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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

Gua de Prcticas de laboratorio de

ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL I


Segunda Edicin

Recopilacin:
Dr. Wilson Parra
Dr. Ivn Tapia

CONTENIDO
1

DENSIMETRIA.............................................................................................................6

REFRACTOMETRIA I.............................................................................................12

REFRACTOMETRIA II..............................................................................................16

POLARIMETRIA........................................................................................................19

INTRODUCCIN A LA ESPECTROFOTOMETRA............................................25

FOTOCOLORIMETRA.............................................................................................33

ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE......................................................................37

ANLISIS ESPECTROFOTOMTRICO DE UNA MEZCLA.............................41

DETERMINACIN DEL pH de UNA SOLUCIN REGULADORA................44

10

DETERMINACIN DE LA COMPOSICIN DE COMPLEJOS......................47

11

TITULACIONES FOTOMETRICAS.....................................................................51

12

ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA....................................................55

13

FLUOROMETRIA...................................................................................................58

14

TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA................................................................61

15

TURBIDEZ EN AGUA............................................................................................64

REGLAMENTO DE SEGURIDAD
Normas de laboratorio
Para el desarrollo y aprovechamiento del trabajo en el laboratorio de prcticas es importante tanto
la disciplina general como particular. Cada prctica tiene su instructivo completo en donde se
especifican objetivos, equipos, material de vidrio y algunos reactivos particulares. Este material no
debe mezclarse con el correspondiente a otra prctica. Por otra parte, cada alumno tendr un
material de uso individual, como gafas protectoras, pera de succin y material de grupo de trabajo
como lminas de aluminio, plstico de embalaje, papel filtro y otros que sern solicitados al inicio
del ciclo semestral.
Existe un material comn: bidones con agua destilada, reactivos qumicos en la estantera
correspondiente, pipetas, embudos, probetas, vidrios de reloj, varillas para agitar, esptulas,
balanzas, agitadores, algunos de los cuales sern entregados a un representante del grupo de
trabajo al inicio de la prctica. Se evitar dispersar este material por el laboratorio y, en lo referente
al material de vidrio, es preciso limpiarlo antes y despus de su utilizacin. Es de inters general
mantener el orden y la limpieza en los espacios fsicos individuales y comunes. As mismo habr
recipientes para recoger los distintos tipos de residuos generados. Al finalizar la prctica, debe
dejarse el material en las mismas condiciones como se lo recibi.
Es obligatorio cumplir con el horario de prcticas. Las sesiones de prcticas durarn tres horas y si
el estudiante debe salir por alguna razn deber solicitar permiso de ausencia al instructor o su
ayudante.
Seguridad en el laboratorio
El trabajo de laboratorio presenta caractersticas que lo diferencian de otras reas. En primer
lugar, la variedad de riesgos. Es frecuente encontrar en un laboratorio riesgos elctricos, de
incendio, biolgicos, de intoxicacin, etc. Dentro de este ltimo, la situacin es especialmente
compleja por la gran variedad de productos qumicos con los que se trabaja habitualmente.
Adems, y sobre todo en los cursos iniciales, la destreza de los alumnos en las tareas es escasa,
lo que se traduce en conductas y comportamientos de riesgo.
Conducta en el laboratorio
Existen tres reglas fundamentales para trabajar en el laboratorio: limpieza, seguridad y disciplina.
Hay que trabajar siempre con mandil o ropa protectora apropiada y llevarla abotonada.
Es preciso mantener el rea de trabajo ordenada y limpia.
Los desperdicios slidos y lquidos hay que depositarlos en contenedores apropiados.
Hay que leer detenidamente la etiqueta de los recipientes antes de usar su contenido.
No se deben cambiar las etiquetas de los reactivos ni los recipientes con productos distintos a
los que indica dicha etiqueta.
El almacenamiento de reactivos preparados en el laboratorio se llevar a cabo en recipientes
adecuados a su reactividad y sern debidamente etiquetados.
Hay que evitar usar y almacenar excesivas cantidades de reactivos qumicos.
3

Es muy importante no contaminar los reactivos de los botes con otros productos. No se debe
pipetear directamente de los mismos y en caso de slidos hay que usar esptulas recin
limpias.
No se deben calentar recipientes de vidrio aforados (pipetas, buretas, matraces aforados,
etc.), botellas pesadas ni recipientes hermticamente cerrados.
No hay que ir con prisas. Es necesario leer cuidadosamente el instructivo antes de empezar
los experimentos y seguir los consejos del profesor.
Se deben consultar las dudas existentes al profesor encargado o su ayudante y no al
compaero.
Al terminar el experimento, hay que limpiar el rea de trabajo, banquetas, balanzas, mesas,
campanas extractoras, etc.

Normas de seguridad para el trabajo en el laboratorio

Hay que usar gafas de seguridad


Hay que utilizar mascarilla de respiracin cuando se trabaje con sustancias voltiles o slidos
en forma de polvo.
Hay que usar guantes de goma cuando se manejen sustancias potencialmente peligrosas al
contacto con la piel.
No se deben llevar comidas ni bebidas al laboratorio.
Est prohibido fumar. Los cigarrillos son puntos de combustin incontrolados.
No se deben llevar prendas de vestir sueltas y si se tiene el cabello largo deber estar
recogido hacia atrs.
No se deben mantener mecheros encendidos cuando no se usan. Siempre que estn
encendidos deber permanecer una persona vigilndolos.
No se debe trabajar con lquidos inflamables cerca de la llama de los mecheros.
Hay que mantener los recipientes de los productos qumicos perfectamente tapados y
ordenados.
No se debe situar la cara cerca de los recipientes con lquidos voltiles.
Nunca hay que probar el sabor ni el olor de productos y mezclas qumicas.
Hay que usar aspiradores (peras de goma) para pipetear reactivos o disoluciones.
Hay que utilizar la campana extractora de seguridad (sorbona para reacciones que involucran
la emisin de humos, vapores corrosivos o venosos).
No se deben hacer en solitario trabajos experimentales que entraen el ms mnimo riesgo.
Los experimentos que, debido a su largo duracin, han de continuar durante toda la noche
sern debidamente sealizados, indicando claramente en una nota su posible peligrosidad y el
telfono de contacto de la persona responsable.
No se deben calentar recipientes de vidrio directamente a la llama, procurando elevar su
temperatura poco a poco. Hay que evitar colocar los recipientes que estn calientes junto a un
foco fro, puesto que el choque trmico podra romperlos.
No se debe dirigir la boca de recipientes que se estn calentando o agitando hacia los
compaeros, con el fin de evitar proyecciones peligrosas.

Normas de seguridad contra incendios


Precauciones generales

Est prohibido fumar en el laboratorio.


No hay que mantener mecheros encendidos sin usarlos.
No se debe trabajar con lquidos inflamables cerca de la llama de los mecheros.
Se ha de conocer perfectamente la inflamabilidad de los reactivos con que se trabaja.
No se deben sobrecargar los puntos de suministro elctrico.
En los experimentos que sean potencialmente peligrosos de provocar incendios, se
4

extremarn las precauciones anteriores.


Hay que seguir estrictamente las normas de evacuacin en los simulacros de incendios.
Se debe conocer perfectamente la ruta de evacuacin a seguir en caso de incendio.
Hay que conocer la localizacin exacta de los medios de extincin existente (mangueras,
extintores y mantas).

Lucha contra el fuego

No se debe correr riesgos personales.


En caso de producirse un conato de incendio, es necesario procurar no perder la calma
apagando el fuego con el equipo de lucha contra incendios ms adecuado que se disponga.
Hay que cerrar todas las puertas y ventanas, eliminando las corrientes de aire, para evitar el
aporte de oxgeno a la zona de combustin.
Si el fuego es tan serio como para requerir ms de un extintor o, en el caso se estime que est
fuera de control, hay que hacer sonar la alarma de incendios, advertir a las personas ms
cercanas de la necesaria evacuacin y llamar a los bomberos dando la posicin exacta del
fuego.

Evacuacin

Cuando suene la alarma hay que evacuar inmediatamente el laboratorio.


La evacuacin debe ser ordenada y sin prisas.
Todos los responsables del instrumental abandonarn el edificio tras comprobar que todos los
aparatos estn apagados.
Antes de abandonar el edificio hay que apagar los mecheros bunsen, cortar el suministro
general de gases (cerrar vlvulas de los tanques), cerrar los grifos de agua y desconectar los
equipos elctricos, siempre y cuando lo permitan las condiciones del incendio.
Los profesores responsables de las prcticas debern comprobar que no se ha quedado
ningn alumno y que todos los aparatos estn desconectados.
Como prevencin todos los pasillos y salidas deben estar libres de obstrucciones. Todas las
puertas de los laboratorios deben estar siempre desbloqueadas.

Algunos percances usuales y su tratamiento


En el laboratorio debe existir un botiqun provisto de un material mnimo, como algodn, gasas,
tijeras, esparadrapo, yodo y alcohol sanitario, agua oxigenada, crema para quemaduras,
bicarbonato sdico, analgsicos, etc.
Ingestin de sustancias:
Es necesario conseguir la mayor informacin posible sobre el producto ingerido y trasladar
inmediatamente a la persona intoxicada a un centro sanitario. En caso de dudas de la peligrosidad
de la sustancia, se puede pedir informacin al Centro de Informacin de Medicamentos y Txicos
CIMET (2500-535).
Lesiones superficiales:
En general, hay que proceder al lavado con agua abundante, salvo si la lesin se ha producido por
cido sulfrico. En este caso se neutraliza con agua jabonosa y se aplica sustancias oleosas. En
particular, para cidos fuertes hay que lavar abundantemente con agua bicarbonatada y para
bases fuertes como sosa castica hay que lavar abundantemente con agua acidulada o vinagre.
En caso de cortaduras superficiales, lavar con abundante agua y desinfectar con un antisptico y
aplicar presin con una gasa estril para detener el sangrado, realizar un vendaje en la zona
5

afectada.
En caso de quemaduras, aplicar crema para quemaduras o cubrir con jelonet al rea afectada, y
sobre este colocar una gasa y vendar apropiadamente.

Prctica N:

1
1.1

DENSIMETRA

OBJETIVOS
Familiarizarse con diversos mtodos densimtricos para el anlisis cuantitativo de diversas
sustancias.
Conocer cmo se debe trabajar con un picnmetro.
Conocer el uso de la balanza de Westphal
Conocer el uso de los densmetros, alcoholmetros, aermetros etc.
Determinar la densidad de varias soluciones
Determinar la concentracin de una muestra en solucin, midiendo la densidad relativa por
varios mtodos:
a) Picnomtrico.
b) Balanza de Westphal.
c) Densmetros
d) Balanza hidrosttica

1.2

TEORA

Fundamento
Se determina la densidad relativa de la muestra mediante los mtodos
indicados. Por medio de curvas de calibracin experimentales y tablas de
densidad en funcin de la concentracin de soluciones acuosas de analito
seleccionado, se calcula su contenido.
Para el rango de concentracin estudiado, existe una relacin lineal entre densidad y
concentracin. Aprovechando esta particularidad se encuentra la concentracin de una muestra
por interpolacin grfica y matemtica.

Consulta

Definiciones de densidad absoluta, densidad relativa, unidades.


Principio de Arqumedes. Principales mtodos experimentales para determinar la densidad.
Relacin entre la densidad - concentracin y temperatura para mezclas binarias.
Conversiones %P/P - % V/V - %P/V
Discusin del diseo y funcionamiento de los instrumentos: Funcionamiento y precauciones.
Principio en que se basan las determinaciones experimentales de la densidad con los
hidrmetros y con la balanza hidrosttica.
Ecuaciones que definen el empuje de los lquidos sobre los cuerpos sumergidos.
Clasificacin de los hidrmetros o aermetros
Relacin entre densidad especfica y la concentracin para mezclas binarias.
Ecuaciones para calcular la densidad especfica segn la balanza hidrosttica.

