ORTIZ.

A-ORTEGA-ORTIZ

ANLISIS MICROBIOLGICO DE LOS ALIMENTOS

PRCTICA No.5: ANLISIS MICROBIOLGICO DE LOS ALIMENTOS.

Mauricio Ortiz Aragn 1330114
Juan David Ortega 1329842
Brayan Stevens Ortiz 1324444
Universidad del Valle
Facultad De Ingeniera, Escuela De Ingeniera De Alimentos.
Santiago de Cali, Noviembre 12 del 2014.
RESUMEN
La prctica consisti en la determinacin de la calidad microbiana presente en los alimentos, en este
caso el producto a analizar fueron los jamones utilizados en las colitas cubanas del edificio 320 de la
Universidad del Valle. Pasada las 24-48 horas de incubacin se revisaron las muestras, obteniendo las
ilustraciones de las disoluciones que se muestran en la figura 1. Se observa que en la disolucin 10^-1
10^-2 hubo turbidez, por lo tanto hubo crecimiento bacteriano. En las diluciones 10^-1, 10^-2 hubo
presencia de burbujas en la campana de Durham, indicando que presencia de coliformes totales,
fecales. Adems, pasadas las 24hr - 48hr, se realiz la observacin de los mesfilos en agar PCA,
enterobacterias en agar cristal violeta y se observaron los hongos y levaduras en agar Saboraud. Se
encontr que en la disolucin 10^-1 se present el mayor crecimiento bacteriano, y que en la
disolucin 10^-3 se present el menor crecimiento bacteriano. Despus de las observaciones se
realiz en recuento de las colonias bacterianas mesfilos, enterobacterias, hongos y levaduras
presentes en su respectivo agar. Para as analizar la calidad del producto en trminos de
contaminacin bacteriana.
1

INTRODUCCIN

En particular la carne comestible de los

animales comprende principalmente los tejidos
musculares pero tambin incluye rganos tales
como el corazn, el hgado y los riones. La
mayor parte de los estudios microbiolgicos
sobre la carne han sido llevados a cabo con
tejidos musculares y es en estos en los que se
basa la informacin que aqu se ofrece. Cada
fibra muscular est rodeada por una membrana
celular, el sarcolema, en cuyo interior estn
contenidas las miofibrillas, complejos de las
dos protenas principales actina y miosina,
rodeados por el sarcoplasma. Su elevada
actividad de agua y sus abundantes nutrientes
hacen de la carne un medio excelente para
mantener el crecimiento microbiano. Aunque
algunos de los microorganismos que crecen
sobre la carne son proteolticos, al principio
crecen a expensas de los sustratos que son
utilizados muy fcilmente,; la reserva
hidrosoluble de carbohidratos y el nitrgeno
no proteico. La protelisis amplia nicamente
tiene lugar en las ltimas fases de la
descomposicin cuando la carne ya suele estar
totalmente alterada desde el punto de vista
organolptico ( ADAMS, 1997), por esta razn
se hace de suma importancia el anlisis

Segn el diccionario Ingles de Oxford, alterar

es desposeer
de cualidades buenas o
efectivas. Cuando un alimento se altera, sus
caractersticas resultan perjudiciales de modo
que ya no es aceptable. Tales modificaciones
no siempre tiene una causa microbiolgica; un
producto se puede convertir en inaceptable
como consecuencia de un dao por insectos,
de desecacin total, de decoloracin, de
envejecimiento o de rancidez, por ejemplo,
pero, por lo general, la mayor parte de las
alteraciones de los alimentos son consecuencia
de la actividad microbiana.
Una caracterstica general de la alteracin
microbiana es la aparicin relativamente
repentina; no parece ser que se desarrolle
gradualmente, da tras da un poco peor, sino
que con ms frecuencia es un descubrimiento
inesperado y desagradable. Este hecho es un
reflejo del carcter exponencial del
crecimiento microbiano y de su consecuencia
de que el metabolismo microbiano tambin
puede
avanzar
a
una
velocidad
exponencialmente creciente.

