Manual Del Curso de Categoría B

Animales de laboratorio.
Uso, manejo y cuidados
Manual de Tcnicas y
Cuidados en
Experimentacin Animal
Manual del programa de capacitacin bsica para cuidadores y tcnicos en experimentacin animal
Charles River Laboratories. 2011.
Manual de Cuidados y Tcnicas en experimentacin Animal

Autores y Colaboradores
Versin: 1.4
Junio 2011
Coodinador de la edicin:
Ernesto de la Cueva Bueno
Charles River Laboratories
Consulting and Staffing Services
Autores y colaboradores:
Isabel Blanco Gutirrez
Beln Pintado Sanjuanbenito

Centro Nacional de Investigaciones Oncolgicas (CNIO)
Centro Nacional de Biotecnologa (CNB CSIC)

Unidad de Transgnesis
Ernesto de la Cueva Bueno
Jos Manuel Snchez Morgado

Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (CNIC)

Unidad de Animalario
Teresa de la Cueva Bueno
Jess Martnez Palacios

ngel Naranjo Pino

Centro Nacional de Biotecnologa (CNB CSIC)
Centro de Investigaciones Energticas, Medioambientales y

Tecnolgicas - CIEMAT
Alfredo Serrano Montalvo

Centro Nacional de Biotecnologa - CSIC
Unidad de Transgnesis
Eduardo Daz
Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (CNIC)
Charles River Laboratories. 2011.

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training purposes only. It neither establishes Charles River Laboratories policy nor reflects its actual animal care and use
guidelines.
Manual de Cuidados y Tcnicas en Experimentacin Animal

Contenido

Contenido
Contenidos
LEGISLACIN Y RECOMENDACIONES.................................................................... 11
Legislacin Europea ................................................................................................. 14
Consejo de Europa ............................................................................................................ 14
Unin Europea (Comisin Europea y Consejo) .................................................................. 15
Legislacin Nacional ................................................................................................. 16

Real Decreto 1201/2005 .................................................................................................... 16
Ley 32/2007 ....................................................................................................................... 17
Otra Legislacin Relevante ................................................................................................ 17
Legislacin Autonmica ............................................................................................ 18

La Gua y el Principio de las 3Rs ............................................................................ 19
El Concepto de las 3Rs ...................................................................................................... 20
ANATOMA Y FISIOLOGA DE LOS PRINCIPALES MODELOS ANIMALES ............... 23

Introduccin al Desarrollo Embrionario ..................................................................... 27
Segmentacin .................................................................................................................... 27
Gastrulacin ....................................................................................................................... 27
Tipos de Huevos ................................................................................................................ 28
Tipos de Segmentacin del Huevo ..................................................................................... 29
Blstula .............................................................................................................................. 31
Grastrulacin ..................................................................................................................... 32
El Mesodermo .................................................................................................................... 32
El Celoma (Cavidad Celomtica) ....................................................................................... 33
Peces ........................................................................................................................ 34
Piel y Tegumentos ............................................................................................................. 35
Esqueleto y Musculatura .................................................................................................... 36
Cavidades Corporales ........................................................................................................ 37
Aparato Digestivo ............................................................................................................... 37
Sistema Circulatorio ........................................................................................................... 38
Sistema Linfohematopoytico ............................................................................................ 38
Sistema Urogenital ............................................................................................................. 38
Aparato Respiratorio .......................................................................................................... 41
Sistema Nervioso ............................................................................................................... 41
rganos de los Sentidos .................................................................................................... 41
Reproduccin ..................................................................................................................... 41
Anfibios ..................................................................................................................... 43
Reproduccin ..................................................................................................................... 50
Reptiles ..................................................................................................................... 53

Contenido

Reproduccin ..................................................................................................................... 61
Aves .......................................................................................................................... 64
Cavidades Corporales........................................................................................................ 70
Aparato Digestivo............................................................................................................... 70
Sistema Urogenital............................................................................................................. 74
Mamferos ................................................................................................................. 77
Aparato Digestivo............................................................................................................... 80
Aparato Circulatorio ........................................................................................................... 81
Sistema Endocrino ............................................................................................................. 85
Caractersticas Propias de Roedores ................................................................................. 90
Caractersticas Propias de Lagomorfos .............................................................................. 96
Protocolo Estandarizado de Necropsia ..................................................................... 99

Instrumental, Productos, Equipamiento y Seguridad .......................................................... 99
Observacin Clnica ......................................................................................................... 100
Vocabulario til ................................................................................................................ 104
Caso Prctico. Control Sanitario en Ratn ....................................................................... 109
ALOJAMIENTO DE ANIMALES DE LABORATORIO ................................................ 113

Conceptos y Definiciones ........................................................................................ 116
ACH ................................................................................................................................. 116
Alojamiento Primario ........................................................................................................ 116
Alojamiento Secundario ................................................................................................... 116
Entorno Fsico .................................................................................................................. 116
HEPA ............................................................................................................................... 116
Humedad Relativa (HR) ................................................................................................... 117
IVC .................................................................................................................................. 117
Partes Por Milln (ppm) ................................................................................................... 117
Refinamiento.................................................................................................................... 118
Variabilidad ...................................................................................................................... 118
Temperatura Corporal ...................................................................................................... 118
Alojamiento: Legislacin y Recomendaciones ........................................................ 119

Alojamiento Primario ........................................................................................................ 119
Alojamiento Secundario ................................................................................................... 123
Alojamiento Adecuado ............................................................................................ 127

Alojamiento de Peces ...................................................................................................... 127
Alojamiento de Anfibios .................................................................................................... 132
Alojamiento de Reptiles ................................................................................................... 138
Alojamiento de Aves ........................................................................................................ 143
Alojamiento de Roedores ................................................................................................. 146
Alojamiento de Lagomorfos.............................................................................................. 152
Alojamiento de Perros ...................................................................................................... 156
Enriquecimiento ambiental ...................................................................................... 157

Pruebas de Preferencia ................................................................................................... 157
Pruebas de Fuerza de la Motivacin ................................................................................ 158
Tipos de Enriquecimiento Ambiental ................................................................................ 158
Enriquecimiento nutricional .............................................................................................. 161
Enriquecimiento e Interferencia con la Investigacin .............................................. 162

Enriquecimiento Ambiental y Variabilidad ........................................................................ 162
Bibliografa .............................................................................................................. 163

Contenido
BIENESTAR ANIMAL ............................................................................................... 165

Conceptos y Definiciones ....................................................................................... 168
Bienestar animal .............................................................................................................. 168
Conducta y comportamiento............................................................................................. 168
Distrs (Angustia) ............................................................................................................ 168
Dolor ................................................................................................................................ 168
Estrs .............................................................................................................................. 169
Homeostasis .................................................................................................................... 169
Necesidades .................................................................................................................... 169
Sufrimiento....................................................................................................................... 169
Welfare y well-being .................................................................................................... 170
Indicadores de Bienestar Animal ............................................................................ 171

Evaluacin del bienestar animal ............................................................................. 172
El concepto five freedoms .............................................................................................. 172
Evaluacin de Indicadores de Bienestar ........................................................................... 172
Test de Preferencia .......................................................................................................... 173
COMPORTAMIENTO DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO ................................ 175

Clases de Comportamiento..................................................................................... 178
Comportamiento Innato .................................................................................................... 178
Reflejos ............................................................................................................................ 178
Taxias .............................................................................................................................. 178
Patrones (o Pautas) Fijos de accin ................................................................................. 178
Comportamientos Aprendidos .......................................................................................... 183
Domesticacin ................................................................................................................. 183
Animales en Cautividad .......................................................................................... 185

Enriquecimiento Ambiental y Comportamiento ....................................................... 188
Bibliografa .............................................................................................................. 190
NUTRICIN ANIMAL ............................................................................................... 191
Bioqumica Nutricional y Nutrientes Bsicos ........................................................... 194
Carbohidratos .................................................................................................................. 194
Aminocidos y Protenas .................................................................................................. 194
Lpidos ............................................................................................................................. 195
Vitaminas ......................................................................................................................... 196
Minerales ......................................................................................................................... 197
Requerimientos Nutricionales ................................................................................. 198

Ratas y Ratones............................................................................................................... 198
Cobayos........................................................................................................................... 199
Conejos ........................................................................................................................... 200
Cerdos ............................................................................................................................. 201
Perros .............................................................................................................................. 202
Primates no Humanos ...................................................................................................... 203
Peces............................................................................................................................... 204
Tipos de Dietas ....................................................................................................... 205

Esterilizacin de Dietas .................................................................................................... 205
Tipos de Dietas ................................................................................................................ 205
Papel de la Dieta en la Investigacin ...................................................................... 208

Influencia del Tipo de Dieta .............................................................................................. 208
Influencia de los Ritmos Circadianos ................................................................................ 209
Influencia del Tipo de Alojamiento .................................................................................... 211
Manipulaciones Nutricionales ........................................................................................... 211
Influencia de los Ritmos Circadianos ................................................................................ 211
Recompensa y Enriquecimiento ....................................................................................... 212
Privacin de Alimento ............................................................................................. 213

Efecto del Ayuno en el Vaciado Gstrico y el Peso Corporal ............................................ 213
Efectos del Ayuno sobre otros Parmetros ....................................................................... 214
Bibliografa .............................................................................................................. 215

Contenido
GENTICA DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO ............................................... 217

cido Desoxirribonuclico ................................................................................................ 219
cido Ribonuclico .......................................................................................................... 219
Alelo ................................................................................................................................ 219
Carcter ........................................................................................................................... 219
Cariotipo .......................................................................................................................... 219
Consanguinidad ............................................................................................................... 220
Cromosoma ..................................................................................................................... 220
Deriva Gentica ............................................................................................................... 220
Dominancia ...................................................................................................................... 221
Endogamia ...................................................................................................................... 221
F1 .................................................................................................................................... 221
Fenotipo........................................................................................................................... 221
Gen.................................................................................................................................. 221
Gentica .......................................................................................................................... 222
Genoma ........................................................................................................................... 222
Genotipo .......................................................................................................................... 222
Herencia .......................................................................................................................... 222
Heterocigosis ................................................................................................................... 222
Homocigosis .................................................................................................................... 222
Ligamiento ....................................................................................................................... 222
Locus ............................................................................................................................... 223
Meiosis ............................................................................................................................ 223
Parentesco....................................................................................................................... 223
Mutacin .......................................................................................................................... 224
Recesividad ..................................................................................................................... 224
Sobrecruzamiento ............................................................................................................ 224
Conceptos Generales de Gentica ......................................................................... 225

Leyes de Mendel.............................................................................................................. 225
Teora Cromosmica de la Herencia ................................................................................ 226
Caracteres Cualitativos .................................................................................................... 227
Caracteres Cuantitativos .................................................................................................. 227
Herencia Ligada al Sexo .................................................................................................. 228
Gentica y Modelos Animales ................................................................................. 229

Pez cebra......................................................................................................................... 229
Anfibios ............................................................................................................................ 234
Rata de Laboratorio (Rattus norvegicus) .......................................................................... 235
Gentica del ratn de laboratorio ............................................................................ 237

Origen del Ratn de Laboratorio ...................................................................................... 237
Principales Estirpes Definidas Genticamente ................................................................. 238
Colonias No Definidas Genticamente ............................................................................. 244
Gentica Bsica del Pelaje .............................................................................................. 245
Control de la Pigmentacin en el Ratn ........................................................................... 247
Manipulacin Gentica del Ratn ........................................................................... 250

Mtodos de Modificacin Gentica .................................................................................. 250
Gestin de Colonias de Ratones Modificados Genticamente ......................................... 257
Biotecnologa Reproductiva Aplicada a la Gestin de Colonias ........................................ 259
Bibliografa .............................................................................................................. 261

ADQUISICIN DE ANIMALES Y ESTATUS SANITARIO .......................................... 262
Estandarizacin Microbiolgica ............................................................................... 264
Estatus Microbiolgico ............................................................................................ 266
Definicin Microbiolgica ........................................................................................ 267
Adquisicin de Animales ......................................................................................... 269
MANEJO, SUJECCIN E IDENTIFICACIN DE ANIMALES .................................... 275
Manejo de Animales................................................................................................ 277
Peces............................................................................................................................... 277
Anfibios ............................................................................................................................ 277
Reptiles............................................................................................................................ 277
Aves ................................................................................................................................ 278
Conejos ........................................................................................................................... 278

Contenido
Rata ................................................................................................................................. 279

Ratn ............................................................................................................................... 279
Hmster ........................................................................................................................... 279
Cobayo ............................................................................................................................ 279
Identificacin de Animales ...................................................................................... 280

Identificacin Temporal .................................................................................................... 280
Identificacin Permanente ................................................................................................ 280
TOMA DE MUESTRAS ............................................................................................ 283

Obtencin de Muestras de Sangre.......................................................................... 286
Efectos Fisiolgicos de la Prdida de Sangre ................................................................... 286
Volumen Seguro de Extraccin ........................................................................................ 288
Mtodos de Extraccin de Sangre .................................................................................... 289
Procesado de la Muestra e Influencia en los Resultados .................................................. 291
Sitio de Extraccin ........................................................................................................... 293
Anticoagulantes ms Utilizados ........................................................................................ 294
Obtencin de Muestras de ADN ............................................................................. 296

Obtencin de Muestras de Orina ............................................................................ 297
Mtodos de Obtencin de Muestras No Estriles ............................................................. 297
Mtodos de Obtencin de Muestras Estriles................................................................... 297
Obtencin de Otras Muestras Biolgicas ................................................................ 298

Lquido Biliar .................................................................................................................... 298
Mdula sea.................................................................................................................... 298
Fludo Cerebroespinal ...................................................................................................... 298
Heces .............................................................................................................................. 299
Salida y Fludo Lacrimal ................................................................................................... 299
Leche ............................................................................................................................... 299
Fludo Peritoneal .............................................................................................................. 299
Clulas (Macrfagos) Alveolares ...................................................................................... 299
Bibliografa .............................................................................................................. 300

ADMINISTRACIN DE SUSTANCIAS ...................................................................... 301
Volmenes de Administracin .......................................................................................... 303
Seguridad y Solubilidad de Sustancias............................................................................. 304
pH de las Soluciones Inyectables ..................................................................................... 305
Ratio de Absorcin y Distribucin de Sustancias .............................................................. 305
Vas de Administracin ........................................................................................... 306

Administracin Enteral (per os) ........................................................................................ 306
Administracin Parenteral ................................................................................................ 309
Bibliografa .............................................................................................................. 319

ANESTESA, ANALGESIA Y CUIDADOS PERIOPERATIVOS .................................. 320
Equipos y Gases ..................................................................................................... 323
Oxgeno ........................................................................................................................... 323
Manorreductor.................................................................................................................. 324
Rotmetro ........................................................................................................................ 324
Vaporizador ..................................................................................................................... 324
Flujo de Oxgeno de Emergencia ..................................................................................... 325
Alarma de Suministro de Oxgeno .................................................................................... 325
Cmara de Anestesia ....................................................................................................... 325
Mscaras ......................................................................................................................... 325
Tubos Endotraqueales ..................................................................................................... 326
Laringoscopios ................................................................................................................. 326
Equipo de Monitorizacin ................................................................................................. 326
El Animal ................................................................................................................. 327

Examen Clnico ................................................................................................................ 327
Ayuno .............................................................................................................................. 327
Anestesia ................................................................................................................ 329

Medicacin Preanestsica ............................................................................................... 329

Contenido
Analgesia ................................................................................................................ 331

Guas para paliar el dolor ................................................................................................. 331
Tipos de analgsicos ....................................................................................................... 331
Dosificacin de analgsicos ............................................................................................. 334
REDUCCIN DEL DOLOR, MALESTAR Y SUFRIMIENTO ...................................... 335

Sufrimiento: Dolor, Malestar y Angustia .................................................................. 339
Dolor y Malestar ............................................................................................................... 339
Angustia (Distrs) ............................................................................................................ 339
Alteraciones Provocadas por el Malestar ................................................................ 341

Reconocimiento y Control del Malestar ................................................................... 342
Reconocimiento del Malestar ........................................................................................... 343
Criterios de Punto Final Humanitario (Humane Endpoints) ............................................... 344
Clasificacin de la Severidad de los Procedimientos .............................................. 346

Seccin I. Categoras de Severidad ................................................................................. 346
Seccin II. Criterios de Atribucin .................................................................................... 346
Seccin III. Ejemplos........................................................................................................ 347
TCNICAS ASPTICAS .......................................................................................... 351

Tcnica Asptica en Ciruga ............................................................................................. 353
Instalaciones .................................................................................................................... 354
Preparacin para la Ciruga .............................................................................................. 354
Bibliografa .............................................................................................................. 356

CRITERIOS DE PUNTO FINAL HUMANITARIO ....................................................... 357
Diseo de un Protocolo de Punto Final Humanitario ............................................... 360
Valoracin del Objetivo del Experimento .......................................................................... 360
Indicadores de Dolor, Distrs y Enfermedad .................................................................... 360
Determinacin del Criterio de Punto Final ........................................................................ 361
Entrenamiento del Personal y Frecuencia de Observaciones ........................................... 362
Guas de Aplicacin del Punto Final Humanitario ................................................... 364

Cncer ............................................................................................................................. 364
Toxicologa ...................................................................................................................... 365
Enfermedades Infecciosas ............................................................................................... 365
Gua para Determinar el Grado de Severidad ......................................................... 366

Bibliografa .............................................................................................................. 367
MTODOS DE EUTANASIA .................................................................................... 369
Eutanasia......................................................................................................................... 371
Feto ................................................................................................................................. 371
Neonato ........................................................................................................................... 371
Adulto .............................................................................................................................. 371
Eutanasia de Roedores y Conejos Adultos ............................................................. 372

Mtodos Fsicos ............................................................................................................... 372
Mtodos Qumicos ........................................................................................................... 372
Confirmacin de la Eutanasia .......................................................................................... 374
Eutanasia de Roedores Neonatos .......................................................................... 375

Dixido de carbono (CO2) ................................................................................................ 375
Otros Mtodos ................................................................................................................. 375
Eutanasia de Fetos (Roedores) .............................................................................. 376

Bibliografa .............................................................................................................. 377
10
LEGISLACIN Y
RECOMENDACIONES
11

Legislacin y Recomendaciones
Las leyes surgen por la necesidad de regular actividades o situaciones sobre las que no existe un
consenso total. Cualquier hecho o situacin, salvo aquellos que son absolutamente incuestionables, se
puede interpretar de diferentes formas, y son generalmente estas diferentes interpretaciones las que
fomentan conflictos que ponen de manifiesto la necesidad de una legislacin que regule los hechos o
situaciones.
El uso de animales con fines experimentales, formativos o cientficos no es una excepcin, pero,
aunque exista una cierta normativa, hasta la segunda mitad del siglo XX no se gener la suficiente
presin social como para promover la publicacin de leyes especficas. Esta presin social resulta del
enfrentamiento entre una postura totalmente proteccionista y una defensa de la necesidad de utilizar
animales en estudios cientficos.
La legislacin que afecta directamente a los animales utilizados para experimentacin u otros fines
cientficos en centros localizados en el territorio espaol tiene 3 niveles o mbitos de aplicacin:
- Europeo.
- Nacional.
- Autonmico.
13

Legislacin Europea
La legislacin europea proviene de 2 fuentes distintas, por un lado los convenios europeos y por otro
las directivas europeas. Los primeros los elabora el Consejo de Europa y las segundas la Unin
Europea y son de obligado cumplimiento para los pases miembros.
Consejo de Europa
El Consejo de Europa, establecido en 1949, es una organizacin poltica intergubernamental, con sede
en Estrasburgo (Francia) que representa a 47 estados europeos. Cuenta tambin con cinco
observadores (Canad, Estados Unidos, Japn, Mjico y El Vaticano).
Los Convenios Europeos tratan de buscar un espacio legal comn europeo. Estos convenios sirven de
referencia y de base comn para la modificacin y armonizacin de la legislacin de los diferentes
pases. Actualmente hay 5 convenios que hacen referencia a aspectos del bienestar animal, pero el
fundamental es el convenio europeo para la proteccin de animales vertebrados utilizados en
investigacin y otros propsitos cientficos, denominado Convenio ETS123. Este Convenio se abri a la
firma en Estrasburgo el 18 de Marzo de 1986. Espaa lo firm el 11 de Agosto de 1988 y lo ratific el
12 de Septiembre de 1989, entrando en vigor el 1 de Enero de 1991. Los convenios slo afectan a
aquellos pases que deciden adherirse mediante una firma especfica.
Uno de los aspectos que inmediatamente se puso de manifiesto fue que el proceso legislativo no era lo
suficientemente gil como para incorporar el avance de los conocimientos en este campo con la
suficiente rapidez. Por ello, se elabor y aprob el protocolo de enmienda al Convenio ETS123
(Convenio ETS170). Se abri a la firma el 22 de Junio de 1998 en Estrasburgo. Espaa lo firm el 1 de
Julio de 2003, lo ratific 17 de Noviembre, y entro en vigor el 2 de Diciembre de 2005. Este protocolo
de enmienda, permite que las modificaciones respecto a las caractersticas de alojamiento y manejo
detalladas en los apndices puedan modificarse por un procedimiento mucho ms sencillo y gil.
La cuarta consulta multilateral de las partes del Convenio Europeo ETS123 se reuni el 15 de Junio de
2006, adoptando por unanimidad un anexo a dicho Convenio. Este anexo A consta de una primera
parte (parte A), con una seccin general, que proporciona lneas directrices para el alojamiento y los
cuidados de los animales destinados a experimentacin u otros fines cientficos. Esta seccin se
desarrolla con condiciones adicionales para las especies que se utilizan con mayor frecuencia
(roedores, conejos, perros, gatos, hurones, animales de granja, aves, primates no humanos, peces,
anfibios y reptiles). En la segunda parte (parte B), los expertos que intervinieron en la elaboracin del
anexo, aportan la justificacin cientfica para las directrices detalladas en la parte A.
Ms informacin sobre esta propuesta puede encontrarse en:
http://ec.europa.eu/environment/chemicals/lab_animals/proposal_en.htm
14

Unin Europea (Comisin Europea y Consejo)

La Comisin Europea es un rgano de la Unin Europea. La Comisin Europea es la institucin que en
el marco constitucional que de la Unin Europea se encarga de promover las directivas y tratados.
No debe confundirse el Consejo con el Consejo Europeo, institucin de la UE que rene a los jefes de Estado y de gobierno
de los Estados miembros de la Unin Europea, ni tampoco con el Consejo de Europa, una organizacin internacional y ajena
a la Unin Europea.
El Consejo (tambin llamado Consejo de la UE o Consejo de Ministros) es la Institucin de la UE en la que se encuentran
representados los gobiernos nacionales de los Estados miembros, y a la que corresponde, junto con el Parlamento Europeo,
las funciones legislativa y presupuestaria. Es, pues, un rgano legislador y con ciertas funciones polticas suplementarias. En
ambos casos se pronuncia a iniciativa de la Comisin Europea, segn la siguiente secuencia: Comisin-Consejo-Parlamento.
La Unin Europea public en 1986 la Directiva del Consejo 86/609/CEE de 24 de Noviembre, relativa a
la aproximacin de las disposiciones legales, reglamentarias y administrativas de los estados miembros
respecto a la proteccin de los animales utilizados para experimentacin y otros fines cientficos. Dado
que la entonces Comunidad Econmica Europea no tena competencias sobre temas de formacin,
esta Directiva no incluy dentro de su mbito de aplicacin el uso de animales con fines de formacin,
por lo que para regular esta utilizacin en la misma fecha se adopt la Resolucin 86/C331/02 en la
que los estados miembros se comprometen a no utilizar animales en experimentos salvo para
determinados fines y desarrolla las condiciones de uso de los mismos en la enseanza y formacin.
La Directiva 86/609/CEE se modific en 2003, adoptando el Protocolo de Enmienda al Convenio
ETS123. Esta modificacin permite la creacin de un Comit de Reglamentacin para asumir en la
normativa comunitaria los cambios propuestos en los anexos del Convenio ETS123 del Consejo de
Europa, ya que de otra manera los anexos de la Directiva podran no ser conformes con las
obligaciones que se derivan del Convenio ETS123. El 6 de Agosto de 2003 se public la Decisin del
Consejo 2003/584/CE, de 22 de Julio, relativa a la celebracin del Protocolo de Enmienda del Convenio
Europeo sobre la proteccin de los animales utilizados para experimentacin y otros fines cientficos.
La Comisin Europea ha aprobado una nueva directiva: 2010/63/UE del Parlamento Europeo y del
Consejo, de 22 de Septiembre de 2010, relativa a la proteccin de los animales utilizados para fines
cientficos. Esta directiva debe transponerse a las legislaciones nacionales como fecha tope el 1 de
Enero de 2013, aunque en ningn caso derogar legislacin nacional publicada con anterioridad que
sea ms restrictiva que la propia directiva. Este punto hace que sea posible que actuaciones que estn
prohibidas por una ley nacional en algn pas miembro no lo estn en otro. La nueva directiva ha
intentado encontrar una base mnima para no excluir a los pases de nueva incorporacin en los que la
legislacin en experimentacin animal es muy laxa. Sin embargo, esto ha causado bastante
descontento en pases o colectivos que buscaban una legislacin mucho ms estricta. De hecho no
ser posible dictar condiciones ms restrictivas con posterioridad a la trasposicin de esta directiva
europea.
15

Legislacin Nacional
En Espaa, la legislacin relativa al uso de animales en investigacin cientfica procede, casi
exclusivamente, de la transposicin de directivas aprobadas por algn rgano de la Unin Europea.
Real Decreto 1201/2005

El Real Decreto 1201/2005, de 10 de Octubre, sobre proteccin de los animales utilizados para
experimentacin y otros fines cientficos traspone y desarrolla la Directiva 86/609/CEE. Este Real
Decreto regula, entre otros aspectos, las condiciones en que se pueden utilizar animales de
experimentacin, el registro de establecimientos de cra, suministradores y usuarios de animales de
experimentacin, los requisitos de las instalaciones y equipos de los mismos, tanto humanos (con
especial hincapi en cual debe ser su formacin) como materiales. Establece asimismo la creacin
tanto de comits ticos de bienestar animal para los centros de titularidad estatal como de la comisin
tica estatal de bienestar animal. En resumen, regula el cundo, cmo, dnde y por quin se realiza la
experimentacin con animales. Adems de incluir normas especficas sobre el alojamiento de los
animales establece qu actuaciones sobre los mismos se consideran experimentacin animal. Por
ejemplo, se excluyen los actos veterinarios y los procedimientos de marcaje de animales que se llevan
a cabo
frecuentemente
en
animales
silvestres.
Segn
nuestra legislacin
se consideran
experimentacin con animales y, por tanto, sujetos a las condiciones descritas en el Real Decreto,
procedimientos cientficos y docentes tales como:
- Investigacin cientfica sobre aspectos tales como la prevencin de enfermedades, alteraciones de
la salud y otras anomalas o sus efectos, as como su diagnstico y tratamiento en el hombre, los
animales o las plantas.
- El desarrollo y fabricacin de productos farmacuticos, alimenticios y otras substancias o productos,
as como la realizacin de pruebas para verificar su calidad y seguridad.
- La valoracin, deteccin, regulacin o modificacin de las condiciones fisiolgicas en el hombre, los
animales y las plantas.
- La proteccin del medio ambiente natural en inters de la salud o bienestar del hombre o los
animales y mantenimiento de la biodiversidad.
- Educacin y formacin.
- La investigacin mdico-legal.
Tras la publicacin de la nueva directiva europea en 2010, se abre un plazo de 2 aos para que los paises miembros de la UE
trasladen esta directiva a sus respectivos marcos legislativos. Es de esperar, por lo tanto, que en 2012 Espaa promulgue una
nueva ley o RD adaptndose a la nueva normativa europea.
16

Ley 32/2007
Ley de 7 de Noviembre de 2007, para el cuidado de los animales en su explotacin, transporte,
experimentacin y sacrificio. El objetivo de esta ley es fijar las normas bsicas sobre explotacin,
transporte y sacrificio de animales, as como la experimentacin con los mismos. Con esta ley se
completa la normativa nacional incorporando algunos aspectos de la normativa comunitaria en materia
de proteccin animal, incluyendo la tipificacin de infracciones y sanciones. Comprende en su mbito
de aplicacin tanto las explotaciones (incluyendo
centros donde se alojan animales de
experimentacin) como los medios de transporte y de sacrificio.