1.3

METODOLOGA

Materiales y Reactivos

Probetas de 2000 ml
Balanza de Westphal
Picnmetro

Bao termosttico
Balanza analtica
Diversos densmetros y aermetros
Balones aforados de 250ml
Balones aforados de 100ml
Vasos de precipitacin de 50ml
Agua destilada
Soluciones de sacarosa: 2, 4, 8 y 12% P/V
Soluciones de etanol (2, 4, 8, 12 %V/V)
Termmetros
Buretas de 25ml
Gradilla con tubos de Nessler

Procedimiento
1.3.2.1 Mtodo del picnmetro:

Determinar el peso del picnmetro vaco con exactitud de 0,1mg. (El picnmetro debe estar
limpio y seco).
Llenar el picnmetro con agua destilada, asegurndose que el capilar est lleno de agua y que
no existan burbujas de aire.
Introducir el picnmetro en el bao trmico por 3 minutos.
Secar completamente las paredes exteriores y determinar su peso en la balanza analtica.
Llenar el picnmetro con la muestra, y repetir el procedimiento anterior.

1.3.2.2 Mtodo de la Balanza de Westphal


Armar la balanza segn indicaciones.
Ajustar la balanza en cero.
Calibrar la balanza con agua destilada.
Determinar la densidad de la muestra.
Determinar la temperatura.

1.3.2.3 Densmetros e hidrmetros:

Llenar las probetas con soluciones de sacarosa y con la muestra.


Sumergir lentamente el densmetro hasta que se mantenga estable y no tope las paredes de la
probeta, observar donde corte el menisco del lquido, la escala de densidad y anotar la lectura
(4 cifras decimales). Realizar 5 determinaciones.
Determinar los grados Baum de cada solucin utilizando los hidrmetros correspondientes.

1.3.2.4 Balanza hidrosttica:

Adaptar la balanza analtica segn las indicaciones dadas para que funcione como balanza
hidrosttica.
Pesar el inmersor de vidrio en el aire (con 0.1mg)
Pesar el inmersor sumergido en agua destilada
Pesar el inmersor en cada solucin de sacarosa y en la muestra.
8

1.4

TABLAS DE DATOS

Tabla 2-1 Determinacin del peso del picnmetro con agua, al vaco y con las diferentes
soluciones
Wpic. vaco
(g)

Wpic.+ agua
(g)

Wpic.+ sol. 2%
(g)

Wpic.+ sol. 4%
(g)

Wpic.+ sol. 8%
(g)

Wpic.+ sol. 12%


(g)

Wpic.+ muestra
(g)

1
2
3
4

Tabla 2-2 Determinacin de la densidad del agua y las soluciones dadas con la Balanza
Westphal

agua

sol. 2%

sol. 4%

sol. 8%

sol. 12%

muestra

T (C)

1
2
3

x
Tabla 2-3 Densidad de las diferentes soluciones con los densmetros
Solucin
Lectura

Agua

2,0%

4,0%

8,0%

12,0%

Muestra

1
2
3
4
x

1.5

CLCULOS Y RESULTADOS

Clculo de la densidad relativa y absoluta por el mtodo del picnmetro:


Dtt21

W3 W1 W3 W1

W2 W1
W

Dtt21 = densidad relativa


t1 = densidad absoluta a t1

t1 Dtt21 . Ht1 2O

W1 = peso de picnmetro vaco

W = W2 - W1

W2 = peso del picnmetro + agua


W3 = peso del picnmetro + muestra
w = equivalente del agua

Incluir nicamente un ejemplo del clculo.


9

Clculo de la densidad relativa y absoluta por el mtodo de la balanza de


Westphal
(Los datos obtenidos en la balanza de Westphal son directamente de densidad relativa a
t1/t2). Calcular densidad absoluta:

t1 = tt12 ( exp ) . tH1 2O

Clculo de la concentracin de la muestra:

Clculo de la concentracin de la muestra por interpolacin grfica y matemtica con una


exactitud de 0.1% mediante curva de calibracin, esto para los cuatro mtodos.
Los datos se ajustan a una recta del tipo y = ax + b
Recomendaciones:
Establecer si las tablas vienen expresadas en % P/P %P/V y/o % V/V.
Familiarizarse con el uso de referencias bibliogrficas (mirar bibliografa) y tablas de
densidad absoluta y relativa.
Considerar la temperatura en cada determinacin.

Calcular la concentracin en % P/V y % V/V, % P/P

Tabla 2-4 Datos calculados de densidades para los estndares y la muestra, obtenidos con
el mtodo del picnmetro.

Solucin
1
2
3
4
Muestra

20
20

20 , g/cm3

% P/P

%P/V

%V/V

Tabla 2-5 Datos calculados de densidades para las soluciones de NaCl y, concentracin de
la muestra obtenida con la balanza de Westphal

Estndar
1
2
3
4
Muestra

20
20

20 , g/cm3

% P/P

%P/V

%V/V

Tabla 2-6 Mtodo de los densmetros: densidades relativa y absoluta para las soluciones de
sacarosa y muestra; expresar las concentraciones en porcentajes

Estndar

2020 ( g / cm3 ) 20 ( g / cm3 )

D 20 ( g / cm3 )
(tablas )

1
2
3
10

%P/P

%P/V

%V/V

4
Muestra

Clculo estadstico:
1.5.5.1 Mtodo del picnmetro
Calcular: (para la muestra)

La media de densidad absoluta


La desviacin estndar de la densidad absoluta
La media de la concentracin %P/P
La desviacin estndar de la concentracin
Expresar el resultado como:

% P / P n 1

20 n 1
1.5.5.2

Mtodo de la balanza de Westphal

Realizar de igual forma que en el mtodo del picnmetro.


1.5.5.3 Calcular la sensibilidad y el lmite de deteccin para los cuatro mtodos.
NOTA:
Incluir en el informe fotocopia de la tabla de constantes fsicas de las soluciones
empleadas y de la densidad del agua a varias temperaturas.

Ajuste de los datos experimentales a una recta del tipo: 0 K s C


Tabla 2-7 Clculos de los valores ajustados de la densidad para todos los mtodos (B.
Westphal, picnmetro, densmetros)

% P/P

2020 ( g / cm3 ) (experimental)


Pic.

B. W

Hidrom.

B. Hidros.

2020 ( g / cm3 ) (ajustado)


Pic.

B. W

Hidrom.

B. Hidros.

0,0
2,0
4,0
8,0
12,0

Grficos
a) Densidad relativa vs concentracin (hidrmetros) (experimental y tablas)
b) Densidad relativa vs concentracin (B. Westphal)
c) Densidad relativa vs concentracin (Picnmetros)
De cada grafico se obtendrn las respectivas ecuaciones del tipo 0 ks C ; con las
cuales podrn calcularse las concentraciones de las muestras.
11

Clculo Estadstico
Tabla 2-8 Resultados para las muestras con todos los mtodos:

Determinacin

% P/P sacarosa
Densmetros
Picnmetro

B. Westphal

1
2
3
4
x

Calcular:
a) La media del %P/P de sacarosa para la muestra
b) Desviacin estndar n 1
c) Reportar como % P / P n 1
d) Sensibilidad y lmite de deteccin para sacarosa por densimetra, utilizando los
hidrmetros y la balanza hidrosttica.

1.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

1.7

BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
216-217, 243-247
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6-11.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 1116
[4]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill.
Mxico. p. 166179.

[5]. Otra Referencia bibliogrfica:

International Critical Tables


Handbook of Chemistry and Physics
Manual de Lange

12

Prctica N:

2
2.1

REFRACTOMETRA I

OBJETIVOS
Examinar el refractmetro de Abbe, sus accesorios y forma de operacin.
Determinar el ndice de refraccin de sustancias lquidas y compararlo con tablas.
Calcular la dispersin parcial, refraccin especfica, refraccin molar y el nmero de Abb.
Identificar una sustancia mediante su ndice de refraccin.

2.2

TEORIA

Fundamento
El ndice de refraccin es una propiedad fsica caracterstica que se utiliza para identificar
substancias qumicas.

Consulta

2.3

Refraccin, ndice de refraccin, variables que afectan al ndice de refraccin, mtodos


experimentales para determinar el ndice de refraccin, nmero de Abb, refraccin molar,
variacin de la refraccin molar y nmero de Abb en series homlogas.
Discusin del diseo y funcionamiento del refractmetro de Abb

METODOLOGA

Materiales y reactivos

Refractmetros de Abb (Carl Zeiss, Baush & Lomb)


Bao termosttico
Termmetros
Piceta
Frascos goteros
Agua destilada
Metanol
Isobutanol
Acetona
Glicerina
Muestra

Procedimiento

Examinar el refractmetro, sus partes y las conexiones al bao termosttico a 25C. Hacer un
esquema del instrumento.
Colocar 2 gotas de agua destilada en el prisma inferior o de iluminacin. Cierre suavemente el
prisma superior.
13

Mover los prismas de Amici hasta obtener los 2 campos perfectamente definidos.
Llevar hasta la lnea el lmite del ngulo crtico de refraccin con 4 cifras decimales. Anotar
tambin la posicin de los prismas de Amici en el tambor (compensador).
Hacer 3 lecturas ms a fin de obtener el promedio.
Limpiar cuidadosamente los prismas con un papel absorbente suave y luego con acetona.
Determinar los ndices de refraccin de las dems substancias.

2.4

TABLA DE DATOS

Tabla 3-9 Lecturas del ndice de Refraccin y del compensador


25

nD
1

Compensador

Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano
Muestra

2.5

CLCULOS Y RESULTADOS

Calibracin del refractmetro


AGUA DESTILADA
25
25
n D (tablas) - n D (experimental) = n

El n se debe sumar o restar (segn el signo) a las dems lecturas


Tabla 3-10 Valores de

Sustancia
Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano

25
25
n D corregidos y n D de tablas
25
n D (exp.)

25
n D (corregidos)

Clculo de la dispersin parcial y la dispersin especfica

D p = n F - nc

F lnea azul del H2 ( = 486.1nm)


C lnea roja del H2 ( = 656.3nm)

D p = n F - nc = A + (B * C)
14

25
n D (tablas)

A, B, C

D
Dc =

A
Dp

Valores que se deben consultar en tablas, hacer interpolaciones.


B

Compensador

(Poner un solo ejemplo de clculo)

Clculo de la refraccin molar y # de Abb


2

nD - 1 ) M
RM = ( 2
nD + 2
-1
= nD
n f - nc

Se puede calcular n f ; nc ; v segn NOMOGRAMAS


Valores de D ; Dc ; v ; RM

Tabla 3-11 Valores de dispersin parcial, refraccin especfica, refraccin molar y nmero
de Abb para varias sustancias

r (nomog )

Sustancia
Agua destilada
Propanol
Isobutanol
Alcohol benclico
Heptano

RM

v (calculado)

Clculo estadstico
Tabla 3-12 Clculo estadstico de los valores de ndice de refraccin del agua
25
n D AGUA

corregidos
1
2
3
4

n-1
NOTA: Incluir fotocopias de tablas de nomogramas.
15

2.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
__________________

2.7

BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
647659
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 187196
[3]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161
[4]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 306317.
[5]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 370375.

16

Prctica N:

REFRACTOMETRA II

DETERMINACIONES CUANTITATIVAS

3.1

OBJETIVOS:

Examinar el refractmetro de Inmersin, su forma de operacin y sus accesorios.


Realizar determinaciones cuantitativas de soluciones de NaCl y etanol mediante refractometra.
Estudiar la relacin entre ndice de refraccin y la concentracin de soluciones acuosas (n vs. %
P/V)
Obtener los siguientes grficos:
Lectura vs % P/V
n vs. % P/V

3.2

TEORA

Fundamento
Para el rango de concentracin estudiado existe una relacin lineal entre n y la concentracin de
NaCl, sacarosa, etanol, etc. Aprovechando esta particularidad se determina la concentracin de
una muestra por interpolacin grfica y analtica.

Consulta

Relacin del ndice de refraccin con el porcentaje de sustancia seca y con los slidos disueltos.
De existir poner ejemplos. (mnimo 5)
Discusin del diseo y funcionamiento del refractmetro de inmersin:

3.3

METODOLOGA

Materiales y reactivos

Refractmetro de inmersin
Refractmetro de Abbe
Baos termostticos
Baos de agua
Termmetros
Agua destilada
Soluciones de NaCl: 2%, 4%, 8%, 12% P/V
Soluciones de etanol: 2%, 4%, 8%, 12% V/V
Muestras de etanol, NaCl, sacarosa

Para el etanol trabajar en % V/V (precaucin en los grficos)

17

Procedimiento

3.4

Preparar soluciones de NaCl y etanol, de las concentraciones sealadas anteriormente.