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microbiolgico de forma preventiva en la

industria de los alimentos.

ANLISIS MICROBIOLGICO DE LOS ALIMENTOS

OBJETIVOS

Determinar la calidad del producto en

trminos
de
contaminacin
microbiana.

1.1 APARATOS, INSTRUMENTOS Y

MATERIALES
*Cajas petri esterilizadas
*Pipetas esterilizadas
*Pipetas pasteur esterilizadas
*Frasco con 90mL de agua peptonada
*Tubos de ensayo con 9 mL de caldo de
lactosas
*Erlenmeyer con agar PCA
*Erlenmeyer con agar Saboraud
*Erlenmeyer con agar EMB
*Gradilla para tubos
*Mechero
*Caldo Laury sulfato
*Caldo brilla
*Caldo Triptona
*Reactivo de Kovacs.
*Agar Cristal Violeta
1.2 MTODOS

Establecer el nmero y tipo de

microorganismos que se encuentran en
distintos alimentos.

1. MATERIALES Y METODOS

Dilucin de la muestra alimento.

Se prepararon diluciones del alimento 10 -1, 102
, 10-3
La dilucin 10-1 se prepar midiendo 10mL de
la muestra en un frasco que contena 90 mL de
diluyente agua peptonada
Transferir 1 mL de la dilucin 10 -1 a un tubo
que contenga 9 mL de diluyente para obtener
la dilucin 10-2 y as sucesivamente se prepara
la dilucin 10-3

Nmero ms probable de coliformes totales

y fecales.

Prueba presuntiva.
Pipetear 1 mL de cada una de las diluciones
(10-1 a 10-3) en tubos con caldo lauryl sulfato
utilizando 3 tubos por dilucin.
Los tubos se inocularon a 37C por 24 -48
horas.
Cuando pasaron las 24 - 48 horas se mir la
produccin de gas en los tubos, lo cual se determin por el desplazamiento del tubo
Durham.
Prueba confirmativa para coliformes
totales.
Los tubos que presentaron produccin de gas
en la prueba presuntiva se les agreg 4 gotas
del reactivo de kovacs
La presencia de un anillo rojo en la superficie
del tubo indic una reaccin positiva
Interpretacin de resultados.
Se analiz la tabla del NMP con lo cual se determin un resultado para coliformes totales
con base en los tubos positivos para la prueba
anterior.
Los tubos positivos se sembraron en agar
EMB.
Se incub por 24-48 horas
Pasado el tiempo estimado se hizo la lectura
de las colonias tpicas de coliformes.
Recuento de organismos mesfilos.
Se transfirieron alcuotas de 1mL de cada una
de las diluciones 10-1 a 10-3 en cajas petri vacas y estriles.
Verter en las cajas agar PCA fundido.
Se mezcl y se dej solidificar el agar.
Cuando se solidific se procedi a incubar las
cajas petri a 37C durante 24 horas.
Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento
de mesfilos presentes.
Recuento de enterobacterias.
Se transfirieron alcuotas de 1mL de cada una
de las diluciones 10-1 a 10-3 en cajas petri vacas y estriles.
Verter en las cajas agar cristal violeta.
Se mezcl y se dej solidificar el agar.
Cuando se solidific se procedi a incubar las
cajas petri a 37C durante 24 horas.
Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento
de enterobacterias presentes.

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Recuento de hongos y levaduras.

Se transfirieron alcuotas de 1mL de cada una
de las diluciones 10-1 a 10-3 en cajas petri vacas y estriles.
Verter en las cajas agar Saboraud fundido.
Se mezcl y se dej solidificar el agar.
Cuando se solidific se procedi a incubar las
cajas petri a 37C durante 24 horas.
Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento
de hongos y levaduras presentes.

Figura 2. Presencia de un anillo rojo

vermellon en las diluciones 10-1, 10-2 por
triplicado respectivamente para la prueba de
presencia de coliformes Fecales en Caldo
Lauril con 4 5 gotas de reactivo de Kovac.