Con objeto de asegurar el cumplimiento de la ley, se regulan las inspecciones y se establecen las
competencias inspectoras, por las que se determina que las administraciones pblicas, en el mbito de
sus competencias, son las encargadas de realizar los controles necesarios para asegurar el
cumplimiento de la normativa, as como de las disposiciones de las Comunidades Autnomas en esta
materia, correspondiendo a la Administracin General del Estado las inspecciones sobre los aspectos
de la proteccin animal en materia de importacin y exportacin de animales y en los centros que
dependen de ella.
Ninguno de estos 2 textos hace referencia directa al procedimiento para la acreditacin de la formacin
para la realizacin de procedimientos con animales de experimentacin. Este aspecto pretende
abordarse con un nuevo Real Decreto pendiente an de aprobacin aunque en fase muy avanzada de
redaccin. Como un aspecto especfico de los animales de experimentacin y dado el creciente
nmero de modelos genticamente modificados que hay en los animalarios, conviene mencionar la
legislacin que afecta a estos animales especficamente y que se recoge en otra ley y el real decreto
que la desarrolla.
Otra Legislacin Relevante

Ley 9/2003 sobre el rgimen jurdico de la utilizacin confinada, liberacin voluntaria y comercializacin
de organismos modificados genticamente (OMG).
Real decreto 178/2004 con el reglamento para el desarrollo y ejecucin de la ley 9/2003.
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Legislacin Autonmica
La legislacin nacional afecta fundamentalmente a los centros de titularidad estatal y a aquellos
aspectos que estn relacionados con el transporte de animales entre pases, pero las diferentes
comunidades autnomas tienen potestad legislativa. En la pgina web del Ministerio de Medio
Ambiente, Rural y Marino se recoge el listado de diferentes normas dictadas en diferentes territorios del
Estado Espaol. Es conveniente realizar consultas peridicas para una puesta al da en la siguiente
pgina web:
http://www.mapa.es/es/ganaderia/pags/bienestar/laboratorio.htm
18
La Gua y el Principio de las 3Rs

La ciencia del animal de laboratorio ha sido tratada en profundidad en un gran nmero de libros y
trabajos cientficos que abordan aspectos tan diversos como el manejo, la sanidad, o la etologa.
Adems de estos textos ms especficos, hay uno que es necesario mencionar, popularmente conocido
como La Gua. Este texto recoge informacin referente a los aspectos ms prcticos del alojamiento y
el cuidado de los animales de experimentacin en un intento de proporcionar un verdadero manual,
divulgativo y asequible, en contraste con las disposiciones legales que muchas veces son difciles de
interpretar.
En realidad debemos hacer mencin a 2 guas. La original es un texto americano titulado Gua para el
cuidado y uso de los animales de laboratorio publicada en 1963 y que recoge una serie de principios
de manejo, cuidado y alojamiento que deban ser seguidos por todos aquellos investigadores que
reciban fondos del sistema de salud pblico de EEUU (NIH). Esta gua ha sido revisada en numerosas
ocasiones: 1965, 1968, 1972, 1978, 1985, 1996 y recientemente en 2010.
La otra gua es de mbito europeo, se conoce como la Eurogua y es un resumen del apndice A del
Convenio Europeo ETS123 de 2006. Esta Eurogua fue redactada por FELASA (Federacin Europea
de Asociaciones para la Ciencia del Animal de Laboratorio).
FELASA es una federacin de asociaciones nacionales relacionadas con las ciencias del animal de
laboratorio. En el caso de Espaa, la asociacin representada en FELASA es SECAL. Esta sociedad,
como todas sus homlogas europeas, agrupa profesionales relacionados con la ciencia del animal de
laboratorio de todos los estamentos, pblicos, privados y de la ms diversa orientacin, desde la
industria farmacutica, alimentaria, la investigacin bsica o aplicada y tambin industrias relacionadas
con productos destinados a los animales de laboratorio. FELASA, a pesar de ser una institucin no
gubernamental tiene un gran peso especfico y es uno de los rganos consultivos de referencia en
cualquier legislacin referente a los animales de experimentacin a los que recurre la Comision
Europea ante cualquier iniciativa legislativa. Las recomendaciones de FELASA en ciertos aspectos han
llegado a ser el estndar internacional. Un ejemplo es el perfil sanitario que suele acompaar a
cualquier intercambio de animales entre instituciones. Estas organizaciones no gubernamentales son
una fuente importante de informacin y suelen disponer de pginas web que pueden consultarse.
Desatacan:
AALAS
http://www.aalas.org
ECLAM
http://www.eclam.org
ESLAV
http://www.eslav.org
FELASA
http:// www.felasa.eu
Fundacin Guido Bernardini http://fondazioneguidobernardini.org/en/home.aspx

IAT - Institute of Animal Technology http://www.iat.org.uk
ICLAS http://www.iclas.org
ILAR http://dels.nas.edu/ilar
UFAW http://www.ufaw.org.uk
19

El Concepto de las 3Rs

En los aos 50, la preocupacin por la utilizacin correcta de animales en experimentacin y otros fines
cientficos se plasm en el enunciado por parte de Russel y Burch en 1959 de lo que se conoce como
'principio de las 3Rs'. Este principio constituye un eje esencial en el desarrollo de la experimentacin
animal. Las 3Rs a las que se hace referencia son:
- Reduccin: estrategia encaminada a utilizar el mnimo nmero de animales necesario para
alcanzar el objetivo propuesto.
- Refinamiento: incluye la mayora de aquellos procedimientos que afectan a la vida del animal de
experimentacin y permiten aliviar o reducir el posible dolor o malestar.
- Reemplazo: utilizacin de tcnicas alternativas que puedan aportar el mismo nivel de informacin
que el obtenido con animales y que no impliquen la utilizacin de stos.
La importancia conceptual de este principio es de tal calibre que se hace referencia directa a l en la
nueva directiva europea recientemente aprobada. Su aplicacin contribuye de manera importante a
disminuir paulatinamente el nmero de animales utilizados en experimentacin sin comprometer los
resultados cientficos.
Un ejemplo de reduccin es la utilizacin de animales con un fondo gentico definido. Limitando la
variabilidad es posible obtener una respuesta ms homognea tras un determinado tratamiento,
pudiendo determinarse su efecto real. Sin embargo, esto puede ser un arma de doble filo. Hay que
entender que la utilizacin de un nico fondo para un estudio da una informacin limitada a las
caractersticas genticas de esa lnea, si se quiere contar con un estudio representativo es necesario
comprobar que el tratamiento tiene el mismo efecto o parecido en otro fondo diferente.
La reduccin en experimentacin animal debe entenderse siempre de forma correcta, un experimento
planteado con un nmero insuficiente de animales es contraproducente, porque efectivamente reduce
el nmero de animales utilizados, pero estos resultan intiles ya que los resultados no son
consistentes. El cumplimiento correcto del principio de reduccin del nmero de animales utilizados en
experimentacin est en manos de las personas encargadas del diseo experimental. Un correcto
diseo permite maximizar la informacin obtenida si se recurre a una estadstica adecuada para cada
tipo de estudio. Quien propone un experimento debe adems evitar repetir experimentos ya realizados.
El intercambio de modelos animales entre instituciones y grupos de investigacin reduce el nmero de
animales utilizados, lo mismo que la creacin de repositorios internacionales. Muchas iniciativas
internacionales van encaminadas a lograr esta meta.
El concepto de refinamiento se refiere a cualquier procedimiento que permita mejorar el bienestar y
disminuir el dao producido a los animales. Refinamiento es, por ejemplo, la aplicacin de analgesia a
un animal tras una intervencin quirrgica. Las tcnicas no invasivas como la resonancia magntica
nuclear son otro ejemplo de refinamiento, pero no es necesario buscar mejoras tan sofisticadas, a
veces un buen conocimiento del comportamiento del animal permite crear unas condiciones
ambientales que mejoren su adaptacin.
20
Los tcnicos que realizan procedimientos tienen un papel esencial en el refinamiento. En muchos
casos, un correcto entrenamiento permite realizar el procedimiento en menor tiempo y con un menor
grado de estrs para el animal. Acostumbrar a los animales al manejo diario supone una mejora
consistente en su bienestar y contribuye a la obtencin de resultados experimentales ms fiables.
El tercer concepto (reemplazo) es la meta final que se persigue; el tratar de sustituir la experimentacin
con animales de forma completa, utilizando material no sensible. En el concepto de reemplazo se
engloban aspectos muy variados:
a. El correcto intercambio de informacin, lo que incluye la aceptacin a nivel legal de los
resultados de un estudio por otros pases.
b. La creacin de simuladores y modelos matemticos.
c. La utilizacin de medios audiovisuales en la docencia o incluso maniques que sirven para
desarrollar una cierta destreza manual antes de realizar los procedimientos en un animal vivo.
d. El uso de seres vivos con sistemas sensoriales menos desarrollados siempre que los
estudios lo permitan. Por ejemplo, peces en lugar de ratones. O recurrir a fases de desarrollo en
las que el sistema sensorial no sea funcional.
e. Las tcnicas in vitro que abarcan desde el uso de organismos unicelulares a lneas celulares
derivadas de tejidos o la utilizacin de rganos aislados.
El deseo de promover, dentro de los limites posibles, el reemplazo llev a la Unin Europea en 1991 a
crear el ECVAM (European Centre for the validation of alternative methods), respondiendo a uno de los
requerimientos de la Directiva 86/609/CEE, en la que se especifica en su artculo 23 que 'La Comisin y
los Estados miembros debern fomentar la investigacin sobre el desarrollo y la confirmacin de
tcnicas alternativas que puedan aportar el mismo nivel de informacin que el obtenido en
experimentos con animales, que supongan el uso de menos animales o que impliquen procedimientos
menos dolorosos, y darn los pasos oportunos, en la medida en que lo consideren apropiado, para
fomentar la investigacin en este campo'. Actualmente ECVAM esta integrado en el Instituto para la
Salud y Proteccin de los consumidores, en Ispra (Italia). Entre las labores de ECVAM destacan:
1. Coordinar la validacin de los mtodos alternativos a nivel de la Unin Europea.
2. Actuar como punto de intercambio de informacin en el desarrollo de mtodos alternativos.
3. Crear, mantener y gestionar una base de datos sobre mtodos alternativos.
4. Promover el dilogo entre los diferentes sectores implicados, para el desarrollo, la validacin y el
reconocimiento internacional de los mtodos alternativos.
A pesar del tremendo esfuerzo realizado para el desarrollo de sistemas in vitro que reemplacen la
investigacin con animales hay algunas limitaciones que ser imposible salvar; los modelos in vitro dan
una informacin importante pero limitada y son insuficientes cuando se estn estudiando efectos que
se deben a la interaccin de diferentes tejidos y rganos, como por ejemplo los estudios de toxicidad
crnica o de carcinognesis.
Sin embargo, algunos sistemas in vitro han sustituido de forma prcticamente total a la utilizacin de
animales. Por ejemplo, en la generacin de anticuerpos monoclonales, o en ciertas partes de los
estudios de toxicidad y seguridad de agentes qumicos y biolgicos. Dado el impulso que se quiere
21

hacer del desarrollo y validacin de nuevos mtodos alternativos a travs de la nueva poltica de la
Unin Europea, es posible que esta lista se vea aumentada en el futuro.
22
ANATOMA Y
FISIOLOGA DE LOS
PRINCIPALES MODELOS
ANIMALES

Anatoma y Fisiologa de los Animales de Laboratorio
A continuacin, se exponen algunas caractersticas anatmicas y fisiolgicas relevantes de los

principales grupos de vertebrados utilizados en investigacin cientfica y otros procedimientos
relacionados.
El grupo de los vertebrados (Vertebrata, es decir, animales que poseen vrtebras) es un subfilo muy
diverso de cordados que engloba a todos los animales con espina dorsal o columna vertebral
compuesta de vrtebras. Incluye unas 60,000 especies actuales y muchos fsiles. Los vertebrados se
han adaptado a prcticamente todos los ecosistemas terrestres, incluidos los ms extremos e
inhspitos. Aunque proceden inicialmente del medio dulceacucola, han conseguido evolucionar en el
mar y pasar posteriormente al medio terrestre, el cual dominan en la actualidad. Los vertebrados tpicos
tienen el cuerpo claramente dividido en 3 regiones: cabeza, tronco y cola. La cabeza est bien
diferenciada, y en ella se agrupan y centralizan la mayora de rganos sensoriales y nerviosos. La
estructura craneal de los vertebrados fosiliza con facilidad, lo cual ha sido fundamental para conocer su
evolucin. El tronco est a su vez subdivido en trax y abdomen. Del tronco sobresalen las
extremidades, que son impares en las lampreas y pares en el resto de vertebrados. Presentan
notocordio en la fase embrionaria, que es sustituido por la columna vertebral durante el desarrollo.
Durante el desarrollo embrionario, las paredes del cuerpo de los vertebrados desarrollan unos orificios
o hendiduras branquiales, que dan lugar a las branquias (en los peces) y a diferentes estructuras. El
esqueleto puede ser seo, cartilaginoso, y en ocasiones presentar dermoesqueleto, consistente en
unas formaciones cutneas esquelticas.
El grupo de los Vertebrados incluye todos los peces, anfibios, reptiles, aves y mamferos existentes en
la actualidad. Se divide tradicionalmente en 8 clases vivientes, agrupadas de la siguiente manera:
Subfilo Vertebrata (Vertebrados).
- Agnatha (vertebrados sin mandbulas).
Clase Cephalaspidomorphi-Petromyzontiformes (lampreas).
Clase Myxini (mixines).
- Gnathostomata (vertebrados con mandbulas).
Clase Chondrichthyes (tiburones, rayas y otros peces cartilaginosos).
Clase Osteichthyes (peces seos).
Clase Amphibia (anfibios).
Clase Reptilia (reptiles).
Clase Aves (aves).
Clase Mammalia (mamferos).
25

Introduccin al Desarrollo Embrionario

Los aspectos embriolgicos que se exponen a continuacin, se refieren a animales de reproduccin
sexual, o sea que comienzan su desarrollo a partir de una sola clula (normalmente 2n) llamada cigoto
o huevo. Este embrin se forma tras la fusin de 2 gametos, que pueden ser iguales (isogametos) o,
ms comnmente, diferentes (anisogametos) denominados vulo () y espermatozoide (). El
citoplasma del cigoto presenta toda la cantidad de sustancia nutritiva que el vulo haya podido aportar,
pues el espermatozoide slo aporta material gentico. A la sustancia nutritiva del embrin se le llama
vitelo y la cantidad del mismo est muy relacionada con el tipo de desarrollo. De modo que si existe
poco vitelo, el desarrollo ser muy rpido o debe existir un aporte externo de sustancia nutritiva.
El inicio del desarrollo embrionario ofrece aspectos semejantes en todas las clases animales. Despus
de la fecundacin, el huevo se divide numerosas veces (segmentacin), alcanzando el estadio de
mrula primero (masa de clulas con aspecto de mora), y blstula una vez que se ha formado una
cavidad interna en el embrin. La blstula es el origen de una fase ms avanzada, la gastrulacin,
durante la cual las hojas embrionarias se disponen adecuadamente, lo que corresponde ya el estadio
de gstrula. Despus de la gastrulacin, los rganos comienzan a formarse y el desarrollo inicia su
especializacin (organognesis).
Segmentacin
El cigoto formado tras la fecundacin, se divide dando 2 clulas hijas o blastmeros. A continuacin,
cada uno de stos se segmenta segn un plano perpendicular al plano de divisin anterior; estadio de
4 blastmeros. Contina el proceso de segmentacin con sucesivas divisiones y cuando se llega a un
nmero determinado de blastmeros que depende de la especie y generalmente no ms de 128 , se
llega a una estructura que recuerda el aspecto de una mora o mrula, sin que se haya producido
aumento de tamao. En teora, la mrula en corte se vera como una serie de blastmeros, en este
caso de igual tamao, que confluyen en la parte central, presentando dos polos, uno externo en
contacto con el medio ambiente y otro interno, en contacto con las otras clulas.
Una vez formada la mrula, el embrin comienza a aumentar en tamao adoptndo una forma similar a
la de una pelota. Los blastmeros migran hacia la periferia, quedando un hueco en el centro o
blastocele, lleno de lquido (lquido blastoclico) producido por los mismos blastmeros a travs de
entrada de lquido externo. El blastocele o cavidad primaria nunca est en contacto con el exterior. A
esta fase se le denomina ya blstula.
Gastrulacin
Hasta la fase de blstula no ha habido necesidad de aporte nutritivo externo. A partir de este estadio, si
el cigoto contiene poco vitelo habr necesidad por ejemplo de aporte materno. Si el huevo es de mucho
vitelo el proceso ser diferente. Como ejemplo, suponemos que nuestro cigoto es de poco vitelo y
existe suficiente aporte nutritivo.
27

La gastrulacin es el conjunto de procesos morfogenticos que conducen a la formacin de las capas

fundamentales de los metazoos. La actividad mittica, muy intensa a lo largo de la segmentacin,
disminuye aunque nunca por completo. Los blastmeros, o agrupaciones de ellos, emprenden
migraciones considerables de las que se origina la segregacin celular en dos tipos, uno de los cuales
cubrir al otro. La capa externa o ectoblasto (ectodermo), cubre la capa interna o endoblasto
(endodermo). Pero la gstrula no es diblstica ms que en los porferos y celenterados (cnidarios y
ctenforos), en todos los dems metazoos existe una capa media o mesoblasto (mesodermo), que
queda intercalada entre las dos capas antes mencionadas.
En la blstula una parte de los blastmeros comienza a invaginarse, formndose el blastoporo. El lugar
donde esto se produce, se encuentra determinado genticamente. La invaginacin progresa e invade
todo el territorio del blastocele que se va viendo reducido proporcionalmente al aumento del
arqunteron o nueva cavidad que se va formando, que tiene la particularidad de estar en contacto con
el exterior a travs del blastoporo.
Hasta aqu, se ha formado una gstrula a travs del proceso de gastrulacin. Se han formado 2 capas
de blastmeros, una en contacto con el exterior o ectodermo y otra en contacto con el arqunteron o
endodermo y entre las 2 se encuentra el blastocele (lleno de lquido blastoclico).
Como se ha comentado antes, algunos animales, porferos y celentreos, mantienen esta etapa,
siendo animales diblsticos (con 2 hojas blastodrmicas). Por ejemplo, los plipos tienen 2 capas y se
pueden asemejar a una gstrula invertida, siendo la mesoglea equivalente al blastocele y la cavidad
interna en contacto con el exterior equivalente al arqunteron, no as el gastroporo con el blastoporo,
pues tienen orgenes embrionarios diferentes. Estos animales son representantes de un nivel celular
muy sencillo que no han formado rganos sino algo parecido a tejidos.
Para la formacin de rganos se ha tenido que desarrollar una tercera hoja blastodrmica
(mesodermo), aunque de tal forma que no se aumente demasiado el volumen, siguiendo la lnea
anteriormente descrita. En la gstrula diblstica, algunas clulas del endodermo se invaginan formando
unas bolsas que se van ampliando hasta la formacin del mesodermo, situada entre el endodermo y el
ectodermo. Esta nueva hoja embrionaria presenta 2 capas; la somatopleura cercana al ectodermo y la
esplacnopleura cercana al endodermo. El mesodermo delimita junto con el mediastino (que dar lugar
al mesenterio) una cavidad o celoma. Los animales con tres hojas blastodrmicas se denominan
triblsticos, tanto acelomados, pseudocelomados como eucelomados. La formacin del mesodermo,
anteriormente descrita, se denomina enterocelia.
Tipos de Huevos
Las caractersticas del huevo o cigoto, dependen del vulo, puesto que el espermatozoide aporta slo
la informacin gentica complementaria para formar una clula 2n. Los huevos, en funcin de la
cantidad y distribucin de vitelo pueden clasificarse del modo siguiente:
28

Oligolecitos: con muy poca cantidad de vitelo homogneamente distribuido. De pequeo

tamao y ncleo central. Si la cantidad de vitelo es nfima se habla de huevos alecitos. Se
observan, por ejemplo, en anfioxos, erizos de mar, estrellas de mar y mamferos.
Heterolecitos: con una mayor cantidad de vitelo que tiende a concentrarse en el polo
vegetativo. Ncleo desplazado hacia el polo animal. Con segmentacin total desigual. Por
ejemplo, huevos de anfibios.
Telolecitos: con gran cantidad de vitelo dispuesto en el polo vegetativo, Ncleo desplazado
hacia el polo animal. Con segmentacin parcial. Se observa en por ejemplo aves, reptiles y
elasmobranquios.
Centrolecitos: vitelo y ncleo centrales. El citoplasma en la periferia. Con segmentacin
parcial. Huevos de insectos.
Tipos de Segmentacin del Huevo

Existen 2 tipos principales de segmentacin, total y parcial:
Segmentacin total
Afecta a la totalidad del huevo. La encontramos en los huevos oligolecitos y heterolecitos. Tambin
llamada segmentacin holoblstica. Segn distintos criterios podemos establecer las siguientes
subclasificaciones. Por ejemplo, en funcin de la dimensin de los blastmeros:
Igual: cuando todos los blastmeros son de igual tamao.
Desigual: las dos primeras divisiones dan lugar a blastmeros iguales, pero a partir de la
tercera segmentacin se da lugar a blastmeros pequeos o micrmeros, que se localizan en
el polo animal, y a blastmeros grandes o macrmeros en el polo vegetativo.
Segn la disposicin de los blastmeros:
Radial: los blastmeros se distribuyen segn meridianos y paralelos. Un blastmero dado se
hallar por debajo del blastmero superior y por encima del inferior. La segmentacin radial es
indeterminada, en el sentido de que no hay ninguna relacin entre la posicin de cualquiera
de los blastmeros y el tejido que de modo especfico vayan a formar en el embrin. Esta
segmentacin se encuentra entre los deuterstomos, los cordados y algunos filos menores.
Espiral: los husos de segmentacin no son ni horizontales ni verticales, sino oblicuos con
relacin al eje del huevo. Los blastmeros hijos se disponen sobre los surcos que hay entre
los blastmeros padres. Para ir del polo animal al vegetal, es preciso describir una espiral
cuyo eje es el del huevo. La segmentacin espiral es determinada, debido a que el destino de
cada blastmero resulta fijado tan pronto como comienza la segmentacin. Todos los
blastmeros deben estar presentes para formar el embrin completo, y si uno es separado de
29

los dems habr un desarrollo embrionario anormal. Con pocas excepciones, este tipo de
segmentacin aparece en los platemintos, moluscos, anlidos, artrpodos y muchos filos
menores.
Bisimtrica o birradial: se encuentra en los celentreos ctenforos. Los dos primeros planos
de segmentacin, que son meridianos. Constituyen los dos planos de simetra del embrin. Si
quitramos uno de los blastmeros, no se desarrolla parte importante del animal.
Bilateral: se halla en ascidias. El primer plano de segmentacin corresponde al plano de
simetra bilateral del embrin. El huevo en vas de desarrollo aparece siempre bajo el aspecto
de dos mitades simtricas, cada blastmero de un lado se corresponde a un blastmero
simtrico del lado opuesto.
Los diferentes tipos de segmentacin total expuestos no son excluyentes entre s, sino que se pueden
mezclar, dando lugar a:
Total radial igual: slo se conoce en el gnero Synapta, equinodermo holotrido cuyos huevos
son oligolecitos. En el polo animal, que dar lugar a la estructura del organismo, se
encuentran los micrmeros, y en el polo vegetativo los macrmeros que se encargarn de
nutrir al resto de la formacin. Segn la regla de Balfour: "Una clula se multiplica tanto ms
rpidamente cuanto menos vitelo tenga", los macrmeros se dividirn ms lentamente que los
micrmeros.
Total radial desigual: caso general en la mayora de los huevos oligolecitos y para todos los
heterolecitos. Ejemplo tpico es la segmentacin del huevo de rana.
Total espiral igual: no se ha observado nunca en la realidad.
Total espiral desigual: se da en numerosos invertebrados como moluscos, anlidos y
artrpodos. La primera segmentacin es meridiana, y conduce a la formacin de los 2
primeros blastmeros, llamados AB y CD. La segunda segmentacin, en un plano igualmente
meridiano y perpendicular al primero, da los cuatro blastmeros A, B, C y D, origen de los 4
cuadrantes del embrin. Despus de la tercera segmentacin se aslan del polo animal cuatro
micrmeros que se intercalan seguidamente entre los cuatro macrmeros del polo vegetativo.
Estos 4 micrmeros constituyen el primer cuarteto 1a, 1b, 1c y 1d. Los 4 macrmeros se
designarn por 1A, 1B, 1C y 1D. Despus de la cuarta segmentacin, los macrmeros
originarn un segundo cuarteto de micrmeros: 2a, 2b, 2c y 2d. Los macrmeros se
convierten en 2A, 2B, 2C y 2D. Pero mientras que el segundo cuarteto se separa, el primero
se divide y produce 2 grupos de 4 micrmeros: un grupo inferior en el polo animal (1a1, 1b1,
1c1 y 1d1) y un grupo intercalado por debajo (1a2, 1b2, 1c2 y 1d2). Este proceso y
numeracin celular contina hasta la sexta segmentacin que conduce a la blstula de 64
blastmeros. Los macrmeros dan un cuarto y ltimo cuarteto: 4a, 4b, 4c y 4d, tornndose en
4A, 4B, 4C y 4D. Los tres primeros cuartetos se dividen al unsono y su nomenclatura sigue
las reglas precedentes. La notacin del linaje celular se interrumpe aqu, y al tiempo, la
30

segmentacin de torna asncrona, en especial en lo que se refiere al blastmero D, que es

siempre el ms voluminoso. Cada divisin se hace en un sentido diferente.
Segmentacin parcial
La segmentacin no incluye el polo vegetativo del huevo y la mayor parte del vitelo permanecer
insegmentado. Este tipo de segmentacin se encuentra en huevos telolecitos y centrolecitos. Tambin
se denomina segmentacin meroblstica. El huevo alecito de los mamferos, por perder el vitelo
secundariamente, inicia su segmentacin al modo holoblstico (total) y la prosigue enseguida al modo
meroblstico (parcial). Existen dos tipos de segmentacin parcial:
Segmentacin parcial discoidal: tpica de los huevos telolecitos. La segmentacin de hecho no
afecta ms que a un disco de citoplasma prximo al polo animal. El ncleo se escinde en dos
y prcticamente antes de que se formen las nuevas membranas ya se estn dividiendo los
nuevos ncleos, as el huevo nunca se segmenta del todo, careciendo de divisin el polo
vegetativo. Se forma seguidamente un disco o casquete de blastmeros, el blastodermo o
blastodisco, a partir del cual se formar el embrin que reposa sobre la masa vitelina.
Segmentacin parcial perifrica o superficial: tpica de los huevos centrolecitos de los
insectos. Al principio el ncleo central se divide numerosas veces sin aparecer lmites
celulares definidos en la masa vitelina. Luego, los ncleos alcanzan el citoplasma perifrico, y
se disponen formando una capa sincitial. Finalmente surgen los lmites que delimitan un
blastodermo perifrico alrededor del vitelo central no segmentado. Cabe sealar adems que
uno o varios ncleos emigran a uno de los polos en donde sern el origen de las clulas
germinales.
Blstula
Durante las primeras fases de la segmentacin, los blastmeros permanecen unidos dando al huevo un
aspecto parecido al de una mora, es el estadio de mrula. Pero muy pronto, los blastmeros tienden a
colocarse alrededor de una cavidad central o blastocele, quedando el estadio de blstula. Los
diferentes tipos de segmentacin de cada uno de los tipos de huevos condicionan tambin diferentes
tipos de blstula. Aunque existen muchos tipos intermedios, los principales son:
Celuloblstula regular: es el resultado de la segmentacin total igual. Es una blstula esfrica
con todos los blastmeros prcticamente iguales.
Celuloblstula irregular: es el caso de la segmentacin total desigual. Es una blstula esfrica,
con el blastocele ocupando una posicin excntrica y blastmeros de diferente tamao,
siendo el nmero de micrmeros mayor que el de macrmeros.
31

Esteuroblstula: es un caso extremo de segmentacin total desigual, donde el blastocele es

virtual al estar colmado por los voluminosos macrmeros del polo vegetativo. Su ejemplo
tpico se encuentra en el anlido marino Nereis.
Discoblstula: en la segmentacin parcial discoidal de los huevos telolecitos. El polo animal
del huevo forma un casquete de blastmeros que segregan lquido formando una cmara
equivalente al blastocele, todo ello cubriendo el vitelo no segmentado.
Periblstula: resultado de la segmentacin parcial perifrica de los huevos centrolecitos. En
ella el blastocele es virtual, rodeando los blastmeros el vitelo.
Grastrulacin
La gastrulacin es el conjunto de procesos morfogenticos que conducen a la formacin de las capas
fundamentales de los metazoos. La gastrulacin puede verificarse segn cuatro modalidades distintas,
pudiendo ser varias de ellas simultneas entre s:
Embolia: es el caso ms sencillo. Slo es posible en celuloblstulas.
Epibolia: en el caso de que el blastocele sea virtual, como en las esteuroblstulas, los
micrmeros del polo animal se multiplican activamente y terminan por rodear a los
macrmeros del polo vegetativo, quedando stos en posicin interna. El blastoporo queda
constituido por el contorno circular libre de la cpula ectodrmica. Sern los propios
macrmeros quienes delimitarn el arqunteron constituyndose en el endodermo. Los dos
casos anteriores, embolia y epibolia, estn asociados en los anfibios.
Deslaminacin: gastrulacin propia de algunos celentreos. Por mitosis las clulas de la
celuloblstula se separan en dos capas. Los husos mitticos son radiales y los planos de
segmentacin se producen paralelamente a la superficie del huevo. La blstula
monoestratificada se transforma en un germen con doble capa celular, formndose un
ectodermo y un endodermo. Este ltimo rodea al arqunteron que queda como un resto del
blastocele. No hay blastoporo. Se debe abrir una abertura, pero secundariamente, que no es
comparable con el blastoporo. En los animales con este arqunteron, resto de cavidad
primaria, se segregar una sustancia gelatinosa entre el endodermo y el ectodermo, que
formar una estructura llamada mesoglea, llena de clulas que pueden transitar por ella
(cnidarios).
Inmigracin: se observa en vertebrados superiores. Las clulas de la blstula emigran
activamente hacia el blastocele al nivel de un blastoporo, quedan libres y posteriormente se
estructuran en el interior, formando una capa compacta o endodermo bajo el ectodermo.
El Mesodermo
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El mesodermo es la tercera capa blastodrmica que se forma entre el ectodermo y el endodermo. Los
animales que poseen esta tercera capa se denominan triblsticos. Los animales triblsticos se dividen
en 3 grupos, dependiendo de si poseen o no celoma:
Acelomados: aquellos que no poseen celoma. El mesodermo en un momento de la
gastrulacin, se forma por proliferacin de clulas endodrmicas y, en su mayora,
ectodrmicas, constituyndose una masa celular o parnquima y no celoma. Los platelmintos,
por ejemplo, son animales acelomados.
Pseudocelomados: poseen un falso celoma. El mesodermo se forma a partir del endodermo,
constituyndose en masas celulares que dejan cavidades, llamadas pseudocelomticas,
limitadas por el endodermo y el mesodermo. Tienen funciones similares a las del celoma. Los
rotferos y nemtodos son ejemplos de animales pseudocelomados.
Eucelomados: animales con verdadero celoma. La formacin del mesodermo y, por lo tanto,
del celoma, se produce de 2 formas:
Enterocelia: se da en equinodermos y cordados.
Esquizocelia: en la gstrula, las clulas endodrmicas se dividen y forman un conjunto de
clulas que nunca han estado en contacto con el arqunteron, denominadas teloblastos. En
una fase posterior, y como resultado de la proliferacin de los teloblastos, se forman cordones
teloblsticos que originarn una esplacnopleura, una somatopleura, el mediastino y el celoma.
Esta modalidad la presentan moluscos, anlidos y artrpodos.
El Celoma (Cavidad Celomtica)