Montar los accesorios del refractmetro de inmersin.
Determinar la lectura obtenida de cada solucin y del agua destilada en la escala del
refractmetro de inmersin, realizar 3 lecturas.
Consultar las tablas para transformar el valor ledo en ndice de refraccin (con 5 cifras
decimales)
Determinar el ndice de refraccin de la muestra.
Determinar en el refractmetro de Abbe la lectura de la concentracin de sacarosa en grados
BRIX. Repetir con otras sustancias a indicarse.

TABLA DE DATOS

Tabla 3-13 Datos de ndice de refraccin para soluciones de NaCl o etanol*


% P/V (NaCl)
o
% V/V (Etanol)

Lecturas
1

n20(exp.)

n20(tablas)

0.0
2.0
4.0
8.0
12.0
Muestra
* Para cada serie de soluciones

3.5

CLCULOS Y RESULTADOS

Conversin de los valores refractomtricos en ndice de refraccin, utilizando


tablas. Interpolar datos de ser necesario. Incluir slo un ejemplo de clculo.
Ajuste de los datos obtenidos experimentalmente a una recta del tipo
0 ksC

Tabla 3-14 Clculo de los valores ajustados de utilizando la ecuacin obtenida.


(exp.)

(corregido)

0.0
2.0
4.0
8.0
12.0

Clculo de la concentracin de NaCl y etanol en las muestras por interpolacin


grfica y en la ecuacin matemtica.

18

Clculo estadstico
Tabla 3-15 Clculo estadstico de la concentracin de NaCl o etanol en la muestra

LECTURA

%P/V (NaCl)

%V/V (Etanol)

1
2
3

n-1
% DE ERROR

Clculo de la sensibilidad y lmite de deteccin para NaCl y/o etanol,


3.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
__________

3.7

BIBLIOGRAFA
[1]. BLATT, F. (1991). Fundamentos de Fsica 3ra. Edicin. Prentice Hall. Mxico. p.
216217, 243247.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 187196.
[3]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161
[4]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 306317.
[5]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 1116.

19

Prctica N:

4
4.1

POLARIMETRA

OBJETIVOS
Examinar el diseo y operacin de los polarmetros.
Determinar si una sustancia es dextrgira o levgira o si es pticamente inactiva.
Medir el ngulo de rotacin y evaluar la rotacin especfica de los azcares.
Estudiar la relacin entre la longitud del tubo del polarmetro y la concentracin con el ngulo de
rotacin y la rotacin especfica.
Familiarizarse con los mtodos cuantitativos polarimtricos.
Determinar el contenido de lactosa en una muestra de leche en polvo.

4.2

TEORA

Fundamento
Las substancias que tienen la propiedad de hacer girar la luz polarizada en un plano son
denominadas ptimamente activas, pueden ser determinadas cualitativa o cuantitativamente por
medio de mediciones polarimtricas.

Inactivo

Dextro

Levo

Al precipitar las protenas de la leche por la adicin de sales de metales pesados en medio
cido, se separa la lactosa que permanece en solucin. Midiendo el ngulo de rotacin de esta
solucin es posible determinar el contenido de lactosa en la muestra.

Consulta

Sustancias pticamente activas


Rotacin especfica
Variables que afectan a la rotacin especfica
Discusin sobre el diseo y funcionamiento del polarmetro y precauciones de su uso
Determinaciones cuantitativas polarimtricas, ventajas y limitaciones

Relacin de con C en soluciones que contiene slo un soluto pticamente activo.


Valores normales de la lactosa en la leche. (Composicin qumica de la leche).

20

4.3

METODOLOGA

Materiales y reactivos

Polarmetro
Agua destilada
Solucin de sacarosa al 0,5; 1,0;
1,5; 3,0% (100mL)
Tubos polarimtricos de 1 y 2dm.
Termmetros
Balanza analtica
Embudos
Vasos de precipitacin

Balones o Tubos de Nessler


Pipetas Volumtricas
Discos de Papel filtro cuantitativo
Solucin de cido sulfrico al 20%
Solucin de Tungstato de Sodio
(Wolframato de Sodio) al 10%
Lactosa de alta pureza
Muestra comercial de leche en
polvo.

Procedimiento

Examinar el polarmetro, sus partes y controles segn la explicacin previa.


Llenar el tubo polarimtrico de 2dm con agua destilada y colocar en el porta muestras. Graduar la
escala del ngulo de rotacin en 0.0, observar y anotar la disposicin de los campos.
Mover lentamente el analizador hasta que se invierta el campo y luego regresarlo
cuidadosamente hasta obtener dos o tres campos visuales que tengan igual coloracin.
Segn el caso leer el ngulo de rotacin con 0.05 o 0.1 de exactitud.
Hacer dos lecturas ms, cambiando la disposicin de los campos y encontrando nuevamente el
punto de equilibrio.
Siguiendo el mismo procedimiento, determinar los ngulos de rotacin de las soluciones de 0,5;
1,0; 1,5 y 3,0 % P/V con el tubo de 1dm y luego con el de 2dm. Determinar la temperatura de la
solucin.
Determinar los ngulos de las dos soluciones problema, utilizando los dos tubos polarimtricos de
1 y 2dm.

4.3.2.1
PREPARACION DE LA MUESTRA
Preparar soluciones de lactosa en agua destilada de 0.5; 1.0; 1.5 y 3.0 % P/V.
Pesar 5 gramos (0.001) de leche en polvo, disolver con 20ml de agua caliente.
Agregar 20ml de cido sulfrico al 20% y 5ml de solucin de Tungstato de Sodio al 10%, colocar
5-6 gotas de NH3. Filtrar y aforar con agua destilada a 100ml, determinar el ngulo de rotacin
con un tubo polarimtrico de 2dm.

4.3.2.2

MEDICION DEL ANGULO DE ROTACION

Utilizando un tubo polarimtrico de 1 y 2dm, medir los ngulos de rotacin de las soluciones de
lactosa al 0.5%; 1.0%; 1.5% y 3.0 % P/V, as tambin de la solucin obtenida del tratamiento de la
leche.
Realizar 5 lecturas y obtener el promedio.
Medir la temperatura de la solucin.
Medir la densidad de las soluciones de sacarosa

21

4.4

TABLAS DE DATOS

Tabla 5-16 Valores de rotacin ptica observada con el tubo de 1dm

%P/V
--0,5%
1,0%
1,5%
3,0%
Muestra

T (C)

sol

sol

Tabla 5-17 Valores de rotacin observada con el tubo de 2dm

%P/V

T (C)

--0,5%
1,0%
1,5%
3,0%
Muestra

4.5

CLCULOS Y RESULTADOS

Clculo de la rotacin especfica experimental de la sacarosa y levulosa de


acuerdo al tubo utilizado en la medicin

100 *
l *C

( l en dm ; C en % P / V )
Tabla 5-18 Valores de rotacin especfica observada con el tubo de 1dm para la lactosa

St
(%P/V)
0,0
0,5
1,0
1,5
3,0

Tabla 5-19 Valores de rotacin especfica observada con el tubo de 2dm para la lactosa

St
(%P/V)
0,0
0,5
1,0
1,5
3,0

22

Clculo de la rotacin especfica segn las polinmicas dadas en las tablas.


(para la sacarosa)
Sacarosa:
[ ] = + 66.412 + 0.01267 d - 0.000376 d2
d= concentracin (%P/P)
Tabla 5-20 Valores de rotacin especfica de la sacarosa segn ecuacin polinmica

Concentracin (% P/V)
0,5
1,0
1,5
3,0

[ ] exp

exp

[ ] tablas

Correccin por el efecto de la temperatura


a) sacarosa:
[ ] = [ ] + n [t2 - t1]
Tabla 5-21 Valores de rotacin especfica corregida por efecto de temperatura a varias
concentraciones de sacarosa

Concentracin (% P/V)
0,5
1,0
1,5
3,0

[ ] exp

exp

[ ] tablas

Clculo de la concentracin de la muestra por interpolacin grfica.

Graficar: vs. C (ngulo de de rotacin, no rotacin especfica)


Calcular el valor de ajustado mediante la recta de regresin (LR).

= 0 + b [%P/V]
Tabla 5-22 Comparacin de los valores de experimentales y ajustados

Concentracin (%P/V)
Blanco
0,5
1,0
1,5
3,0

(exp erimental )

23

( ajustado )

Clculo de la concentracin de la muestra por interpolacin matemtica


mediante una recta de regresin (y = a + bx)
0 ks C
0
CM M
ks

0 = ngulo de rotacin del solvente (a)

M = ngulo de rotacin de la muestra (y)


ks = pendiente, sensibilidad de calibracin (b)
CM = concentracin de la muestra en % P/V (x)

Determinacin del contenido de lactosa en la leche (expresado como % P/P)


Segn el valor de

[ ] t que indican tablas.

[ ] tDlactosa = +52.4 + 0.072 (20 - t)


Nota: [

CM =

Temperatura para C = 5% P/V

t
] D : No cambia con la concentracin.

100 . a
[ ] tD . l

[ ] tD : corregido a T de laboratorio

Calcular el porcentaje en peso de lactosa en la muestra considerando el peso y volumen de aforo


de leche utilizada:

%( P / P ) lact . =

Plactosa
x100
Pmuestra

Clculo del porcentaje de error:

%ERROR =

[ ] tablas - [ ] exp .
[ ] tablas

. 100 =

Clculo Estadstico:
Tabla 5-23 Clculo estadstico

Grupo No.
1
2
3
4

%P/P lactosa

24

S S( b ) ks C
S m S ( b ) 3 ( b )

y/x

Cm

(y
i 1

y i ) 2

n2
S m Sbl
Ks

Clculo Estadstico:

Media de la rotacin especfica para todas las soluciones


Media de la concentracin de la muestra
Desviacin estndar n 1 para de las soluciones y para la muestra
Reportar el valor de la muestra X + n 1

Tabla 5-24 Resultados

[ ] exp
% Error
Marca de la leche analizada
Contenido de lactosa en % p/p
% p/p n-1
Sensibilidad de calibracin
Lmite de deteccin

4.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________

4.7

BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 201211.
[2]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 318339.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 375388.
[4]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6-11.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 471 490.
[6]. WINGROVE, A. y CARET, R. (1981). Qumica Orgnica. Harla. Mxico. p. 205211,
218223.
[7]. WEAST Robert; CRC Handbook of Physics 49th (1968)

25

Prctica N:

INTRODUCCIN A LA ESPECTROFOTOMETRA

CONTROL INSTRUMENTAL FOTOMTRICO

5.1

OBJETIVOS
Examinar y operar un espectrofotmetro UV - VIS
Conocer los procedimientos para evaluar el desempeo del espectrofotmetro
Determinar las posibles causas de error en una medicin espectrofotomtrica

5.2

TEORA

Fundamento
Dentro de los requerimientos para el buen desempeo de un Laboratorio de Qumica Analtica,
ocupa un lugar preferencial el tipo de instrumento utilizado en la deteccin y cuantificacin de los
parmetros que se analizan y el control de su ptimo funcionamiento. El espectrofotmetro UV Vis. constituye el instrumento ms utilizado en el Laboratorio, ya que la mayora de las
determinaciones se llevan a cabo colorimtrica o espectrofotomtricamente. Aunque los aparatos
de medicin que existen en el mercado son sometidos a controles de calidad por sus fabricantes,
el intenso uso y el envejecimiento deterioran su rendimiento, dando lugar a errores analticos de
origen instrumental que, aunque sea parcialmente, se pueden detectar y corregir.
En el laboratorio se debe llevar un registro de todo el instrumental, donde deben constar todos los
controles que se realizan, los desperfectos que se producen, las reparaciones que se efectan, los
responsables del servicio tcnico, etc. de manera de constituirse en una documentacin vlida que
respalde el accionar profesional.

