UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

REPORTE DE LA VISITA AL BIOTERIO E INFORME DE
PRUEBAS BIOLOGICAS

PROFESORA:

Ana Aguilar

INTEGRANTES:

SAMUEL ESPINOZA BENITES

MIGUEL GOMEZ CASTILLO
JOSE FELICIANO RAVICHAGUA
KARLOS CUSSIANOVICH

2012 II

REPORTE DE LA VISITA
Lugar visitado : bioterio de la facultad de zootecnia

Fecha: lunes 12 de noviembre del 2012

Descripcin:
En la visita al Bioterio de la UNALM de la facultad de zootecnia pudimos
observar el rea de Reproduccin de Ratas y el rea de Ensayos Biolgicos.
A. rea de Reproduccin de Ratas
Durante la visita se observaron ratas, provenientes de cepas americanas.
Estas ratas consumen alimento con 17% protena. El bioterio cuenta con
ms de 400 ratas. Siempre hay ratas preadas, para experimentos que
puedan presentarse.
Las ratas machos son encerrados en jaulas con 3 hembras. El periodo de
gestacin 21 das y la lactancia 21-22 das. Las madres gordas no dan
buenas cras (menor a 7 cras). Se les da alimento molido para que lo
aprovechen mejor. Debe cuidarse constantemente el agua, porque si no
hay agua por ms que tenga alimento la rata no va comer. El ambiente
debe estar ventilado, con calefaccin durante la noche
El bioterio visitado de la UNALM abastece a otras universidades.
Se utiliza las ratas blancas para experimentosdebido a que :
-

Son de fcil manejo.

Tienen un alto nmero de cras.

No requieren demasiados cuidados.

Tienen un sistema inmune similar al de los seres humanos.

Poseen un breve perodo de gestacin (19-21 das), y su destete es

rpido.

B. rea de Ensayos Biolgicos

En esta rea se encontraban realizando un experimento para determinar el
Valor Biolgico. Para este experimento se trabajan con 6 ratas de 21 a 25 das
de edad, todos machos. Se aloja cada rata en una jaula y se evala la calidad
proteica de este alimento, sabiendo cuanto de nitrgeno ingiere, cuanto elimina
a travs de las heces y de la orina. Se agrega tolueno para que la orina se vaya
al fondo. Las jaulas son metablicas, de material quirrgico. Las ratas
consumen una racin de 10% protenas y 380 Kcal.
El experimento dura 10 das, divididos en 4 das de acostumbramiento de la
rata con el alimento de experimento y 6 das de recoleccin de muestra. Todos
los das pesan las heces, se analiza cuanto de protena tiene. La orina se
guarda en la refrigeradora, previa medicin del volumen.
Se le da alimento el primer da con colorante carmn, que es un indicador. Esto
es para saber que muestras de heces tomar. Las heces con color son tomadas
en cuenta para los datos, las heces sin color me indicaran que provienen del
alimento del da anterior y son desechados. Luego al quinto da tambin se le
da alimento con colorante carmn para cortar el experimento. Aqu es al revs
que el primer da, ya que se toma las heces sin color para el control de los
datos. La cantidad de agua no es necesario controlar.
Los datos obtenidos son registrados. Luego son analizados en el laboratorio las
muestras de heces y orina, y se determina el Valor Biolgico.
Adems en este tipo de jaulas se pueden realizar otros tipos de experimentos
como determinacin de PER (se realiza solo con 6 ratas de problema), NPR
(es mejor, ya que se realiza con 6 ratas problema y 6 ratas aproteica libres de
protenas para hacer una correccin), NPU (es mas complicado porque se

requiere de 4 camadas del mismo da de nacido con ocho cras, pero de

cualquier sexo.

I.

INTRODUCCIN
La cantidad de nutrientes que posee un alimento se conoce a travs del
anlisis proximal, sin embargo la biodisponibilidad proteica en un producto
alimenticio define de manera certera si ste es nutritivo o no evaluando su
capacidad de cubrir los requerimientos de un individuo; lo cual depende
fundamentalmente de la composicin de AA y de la biodisponibilidad de los
mismos.
Para medir la calidad proteica de un alimento, existen mtodos qumicos,
biolgicos y microbiolgicos. Dentro de los biolgicos se han usado, y se
siguen usando, el coeficiente de eficacia proteica (PER), el valor biolgico (VB)
y la utilizacin neta proteica (NPU).
La eficacia proteica corresponde a la capacidad de la protena dietaria para
promover el crecimiento, la utilizacin neta de protena mide la proporcin de
nitrgeno del alimento que se retiene en el organismo, en tanto el valor
biolgico indica cuan til es la protena para las funciones de crecimiento y
mantenimiento corporal.
Los objetivos de la prctica realizada fueron conocer las pruebas biolgicas
ms utilizadas para la evaluacin de los alimentos, as como el clculo del valor
de la eficiencia proteica (PER) y la utilizacin neta de protena (NPU).