El celoma es un espacio que permite que el mesodermo comience a formar rganos. Por tanto el tener
celoma es ventajoso. Adems cuanto ms complejo es un animal menor ser el celoma. Entre sus
funciones estn:
Espacio para formar rganos.
Esqueleto hdrico. Cuando est lleno de lquido se le llama hidrocele, como por ejemplo en la
lombriz de tierra.
El lquido celmico acta como un sistema de transporte entre la pared del cuerpo y la del
tubo digestivo, facilitando la distribucin de los nutrientes, metabolitos y gases resporatorios y
pudiendo almacenar temporalmente los productos de desecho para ser excretados
posteriormente.
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Peces
Los peces son animales acuticos, por lo general fusiformes y con simetra bilateral. Presentan
apndices especializados para el desplazamiento en el agua: las aletas. El color de los peces se debe
a las irisaciones de las escamas y los pigmentos contenidos en los cromatforos (clulas
especializadas de la epidermis). La coloracin de la piel y escamas se debe a pigmentos carotenoides,
melaninas, flavinas y purinas. En algunos peces, los msculos tambin poseen coloraciones
especficas, como consecuencia de determinados animales que les sirven de alimento. Los peces
respiran a travs de branquias. Las branquias estn constituidas por arcos cartilaginosos, situados en
la faringe, de los que parten filamentos con laminillas perpendiculares muy bien irrigadas. En general,
los peces seos tienen 4 arcos branquiales y los cartilaginosos hasta 7. Esta estructura confiere a las
branquias una gran superficie de intercambio de gases entre la sangre y el agua. Adems del
intercambio gaseoso, las branquias participan en el intercambio de otras sustancias (macromolculas,
sustancias orgnicas, iones) y juegan un papel importante en la regulacin osmtica. Las branquias de
los peces se colapsan cuando se sacan del agua, al disminuir la superficie de intercambio, y aunque se
conserven hmedas, el pez se asfixia en pocos minutos. El intercambio gaseoso con el agua ocurre en
las branquias, aunque en muchos peces exista intercambio gaseoso a travs de la piel (respiracin
cutnea).
La mayora de los peces seos (excluidos los planos), tienen vejiga natatoria. La vejiga natatoria se
llena de gases (45% O2, 4% CO2; 50% N2) que extrae de la sangre, sirve de elemento estabilizador y
cumple funciones acsticas (percepcin y emisin de sonido).
Los peces no mantienen una temperatura corporal definida, sino que se adaptan a la temperatura del
medio. Un aumento brusco de la temperatura, favorece la produccin de burbujas al disminuir la
solubilidad de los gases en la sangre (enfermedad de las burbujas). Los peces son capaces de regular
su presin osmtica manteniendo una concentracin inica constante frente a las variaciones
ambientales. Este proceso se realiza a travs de las branquias y los riones, donde se produce la
filtracin de la sangre. La cantidad de orina excretada depende de la temperatura, salinidad,
alimentacin y estado fisiolgico del pez. Los telesteos marinos regulan su presin osmtica
manteniendo concentraciones de iones en sangre bajas con respecto al medio y expulsando
activamente sales a travs de las branquias. Los de agua dulce, la regulan mediante la captacin activa
de sales a travs de las branquias manteniendo su sangre a mayor concentracin que el medio. Los
peces cartilaginosos acumulan urea.
Por lo general, los peces son fusiformes, ensanchados en su extremo craneal y deprimidos
lateralmente, en su parte caudal. Esta forma proporciona una movilidad ptima en el agua con el menor
consumo de energa, gracias a una disminucin considerable del rozamiento. Otras formas son la
ovalada, serpentiforme (e.g., anguilas), aplanada dorsoventralmente (e.g., lenguado), acintadas (e.g.,
peces abisales, caballito de mar).
Como el resto de los vertebrados, los peces poseen 3 regiones anatmicas: cabeza, tronco y cola. La
cabeza queda comprendida entre el extremo de la boca, cranealmente, y el borde caudal del oprculo
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(placa sea derivada del II arco visceral embrionario o arco hioideo que cubre a las branquias). El
tronco, de longitud muy variable, se extiende desde el borde caudal del oprculo hasta la vertical que
pasa por el ano. En l se implantan las aletas dorsal (normalmente impar), pectorales (2) y pelvianas
(2). La cola se corresponde con la porcin terminal y caudal del cuerpo, entre el ano y la finalizacin de
la aleta caudal (normalmente impar); incluye tambin el pednculo caudal, y una o ms aletas anales
(siempre situadas por detrs del orificio anal).
Las aletas pectorales y pelvianas se unen al cuerpo por un cinturn seo. Durante el proceso evolutivo
el cinturn seo de las aletas pelvianas ha migrado cranealmente llegando en algunas especies a
contactar con el torcico. Por otro lado, las aletas dorsal y anal se sostienen mediante pequeos
huesos incrustados en los septos intermusculares, mientras que la aleta caudal se une a varias
vrtebras caudales fusionadas. Las aletas contienen radios que pueden ser de 2 tipos, espinosos y
blandos. Los radios espinosos (presentes en especies ms evolucionadas) son huesos simples. Los
radios blandos (presentes en especies menos evolucionadas y en las aletas caudales de todos los
telesteos) estn formados por 2 componentes laterales cutneos que terminan unindose en la lnea
media.
Piel y Tegumentos
La piel acta como proteccin primaria frente al ambiente y por tanto como primera lnea defensiva
contra la enfermedad: una pequea herida puede convertirse rpidamente en una lesin mayor y ms
grave al saturarse de agua los tejidos subyacentes. Estructuralmente, la piel se compone de epidermis
(revestida por una cutcula) y dermis (desde donde se originan las escamas). Esta ltima descansa
sobre la hipodermis (capa adiposa laxa que une la piel a las estructuras subyacentes). La cutcula, de
escaso grosor (en torno a 1
m), la integran mucopolisacridos resultantes de una combinacin de
material celular, clulas descamadas y mucus secretado por clulas epidrmicas. Tambin puede
contener inmunoglobulinas especficas, cidos grasos libres, lisozimas y otras sustancias que podran
proteger frente a patgenos. El mucus, presente en gran cantidad en ciertas especies, hace que la piel
sea menos permeable (regulacin osmtica), la protege contra la abrasin, le ayuda a disminuir la
fuerza de rozamiento y reduce la posible accin de agentes irritantes o microorganismos,
desempeando un importante papel como fungicida y bactericida. En algunas especies el mucus
contiene sustancias que intervienen en la comunicacin (como la sustancia de alarma secretada por las
llamadas clulas de Schreckstoff en la piel de la carpa).
La epidermis se compone de un epitelio estratificado escamoso no queratinizado con clulas de
Malpigio bsicas (comunes a todos los vertebrados). Adems, presenta clulas caliciformes secretoras
del mucus. Su grosor es variable (capas de 3 a 20 clulas dependiendo de la especie), siendo mayor
en las especies con menor nmero o total ausencia de escamas (peces cartilaginosos). La dermis se
compone de 2 estratos, uno superficial o esponjoso (red de tejido conjuntivo laxo y fibras de reticulina
que contiene cromatforos, responsables del color de la piel, y mastocitos) y otro profundo o estrato
compacto (matriz densa de colgeno responsable de la fortaleza estructural de la piel).
Las escamas se originan en la dermis, e imbricadas unas con otras quedan cubiertas por la epidermis.
Normalmente no recubren la cabeza. Se trata de placas flexibles calcificadas (constituyen una fuente
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de calcio en caso de necesidad) que presentan una cresta sea exterior y una parte interior de tejido
conjuntivo fibroso (colgeno) no calcificado o parcialmente calcificado, dependiendo de la especie. La
prdida de escamas conlleva una prdida de epidermis, lo que puede tener consecuencias en la
regulacin osmtica. En los peces telesteos se encuentran 2 tipos principales de escamas: las
escamas ctenoideas (presentes en los telesteos de radios espinosos) y las escamas cicloideas
(presentes en los telesteos de radios blandos). La diferencia entre ellas radica en la presencia de un
nmero variable de indentaciones que se observan en el borde caudal de las escamas ctenoideas (su
forma recuerda a un peine, mientras que las escamas cicloideas presentan forma ms o menos
circular). Al tener un crecimiento continuo, ambos tipos de escamas quedan marcadas por anillos en su
superficie, lo que permite estimar la edad del individuo en muchas especies.
La hipodermis se conforma por tejido adiposo laxo que conecta la epidermis y dermis a las estructuras
subyacentes. Los procesos infecciosos e inflamatorios que hayan superado la piel se propagan
fcilmente por la hipodermis.
Esqueleto y Musculatura
La columna vertebral es ms sencilla que la de los mamferos, ya que no debe soportar el peso
corporal. Las vrtebras presentan 2 extremos cncavos entre los que se intercala un disco
intervertebral que conserva la notocorda embrionaria; presentan adems un arco neural y en la regin
torcica unas apfisis transversas que dan soporte a las costillas. Las vrtebras caudales presentan
tambin una apfisis ventral y un arco ventral (hemal) que protege a los principales vasos sanguneos.
En muchas especies existen espinas que parten desde la columna vertebral hacia los septos
intermusculares.
La musculatura se sita a ambos lados de la columna vertebral. Conserva el estado metamrico que se
describe en los embriones de los mamferos, de modo que aparece segmentada en una sucesin de
mimeros o miotomos, separados entre s por lminas finas de tejido conectivo denominadas
mioseptos (miocommata). La seccin transversal de un pez telesteo muestra de superficie a
profundidad 2 estratos musculares denominados msculo rojo (superficial) y blanco (profundo). Entre
ellos, el estudio microscpico permite definir un tercer estrato denominado msculo rosa o intermedio.
Desde la columna vertebral se proyecta hacia la lnea lateral un septo conectivo horizontal, que divide
la musculatura en 2 mitades: dorsal (epiaxial) y ventral (hipoaxial). Dado que la musculatura axial no
tiene msculos individualizados, el modo ms comn de describirla es mediante los trminos
anatmicos ya referidos (dorsales y ventrales).
Una caracterstica llamativa de las fibras musculares de los peces es su capacidad de crecimiento
hipertrfico e hiperplsico durante gran parte de la vida del pez. Por ello, el tamao de las fibras
musculares es muy variable, observndose en un filete fibras grandes, medianas y pequeas, segn se
trate de fibras ms o menos recientes (aspecto de mosaico).
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Cavidades Corporales
La cavidad celmica es la gran cavidad corporal de los peces. En su interior se alojan, ventralmente,
los rganos relacionados con los sistemas cardiocirculatorio y digestivo. Sobre el sistema digestivo se
sita el aparato reproductor (gnadas) y la vejiga natatoria. Finalmente, en la parte ms dorsal y en
situacin retroperitoneal se localiza el rin. Es importante conocer las caractersticas y relaciones
topogrficas de los rganos contenidos en esta cavidad, a fin de realizar la necropsia y remitir las
muestras pertinentes requeridas por los laboratorios de histopatologa, enfermedades parasitarias o
infecciosas, etc.
Celoma: (del griego koilos, hueco): es la cavidad corporal secundaria propia de los animales celomados, se forma entre capas
del mesodermo, y en ella se hallan suspendidos el tubo digestivo y otros rganos internos. El celoma es de origen
mesodrmico, por tanto es exclusivo de animales triblsticos.
Aparato Digestivo
Existen peces herbvoros y carnvoros. El intestino de los herbvoros es largo y fino, mientras que el de
los carnvoros es corto y grueso. El sentido del gusto est localizado en la boca, faringe, barbillas, e
incluso por todo el cuerpo (deteccin de sustancias qumicas en el agua). No existe una diferencia clara
entre gusto y olfato. La forma y el tamao del estmago de los peces varan mucho en funcin de sus
hbitos alimenticios. El estmago tpico suele tener forma sigmoidea (ms pronunciada en carnvoros)
con un saco ciego, ms o menos largo, dirigido caudalmente. El interior se puede dividir en 3 regiones
(cardias, fundus y porcin pilrica). La mucosa presenta numerosos pliegues y es rica en glndulas
secretoras de mucus, pepsina y cido clorhdrico.
El hgado se encuentra inmediatamente caudal al corazn (separado de ste por el septo transverso),
tiene normalmente un gran tamao y una coloracin que vara dependiendo de los hbitos alimenticios
del pez. Suele mostrar tonos marrones o rojizos en los peces carnvoros, y marrones claros en los
herbvoros. No obstante, en los ejemplares de acuicultura intensiva la acumulacin de grasa puede
determinar una coloracin blanquecina o amarillenta (hgado graso).
En los elasmobranquios, el hgado presenta 2 grandes lbulos laterales (izquierdo y derecho) bien
delimitados, y un pequeo lbulo intermedio (cstico) que acoge a la vescula biliar. En los telesteos,
los lbulos no son tan evidentes (si bien esto vara con la especie), pero pueden existir procesos
(apfisis) que se extienden todo a lo largo de la cavidad celmica. En algunas especies (e.g., la carpa)
el hgado tambin integra al pncreas, denominndose entonces hepatopncreas. Al igual que en
mamferos, el hgado segrega bilis, que puede almacenarse en una vescula biliar de tamao y forma
variable. Adems, el hgado almacena glucgeno y grasa (en elasmobranquios es tambin importante
para la flotabilidad).
Desde el punto de vista histolgico el hgado carece de la tpica triada portal, propia de los mamferos.
Los conductos biliares y las ramas de la arteria heptica y vena porta se distribuyen por todo el
parnquima, donde cordones de hepatocitos se disponen alrededor de los sinusoides. Suele haber
tejido hematopoytico y abundantes macrfagos cargados de melanina.
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El intestino se dispone a modo de tubo entre el ploro y el ano. Es relativamente corto en carnvoros y
ms largo en herbvoros. Puede ser dividido en 4 partes: ciegos pilricos, intestino anterior o craneal,
posterior o caudal y recto. Los ciegos pilricos se definen como proyecciones digitiformes ciegas del
tubo digestivo, sencillas o con ramificaciones, extendidas a partir del ploro del estmago o de la parte
ms craneal del intestino, con los que pueden quedar comunicados de forma independiente o mediante
un orificio comn. Su nmero es muy variable: hasta 70 en salmnidos, varios cientos en tnidos y muy
escasos (3-5) en espridos como la dorada y el sargo. Pueden estar ausentes en las especies que
carecen de estmago. Estructuralmente se asemejan ms al intestino que al esfago. La mucosa est
provista de numerosos pliegues con glndulas secretoras de enzimas (lactasa, sacarasa, lipasa) que
intervienen en la digestin de las grasas. Tambin se les atribuye un papel en la absorcin de los
alimentos ya digeridos, al ampliar la superficie del tracto intestinal.
Los pliegues de la mucosa intestinal disminuyen progresivamente del intestino anterior al posterior. En
el recto los pliegues de la mucosa son cortos, la pared muscular gruesa y con gran capacidad de
distensin. Suele describirse una vlvula intestinal que separa el intestino posterior del recto.
El bazo tiene un tamao y una forma variable, se suele situar prximo al estmago. Su color es rojo
oscuro y estructuralmente no presenta separacin entre las pulpas esplnicas roja y blanca, pudiendo
presentar centros de melanomacrfagos (agregados de macrfagos cargados de melanina y
hemosiderina).
El pncreas se encuentra formando ndulos de disposicin variable. En ciertas especies se localiza de
forma difusa alrededor del intestino, entremezclado con la grasa mesentrica. En salmnidos los
ndulos del pncreas se disponen diseminados entre la grasa del mesenterio que fija los ciegos
pilricos; en la carpa se dispersan en el hgado en torno a la vena porta, formando el hepatopncreas,
y en otras especies, se sitan en el tejido subcapsular del bazo. Consta de una porcin exocrina y otra
endocrina (escasa). Existe un conducto pancretico que normalmente se une al biliar antes de
desembocar en el intestino craneal.
Sistema Circulatorio
La circulacin sangunea es cerrada, es decir, no se extravasa en su recorrido por el organismo. La
sangre representa alrededor del 2% del peso corporal. El corazn est constituido por 2 cmaras
situadas en serie. La sangre bombeada por el corazn pasa por las branquias y es distribuida despus
por el cuerpo del pez. La sangre de los peces es coagulable, los eritrocitos son nucleados, y poseen
leucocitos. Los peces tienen defensas inmunolgicas que les permiten neutralizar las infecciones.
Sistema Linfohematopoytico
Sistema Urogenital
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Las gnadas en los peces suelen ocupar un gran espacio dentro de su cavidad celmica. Entre las
especies de telesteos existe una gran variedad de estrategias reproductivas:
Especies gonocoristas: desarrollan un nico sexo funcional a lo largo de toda su vida. Se
clasifican en: primarios o diferenciados (desarrollan un nico tipo gonadal); indiferenciados (si
todos los individuos desarrollan inicialmente un ovario indiferenciado, el cual degenera en la
mitad de la poblacin para desarrollar un testculo funcional); y secundarios, si desarrollan una
gnada hermafrodita que posteriormente evoluciona hacia un nico sexo.
Especies hermafroditas: presentan ambos sexos funcionales a lo largo de su vida. En este
caso, si desarrollan antes el sexo masculino se denominan especies protndricas, y si es el
femenino el que se desarrolla primero se denominan protognicas. Si las gnadas propias de
cada sexo se desarrollan a la vez, se denominan ambisexuales.
Testculo de telesteos. Es un rgano par, alargado y unido a la pared dorsal de la cavidad celmica
por el mesorquio. Queda recubierto por la tnica albugnea. El conducto deferente se sita dorsalmente
y se abre al exterior desembocando a la cloaca en una papila urogenital. Se describen 2 tipos de
estructura testicular en funcin de dnde se desarrolle el tejido germinal. El testculo tubular presenta
tubos ciegos orientados desde la periferia a una cavidad central en la que se liberan los
espermatozoides. Es propio de los ateriniformes, como el guppy. El testculo lobular est integrado por
lbulos separados por tejido conjuntivo, rodeados a su vez por una membrana basal continua que
divide el testculo en 2 compartimentos: el interlobular y el intralobular.
El ovario de telesteos es tambin un rgano par, alargado y unido a la pared dorsal del celoma por el
mesovario. De l parte un corto oviducto que se contina con el extremo caudal de la gnada y que
termina en la papila urogenital. En los salmnidos falta el oviducto, de modo que los vulos escapan de
la cavidad celmica a travs de unos poros abdominales que comunican con la cloaca. Tambin se
describen 2 tipos de ovarios. El tipo gimnovrico no tiene una verdadera cavidad intraovrica, de modo
que los ovocitos maduros se liberan a la cavidad peritoneal para ser capturados por el extremo del
oviducto. En el tipo cistovrico, los ovocitos son liberados a una cavidad delimitada en el propio ovario,
cavidad que se contina con el oviducto.
En el ciclo anual del ovario se presentan las fases de ovognesis, ovulacin y puesta. Durante la
ovognesis el tamao del ovario es mucho mayor de lo normal, y puede adquirir una tonalidad rojiza o
amarillenta, debida al abundante vitelo de los ovocitos. Durante la poca reproductiva tambin se
hipertrofian los testculos. Tras la puesta y apareamiento, las gnadas regresan a un estadio
quiescente.
Telesteos hermafroditas (espridos). Presentan una gnada heterosexual que se describe como un
ovotestculo dividido en 2 zonas por tejido conjuntivo. El rea ovrica se suele situar en la parte
mediodorsal de la gnada, mientras que el rea testicular ocupa una posicin lateroventral. El cambio
de sexo funcional de la gnada depende no slo de la dotacin gentica del individuo (determinacin
genotpica del sexo), sino tambin de la interaccin de ste con su entorno (determinacin ambiental
del sexo).
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En funcin de la latitud en que habiten, se describen diferentes tipos de ciclos reproductivos. En climas
fros la puesta tiene lugar durante varias semanas al ao (salmnidos), en latitudes templadas la
puesta se prolonga durante varios meses (especies mediterrneas), y en las zonas tropicales el ciclo
reproductivo se prolonga durante todo el ao. En las especies de puesta estacional se describe un ciclo
con 4 fases (gametognesis, puesta, post-puesta y quiescencia). Las especies que ponen durante todo
el ao carecen de las fases de post-puesta y quiescencia.
La vejiga natatoria de los peces es un saco de paredes membranosas que deriva del intestino craneal
embrionario. Localizada en la parte ms dorsal de la cavidad celmica, se encuentra por lo general
dividida en 2 o 3 compartimentos. Esta estructura est presente en los peces telesteos, pero no en los
cartilaginosos. Puede constituir ms del 7% (peces de aguas continentales) o del 5% (peces marinos)
del volumen corporal. Sus funciones estn relacionadas con la flotabilidad, recepcin y produccin de
sonidos (en cipriniformes existe una cadena de huesecillos que conectan la pared de la vejiga con el
odo interno), percepcin de la presin e incluso respiracin (en los peces dipnoos constituye una
estructura pulmonar que les permite vivir fuera del agua).
En algunas especies, la vejiga natatoria (tambin denominada gaseosa) puede mantener su conexin
embrionaria con el esfago a travs de un conducto neumtico (peces denominados fisstomos),
mientras que los peces que han perdido esta comunicacin se denominan fisoclistos. Histolgicamente,
la pared de la vejiga est formada por una tnica interna con un epitelio de transicin sobre la lmina
muscular de la mucosa y una submucosa de tejido conjuntivo laxo muy vascularizado, adems de una
tnica externa con una serosa y una capa fibrosa rica en msculo y conjuntivo elstico. La vejiga
natatoria contiene gases en proporcin variable (oxgeno, nitrgeno y dixido de carbono). Los peces
fisstomos y algunos fisoclistos llenan la vejiga por primera vez con aire atmosfrico durante su fase
larvaria. Una vez que este aire ha sido absorbido, se puede volver a llenar con gases que se extraen de
la sangre arterial que pasa a travs de una glndula denominada glndula del gas o cuerpo rojo (es
una red extremadamente rica en capilares, recubierta por epitelio de aspecto glandular en los peces
fisoclistos). Dicha glndula queda situada a nivel de la tnica interna de la pared ms craneo-ventral de
la vejiga natatoria.
Los riones se sitan dorsalmente a la vejiga gaseosa, a lo largo de casi todo el techo de la cavidad
celmica (derivan del mesonefros y metanefros embrionarios) en posicin retroperitoneal y en posicin
ventral a la aorta dorsal. Los riones se describen como rgano par, aunque en algunas especies
pueden fusionarse parcial o completamente. Por lo general, se diferencia un rin craneal (formado por
abundante tejido hematopoytico, linfocitos, macrfagos, hemoblastos y eritroblastos) y un rin caudal
(que contiene un parnquima formado por corpsculos renales y tbulos, sin diferenciarse la corteza de
la mdula; contiene tambin tejido hematopoytico y centros de melanomacrfagos).
La orina producida drena desde los conductos colectores a los urteres. stos pueden fusionarse
caudalmente e incluso producir un ensanchamiento que se suele describir como dilatacin o vejiga
urinaria. Al igual que ocurre en las aves, existe un sistema porta-renal, que recibe sangre venosa
procedente de la cola a travs de la vena caudal. Entre los vasos sanguneos del rin craneal se
localiza la glndula interrenal, productora de cortisol, equivalente a la corteza de la glndula adrenal
(suprarrenal) de los mamferos. Junto a las clulas interrenales, asociadas a ganglios simpticos, o a
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modo de acmulos de tejido entre el rin y la columna vertebral, existen clulas cromafines,
equivalentes a la mdula de la glndula adrenal de los mamferos. Estas clulas son productoras de
epinefrina y norepinefrina (hormonas liberadas como respuesta primaria al estrs).
Aparato Respiratorio
Sistema Nervioso
rganos de los Sentidos
Reproduccin
En general, en los peces existen sexos separados, aunque se encuentran casos de hermafroditismo
sucesivo (por ejemplo, las doradas son machos el primer ao y posteriormente son hembras). La
mayora de los peces son ovparos aunque algunos, como el guppy, son ovovivparos.
Las gnadas estn alojadas en la cavidad abdominal. Expulsan sus productos mediante un conducto
que desemboca detrs del ano (poro genital). La fecundacin es externa y ocurre en el agua. La
gametognesis, est determinada principalmente por factores externos: luz y temperatura. Estos
factores influyen sobre la pituitaria que libera hormonas (gonadotropinas), que se distribuyen por la
sangre e influyen sobre distintos rganos, estimulando la secrecin de hormonas esteroides en las
gnadas, que controlan la gametognesis. Durante este perodo, gran parte del alimento se
transformar en reservas nutritivas en el vitelo de los huevos.
La localizacin de la puesta vara en funcin de la especie, en unas los huevos caen al fondo (huevos
bentnicos) y en otras flotan en la superficie (huevos pelgicos). En todas, el desarrollo es directo, de
los huevos sale una larva que se alimenta de vitelo (larva I). Cuando se ha desarrollado el aparato
digestivo lo suficiente y la larva termina el vitelo, debe encontrar el alimento adecuado para no morir de
inanicin. Este cambio se denomina punto crtico, puesto que es un momento delicado para la
supervivencia de las larvas (que pasan a ser alevines). Las altas mortalidades naturales hacen que las
puestas sean extremadamente numerosas para asegurar la supervivencia de las larvas. El crecimiento
del pez es continuo aunque a distintas velocidades, dependiendo principalmente de la temperatura del
agua y de la alimentacin, lo que origina anillos de crecimiento en las escamas. La hipfisis y el timo
segregan hormonas de crecimiento.
Algunas especies, como los guppy, se reproducen fcilmente en cautividad. El tamao de las hembras
determina el nmero de cras por parto, siendo el perodo medio entre partos de 31 das. Las hembras
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preadas se colocan en parideras para evitar que se coman a sus cras. La temperatura ptima para
que stas se desarrollen es de 25-28C con un pH de 7.
La determinacin del sexo puede ser difcil en algunas especies, mientras que otras presentan
diferencias notables, los guppy machos, por ejemplo, son pequeos y presentan una aleta dorsal ms
larga que la abdominal. Su aleta abdominal es tan larga como su rgano copulador. Las hembras, por
el contrario, son de mayor tamao y exhiben una aleta dorsal ms redondeada.
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Anfibios
Los anfibios son los primeros vertebrados (animales con espina dorsal) terrestres. Abarca 3 rdenes de
anfibios vivos: los anfibios con cola, formados por las salamandras (tambin los tritones) y las sirenas;
los anfibios sin cola, entre los que se encuentran los sapos y las ranas; y las cecilias, anfibios similares
a gusanos, carentes de extremidades. Debido a sus cuerpos esbeltos y largas colas, es fcil confundir
a algunos anfibios, como las salamandras, con los lagartos y otros reptiles. No obstante, al contrario
que los reptiles, los anfibios carecen de escamas y tienen que permanecer en las inmediaciones del
agua para sobrevivir.
La piel de los anfibios es fina, permeable, hmeda y viscosa e impide hasta cierto punto la prdida de
agua por evaporacin. Se encuentra provista de un abundante nmero de glndulas microscpicas que
contribuyen a mantenerla hmeda gracias al lquido que segregan. Cada 2-3 semanas renuevan la piel
mudando las capas superiores y a menudo se la comen. Las ranas y los sapos adultos presentan un
cinturn plvico desarrollado que recibe el impulso de las patas traseras al saltar. Los huesos de la cola
se han fusionado en una slida barra amortiguadora dentro del cinturn plvico. La columna vertebral
tiene de 6 a 10 vrtebras libres. La regin torcica est encerrada dentro de un cinturn torcico y
carecen de costillas. Las especies acuticas han perdido los prpados y tienen los ojos pequeos,
mientras que en la mayora de las especies terrestres stos son grandes y no solamente poseen
prpados sino rebordes transparentes inferiores.
Piel y Tegumentos
La piel de los anfibios es hmeda y fina aunque a veces puede presentar verrugas que le dan un
aspecto ms spero como en el caso de los sapos (Bufnidos) y entre sus particularidades est la de
estar nicamente sujeta al cuerpo del animal por unos puntos muy determinados.
La piel est formada por 2 capas que reciben el nombre de epidermis (la ms externa) y dermis (la ms
interna). Como se puede observar en el esquema, la epidermis est formada por varias capas de
clulas algo que histolgicamente se conoce con el nombre de pluriestratificado, mientras que la
dermis muestra una estructura esponjosa.
La capa ms externa de clulas que forma la epidermis est sujeta a renovaciones peridicas algo que
recibe el nombre de muda. Esta capa contiene depsitos de queratina que pueden ser ms o menos
abundantes dependiendo del hbitat de los animales. Por ejemplo, los sapos que seran los que dentro
de los anfibios tendran costumbres ms terrestres, presentan grandes acmulos de queratina y por
eso tambin, su piel es ms seca.
La queratina es una protena fibrosa muy resistente que sirve a los anfibios como proteccin contra el
desgaste (erosin) y en cierta medida evita la prdida de agua. A diferencia de la queratina que forma
las plumas de los pjaros, los pelos de los mamferos, las escamas de los reptiles, etc., la queratina de
los anfibios es ms blanda.
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En la dermis encontramos 2 tipos de glndulas: mucosas y serosas. Las primeras son las encargadas
de mantener hmeda la piel del animal mediante la produccin de moco y las segundas producen un
veneno acuoso y blanquecino que sirve para proteger al anfibio de sus depredadores potenciales. Si
bien es cierto que todos los anfibios tienen capacidad de producir este veneno, el grado de toxicidad
del mismo vara segn la especie. Lo que no queremos es que se caiga en la tentacin de dividir a los
anfibios en txicos o no txicos, venenosos o no venenosos, porque dado que todos presentan estas
glndulas, podemos decir que todos son potencialmente txicos y siempre hay que tomar unas
mnimas precauciones para no llevarnos sorpresas desagradables.
Las ranas producen potentes toxinas a partir de los alcaloides que ingieren en su dieta. Los alcaloides
se encuentran presentes en las plantas. Los insectos al ingerir estas plantas, se convierten en
portadores de estas toxinas que se van acumulando en las ranas. Esto hace que las ranas flecha
criadas en cautividad sean menos venenosas que sus parientes de las selvas tropicales.
En la dermis de los anfibios encontramos tambin las clulas encargadas del color de la piel que
reciben el nombre genrico de cromatforos. Estas clulas no son exclusivas de los anfibios, muchos
otros organismos tanto terrestres como marinos (e.g., sepias) las presentan. Los cromatforos pueden
acumular el pigmento en un punto concreto o bien dispersarlo por la piel dando lugar a las coloraciones
homogneas. Segn el grado de excitacin que presenten estas clulas, la coloracin puede aumentar
o disminuir de intensidad y a su vez pueden servir al animal para crear coloraciones crpticas (color de
la piel del animal idntico al de la superficie sobre la cual est posado).
Se distinguen 3 tipos de cromatforos:
Xantforos. Son los ms superficiales y presentan pigmentos como el rojo, el amarillo o el
naranja.
Iridiforos. Situados debajo de los anteriores, stos producen un pigmento plateado tirando a
cristalino.
Melanforos. Son los ms profundos y contienen melanina, responsable de la coloracin
pardo-negruzca.
La funcin de los iridiforos es actuar como espejo, es decir, la luz que incide sobre la piel y llega a
estas clulas es reflejada hacia los xantforos que son los cromatforos que se encuentran justo en el
nivel superior y el resultado de dicha interaccin, es la produccin de una u otra coloracin segn cual
sea el pigmento del xantforo que interacte.
Los animales adaptados al medio terrestre han desarrollado un potente esqueleto de sostn. Los
anfibios tpicamente presentan un esqueleto interno seo completo con huesos y cartlagos que ofrece
proteccin mecnica y sostn a los msculos, sistema nervioso y vsceras. Ahora bien, el grado de
robustez del esqueleto es variable en funcin de la especie y su modo de vida. Por ejemplo, un
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escuerzo (Ceratophrys ornata) necesita unas potentes mandbulas ayudadas de una potente
musculatura para la captura de los pequeos vertebrados que forman parte mayoritaria de su dieta.
La mayora de anuros presentan un sistema locomotor (musculo-esqueltico) especializado para el
salto y la natacin, gracias a contracciones simultneas que realizan de los msculos extensores de
sus extremidades posteriores. Los anfibios contrariamente a los peces que se mueven por
contracciones miotmicas del tronco, dependen de la columna vertebral que acta a modo de eje de
transmisin perdiendo la flexibilidad que tena en los peces y convirtindose en un eje rgido que
transmite la fuerza desde las extremidades posteriores al resto del cuerpo. Las ranas tpicas (Gnero
Rana por ejemplo) presentan 9 vrtebras troncales y un urostilo en el extremo posterior
correspondiente a la fusin de varias vrtebras caudales.
El crneo de una rana es mucho ms ligero que el de sus antepasados craneados debido a su menor
osificacin y tiene un perfil ms deprimido. Se diferencian 2 zonas con diferente grado de desarrollo:
frontal y posterior. La primera es donde se localiza la nariz, los ojos y el encfalo y presenta un grado
de desarrollo mucho mayor que la parte posterior donde tericamente debieran estar las branquias de
sus antecesores, los peces.
Los anuros como el resto de tetrpodos presentan 3 articulaciones principales: cadera, rodilla y taln o
si estamos en la extremidad anterior: hombro, codo y mueca.
La musculatura de los tetrpodos deriva de los msculos radiales que movan las aletas de aquellos
peces primitivos. La disposicin de la musculatura en los tetrpodos se ha hecho tan compleja que es
difcil encontrar evidencias o paralelismos de esta afirmacin. Haciendo una comparativa de las
diferencias y semejanzas de la musculatura de los peces y los anfibios nos encontramos con lo
siguiente. Los peces presentan una musculatura troncal organizada en bandas que reciben el nombre
de mimeros que les permiten flexiones laterales del cuerpo. Los msculos dorsales permiten que la
cabeza est unida a la columna vertebral y la musculatura ventral sirve para sujetar las vsceras en
aquellos anfibios que no viven en el agua.
Aparato Digestivo
Los anfibios adultos son carnvoros y se alimentan bsicamente de invertebrados diversos o tambin
de pequeos vertebrados en algunos casos. Debido al tipo de alimento que ingieren presentan un
intestino corto (caracterstica comn de todos los animales carnvoros) donde se produce parte de la
digestin enzimtica y absorcin de los nutrientes. No todos los anfibios tienen costumbres carnvoras
durante toda su vida, muchos anuros durante su fase larvaria son vegetarianos y se alimentan de algas
que raspan gracias a unas estructuras crneas que tienen en la boca. Para degradar la materia vegetal
es necesario un intestino largo donde pueda tener lugar la fermentacin necesaria que rompa las
molculas de celulosa (principal componente de estos alimentos).
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La captura del alimento tiene lugar gracias a una lengua extensible que tiene en su extremo una zona
altamente glandulosa que produce una secrecin viscosa para fijar la presa. No todos los anfibios
presentan lengua, incluso es un carcter definitorio de algn grupo como el de los Aglosos (Ppidos).
Todos los craneados presentan un sistema de circulacin cerrado, es decir, la sangre circula a travs
de una serie de venas, arterias y capilares impulsada por la accin de una bomba que recibe el nombre
de corazn. Aunque los peces tambin presentan el mismo sistema circulatorio, encontramos una serie
de transformaciones debido al paso de la respiracin branquial a la pulmonar. La eliminacin de las
branquias supuso la desaparicin de un obstculo para la libre circulacin de la sangre pero
aparecieron 2 nuevos problemas:
Proveer sangre a los pulmones. Para solucionar este problema, tuvo lugar la conversin del
sexto arco artico existente en los peces en unas arterias pulmonares y tambin aparecieron
unas venas pulmonares que retornaban la sangre al corazn.
Separar la sangre oxigenada de la no oxigenada. Esto supuso la creacin de un sistema de
circulacin doble: sistmica y pulmonar. La solucin adoptada fue la formacin de un tabique
en el plano mediano del corazn convirtiendo la nica bomba impulsora en una bomba doble
que proveyera sangre a cada circuito.
El corazn de una rana presenta por tanto, 2 aurculas y un solo ventrculo. La sangre del circuito
sistmico entra por la aurcula derecha y la aurcula izquierda recibe sangre recin oxigenada
procedente de los pulmones. Sangre oxigenada y no oxigenada separadas, verdad? Pero ahora,
ambas aurculas se contraen a la vez, o casi, y envan la sangre al nico ventrculo existente donde
tericamente se mezclan ambas. Pues bien, parece que la cosa no funciona exactamente as. Existe
una vlvula espiral que mantiene ambos tipos de sangre separados y garantiza que la sangre
oxigenada vaya al circuito sistmico y que la no oxigenada vaya al circuito pulmonar que tambin
incluye a la respiracin cutnea.
Sistema Urogenital
Los anfibios pueden realizar el intercambio gaseoso a travs de 3 superficies: piel, boca y pulmones.
Lgicamente, esto es as en anfibios adultos tpicos, puesto que las larvas respiran por branquias y hay
casos de adultos que siguen mantenindolas.
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El grado de utilizacin de una u otra superficie respiratoria depende del grupo. Los anuros muestran
una mayor dependencia de la respiracin pulmonar, mientras que los urodelos dependen ms de la
respiracin cutnea. Ahora bien no son excluyentes estos sistemas, es bien sabido que la piel supone
un aporte suplementario al intercambio gaseoso realizado por los pulmones durante el invierno en el
caso de los anuros o que an en condiciones normales, la mayor parte del dixido de carbono se
pierde a travs del tegumento y que la va ms importante de incorporacin de oxgeno son los
pulmones.
Uno de los requisitos para que los craneados iniciaran su andadura por el medio terrestre era que
desarrollaran pulmones o estructuras similares. Los pulmones estn irrigados por un complejo
entramado de capilares procedentes de arterias pulmonares derivadas del sexto par de arcos articos y
una vez se ha producido el intercambio gaseoso, la sangre retorna por las venas pulmonares y entra al
corazn por la aurcula izquierda. Los pulmones de las ranas son ovoides, elsticos y presentan su
superficie interna dividida en una serie de tabiques que a su vez se subdividen en una serie de
cmaras llamadas alvolos. stos tienen un tamao mayor al del resto de craneados, lo que implica
que los anuros tienen una superficie de intercambio gaseoso ms pequea, siempre hablando en
proporcin a su tamao lgicamente.
Cmo consiguen las ranas sacar rendimiento a una superficie pulmonar tan escasa? Los anuros
pulmonados respiran por presin positiva, lo que quiere decir que llenan sus pulmones forzando al aire
a entrar en ellos. Esto contrasta con el sistema de presin negativa de los amniotas, puesto que
nuestros pulmones se llenan de forma pasiva y realizamos el esfuerzo en la expulsin del aire. La
respiracin consta de unos movimientos rtmicos que siguen el siguiente orden: el aire penetra en la
cavidad bucal a travs de los orificios nasales al reducir la presin por descenso del suelo de la cavidad
bucal. Gran parte del aire se sita en una depresin posterior a la superficie inferior de la boca,
dispuesta centralmente a la obertura de la glotis. A continuacin se abre la glotis y el aire pulmonar
espirado pasa en forma de masa compacta a travs de la pared dorsal de la cavidad bucofarngea y
sale por los orificios nasales. La superficie bucal asciende con los orificios nasales cerrados forzando al
aire a pasar de nuevo por los pulmones. Con los pulmones hinchados se inicia el bombeo bucofarngeo
con la glotis cerrada y los orificios nasales abiertos. Este bombeo elimina de la cavidad bucal los restos
de aire pulmonar espirado. Los pulmones no estn completamente vacos de aire en cada espiracin,
de manera que el aire inspirado se mezclar con un volumen residual de aire espirado. sta es la tpica
consecuencia de la respiracin de flujo y reflujo y significa que la presin parcial de oxgeno ser
siempre inferior a la ambiental.
Hasta aqu todo lo que concierne a la respiracin pulmonar, pero muchos anfibios combinan la
respiracin pulmonar con la cutnea o en algunos casos incluso carecen de la primera (Pletodntidos).
Tambin como se ha comentado, encontramos anfibios adultos que siguen respirando por medio de
branquias y es todo esto lo que vamos a tratar a continuacin.
La respiracin cutnea tiene lugar gracias a que la piel de los anfibios es hmeda y bien vascularizada.
La captacin del oxgeno a travs del tegumento se hace por difusin y esto es posible por la
concentracin constante de oxgeno en la atmsfera. Los anfibios requieren ms oxgeno conforme
aumenta la temperatura debido al aumento de su metabolismo. Por eso durante el verano, la difusin
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no proporciona suficiente y se cubre con una captacin adicional de aire por los pulmones en algunos
grupos.
Algunos urodelos como la salamandra gigante de los Apalaches (Cryptobranchus alleganiensis)
presentan una serie de pliegues cutneos con arrugas que mueven para incrementar la superficie
respiratoria. Ya slo nos queda hablar un poco de la respiracin branquial, el ltimo sistema de
captacin de oxgeno que nos queda por tratar. Todos los anfibios pasan por una fase de respiracin
branquial cuando son larvas, pero en la mayora de especies tal caracterstica desaparece cuando
tiene lugar la metamorfosis. Pese a ello, algunos ambistmidos, sirnidos, etc., mantienen las
branquias cuando son adultos.
Algunos amfibios tienen la capacidad de producir sonidos. Esta carcterstica se encuentra slo en los
machos de los anuros y aunque resulta un tanto difcil para un aficionado distinguir a los anuros por su
sonido, los especialistas consiguen hacerlo dado que cada especie tiene un sonido peculiar que la
identifica o por lo menos se puede llegar a identificar a nivel de gnero. Aunque slo los machos son
capaces de producir sonidos, las hembras tambin presentan cuerdas vocales, que son las estructuras
encargadas de producirlos. Lo que ocurre es que en el caso de los machos, stas estn ms
desarrolladas y esto unido a que se localizan en la laringe que es como una especie de caja de
resonancia, hace que el sonido se pueda producir.
La intensidad del canto no slo depende de la laringe y del paso del aire a travs de las cuerdas
vocales que las hace vibrar sino que en el caso de los machos tenemos una serie de sacos o bolsas
vocales situadas en la boca que tambin sirven como eficaces cajas de resonancia.
Sistema Nervioso
Los anfibios son organismos cefalizados como lo son todos los craneados y buena parte de los
invertebrados en mayor o menor medida. El encfalo es el centro de todo el sistema nervioso y est
constituido por 3 regiones:
Encfalo anterior.
Encfalo medio.
Encfalo posterior.
Un centro nervioso sin nervios que comuniquen con rganos sensoriales sera poco til, as que en
este apartado hablaremos tambin de cules son los rganos sensoriales que presentan los anfibios y
que les permiten captar los estmulos externos ya sean mecnicos o qumicos.
El encfalo anterior se encarga del olfato y desempea un papel importante en la localizacin de
comida en salamandras acuticas, sirve para encontrar pareja, reconocimiento entre individuos, etc. De
hecho, las salamandras aparte de captar estrictamente olores tambin pueden detectar determinadas
sustancias qumicas de su entorno por medio del sistema vomeronasal. Algunas especies tienen ms
desarrollado este sistema que otras, pero por ejemplo las salamandras sin pulmones (Pletodntidos)
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hacen pasar el agua por los orificios nasales situados a cada lado del hocico y conducindola a travs
del rgano vomeronasal, lo que permitie a la hembra de salamandra detectar la composicin y calidad
de la dieta de los machos oliendo las heces de stos.
El encfalo posterior est dividido en 2 partes: cerebelo y mdula. El primero se ocupa del sentido del
equilibrio y la coordinacin de movimientos (no especialmente desarrollado en anfibios). La mdula
(parte anterior dilatada) tiene una forma oblonga y por el interior de la cual pasan todas las neuronas
sensoriales exceptuando las de la vista y del olfato. Encontramos aqu los centros de los reflejos
auditivos, la respiracin, la deglucin y el control vasomotor.
Despus de haber visto como est constituido el sistema nervioso central, vamos a ver desde un punto
de vista evolutivo, cules han sido las modificaciones que han sufrido los receptores encargados de la
percepcin de estmulos externos con el paso a la vida terrestre. Los peces desarrollaron la lnea
lateral como un sistema de deteccin de variaciones de presin y se ha mantenido como sistema
receptor en las larvas de los anfibios, si bien en los adultos prcticamente ha desaparecido con la
excepcin de algunas especies totalmente acuticas como el gnero Xenopus (ranas de uas). En el
medio terrestre no tiene sentido presentar una lnea lateral dado que el medio envolvente es el aire y
no el agua. Por ello, los animales han desarrollado un rgano para la deteccin del sonido, el odo que
en el caso de los anfibios presenta una estructura muy simple:
Membrana timpnica. Gran membrana que recubre externamente al odo medio.
Osculo. Recibe tambin el nombre de columela y transmite las vibraciones al odo interno.
Utrculo. Se localiza dentro del odo interno y de ste salen los canales semicirculares.
Sculo, Lagena y membrana tectorial.
Puede un anfibio or cualquier frecuencia? No. Todos los animales percibimos las ondas sonoras
situadas entre unas determinadas frecuencias y en el caso de los anfibios (anuros) son sonidos de baja
frecuencia, nunca superiores a 4-5 KHz. Como curiosidad cabe resaltar que dentro de los sonidos de
baja frecuencia existen variaciones entre las diferentes especies de anuros y que suelen percibir la
frecuencia que coincide con la llamada de los machos. Por ejemplo, las ranas toro oyen frecuencias
situadas entre 100 y 200 Hz, que coinciden con la frecuencia del canto emitido por el macho.
El sentido mejor desarrollado en un anuro tpico es la vista, si bien esto no es cierto para todos los
anfibios, especialmente para los que son completamente acuticos o para aquellos grupos cuyos
miembros carecen de ojos, como las cecilias. Si bien todos los anfibios tienen el mismo tipo de visin,
las salamandras sin pulmones (Pletodntidos) presentan visin binocular (lo que es un caso nico en
los anfibios).
El ojo de un pez no requiere de una estructura que lo mantenga hmedo dado que el agua se encarga
de esto, pero cuando se considera un animal que se desenvuelve en el medio terrestre, se necesita
alguna estructura que realice esta funcin como puede ser la aparicin de los prpados que a parte
ofrecen proteccin mecnica o de las glndulas lacrimales. Los ojos de los anfibios a diferencia de los
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de la mayora de los peces, cuando se encuentran en reposo, el enfoque est ajustado a objetos
distantes y necesita moverse hacia delante para enfocar objetos cercanos.
El ojo de un anfibio consta de las siguientes partes:
Retina. Contiene conos y bastones, siendo estos ltimos los responsables de la visin en
color.
Iris. Los msculos circulares y radiales que presenta, le permiten abrir o cerrar la pupila para
ajustarla a la cantidad de luz que incide sobre el ojo.
Membrana nictitante. Contrariamente a nosotros que tenemos el prpado superior mvil, los
anfibios lo tienen fijo siendo el prpado inferior el que se desplaza. La particularidad es que
este prpado est plegado de una forma especial que recibe este nombre.
Si hacemos una valoracin de conjunto, podemos decir que los anuros tienen una buena visin. Esto
es importante para emprender la huida antes de la llegada de un depredador y tambin para la captura
eficaz de las presas de las cuales se alimentan. Se sabe que algunas especies pueden distinguir hasta
8 colores diferentes y tanta es la agudeza visual que en algunos casos pueden ver a sus presas en la
ms completa oscuridad.
Reproduccin
Para la reproduccin se utilizan animales de entre 2-5 aos. La hembra produce feromonas que
estimulan al macho para que deposite los espermatforos. La fecundacin es externa, los machos
abrazan a las hembras por la parte dorsal y los huevos slo se fecundan en el momento de la puesta.
En la estacin reproductora los machos emiten una llamada de apareamiento, que sirve para atraer a
las hembras al rea de reproduccin. Adems de la llamada de apareamiento tienen otra llamada de
liberacin que emiten cuando son abrazados por otro macho. Las llamadas se amplifican mediante
resonadores sacos vocales que son estructuras blandas en forma de bolsa que salen de la cavidad
bucal y se hinchan de aire cuando tiene lugar la llamada.
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Los huevos se depositan en el agua y dependiendo de la temperatura de sta, variar el tiempo en que
aparezcan las larvas acuticas (renacuajos), que oscila entre 1 da y 3 semanas. Los huevos
generalmente estn incluidos dentro de una cpsula gelatinosa. El tamao del huevo y de las cpsulas,
la forma de la cpsula, el color de los huevos y forma de la puesta (en grupos pequeos o grandes, en
cordones, separadamente o adheridos a plantas o piedras) son rasgos importantes para el
reconocimiento de la especie. De los huevos nacen los renacuajos voraces que crecen con gran
rapidez, y respiran por medio de branquias hasta la metamorfosis, tras sta adquieren pulmones, su
sistema circulatorio pasa de ser sencillo y completo como el de los peces a doble e incompleto como el
de los reptiles y adquieren el aspecto de sus progenitores. En esta poca se desarrolla igualmente las
mandbulas y el anfibio comienza a comer insectos y otros animales minsculos. Como resultado de la
diferente alimentacin, el aparato digestivo disminuye enormemente de tamao. El proceso de
madurez en algunas larvas requiere pocos meses y en otras se prolonga durante varios aos.
Las larvas de tritn y salamandra tienen el cuerpo largo con branquias plumosas y desarrollan sus
patas anteriores antes que las posteriores. En contraste, los renacuajos de ranas y sapos tienen el
cuerpo redondeado, las branquias no son visibles externamente excepto en fases tempranas del
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5:00h
4 das
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30:00h
18:00h
desarrollo y sus patas posteriores se desarrollan antes que las anteriores. Presentan una boca
bastante especializada con un pico crneo bordeado por varias hileras de dientes labiales. Como las
branquias son internas deben ser aireadas por una corriente de agua que entra por la boca y sale por
el espirculo.
Xenopus laevis sufre el proceso de metamorfosis a los 4 meses, aunque no termina su desarrollo
completo hasta el ao. El macho es de menor tamao y presenta en la parte interior de las patas
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delanteras unas callosidades de color negruzco cuando es maduro sexualmente, ms evidentes en

