicial
(ml)
Vol. Final
(ml)
Concent.
(mol /l)
A
526nm
, 526nm
(l /mol cm)
A
440nm
440nm
(l /mol cm)
A
B
C
Solucin
Vol. Inicial
(ml)
Vol. Final
(ml)
Concent.
(mol /l)
A
526nm
, 526nm
(l /mol cm)
A
440nm
, 440nm
(l /mol cm)
D
E
F
A
526nm
A
440nm
Solucin G
(Solucin B + Solucin E)
Concentracin
KMnO4 (mol / l)
K2Cr2O7 (mol / l)
Mn (ppm)
Cr (ppm)
Solucin Problema
43
8.5
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
___________________________
8.6
BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G. (1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 491
493, 671674.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1011.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 189190.
[4]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 325328.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 112115.
44
Prctica N:
OBJETIVOS
Determinar espectrofotomtricamente el pH de una mezcla reguladora.
9.2
Fundamento
Las absortividades de las formas cida y bsica conjugada de un indicador se miden a dos
longitudes de onda diferentes. En una solucin reguladora problema se determina la
concentracin de cada forma a las dos longitudes de onda; la concentracin del in hidronio se
puede calcular a partir de esos datos.
La relacin entre las dos formas de verde de bromocresol en solucin acuosa se puede describir
por el equilibrio:
In- + H3O+
HIn + H2O
Amarillo
Para la que: K a
azul
1.6 x10
H O In
HIn
9.3
Consulta.
Intervalo de pH de cambio de color del indicador
Constantes fsicas y qumicas del verde de bromocresol
9.4
METODOLOGA
Materiales y reactivos
-
Balanza
Espectrofotmetro
Buretas de 50,0ml
Balones de 100,0ml
HCl 0,4F
NaOH 0,4F
Verde de bromocresol
Procedimiento
9.4.2.1
Verde de bromocresol. Disolver 100mg de indicador en 1,45ml de NaOH 0,01N y luego diluir
hasta 100ml con agua destilada.
HCl 0,4F. Diluir unos 7ml de HCl concentrado hasta alrededor de 200ml
NaOH 0,4 F. Disolver unos 3g de NaOH en 200ml de destilada o desionizada.
45
9.4.2.2
Aadir a uno 5,0ml de HCl 0,4 F, y al otro aadir 5,0 de NaOH 0,4 F.
Diluir cada uno hasta el enrase, mezclar bien.
Obtener los espectros de absorcin, entre 400 y 650nm para las formas cida y bsica
conjugadas del indicador, utilizando agua como blanco.
9.4.2.3
Transferir una alcuota de 1,0ml de la solucin madre del indicador verde de bromocresol a un
matraz aforado de 100,0ml
Aadir 20,0ml de la solucin reguladora problema.
Diluir hasta el enrase y medir la absorbancia de la solucin diluida a las longitudes de ondas para
las que se calcularon los datos de absortividad.
TABLA DE DATOS
Tabla 9-1 Espectros de absorcin de la forma cida del indicador
Longitud de onda ()
400
410
420
650
% Transmitancia
Absorbancia
Longitud de onda ()
400
410
420
650
% Transmitancia
CLCULOS Y RESULTADOS
9.4.4.1
46
Absorbancia
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p.
[2]. LIDE, D. (2006). Handbook of Chemistry and Physics 86ta. Edicin. CRS Press. p.360 3-61, 8-16.
[3]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1011.
[4]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 312317.
[5]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 189190.
[6]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 325328.
[7]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico.
p. 788789.
[8]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 112115.
47
Prctica N:
10.2 TEORA
Fundamento
La tcnica de la razn molar es un mtodo en el cual se puede determinar el nmero de
ligandos en un complejo con el in central. Se prepara una solucin de concentracin conocida
del in central y se le agrega en pociones el formador de complejo; despus de cada adicin se
determinan las absorbancias hasta que no aparezca aumento alguno en ellas, lo que, por lo
general, dar una curva del tipo indicada por la lnea continua de en la figura 1. Sin embargo, si
el complejo se disocia considerablemente, la curva obtenida, indicada por la lnea de trazos
vara apenas en su pendiente, haciendo casi imposible la interpretacin de los resultados.