2. RESULTADOS
Determinacin del nmero ms probable de
coliformes totales y fecales.
Al someter muestras por triplicado de las
diferentes soluciones en tubos de ensayo para
cada una de las concentraciones, se obtuvo
presencia de gas en las campanas de Durham
10^-1 y 10^-2 a las 24h de incubacin a 37C
Figuras 1, lo cual indica que en estas
disoluciones hay presencia de lactasas
caractersticas de los coliformes, es decir, que
6 tubos son positivos por lo cual segn la
Tabla de NMP la relacin sera 3:3:0.

Con los tubos positivos se hizo una siembra en

agar EMB en donde se pudo apreciar el
crecimiento caractersticos de los coliforme el
cual se aprecia en la formacin del color verde
metlico en las lneas de inoculacin Figura
3.

Figura 1. Muestra la presencia de gas en las

campanas de Durham en las diluciones 10-1,
10-2 por triplicado respectivamente para la
prueba de presencia de Coliformes Totales en
Caldo Lauryl sulfato.

Figura 3. Siembra por estra en superficie de

placa con agar EMB.
Recuento de mesofilos presentes en PCA.
Posterior a la siembra e incubacin Figura 4.
se realiz un conteo del nmero de colonias
mesofilas presentes en las cajas petri con PCA
a concentraciones 10-1, 10-2 y 10-3. Los
resultados se tabularon en la Tabla 1.

Dado que seis tubos presentaron gas, se agreg

a cada tubo 4-5 gotas de reactivo de Kovac,
observando la formacin de un anillo rojo en
todos los seis tubos, Figuras 2, lo cual es un
indicativo que en cada uno de los seis tubos,
de las tres diluciones, hubo presencia de indol,
el cual es resultado del metabolismo de la
Tripofanasa, caracterstica de coliformes
fecales, dando una relacin de 3:3:0 para la
tabla de NMP indicando que las muestras
presentaron un nmero de 240 por 100 mL.

Tabla 1. Muestra el nmero de colonias

contadas mesofilas en las diferentes
diluciones.

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Figura 4. Muestra las colonias mesfilas

presentes en agar PCA.

Figura 6. Muestra de colonias de hongos y

levaduras presentes en el agar Saboraud.

Recuento de enterobacterias.
Luego a la siembra e incubacin Figura 5. se
hizo un conteo del nmero de colonias
presentes en las cajas petri con agar cristal
violeta a concentraciones 10-1, 10-2 y 10-3. Los
resultados se muestran en la tabla 2.

3. DISCUSION
Todos los animales sanos llevan consigo una
compleja flora microbiana, una parte de la cual
puede ser muy especializada y adaptada al
crecimiento y supervivencia de su hospedador
y otra parte puede ser temporal, reflejando las
interacciones inmediatas del animal con su
medio (ADAMS, 1997). Ahora, para el caso
particular de la pasada practica se hizo
necesario conocer el nmero de coliformes
totales y fecales, llamadas Enterobacteriacea
lactosa-positiva o grupo coli-aerogenes que
constituyen un grupo de bacterias que se
definen ms por las pruebas usadas para su
aislamiento que por criterios taxonmicos.
Pertenecen a la familia Enterobacteriaceae y
se caracterizan por su capacidad para
fermentar la lactosa con produccin de acido y
gas(Figura 1), mas o menos rpidamente, en
un periodo de 48 horas y con una temperatura
de incubacin comprendida entre 30-37C.
Son bacilos gram-negativos, aerobios y
anaerobios facultativos, no esporulados. Del
grupo coliformes forman parte varios
generos:
Escherichia
Enterobacter
Klebsiella
Citrobacter.

Tabla 2. Muestra el nmero de colonias

bacterianas presentes en agar EMB .

Figura 5. Muestra las colonias bacterianos

presentes en el agar Cristal violeta.
Recuento de hongos y levaduras.
Despus de la siembra e incubacin Figura 6.
se hizo un conteo del nmero de colonias
presentes en las cajas petri en agar Saboraud a
concentraciones 10^-1, 10^-2 y 10^3. Los
resultados se muestran en la tabla 3.