perodos reproductivos, que le sirven para asirse a la hembra durante la cpula. Pueden vivir hasta 25
aos.
Se puede inducir la puesta de huevos de manera experimental, inyectando gonadotropina a ambos
sexos. Existen diferentes protocolos, uno de los ms sencillos, consiste en la inyeccin de 300 UI en el
saco linftico dorsal durante 2 das consecutivos al macho, y 600 UI el segundo da a la hembra. Tras
la inyeccin se dejan los animales en oscuridad, observando los huevos a la maana siguiente. La
temperatura del agua se debe mantener entre 18-22C, para que stos se desarrollen correctamente.
Debe construirse una plataforma perforada para proteger a los oocitos fecundados de sus padres. La
dieta es importante en los procesos reproductivos, hembras deficientemente alimentadas generan
oocitos con problemas de viabilidad.
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Reptiles
La clasificacin morfolgica de la clase Reptilia est basada en la presencia o no de ciertas aberturas
(bsides) situadas en la regin temporal del crneo, justo detrs de las rbitas. Los reptiles actuales se
agrupan slo en dos subclases, Diapsida y Anapsida. Aunque la clase Reptilia presenta un total de
cuatro subclases, dos de ellas, Synapsida y Euryapsida, corresponden a reptiles primitivos ya
extinguidos.
La subclase Diapsida se caracteriza porque, en su origen, los reptiles pertenecientes a este grupo
presentaban dos bsides en cada regin temporal, cada uno de los cuales quedaba limitado por un
arco (o barra sea) en su parte inferior. Con el paso del tiempo, la evolucin ha modificado estas
estructuras seas en ciertos rdenes y subrdenes, que ms adelante se detallarn. Los reptiles
dipsidos estn divididos en dos lneas principales. La lnea Lepidosauria, que etimolgicamente
siginifica reptiles escamosos, encuadra a los rdenes Rhynchocephalia (con una sola especie
viviente, la tuatara) y Squamata (que agrupa a los lagartos, serpientes y lagartos podos). La lnea
Archosauria significa etimolgicamente reptiles dominantes, la cual engloba al grupo de reptiles
extinguidos ms populares de todos los tiempos, los dinosaurios. Como reptiles dominantes vivientes,
que as lo son en los nichos ecolgicos que ocupan, encontramos el orden Crocodylia.
La subclase Anapsida est caracterizada porque los reptiles aqu descritos, no presentan bsides en la
regin temporal. El nico orden viviente es el Chelonia, cuyos miembros, evolutivamente hablando, han
sufrido importantes variaciones morfolgicas respecto a los anpsidos originales.
Los reptiles son animales poiquilotermos, y a diferencia de los anfibios no sufren metamorfosis.
Piel y Tegumentos
Morfolgicamente, la caracterstica que ms llama la atencin en un reptil cuando se observa por
primera vez, es su piel. Su epidermis presenta engrosamientos que dan lugar a las escamas que
cubren su piel, constituyendo una lmina continua. A diferencia de los peces, los reptiles presentan
escamas que no pueden separarse. La disposicin y el nmero de escamas en determinadas regiones
corporales se utilizan en la diferenciacin y clasificacin de varias especies de reptiles.
Cuando un reptil muda su piel (proceso fisiolgico denominado ecdisis), lo que hace es renovar su
capa de queratina, que se puede soltar en fragmentos o en una nica pieza. Bajo la epidermis, se
encuentra la dermis, formando un estrato vasculonervioso, que tambin es rico en tejido conectivo.
Los cocodrilos y quelnidos presentan a este nivel unos engrosamientos denominados osteodermos,
placas seas que refuerzan a las escamas crneas de la epidermis. Otros reptiles, camaleones y
algunos saurios, presentan clulas pigmentarias las cuales estn reguladas por estmulos de
naturaleza hormonal, nerviosa (camalen) o por una combinacin de ambos.
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La piel de los cocodrilos est formada por toscas escamas, engrosadas, de queratina, que dan lugar a
fuertes estructuras que juegan un importante papel en la defensa y camuflaje del individuo. La
estructura de escamas que conforma la epidermis en los cocodrilos es diferente a la que presentan los
peces: en los primeros, las escamas forman una capa continua que se articulan mediante tejido
conectivo elstico situado en la dermis, no estando articuladas de forma independiente (caso de los
peces). Por ello, las escamas no se disponen de forma solapada, aunque externamente pueda
parecerlo a los ojos del observador. A diferencia de otros reptiles (ofidios, saurios), la piel de escamas
no se renueva peridicamente.
La dermis la conforma una capa de tejido conectivo surcada por multitud de vasos sanguneos y
nervios. En esta capa se sitan pequeas placas de naturaleza sea, denominadas osteodermos, que
se disponen a modo de refuerzo de las escamas epidrmicas.
La piel del animal sufre determinadas variaciones estructurales dependiendo de la regin corporal que
se topografie. Sobre la cabeza, la piel est fuertemente adherida al crneo. Los territorios dorsales del
animal presentan escamas muy cornificadas que le confieren un alto grado de proteccin; mientras que
la piel de las regiones lateroventrales presenta escamas ms delgadas y de aspecto menos tosco. La
cola presenta, en la superficie dorsal, una doble fila de escamas triangulares dispuestas verticalmente
que, posteriormente, se fusionan en una nica fila desde la mitad de la longitud total de la cola hasta el
final de esta.
La disposicin y el nmero que presentan las escamas en las diferentes regiones corporales son
usados como caractersticas distintivas especficas, siendo las escamas situadas en las regiones
postoccipital y nucal las de mayor importancia para la identificacin. Las escamas de la regin
postoccipital son las situadas sobre la superficie dorsal de la base del crneo; las escamas de la regin
nucal se localizan inmediatamente caudal a las escamas de la regin postoccipital.
La piel de los cocodrilos posee clulas de tipo pigmentario (cromatforos), que les confiere la
capacidad de poder modificar, en un bajo grado, el color de su piel, sin llegar a ser tan evidente y
espectacular como los camaleones o igunidos. La coloracin de las regiones lateroventrales del
cuerpo del animal tiende a ser ms claras y brillantes que la superficie dorsal, cuya coloracin suele ser
ms oscura. Los individuos jvenes presentan una coloracin ms brillante y notoria que, al transcurrir
el tiempo, se vuelve ms tenue.
Los cocodrilos, a diferencia de otros reptiles, presentan ciertas glndulas cutneas: dos de ellas se
localizan en la mandbula, a nivel ventral, se cree que pueden estar relacionadas con el balance de sal;
otras dos glndulas se localizan a nivel cloacal, emiten una sustancia de carcter almizclero
relacionada con el apareamiento y la defensa.
El esqueleto de los reptiles, presenta ciertas particularidades evolutivas que les han ayudado a
colonizar la mayora de los biotopos existentes en las diferentes zonas biogeogrficas que conforman
la Tierra. Las mandbulas de muchos reptiles, no estn soldadas entre s, teniendo la capacidad de
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distenderse al presentar charnelas que permiten un mayor grado de movilidad (cinesis), lo que favorece
determinadas adaptaciones evolutivas a la hora de alimentarse. Los crneos pueden presentar un
mayor nmero de huesos, respecto a otros vertebrados superiores, al poseer un mayor nmero de
huesos independientes (paraesfenoides, supratemporal). Para mejorar el punto de enfoque hacia un
objeto, algunas especies de saurios y tortugas (tambin la tuatara), poseen osculos esclerticos en el
ojo, a modo de pequeas placas seas. Los reptiles con dientes, en general, los reemplazan
continuamente a lo largo de toda su vida, incluso durante la vejez, y las tortugas presentan un
crecimiento continuo en su pico crneo. Esta caracterstica, unido a que ciertas familias no presentan
centros secundarios de osificacin, epfisis seas, pudiendo crecer lenta, pero continuamente durante
su vida, hace que algunos reptiles no tengan barreras a la longevidad.
Como refuerzo de las paredes de la cavidad abdominal, para as soportar el peso del paquete visceral,
los reptiles presentan estructuras seas y cartilaginosas como las costillas abdominales (gastralia) de
los cocodrilos y las barras cartilaginosas (parasternum) de algunos lagartos.
Aparato Digestivo
La lengua presenta su superficie ventral (raz) fijada al piso de la cavidad oral, estando sus
movimientos bastante limitados (no puede protruirla). La porcin caudal de la lengua, a nivel de la
base, est elevada para formar un gran pliegue transversal que va a formar parte del pliegue larngeo
que separa la cavidad oral de la faringe. Para que el animal trague un bocado de carne tiene que
elevar verticalmente su hocico, debido a que la lengua, por su escasa motilidad, no participa en el
proceso de deglucin de la comida hacia el esfago. La denticin de los cocodrilos es tecodonta
(dientes sujetos a los alvolos dentarios excavados en el hueso), con dientes de forma cnica. Existen
ciertas variaciones interespecficas: los gaviales poseen todos los dientes iguales, siendo de pequeo
tamao, ideales para su dieta exclusivamente ictifaga; en el resto de especies los dientes pueden
variar en tamao, segn su localizacin en la boca. Los cocodrilos no mastican, sus dientes sirven para
sujetar a la presa para luego desgarrarla mediante bruscos movimientos de su cabeza o rotando sobre
su propio eje. Los dientes se renuevan, a medida que se pierden, durante toda la vida del animal.
Las serpientes presentan una cavidad oral que aumenta de tamao para tragar grandes presas debido
a la falta de fijacin de las mandbulas. Las serpientes tampoco mastican a sus presas sino que las
tragan enteras. Sus dientes, distribuidos en 6 filas (4 superiores y 2 inferiores), sirven para retener a la
presa. Los colmillos para inyectar el veneno estn atravesados, longitudinalmente, por un fino conducto
que comunica con las glndulas de veneno. Estas son glndulas labiales modificadas, cuyo contenido
es rico en enzimas, que han evolucionado en ciertas familias de serpientes. Para humedecer la cavidad
oral y lubricar a la presa para facilitar su deglucin, se encuentran varias glndulas mucosas
distribuidas por la boca (palatinas, linguales, sublinguales y labiales). La lengua est depositada en una
vaina situada bajo la glotis y la epiglotis, presenta terminaciones nerviosas de tipo olfativo.
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La denticin de los lagartos, en la mayora de especies, es de tipo pleurodonta (dientes con races
alargadas dbilmente sujetos al margen interno de la arcada dentaria, sin alveolos dentarios), siendo
los dientes perdidos o mudados reemplazados a lo largo de la vida del animal. Algunas familias
(Agamidae y Chamaeleontidae) presentan denticin acrodonta (dientes cortos unidos firmemente al
margen cortante de la arcada dentaria, sin alveolos dentarios), en estos, slo se reemplazan los
dientes de los individuos jvenes. Existen algunas especies de lagartos venenosos. El mecanismo de
transmisin del veneno es diferente al de las serpientes. Los colmillos de los lagartos no son huecos,
sino que presentan una hendidura exterior, no conectada directamente a las glndulas del veneno
(glndulas sublinguales modificadas). Cuando el reptil muerde, el veneno fluye desde la glndula,
circula por el surco del diente penetrando en la herida causada por la mordedura.
El pliegue larngeo de los cocodrilos se sita a nivel caudal del hueso palatino, entre el lmite caudal de
la cavidad oral y la faringe. Surge a modo de dos largos pliegues transversos que conforman el velo del
paladar; estos al unirse con el pliegue transverso de la base de la lengua dan lugar a la formacin del
gran pliegue larngeo que separa la cavidad oral de la faringe. El esfago es alargado, con gran
capacidad de distensin. Presenta numerosos pliegues longitudinales en su mucosa. Se comunica con
el estmago mediante el esfnter del cardias. En serpientes, el esfago puede dilatarse para que por l
pase una presa entera, ya que no existen barreras fsicas que le impidan dilatarse (no hay cintura
escapular, ni esternn). Presenta una pared con escaso o nulo componente muscular, por lo que la
presa avanza mediante movimientos de la musculatura axial. Sobre la mucosa esofgica se localizan
tonsilas que actan como barrera inmunolgica. Tampoco presentan un esfnter del cardias bien
desarrollado.
El esfago de las tortugas marinas presenta una mucosa recubierta de estructuras con forma cnica, a
modo de espculas cornificadas, que favorecen el paso del alimento hacia el estmago evitando su
reflujo.
El estmago de las serpeintes es alargado, formando un saco con gran capacidad de distensin. Su
pared es de naturaleza muscular. El intestino delgado est poco desarrollado y desemboca en el colon,
el cual tiene capacidad para acumular heces durante un cierto periodo de tiempo. Booidea presenta un
pequeo ciego que est situado proximalmente al colon.
En cocodrilos, el estmago presenta 2 regiones: cuerpo (prximo al cardias) y porcin pilrica. En su
estructura destaca una capa muscular muy desarrollada reforzada por 2 tendones fijados a las
paredes, lo que unido a la presencia de gastrolitos (desde piedras y trozos de madera a botellas) en el
interior de la cavidad estomacal, le confieren al cuerpo una funcionalidad similar a la molleja de las
aves. La mucosa presenta pliegues y surcos que facilitan el desmenuzamiento del alimento, siendo
triturado en pequeos trozos, que se mezclan con el mucus segregado por las numerosas glndulas
que aqu se localizan. Todo ello pasa posteriormente a la regin pilrica. El alto grado de acidez
estomacal permite que se digieran todo tipo de estructuras orgnicas (huesos, piel, pezuas). El
esfnter pilrico separa el estmago del intestino delgado. El estmago de los lagartos es simple, de
forma alargada. No presenta piedras en su interior (gastrolitos) a diferencia de los crocodlidos.
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El intestino delgado est sostenido a las paredes de la cavidad corporal, junto con el bazo, mediante el
mesenterio dorsal. Se contina con el intestino grueso a travs del esfnter ileoclico. El intestino
grueso no presenta gran longitud respecto al intestino delgado, pero su luz posee un dimetro dos
veces mayor que la del intestino delgado. Entre el intestino grueso y la cloaca se encuentra el ano que
presenta un esfnter anal muy desarrollado. La cloaca es la terminacin caudal de los conductos
excretores de los aparatos digestivo, urinario y genital. Est dividida en tres cmaras:
Coprodeum o porcin anterior es donde se acumulan las heces que vierte el intestino largo a
travs del esfnter anal.
Urodeum o porcin media es donde desembocan los urteres; a este nivel est fijada la unin
con el pene.
Proctodeum o porcin posterior es donde se vierten los desechos antes de eliminarlos al
exterior.
La cloaca se abre al exterior mediante una abertura longitudinal situada en la superficie ventral del
cuerpo, a la altura de los miembros posteriores.
Como rganos anexos al aparato digestivo se encuentra un hgado bilobulado (con lbulo derecho y
lbulo izquierdo), adyacente a ste se encuentra la vescula biliar. La unin de los tres conductos
hepticos que presenta el hgado, forman el conducto biliar comn. En serpientes, el hgado es
alargado, fusiforme. Caudalmente a este, se sita la vescula biliar que se localiza junto al pncreas y
el bazo. Algunas especies de serpientes pueden presentar un esplenopncreas.
La digestin se ve afectada por la temperatura del medio. En general, los crocodlidos se alimentan
cuando la temperatura ambiental oscila entre los 25 y 35 C.
El corazn de las tortugas, al igual que en los saurios y los ofidios, es un rgano tricameral, que
presenta 2 aurculas y 1 ventrculo.
La aurcula derecha recibe la sangre pobre en oxgeno que procede del seno venoso, al cual ha
llegado a travs de la circulacin sistmica. El seno venoso es una cmara situada sobre la superficie
dorsocaudal de la aurcula derecha, que presenta una pared muscular a travs de la cual llega la
sangre drenada por las venas precavas derecha e izquierda, la vena postcava y la vena heptica
izquierda. La aurcula izquierda recibe sangre desde los pulmones oxigenada a travs de las venas
pulmonares izquierda y derecha.
Al tener un solo ventrculo, ste debe realizar una doble funcin, esto es, desde el punto de vista
anatmico existe un nico rgano que fisiolgicamente trabaja como si fueran dos. Para ello, presenta
tres compartimentos o subcmaras: Cavum pulmonale, cavum venosum y cavum arteriosum.
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El cavum venosum y el cavum arteriosum estn conectados mediante un canal interventricular y