II.

REVISIN DE LITERATURA
2.1. Valor biolgico
El aprovechamiento de una protena aislada no depende de su origen,
intervienen muchos factores ms, como son la combinacin con otras
protenas, otras molculas o nutrimentos, adems de los procesos de digestin,
absorcin, o el hecho de que algunos aminocidos puedan estar en formas
qumicas no utilizables, etc. El trmino calidad proteica se refiere a la
capacidad de una protena de la dieta para incorporarse en las protenas
corporales y se puede estimar a travs de varios indicadores, dentro de los que
se destaca el valor biolgico o calificacin qumica (Gonzlez, 2007).
El valor biolgico est definido como la proporcin en que se encuentra un
aminocido indispensable limitante con respecto al patrn de referencia. Por
definicin, se entiende como aminocido limitante a aquel en el que el dficit es
mayor comparado con la protena de referencia, es decir, aquel que, una vez
realizado el clculo, da un valor qumico ms bajo. La protena de referencia
es una protena terica definida por la FAO la cual tiene la composicin
adecuada para satisfacer correctamente las necesidades proteicas, la FAO ha
propuesto a la protena del huevo y la protena de la leche humana como
protenas de referencia. Se han fijado distintas protenas de referencia
dependiendo de la edad, ya que las necesidades de aminocidos esenciales
(Gonzlez, 2007)
En la Figura 1 se explica qu ocurre con el nitrgeno ingerido de las protenas
en la dieta: de ste una parte es absorbida mientras que otra es excretada.
Esta ltima porcin (la excretada) se deriva del nitrgeno alimentario y del
endgeno. As mismo, del nitrgeno absorbido una parte se retiene y otra se
elimina mediante la orina (Costa y Botella, 1974).

Figura 1: Rutas del nitrgeno ingerido de los alimentos.

Fuente: Costa y Botella (1974).
2.2. Factores afectan la digestibilidad de una protena
Hay varias razones que limitan la digestibilidad de ciertas protenas:
Conformacin de la protena: las proteasas atacan a las protenas
fibrosas insolubles ms lentamente que a las protenas globulares
solubles. Pero, la digestibilidad puede ser fcilmente incrementada por la
desnaturalizacin de la protena, por ejemplo, por un tratamiento trmico
previo (Gonzlez, 2007).
La unin a ciertos metales, lpidos, cidos nucleicos, celulosa u otros
polisacridos,

puede

ver

limitada

parcialmente

su

digestibilidad

(Gonzlez, 2007).
Factores

antinutricionales

como

los

inhibidores

de

tripsina

quimiotripsina. Otros inhibidores afectan a la absorcin de aminocidos

(Gonzlez, 2007).
El tamao y superficie de la partcula donde se encuentran las protenas.
La digestibilidad de las protenas de los cereales puede ser

incrementada, por ejemplo, mediante el molido ms fino de la harina

(Gonzlez, 2007).
2.3.

Relacin de Eficiencia Proteica (PER).

El mtodo ms comnmente utilizado en las evaluaciones de la calidad

nutricional de las protenas, en general ha sido la razn de eficiencia proteica
(REP), el cual est basado en experimentos de alimentacin a corto plazo (de
tres a cuatro semanas) de ratas recin destetadas. La respuesta a las dietas se
expresa en trminos de peso ganado por unidad de protena consumida. El
valor de REP obtenido se compara con el de una protena de referencia, como
la casena, que en la prctica se asume posee un valor de 2.5 Aunque la
estimacin del REP ha sido el mtodo ms aplicado para evaluar la calidad de
las protenas, tiene ciertas limitaciones. La principal fuente de errores consiste
en utilizar la ganancia de peso como el nico criterio per se de valor proteico.
Por estas razones, se ha recomendado la utilizacin de otros mtodos ms
especficos para evaluar la calidad de la protena, como la utilizacin de
protena neta (UPN) y el valor biolgico (VB) (Morris, 2003).
2.4.