Se encuentran en el intestino del hombre y de

los animales, pero tambin en otros ambientes:
suelo, plantas,etc. Aunque su especificidad
como indicadores no es buena, se suelen usar
como ndice de contaminacin fecal:
Su frecuencia en las heces.
Su fcil deteccin en el laboratorio.
Sus caractersticas semejantes a las de
algn miembro patgeno de la familia
Enterobacteriacae.

Tabla 3. Muestra el nmero de colonias

contadas en las diferentes diluciones
sembradas en agar Saboraud.

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Dentro de este grupo, son lo coliformes fecales

los que tienen significado sanitario y, por
consiguiente, los que ms interesan en el
anlisis microbiolgico de alimentos.

especificar el tipo de germen. Esta

determinacin refleja la calidad sanitaria de los
productos analizados indicando, adems de las
condiciones higinicas de la materia prima, la
forma como fueron manipulados durante la
elaboracin.
Tiene un valor limitado como indicador de la
presencia de patgenos o sus toxinas. Un
recuento total de aerobios mesofilos bajo no
asegura que un alimento est exento de
patgenos o toxinas; tampoco un recuento total
alto significa inevitablemente, presencia de
flora patgena.
Excepto en productos que se elaboran en
fermentacin, un alto recuentos microbianos se
consideran poco aconsejables para la mayor
parte de los alimentos. Su significado es
diverso:
Materia
Prima
excesivamente
contaminada.

Se consideran coliformes fecales como

presuntos Escherichia Coli. Sus principales
caractersticas son:
Aptitud para desarrollar entre 43,545,5C.
Capacidad para crecer en presencia de
sales biliares.
Facultad para producir indol en agua
de peptona.
As, en relacin con la facultad de producir
indol, basado en la formacin de un complejo
de color rojo (Figura 2) cuando el indol
reacciona con el grupo aldehdo del pdimetilaminobenzaldehdo, producto qumico
activo de los reactivos de Kovac y de
Ehrlich(KONEMAN, 2008), dando una
relacin de 3:3:0 que permite ver un NMP de
240*gr. Acto seguido, para realizar un anlisis
ms especfico de NMP se realiz una
siembra por estra en un medio especifico
conocido como agar EMB (eosina azul de
metileno), que permite observar un
crecimiento de colonias de color verde
metlico (Figura 3), para la E.Coli, sin
embargo la figura observada no presenta una
visualizacin optima de las colonias debido a
dos razones de suma importancia; primero se
realiz una siembre por estra de forma
inadecuada pues no se tuvo en cuenta el
patrn estndar para obtener colonias
separadas y pueda realizarse un anlisis semicuantitativo
(FORBES et al, 2009) y
segundo debido a las distintas fases del
crecimiento, que va desde una fase de retraso,
luego una exponencial, estacionaria y de
declinacin, se observaron las colonias con
una poblacin microbiana con cierta cantidad
de colonias muertas que se equilibran con el de
las colonias vivas, las razones del cese del
crecimiento exponencial no siempre son
claras, tambin llamada fase estacionaria. Se
supone que el agotamiento de los nutrientes, la
acumulacin de productos de desecho y los
cambios perjudiciales del pH pueden participar
en este proceso. (TORTORA,2007)

Deficientes mtodos de manipulacin

durante la elaboracin de los
productos.

La posibilidad, por tratarse de

microorganismos mesofilos de que
entre ellos pueda haber patgenos,
dado que esta flora suele ser mesofila.

Altos recuento suelen ser signo de

inmediata alteracin del producto.
Tasas superiores a 106-107 germenes
por gramo suelen ser ya materia en
descomposicin.
(PASCUAL- CALDERON,1999)

De este modo es posible observar que el

alimento presenta una grande cantidad de
mesfilos (Tabla 1) en el anlisis
correspondiente. Para finalizar el anlisis
microbiolgico entonces, hacen falta dos
pruebas importantes, la de enterobacterias y
hongos y levaduras. Las enterobacterias como
ya fue descrito en la parte superior son
bacterias que tiene como habitad natural el
intestino de hombres y animales, familia
formada por gram-negativas, no esporulados,
algunos tiene movilidad por flagelo peritricos,
son anaerobios y anaerobios facultativos. Casi
todos estas bacterias de los miembros de esta
familia crecen bien en medios de cultivos