reciben sangre procedente de los atrios derecho e izquierdo respectivamente. La situacin topogrfica
de ambos cavums es dorsal al cavum pulmonale, el cual ocupa la regin ventral del ventrculo, cuyo
lmite se presenta a nivel del ostium de la arteria pulmonar. El cavum pulmonale est separado de sus
homnimos mediante un pliegue muscular.
El cavum venosum se encuentra en posicin crneoventral dentro del ventrculo extendindose hasta
los 2 arcos articos, uno izquierdo y otro derecho, que salen craneoventralmente desde el ventrculo. A
nivel craneal del canal interventricular se disponen dos vlvulas auriculoventriculares, las cuales
ocluyen, parcialmente, dicho canal durante la sstole auricular; mientras que durante la sstole
ventricular evitan que la sangre refluya desde el ventrculo hacia el atrio. La localizacin de las vlvulas
auriculoventriculares en el canal interventricular unido a las contracciones musculares que originan
cambios de presin en el rgano hace posible que con un solo ventrculo, las tortugas presenten un
completo circuito para que la sangre fluya entre los diferentes rganos encargados de su depuracin
sin mezclarse. As la sangre de la aurcula derecha es enviada mediante la sstole auricular hacia el
ventrculo, exactamente al cavum venosum y pulmonale para luego ir a los pulmones.
Dentro del grupo de los reptiles, los crocodlidos presentan, al igual que las aves y mamferos, un
corazn tetracameral (2 aurculas y 2 ventrculos). Presentan un sistema circulatorio completo, con una
circulacin mayor que distribuye la sangre a nivel sistmico; y una circulacin menor que la lleva a los
pulmones para oxigenarla. El ritmo cardaco es lento, dependiendo de la temperatura del medio (por
ejemplo: a 10C presenta unas 4 pulsaciones por minuto y a 28C, unas 32).
La capacidad de permanecer sumergidos durante un tiempo prolongado est determinada por ciertas
caractersticas especiales relacionadas con el sistema circulatorio de estos animales. La presencia del
agujero de Panizza a nivel interseptal, conecta el tronco artico derecho y el tronco artico izquierdo,
con la consecuente mezcla de sangre desoxigenada (procedente del ventrculo derecho) y de sangre
oxigenada (procedente del ventrculo izquierdo). La finalidad de este agujero es la de actuar como
puente de paso entre ambos ventrculos: cuando el animal est sumergido, las presiones
intraventriculares se invierten respecto a cuando est respirando en la superficie; durante la inmersin
se produce un aumento de la presin ventricular derecha consecuencia de la hipertensin pulmonar
debida al aumento de presin sobre los pulmones por la profundidad de inmersin, causando la
apertura del agujero de Panizza para que el exceso de sangre contenida pase al tronco artico
abdominal. Cuando el animal emerge a la superficie disminuye la presin sobre los pulmones,
disminuyendo la presin sobre el ventrculo derecho; el agujero se cierra y aumenta la presin a nivel
del ventrculo izquierdo, siendo ste el nico que drena a la aorta. Este mecanismo permite al animal
permanecer bajo el agua largos periodos de tiempo.
Sistema Urogenital
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Su aparato urinario est compuesto por dos riones topografiados en la regin ventrocaudal del
caparazn, caudal al acetbulo. Las tortugas marinas (Cheloniidae, Dermochelyidae) los presentan en
la misma situacin pero craneal al acetbulo. De los riones parten sendos urteres que desembocan
en la vejiga urinaria, a nivel del cuello de sta. La vejiga es bilobulada y presenta una pared con gran
capacidad de distensin. En los procesos de miccin, la orina (cido rico y sales de uratos) llega a la
cloaca a travs del urodeum.
El aparato genital presenta las gnadas (testculos u ovarios) localizados cranealmente a los riones.
Los machos presentan un pene extensible de gran desarrollo, liso y de coloracin oscura, que no
presenta funcin de miccin. Para la eyaculacin, el pene presenta un surco seminal por donde sale el
semen. Cuando no est erecto, yace ventromedialmente en el proctodeum, sobre el suelo de la
cavidad celmica. Las hembras, presentan unos largos oviductos donde tiene lugar la formacin de las
envolturas del huevo.
Los lagartos presentan dos riones que se localizan, generalmente, a nivel profundo del canal plvico
(por lo que cualquier causa de nefromegalia produce obstruccin del colon). Como en otros reptiles, el
segmento sexual, situado en la porcin caudal del rin de los machos, aumenta de tamao durante la
estacin reproductora y produce fluidos que contribuyen a la formacin del semen. La mayora de las
especies presentan una vejiga urinaria de finas paredes; es frecuente la aparicin de clculos debido a
dietas incorrectas (escasez de agua, exceso de protenas).
Poseen dos hemipenes con forma sacular que carecen de tejido erctil. Se encuentran situados en la
regin ventral de la base de la cola, en posicin invertida dentro de unos sacos, produciendo un
abultamiento visible externamente. Los hemipenes no intervienen en los mecanismos de miccin del
animal. Slo uno de ellos acta durante la cpula. Los testculos estn cranealmente situados a los
riones. Determinados caracteres sexuales secundarios, como espinas, cuernos, poros femorales y
colores brillantes, estn ms desarrollados en el macho que en la hembra. Los ovarios se sitan
cranealmente a los riones, continundose con los oviductos.
La fecundacin es interna. Existen especies ovparas, ovovivparas y vivparas. Algunas poblaciones de
Lacerta spp., donde todos los individuos son hembras, se reproducen por partenognesis.
En las serpientes, el aire penetra a travs de 2 fosas nasales situadas en el extremo rostral de la
cabeza, pasa a travs de la hendidura coanal (las serpientes no poseen paladar completo). La glotis se
abre en el suelo de la boca, siendo fcil visualizarla. Puede desplazarse lateralmente para facilitar la
respiracin cuando el animal est alimentndose. El cartlago epigltico puede presentar determinadas
modificaciones en ciertas especies para producir silbidos, que son utilizados como medidas disuasorias
ante los depredadores. Cuando la boca permanece cerrada, la epiglotis encaja en un surco que existe
en la maxila, donde cranealmente se observa la abertura del rgano de Jacobson. En los cocodrilos,
las fosas nasales tambin se abren en el extremo rostral del crneo y pueden cerrarse voluntariamente
cuando el animal se sumerge. Se continan, internamente, mediante un largo conducto nasal hasta las
coanas, que coinciden con el final del paladar, comunicndose con la cavidad oral a nivel de la regin
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farngea, para proseguir hacia la laringe a travs de la abertura de la glotis. Al final de la cavidad oral se
sita un pliegue valvular (pliegue larngeo) con origen en las paredes y techo de la boca que aisla esta
de la regin farngea. Esto permite al animal abrir la boca bajo el agua para sujetar presas y poderlas
arrastrar hacia aguas profundas sin que el agua penetre en la trquea. Tambin le permite abrir la boca
bajo el agua y poder respirar al mismo tiempo, si permanece a flote.
Las fosas nasales presentan las glndulas nasales de la sal (Iguanidae); su funcin es excretar el
exceso de sodio cuando sus concentraciones plasmticas son elevadas. Esto permite conservar el
agua en el organismo del animal. Las coanas se sitan en el paladar, localizadas cranealmente.
Gekkonidae presenta cuerdas vocales que producen fuertes vocalizaciones. La glotis, salvo en los
movimientos respiratorios, permanece cerrada. La vibracin de la papada, que producen algunas
especies, no presenta una funcin respiratoria propiamente dicha, puede servir para ventilar la
orofaringe.
La trquea de las serpientes presenta los anillos cartilaginosos incompletos, su porcin ventral es rgida
y el extremo dorsal es de naturaleza membranosa. Algunas serpientes presentan un pulmn traqueal,
en el que la porcin vascular del pulmn se extiende craneodorsalmente hacia la trquea dorsal,
llegando a ser, en ciertos casos, la nica porcin funcional del pulmn. En cocodrilos, la trquea se
divide en 2 bronquios principales que conectan con 2 pulmones bien desarrollados, no lobulados,
situados en la cavidad torcica. Los pulmones estn separados de las vsceras abdominales mediante
el septum posthepaticum, una lmina muscular similar al diafragma. Para poder permanecer largos
periodos de tiempo sumergidos, los crocodlidos cierran la epiglotis dejando el aire en el interior de sus
vas respiratorias bajas; el tiempo de inmersin depende de multitud de factores tales como la
temperatura del agua, el tamao del animal y su estado metablico. Las serpientes presentan slo un
pulmn desarrollado (derecho), encontrndose el izquierdo ausente o muy reducido en tamao. El
pulmn derecho se extiende desde el corazn hasta el extremo craneal del rin derecho. Slo la parte
craneal del pulmn est vascularizada, por lo que es aqu donde se realiza el intercambio gaseoso. Las
zonas caudales del pulmn no intervienen en la respiracin; son meros sacos areos. Algunas
serpientes acuticas han sufrido adaptaciones y su pulmn se extiende caudalmente hasta la cloaca,
actuando como una estructura hidrosttica.
La trquea en lagartos e iguanas conduce a los pulmones situados en el trax. Los lagartos ms
evolucionados tienen pulmones de consistencia esponjosa, formados por cmaras interconectadas con
paredes recubiertas de alvolos. Los lagartos primitivos presentan pulmones similares a sacos huecos
donde los alvolos slo cubren las superficies internas. Los lagartos suelen inflar sus pulmones al
mximo para as aumentar su tamao corporal cuando se ven amenazados. No presentan diafragma,
las costillas cumplen una funcin similar mediante movimientos de expansin y contraccin.
En los Quelonios (tortugas) la respiracin se realiza a travs de las fosas nasales, no siendo fisiolgica
la respiracin a travs de la boca. El aire inspirado penetra en la trquea a travs de la glotis, la cual se
encuentra a nivel caudal de la base de la lengua. La mayora de las tortugas, salvo las marinas
(subfamilia pleurodira), presentan un corto tubo traqueal, en comparacin con otros reptiles, que se
bifurca muy pronto formando 2 bronquios principales. Esto permite respirar al animal cuando tiene la
cabeza escondida y el cuello replegado (la luz bronquial no se ocluye). La disposicin de los pulmones
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bajo el caparazn hace que los dos bronquios presenten una trayectoria ventro-dorso-craneal para as
poder entrar en los pulmones. Los pulmones presentan su cara dorsal adosada a la superficie ventral
(interna) del caparazn, mientras que la cara ventral limita con una lmina fibromuscular que, aunque
no se considera como un verdadero diafragma, separa los pulmones del paquete digestivo. Esta lmina
presenta ligamentos que la fijan al hgado, estmago e intestino. Los pulmones poseen una estructura
interna muy tabicada con multitud de poros. Tambin presentan bandas de msculo liso y tejido
conectivo. Su superficie tiene un aspecto reticulado.
En comparacin con los mamferos, y aunque el volumen pulmonar es grande, la superficie respiratoria
es menor, por ser animales con un bajo ritmo metablico. En los procesos respiratorios intervienen
varios grupos musculares, ayudados por movimientos de las extremidades y la cabeza. Sin embargo,
no presentan una presin negativa intratorcica, lo cual posibilita que la respiracin no se vea afectada
ante graves traumatismos del caparazn que expongan los pulmones. Para alimentarse las tortugas
mordedoras (familia Chelydridae) se sumergen bajo el agua, donde debido a la presin existente, la
inspiracin es un proceso activo y la expiracin pasivo. En tierra, ocurre todo lo contrario, la inspiracin
es pasiva y la expiracin activa.
Muchas especies de tortugas acuticas han desarrollado rganos respiratorios complementarios para
cuando se encuentran sumergidas. As, las tortugas de caparazn blando (familia Trionychidae)
pueden respirar a travs de la piel y del recubrimiento de la garganta. El gnero Rehodytes presenta un
elevado desarrollo de las bolsas cloacales, rganos de paredes finas por los que puede respirar al
mantener su cloaca abierta. La respiracin mediante las bolsas cloacales tambin es utilizado por otras
especies de tortugas y de galpagos (Emdidos).
La extraordinaria capacidad de las tortugas para mantener largos perodos de apnea, crea dificultades en el quirfano a la
hora de inducir la anestesia inhalatoria sin la ayuda de preanestsicos inyectables.
Sistema Nervioso
Reproduccin
En los reptiles de zonas templadas, las variaciones en la intensidad de luz y duracin del da sirven de
seal para sincronizar los ciclos reproductivos con las condiciones ambientales ptimas. En las
especies tropicales, otros factores suelen ser ms importantes (humedad, disponibilidad de alimento,
densidad de poblacin, etc.). Los cambios estacionales de la intensidad de la luz han demostrado ser
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beneficiosos para la reproduccin en cautiverio. Se recomienda una luz de espectro completo (luz
normal + rayos ultravioleta) porque mejora la conducta alimentaria y la reproduccin.
La fertilizacin es interna y el apareamiento tiene lugar a menudo con muy pocos preliminares, el
embrin se desarrolla dentro de un huevo amnitico, ya sea externo (ovparo) o interno
(ovovivparo/vivparo). Los huevos de las tortugas terrestres y de agua dulce, y de las salamanquesas
tienen la cscara dura y son depositados a menudo en lugares secos, mientras que los huevos de las
especies restantes, tienen cscaras blandas y flexibles y son depositadas en arena, tierra o vegetacin
muerta siempre que est hmeda. Los jvenes que eclosionan son versiones diminutas de sus padres
completamente independientes y que no reciben cuidado por parte de sus progenitores.
Algunas especies de lagartos presentan dimorfismo sexual, puede forzarse la salida del hemipene
mediante presin caudal a la cloaca y palparlo rodando el pulgar en sentido ceflico. En otras especies
puede determinarse por sonda. El extremo de la sonda debe ser liso y redondeado para evitar lesiones.
Previa lubrificacin la sonda se inserta en la cloaca y se dirige en direccin caudal un poco hacia un
lado de la lnea media. En los ofidios, la sonda progresar en la hembra entre 2-4 escamas y entre 8-12
escamas si es macho. En el resto de las especies es ms complicado y hay que recurrir a
ultrasonografa o a laparoscopa. En cocodrilos es necesario recurrir a la inmovilizacin del animal para
realizar la palpacin digital profunda de la cloaca. El macho tiene un pene palpable.
Las tortugas macho tienen la cola ms larga que las hembras. Adems, en las especies semiacuticas,
el macho es ms pequeo, tiene garras ms largas y a veces presentan un espoln en las patas
traseras. En las tortugas terrestres, se observan diferencias en la forma de la concha inferior, siendo
cncava en el macho y plana en la hembra. Algunos machos tambin poseen un par de escamas
guturales de mayor tamao.
El desarrollo del huevo amnitico en los reptiles supuso un avance evolutivo crucial para los animales
terrestres. El huevo es caracterstico tambin de las aves y de algunos mamferos. El vitelo le
proporciona alimento y el albumen agua y otros nutrientes. Los desechos se almacenan en el
alantoides, que es una extensin del intestino del embrin. El oxgeno y el CO2 difunden a travs de la
cscara. Su paso al embrin es regulado por el corin.
El nmero de huevos o de cras de los reptiles vara mucho de una especie a otra e incluso dentro de
una misma especie. Por ejemplo, ciertas tortugas africanas de pequeo tamao slo ponen un huevo
en cada puesta, mientras que algunas tortugas marinas ponen hasta 150 huevos. Algunas especies de
serpientes tienen entre 5 y 100 cras. Los reptiles normalmente depositan sus huevos en un nido
excavado en la arena, en la tierra o sobre las hojas, pero luego los abandonan y no se ocupan de las
cras recin nacidas. La pitn es una excepcin, ya que se mantiene cerca de los huevos para
protegerlos de los depredadores. Las hembras de cocodrilo, y a veces tambin los machos, vigilan sus
nidos. Si una de las cras tiene problemas para salir del cascarn, sus padres la ayudan metindose el
huevo en la boca y rompiendo la cscara con suavidad, sin daar a la cra.Los reptiles se encuentran
totalmente desarrollados y preparados para llevar una vida independiente desde que nacen. Son muy
pocos los reptiles que sobreviven al primer ao de vida, pero los que lo hacen suelen tener una larga
existencia. Por ejemplo, se cree que algunas tortugas viven hasta 120 aos en condiciones de libertad
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y los tutara parece que tambin pueden alcanzar esa edad. Los caimanes viven cerca de 70 aos. Por
el contrario, algunos lagartos de pequeo tamao slo viven 4 o 5 aos.
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Aves
El vuelo es la facultad ms caracterstica de las aves y, en consecuencia, todo su organismo ha
experimentado cambios tendentes a favorecerlo. Dichos cambios deben ser considerados por el
veterinario a la hora de solventar los posibles problemas que pueden presentar las aves cuando son
llevadas a la clnica veterinaria. Los amplios conocimientos anatmicos sobre los mamferos
domsticos que el veterinario adquiere a lo largo de su formacin acadmica, son fundamentales para
conocer las diferencias ms sustanciales que ofrece la anatoma de las aves. Un conocimiento de la
anatoma aviar es imprescindible a la hora de emitir un diagnstico preciso y establecer el tratamiento
ms adecuado.
Las aves poseen unas caractersticas anatmicas especficas; son vertebrados adaptados al vuelo y,
aunque alguna haya perdido esta facultad, toda su anatoma y fisiologa estn ordenadas en funcin de
esta adaptacin.
Piel y Tegumentos
La piel de las aves es fina, seca y de color blanco amarillento, con escasos vasos y terminaciones
nerviosas; ello da lugar a que se desgarre con facilidad sin apenas hemorragia y ausencia de dolor.
Pueden realizarse inyecciones subcutneas a nivel de los pliegues cutneos axilar, inguinal y zona
dorsal de cuello. La epidermis, aunque es fina en todas las zonas pobladas de plumas, se condensa y
cornifica en ciertos lugares, dando lugar a estructuras tales como la ranfoteca del pico, las uas o
garras y el espoln que presentan ciertas especies en la cara medial del tarsometatarso. A nivel de
este hueso la epidermis tambin se modifica, constituyendo escamas similares a las que recubren el
cuerpo de los reptiles.
Las aves tienen el cuerpo cubierto de plumas, stas son exclusivas de esta especie, y les sirven para
volar y protegerse. Las plumas son formaciones epidrmicas desprovistas de clulas vivas,
fuertemente queratinizadas y mineralizadas. Las plumas cumplen funciones diversas: ayudan a
controlar la temperatura corporal, sirven de fuerza aerodinmica durante el vuelo, su coloracin permite
el camuflaje o la comunicacin entre los distintos individuos. En el adulto se describen 3 tipos
principales:
Plumas de revestimiento, subdivididas en coberteras (tectrices), remeras (primarias y
secundarias) y timoneras.
Plumones: plumas pequeas cubiertas por las de revestimiento. En psitcidas se describe el
plumn polvoriento, que contiene pequeos grnulos de queratina que favorecen la limpieza
de todo el plumaje.
Filoplumas o plumas rudimentarias relacionadas con la propiocepcin.
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Las plumas se disponen sobre el cuerpo en reas determinadas denominadas pterilios, en contraste
con los apterios o zonas desprovistas de folculos plumosos. Es interesante reconocer ambas zonas, al
objeto de procurar no daar los folculos de las plumas en caso de intervencin quirrgica. Una pluma
tpica consta de un eje o mstil, dividido en can o clamo (porcin proximal hundida en el folculo) y
raquis (zona distal restante). Este ltimo, a ambos lados presenta una serie de barbas paralelas que
constituyen el estandarte. En su extremo proximal el can muestra el ombligo, cicatriz que encierra la
papila de la pluma, constituida sta por vasos y nervios en una matriz conectiva. Los movimientos de
las plumas obedecen, por un lado, a la existencia de msculos de fibra lisa, y por otro, a la accin que
desempean concretos msculos esquelticos.
El plumaje se renueva peridicamente. Este proceso, denominado muda, consiste en la cada de la
pluma y su sustitucin por otra nueva; el plumaje cambia una vez al ao, casi siempre al final del
verano o en otoo, aunque en psitcidas es normal que la muda suceda durante todo el ao. Durante
este periodo las aves pasan por un estado fisiolgico de resistencia reducida frente a los agentes
patgenos, lo que debe ser tenido en cuenta por cuidadores y veterinarios. Algunas especies pierden la
mayora de las plumas al mismo tiempo, mientras que otras lo hacen de forma paulatina. Las plumas
arrancadas accidentalmente a un ave, excepto las remeras primarias y secundarias, se reponen en un
breve periodo de tiempo si el folculo no est daado (de 2 a 4 semanas), mientras que las plumas que
han sido cortadas no se cambian hasta la muda siguiente. La estructura interna del raquis permite la
realizacin de injertos en plumas imprescindibles para el vuelo (remeras y timoneras).
La dermis desarrolla pulpejos (almohadillas adiposas pobres en vascularizacin) que se localizan en la
cara plantar de los dedos y a nivel de las articulaciones metatarsofalangianas. Tambin son
especializaciones drmicas los apndices carnosos u ornamentales como la cresta, barbillas, rictus y
lbulo auricular. En ellos la dermis es gruesa y muy vascularizada, mientras que la epidermis es muy
fina y fcilmente desgarrable, lo cual provoca hemorragias copiosas.
La piel de las aves carece de glndulas sebceas y sudorparas, si exceptuamos las del conducto
auditivo externo (sebceas) y la llamada glndula uropgea. Esta ltima encuentra un gran desarrollo
en las aves acuticas y consta de un cuerpo con 2 lbulos, situados bajo la piel adyacente al pigostilo.
Segrega un producto graso rico en ceras y aceites que permite al ave encerar su plumaje hacindolo
impermeable al agua. Se ha descrito que algunos componentes del aceite, al exponerse a la luz solar
se transforman en vitamina D3 activada, la cual sera ingerida por el ave al acicalarse el plumaje. La
glndula uropgea no se encuentra en todas las aves; avestruces, casuares, emes, pjaros
carpinteros, ciertas razas de palomas y las psitcidas, carecen de ella. El tejido subcutneo es escaso,
aunque en determinadas zonas corporales es frecuente el acmulo de tejido adiposo.
El esqueleto de las aves es ms ligero que el de los mamferos, pues gran parte de sus huesos
contiene aire (neumatizacin) en lugar de mdula sea. Las cavidades seas neumatizadas se
comunican con el sistema respiratorio y tienen como finalidad disminuir el peso corporal para favorecer
el vuelo. Constituyen excepciones a este respecto los huesos situados distalmente al hmero y a la
pelvis. La disminucin del peso en el tejido seo puede llegar a casos extremos. As, por ejemplo, en
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un guila calva de unos 4 Kg de peso, el plumaje alcanza los 600 gramos, mientras que el esqueleto
completo no supera los 300 gramos.
Por otra parte, los huesos de las aves son ms ricos en sustancias inorgnicas (fosfato clcico) que los
de los mamferos, llegando a contener hasta un 84% de estas sustancias. Los huesos largos, adems,
presentan una cortical muy fina y la cavidad medular contiene una red de trabculas que aumentan la
resistencia del hueso. Estas circunstancias dan lugar a que los huesos de las aves sean ms duros
pero a la vez ms frgiles y menos elsticos que los de los mamferos. Por ese motivo, al producirse
una fractura se astillan fcilmente, lo que imposibilita su reparacin mediante empleo de placas de
metal o clavos intramedulares que destruyen la estructura interna. Por todo ello, lo ms apropiado para
la correccin de fracturas es el uso de fijadores externos.
El crneo presenta 3 rasgos fundamentales: es abovedado, rbitas de gran tamao separadas por un
fino septo interorbitario y modificacin de los huesos de la cara para formar el pico (rostro piramidal). El
lmite entre los diferentes huesos es difcil de definir, ya que las suturas existentes se transforman en
sinostosis a los pocos meses de la eclosin. La valva superior del pico est formada por los huesos
premaxilar, maxilar y nasal; y la valva inferior por 5 huesecillos que se fusionan precozmente para
formar la mandbula. Destacar la existencia de un slo cndilo occipital y la presencia del llamado
hueso cuadrado que conecta la mandbula con el crneo (h. temporal). Los huesos cuadrados forman
el componente ms importante del llamado aparato maxilopalatino. Gracias a este aparato, las valvas
superior e inferior del pico pueden moverse de forma simultnea, la superior hacia arriba y la inferior
hacia abajo, cuando gira el hueso cuadrado. El pico puede abrirse ampliamente gracias a este
complicado mecanismo. En las psitcidas, adems, la articulacin craneofacial es de tipo sinovial,
haciendo que los movimientos del maxilar (valva superior) respecto a la mandbula (valva inferior) sean
ms amplios y ms fuertes.
Gran parte de los huesos del crneo se encuentran neumatizados, de tal manera que entre las 2 finas
lminas de hueso compacto existe una red de trabculas que encierran numerosos espacios llenos de
aire. Estos espacios estn en comunicacin con las cavidades nasal y timpnica y su funcin primordial
es la de restar peso a la cabeza para favorecer el vuelo. Otro hecho relevante para la reduccin del
peso ceflico es la ausencia de dientes.
La columna vertebral de las aves se divide en 4 zonas: cervical, torcica, lumbosacra y coccgea. La
frmula vertebral vara de unas especies a otras, y en comparacin con la de los mamferos son muy
numerosas las vrtebras cervicales. La frmula vertebral general podra ser: C14, T7, LS14, Cd6. Las
vrtebras cervicales son muy numerosas (entre 13 y 25 dependiendo de la especie) y estn provistas
de apfisis salientes para implantacin de poderosos msculos en el cuello. La forma de S que
presenta el raquis cervical en numerosas especies es necesaria a fin de proteger elsticamente al
encfalo de las sacudidas que se producen tras el salto o despus del vuelo. El atlas tiene forma de
anillo y carece de alas. Al existir un slo cndilo, la articulacin atlantooccipital resulta muy mvil, lo
que permite a la cabeza, y por extensin al pico, realizar un gran nmero de movimientos en todas
direcciones. Las vrtebras torcicas estn en menor nmero (de 5 a 7) que en los mamferos, y varias
de ellas estn fusionadas formando el hueso notarium. La vrtebra torcica siguiente a este hueso no
est fusionada, siendo la nica vrtebra mvil del tronco. Es sta una zona delicada, ya que dicha
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vrtebra, ante traumatismos, puede desplazarse ventralmente seccionando o daando la mdula