Utilizacin Proteica Neta (NPU)

La medicin de la calidad de la protena tambin se determina mediante el

clculo de la cantidad de la misma que realmente utiliza un organismo. La
Utilizacin Neta de Protena (Net Protein Utilization, NPU) es el mtodo usado
ms frecuentemente para este fin. Se lleva a cabo mediante el balance de
nitrgeno (N), que est definido como la diferencia observada entre el nitrgeno
ingerido y el excretado. El segundo es calculado como la suma de nitrgeno
contenido en orina y heces, y en prdidas a travs de diferentes vas, como piel
y sudor. La medicin del balance de nitrgeno es difcil, ya que representa una
diferencia pequea en trminos de cantidad de N consumido y excretado. Las
diversas prdidas de N son particularmente difciles de pedir, y a menudo se
asume que son del orden de 5 - 8 mg / kg de peso por da. En adultos sanos el
balance es de cero. Es negativo cuando existe ayuno y en algunas formas de
desnutricin proteico-energtica. Durante el crecimiento, la gestacin, y en
adultos que estn aadiendo masa muscular o recuperndose de alguna lesin
o enfermedad, el balance debe ser siempre positivo (Gonzlez, 2007).

III.

RESULTADOS Y DISCUSION
A continuacin se presentan los anlisis proximales del pan elaborado con
harina de pota, as como tambin los anlisis de heces y orina que luego
servirn para determinar el valor de biodisponibilidad y valor biolgico.
Cuadro 1: anlisis proximales del Pan con harina de Pota, anlisis de los
diferentes componentes de la racin con 10%de protena, adems del anlisis
de heces y orina.
ANLISIS PROXIMAL: PAN + HARINA DE
POTA
Humedad (%)
Protena (%)
Extracto etreo (%)
Fibra Cruda (%)
Ceniza (%)
ELN (%)

23.42
12.61
11.14
0.25
1.13
51.45

RACIN (10% PT, 359.22 KCAL)

Harina de pan
Sales minerales
Vitaminas
Maicena
Azcar
Fibra

62.93
4.00
5.00
15.38
7.69
5.00

ANLISIS DE RACIN
Humedad (%)
Protena (%)

5,06%
9,15%

ANLISIS DE HECES
Humedad (%)
Protena (%)

39,64%
11,94%

ANLISIS DE ORINA
Densidad (g/ml)

1,03655

Protena

6,16%

Cuadro 2: Datos recolectados antes, durante y despus de la experimentacin.

Nmero de Animales
Peso Inicial (g)
Peso final (g)

6
59,73
58,23

Ganancia de Peso
Alimento consumido
Alimento (m.s) (%)
Alimento (m.s)
Alimento Nitrgeno (%)

37,37
94,94%
35,48
1,454%

Alimento Nitrgeno (g)

0.52

Nitrgeno consumido (g)

Heces excretadas (g)
Heces (m.s.) (%)
Heces (m.s.)
Heces- nitrgeno (%)
Heces- nitrgeno (g)
Nitrgeno excretado (g)
Orina (densidad)
Orina excretada (ml)
Orina excretada (g)
Orina - Nitrgeno (%)
Orina N2 excretado (g)

0.519
8,45
60,36%
5,10
1,91%
0.1
1,03655
17,78
18,43
0,98%
0,18

Cuadro 3: Resultados de los mtodos para evaluar la Biodisponibilidad de la

Protena del Pan elaborado a base de Harina de Pota.

Nitrgeno

%
(g)

I (Ingerido)

0,52

F (Fecal)

0,10

(Orina)

0,18

Prueba Biolgica

Gracias

al

proximal

Valor Biolgico

57.35

Digestibilidad aparente

81,31

alimento se

anlisis
del
puede

conocer los porcentajes de los componentes del pan de harina de pota, adems
se realiz un balance de vitaminas, minerales, azcar y fibra para dosificar la
racin alimenticia

de las ratas de manera adecuada, y as poder obtener un

correcto anlisis de digestibilidad y valor biolgico.

Dentro de un periodo de tiempo de alimentacin con la mezcla alimenticia en
estudio se fue recolectando las heces y la orina para su posterior anlisis de
humedad y densidad respectivamente, y as conocer la cantidad de protena
retenida en las ratas.
Segn Surez et. al. (2006), El valor biolgico de la harina de pota es de 70%, sin
embargo como se puede observar en el cuadro 3 el valor biolgico del pan con
harina de pota es de 57.4%, este valor se encuentra por debajo de lo expuesto por
el autor.