Luego para el recuento de microorganismos

mesofilos se estima la flora total, pero sin

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simples, no son exigentes en sus

requerimientos nutricionales, pero se han
ideado medios especializados para aquellos
casos en los que la muestra presenta varias
especies bacterianas. Todos estos medios
obstaculizan el crecimiento de las bacterias
gam-positivas y favorecen el crecimiento de lo
bacilos gram-negativos. Una gran parte de las
muestras para investigar e identificar
enterobacterias son materias fecales, y en
general,
se
trata
de
identificar
enteropatogenos. Por esta razn se han
diseado tres tipos de medios especiales para
enterobacterias: diferenciadores, selectivos y
enriquecidos. Para este caso en particular los
medios
diferenciadores
permiten
el
crecimiento enterobacterias y saprobios, pero
las colonias de uno y de otros se distinguen
por la diferente coloracin que producen. Sin
embargo en la Figura 3 y la Tabla 2, no se
logra observar una caja Petri con un nmero
mnimo de 30 colonias, lo que tendra una
contradiccin con el gran nmero de mesfilos
del procedimiento anterior, que presenta un
numero bastante elevado de NMP por gr, en
consecuencia uno de los errores ms posible a
la hora del sembrado en el medio diferencial
fue con una temperatura mayor a 45C lo que
produjo una muerte de muchas de las
enterobacterias pues estas presentan una
temperatura optima de crecimiento entre 3037C, es por esto que en cambio se observa un
crecimiento favorable de una colonia bastante
grande de E.coli. (Figura 5), pues esta puede
crecer en un rango de temperatura de 43,545.5C.
Y finalmente para terminar, al observar la
Figura 6. Se encuentra una representativa
presencia de pequeas levaduras, hongos que
crecen regularmente en forma de agregados
sueltos de clulas independientes, que pueden
ser globosas, ovoides, piriformes, alargadas y
casi cilndricas, las levaduras cuando crecen
sobre medios slidos, forman colonias de
aspecto caracterstico que recuerdan a la
colonias
bacterianas
(PASCUALCALDERON,1999), a diferencia de los
hongos que presenta una consistencia aldosa;
sin embargo cuando maduran la superficie
adquiere una contextura azucarada o granular a
medida que se producen los conidios
(KONEMAN,2008), por lo tanto en la

Figura 6 junto con los datos suministrados en

la Tabla , representan solamente presencia de
levaduras debido a que el tiempo necesario
para que exista un crecimiento ptimo de
hongos es de 3-5 das, tiempo que no fue
tomado en cuenta para el anlisis realizado en
la prctica.
Ahora, teniendo presente cada dato
experimental, se realiz una comparacin con
la normatividad vigente para las condiciones
microbiolgicas para la carne, que se muestra
a continuacin:

(RTCA 67.04.50:08,2001)
Segn la cual el alimento que fue analizado en
el laboratorio presenta unos valores demasiado
elevados para lo mnimos, o incluso la
existencia de microorganismos que no son
permitidos en el alimento.
CONCLUSIONES
El alimento presenta una gran cantidad
de coliformes totales y fecales,
incluyendo una gran persistencia de
E.Coli indicador de y desinfeccin
inadecuadas,
o
de
una
industrializacin
o
tratamientos
incorrecto del alimento.

El tiempo en el cual se
lo cultivos sembrados
Petri debe corresponder
cual el microorganismo
logartmico
adems

debe observar
en las cajas
a la fase en la
este en estado
cuenta
la

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temperatura ptima para que los

microorganismo no mueran en el
momento de ser sembrado en las cajas
Petri

El alimento presenta adems una

deficiencia en el proceso de
elaboracin y una contaminacin en la
manipulacin durante el empaque,
razn por la cual se encuentra una
gran cantidad de mesofilos en el
alimento, que exceden
el NMP
mnimo en 240*gr en alimentos
crnicos.