NOMENCLATURA ESPECTROFOTOMETRICA
Rango Espectral: Intervalo de longitudes de onda en el cual el instrumento puede realizar
medidas de absorbancia o transmitancia. Abarca habitualmente el UV y el visible.
Exactitud de Longitud de Onda: diferencia entre la longitud de onda que indica el seleccionador
y la longitud de onda real. Es el corrimiento de longitud de onda y se mide en nm.
Precisin de longitud de onda: Es la capacidad del instrumento de reproducir la longitud de onda
elegida. Se mide tambin en nm.
Estabilidad de lectura, deriva y ruido: Es la variacin del cero electrnico del instrumento en
funcin del tiempo. La deriva es una inclinacin hacia una lectura ms alta o ms baja durante un
perodo de tiempo y el ruido es la falta de estabilidad.
Abs

Abs

Tiempo

Tiempo

Bajo ruido y baja deriva

Baja deriva y alto ruido

26

Abs

Abs

Tiempo

Tiempo

Alta deriva y bajo ruido

Alta deriva y alto ruido

Exactitud fotomtrica: Exactitud de las medidas de absorbancia, es decir, diferencia entre la


absorbancia real y la absorbancia medida de una solucin.
Precisin fotomtrica: Repetitividad de las medidas de absorbancia.
Sensibilidad o linealidad fotomtrica: es la capacidad de respuesta lineal de un espectrofotmetro a
concentraciones crecientes o decrecientes de una sustancia que cumpla la ley de Beer a distintas
longitudes de onda.
Ancho espectral de rendija (AER): es el intervalo de longitudes de onda que emerge del
monocromador cuando seleccionamos un valor de longitud de onda que va a recibir la mxima cantidad
de luz. Se expresa en nm.
Ancho espectral de banda o ancho de banda (AEB): es el intervalo de longitud de onda que recibe el
50 % del mximo de intensidad de radiacin. Generalmente es la mitad del AER y se mide en nm.
(Figura 2)
Intensidad
A

Longitud de onda
Figura 2: A: longitud de onda seleccionada
DE: ancho de rendija
BC: ancho de banda
Luz parsita: es toda radiacin electromagntica de longitud de onda distinta a la seleccionada por el
monocromador que alcanza el detector y por lo tanto queda registrada por el instrumento.

Consulta

Precisin y exactitud
Seales y ruido: relacin entra seal y ruido, fuentes de ruido en los anlisis
instrumentales.
Linealidad, repetibilidad o repetitividad.

27

5.3

METODOLOGA

Materiales y reactivos

Espectrofotmetro UV - VIS
Balones aforados
Pipetas
Cubetas limpias
Agua destilada
Dicromato de potasio
Azul de bromotimol

Nitrato de cobalto
Cianohemoglobina
cido Sulfrico 0.37N
cido perclrico 0.001 N
P- Nitrofenol
Nitrito de sodio

PROCEDIMIENTO
5.3.2.1

Control de la exactitud de la longitud de onda.

El mtodo ms exacto consiste en reemplazar la lmpara del instrumento por una fuente de
energa radiante que emita fuertes lneas a determinadas longitudes de onda. Son tiles
para este fin: a) Lmpara de vapor de mercurio (313, 365, 405, 436 y 546 nm) y b) Lmpara
de hidrgeno y de deuterio (486 y 656 nm.)
Un segundo mtodo consiste en la utilizacin de filtros de tierras raras como el xido de Holmio (361,
418, 453, 536 y 636 nm.) y el Didimio ( 573, 586, 685, 741 y 803 nm.).
En caso de no contar con estos filtros o sus soluciones se recomienda usar el mtodo del punto
Isosbstico. Esta es una caracterstica que presentan ciertas sustancias con ismeros estables cuyos
espectros en solucin equimolecular cida y alcalina se cortan en una longitud de onda caracterstica.
La importancia del mtodo resulta en que el punto isosbstico es independiente de la concentracin
absoluta de la sustancia y de la temperatura entre 4 y 45 C. La experiencia consiste en determinar los
espectros de absorcin-emisin de alguna de las sustancias que luego se mencionan, en sus formas
cidas y alcalinas. El punto isosbstico se define grficamente tal como muestra la figura siguiente.
Espectro del rojo Congo

Realizar el espectro de barrido de las soluciones cidas y alcalinas de las siguientes soluciones:
a) Dicromato de Potasio (29.5 mg/l) Pto. Isosbstico: 339, 445 nm.

b) Azul de bromotimol ( 25 mg/l) Pto. Isosbstico: 325 y 498 nm.


c) Rojo Congo (14 mg/l) Pto. Isosbstico 541 nm.
Puede tambin utilizarse una solucin absorbente con un pico de mxima absorcin como el
permanganato de potasio ( = 526 nm)
5.3.2.2 Control de la exactitud fotomtrica.

Se pueden utilizar filtros comerciales de absorbancia conocida y certificada a longitudes de


onda dadas o especficas por ejemplo los filtro de Didimio u Oxido de Holmio o neutros. En
su ausencia se puede recurrir a soluciones con absorbancia conocida a determinadas
longitudes de onda. Estas deben cumplir con la condicin de presentar un amplio pico
mximo de absorbancia, alto coeficiente de extincin molar, buena solubilidad, ser estables
e independencia de la absorbancia con la temperatura.
28

a) Dicromato de Potasio en cido Perclrico 0,001 N a 340 nm


b) Nitrato de Cobalto en cido Sulfrico 0.37 N a 510 nm
c) Cianmetahemoglobina a 540 nm
En caso de hallarse errores en la exactitud que superen los lmites de aceptabilidad se deben realizar
correcciones pues generalmente en esta zona del espectro se llevan a cabo lecturas absolutas para
determinacin de enzimas por mtodos cinticos.
Factor de correccin:
F

Abs. referencia
100
Abs. hallada

Este factor se puede utilizar siempre que el error en la medida de absorbancia no supere el
10 % ya que en este caso es imprescindible recurrir al servicio tcnico.
5.3.2.3

Control de la precisin fotomtrica:

Tomar una alcuota, por ejemplo la solucin de Dicromato de Potasio empleada en el punto anterior, en
10 porciones y medir los valores de absorbancia de cada una cuidando de colocar la cubeta en la
misma orientacin. Hallar la media, la desviacin estndar y el coeficiente de variacin. El valor de CV
deber ser inferior a 1 % para cubetas paralelas y 2 % para tubos de fotocolorimetra. Puede realizarse
la misma experiencia con soluciones de Nitrato de Cobalto para la zona de los 510 nm o con soluciones
de Sulfato de Cobre a 650 nm.
5.3.2.4
Control de la linealidad fotomtrica.
El mtodo ms prctico consiste en preparar diluciones de determinadas sustancias y ver la respuesta
del instrumento. Se recomienda medir la linealidad a ms de una longitud de onda, sobre todo de
aquellas sustancias utilizadas en los mtodos de deteccin Qumica.
a)
b)
c)
d)
e)

Dicromato de Potasio Acido a 340 nm.


p - Nitrofenol a 405 nm.
Nitrato de Cobalto a 510 nm.
Cianmetahemoglobina a 540 nm.
Permanganato de potasio 526 nm

Se pueden obtener situaciones como las de los siguientes grficos.

Grfico A

Grfico B

29

Grfico C

Grfico D

Grfico A: Recta ideal


Grfico B: Buena linealidad. Diferencia de exactitud de la absorbancia.
Grfico C: Linealidad aceptable hasta aproximadamente 1.000 UA; luego disminuye
Grfico D: Mala linealidad en todo el rango de absorbancia (mala sensibilidad: no registra
cambios significativos de absorbancia al cambiar la concentracin)
5.3.2.5

Control de la estabilidad de las lecturas.

La deriva y el ruido deben comprobarse y registrarse al menos una vez al mes por medio de
la medicin de las variaciones de ABS cada 30 segundos, durante 15 minutos, tanto para un
blanco de agua de 0,000 UA como para una solucin de Dicromato de ABS
aproximadamente a 0,400 UA a 340 nm. Un instrumento que tenga alto ruido o deriva no
debe usarse para ensayos cinticos y cuando se usa para mtodos colorimtricos punto
final con Estndares debe tenerse cuidado con el intervalo de tiempo entre la primera y la
ltima lectura de absorbancia.
5.3.2.6

Control de cubetas.

a) En caso de trabajar con ms de una cubeta se debe verificar la homogeneidad de


las mismas. Por ejemplo, llenadas con Dicromato y llevadas en forma arbitraria a
ABS = 0,400 no deben diferir entre si en una cantidad mayor de 0,004 unidades
de absorbancia. Realizar la prueba a 340nm.
b) Si el instrumento que se usa tiene un porta cubetas con ms de una posicin
variando la ubicacin de la misma cubeta en el carro, no debe diferir la
absorbancia en 0,002 unidades en 0.400 UA (0.400 + 0.002 UA).

5.3.2.7

Control de luz parsita.

Se puede medir introduciendo en el aparato una muestra que tenga una transmitancia del 0 %; por lo
tanto, cualquier radiacin detectada e indicada en el lector corresponder a luz espuria.
Ajustar cuidadosamente el 100 % T con agua destilada a 340 nm. Luego medir la transmitancia
aparente de una solucin de NO2 Na (50g/l). El valor mximo admisible de T es de 1.0 %.

30

5.4

TABLA DE DATOS

Tabla 6-25 Espectros de absorcin de las formas cida y bsica del indicador
*Longitud de onda ()

Absorbancia
Forma cida

Forma bsica

320
325
330
335
340
345
350
...
550
*Variar la longitud de onda en intervalos de 5 nanmetros y de 1 nanmetro o menos cerca al punto isosbstico

Tabla 6-26 Control de la estabilidad de lectura fotomtrica


Determinacin

Absorbancia

Determinacin

x1
x2
x3
x4
x5
x6

Absorbancia

x7
x8
x9
x10
x

n-1
CV

Tabla 6-27 Control de ruido y deriva:


Agua destilada
Tiempo (seg.)
Absorbancia

Solucin de Dicromato
Tiempo (seg.)
Absorbancia

0
15
30
45
...
900

0
15
30
45
...
900

Tabla 6-28 Control de cubetas


N de cubeta

Absorbancia.

1
2
3
4
Rango
Tabla 5-5 Control de linealidad fotomtrica
Estndar

Absorbancia

0
1
2
3
4
5
y = ax + b
Coeficiente de correlacin (r2 y
r)
31

R2 =

R=

5.5

CALCULOS y RESULTADOS

Clculos de control

Control de la longitud de onda (Incluir grfico de espectro de barrido)


Control de la exactitud fotomtrica.- Determine el factor de correccin de las mediciones de
absorbancia

Abs.referencia
100
Abs.hallada

Control de la precisin fotomtrica.- Determine los valores de la desviacin estndar y coeficiente


(ver clculo estadstico)
Control de la linealidad fotomtrica.- Incluir grfico de correlacin lineal y ecuacin de la recta
Control de la estabilidad de las lecturas.- Incluir grfico de la deriva y ruido
Control de cubetas
Control de luz parsita

Tabla 5-6 Control de calidad de un espectrofotmetro UV - VIS


Marca:
Modelo:
Fecha de Verificacin:
Control de la longitud de onda
Sustancia utilizada
Punto isosbstico
Control de la exactitud fotomtrica
Sustancia utilizada:
Factor de correccin
Control de la precisin fotomtrica
Desviacin estndar (n-1)
Coeficiente de variacin (CV)
Control de la linealidad fotomtrica
Ecuacin de la recta (A = Ao + KsC)
Coeficiente de correlacin ( r )
Control de la estabilidad de las lecturas1
Ruido:
Alto
Bajo
Deriva:
Alto
Bajo
Control de cubetas
Precisin2

Control de la luz parsita


Transmitancia de agua destilada
Transmitancia aparente de la solucin de NO2Na

Clculo estadstico

Clculo de la Desviacin Estndar (n-1) de 10 medidas sucesivas en el control de la


precisin fotomtrica.
N

S n 1

(x
i 1

x) 2

N 1

Realizar el grfico respectivo con una solucin de dicromato de potasio con 0.400 UA y segn resultados marcar un X donde
corresponda
2
Precisin determinada en diferentes posiciones del carro porta cubetas

32

Clculo del Coeficiente de variacin (CV) para las 10 medidas.


S
100%
x
Clculo de la sensibilidad de calibracin (Ks) y del coeficiente de correlacin de la
ecuacin de la recta.
Clculo de la precisin en el control de cubetas.

CV

5.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________

5.7

BIBLIOGRAFA
[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 153161, 318
333.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 5259, 142155, 160164.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 211, 103115, 146149, 151155, 163167, 177
181.