espinal, proceso conocido como kinky back. Las 2 ltimas vrtebras torcicas se fusionan a las
lumbares, sacras y 2 primeras coccgeas, formando el hueso sinsacro, el cual terminar tambin
fusionado al ilion. Notarium y sinsacro otorgan una gran rigidez a esta zona de la columna vertebral,
rigidez que es necesaria para el vuelo. Respecto a las vrtebras caudales o coccgeas, las 5 o 6
primeras son libres, permitiendo as el movimiento de la cola, mientras que las 4-6 ltimas se fusionan
durante el desarrollo prenatal para constituir una pieza sea llamada pigostilo. Este ltimo se encuentra
muy desarrollado en aves que poseen grandes plumas timoneras y ornamentales en la cola.
Las costillas se sitan a ambos lados del raquis en igual nmero que el de vrtebras torcicas. Las 2 o
3 primeras son asternales, mientras que las restantes alcanzan directamente el esternn (costillas
esternales). A diferencia de los mamferos, el cartlago costal de estas ltimas se osifica, con lo que se
describen en las aves 2 partes seas en la costilla: la parte vertebral, articulada a las vrtebras y la
parte esternal articulada al esternn. Las costillas centrales poseen apfisis uncinadas, dirigidas
caudalmente y que contactan con la cara lateral de la costilla siguiente. Se forma as un trax bastante
rgido y resistente que soporta el movimiento ventral del ala durante el vuelo.
El esternn es un gran hueso que, dependiendo de la especie, presenta varias apfisis, escotaduras o
agujeros. En su superficie dorsal existen agujeros neumticos que lo comunican con el saco areo
clavicular. En su cara ventral destaca una cresta esternal muy desarrollada en las aves voladoras
(carenadas), lo que permite la implantacin de los msculos pectorales. En aves no voladoras (ratites)
la superficie ventral del esternn es plana. La situacin subcutnea de la quilla esternal facilita la
obtencin de muestras de mdula sea en grandes aves de jaula, pero tambin las expone a
deformaciones y lesiones del esternn cuando duermen en perchas inadecuadas. El extremo caudal
del esternn es cartilaginoso en las aves jvenes, osificndose con la edad. Su flexibilidad, por tanto,
puede ser indicativa de la edad del ave.
La transformacin de los miembros torcicos en alas ha llevado consigo importantes cambios que se
pueden resumir de la siguiente manera:
Existe un esqueleto zonal completo integrado por 3 huesos; el coracoides, la clavcula y la
escpula.
El esqueleto apendicular ha sufrido una reduccin en el nmero de huesos y el hmero est
neumatizado.
El hueso coracoides est muy desarrollado, conectando el esternn con el miembro torcico. De este
modo, contribuye a mantener alejada el ala del esternn durante el vuelo, y, junto con las costillas,
evita que el trax se colapse durante el batido del ala. Las 2 clavculas se unen ventralmente formando
la horquilla o frcula, que mediante una membrana se une al esternn y coracoides. La frcula conecta
las articulaciones del hombro a modo de un elstico, actuando como un muelle que mantiene, durante
el aleteo, una distancia apropiada entre las articulaciones del hombro.
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Este hueso puede faltar o ser muy rudimentario en ciertas especies de loros. La escpula es estrecha y
curva, adaptndose lateral y horizontalmente sobre el trax, al que se une mediante msculos y
ligamentos. Entre los 3 huesos del esqueleto zonal se constituye un canal seo (canal triseo) por
donde pasa el tendn del msculo pectoral profundo.
El hmero es similar al de los mamferos, aunque neumatizado. El agujero neumtico se sita en el
extremo proximal, donde destacan 2 tubrculos (dorsal y ventral) para insercin muscular. Con el ala
recogida, el hmero se sita contra el trax, paralelo a la escpula. El cbito tiene un mayor desarrollo
que el radio y ambos huesos estn curvados, lo que los protege de fuerzas de doblamiento en el plano
del ala. La epfisis distal del cbito puede ser usada para la administracin de sustancias va
intramedular.
Respecto a los huesos del carpo, hay una notable reduccin de los mismos en comparacin con los
mamferos. En la fila proximal slo persisten los huesos carporradial y carpocubital, mientras que los
huesos de la fila distal se fusionan con el metacarpo, constituyendo el llamado carpometacarpo. De
aqu surgen 3 dedos: el mayor, provisto de 2 falanges, el menor, con una falange y el alular, tambin
con 2 falanges. Unidas al carpometacarpo y a las falanges de los dedos mayor y menor estn las
plumas de vuelo primarias, mientras que el dedo alular sirve de soporte al ala bastarda. Cuando el ave
todava es un polluelo, se puede extirpar la punta del ala seccionndola a nivel de la zona proximal del
carpometacarpo, con lo que se le impide volar.
Los miembros pelvianos sirven para la locomocin, en el medio terrestre o en el acutico. El esqueleto
zonal consta de 3 huesos, como en los mamferos: ilion, isquion y pubis, que se unen para formar el
coxal. Los 2 coxales, salvo en contadas especies, no se fusionan ventralmente (no existe snfisis
plvica), pero s lo hacen (hueso ilion) con el hueso sinsacro. Proporcionalmente, el isquion es mayor
que el de los mamferos y forma buena parte de la pared lateral de la pelvis. El pubis es un hueso largo
y fino, extendido caudalmente y palpable bajo la piel. La flexibilidad que presenta el extremo de este
hueso puede permitir conocer la edad del ave en cuestin.
El fmur es parecido al de los mamferos y su extremo distal se inclina craneolateralmente, acercando
gran parte del miembro pelviano al centro de gravedad del cuerpo. Las aves tambin poseen rtula.
Respecto a los huesos de la pierna, mientras que el peron se reduce a un fino hueso afilado, la tibia
incorpora distalmente la fila proximal de huesos tarsianos, lo que forma el tibiotarso. El fmur y el
tibiotarso, a diferencia de otros huesos largos, son muy ricos en mdula sea.
El esqueleto del pie est formado por los huesos metatarsianos II, III y IV, que se fusionan con la fila
distal de huesos tarsianos para formar el tarsometatarso. El extremo distal de ste termina en una triple
trclea de donde surgen las falanges de los dedos II, III y IV. Existe un pequeo metatarsiano I que
est unido al tarsometatarso por ligamentos. Las aves por tanto, presentan 4 dedos en el pie (I a IV),
provistos de 2, 3, 4 y 5 falanges, respectivamente. La falange ms distal forma la base sea de la ua o
garra.
La musculatura de las aves posee una mayor densidad de miocitos y menos tejido conectivo que la de
los mamferos. La grasa intramuscular es ms escasa y el color del msculo depende de la regin
corporal y la especie. En aves voladoras la musculatura pectoral es muy roja, indicativo del gran
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nmero de fibras musculares ricas en mioglobina (metabolismo aerobio oxidativo), mientras que en las
aves que han perdido la facultad de volar, dicha musculatura es plida, debido al predominio de fibras
musculares blancas glicolticas (metabolismo anaerobio).
Interesa destacar los msculos implicados en el vuelo. Generalmente se describe un msculo pectoral
superficial y uno pectoral profundo, tambin denominados msculo pectoral torcico y supracoracoideo,
respectivamente. El pectoral superficial se origina en la mayor parte de la superficie de la quilla
esternal, clavcula y membrana esternocoracoclavicular y se inserta en el hmero, en su extremo
proximal (cresta pectoral). Acta como msculo depresor del ala durante el vuelo. El msculo pectoral
profundo se origina en parte de la quilla esternal cubierto por el anterior; desarrolla un tendn que pasa
a travs del canal triseo para insertarse en la superficie dorsal del extremo proximal del hmero. Acta
como elevador del ala durante el vuelo.
Dicho tendn puede romperse por un traumatismo (choque contra una ventana, por ejemplo) y
entonces es caracterstico observar que el ave no puede levantar el ala. En este caso es importante
proceder a la reparacin del tendn, ya que un vendaje del ala afectada conducira a la formacin de
un callo seo en el canal que acabara con la funcin del mismo. La musculatura pectoral debe ser
siempre explorada ya que indica el estado nutricional del ave y puede ser usada para la aplicacin de
inyecciones intramusculares. Se recomienda introducir la aguja en la parte caudal del msculo pectoral
superficial, ya que la craneal presenta un mayor aporte sanguneo y existe riesgo de introducir las
sustancias en el torrente sanguneo.
De entre los msculos propios de ala, destacar la descripcin del m. extensor carporradial. Originado
en el epicndilo medial del hmero, su corto tendn de insercin se extiende sobre la superficie craneal
de la articulacin del carpo para terminar en la apfisis extensora del carpometacarpo. Este tendn
puede seccionarse en una de las alas para impedir el vuelo, ya que de este modo se limita la extensin
de ala.
En el miembro torcico, adems de los msculos, conviene resaltar la presencia del propatagio. Se
trata de un pliegue triangular de piel extendido en la parte craneal del ala entre las articulaciones del
hombro y el carpo. Su borde craneal est recorrido por el ligamento propatagial elstico. Para impedir
el vuelo, a veces se recurre a una seccin triangular de este pliegue. Tambin es utilizado para colocar
las grapas que fijan anillas marcadoras en las antidas. En su superficie ventral puede evidenciarse la
vena cutnea cubital, apropiada para venipuntura en su trayecto sobre la articulacin del codo.
Respecto a los msculos del miembro pelviano, indicar que su funcin principal es la de mantener el
cuerpo erecto y en equilibrio, adems de estar al servicio de la locomocin, por lo que todos los
msculos estn bien desarrollados. Pueden utilizarse para realizar inyecciones intramusculares,
aunque siempre considerando que las sustancias administradas transitan por el rin antes de
incorporarse a la circulacin sistmica, al existir en las aves un sistema venoso porta-renal. Por otro
lado, conviene sealar que muchas aves de percha y de presa presentan el llamado aparato
recproco.
Este sistema da lugar a una flexin de las articulaciones interfalangianas de los dedos del pie siempre
que tambin est flexionada la articulacin del tarso. Ello se debe a que los tendones de los msculos
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flexores digitales se tensan a su paso por la cara caudal del tarso cuando el ave se agacha, dando
lugar a una flexin recproca de las articulaciones de los dedos. Este mecanismo debe ser tenido en
cuenta para desasir a un ave grande. En la cara medial de la articulacin del tarso puede reconocerse
la vena tibial caudal. Su trayecto subcutneo resulta idneo para venipuntura en aves de cierto tamao.
Tambin con fines diagnsticos, como por ejemplo en la enfermedad de Marek, es interesante saber
localizar el nervio citico a su paso por el muslo, caudalmente al fmur y cubierto por la musculatura
medial del miembro. Sealar finalmente que es frecuente la mineralizacin de los tendones flexores de
los dedos del pie (mm. gastronemio, flexores digitales superficial y profundo) y de los dedos de las alas,
lo que radiogrficamente debe ser reconocido como un hecho normal.
Los msculos del tronco tienen una importancia menor y los del cuello estn muy desarrollados debido
a la movilidad de esta regin del raquis. Los msculos abdominales e intercostales quedan reducidos a
delgadas lminas.
Dado que el diafragma no constituye un tabique completo de separacin entre las cavidades torcica y
abdominal, como sucede en los mamferos, en las aves los principales rganos ocupan una nica
cavidad corporal, aunque pueden ser concretados en dependencias celmicas conocidas como sacos
peritoneales.
Aparato Digestivo
Se inicia en el pico, cuya base sea la integran por un lado, los huesos nasal, maxilar y premaxilar, y
por otro, el esqueleto mandibular. Todos estos huesos quedan revestidos por un estuche crneo
epidrmico muy duro denominado ranfoteca. El pico, cuya forma depende del tipo de alimentacin,
sustituye a los labios, carrillos y dientes de los mamferos, y algunas aves lo utilizan como rgano
prensil (psitcidas). Ocasionalmente, en aves enjauladas se produce un sobrecrecimiento exagerado
de las valvas superior e inferior, que impide la normal ingestin de alimentos. Por lo general, se
requiere al veterinario para el limado del pico.
Las cavidades oral y farngea se describen como una nica cavidad orofarngea, caracterizada por la
existencia de un largo paladar duro y presencia de papilas cornificadas dispuestas en hileras. No suele
existir, por lo tanto, ni paladar blando ni nasofaringe, de modo que las coanas y trompas auditivas se
abren a la cavidad bucofarngea a travs de sendos orificios o hendiduras que perforan el paladar.
Por lo general, la lengua se adapta a la forma del pico, y puede ir provista de papilas filiformes, como
en las palmpedas. Estas papilas, junto con las laminillas crneas del pico actan como barrera para el
filtrado del alimento. En las psitcidas destaca una lengua dura, carnosa (consta de msculos propios)
y muy mvil, lo que parece ser facilita la emisin de sonidos y palabras. Al no masticar, las glndulas
salivares se reducen considerablemente, excepto en algunas especies de aves insectvoras como por
ejemplo el pito real, donde se describen glndulas que alcanzan los 7 cm de longitud.
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La faringe se contina con el esfago, cuyo orificio de entrada (vestbulo esofgico) debe ser localizado
para rehidratar o alimentar al ave extenuada. La introduccin de la sonda deber hacerse salvando la
entrada a la laringe (glotis), localizada sta sobre una prominencia ventral al esfago. En su inicio, el
esfago se sita entre la trquea y los msculos cervicales, pero enseguida se desva hacia la derecha,
manteniendo esta posicin en su recorrido por el cuello. En la porcin caudal del esfago de las
antidas existe un acumulo de tejido linfoide conocido como amgdala esofgica. Aunque no en todas
las especies, el esfago suele presentar una dilatacin llamada buche, que acta como reservorio de
alimentos (en l no hay digestin). En las columbiformes (palomas), la mucosa del buche segrega una
sustancia rica en protenas, denominada casena o leche del buche. Los adultos producen esta
secrecin para nutrir a los pichones. La forma del buche vara con la especie, desde una simple
dilatacin (aves acuticas), a una bolsa (rapaces y granvoras), doble bolsa (paloma), o a modo de S
(psitcidas). Tanto el esfago como el buche son formaciones subcutneas fcilmente palpables y
accesibles quirrgicamente. Una vez rebasa el corazn y los pulmones, el esfago desemboca al
estmago, donde se distinguen 2 porciones: proventrculo y molleja.
El proventrculo, ventrculo subcenturiado o estmago glandular, est en contacto ventral con el lbulo
izquierdo del hgado. Presenta una pared rica en glndulas que segregan mucus, enzimas (pepsina) y
cido clorhdrico. Este ltimo componente, en las aves carnvoras (rapaces) es imprescindible para la
digestin de la carne e incluso de los huesos ingeridos.
La molleja o estmago muscular, queda ms caudal y tambin se relaciona con el hgado, pero
establece un contacto ms extenso con el esternn y la parte ventral de la pared abdominal izquierda.
Suele alojar granos de arena y piedras para favorecer el triturado del alimento, lo que funcionalmente
suple la carencia de dientes en las aves. Su pared muscular es ms potente en las granvoras que en
las carnvoras, y su mucosa segrega una sustancia queratinizada que la protege de los posibles daos
que pueden causar los guijarros o piedrecillas ingeridas. Esta porcin del estmago, en ciertas aves
(rapaces) puede retener muchos de los desechos alimenticios (pelos, plumas, huesos), que son
regurgitados en forma de bolas o pelotas, denominadas egagrpilas. El estudio de las mismas
permite conocer las preferencias alimentarias de las distintas especies.
El intestino queda comprendido en el saco peritoneal ventral, ocupa la parte caudal de la cavidad
corporal y establece relacin con la molleja y los rganos reproductores. Consta de duodeno, yeyuno,
leon, 2 sacos ciegos y el recto. Su longitud y desarrollo dependen del tipo de alimentacin, siendo muy
largo en las aves granvoras y herbvoras, y ms corto en las frugvoras y carnvoras. En el yeyuno
puede ser observado el divertculo vitelino, resto del primitivo saco vitelino que durante los primeros
das de vida nutrir al pollito recin eclosionado. Los ciegos, ausentes en las psitcidas, se abren en la
zona de trnsito del intestino delgado al grueso. Su tamao tambin depende del tipo de alimentacin,
siendo muy corto en las granvoras y muy largo en las herbvoras. Parece ser que los ciegos facilitan la
digestin de la celulosa, la absorcin de agua, e incluso, en ciertas aves como las palomas, dada su
riqueza en tejido linfoide actan como autnticos rganos defensivos. El recto desemboca en la cloaca,
zona de encrucijada tambin para la desembocadura de los conductos genitales y urinarios.
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Fisiolgicamente se divide en 3 compartimentos:

Coproceo: compartimento ms craneal donde termina el recto y se acumulan las heces.
Uroceo: compartimento medio donde desembocan los conductos urogenitales.
Proctoceo: compartimento caudal, que comunica al exterior a travs del orificio cloacal,
provisto de musculatura esfintrea. Dorsalmente presenta la bolsa de Fabricio, pequeo saco
impar de naturaleza linforreticular, situado retroperitonealmente.
Indicar tambin que la gran capacidad digestiva que presentan las aves hace que sean capaces de
utilizar la mayor parte del alimento ingerido, por lo que sus excrementos, aunque numerosos, son de
escaso tamao. En la exploracin del ave es interesante observar el estado de las plumas que rodean
la cloaca. En casos de diarrea estas plumas siempre estarn manchadas por heces.
En cuanto a las vsceras anejas al tubo intestinal, el hgado queda envuelto en 4 sacos peritoneales (2
sacos hepticos ventrales y 2 dorsales). Presenta 2 lbulos principales, derecho e izquierdo; del
izquierdo surge el conducto hepatopancretico que drena la bilis directamente al duodeno. Del derecho
parten 2 cortos conductos hepatocsticos que llevan la bilis a la vescula biliar (ausente en ciertas
especies de psitcidas, la paloma y el avestruz). Desde aqu, la bilis ser vertida al duodeno mediante
el conducto csticoentrico. En el pncreas se describen 3 lbulos (dorsal, ventral y esplnico) y de
cada uno de ellos arranca el correspondiente conducto pancretico hacia el duodeno. La forma del
bazo es variable y queda situado entre la molleja, el proventrculo y la vescula biliar, no actuando como
reservorio sanguneo.
Por lo general, indicar que las aves ingieren diariamente alimentos que suponen el 25-30% de su peso
corporal, dado su alto metabolismo. As, se requieren grandes aportes energticos, por lo que las aves
de menor tamao, como los pequeos paseriformes, sucumben fcilmente si permanecen varias horas
con el intestino vaco. Ello da lugar a que dichas aves necesiten comer mucho y de forma frecuente. Si
se comparan con los mamferos, las aves presentan una alta tasa metablica, es decir, la absorcin, el
metabolismo y la eliminacin de los elementos nutritivos y los excrementos se realiza ms
rpidamente, necesitando un aporte alimenticio continuo y rico en energa, que consiguen aunque la
comida se realice a intervalos, debido a la existencia del buche que almacena y regula el trnsito del
alimento. Esto debe tenerse en cuenta cuando se utilizan como animales de experimentacin.
Sistema Linfohematicopoytico
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Est muy modificado por la adaptacin al vuelo. Este acto locomotor exige un gran esfuerzo muscular
del que deriva un elevado consumo de oxgeno, por lo que se necesita una ventilacin potente y
rpida.
Los orificios nasales se abren en la ranfoteca dorsal del pico, ya sea en la parte crnea o en la cera
(tejido cutneo de transicin rico en terminaciones nerviosas). El color de la cera puede servir como
referencia del estado nutricional del ave (rapaces) o incluso para diferenciar el sexo (en los periquitos la
cera del pico es azulada en los machos y de color carne en las hembras e inmaduros). Las cavidades
nasales estn separadas por un fino septo nasal cartilaginoso, que puede ser incompleto rostralmente
(nariz permeable de las palmpedas). Existen 3 conchas nasales (rostral, media y caudal), cuyo
desarrollo vara con la especie, mientras que el laberinto etmoidal no se describe, debido al escaso
desarrollo del sentido del olfato. De las cavidades paranasales slo existe el seno infraorbitario, que se
corresponde con el seno maxilar de los mamferos. Dicho seno queda situado ventral y caudalmente al
ojo, estando comunicado con la concha nasal caudal y la propia cavidad nasal. En las psitcidas, los
senos infraorbitarios izquierdo y derecho se comunican entre s y poseen divertculos que neumatizan
amplias zonas del crneo. En algunas especies, como en los loros Amazonas, estos divertculos se
extienden dorsolateralmente a cada lado del cuello hasta alcanzar caudalmente la altura de la 7
vrtebra cervical. Las infecciones de las vas respiratorias altas pueden afectar a estos senos, donde
se acumula pus de difcil tratamiento.
Desde las coanas (que se abren directamente en el paladar duro) el aire pasa a trquea a travs de la
laringe, integrada tan slo por los cartlagos aritenoides y el cricoideo (no existe epiglotis). La glotis se
sita sobre una pequea elevacin conocida como prominencia larngea. Tampoco existen en las aves
pliegues vocales, y los msculos larngeos son muy rudimentarios. Esto se debe a que la laringe, al
contrario que en los mamferos, no interviene en la emisin de sonidos (fonacin).
La trquea consta de 100 a 130 anillos cartilaginosos que suelen osificarse. Los anillos tambin estn
presentes en los bronquios principales. En especies de cuello muy largo (e.g., cisnes), sobre la cara
izquierda del esternn, que presenta una escotadura al efecto, la trquea describe circunvoluciones
(hipertrofia traqueal). Tal hipertrofia parece estar relacionada con un aumento de la potencia de la voz.
La bifurcacin de la trquea se modifica para constituir el autntico rgano fonador de las aves: la
siringe o laringe caudal, que puede faltar en ciertas especies (buitres, avestruz y algunas cigeas). La
siringe va provista de una fuerte musculatura que tensa una membrana vibradora. La calidad y
complejidad del canto depende directamente de esta musculatura. Por ejemplo, los halcones, que slo
emiten algunos gritos, poseen slo 2 pares de msculos, mientras que los paseriformes (por ejplo.,
canarios) tienen hasta 7 y 9 pares.
Los 2 bronquios principales penetran en el parnquima de ambos pulmones, morfolficamente muy
rudimentarios. Los pulmones representan slo el 11 % de todo el aparato respiratorio, pero tienen una
gran capacidad funcional. Ambos bronquios principales se dilatan (vestbulo) y de ah se continan con
los mesobronquios (conductos membranosos) hasta el extremo caudal del pulmn, donde se abren a
los sacos areos abdominales. Un bronquio intermedio los relaciona con el saco areo torcico caudal.
Los sacos areos son dilataciones extrapulmonares de paredes muy finas que quedan intercalados
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entre los sistemas viscerales y las paredes de la cavidad corporal. Alguno de ellos penetra en la
cavidad medular de huesos a los que neumatiza. La funcin principal de los sacos areos es
disminuir el peso corporal para favorecer el vuelo y la natacin, pero tambin impiden el calentamiento
del cuerpo durante estas funciones locomotoras. Normalmente hay 9 sacos areos: 2 cervicales, 1
interclavicular, 2 torcicos craneales, 2 torcicos caudales y 2 abdominales (el izquierdo se puede
canular en caso de obstruccin de las vas respiratorias altas). Estos sacos no intervienen directamente
en el intercambio de oxgeno, pero actan como fuelles facilitando el flujo continuo de aire sobre la
superficie funcional del pulmn. De este modo, tanto el aire inspirado como el espirado atraviesan el
parnquima pulmonar, lo que permite un intercambio de gases continuo en ambas fases del ciclo
respiratorio (ausencia de espacios muertos). Con cada inspiracin el ave reemplaza casi todo el aire de
sus pulmones y la mitad de todo el existente en su sistema respiratorio. Por ello, la ventilacin
pulmonar se ejecuta ms libremente y a fondo que en los mamferos. Al no existir diafragma muscular,
los movimientos inspiratorios y espiratorios de las aves dependen de los msculos de la pared torcica.
Sistema Urogenital
Los riones quedan empotrados en sendas fosas labradas en la cara ventral de los huesos sinsacro e
ilion. Cada uno de ellos est dividido en 3 lbulos y no existe un lmite preciso entre la corteza y la
mdula, por lo que hay numerosos clices renales por lbulo. Destacar la existencia del ya mencionado
sistema porta renal. ste se origina en virtud de que las 2 venas iliacas externas y el tronco venoso de
las ltimas porciones del intestino se resuelven en capilares que penetran en los riones, de donde
nacen 2 vasos eferentes (uno por cada rin) que desembocan a la vena cava caudal. Las inyecciones
en el muslo no son recomendables, pues los medicamentos pueden pasar al rin por este sistema
porta y ser eliminados sin llegar a la circulacin general. La orina es transportada por los urteres, que
discurren junto al borde medial de los riones y se dirigen caudalmente hasta desembocar en la cloaca
(uroceo), no desarrollndose vejiga urinaria. Las aves excretan una orina semislida (en el uroceo se
produce una gran absorcin de agua) rica en cristales de cido rico, factor importante en la
predisposicin a padecer procesos de gota.
Los testculos son intraabdominales (endorquidia fisiolgica) y se sitan en las inmediaciones del polo
craneal de los riones. El izquierdo suele ser algo mayor que el derecho. En especies sin dimorfismo
sexual es necesario recurrir a la endoscopia para discernir el sexo. Para realizar la misma, se utilizan 2
vas de acceso: una, a travs de la escotadura del esternn situada entre la penltima y ltima costilla,
inmediatamente por debajo del borde craneal del msculo sartorio; y otra, por la parte superior de un
tringulo formado entre el extremo proximal del fmur, la ltima costilla y el borde craneal del pubis. El
epiddimo se localiza fijado al borde dorsomedial del testculo y los conductos deferentes desembocan
tambin en el uroceo. La temperatura ptima para la produccin de espermatozoides se consigue
gracias a la refrigeracin que se produce por el contacto con los sacos areos abdominales durante la
inspiracin forzada. No existen glndulas genitales accesorias y el rgano copulador suele ser bastante
rudimentario (papila peneana), aunque en determinadas especies palmpedas) llega a alcanzar los 8
cm de longitud.
Los rganos genitales femeninos se caracterizan por el desarrollo exclusivo del ovario y oviducto
izquierdos. Aunque en algunas rapaces son el ovario y oviducto derechos los funcionales. En actividad
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sexual, el ovario ofrece un aspecto a modo de racimo, debido a los numerosos folculos que afloran a
su superficie. Los ovocitos contenidos en los folculos se ven pronto envueltos por capas de vitelo
(futura yema del huevo). El oviducto cumple 2 funciones: la de hacer que el vulo progrese hacia la
cloaca y, por potra parte, segregar las sustancias que lo van a proteger del medio ambiente. Las
porciones que se describen son las siguientes: infundbulo, magnum, istmo, ampolla, tero y vagina. En
el magnum y el istmo se formar la mayor parte de la albmina, mientras que en la ampolla tendr
lugar la formacin de las membranas de la cscara, formndose esta ltima en el tero. La vagina es el
ltimo segmento del oviducto y en ella se segrega la cutcula y el pigmento especfico del huevo: su
desembocadura tiene lugar en el uroceo a la izquierda del lugar donde lo hicieron los urteres.