Con el mtodo de las variaciones continuas, el nmero de moles presentes se mantiene
constante. Esto es, si se mezclan 2ml de una solucin (0.01M) y 8ml de otra de igual
concentracin, todas las otras determinaciones debern tener siempre un volumen total de
10ml, por ejemplo 3 y 7, 6 y 4, etc. En este caso se traza una grfica de la absorbancia en
funcin de la fraccin molar del in central. En la figura 2 se muestra el tipo de curva
correspondiente. La absorbancia aumenta a medida que se forma ms complejo alcanzando un
mximo cuando se llega a la relacin estequiometria, descendiendo luego en virtud de la
insuficiente cantidad del in formador de complejo.
Fig. 2
Fig. 1
M + nL
MLn
Consulta
48
10.3 METODOLOGA
Materiales y Reactivos
-
Espectrofotmetro
Balanza analtica
Balones de 50,0ml
Bureta
cido sulfrico 6M
Hidroquinona
cido clorhdrico
Sal de Mohr
Procedimiento
10.3.2.1 PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Disolucin de reserva A: Ion ferroso 0,01 M. Disolver 3,92g de FeSO4(NH4)2SO4.6H2O para anlisis en
agua, aadir 1 2ml de cido sulfrico 6M y diluir a un litro.
Disolucin de reserva B: 1,10 fenantrolina 0,01 M. Disolver 1,98g del monohidrato en la menor
cantidad posible de etanol y diluir con agua a un litro.
Hidroquinona en disolucin acuosa al 1%.
cido clorhdrico 0,1M.
MTODO DE LAS VARIACIONES CONTINUAS (tabla 10-1)
Preparacin de las soluciones:
Utilizando matraces volumtricos preparar una disolucin exacta 1:10 de la solucin A y de la B;
etiquetar estas soluciones con C y D, respectivamente.
Utilizando buretas o pipetas graduadas, preparar en balones de 50,0ml las mezclas siguientes:
8,0ml de C + 2,0ml de D
6,0ml de C + 4,0ml de D
4,0ml de C + 6,0ml de D
3,0ml de C + 7,0ml de D
2,5ml de C + 7,5ml de D
2,0ml de C + 8,0ml de D
1,5ml de C + 8,5ml de D
1,0ml de C + 9,0ml de D
2,5ml de C + 20,0ml de D
Aadir a cada solucin 1,0ml de hidroquinona al 1% y 0,5ml de cido clorhdrico 0,1M y diluir con
agua a 50,0ml. Homogeneizar las soluciones y dejarlas en reposo durante una hora a la
temperatura ambiente.
Medida:
Poner el espectrofotmetro a 508nm y determinar la absorbancia de las soluciones anteriores en la
forma habitual, utilizando agua como blanco.
Representacin grfica y clculos:
Con los datos obtenidos para las soluciones 1 a 8, representar la absorbancia en eje de
ordenadas contra la fraccin molar de D en abscisas (figura 2). Trazar una curva continua que
recoja los puntos experimentales. Extrapolar los segmentos de la curva a un punto de
interseccin y anotar el valor de la absorbancia en este punto; cmo se compara con la
absorbancia medida para la solucin 9?
Deducir la composicin del complejo expresndolo en nmero de moles de 1,10 fenantrolina que
reacciona con un mol de Fe++.
Utilizar la absorbancia de la solucin 9 y la absorbancia de la solucin que en la serie anterior
corresponde a la composicin del complejo para calcular la constante de formacin del complejo
fenantrolina-ferrosa. Comparar el valor calculado con el valor tomado de la literatura. Explquese
la posible discrepancia.
49
Solucin C
Ml
8.0
6.0
4.0
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
2.5
Solucin D
ml
2.0
4.0
6.0
7.0
7.5
8.0
8.5
9.0
20.0
Hidroq. 1%
ml
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
HCl 0.1M
Ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Vf.
ml
Fraccin
Absorbancia
molar de D
Solucin C
Ml
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
Solucin D
ml
2.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
10.5
12.0
15.0
Hidroq. 1%
ml
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
HCl 0.1M
ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Vf.
ml
D/C
Absorbancia
10.5 CLCULOS:
Clculo de la constante de formacin de complejos:
Deducir la ecuacin considerando que:
M + nL = MLn
10.6 RESULTADOS
Con los datos obtenidos determinar la composicin del complejo hierroortofenantrolina por los dos mtodos
10.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
10.8 BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 491
501, 674676.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1315.