33

Prctica N:

6 FOTOCOLORIMETRA
6.1

OBJETIVOS
Realizar determinaciones colorimtricas mediante el empleo de tubos de Nessler y el colormetro
de Duboscq.
Determinar el funcionamiento del espectrofotmetro
Establecer la longitud de onda de mxima absorbancia del KMnO 4 en solucin.
Obtener los siguientes grficos:

A vs c
A vs (para el estndar tres)
A vs (para todos los estndares a 530 y 620 nm ; dos grficos)
%T vs c

Determinar el contenido de manganeso en una muestra de suelo

6.2

TEORIA

Fundamento
El manganeso presente en el suelo se extrae mediante una fusin con KHSO 4, luego por
oxidacin con peryodato de potasio, el color resultante del permanganato de potasio obtenido se
compara con estndares y se determina su absorbancia a una longitud de onda de 526 nm donde
se produce su mximo de absorcin

Consulta

Fundamento de la absorcin molecular de la radiacin electromagntica por qu las sustancias


presentan coloracin?
Definicin de Absorbancia y Transmitancia
Diseo y funcionamiento del colormetro de Duboscq, fotmetro de filtro.
Mtodos de medicin de la absorcin de la radiacin:
a) Mtodo de las series patrn
b) Mtodo de compensacin

6.3

METODOLOGA

Materiales y Reactivos

Tubos de Nessler
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Bao de agua
KMnO4 0.1 N

34

KIO4
KHSO4
H2SO4 0.25N
H3PO4 0.25N
Mezcla cida (H2SO4 + H3PO4)
Agua estabilizante (mezcla
cida+0.1gKIO4)

Procedimiento
6.3.2.1

ESTNDARES

Preparar una serie de estndares como se indica en la tabla 6 1


6.3.2.2

REALIZACINDE LECTURAS:

Comparar visualmente el juego de estndares en los tubos Nessler, comparar la muestra


obtenida con estos estndares.
En el espectrofotmetro, calibrar a 526nm de longitud de onda y medir la absorbancia y/o el
porcentaje de transmitancia de los estndares y muestra.

6.3.2.3

MUESTRA

Preparar la muestra de suelo segn las siguientes instrucciones


Pesar (exactamente) en balanza analtica alrededor de 0,1g de suelo, pasar a un tubo de ensayo
pyrex seco y agregar 0,5g de KHSO4, mezclar y fundir en un mechero.
Calentar con 5ml de H2SO4 0,25 N en bao Mara, filtrar y luego lavar con 5ml de mezcla cida.
Agregar 0,25g de KIO4, llevar a ebullicin por 30 segundos en un mechero SIN DERRAMAR LA
MUESTRA.
Calentar en bao mara por 15 minutos y diluir a 50,0ml con agua estabilizante. El color resultante
comparar con los estndares. De ser necesario hay que realizar diluciones.
Hacer lecturas con el estndar ms cercano en el colormetro de Duboscq, luego determinar la
absorbancia o la transmitancia de la muestra a las longitudes de onda de 530 y 620nm en el
fotocolormetro y, en el espectrofotmetro realizar las lecturas a 526 nm

6.4

TABLAS DE DATOS

Tabla 7-29 Preparacin de los estndares de trabajo

Estndares
0
1
2
3
4

ml. KMnO4 0,001N


0
6
12
18
24

ml. H2O estabilizante


50
44
38
32
26

Tabla 6-2 Valores de absorbancia y transmitancia para los estndares y muestra a diferentes
longitudes de onda

St.

A530

T530

A620

Espectrofotmetro

T620

Espectrofotmetro

0
1
2
3
4
M

35

Tabla 6-3 Valores de absorbancia y transmitancia para el estndar tres a diferentes longitudes
de onda

nm
420
470
530
620
670

6.5

Estndar 3
%T

CALCULOS Y RESULTADOS

Absortividad molar
Tabla 6-4 Clculo del coeficiente de absortividad molar y absortividad especifica a cada
longitud de onda

Estndar 3
(nm)
420
470
530
620
660

Absortividad molar
(mol.L-1.cm-1)

Absortividad especfica
(mg.L-1.cm-1)

Tabla 6-5 Clculo de absortividad a una longitud de onda de 535nm (o la ms cercana)

St.

(535nm)
Absortividad Molar

0
1
2
3
4

Concentracin de los estndares:


Tabla 6-6 Clculo de la concentracin de los estndares

Estndar

g Mn/ml

g
KMnO4/ml

ppm Mn

0
1
2
3
4
5

36

ppm
KMnO4

ppm MnO2

Concentracin de Mn en el suelo, expresado:


a.
b.
c.

Como % de Mn y ppm de Mn, ppm de KMnO4, ppm MnO2


En meq de Mn /100g de suelo.
Suponiendo una capa arable de 15cm de espesor y la densidad del suelo = 2,65 g/cm 3;
expresar en Kg. de Mn por hectrea de suelo.

Tabla 6-7 Clculo de la concentracin de Mn en la muestra

CONCENTRACIN

COLORIMETRO
DE
DUBOSCQ

ESPECTROFOTMETRO

Mn (%)
Mn (ppm)
KMnO4 (ppm)
MnO2 (ppm)
Mn (meq/100g suelo)
Mn (Kg/Ha suelo)

Clculo Estadstico

Promedio

Desviacin estndar n 1
% Mn 3 n-1

Tabla 6-8 Tratamiento estadstico

Grupo
1
2
3
4
Promedio
Desviacin estndar
Resultado

6.6

% Mn
x1
x2
x3

Espectrofotmetro

x4
x

n 1
x 2 n 1

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________

6.7

BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 463
471
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 13.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 6678, 84, 142147.
[4]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 103115.

37

Prctica N:

7 ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE
7.1

OBJETIVOS

7.2

Examinar y operar el espectrofotmetro


Determinar hierro en una muestra por el mtodo de la ortofenantrolina
Familiarizarse con los diferentes mtodos que existen para el clculo de la concentracin por
espectrofotometra. Ley de Beer.

TEORA

Fundamento
Tres molculas de ortofenantrolina (1-10 fenantrolina) reaccionan con los iones ferrosos
formando un complejo de color anaranjado que obedece a la Ley de Beer y cuya mxima
absorcin se produce a 510nm. Se utiliza tambin cido ascrbico para reducir el Fe 3+ a Fe2+, o en
su defecto se puede utilizar gotas de clorhidrato de hidroxilamina. Pueden interferir los iones
Cobre, cinc y nquel.

Consulta

7.3

Diseo y funcionamiento de un espectrofotmetro de un solo haz y de doble haz

METODOLOGA

Materiales y reactivos
Espectrofotmetro
Balones aforados
Pipetas
Cubetas limpias
Agua destilada
Fe (NH4)2(SO4)2. 6H2O (Sal de Mohr)
Buffer de pH 4-5 (pesar 16,5g de NaOAc, aadir 11,4ml de HOAc y aforar 100ml)
Solucin de cido ascrbico 10% sulfito de sodio 5% (no pesar en papel aluminio el sulfito)
Solucin de ortofenantrolina 0.25%

Procedimiento
7.3.2.1

PREPARACIN DE LOS ESTNDARES


A partir de la sal de Mohr preparar una solucin que contenga 1000ug Fe/ml y a partir de
esta una solucin patrn de 10ug Fe/ml.
De esta ltima (solucin patrn), preparar la siguiente serie de estndares indicada en la
tabla

38

Tabla 8-30 Preparacin de los estndares de hierro

St.
0
1
2
3
4
5

ml Soln.
Patrn
0,0
0,6
1,3
2,5
5,0
10,0

ml Ac.
Ascrbico
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5

ml Buffer
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

ml
Ortofenantrolina
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

ml H2O

Vol. Final

12,5
11,9
11,2
10,0
7,5
2,5

15,0
15,0
15,0
15,0
15,0
15,0

Determinar los valores de % de transmitancia y Absorbancia a 510nm de cada estndar y la


muestra en el espectrofotmetro y en el colormetro.

7.3.2.2

PREPARACIN DE LA MUESTRA PROBLEMA

Las muestras disponibles contienen alrededor de 3-6 ppm de Fe (*), hacer los clculos necesarios para
tomar un volumen adecuado de muestra y que las mismas presenten una absorbancia que se
encuentre en la mitad de la curva de calibracin. Las muestras deben recibir el mismo tratamiento que
los estndares, una vez hecho esto determinar la A y %T en los 2 equipos, tanto de los estndares
como en las muestras.
(*)Para los clculos considrese un contenido promedio de 4,5 ppm en las muestras.

7.4

TABLA DE DATOS

Tabla 8-31 Valores de comparativos de absorbancia y transmitancia

St.

g Fe / ml

Espectrofotmetro
Absorbancia
Transmitancia

0
1
2
3
4
5
M

7.5

CALCULOS y RESULTADOS

Solucin patrn
Clculo de la cantidad de sal de Mohr necesaria para preparar la solucin
patrn de 1000g/ ml de hierro.
Concentracin de hierro
Clculo de la concentracin de hierro en los estndares (un solo clculo modelo)

Curva de calibracin
Ajuste de los datos a una recta del tipo: y= a + b x

39

Tabla 8-32 Correccin de los valores de absorbancia

Estndar

Absorbancia
(Shimadzu)
Experimental
Corregido

0
1
2
3
4
5

Coeficiente de absortividad molar y absortividad especifica

Clculo del coeficiente de cada estndar, sacar la media de estos valores adems de y su
media.

Muestra
Clculo de la cantidad de hierro en la muestra por los siguientes mtodos:

Interpolacin grfica
Interpolacin analtica (Recta ajustada A = A0 + KsC)
Clculo de las concentraciones utilizando y comparando con el estndar ms cercano

Tabla 8-33 Clculo de los valores de absortividad especfica

St

g Fe/ml

Molaridad
Fe

___

___

Espectrofotmetro
(l / mg cm) (l / mol cm)

1
2
3
4
x

Clculo estadstico
Clculo de la sensibilidad y lmite de deteccin para el mtodo.
REPORTAR:

% de Fe en el agua potable
Coeficiente
Coeficiente
Reportar todos los resultados como
% de Fe en agua 2 N 1

Tabla 8-34 Clculo estadstico

Mtodo

% Fe
(agua potable)

Espectrofotmetr
o

40

Ks

LD

7.6

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_______________

7.7

BIBLIOGRAFA
[1]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 164170.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 165186, 337347.

41

Prctica N:

8 ANLISIS ESPECTROFOTOMTRICO DE UNA MEZCLA


8.1

OBJETIVOS
Estudiar las aplicaciones de la ley de Beer.
Conocer los mtodos de anlisis de mezclas absorbentes de dos o ms componentes.
Realizar la determinacin simultnea de una mezcla de soluciones de Dicromato y permanganato
de potasio.

8.2

TEORA

Fundamento
La absorbancia total de una solucin a cualquier longitud de onda es igual a la suma de las
absorbancias de los componentes individuales de la solucin. Esta relacin en principio permite
determinar las concentraciones de los componentes individuales de una muestra incluso si existe
solapamiento total de sus espectros, gracias a esto es posible analizar simultneamente una
mezcla de dicromato y permanganato de potasio.
A total = A K2Cr2O7 + A KMnO4

Consulta

8.3

Anlisis de mezclas de sustancias absorbentes: determinacin simultnea de dos o ms


componentes.

METODOLOGA

Materiales y reactivos:
-

Balones aforados de 50 ml
Bureta de 25 ml
Balanza
Espectrofotmetro
Acido sulfrico 0,5M
Agua estabilizante
KMnO4 4,0 x 10-3M en cido sulfrico 0,5M (estabilizada con KIO4)
K2Cr2O7 1,00 x 10-2M en cido sulfrico 0,5M

Procedimiento
8.3.2.1 PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES:
Preparar las soluciones siguientes por disolucin a volumen exacto a partir de las soluciones originales:
Solucin A: En un baln de 50,0ml preparar una solucin 4,0 x 10 -4M de KMnO4 en cido sulfrico
0,5M.
Solucin B: Diluir una porcin de la solucin A con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin C: Diluir una porcin de la solucin B con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin D: En un baln de 50,0 ml preparar una solucin de 1,00 x 10 -3 M K2Cr2O7 en cido
sulfrico 0,5M.
Solucin E: Diluir una porcin de la solucin D con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin F: Diluir una porcin de la solucin E con un volumen igual de cido sulfrico 0,5M.
Solucin G: En un baln de 50,0 ml preparar una solucin que sea 2,0 x 10 -4 M de KMnO4, 5,0 x
10 4 M de K2Cr2O7 y afrese con solucin 0,5M en cido sulfrico.
Solucin problema: diluir la solucin problema a 50,0 ml.
Medir la absorbancia de cada una de las soluciones anteriores, de A hasta G, y la de la disolucin
42

problema, contra cido sulfrico 0,5M como referencia, a 526nm y a 440nm.