Presentan un escaso desarrollo los rganos relacionados con el olfato y el gusto. Sin embargo, el tacto,
odo y vista adquieren en las aves una importancia relevante. Los rganos del tacto, al igual que en
mamferos, corresponden a corpsculos nerviosos terminales tctiles y a propioceptores. Junto con la
vista representa el sentido ms importante en la eleccin de los alimentos. Los corpsculos tctiles se
localizan en los bordes y punta del pico, as como en la cavidad bucal. Transmiten las percepciones
relativas al tamao, forma, dureza y caractersticas superficiales de los alimentos. El plumaje evita en
gran parte que la piel perciba sensaciones dolorosas, por lo que en las aves se pueden realizar ciertas
operaciones sin anestesia (castracin, incisin del buche, etc).
Los receptores del equilibrio y odo se agrupan en el rgano vestbulococlear, si bien, en las aves no
est claramente definido el odo externo (no existe pabelln auricular). La entrada al conducto auditivo
externo es circular y queda demarcada por un ribete cutneo que circunscribe el llamado disco o lbulo
auricular. El conducto auditivo debe estar limpio, sin secreciones y en su exploracin debe tenerse en
cuenta la posible existencia de parsitos. El odo medio est bastante modificado, presentando un
hueso alargado (columela) que sustituye a los huesecillos descritos en los mamferos. El odo interno
es muy parecido al de los mamferos, aunque la cclea es 10 veces ms pequea que en estos
ltimos. La sensibilidad a la resonancia es muy grande, especialmente en las rapaces nocturnas. Por
ejemplo, los bhos distinguen 2 sonidos emitidos a 0.00003 segundos el uno del otro.
En cuanto al sentido de la vista, las aves gozan de una vista excelente y el comportamiento de la
mayora de ellas se basa en informaciones visuales. Los globos oculares se caracterizan por ser de
gran tamao, y en la mayora de las aves quedan situados lateralmente. Por ello, el campo visual
abarca 280-360, lo que permite ver casi todo el contorno. La forma del globo no es esfrica sino
aplanada y en algunas especies (rapaces) alargada. La retina, provista de conos y bastones, presenta
una fvea central integrada casi de forma exclusiva por conos (en el ratonero comn se han llegado a
2
contar hasta un milln de conos/mm , lo que le confiere una agudeza visual 8 veces superior a la
humana. Existe un 100% de decusacin de fibras en los nervios pticos por lo que no se aprecia reflejo
pupilar consensuado en las aves. La cmara posterior (humor vtreo) contiene una estructura tpica, el
pecten o peine. Se trata de una membrana vascular pigmentada situada en el fondo del ojo a nivel de
la entrada del nervio ptico, flotando en el humor vtreo, que desempea funciones muy importantes
(trfica, rgano del sentido de la presin, regulacin de la temperatura). Los msculos oculares internos
son de fibra estriada y por tanto, voluntarios, lo que dificulta el examen oftalmolgico. La esclertica se
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caracteriza por contener un anillo seo (huesecillos esclerticos). Entre los rganos accesorios
destacar que las aves poseen una extensa membrana nictitante (3er prpado) dotada de gran
movilidad y que se desplaza barriendo la crnea, en sentido dorsonasal o ventrotemporal. Esto proteje
y lubrifica la crnea, protegindola y lubrificndola gracias a la secrecin de su glndula adyacente.
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Mamferos
Los Mamferos surgieron de un linaje de Reptiles pertenecientes a la subclase Synapsida,
especficamente de aquellos pertenecientes al Orden Therapsida. A fines del Carbonfero este grupo
de reptiles mamaliformes se apartaron del resto. Los mamferos primitivos se originaron a finales del
Trisico, hace unos 210-220 millones de aos, sin embargo los dinosaurios eran dominantes en esa
poca y los mamferos del Mesozoico eran pequeos organismos de hbitos nocturnos. Recin a
finales del Cretcico, con la extincin de los dinosaurios, comenz la espectacular radiacin adaptativa
de los mamfeos que los llev a ocupar una posicin dominante durante la era cenozoica.
Los mamferos son los nicos sinpsidos (una sola ventana temporal) que sobreviven en la actualidad.
La evolucin de este grupo tiende a aumentar la actividad, as como a mejorar la locomocin y la
capacidad de conseguir o procesar el alimento.
Los mamferos actuales se dividen en 3 grupos, diferenciados entre s fundamentalmente por la forma
en que se desarrollan sus cras: Monotremas (ovparos), Marsupiales (placenta coriovitelina) y
Placentados (placenta corio alantoidea).
Los Mamferos tienen las siguientes caractersticas particulares:
Vertebrados endotermos.
Crneo sinpsido.
Articulacin entre el crneo y la mandbula es dentario-escamoso.
3 huesecillos en el odo medio: estribo (homlogo de la columela de los Reptiles), martillo
(homlogo del articular de los Reptiles) y yunque (homlogo del cuadrado de los Reptiles).
Odo medio rodeado por el hueso timpnico (homlogo del angular de los Reptiles).
Arco artico derecho completamente reducido.
Diafragma muscular, que separa la cavidad abdominal de la torcica.
Presencia de glndulas mamarias con produccin de leche.
Cubierta de pelos.
Denticin tecodonta, con 2 generaciones de dientes (difiodoncia) y diferentes formas
(heterodoncia).
Desarrollo del pabelln auricular (oreja).
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Piel y Tegumentos
La piel de los mamferos contiene numerosas estructuras especializadas y varios tipos de receptores
sensoriales. Las glndulas de los Mamferos son:
Glndulas sebceas: Producen una secrecin aceitosa que lubrica e impermeabiliza pelo y
piel.
Glndulas sudorparas: ayudan a regular la temperatura corporal. Con la transpiracin adems
se eliminan productos de desecho. La secrecin de algunas de estas glndulas interviene en
el reconocimiento individual.
Glndulas odoriferas: sus secreciones intervienen en la comunicacin social.
Glndulas mamarias: Producen leche para alimentar a las cras. La leche es una mezcla
acuosa de grasas, azcares y protenas.
El tejido de la glndula mamaria es un derivado del tegumento que se encuentra en la dermis, y sus
conductos alcanzan la superficie atravesando la epidermis. Las glndulas mamarias estn distribuidas
en lbulos, cada uno de los cuales estn formados por un conjunto de alvolos y sus conductos. Las
glndulas mamarias de los monotremas desembocan directamente en la superficie de la piel sin
especializar, y los jvenes presionan sobre ella su hocico, que tiene la forma del lugar donde
desembocan stas glndulas. En algunos marsupiales y en muchos mamferos placentarios los
conductos de las glndulas mamarias desembocan a travs de especializaciones del tegumento. La
tetilla es una especializacin tubular de la epidermis que se dilata en una cisterna basal, una cmara
que recibe la leche de las glndulas mamarias antes de pasar por el conducto comn de la tetilla a la
cra que mama. El pezn es una papila epidrmica alrededor de la cual se colocan directamente los
flexibles labios de la cra para beber la leche secretada.
Derivados del tegumento:
Pelos: son filamentos queratinizados, cuya principal funcin es el aislamiento trmico. El
pelaje suele estar formado por 2 tipos de pelos: pelos de cobertura (ms largos y gruesos), y
los pelos lanosos (situados bajo el pelaje de cobertura, ms finos y cortos). Los pelos pueden
especializarse en vibrisas (pelos sensitivos) o en pas (puercoespines y erizos).
Garras, uas y pezuas: son acumulaciones de queratina que protegen la falange distal de los
dedos. Las garras que se observan en carnvoros, tienen forma de gancho, las uas, chatas
se presentan en los primates. Las pezuas son una cpsula crnea slida que cubre las
falanges terminales y se observan en ungulados.
Cuernos y astas: Cumplen funcin defensiva, de reconocimiento social, o despliegue sexual.
Los cuernos estn formados por una vaina cornificada sobre una mdula de hueso. Son
permanentes y se encuentran en la familia Bovidae (Orden Artiodactyla). Las astas son seas
y se renuevan todos los aos. Estn presentes en la familia Cervidae (Orden Artiodactyla).
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Los cuernos de los rinocerontes carecen de hueso y estn formados por fibras
queratinizadas compactadas.
Escamas: derivados cornificados de la epidermis. Presentes en la cola de algunos roedores y
marsupiales. Tambin cubren todo el cuerpo de los pangolines.
Armadura drmica: deriva de la dermis. Presente slo en armadillos.
Barbas: derivan del tegumento del interior de la boca de las ballenas misticetas. Consisten en
lminas queratinizadas y se utilizan para filtrar el alimento del agua.
La tendencia morfolgica en los mamferos ha sido la simplificacin esqueltica. Respecto a los
Reptiles, en los mamferos varios huesos del crneo se perdieron o redujeron de tamao y se
simplificaron estructuras de extremidades y cinturas, reduciendo el peso.
El crneo es sinpsido, o sea que tiene una nica ventana temporal, limitada inferiormente por una
barra (arco zigomtico) formada por los huesos escamoso, yugal y maxilar. En la mandbula de los
mamferos, la articulacin cuadrado-articular de los reptiles es sustituida por la articulacin dentarioescamoso.
La articulacin entre el crneo y el atlas (primera vrtebra) se da mediante 2 cndilos. La columna se
divide en 5 regiones cervical, torcica, lumbar, sacra y caudal. Los movimientos principales de la
columna para la locomocin son en sentido vertical, lo que favoreci la reduccin de las costillas
lumbares. Los mamferos presentan costillas libres slo en la regin torcica.
El esqueleto apendicular tambin cambi respecto a otros Vertebrados para permitir que las patas se
coloquen bajo el tronco y lo sostengan separado del suelo. La cintura pectoral est constituida por
escpula y clavcula, pero los monotremas tienen adems interclavcula, coracoides anterior
(precoracoides) y coracoides posterior. La cintura plvica consta de 3 huesos: ilion, isquion y pubis. En
Monotremas y Marsupiales, los huesos epipbicos se extienden hacia delante a partir del pubis en
ambos sexos.
Comparada con los reptiles, se caracteriza por un mayor desarrollo de los msculos de los miembros
(que proporcionan el impulso para la marcha), la presencia de un diafragma muscular, el desarrollo de
los msculos de la masticacin y de msculos drmicos.
El diafragma permite el aumento del volumen de aire para la respiracin y separa el trax del abdomen.
Cuando se relaja se arquea hacia delante y cuando se contrae se desplaza hacia atrs, aumentando el
volumen de la cavidad torcica.
Los msculos faciales permiten movimientos esenciales de la boca, cejas, orejas y permiten las
expresiones. Adems permiten la succin y tambin intervienen en la comunicacin. Los principales
msculos de la masticacin son el temporal, el masetero y los pterigoideos.
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La musculatura subcutnea, muchas veces forma como una funda que cubre casi todo el cuerpo y
permite la movilidad de la piel. Se encuentra especialmente la asociada a los pelos, cumple funcin de
termorregulacin, defensiva (en especies con pas o corazas) y de comunicacin social.
Aparato Digestivo
Los mamferos mastican con sus dientes, para reducir el alimento a pequeos fragmentos. La denticin
es tecodonta, o sea que los dientes estn en alvolos dentro del hueso. Los dientes estn formados
por la corona y una o varias races, que se insertan en el hueso. Consisten de 3 tejidos: la dentina
(rodea el espacio ms interno y sensible del diente, la Pulpa, constituida por vasos sanguneos y
nervios), el esmalte (cubre la dentina en la corona) y el cemento (cubre a la dentina en la raz). Los
mamferos son difiodontos (con una denticin de leche y una permanente). Los dientes tienen formas
diferentes (heterodoncia) segn la funcin que desempeen: incisivos para cortar, caninos para agarrar
o desgarrar, y premolares y molares para aplastar o moler.
Clasificacin de los dientes:
Segn su crecimiento:
Braquiodontes: se reconocen corona y raz. Despus de formado, no crece ms y el desgaste
rebaja la corona progresivamente.
Hipsodontes: dientes de crecimiento continuo. No se reconoce corona y raz.
Segn su morfologa:
Bunodonte: forma casi cuadrada con 4 cspides romas. Presente en omnvoros (cerdo,
primates).
Secodonte: cspides puntiagudas. Presentan muela carnicera (cuarto premolar superior y primer
molar inferior) adaptados para cortar. Es caracterstico de los carnvoros.
Selenodonte: las cspides toman forma de media luna. Se observa en algunos herbvoros (vaca,
ciervo, llama).
Lofodonte: las cspides se unen de 2 en 2, transversalmente, mediante crestas rectas o un tanto
arqueadas. Se observa en algunos herbvoros y roedores (caballo, tapir, carpincho).
Movimientos masticatorios:
Ortal: apertura y cierre de la boca. Cavidad glenoidea y cndilo mandibular transversales.
Ectental: movimientos laterales (derecha-izquierda). Cavidad glenoidea y cndilo mandibular
redondeados.
Propalinal:
movimientos
longitudinales.
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atrs-adelante.
Cavidad
glenoidea
cndilo
mandibular

La lengua en los mamferos adquiere su mximo desarrollo y posee la musculatura ms diferenciada

entre los vertebrados. La parte posterior muy musculosa, coloca el alimento entre los dientes con la
ayuda de los msculos de las mejillas. La parte anterior toma el alimento por lo que puede ser
vermiforme en los insectvoros, lamedora en los quirpteros frugvoros, etc. La lengua tambin colabora
en el arreglo del pelaje, la succin de la leche y la termorregulacin por evaporacin, como en el perro.
El estmago es, generalmente, una nica cavidad con forma de saco, aunque est dividido en
Cetceos y Sirenios. En camlidos forma 3 cmaras y en rumiantes (vacas, ciervos), 4.
El intestino se divide en delgado y grueso. Entre el intestino delgado y el grueso puede existir un ciego.
Aunque los mamferos suelen tener salidas separadas para los sistemas digestivo, reproductor y
excretor, los monotremas, marsupiales y algunos insectvoros presentan cloaca. En herbvoros pueden
existir bacterias simbiontes en el intestino o el estmago.
En los mamferos los pulmones son grandes. La trquea, por donde penetra el aire, se divide
sucesivamente en bronquios, bronquiolos, canales alveolares y alvolos pulmonares, cada uno de
menor dimetro. El intercambio gaseoso ocurre en los alvolos. Estos alvolos son pequeas
concavidades, revestidas de un epitelio muy fino que contiene una densa red de capilares. El aire entra
en los pulmones gracias a los movimientos de la caja torcica y del diafragma.
Aparato Circulatorio
El mantenimiento de una actividad celular correcta depender de la capacidad de nutrientes y oxgeno
de llegar a las clulas y de la eliminacin apropiada de los productos de desecho. Esta funcin es
llevada a cabo por el sistema circulatorio, adems de transportar hormonas y otros qumicos que
ayudan en la regulacin de las funciones de los rganos. El aparato circulatorio permite sostener una
alta actividad y endotermia, mediante la separacin estricta de la circulacin pulmonar y la general. El
arco sistmico (que lleva sangre al cuerpo) deriva del arco artico izquierdo.
El corazn se encuentra siempre dividido en 4 cavidades, que funcionan como una bomba doble. Los
ventrculos estn completamente separados por un septo. La aurcula derecha recibe la sangre no
oxigenada del cuerpo y la pasa al ventrculo derecho que la bombea a los pulmones. Desde los
pulmones, la sangre oxigenada pasa a la aurcula izquierda y luego al ventrculo izquierdo, que la enva
a la circulacin general.
Solo en los mamferos los eritrocitos son clulas bicncavas en forma de disco y no tienen ncleo. Esto
tendra la funcin de aumentar la capacidad de transporte de oxgeno. Los leucocitos fagocitan
bacterias y cuerpos extraos. Las plaquetas participan en el proceso de coagulacin.
El corazn, que impulsa la circulacin de la sangre a travs del organismo, se compone en mamferos
y aves de 4 cmaras y se haya protegido por una delgada capa de tejido conectivo denominada
pericardio. El corazn puede dividirse funcionalmente en 2 mitades, derecha e izquierda, cada una de
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las cuales est formada por 2 cmaras: una aurcula y un ventrculo, de manera que el flujo de la
sangre a travs del corazn se realiza de la siguiente manera;
La aurcula derecha colecta la sangre proveniente de los rganos, excepto la proveniente del
corazn.
La sangre pasa al ventrculo derecho desde donde es impulsada a los pulmones.
Una vez oxigenada, la sangre vuelve al corazn, a la aurcula izquierda.
De aqu pasa al ventrculo izquierdo desde donde ser conducida a todo el organismo a travs
de la arteria aorta.
Las paredes del corazn estn compuestas por 3 capas de tejido:
Miocardio: es el tejido muscular del corazn y se halla profusamente vascularizado.
Epicardio: tejido conectivo fibroso que recubre la superficie externa del miocardio y que
contiene vasos sanguneos y linfticos.
Endocardio: una delicada capa de clulas que recubre la parte interna de las cmaras del
corazn. Este tejido es muy similar al que recubre la pared de los vasos sanguneos, el
endotelio.
El corazn requiere oxgeno y nutrientes para mantener su propia actividad constante. La sangre llega
al corazn por las arterias coronarias. Esta sangre retorna de nuevo al corazn, a la aurcula izquierda
a travs de las venas coronarias que son las estructuras ms prominentes sobre la superficie del
ventrculo izquierdo.
En cuanto a los vasos que distribuyen la sangre por todo el organismo, se distinguen 3 tipos:
Arterias: que portan la sangre desde el corazn a los rganos y tejidos. La mayor arteria es la
Aorta, que parte del ventrculo izquierdo y distribuye la sangre a todo el organismo.
Venas: a travs de las cuales la sangre retorna al corazn. La ms importante es la vena
Cava.
Capilares: vasos de muy pequeo dimetro que conectan venas y arterias.
Tanto la presin arterial (PA) como el ritmo cardiaco (RC) se van a ver afectados por la administracin
de agentes anestsicos, no solo por la accin farmacolgica directa de estos medicamentos sobre
ellos, sino por la hipotermia que producen ya que la temperatura influye tambin en ambos. Antes de
llevar a cabo un protocolo de anestesia es importante conocer el efecto cardiovascular concreto del
agente anestsico a utilizar en el modelo animal con que estamos trabajando ya que existen
diferencias muy grandes en la respuesta, metabolismo, recuperacin, etc.
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Los valores de PA y RC presentan fluctuaciones a lo largo del da observndose picos de RC al inicio

del ciclo de oscuridad con valores mnimos durante la mitad de los perodos de luz y oscuridad. En
cuanto a la PA tiene valores superiores al principio y final del perodo de oscuridad.
Sistema Nervioso
El sistema nervioso es un tejido especializado cuya unidad funcional, la neurona, posee una membrana
externa capaz de generar impulsos elctricos y transmitirlos a neuronas vecinas a travs de la sinapsis
(zona de conexin entre neuronas). El Sistema nervioso se divide en sistema nervioso central (SNC) y
sistema nervioso perifrico (SNP).
El SNC comprende el encfalo, dentro de la cavidad craneal, y la mdula espinal, en el interior de la
columna vertebral. En el encfalo est compuesto por:
Cerebro; dividido en 2 hemisferios, derecho e izquierdo, que a su vez estn constituidos por 4
lbulos (frontal, parietal, temporal y occipital). Los hemisferios cerebrales estn recubiertos
por la corteza cerebral donde se integran y reconocen los impulsos sensitivos y sensoriales y
donde se originan los impulsos motores y las funciones superiores tales como el lenguaje, el
pensamiento, etc En el lbulo frontal de ambos hemisferios encontramos el Bulbo olfatorio,
que recibe seales de los receptores nerviosos del epitelio olfatorio y las enva a la corteza.
Tronco cerebral; regin del encfalo que conecta con la mdula espinal.
Cerebelo; est detrs del tronco cerebral y tiene una estructura diferente y fcil de reconocer.
Su funcin principal est en relacin con el control del equilibrio y del movimiento.
Est constituido por los nervios perifricos (fuera del crneo y columna vertebral) que transportan los
impulsos nerviosos desde el SNC hasta los rganos efectores (vsceras, msculos, etc.) y viceversa,
desde los rganos sensitivos (visin, olfato, audicin, etc.) o desde el msculo hasta el SNC.
Tiene 2 subdivisiones:
SNP voluntario, que controla la actividad voluntaria (movimientos voluntarios, vocalizacin,
etc.).
SNP autnomo, que regula la funcin de los rganos segn cambian las condiciones
medioambientales. Para ello, dispone de 2 mecanismos antagnicos; el sistema nervioso
simptico y el sistema nervioso parasimptico:
El simptico es especialmente importante durante situaciones de emergencia y se asocia con la
respuesta de lucha o huida. Por ejemplo inhibe el tracto digestivo, pero dilata las pupilas, acelera
la frecuencia cardiaca, y respiratoria. Las fibras preganglionares de la divisin simptica se
originan en los niveles torcico y lumbar de la mdula espinal y casi inmediatamente terminan en
ganglios situados en la proximidad de la mdula espinal. Por lo tanto, en este sistema las fibras
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preganglionares son cortas, mientras que las posganglionares que contactan con los rganos
son largas.
El sistema parasimptico est relacionado con todas las respuestas internas asociadas con un
estado de relajacin, por ejemplo provoca que las pupilas se contraigan, facilita la digestin de
los alimentos y disminuye la frecuencia cardiaca. Est formado por pares craneales incluyendo el
nervio vago y fibras originadas de niveles sacros de la mdula espinal. Por lo tanto, este sistema
frecuentemente se denomina la porcin crneo-sacra del SNA. En la divisin parasimptica las
fibras preganglionares son largas y las posganglionares son cortas ya que los ganglios estn en
la proximidad o dentro de los rganos.
El encfalo adquiere caractersticas de desarrollo y complejidad anatmica muy grande. Este refleja las
necesidades de procesamiento de informacin que cada especie requiera en su hbitat y segn su
modo de vida. El cerebelo, est ms desarrollado y tiene 2 funciones fundamentales: integracin de
informaciones relacionadas con los sentidos (vista, tacto y odo) para mantenimiento del equilibrio y
tono muscular y el ajuste fino de las funciones motoras.
En el diencfalo es destacable la importancia del hipotlamo (estimula hipfisis para la regulacin
homeosttica) y los cuerpos mamilares vinculados a informacin olfativa. Pero es especialmente en el
desarrollo del telencfalo donde se hallan los mayores cambios. Est compuesto por 2 grandes lbulos
(hemisferios cerebrales), divididos en corteza y regin subcortical.
Est especialmente desarrollado en los mamferos superiores ya que la superficie y el grado de
plegamiento parece estar relacionado con la capacidad cognitiva del animal. En los placentarios,
aparece una estructura que comunica los 2 hemisferios cerebrales, llamada cuerpo calloso.

Visin: La visin estereoscpica est especialmente desarrollada entre los grupos arborcolas y
carnvoros. La mayora de los mamferos nocturnos poseen tapetum lucidum, una capa reflectante que
permite la visin en bajas intensidades de luz. Algunos cetceos, los cavadores y algunos mamferos
nocturnos han reducido notablemente su capacidad de visin.
Gusto: La presencia de quimiorreceptores es la base. Las papilas gustativas suelen estar situadas en la
lengua en los mamferos y participan en la estimulacin de la secrecin de saliva y jugos gstricos. Si
bien existen en humanos 4 submodalidades: dulce, agrio, salado, amargo, stas no se perciben de la
misma manera en otros animales.
Olfato: est muy desarrollado en mamferos excepto en primates superiores y cetceos. Todos tienen
rgano de Jacobson (o vomerolfato), una bolsa revestida de epitelio olfativo que se comunica con la
cavidad oral. Sirve para detectar feromonas y otras sustancias. El olfato es esencial para la captura de
alimento y el reconocimiento entre individuos, la orientacin, etc. Los bulbos y lbulos olfatorios tienen
gran desarrollo en los insectvoros, carnvoros y roedores. En numerosas especies de cervdeos
(quienes poseen hasta 5 o 6 tipos de glndulas diferentes) adquiere gran importancia la comunicacin
qumica, as como tambin en los roedores. Tambin se emiten sustancias de alarma que varios
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mamferos son capaces de generar en presencia de estimulos aversivos, condicionando a quien la

emite y a los coespecficos.
Odo: Muy desarrollado en los mamferos. Permite una discriminacin de frecuencias excepcional,
amplia sensibilidad a varias intensidades de sonido y direccionalidad. La oreja (pabelln auditivo
externo) y el conducto auditivo externo largo, son propios de los mamferos. La oreja falta en las focas,
Cetaceos y algunos Insectvoros. El odo medio es una cmara llena de aire donde se alojan 3
huesecillos (martillo, yunque y estribo). El odo interno est formado por el aparato vestibular y
espacios perilinfticos circundantes. En los mamferos la lagena se enrolla para constituir la cclea. Los
Cetceos y los Quirpteros (murcilagos) usan la ecolocalizacin para orientarse y obtener alimento
Por otra parte, existen adaptaciones para la recepcin de seales en roedores subterrneos, o los
cantos de llamada en primates Sudamericanos y de varios ungulados capaces de tener una adecuada
propagacin del sonido de varios km (Crvidos).
Tacto: adems de los receptores de la piel, los mamferos tienen pelos especializados rgidos con
elementos sensoriales en su base, llamados vibrisas. Las vibrisas se encuentran alrededor del hocico y
les permiten detectar corrientes de aire, percibir distancia a obstculos en la oscuridad o captar
vibraciones producidas por las presas.
Sistema Endocrino
El sistema endocrino (secrecin interna) se compone de glndulas productoras de hormonas,
compuestos qumicos que actan como mensajeros dando lugar a respuestas caractersticas en otras
clulas del cuerpo o clulas diana. El sistema endocrino regula funciones tales como:
Digestin.
Metabolismo.
Reproduccin.
Crecimiento.
Envejecimiento.
Siendo, por tanto, esencial en el mantenimiento de la homeostasis del organismo.
El hipotlamo es una regin del cerebro que controla un inmenso nmero de funciones corporales
principalmente por la liberacin de hormonas que actan sobre la hipfisis. Las hormonas
hipotalmicas reciben el nombre de liberadoras o inhibidoras segn su accin sea estimulante o
supresora de secrecin de una hormona concreta por parte de la hipfisis, por ejemplo:
La hormona CRH: Hormona Liberadora de Corticotropina.
La hormona TRH: Hormona Liberadora de hormona tiroidea.
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La secrecin de estos potentes mediadores debe tener un sistema de regulacin que en la mayora de
los casos tiene lugar a travs de un mecanismo de retroalimentacin negativa o feed-back negativo
en el cual el producto ltimo de la estimulacin hormonal inhibe la liberacin de la propia hormona.
Las principales glndulas que componen el sistema endocrino son:
- Pituitaria. Se trata de una nica glndula denominada tambin Hipfisis localizada en la base del
cerebro. Est dividida en 2 regiones independientes: lbulo anterior (Adenohipfisis) y lbulo
posterior (Neurohipfisis). Las hormonas ms importantes secretadas por la pituitaria son:
Vasopresina (ADH): Hormona antidiurtica. Regula la retencin de agua en los riones
controlando la presin sangunea.
Adrenocorticotrpica (ACTH): Controla la produccin y secrecin de hormonas de las glndulas
adrenales.
Hormona del crecimiento (GH): Estimula la produccin de protenas y afecta al crecimiento y
desarrollo.
Hormona Luteinizante (LH) y Folculo estimulante (FSH): Controla funciones reproductivas y
caractersticas sexuales.
Oxitocina: Estimula la contraccin del tero y de los conductos de las glndulas mamarias.
Prolactina: Inicia y mantiene la produccin de leche.
Hormona estimulante del tiroides (TSH): Estimula la produccin y secrecin de hormonas
tiroideas.
- Glndula Pineal. Tambin situada en el cerebro, produce Melatonina, hormona que regula los ciclos
de sueo y algunos aspectos de la reproduccin. Su secrecin aumenta en la oscuridad y decrece
durante la exposicin a la luz.
- Glndulas adrenales. Tambin denominadas glndulas suprarrenales son pequeas glndulas
triangulares situadas en la parte superior de ambos riones. Constan de 2 partes: externa o corteza
adrenal e interna o mdula adrenal.Las hormonas producidas por la corteza adrenal son:
Glucocorticoides: Hidrocortisona (o Cortisol) y Corticosterona, que regulan el metabolismo de
lpidos, protenas e hidratos de carbono y afectan al sistema inmunolgico.
Mineralocorticoides: Aldosterona, que regula la excrecin de sodio y potasio en orina,
manteniendo el volumen y presin sangunea.
La mdula adrenal secreta sus hormonas en respuesta a la estimulacin del sistema nervioso
autnomo. Las 2 hormonas que secreta, conocidas como catecolaminas, intervienen en el control
del estrs fsico y emocional y son:
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Epinefrina (o adrenalina): aumenta la frecuencia y fuerza de contraccin del corazn, facilita el