51
Prctica N:
11 TITULACIONES FOTOMETRICAS
11.1 OBJETIVOS
11.2 TEORIA
Fundamento
En el sistema estudiado, el indicador p-nitrofenol en medio bsico (>7,6), absorbe fuertemente la
radiacin de 410nm permitiendo la titulacin de un cido dbil con una base fuerte.
Consulta
11.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
-
Espectrofotmetro
2 buretas
Balones
4 Matraces de erlenmeyer de 250 y
125 ml
Pipetas volumtricas de 1 y 10ml
Vinagre comercial * (2-5% de cido
actico)
NaOH 0,1M
P-nitrofenol (sol.)
Agua destilada
Agitador magntico
Magneto
(*)Preparar la muestra diluyendo 10ml de vinagre en un baln de 100ml y de aqu tomar las
muestras para titular.
Procedimiento
11.3.2.1
METODO CLSICO
Titular 10 ml de vinagre con NaOH 0.1 M utilizando fenolftalena como indicador.
Determinar los ml. de titulante en el punto de equivalencia y calcular la concentracin
de cido. Por el mtodo clsico podemos conocer cul es el volumen crtico, es decir
el volumen de NaOH al que se produce la neutralizacin.
11.3.2.2
METODO FOTOMTRICO
Medir 5 ml de vinagre diluido y agregarlos a la cubeta, aadir 25 ml de agua y 1 ml
de indicador, agregar todos estos reactivos a un matraz erlenmeyer de 125 ml,
conjuntamente con suficiente agua para que el agitador magntico pueda agitar la
solucin. Seleccionar la longitud de onda a 410 nm, y llevar al 100% de la
transmitancia. Agregar desde la bureta NaOH 0.1 M, con incrementos segn
indicaciones, esperar a que la aguja se estabilice y medir el % de transmitancia. Al
llegar al volumen crtico debe agregarse titulante con intervalos de 0.2 ml o menos.
52
Determinacin
Alcuota de muestra
(ml)
V NaOH 0,1M
Gastado (ml)
1
2
3
4
Tabla 12-42 Mtodo Fotomtrico
NaOH 0,1M
(ml)
0,0
1,0
2,0
-------
%T
A
(leda)
A*
(corregida)
V v
corregida Aleida
V
V volumen inicial
v volumen de titulante aadido
Determinacin
Vol. HO Ac
(ml)
1
2
3
4
x
LC x
ts
n
53
M
HO Ac
% P/V
HO Ac
Vtit (ml)
Vtit (ml)
A
V
A
V
Vtit (ml)
Vtit (ml)
VNaOH
(ml)
%T
A
V
' ' A
V
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________
11.7 BIBLIOGRAFA
[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 192194.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 372374.
55
Prctica N:
12 ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA
12.1 OBJETIVO
12.2 TEORIA
Fundamento
El cloranfenicol es una sustancia que absorbe fuertemente la radiacin UV produciendo un
mximo a 278nm, esto nos permite realizar una valoracin de cualquier forma farmacutica que
declare contener este principio activo (PA).
Consulta
Espectrofotometra UV
Principales especies qumicas que absorben esta radiacin
Aplicaciones de la espectrofotometra UV
O
HO
Cl
NH
Cl
N
O
CLORANFENICOL
[ ]20
D = +18 a + 20
Soluc. 5% en etanol de 95
57
12.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
Espectrofotmetro UV/VISIBLE
Balones aforados
Pipetas
Vasos de precipitacin
Agua destilada
Cpsulas cloranfenicol
Cloranfenicol Q. P.
Procedimiento
Fabricante
Presentacin
Nombre comercial
Cantidad declarada
Pesos promedio de las cpsulas
Cantidad pesada para el anlisis
Volumen de aforo
Alcuota para la dilucin
Volumen final
%T =
A=
Cantidad determinada
Tabla 13-45 Mediante una curva de calibracin:
Estndar
1
2
3
4
M
Cloranfenicol (ppm)
58
Absorbancia
12.7 BIBLIOGRAFA
[1]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 173186.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 334367.