La observacin de hongos debe ser

llevada a cabo en un tiempo mnimo
determinado para poder observar con
segura su crecimiento.

iniciar la recuperacin y actividad de las

clulas microbianas presentes, as como para
favorecer aquellas que se buscan entre una
poblacin mixta. Se pretende encontrar el
nmero de microorganismos por unidad de
volumen, hasta asegurar que despus de la
incubacin se obtenga un resultado
cuantificable, esto se logra despus de realizar
tantas diluciones decimales seriadas como sea
necesario, en el mismo diluyente. Este
resultado puede ser la cuenta de colonias en
placas o la observacin de resultados
proporcionales al tamao de la poblacin, en el
caso de tubos o matraces. (CAMACHO, A. et
al 2009)
2. inoculacin del alimento
Nmero ms probable de coliformes totales y
fecales
FUNDAMENTO
La determinacin de microorganismos
coliformes totales por el mtodo del Nmero
ms Probable (NMP), se fundamenta en la
capacidad de este grupo microbiano de
fermentar la lactosa con produccin de cido y
gas al incubarlos a 35C durante 48 h.,
utilizando un medio de cultivo que contenga
sales biliares. Esta determinacin consta de
dos fases, la fase presuntiva y la fase
confirmativa.
En la fase presuntiva el medio de cultivo que
se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el
cual permite la recuperacin de los
microorganismos daados que se encuentren
presentes en la muestra y que sean capaces de
utilizar a la lactosa como fuente de carbono.
Durante la fase confirmativa se emplea como
medio de cultivo caldo lactosado bilis verde
brillante el cual es selectivo y solo permite el
desarrollo de aquellos microorganismos
capaces de tolerar tanto las sales biliares como
el verde brillante.
La determinacin del nmero ms probable de
microorganismos coliformes fecales se realiza
a partir de los tubos positivos de la prueba
presuntiva y se fundamenta en la capacidad de
las bacterias para fermentar la lactosa y
producir gas cuando son incubados a una
temperatura de 44.5 C por un periodo de 24 a
48 h.
Finalmente, la bsqueda de Escherichia coli se
realiza a partir de los tubos positivos de caldo
EC, los cuales se siembran por agotamiento en
medios selectivos y diferenciales (Agar Mac
Conkey, Agar eosina azul de metileno) y

PREGUNTAS.
Cual es el fundamento de las diferentes
pruebas que ha realizado?
R// MTODOS
1. dilucin de la muestra de alimento
Dado el tamao de las poblaciones
microbianas que pueden estar presentes en un
alimento, que van desde algunos miles hasta
varios millones de clulas por gramo, su
determinacin cuantitativa
requiere
la
preparacin de diluciones conocidas de la
muestra; y es costumbre utilizar cifras
decimales para facilitar los clculos.
(CAMACHO, A. et al 2009)
FUNDAMENTO
Posteriormente a la toma de muestra y como
parte del anlisis, se hace una dilucin
primaria cuya finalidad es lograr obtener una
muestra representativa del alimento, esto es,
tanto en el aspecto cualitativo (diferentes tipos
de bacterias) como en el cuantitativo, y as
lograr una distribucin lo ms uniforme
posible, de los microorganismos contenidos en
la muestra destinada al anlisis. Con este fin,
se utiliza un diluyente que favorezca la
recuperacin
de
los
microorganismos
presentes, para ponerlos de manifiesto cuando
se cultiven; para lograrlo, el diluyente debe
tener la osmolaridad y el pH favorables para

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posteriormente
realizando las
pruebas
bioqumicas bsicas (IMViC) a las colonias
tpicas. (ARIAS, L. et al 2010).