Segn Silva (2003), los compuestos nitrogenados son provenientes de protenas,

las cuales una vez absorbidos son utilizados para procesos metablicos y
eliminados a travs de las heces y la orina, por lo que es importante contabilizar el
contenido de nitrgeno en las heces y orina para as determinar el % de nitrgeno
retenido en el animal.
La digestibilidad hallada en el anlisis fue de 81.3%, lo que nos indica que gran
cantidad de protena aportada por el alimento utilizado es absorbido para ser
utilizado en diferentes funciones metablicas y para cumplir los requerimientos
energticos, se puede indicar tambin que la muestra de pan a base de harina de
pota, posee buena digestibilidad, y un buen valor biolgico 57.35%.

IV.

CONCLUSION
El valor biolgico hallado fue de 57.3%, es bajo tomando en cuenta que se trata
de una protena de origen animal.
El valor de digestibilidad aparente fue de 81.3%.
Se puede indicar que la muestra de pan a base de harina de pota, posee buena
digestibilidad y un aceptable valor biolgico.
La evaluacin in vivo en ratas de laboratorio es adecuada para conocer el valor de
digestibilidad y valor biolgico de un alimento en estudio.

V.

BIBLIOGRAFA
GONZLEZ, L. TLLEZ, A. SAMPEDRO, J. NJERA, H. 2007. Las protenas en
la nutricin. Instituto de Ciencias de la Salud - Universidad Autnoma del Estado

de

Hidalgo.

Mxico.

Disponible

http://www.respyn.uanl.mx/viii/2/ensayos/proteinas.htm.

Visitado

en:
el

15

de

noviembre del 2012.

MORRIS, H. CARRILLO, O. BERMDEZ, R. 2003. Enfoque integral en la
utilizacin de los mtodos qumicos de evaluacin de la calidad proteica. Centro
de Estudios de Biotecnologa Industrial. Facultad de Ciencias Naturales.
Universidad

de

Oriente.

Santiago

de

Cuba.

Disponible

en:

www.sld.cu/revistas/spu/vol29_1_03/spu06103.pdf. Visitado el 16 de noviembre

del 2012.
SILVA, W., ARBAIZA, T., CARCELN, F. y LUCAS, O. 2003. Evaluacin Biolgica
en Ratas de Laboratorio (Rattus norvegicus) de Fuentes Proteicas Usadas en
Alimentos Comerciales para Perros (Serial online). Universidad Nacional Mayor
de

San

Marcos.

Lima

Per.

Pgina.

Disponible

en:

http://www,scie.org.pe/scielo.php?
pid=S160991172003000100004&script=sci_arttext. Visitada el 17 de Noviembre
del 2012.
SUREZ, M., KIZLANSKY, A. Y LPEZ, L. 2006. Evaluacin de la calidad de las
protenas en los alimentos calculando el escore de aminocidos corregido por
digestibilidad. Facultad de Medicina. Universidad de Buenos Aires. Argentina.
VI.

CUESTIONARIO
6.1. Explicar el mtodo NPR (relacin proteica neta). Qu ventaja tiene?
La Razn Protenica Neta (NPR), es un mtodo basado en la ganancia de
peso de un determinado animal, para esto se tiene que definir primero el radio
de eficiencia proteica (PER), que es la ganancia en peso por gramos de
protena ingerida. El animal experimental es por lo general una rata, la cual es
alimentada con una dieta que contiene 10% (100 gramos de protena bruta por

cada kilogramo de dieta) de la protena en estudio durante cuatro semanas a

partir del destete.
As, la relacin de protena neta incluye en el PER el clculo de la prdida de
peso por un grupo de ratas alimentadas con un rgimen sin protenas, estas
pueden valorarse por su capacidad para el mantenimiento y el crecimiento.
Las ventajas de este mtodo es que es un mtodo rpido, es econmica, y es
da unos valores cercanos a los reales por esto es uno de los de los mtodos
ms empleados.
6.2. Qu factores afectan la digestibilidad de una protena?
La digestibilidad de los aminocidos depende de varios factores, mismos que
pueden clasificarse en factores propios de la materia prima; que a su vez se
clasifican en factores independientes a la protena del ingrediente y factores
propios a la protena del ingrediente, y en factores externos a la materia prima,
que

principalmente

se

refieren

condiciones

de

tratamientos

procesamientos industriales aplicados a las materias primas.

6.3. Qu es la digestibilidad aparente y verdadera?
La digestibilidad aparente es el resultado de restar la cantidad de nitrogeno del
alimento consumido de lo presente en las heces. Mientras que la digestibilidad
verdadera es la que resulta de restar a la digestibilidad aparente los valores de
compuesto de origen metablico o endgeno