59
Prctica N:
13 FLUOROMETRIA
13.1 OBJETIVOS
13.2 TEORIA
Fundamento
El mtodo fluoromtrico para determinacin de vitamina B1 se basa en la oxidacin en medio
alcalino de la tiamina a tiocromo, el cual presenta una intensa fluorescencia azul. Este mtodo se
utiliza principalmente para la determinacin de vitamina B1 en piensos, productos de nutricin
animal, rganos, lquidos biolgicos, alimentos y otros productos naturales, se aplica tambin en el
anlisis farmacutico, particularmente en preparaciones multivitamnicas.
Los resultados tan slo son reproducibles en un 5-10% de acuerdo con la naturaleza de la
muestra.
Consulta
Teora de la fluorescencia
Molculas que presentan el fenmeno de fluorescencia.
Relacin entre la fluorescencia y la concentracin.
Aplicaciones y limitaciones.
Sustancias fluorescentes, sustancias fosforescentes. (mnimo 5 ejemplos)
Diseo y funcionamiento de los instrumentos.
13.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
Fluormetro Coleman 12 C
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Balanza analtica
Embudos de separacin
Tiamina P. A.
Isobutanol (libre de impurezas fluorescentes)
KCl (Solucin cida):25 g de KCl y 0.85 ml de HCl (37%) (Aforar a 100 ml)
K3 [Fe (CN)6] 1%
NaOH 15%
HCl 0.1 N
Sulfato de sodio anhidro
60
Procedimiento
13.3.2.1 CURVA DE CALIBRACIN
Estndar
0
1
2
3
4
Muestra
Concentracin
61
Fluorescencia
Fm.
Cm
ug.
13.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 3538.
[2]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 308312.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 201223.
[4]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 381399.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 1116.
62
Prctica N:
14 TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA
14.1 OBJETIVOS
14.2 TEORIA
Fundamento
Los iones sulfato reaccionan con bario formando un precipitado fino de sulfato de bario, el cual
es mantenido en suspensin por medio de una solucin acondicionadora. En estas condiciones se
cumple una relacin lineal entre la turbidez y la concentracin.
Consulta
14.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
Espectrofotmetro
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Cristales de BaCl2.2H2O
Solucin patrn de 100ppm de (SO4)2- (NaSO4)
Reactivo Acondicionante: 75,0g NaCl + 30,0ml HCl (agitar) + 100ml de etanol + 50,0ml de
glicerina, y aforar a 500ml.
Procedimiento
14.3.2.1 PREPARACIN DE LA CURVA DE CALIBRACIN
63
Estndar
0
1
2
3
4
5
Sol. Patrn
(ml)
0,0
1,0
2,0
4,0
6,0
7,0
Agua destilada
(ml)
10,0
9,0
8,0
6,0
4,0
3,0
Sol. Acondicionante
(ml)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
AGUA POTABLE
Medir 10,0ml. de agua potable filtrada, aadir 0.5ml. de la solucin acondicionadora
y agregar 0.5ml. de solucin de cloruro de bario al 10%. Proceder de idntica
manera que los estndares y finalmente determinar el % de T.
Sol. Patrn
(ml)
0,0
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0
Estndar
0
1
2
3
4
5
Agua destilada
(ml)
10,0
9,0
8,0
6,0
4,0
2,0
Sol. Acondicionante
(ml)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
Proceder de idntica forma que para la turbidimetra, excepto que las lecturas se harn con
el espectrofotmetro
Para la MUESTRA tomar la dcima parte (1.0 ml)
Estndar
0
1
2
3
Sol. Patrn
(ml)
0,0
0,5
1,0
2,5
V. Final
ppm SO4
10,5
10,5
10,5
10,5
64
%T
Turbidez
4
5
Muestra
5,0
7,5
10,5
10,5
Estndar
0
1
2
3
4
5
Muestra
TURBIDEZ:
Sol. Patrn
(ml)
0,0
0,5
1,0
2,5
5,0
7,5
V. Final
ppm SO4
Unidades de
Turbidez
10,5
10,5
10,5
10,5
10,5
10,5
= log ( T o )
T
14.6 CUESTIONARIO
14.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 4145.