8.4

CLCULOS

A partir de las absorbancias medidas de las soluciones A, B y C, calcular la


absortividad molar del KMnO4 y la media de los tres valores a 526 y a 440nm.
Tabla 9-35 Clculo de la absortividad molar del KMnO4 a dos longitudes de onda

Solucin

Vol. Inicial
(ml)

Vol. Final
(ml)

Concent.
(mol /l)

A
526nm

, 526nm
(l /mol cm)

A
440nm

440nm
(l /mol cm)

A
B
C

A partir de las absorbancias de las soluciones D, E y F, calcular la absortividad


molar de K2Cr2O7 y la media de los tres valores a ambas longitudes de onda.
Tabla 9-36 Clculo de la absortividad molar del K2Cr2O7 longitudes de onda

Solucin

Vol. Inicial
(ml)

Vol. Final
(ml)

Concent.
(mol /l)

A
526nm

, 526nm
(l /mol cm)

A
440nm

, 440nm
(l /mol cm)

D
E
F

Para la solucin G, comprese la absorbancia medida a cada una de las


longitudes de onda, con la suma de las absorbancias de los componentes
aislados a las mismas concentraciones: son aditivas las absorbancias con el
margen de error experimental?
Tabla 9-37 Comparacin de de las absorbancias de la solucin G, con la suma de las
absorbancias de los componentes.

A
526nm

A
440nm

Solucin G
(Solucin B + Solucin E)

Calcular la concentracin de cada uno de los componentes en la muestra


problema (despus de diluir a 50,0 ml para la medida); informar los resultados
en concentraciones molares de KMnO4 y de K2Cr2O7 y tambin en ppm de
manganeso y de cromo.
Tabla 9-38 Clculo de la concentracin de la solucin problema

Concentracin
KMnO4 (mol / l)
K2Cr2O7 (mol / l)
Mn (ppm)
Cr (ppm)

Solucin Problema

43

8.5

DISCUSIN Y CONCLUSIONES

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
___________________________

8.6

BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G. (1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 491
493, 671674.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1011.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 189190.
[4]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 325328.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 112115.

44

Prctica N:

9 DETERMINACIN DEL pH de UNA SOLUCIN REGULADORA


9.1

OBJETIVOS
Determinar espectrofotomtricamente el pH de una mezcla reguladora.

9.2

Fundamento
Las absortividades de las formas cida y bsica conjugada de un indicador se miden a dos
longitudes de onda diferentes. En una solucin reguladora problema se determina la
concentracin de cada forma a las dos longitudes de onda; la concentracin del in hidronio se
puede calcular a partir de esos datos.
La relacin entre las dos formas de verde de bromocresol en solucin acuosa se puede describir
por el equilibrio:

In- + H3O+

HIn + H2O
Amarillo

Para la que: K a

azul

1.6 x10

H O In

HIn

La medida espectrofotomtrica de In- y HIn- permite el clculo de H3O+.

9.3

Consulta.
Intervalo de pH de cambio de color del indicador
Constantes fsicas y qumicas del verde de bromocresol

9.4

METODOLOGA

Materiales y reactivos
-

Balanza
Espectrofotmetro
Buretas de 50,0ml
Balones de 100,0ml
HCl 0,4F
NaOH 0,4F
Verde de bromocresol

Procedimiento
9.4.2.1

PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES

Verde de bromocresol. Disolver 100mg de indicador en 1,45ml de NaOH 0,01N y luego diluir
hasta 100ml con agua destilada.
HCl 0,4F. Diluir unos 7ml de HCl concentrado hasta alrededor de 200ml
NaOH 0,4 F. Disolver unos 3g de NaOH en 200ml de destilada o desionizada.
45

9.4.2.2

DETERMINACIN DE LOS ESPECTROS DE ABSORCIN INDIVIDUALES

Transferir alcuotas de 1,0ml de la solucin madre del indicador verde de bromocresol a


dos matraces aforados de 25,0ml

Aadir a uno 5,0ml de HCl 0,4 F, y al otro aadir 5,0 de NaOH 0,4 F.
Diluir cada uno hasta el enrase, mezclar bien.

Obtener los espectros de absorcin, entre 400 y 650nm para las formas cida y bsica
conjugadas del indicador, utilizando agua como blanco.

Registrar los valores de las absorbancias a intervalos de 10nm, y si es necesario a intervalos


menores para definir los mximos y los mnimos.
Calcular la absortividad para cada especie a las longitudes de onda que corresponden a sus
mximos de absorcin.

9.4.2.3

DETERMINACIN DEL pH DE UNA SOLUCIN REGULADORA PROBLEMA

Transferir una alcuota de 1,0ml de la solucin madre del indicador verde de bromocresol a un
matraz aforado de 100,0ml
Aadir 20,0ml de la solucin reguladora problema.
Diluir hasta el enrase y medir la absorbancia de la solucin diluida a las longitudes de ondas para
las que se calcularon los datos de absortividad.

TABLA DE DATOS
Tabla 9-1 Espectros de absorcin de la forma cida del indicador

Longitud de onda ()
400
410
420

650

% Transmitancia

Absorbancia

Tabla 10-2 Espectros de absorcin de la forma bsica del indicador

Longitud de onda ()
400
410
420

650

% Transmitancia

CLCULOS Y RESULTADOS
9.4.4.1

Calcular el pH de la solucin reguladora.

46

Absorbancia

DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p.
[2]. LIDE, D. (2006). Handbook of Chemistry and Physics 86ta. Edicin. CRS Press. p.360 3-61, 8-16.
[3]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1011.
[4]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 312317.
[5]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 189190.
[6]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 325328.
[7]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico.
p. 788789.
[8]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 112115.

47

Prctica N:

10 DETERMINACIN DE LA COMPOSICIN DE COMPLEJOS


10.1 OBJETIVOS

Estudiar los campos de aplicacin del anlisis por absorcin.


Conocer los mtodos espectrofotomtricos para la determinacin de complejos.

10.2 TEORA
Fundamento
La tcnica de la razn molar es un mtodo en el cual se puede determinar el nmero de
ligandos en un complejo con el in central. Se prepara una solucin de concentracin conocida
del in central y se le agrega en pociones el formador de complejo; despus de cada adicin se
determinan las absorbancias hasta que no aparezca aumento alguno en ellas, lo que, por lo
general, dar una curva del tipo indicada por la lnea continua de en la figura 1. Sin embargo, si
el complejo se disocia considerablemente, la curva obtenida, indicada por la lnea de trazos
vara apenas en su pendiente, haciendo casi imposible la interpretacin de los resultados.
Con el mtodo de las variaciones continuas, el nmero de moles presentes se mantiene
constante. Esto es, si se mezclan 2ml de una solucin (0.01M) y 8ml de otra de igual
concentracin, todas las otras determinaciones debern tener siempre un volumen total de
10ml, por ejemplo 3 y 7, 6 y 4, etc. En este caso se traza una grfica de la absorbancia en
funcin de la fraccin molar del in central. En la figura 2 se muestra el tipo de curva
correspondiente. La absorbancia aumenta a medida que se forma ms complejo alcanzando un
mximo cuando se llega a la relacin estequiometria, descendiendo luego en virtud de la
insuficiente cantidad del in formador de complejo.

Fig. 2
Fig. 1

M + nL

MLn

Consulta

Mtodos de clculo: Razn Molar, Variaciones Contnuas

48

10.3 METODOLOGA
Materiales y Reactivos
-

Espectrofotmetro
Balanza analtica
Balones de 50,0ml
Bureta
cido sulfrico 6M
Hidroquinona
cido clorhdrico
Sal de Mohr

Procedimiento
10.3.2.1 PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
Disolucin de reserva A: Ion ferroso 0,01 M. Disolver 3,92g de FeSO4(NH4)2SO4.6H2O para anlisis en
agua, aadir 1 2ml de cido sulfrico 6M y diluir a un litro.
Disolucin de reserva B: 1,10 fenantrolina 0,01 M. Disolver 1,98g del monohidrato en la menor
cantidad posible de etanol y diluir con agua a un litro.
Hidroquinona en disolucin acuosa al 1%.
cido clorhdrico 0,1M.
MTODO DE LAS VARIACIONES CONTINUAS (tabla 10-1)
Preparacin de las soluciones:
Utilizando matraces volumtricos preparar una disolucin exacta 1:10 de la solucin A y de la B;
etiquetar estas soluciones con C y D, respectivamente.
Utilizando buretas o pipetas graduadas, preparar en balones de 50,0ml las mezclas siguientes:
8,0ml de C + 2,0ml de D
6,0ml de C + 4,0ml de D
4,0ml de C + 6,0ml de D
3,0ml de C + 7,0ml de D
2,5ml de C + 7,5ml de D
2,0ml de C + 8,0ml de D
1,5ml de C + 8,5ml de D
1,0ml de C + 9,0ml de D
2,5ml de C + 20,0ml de D

Aadir a cada solucin 1,0ml de hidroquinona al 1% y 0,5ml de cido clorhdrico 0,1M y diluir con
agua a 50,0ml. Homogeneizar las soluciones y dejarlas en reposo durante una hora a la
temperatura ambiente.

Medida:
Poner el espectrofotmetro a 508nm y determinar la absorbancia de las soluciones anteriores en la
forma habitual, utilizando agua como blanco.
Representacin grfica y clculos:
Con los datos obtenidos para las soluciones 1 a 8, representar la absorbancia en eje de
ordenadas contra la fraccin molar de D en abscisas (figura 2). Trazar una curva continua que
recoja los puntos experimentales. Extrapolar los segmentos de la curva a un punto de
interseccin y anotar el valor de la absorbancia en este punto; cmo se compara con la
absorbancia medida para la solucin 9?
Deducir la composicin del complejo expresndolo en nmero de moles de 1,10 fenantrolina que
reacciona con un mol de Fe++.
Utilizar la absorbancia de la solucin 9 y la absorbancia de la solucin que en la serie anterior
corresponde a la composicin del complejo para calcular la constante de formacin del complejo
fenantrolina-ferrosa. Comparar el valor calculado con el valor tomado de la literatura. Explquese
la posible discrepancia.
49

MTODO DE LA RAZN MOLAR (tabla 10-2)


Preparacin de las soluciones:
En todos los balones de 50,0ml que forman la serie de nueve, poner 2,0ml de la solucin C y
aadir despus a cada uno respectivamente, 2.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0, 10.0, 12.0 y 15.0ml de la
solucin D.
Aadir a todos y a cada uno de los matraces 1,0ml de hidroquinona al 1% y 0,5ml de cido
clorhdrico 0,1M y diluir despus hasta el enrase con agua destilada, mezclando bien las
soluciones. Dejar en reposo las soluciones durante una hora.
Medida:
Medir las absorbancias de las disoluciones a 508nm, contra agua.
Representacin grfica y clculos:
Representar la absorbancia en funcin del nmero de moles de 1,10 fenantrolina por mol de Fe ++
(Figura 1: Con este fin puede tomarse el volumen de la solucin que se ha aadido por cada
volumen de solucin C, en lugar de utilizar las concentraciones molares; por qu?).
En la grfica, deducir el nmero de moles de 1,10-fenantrolina que reaccionan con un mol de Fe ++
para formar el complejo.
Utilizar la absorbancia de la ltima solucin (15ml de D / 2ml de C) y la absorbancia de la solucin
que corresponde a la relacin molar en la reaccin para calcular la constante de formacin del
complejo. Comparar este valor con el determinado en la parte a y con el que se encuentra en
literatura.
Notas:
Si se van a realizar las partes A y B de este experimento, preparar 100ml de la solucin C y 200 o
250ml de la solucin D. Si solo va a realizarse la parte a, preparar 50ml de la solucin C y 100ml
de la solucin D.
La absorbancia de la solucin 9, que contiene un gran exceso de 1,10-fenantrolina, representa la
conversin completa de Fe++ en complejo. Localizar su posicin en la grfica de la parte a.
La fraccin molar de D=D / (C + D); los volmenes tomados para la preparacin de las
soluciones pueden utilizarse como si realmente fueran concentraciones.