Los componentes del agar EMB son: peptona,

fosfato dipotsico, lactosa, eosina, azulde
metileno, agar y agua destilada. Se usa para el
aislamiento selectivo de enterobacterias que se
caracterizan por contener lactosa y un
indicador de cambio de pH que detecta la
actividad
fermentadora
de
lactosa.
( FERNANDEZ, M et all, 1994)

3. Recuento de microorganismos
Recuento en placa por siembra en
profundidad.
Consiste en aadir medio de cultivo fundido y
enfriado a 50C sobre placa de Petri que
contiene una cantidad determinada de la
muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para
mezclar la muestra en el agar. Cuando el agar
solidifica se incuban las placas. Las colonias
se desarrollan tanto dentro del agar como en la
superficie. Es un mtodo generalmente
utilizado para el recuento de microorganismos
anaerobios facultativos o microaerofilos.

4. BIBLIOGRAFIA
1. ADAMS, M.R. (1997).Microbiologia
de los alimentos. Pag 120-128,20.
2. KONEMAN,
E.
W.
(2008).
Diagnostico
microbiolgico
6
edicin.
Editorial
medica
panamericana. Pag 744,1123.

Cuales son los componentes de cada uno de

los medios de cultivo y porque se utilizan?

3. FORBES,
B
et
al,
(2009)
Diagnostico
microbiologico.12
Edicin. Editorial Panamericana.
Espaa Pag 257

R// Los componentes del PCA (Plate Count

Agar) son: Triptona 5g, extracto de levadura
2.50 g, dextrosa 1g, agar 12g y agua destilada
1000mL. Es un medio de cultivo usado para la
multiplicacin y recuento por inclusin de
todos los microorganismos aerobios mesfilos
poco exigentes, en alimentos. (ALLAERTESCOL, 2002)

4. TORTORA G.J.,FUNKE B.R., CASE

C.L. (2007) Introduccin a la
microbiologa 9 edicin. Editorial
medica panamericana. Pag 177.

Los componentes del VRBG son: peptona de

carne 7g, extracto de levadura 3g, glucosa 10g,
sales bilares 1,5 g, cloruro sdico 5g, rojo
neutro 0,03g, violeta cristal 0,002g, agar
bacteriolgico 13 g y agua destilada 1000mL.
Es un medio de cultivo selectivo utilizado para
aislamiento y recuento de enterobacterias en
alimentos. (ALLAERT- ESCOL, 2002)

5. PASCUAL. M, D; CAlDERON.V. Microbiologia Alimentaria: Metodologia Analitica para Alimentos y Bebidas. 2 Edicccion. Editorial Diaz de
Santos. Madrid, Espaa. Pag 13-142
6. ROMERO,
C.R,
(2007)
Microbiologia
y
Parasitologia
humana.3 Edicion. Editorial Medica
Panamericana. (Mexico) pag 743.

El agar saboraud esta compuesto de peptona,

glucosa, agar y agua destilada. El medio
contiene nutrientes en cantidad mnima y lleva
un pH cido que lo hace selectivo. Suele
adicionarse de antibioticos para potenciar su
selectividad, y de actidiona para el cultivo de
hongos dermatofilos; tambin se aade
trifeniltetrazolio para diferenciar especies de
levadura que reducen sal y originan colonias
rojas. ( FERNANDEZ, M et all, 1994)

7. Reglamento tecnico centroamericano

(2001). RTCA 67.04.50:08,2001
8. CAMACHO, A., M. GILES, A. ORTEGN, M. PALAO, B. SERRANO Y O.
VELZQUEZ. (2009). Tcnicas para
el Anlisis Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de Qumica,
UNAM. Mxico.

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ANLISIS MICROBIOLGICO DE LOS ALIMENTOS

9. ARIAS, L. VELEZ, M.F. (2010). Mtodo para la determinacin de bacterias coliformes, coliformes fecales y
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ms probable o NMP). Facultad de
Qumica, UNAM. Mxico.
10. http://www.pomif.com/pages/practicas
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11. ALLAERT. C, ESCOL, M. (2002)
Mtodos de anlisis microbiolgicos
de alimentos. Editorial Diaz de Santos.
Madrid, Espaa. Pg 156 y 160.
12. FERNANDEZ, M et all (1994) Microbiologa clnica practica. 2 Edicin. Servicio de publicaciones de la
universidad de Cadiz. Pag 64 y 70