65
Prctica N:
15 TURBIDEZ EN AGUA
15.1 OBJETIVOS
15.2 TEORIA
Fundamento
Este mtodo se basa en la comparacin de la intensidad de la luz dispersada por una muestra bajo
condiciones definidas con la intensidad de la luz dispersada por una suspensin estndar de referencia
bajo las mismas condiciones. Mientras ms alta es intensidad de la luz dispersada mayor ser la
turbidez. La hidracina se utiliza como suspensin patrn para el estndar de referencia. La turbidez de
una concentracin especfica de hidracina se define como 4000 NTU.
15.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
Nefelmetro
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Sulfato de hidracina
Hexametilentetramina
15.4 PROCEDIMIENTO
15.4.1.1 Suspensin Stock de Turbidez:
Solucin I:
Solucin II:
1,0 g. (NH2)2.H2SO4 (sulfato de hidracina). Aforar a 100 ml. con agua destilada
filtrada.
10,0g. (CH2)6N4 (hexametilentetramina). Aforar a 100 ml. con agua destilada
filtrada.
66
Estndar
0
1
2
3
4
5
Muestra
Susp. 40 NTU
(ml)
0,0
2,5
5,0
10,0
15,0
20,0
V. Final
NTU
20,0
20,0
20,0
20,0
20,0
20,0
0
5
10
20
30
40
%T
TURBIDEZ
Muestras de agua:
A B
A
15.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 4145.
[2]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 250252.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 309313.
[4]. APHA (1993). Standard Methods. 20th. Edition
67
ANEXOS
TABLAS Y NOMOGRAMAS
68
69
70
71
NOMOGRAMA
72
4. Calificacin:
a. Los 6 puntos de laboratorio se distribuyen as: un punto (2) para la evaluacin de final
del semestre; dos (4) puntos entre informes y pruebas escritas.
5. Semanero: sta persona cumplir las siguientes funciones:
a. Organizar al grupo para mantener el orden y la limpieza del laboratorio.
b. Retirar el material a utilizar, verificar su estado y entregarlo en el mismo estado al
final de la prctica.
6. Se aplicarn las sanciones adecuadas si se rompen las normas del laboratorio,
especialmente en lo referente a la seguridad, el orden, atrasos y limpieza de material y del
laboratorio.
7. Las faltas a clase prctica se justificaran si hubiesen motivos de fuerza mayor, debidamente
respaldadas por comunicado oficial del decanato.
8. Queda estrictamente prohibido fumar, beber o comer en el laboratorio.
73
INTEGRANTES:
GRUPO N: ________
DIA: ______________
HORA: ____________
1. REPORTE DE DATOS:
1.1. Datos experimentales:
Ttulo de la tabla
2. CLCULOS Y RESULTADOS:
2.1. Clculos Modelo:
A+B=C+D
= N +
Y = ax + b
2.2. Presentacin de Resultados:
Ttulo de la tabla
3. CURVA DE CALIBRACIN:
74
Estadsticos principales y ejemplo de clculo de cada uno, no olvidar las UNIDADES que
acompaen a los resultados si estos tuvieren
_
x : ________
CV: ________
LOD:________
y/x: _________
LOQ: ________
r : ________
Ks: _________
LC: ________
4. DISCUSIN:
El propsito de la discusin es interpretar y comparar los resultados obtenidos.
La discusin debe ser puntual y enfocarse en las ventajas y desventajas del trabajo experimental.
Se debe relacionar el fundamento terico aprendido en la clase terica con lo aprendido en la
clase experimental. Brevemente se describe las implicaciones lgicas de los resultados. Se
sugiere mejoras para obtener mejores resultados. Si los datos no resultaren concordantes trata de
discutir una posible fuente de error, cometido ya que si se tratare de un error craso se debera
repetir el experimento. Dicho de una manera ms sencilla la finalidad principal de una Discusin es
mostrar las relaciones existentes entre los hechos observados.
5. CONCLUSIONES:
Las conclusiones se escriben de acuerdo a los objetivos planteados en el experimento, si estos
han sido alcanzados; en infinitivo, Se observ, Se verific, Se analiz la siguiente muestra, etc.
Como una gua en esta seccin se responde a las siguientes preguntas:
6. BIBLIOGRAFIA:
De acuerdo a la normativa del APA, o con la herramienta de Microsoft Word 2007 que se
encuentra en la interfaz de referencias e Insertar cita.
75