10.4 TABLAS DE DATOS


Tabla 11-39 Mtodo de las variaciones contnuas:

Solucin C
Ml
8.0
6.0
4.0
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
2.5

Solucin D
ml
2.0
4.0
6.0
7.0
7.5
8.0
8.5
9.0
20.0

Hidroq. 1%
ml
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0

HCl 0.1M
Ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

Tabla 11-40 Mtodo de la razn molar:


50

Vf.
ml

Fraccin
Absorbancia
molar de D

Solucin C
Ml
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0

Solucin D
ml
2.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
10.5
12.0
15.0

Hidroq. 1%
ml
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0

HCl 0.1M
ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

Vf.
ml

D/C

Absorbancia

10.5 CLCULOS:
Clculo de la constante de formacin de complejos:
Deducir la ecuacin considerando que:
M + nL = MLn

10.6 RESULTADOS
Con los datos obtenidos determinar la composicin del complejo hierroortofenantrolina por los dos mtodos
10.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________

10.8 BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 491
501, 674676.
[2]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 1315.

51

Prctica N:

11 TITULACIONES FOTOMETRICAS
11.1 OBJETIVOS

Examinar y operar adecuadamente el espectrofotmetro y el proceso de titulacin


fotomtrica.
Titular fotomtricamente vinagre con NaOH utilizando como indicador el p-nitrofenol.

11.2 TEORIA
Fundamento
En el sistema estudiado, el indicador p-nitrofenol en medio bsico (>7,6), absorbe fuertemente la
radiacin de 410nm permitiendo la titulacin de un cido dbil con una base fuerte.

Consulta

Curvas de valoracin fotomtrica tpicas

11.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos
-

Espectrofotmetro
2 buretas
Balones
4 Matraces de erlenmeyer de 250 y
125 ml
Pipetas volumtricas de 1 y 10ml
Vinagre comercial * (2-5% de cido

actico)
NaOH 0,1M
P-nitrofenol (sol.)
Agua destilada
Agitador magntico
Magneto

(*)Preparar la muestra diluyendo 10ml de vinagre en un baln de 100ml y de aqu tomar las
muestras para titular.

Procedimiento
11.3.2.1

METODO CLSICO
Titular 10 ml de vinagre con NaOH 0.1 M utilizando fenolftalena como indicador.
Determinar los ml. de titulante en el punto de equivalencia y calcular la concentracin
de cido. Por el mtodo clsico podemos conocer cul es el volumen crtico, es decir
el volumen de NaOH al que se produce la neutralizacin.

11.3.2.2

METODO FOTOMTRICO
Medir 5 ml de vinagre diluido y agregarlos a la cubeta, aadir 25 ml de agua y 1 ml
de indicador, agregar todos estos reactivos a un matraz erlenmeyer de 125 ml,
conjuntamente con suficiente agua para que el agitador magntico pueda agitar la
solucin. Seleccionar la longitud de onda a 410 nm, y llevar al 100% de la
transmitancia. Agregar desde la bureta NaOH 0.1 M, con incrementos segn
indicaciones, esperar a que la aguja se estabilice y medir el % de transmitancia. Al
llegar al volumen crtico debe agregarse titulante con intervalos de 0.2 ml o menos.

52

Terminar la titulacin cuando la absorbancia comienza una tendencia a estabilizarse. El volumen


mnimo de solucin necesario para medir es 15.0 ml. De lo contrario se debe aadir agua. En el
caso de utilizar el agitador magntico, cada vez que se agregue titulante agitar bien y trasvasar
pequeas cantidades de muestra a las celdas del espectrofotmetro, medir la transmitancia (o
absorbancia o ambos) y luego devolver las muestras al agitador CON CUIDADO DE NO PERDER
MUESTRA y continuar la titulacin.

11.4 TABLAS DE DATOS


Tabla 12-41 Mtodo Clsico

Determinacin

Alcuota de muestra
(ml)

V NaOH 0,1M
Gastado (ml)

1
2
3
4
Tabla 12-42 Mtodo Fotomtrico

NaOH 0,1M
(ml)
0,0
1,0
2,0
-------

%T

A
(leda)

A*
(corregida)

5,0ml vinagre + 1,0ml Sol. Indicador + 10ml de H 2O

V v

corregida Aleida
V

V volumen inicial
v volumen de titulante aadido

11.5 CALCULOS Y RESULTADOS


Clculo de la molaridad y porcentaje de cido actico del vinagre por el mtodo
clsico.
Tabla 12-43 Clculo de la concentracin de cido actico del vinagre

Determinacin

Vol. HO Ac
(ml)

Vol. NaOH 0,1M


(ml)

1
2
3
4
x

LC x

ts
n

53

M
HO Ac

% P/V
HO Ac

Clculo de la molaridad y porcentaje de cido actico del vinagre por el mtodo


fotomtrico, mediante los puntos de equivalencia en los grficos.
GRAFICOS:

Vtit (ml)

Vtit (ml)

A
V

A
V

Vtit (ml)

Vtit (ml)

Tabla 11-4 Resultados de la titulacin

VNaOH
(ml)

%T

11.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES


54

A
V

' ' A
V

_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________

11.7 BIBLIOGRAFA
[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 147148,
153161.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 192194.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 372374.

55

Prctica N:

12 ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA
12.1 OBJETIVO

Determinar la concentracin de cloranfenicol en una forma farmacutica.

12.2 TEORIA
Fundamento
El cloranfenicol es una sustancia que absorbe fuertemente la radiacin UV produciendo un
mximo a 278nm, esto nos permite realizar una valoracin de cualquier forma farmacutica que
declare contener este principio activo (PA).

Consulta

Espectrofotometra UV
Principales especies qumicas que absorben esta radiacin
Aplicaciones de la espectrofotometra UV
O
HO

Cl
NH

Cl

N
O

CLORANFENICOL

[ ]20
D = +18 a + 20

Soluc. 5% en etanol de 95

Solubilidad en agua (25C) = 2.5mg/ ml


56

= 298 (1%, 1cm)


Mol = 323.13 (C11H12Cl2N2O5)
= 278nm

57

12.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos

Espectrofotmetro UV/VISIBLE
Balones aforados
Pipetas
Vasos de precipitacin
Agua destilada
Cpsulas cloranfenicol
Cloranfenicol Q. P.

Procedimiento

Pesar unas 10 tabletas o cpsulas (el polvo) de cloranfenicol de cualquier casa


farmacutica. Obtener el peso promedio de 10 tabletas o cpsulas.
Segn la cantidad de P. A. declarada en la etiqueta por el fabricante, preparar una solucin
de aproximadamente 200ppm de cloranfenicol en agua, filtrar y a partir de esta preparar
una muestra de aproximadamente 20 ppm.
Leer el %T y la A de esta solucin a una longitud de onda de 278nm utilizando agua
destilada o metanol como blanco.

12.3.2.1 PREPARACIN DEL ESTNDAR


Preparar una solucin (100 ml) de cloranfenicol Q. P. de concentracin 200ppm. A partir de
sta preparar un estndar de 20 ppm. Leer el % de T y la A de esta solucin.
Preparar tambin una serie de estndares: 0, 5, 10, 20, 30, 40 ppm

12.4 TABLAS DE DATOS


Tabla 13-44 Mediante comparacin con un solo estndar

Fabricante
Presentacin
Nombre comercial
Cantidad declarada
Pesos promedio de las cpsulas
Cantidad pesada para el anlisis
Volumen de aforo
Alcuota para la dilucin
Volumen final
%T =
A=
Cantidad determinada
Tabla 13-45 Mediante una curva de calibracin:

Estndar
1
2
3
4
M

Cloranfenicol (ppm)

58

Absorbancia

12.5 CALCULOS Y RESULTADOS


Valoracin del cloranfenicol y reportar como mg de cloranfenicol por tableta o
cpsula.
Clculo de % de cloranfenicol encontrado con respecto al contenido declarado.
Deduccin de una(s) frmula(s) que permitan obtener el % de cloranfenicol
utilizando el peso promedio de las cpsulas o tabletas.
Deduccin de una frmula que permita obtener mg de P. A. por tableta o
cpsula.
12.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

12.7 BIBLIOGRAFA
[1]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 173186.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental
5ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 334367.

59

Prctica N:

13 FLUOROMETRIA
13.1 OBJETIVOS

Examinar y operar el Fluormetro COLEMAN modelo 12 C


Determinar tiamina en un preparado farmacutico por el mtodo fluoromtrico.

13.2 TEORIA
Fundamento
El mtodo fluoromtrico para determinacin de vitamina B1 se basa en la oxidacin en medio
alcalino de la tiamina a tiocromo, el cual presenta una intensa fluorescencia azul. Este mtodo se
utiliza principalmente para la determinacin de vitamina B1 en piensos, productos de nutricin
animal, rganos, lquidos biolgicos, alimentos y otros productos naturales, se aplica tambin en el
anlisis farmacutico, particularmente en preparaciones multivitamnicas.
Los resultados tan slo son reproducibles en un 5-10% de acuerdo con la naturaleza de la
muestra.

Consulta

Teora de la fluorescencia
Molculas que presentan el fenmeno de fluorescencia.
Relacin entre la fluorescencia y la concentracin.
Aplicaciones y limitaciones.
Sustancias fluorescentes, sustancias fosforescentes. (mnimo 5 ejemplos)
Diseo y funcionamiento de los instrumentos.

13.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos

Fluormetro Coleman 12 C
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Balanza analtica
Embudos de separacin
Tiamina P. A.
Isobutanol (libre de impurezas fluorescentes)
KCl (Solucin cida):25 g de KCl y 0.85 ml de HCl (37%) (Aforar a 100 ml)

K3 [Fe (CN)6] 1%
NaOH 15%
HCl 0.1 N
Sulfato de sodio anhidro

60

Procedimiento
13.3.2.1 CURVA DE CALIBRACIN

Pesar 0,100g de Tiamina P. A. y disolver en un baln aforado de 100ml, de esta solucin


tomar 1ml y aforar a 250ml, la solucin resultante contiene 4g/ml, de esta coger 1ml y
aforar a 200ml, lo importante es que al final debemos tener una solucin que contenga
0.02g/ml (los aforos debern realizarse con HCl 0.1 N)

La solucin oxidante debe ser preparada en el momento de usar, mezclando 1ml de


solucin de K3[Fe(CN)6] con 24ml de NaOH 15%

Para la preparacin de la curva de calibracin se transfiere a un embudo de separacin


de 500mL un volumen de 20mL de la solucin patrn mas 8mL de KCl mas 3mL de
solucin de ferricianuro de potasio, mezclar por un lapso de 2 minutos, dejar reposar por
2 minutos, posteriormente se aade 20mL de isobutanol, mezclar de forma homognea
por otros 2 minutos evitando que se emulsione, luego dejamos reposar hasta que se
separe la fase orgnica y la fase acuosa, de las cuales la fase acuosa la desechamos a
travs de la llave del embudo, en este paso se debe filtrar a travs de un embudo que
tenga papel filtro con una pequea cantidad de sulfato de sodio anhidro para absorber
los remanentes de la fase acuosa, y finalmente recolectar esta fraccin en un vaso de
precipitacin seco.

De la solucin recolectada en el vaso de precipitacin (fase orgnica) se toman 3, 6 y 9


mL para la preparacin de la curva de calibracin y se afora en un baln de 10mL
usando isobutanol como disolvente.

13.3.2.2 PREPARACION DE LA MUESTRA

Preparar con la ampolla inyectable o el comprimido multivitamnico una solucin de


aproximadamente 0.02g/ml, tomando en cuenta los valores de Tiamina declarados por
el fabricante, (AFORAR CON HCl 0.1 N), de esta solucin colocar 5 ml en un embudo
de separacin y seguir los mismos pasos que para los estndares.
Medir la emisin de fluorescencia y construir la curva de calibracin, para finalmente
interpolar el valor de emisin de la muestra. Calibrar el equipo con isobutanol llevndolo
al cero de emisin.
Asegurarse que los filtros tanto primario como secundario sean los adecuados para la
determinacin de Tiamina.
No exponer las soluciones ms de 15 segundos al paso de radiacin ultravioleta.

13.4 TABLA DE DATOS


Tabla 14-46 Valores de fluorescencia de estndares de diferentes concentracin

Estndar
0
1
2
3
4
Muestra

Concentracin

61

Fluorescencia

13.5 CALCULOS y RESULTADOS


Calcular el contenido de tiamina en la solucin por interpolacin grfica, y por
comparacin con el estndar ms cercano.
Fluorescencia

Fm.

Cm

ug.

Calcular el porcentaje de Tiamina en la forma farmacutica analizada, comparar


con el valor declarado.
13.6 CUESTIONARIO

Resolver el problema #8 del captulo de ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA


MOLECULAR, Skoog-West, Segunda Edicin.

13.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES


_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_____________________________

13.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 3538.
[2]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 308312.
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 201223.
[4]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 381399.
[5]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis.
Continental. Mxico. p. 1116.
62

Prctica N:

14 TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA

14.1 OBJETIVOS

Examinar y operar el complemento TK del espectrofotmetro Spekol 10 para mediciones


turbidimtricas.
Determinar sulfatos en diferentes muestras por diferentes mtodos.
Familiarizarse con los mtodos turbidimtricos y nefelomtricos.

14.2 TEORIA
Fundamento
Los iones sulfato reaccionan con bario formando un precipitado fino de sulfato de bario, el cual
es mantenido en suspensin por medio de una solucin acondicionadora. En estas condiciones se
cumple una relacin lineal entre la turbidez y la concentracin.

Consulta

Fundamento de la turbidimetra y nefelometra, aplicaciones y limitaciones.


Efecto Tyndall.
Diseo y funcionamiento de los instrumentos:

14.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos

Espectrofotmetro
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Cristales de BaCl2.2H2O
Solucin patrn de 100ppm de (SO4)2- (NaSO4)
Reactivo Acondicionante: 75,0g NaCl + 30,0ml HCl (agitar) + 100ml de etanol + 50,0ml de
glicerina, y aforar a 500ml.

Procedimiento
14.3.2.1 PREPARACIN DE LA CURVA DE CALIBRACIN

A partir de la solucin de 100 ppm de sulfatos preparar la siguiente serie de


estndares segn la tabla 14-1

63

Tabla 15-47 Curva de calibracin (turbidimetra)

Estndar
0
1
2
3
4
5

Sol. Patrn
(ml)
0,0
1,0
2,0
4,0
6,0
7,0

Agua destilada
(ml)
10,0
9,0
8,0
6,0
4,0
3,0

Sol. Acondicionante
(ml)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5

Seleccionar a 400nm la longitud de onda en el espectrofotmetro.


Al estndar 0 (blanco) agregar 0.5ml. de solucin de cloruro de bario al 10%, agitar
con una varilla por 30 segundos e inmediatamente pasarla a una cubeta del
espectrofotmetro. Calibrar a 100% T y 0 de absorbancia. Controlar el tiempo que
se ha requerido para realizar la lectura fotomtrica.
Al estndar 1 agregar 0.5ml. de solucin de cloruro de bario al 10%, agitar a igual
velocidad y por el mismo tiempo que para el blanco, y luego determinar el % de T y
la T en el espectrofotmetro, controlando que el tiempo necesario para hacer la
lectura no sea mayor que el requerido para el estndar 0.
Proceder de idntica manera con los dems estndares, asegurando que la
velocidad de agitacin, el tiempo de agitacin, el tiempo para la lectura fotomtrica,
sea reproducible para todos los estndares.

14.3.2.2 PREPARACIN DE LA MUESTRA

AGUA POTABLE
Medir 10,0ml. de agua potable filtrada, aadir 0.5ml. de la solucin acondicionadora
y agregar 0.5ml. de solucin de cloruro de bario al 10%. Proceder de idntica
manera que los estndares y finalmente determinar el % de T.

Tabla 15-48 Preparacin de la curva de calibracin (nefelometra)

Sol. Patrn
(ml)
0,0
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0

Estndar
0
1
2
3
4
5

Agua destilada
(ml)
10,0
9,0
8,0
6,0
4,0
2,0

Sol. Acondicionante
(ml)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5

Proceder de idntica forma que para la turbidimetra, excepto que las lecturas se harn con
el espectrofotmetro
Para la MUESTRA tomar la dcima parte (1.0 ml)

14.4 TABLAS DE DATOS


Tabla 15-49 TURBIDIMETRIA

Estndar
0
1
2
3

Sol. Patrn
(ml)
0,0
0,5
1,0
2,5

V. Final

ppm SO4

10,5
10,5
10,5
10,5
64

%T

Turbidez

4
5
Muestra

5,0
7,5

10,5
10,5

Tabla 15-50 NEFELOMETRIA

Estndar
0
1
2
3
4
5
Muestra
TURBIDEZ:

Sol. Patrn
(ml)
0,0
0,5
1,0
2,5
5,0
7,5

V. Final

ppm SO4

Unidades de
Turbidez

10,5
10,5
10,5
10,5
10,5
10,5

= log ( T o )
T

Graficar vs. C en ambos casos. Interpolar.

14.5 CALCULOS Y RESULTADOS

Concentracin de sulfatos (ppm) en los estndares.


Determinacin de la concentracin de sulfatos en las muestras por interpolacin
grfica con los dos mtodos; ppm de sulfatos en el agua potable.
Clculo estadstico.

14.6 CUESTIONARIO

Indique qu factores deben controlarse en las mediciones turbidimtricas.


Compare las ventajas y desventajas que presente este mtodo turbidimtrico
para determinar sulfatos, con el clsico de gravimetra.
Compare la sensibilidad del mtodo turbidimtrico con el clsico para
gravimetra.
Explique el origen de la aparicin de la turbidez cuando se mezclan las
soluciones de sulfato de hidrazina y de hexametilentetramina (incluir la
reaccin).

14.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES


_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_____________________________________________

14.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 4145.
65

[2]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.


Mxico. p. 250252.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 309313.

Prctica N:

15 TURBIDEZ EN AGUA
15.1 OBJETIVOS

Conocer los mtodos analticos basados en la medicin de la dispersin de la luz.


Determinar la turbidez en agua.

15.2 TEORIA
Fundamento
Este mtodo se basa en la comparacin de la intensidad de la luz dispersada por una muestra bajo
condiciones definidas con la intensidad de la luz dispersada por una suspensin estndar de referencia
bajo las mismas condiciones. Mientras ms alta es intensidad de la luz dispersada mayor ser la
turbidez. La hidracina se utiliza como suspensin patrn para el estndar de referencia. La turbidez de
una concentracin especfica de hidracina se define como 4000 NTU.

15.3 METODOLOGA
Materiales y reactivos

Nefelmetro
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
Sulfato de hidracina
Hexametilentetramina

15.4 PROCEDIMIENTO
15.4.1.1 Suspensin Stock de Turbidez:

Solucin I:
Solucin II:

1,0 g. (NH2)2.H2SO4 (sulfato de hidracina). Aforar a 100 ml. con agua destilada
filtrada.
10,0g. (CH2)6N4 (hexametilentetramina). Aforar a 100 ml. con agua destilada
filtrada.

15.4.1.2 Procedimiento de medicin


Mezclar 5 ml. solucin I y 5 ml. de solucin II. Dejar en reposo por 24 H a 253C. Diluir a
100 ml. con agua y obtener una solucin de 400 NTU.
De la suspensin de 400 NTU tomar 10 ml. y diluir a 100 ml. con agua para obtener una
solucin de 40 NTU.
A partir de la suspensin de 40 NTU, por dilucin preparar las siguientes:

66

15.5 TABLAS DE DATOS


Tabla 2-51 Curva de calibracin (turbidez en agua)

Estndar
0
1
2
3
4
5
Muestra

Susp. 40 NTU
(ml)
0,0
2,5
5,0
10,0
15,0
20,0

V. Final

NTU

20,0
20,0
20,0
20,0
20,0
20,0

0
5
10
20
30
40

%T

TURBIDEZ

15.6 CALCULOS Y RESULTADOS PARA TURBIDEZ EN AGUA

Calcular la concentracin de sulfatos en los estndares.


Calcular la turbidez propia del agua de turbidez, utilizando la siguiente ecuacin.

Muestras de agua:

NTU NTU leido

A B
A

A = Cantidad de muestra tomada


B = Agua aadida

Graficar NTU vs. C


Interpolar el valor de turbidez del agua

15.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES


_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_____________________________________________

15.8 BIBLIOGRAFA
[1]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis
Instrumental. Reverte. Mxico. p. 4145.
[2]. SKOOG, D. y WEST, D. (1975). Anlisis Instrumental 1ra. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 250252.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana.
Mxico. p. 309313.
[4]. APHA (1993). Standard Methods. 20th. Edition

67

ANEXOS
TABLAS Y NOMOGRAMAS

68

69

70

71

NOMOGRAMA

72

NORMAS BSICAS PARA EL LABORATORIO DE ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL


1. La entrada al laboratorio es restringida al personal del laboratorio o personal autorizado
2. Los estudiantes pueden ingresar al laboratorio hasta mximo 10 minutos despus de la hora,
pasado ese tiempo ningn estudiante entra o sale del laboratorio sin autorizacin.
3. Material para el laboratorio:
a.
b.
c.
d.
e.

Mandil (por alumno)


Material requerido por grupo (se indicar adecuadamente)
Material de seguridad
Gua de prcticas de laboratorio (por alumno)
Calculadora con funcin de regresin lineal

4. Calificacin:
a. Los 6 puntos de laboratorio se distribuyen as: un punto (2) para la evaluacin de final
del semestre; dos (4) puntos entre informes y pruebas escritas.
5. Semanero: sta persona cumplir las siguientes funciones:
a. Organizar al grupo para mantener el orden y la limpieza del laboratorio.
b. Retirar el material a utilizar, verificar su estado y entregarlo en el mismo estado al
final de la prctica.
6. Se aplicarn las sanciones adecuadas si se rompen las normas del laboratorio,
especialmente en lo referente a la seguridad, el orden, atrasos y limpieza de material y del
laboratorio.
7. Las faltas a clase prctica se justificaran si hubiesen motivos de fuerza mayor, debidamente
respaldadas por comunicado oficial del decanato.
8. Queda estrictamente prohibido fumar, beber o comer en el laboratorio.

73

(FORMATO PROPUESTO PARA INFORME)

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR


FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS
LABORATORIO DE ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL II
PRCTICA N:___________
Fecha de entrega: __________________
TEMA: ____________________________________________________________________
OBJETIVOS:

INTEGRANTES:

GRUPO N: ________
DIA: ______________
HORA: ____________

1. REPORTE DE DATOS:
1.1. Datos experimentales:
Ttulo de la tabla

Elaborado por: Apellido de un integrante del grupo y otros.

2. CLCULOS Y RESULTADOS:
2.1. Clculos Modelo:
A+B=C+D
= N +
Y = ax + b
2.2. Presentacin de Resultados:
Ttulo de la tabla

Elaborado por: Apellido de un integrante del grupo y otros.

3. CURVA DE CALIBRACIN:

74

Estadsticos principales y ejemplo de clculo de cada uno, no olvidar las UNIDADES que
acompaen a los resultados si estos tuvieren
_

x : ________

CV: ________

LOD:________

y/x: _________

LOQ: ________

r : ________

Ks: _________

LC: ________

4. DISCUSIN:
El propsito de la discusin es interpretar y comparar los resultados obtenidos.
La discusin debe ser puntual y enfocarse en las ventajas y desventajas del trabajo experimental.
Se debe relacionar el fundamento terico aprendido en la clase terica con lo aprendido en la
clase experimental. Brevemente se describe las implicaciones lgicas de los resultados. Se
sugiere mejoras para obtener mejores resultados. Si los datos no resultaren concordantes trata de
discutir una posible fuente de error, cometido ya que si se tratare de un error craso se debera
repetir el experimento. Dicho de una manera ms sencilla la finalidad principal de una Discusin es
mostrar las relaciones existentes entre los hechos observados.
5. CONCLUSIONES:
Las conclusiones se escriben de acuerdo a los objetivos planteados en el experimento, si estos
han sido alcanzados; en infinitivo, Se observ, Se verific, Se analiz la siguiente muestra, etc.
Como una gua en esta seccin se responde a las siguientes preguntas:

Qu dicen los datos obtenidos respecto al experimento?


Qu sucedi en la prctica?
Qu aprendiste al completar esta prctica?

6. BIBLIOGRAFIA:
De acuerdo a la normativa del APA, o con la herramienta de Microsoft Word 2007 que se
encuentra en la interfaz de referencias e Insertar cita.

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