flujo de sangre a msculo y cerebro, aumenta los niveles de glucosa en sangre, etc.
Norepinefrina (o noradrenalina): con fuertes efectos vasoconstrictores que provocan aumento en
la presin sangunea.
- Tiroides. Consiste de 2 lbulos situados a ambos lados de la traquea y tiene un papel fundamental
en la regulacin del metabolismo, que se define como la actividad qumica que tiene lugar en las
clulas y que libera energa de los nutrientes y la utiliza para crear nuevos productos como las
protenas. El ndice metablico basal (Basal Metabolic Rate, BMR) es una medida de la energa
que es requerida para mantener las funciones bsicas de un organismo y se ve incrementado por el
ejercicio, estrs, miedo o enfermedad. Las hormonas secretadas por el tiroides (Tiroxina o T4 y
Triyodotironina o T3) regulan el metabolismo celular estimulando la produccin de protenas e
incrementando por tanto la cantidad de oxgeno utilizada por las clulas. Otra hormona secretada
por la tiroides es la Calcitonina, que regula el balance de Calcio.
- Paratiroides. Son 2 parejas de pequeas glndulas localizadas junto a la glndula tiroides. Secreta
la Hormona Paratiroidea, que ayuda a la Calcitonina en la regulacin del calcio en sangre
- Pncreas. Junto al duodeno y bazo. En adicin a sus funciones digestivas (exocrinas), el pncreas
secreta las hormonas Insulina y Glucagn en los denominados islotes de Langerhans (funcin
endocrina). Estas hormonas tiene efectos contrapuestos, esto es, la insulina decrece el nivel de
glucosa en sangre mientras que el glucagn lo incrementa.
- Gnadas. Son las glndulas sexuales: ovarios (hembras) y testculos (machos). Las hormonas
producidas en estas glndulas ayudan a determinar las caractersticas fsicas secundarias propias
de cada sexo, regulando tambin el comportamiento sexual y los procesos reproductivos. Las
hormonas producidas por los ovarios son:
Estrgeno: Afecta al desarrollo de las caractersticas sexuales y reproductivas.
Progesterona: Prepara al tero para la fertilizacin y a las mamas para la produccin de leche.
La produccin de estas hormonas en los ovarios est controlada por la hormona Gonadotrpica
secretada por la pituitaria. La Testosterona es la hormona producida por los testculos y va a afectar al
desarrollo de caractersticas masculinas y produccin de esperma.
El sistema linftico es el mecanismo de filtrado del organismo y constituye, junto con la piel, uno de
los mayores componentes de la defensa contra la invasin de agentes patgenos. Cuando un agente
infeccioso consigue traspasar las barreras mecnicas de defensa del organismo y alcanzar el tejido o el
torrente sanguneo, van a ser las clulas que se generan, desarrollan, maduran o son almacenadas en
los rganos linfticos las encargadas de luchar contra dicha infeccin. Adems, el sistema linftico
87

acta como una extensin del sistema circulatorio que regula el balance de fluidos entre la sangre y los
tejidos.
Para su estudio, el sistema linftico puede clasificarse en difuso o nodular. El tejido linftico difuso
consiste de una coleccin desorganizada de linfocitos que van a ser encontrados donde quiera que se
hayan dado las condiciones necesarias para su reclutamiento, por ejemplo, en una zona de
inflamacin.
El tejido linftico nodular es un tejido mucho ms organizado que se va a encontrar siempre rodeado
de tejido linftico difuso. El ejemplo tpico de tejido linftico nodular son los centros germinales
(conjunto de linfocitos B altamente ordenados) que se encuentra en la mayora de rganos linfticos.
Los principales rganos linfticos son:
- Ndulos linfticos. Los vasos linfticos son los encargados de drenar los fluidos de los tejidos y
retornarlos a la circulacin venosa. A lo largo de los vasos linfticos se encuentran los ndulos
linfticos que actan como filtros en los que la linfa es impulsada desde la periferia del mismo, haca
el interior, dnde es recogida por la circulacin venosa. En estas formaciones va a tener lugar el
arresto de organismos patgenos y otras sustancias potencialmente nocivas por macrfagos.
- Timo. El timo es el rgano linftico primario en mamferos y su presencia y funcionalidad es
requerida para que la inmunocompetencia se desarrolle completamente. Un ejemplo de
inmunodeficiencia congnita en ratones es la mutacin nude, caracterizada por la ausencia de
este rgano. En ratones, el timo est compuesto por 2 lbulos, siendo el lbulo derecho ligeramente
mayor al izquierdo, y alcanza su estado completo de desarrollo a la edad de 6-8 semanas, momento
a partir del cual sufre una gradual involucin en funcin y desarrollo anatmico. La funcin del timo
es la de procurar entrenamiento a los linfocitos T, ya que es en este rgano dnde los linfocitos T
inmaduros, es decir, en estadios todava no competentes inmunologicamente hablando, adquieren
el estatus de linfocito T activo o maduro, es decir, su forma inmunolgicamente competente. Al no
disponer de centros grminales, en el timo no tiene lugar la sntesis de inmunoglobulinas.
- Bazo. Aunque el bazo realmente forma parte del sistema circulatorio, ha sido tradicionalmente
descrito como integrante del sistema linftico debido a la gran cantidad de linfocitos que se
encuentran en l. El bazo sirve principalmente como almacn de sangre y sistema de reciclaje de
los glbulos rojos, es decir, los eritrocitos viejos o defectuosos son retirados de la circulacin en
este rgano. Puede llegar a ser hasta un 50% ms grande en machos.
Al realizar un corte histlogico de un bazo se observar una matriz de color rojo oscuro con puntos
blancos en ella. Estas 2 zonas diferenciadas son lo que se conocen como pulpa blanca y pulpa roja
del bazo.
La pulpa roja obtiene su apariencia de las clulas sanguneas que la forman, los eritrocitos o
glbulos rojos. La pulpa blanca consiste casi enteramente de linfocitos asociados a las arterias que
riegan el bazo. Contienen centros germinales donde se produce la maduracin de los linfocitos B.
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Todo el rgano se haya recubierto de una membrana o cpsula de colgeno y fibras de msculo liso
que son las que, al contraerse, van a permitir la expulsin de los editorcitos almacenados al torrente
sanguneo cuando sea necesario.
- Tejido linftico asociado a mucosas. Se trata de estructuras con una organizacin propia de tejido
linftico nodular, en algunos casos con centros germinativos, que se encuentran asociadas a la
mucosa del tracto gastrointestinal y sistema respiratorio. Un ejemplo de ste tipo de estructuras son
los Tonsiles, que se encuentran asociados a la cavidad bucal, o las Placas de Pyer en el leo del
intestino delgado, donde tiene lugar la maduracin de linfocitos B.
Hematopoyesis
Las clulas sanguneas, eritrocitos, leucocitos y plaquetas, son generadas en el proceso denominado
Hematopoyesis. Este proceso tiene lugar principalmente en la mdula sea de los grandes huesos, sin
embrago, en ciertas situaciones de emergencia, como en el caso de la supresin medular por
irradiacin o quimioterapia, la demanda de clulas sanguneas es cubierta mediante la activacin de la
hematopoyesis en los rganos que cumplieron esta funcin en la vida fetal: hgado y bazo.
Durante el desarrollo embrionario el hgado es la principal fuente de hematopoyesis hasta que la
mdula sea se establece como rgano hematopoytico. A partir de ese momento, las clulas
hepticas van perdiendo su capacidad de brindar un microambiente adecuado para la expansin de
clulas hematopoyticas. En el ratn, las primeras clulas hematopoyticas colonizan el hgado a partir
del da 9-10 (E9-E10) de gestacin, producindose olas o ciclos de hematopoyesis hasta E15 momento
en el cual la actividad hematopoytica comienza a implantarse en la mdula sea. En el da 2 post
nacimiento (P2) bazo, hgado y mdula son equiparables en cuanto a actividad hematopoytica,
disminuyendo dicha actividad en hgado hasta P14, momento en el cual la hematopoyesis heptica
deja de ser efectiva. En ratones, y al contrario de lo que ocurre en humanos y otros mamferos, el bazo
contina siendo un rgano hematopoyticamente activo en la edad adulta. La produccin de eritrocitos
en bazo, por ejemplo, equivale a la mitad de los eritrocitos producidos en mdula sea en condiciones
normales.
Todo lo visto hasta ahora en hematopoyesis fetal corresponde a la denominada hematopoyesis fetal
definitiva ya que en estadios previos a E9, existe una hematopoyesis primitiva que se inicia el da 7
post concepcin y tiene lugar en tejidos extraembrionarios.
Los valores hematolgicos en el ratn se ven fuertemente influenciados por la edad, sexo, cepa, estado
sanitario y nutricional, estrs, as como tcnica de extraccin de la muestra, manipulacin de la misma,
etc.
Clulas Sanguneas
- Eritrocitos (clulas rojas). Es el tipo celular ms abundante en la sangre y contiene hemoglobina, la
cual es capaz de combinarse con el oxgeno y el dixido de carbono constituyendo el medio de
transporte de estos gases en el organismo. Son clulas sin ncleo, excepto en pjaros, reptiles y
anfibios.
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- Plaquetas (Trombocitos). Son las clulas ms pequeas de la sangre y su principal funcin es la

coagulacin (formacin de trombos) que impiden la prdida de sangre por roturas de vasos.
- Leucocitos (clulas blancas). Son los responsables de la defensa del organismo frente a agentes
patgenos. Se distinguen 2 tipos de leucocitos:
Granulocitos, denominados as por la presencia de grnulos en el citoplasma. Son 3; Eosinfilos,
Basfilos y Neutrfilos.
Clulas linfoides, o agranulocitos, que se dividen a su vez en linfocitos y monocitos. Los
linfocitos, adems de estar presentes en la sangre, proliferan y se diferencian (adquieren
especificidad frente a antgenos) en los rganos y tejidos linfoides; bazo, timo, ndulos linfticos
y tejido linfoide asociado a mucosas en aparato respiratorio e intestino (e.g., Placas de Peyer).
Hay 2 tipos de linfocitos, linfocitos B, productores de anticuerpos (inmunoglobulinas) y
responsables de la denominada respuesta inmune humoral y los linfocitos T, que se diferencian
en timo y ndulos linfticos y producen la denominada respuesta inmune mediada por clulas.
Principales funciones de los Leucocitos:
- Neutrfilos: fagocitan bacterias.
- Eosinfilos: principal lnea de defensa contra parsitos.
- Basfilos: reacciones de hipersensibilidad.
- Monocitos: precursores de los macrfagos, las mayores clulas sanguneas, encargadas de
fagocitar todo tipo de agentes patgenos. Proliferan en lugares donde se dan procesos
inflamatorios.
- Linfocitos B: liberan anticuerpos (Inmunoglobulinas) al torrente sanguneo que al reconocer
antgenos (estructuras complementarias de los anticuerpos) en la membrana de microorganismos,
se unen a ellos, inmovilizndolos y facilitando su destruccin por otras clulas que reconocen estos
complejos antgeno-anticuerpo.
-
Linfocitos T: producen anticuerpos pero no los liberan a sangre, sino que los mantienen en su
superficie utilizndolos para reconocer, principalmente, a clulas del propio organismo infectadas con
virus o transformadas en tumorales.
Caractersticas Propias de Roedores

El grupo de los roedores (orden Rodentia) es el ms grande y diverso dentro de la clase de los
mamferos. Dentro del orden Rodentia se agrupan alrededor del 40% de todos los mamferos. De
hecho, se han descrito 1,135 gneros y 4,629 especies de mamfero, de estos el 39% de los gneros
(443) y el 43.5% de las especies (2,015) son roedores. Aunque el grupo de los mamferos es bien
conocido, las estimaciones sobre el nmero de especies existentes en la actualidad vara bastante en
funcin de la fuente: 4,300 (Anon, 1994), 4,629 (Groombridge y Jenkins, 2002), 5,416 (International
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Union for Conservation of Nature - IUCN, 2004), 5,419 (Wilson y Reeder, 2005), hasta 5,487
(International Union for Conservation of Nature - IUCN, 2009).
La familia con mayor nmero de especies es Muridae, con un 66% de todas las especies de roedores.
Aunque dentro del orden Rodentia se definen 29 familias, el 90% de todas las especies de roedor
pertenecen a alguna de las 5 siguientes:
- Muridae (ratas y ratones).
- Sciuridae (ardillas).
- Echimyidae (ratas espinosas).
- Heteromyidae (ratones pigmeos y ratas canguro).
- Dipodidae (jerbos).
Los roedores forman tambin uno de los grupos animales ms polmicos en cuanto a su clasificacin,
carcter monofiltico, relaciones entre familias y dataciones de divergencia.
Denticin
A pesar de su diversidad morfolgica y ecolgica todos los roedores comparten una caracterstica
comn; una denticin altamente especializada para roer. Existen 4 tipos de dientes; incisivos, caninos,
premolares y molares. El nmero de cada uno de los 4 tipos de dientes en cada una de las mandbulas
(superior e inferior), se denomina frmula dental y puede representarse de la siguiente manera: [I n/n C
n/n P n/n M n/n]. Donde las letras I, C, P y M indican los tipos de dientes y n/n corresponde al nmero
de dientes de cada tipo en ambos lados (derecho e izquierdo) de la mandbula superior o inferior.
Todos los roedores tienen un nico par de incisivos superiores e inferiores seguidos de un espacio sin
dientes (diastema) seguido de uno o ms molares o premolares. Ningn roedor tiene ms de un
incisivo por cuadrante y ningn roedor tiene caninos. En el caso de las ratas y los ratones, la frmula
dental es la siguiente: [I 1/1 C 0/0 P 0/0 M 3/3]. Al ser la distribucin y nmero de dientes idntica en las
2 mandbulas (superior e inferior), el nmero total de dientes es de 16: [2 x (1+1+3+3) = 16].
Los incisivos de ratas y ratones se caracterizan por tener la raz abierta, lo que les confiere la
propiedad de crecer continuamente a lo largo de la vida del animal. Esta particularidad les obliga a
desgastar los incisivos mediante el roce continuo entre ellos durante la masticacin de los alimentos,
que a su vez, debern tener una dureza considerable.
Si los incisivos de ambas mandbulas no coinciden (malocclusion) o la dureza del alimento no es
apropiada, se produce el sobrecrecimiento de stos, que imposibilita la correcta alimentacin del
animal llegando a producirse la muerte por inanicin. Este crecimiento se produce en espiral, con un
ngulo de aproximadamente 86 debido a la mayor dureza de la capa ms externa, el esmalte, que
origina la curvatura de la misma sobre la ms fcilmente desgastable dentina.
Otra caracterstica reseable es la coloracin natural de estos dientes. Los incisivos estn coloreados
con un pigmento amarillento, de manera que ya a los 25 das del nacimiento (en la rata), los incisivos
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superiores presentan una coloracin amarilla ms intensa que los inferiores, mantenindose dicha
diferencia a lo largo de la vida del animal.
Las ratas y ratones tienen 3 grupos de molares que erupcionan a los 19, 21 y 35-40 das
respectivamente. La aparicin de los segundos molares posibilita una correcta masticacin de los
alimentos y marca el momento en que pueden ser destetados. Al contrario que los incisivos, el
crecimiento de los molares es prcticamente indetectable a partir de los 125 das de vida.
Tracto Gastrointestinal
El tracto gastrointestinal consiste de un largo tubo denominado canal alimentario, constituido por varios
rganos (estmago e intestino) y otros rganos adyacentes (hgado y pncreas) que conectan
directamente con l. El paso de la comida a travs de todo el tracto digestivo se realiza gracias a los
movimientos peristlticos de las paredes de esfago e intestino.
El ratn tiene 3 pares de glndulas salivares: partidas (localizadas en la base del odo, con secrecin
serosa), submaxilares (secrecin serosa y mucosa) y sublinguales (secrecin mucosa).
El aparato digestivo y rganos accesorios del ratn presentan una serie de caractersticas que se
detallan a continuacin:
- El esfago, tapizado de un epitelio estratificado escamoso, carece de glndulas secretoras de
moco, frecuentemente vistas en otras especies comunes de laboratorio. Al contrario que en
humanos, est compuesto de msculo estriado nicamente.
- El estmago del ratn est formado por una regin glandular y una regin no glandular de paredes
mucho ms finas y tapizada con el mismo tipo de epitelio que el esfago. La porcin glandular
contiene glndulas secretoras de enzimas, moco, etc.
- El pncreas no es una glndula discreta sino que se trata ms bien de una masa poco organizada
de lbulos dispersa entre el tejido mesentrico, lo que hace a este rgano difcil de identificar de
forma grosera. Secreta enzimas digestivas (lipasa, amilasa, pepsina, tripsina, etc.) a travs del
conducto pancretico en el intestino delgado (funcin exocrina).
- Uno de los conductos pancreticos entra directamente en el duodeno, mientras que el otro lo hace
directamente
en el conducto biliar comn. A menudo, lo ratones tienen otros conductos
pancreticos adicionales que vierten directamente en el duodeno.

- El hgado del ratn est compuesto de 4 lbulos; un gran lbulo mediano, lbulos laterales izquierdo
y derecho (dividido a su vez en dos lbulos, anterior y posterior) y un lbulo caudal. Entre sus
funciones estn la sntesis y excrecin de colesterol, glucosa o bilis, sino tambin el metabolismo de
medicamentos, protenas, grasas, almacn de glucgeno, vitaminas, etc. La bilis se almacena en la
vescula biliar hasta que es vertida al intestino, donde facilita la absorcin de las grasas. En lo que al
metabolismo del colesterol se refiere, su absorcin parece estar muy influenciada genticamente,
con cepas muy resistentes a dietas altas en colesterol como DBA/2 o AKR. La cepa 129/Sv resulta
92

ser 2 veces ms eficiente en la absorcin de colesterol de una dieta baja en grasas que la cepa
C57BL/6. Dado que ambas cepas son ampliamente utilizadas en la produccin de ratones
genticamente modificados, esta caracterstica puede tener implicaciones en los estudios de
colesterol con estas cepas. El hgado es ms pesado en hembras que en machos.
El aparato digestivo de la rata es muy similar al del ratn en lo que ha estructura general del estmago
e intestinos se refiere, sin embrago presenta algunas caractersticas distintivas como son:
- Un pncreas an ms difuso que el del ratn con varios conductos que suplen al duodeno con
enzimas pancreticas.
- El hgado est igualmente constituido por 4 lbulos aunque con forma y disposicin algo distintas;
tiene un lbulo derecho con lbulos anterior y posterior, un gran lbulo izquierdo, y un pequeo
lbulo caudado.
- Una importante distincin anatmica de la rata es que carece de vescula biliar. En ausencia de
vescula para el almacenaje de bilis, un continuo flujo de bilis entra en el duodeno.
Una caracterstica fisiolgica compartida por ambas especies es su incapacidad para vomitar. El vmito
o emesis, es el acto reflejo de eyectar el contenido del estmago a travs de la boca mediante
contracciones musculares coordinadas. Dichas contracciones estn controladas por un ncleo (centro
del vmito) en el sistema nervioso central. En esencia, una gran presin es ejercida sobre el estmago
por los msculos del abdomen produciendo espasmos en el diafragma, que a su vez, se relaja en la
zona que rodea al esfago forzando su apertura.
En el caso de ratas y ratones, la imposibilidad del vmito se debe a varias causas:
- Durante el vmito, es necesario que los 2 msculos del diafragma (crural y costal) acten
separadamente, es decir, que cuando el msculo costal se contraiga, ejerciendo presin sobre el
estmago, el msculo crural ,que forma una especie de pinza alrededor del esfago denominada
crural sling, debe relajarse para permitir la apertura del mismo. Ratas y ratones son incapaces de
disociar la actividad de ambos msculos.
- No pueden mantener abierto el esfnter esofgico para permitir la salida del alimento al exterior. En
los humanos, este esfnter se mantiene abierto durante la emesis gracias a la capa de msculo
longitudinal del esfago, mientras que en ratas y ratones, esta capa muscular es demasiado
delgada, siendo insuficiente para tal fin. Este esfnter, junto con el crural sling, componen la
barrera gastro-esofgica.
- Las ratas y los ratones carecen de las conexiones neuronales, tanto en el sistema nervioso central
(centro del vmito) como entre cerebro y vsceras, necesarias para coordinar todos los msculos
implicados en el vmito.
Sorprende que estos animales, cuyo xito adaptativo se debe en parte a su capacidad para comer
prcticamente de todo, no dispongan de un mecanismo de defensa como es el vmito, frente a la
posible ingestin de toxinas. Sin embargo, esta carencia es suplida con otras aptitudes como son:
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- Un extraordinariamente bien desarrollado sentido del gusto y el olfato, lo que le permite evitar
alimentos potencialmente peligrosos.
- Una vez que se produce la ingestin de alimentos dainos, estos roedores han desarrollado una
estrategia que les ayuda a evitar los efectos nocivos de las toxinas. Se trata del Pica o ingestin
de sustancias no nutritivas como la arcilla o el caoln que se unirn a las toxinas neutralizndolas.
El tracto gastrointestinal tiene tambin un importante papel inmunolgico actuando como barrera tanto
fsica como inmunolgica y manteniendo el contenido normal de la flora bacteriana intestinal.
En los ltimos aos, el ratn ha llegado a ser un importante modelo en la investigacin de la fisiologa
respiratoria, existiendo en la actualidad valiosos modelos murinos de asma. Para su estudio fisiolgico,
el tracto respiratorio del ratn puede dividirse en 2 secciones: una zona de conduccin del aire y una
zona respiratoria:
- Zona de conduccin: forma un conducto continuo a travs del cual el aire puede moverse dentro y
fuera de los pulmones. Comienza en la cavidad nasal y se continua con la faringe, laringe, traquea,
bronquios y bronquiolos.
Cavidad nasal: tapizada con un epitelio que contiene, entre otros, glndulas mucosas, cilios que
limpian el aire de partculas y receptores olfatorios. Est dividida en 2 compartimentos
simtricos separados por una pared de tejido cartilaginoso y contiene unas estructuras
denominadas cornetes sobre las que se asienta el epitelio olfativo. En esta cavidad se
encuentra tambin el rgano vomeronasal de vital importancia en la regulacin del
comportamiento reproductivo y social de estos roedores.
Faringe: constituye la zona de paso comn de aire, fluidos y comida. Se divide en orofaringe,
nasofaringe y laringofaringe.
Laringe: es la zona que conecta la faringe con la traquea. Su funcin principal es mantener el
paso de aire abierto durante la respiracin y cerrarlo cuando comida o lquidos son ingeridos.
Esto se logra gracias a la presencia de la Epiglotis.
Traquea: rgano tubular flexible constituidos por anillos cartilaginosos (de 15 a 18) que se origina
en la base de la laringe y termina en la bifurcacin que da lugar a los bronquios.
- Zona respiratoria: es la parte del sistema respiratorio donde el intercambio gaseoso tiene lugar y
est compuesta por los bronquiolos, conductos alveolares y alvolos.
Pulmones: son bsicamente un conjunto de tubos ramificados que comienzan en la traquea y
terminan en los bronquiolos. Constan de 5 lbulos en total; 4 el pulmn derecho (superior,
medio, inferior y post-caval) y uno el izquierdo.
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Bronquiolos y alvolos: el bronquiolo terminal es la unidad ms pequea de paso de aire en el

ratn y se bifurca en 2 conductos alveolares. Los conductos alveolares, sacos alveolares y
alvolos constituyen la unidad de intercambio gaseoso de los pulmones. A travs de la delgada
pared de los alvolos, el CO2 y O2 es intercambiado entre alvolos y los capilares sanguneos
que los recubren.
El flujo ventilatorio es el resultado neto del gradiente de presiones entre los alvolos y la atmsfera. La
presin en los alvolos determina si el aire fluye dentro o fuera de los pulmones. Durante la inspiracin,
la contraccin del diafragma produce la bajada de la pleura que va a originar un descenso de la presin
pleural y por tanto, de la presin en el interior de los alvolos, lo que en ltimo trmino provoca la
entrada de aire en los pulmones. La expiracin, por otra parte, es predominantemente un proceso
inactivo debido a la relajacin del diafragma.
Ritmo Respiratorio
No todos los ratones respiran segn el mismo ritmo respiratorio. Algunos respiran ms rpidamente
con un menor volumen tidal (VT: volumen de aire inspirado y expirado en cada respiracin normal),
mientras que otros lo hacen ms despacio pero con mayor VT.
Existen 2 mecanismos primarios de regulacin del ritmo respiratorio:
- Central o nervioso.
- Mecnico, mediante un proceso de feedback negativo que detecta cuando los pulmones estn
llenos.
Sin embargo, recientemente se ha sugerido la existencia de un tercer mecanismo de regulacin: la
regulacin gentica. En un estudio con 8 cepas consanguneas de ratn se demostr que cada una
tena un patrn de respiracin distinto encontrndose las cepas C57BL/6 (B6) y C3H (C3) en los
extremos opuestos de la tabla, B6 con un ritmo ms rpido y C3 con el ms lento y profundo de todos,
demostrndose que existen factores genticos que afectan a los valores respiratorios.
Aparato Urinario
La relacin entre peso corporal y el peso de los riones es bastante constante en todos los mamferos,
sin embargo en el caso de los ratones existe una gran diferencia entre unas cepas y otras que puede
variar entre 12 y 23 mg/g de peso corporal. El peso de los riones, al contrario que el peso corporal, es
relativamente insensible a influencias medioambientales.
El ratn excreta de 0,5 a 1 mL de orina diaria en forma de pequeas deposiciones de 1 o 2 gotas cada
vez. La orina producida por los ratones est muy concentrada con un elevado porcentaje de protenas,
entre ellas las mouse protein urinary o protenas urinarias mayores (MUP), componentes de un
familia de protenas producidas principalmente en el hgado y que circulan por la sangre antes de ser
excretadas en orina. Estas protenas actan como transportadoras de feromonas y pueden a su vez
actuar como feromonas liberadas en pequeas cantidades durante la demarcacin del territorio.
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A diferencia de otros mamferos, la creatina forma parte de la excrecin normal en orina. La dieta
influye en la proporcin de protenas excretadas.
El corazn en ratones tiene una forma elptica (de baln de rugby) mucho ms marcada que en
humanos ya que al estar el cuerpo paralelo al suelo, el corazn no descansa verticalmente sobre el
diafragma y tiene ms espacio para moverse dentro de la cavidad pericrdica. El ritmo cardiaco en
ratones es muy superior al de humanos (500-800 pulsaciones/min) y su peso oscila entre los 100-200
mg.
Algunas cepas consanguneas de ratn estn genticamente predispuestas a desarrollar calcificacin
espontnea del miocardio.
Las arterias coronarias en el ratn son difciles de identificar ya que no discurren sobre la superficie del
corazn sino que se hallan embebidas en el propio tejido.
Esqueleto y musculatura
Como todos los vertebrados, ratas y ratones poseen un esqueleto interno (endoesqueleto) que le
provee movimiento, soporte y proteccin. El cerebro se haya protegido por el crneo y el corazn y
pulmones por la cavidad formada por las costillas, esternn y vrtebras. A su vez, el esqueleto
interviene en el movimiento proveyendo puntos de unin a los msculos (tendones) y entre los huesos
(ligamentos).
La cola es una extensin de la columna vertebral constituida por 3 capas concntricas. La ms interna
est formada por las vrtebras de la columna que se hayan recubiertas por una segunda capa
constituida por los tendones y una ltima capa ms externa de piel.
Las funciones de la cola son principalmente la termorregulacin y el equilibrio. La termorregulacin se
lleva a cabo mediante la dilatacin-constriccin de los vasos sanguneos, de esta manera, la dilatacin
permitir la prdida de calor de la sangre durante su recorrido en esta zona. Cuando la temperatura
corporal disminuye, los vasos se contraen, restringiendo el flujo de sangre a la cola e impidiendo de
esta forma una mayor prdida de calor.
En cuanto a la funcin de equilibrio, las ratas y ratones se ayudan de la cola para balancearse y
cambiar su centro de gravedad cuando, por ejemplo, trepan por cuerdas.
Caractersticas Propias de Lagomorfos

El conejo en libertad se alimenta exclusivamente de hierbas y granos, su cuerpo esta cubierto por un
pelo espeso y suave, tienen un temperamento asustadizo, propensos al pnico, por eso su trato y
transporte debe ser cuidadoso.
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Pertenece al orden Lagomorfa, se diferencia de los roedores por el segundo par de incisivos
superiores. No presentan caninos y los incisivos estn separados de los premolares por un espacio
denominado diastema. Los incisivos principales tienen un borde cortante y crecen durante toda la vida.
Sus ojos son prominentes y con campos visuales independientes y panormicos, junto con un pequeo
campo binocular, lo que le permite un amplio rango de visin. El sentido de la audicin y el olfato
tambin estn bien desarrollados. Es un animal herbvoro y su aparato digestivo presenta ciertas
caractersticas de adaptacin como por ejemplo la naturaleza de los dientes, la gran produccin de
bilis, los intestinos voluminosos y el gran ciego terminado en un apndice vermiforme.
En cuanto al aparato genital, los machos jvenes presentan una abertura genital protuberante,
sumamente marcada, en cambio las hembras tienen una abertura poco manifiesta. En los machos
adultos el escroto es perfectamente visible, de localizacin inguinal, carentes de pelo y anterior al pene.
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Protocolo Estandarizado de Necropsia

En muchos casos, es necesario realizar un procedimiento de necropsia como punto final de un
experimento. Por lo general, el protocolo de necropsia se realiza con el fin de tomar muestras
especficas de rganos y/o tejidos, o para determinar la causa de la muerte de un animal, o bien para
evaluar lesiones u otras alteraciones en rganos.
Tan importante como el conocimiento de las lesiones macroscpicas ms tpicas que puede presentar
un organo o tejido, es el reconocimiento de sus caractersticas normales (forma, apariencia, color,
tamao). A continuacin se expone un protocolo estandarizado de necropsia tomando como modelo el
ratn, aunque muchos de los conceptos y tcnicas pueden aplicarse a cualquier especie animal.
Ms adelante en este texto se describen los criterios y mtodos eutansicos apropiados para la
mayora de las especies animales utilizadas en procedimientos experimentales.
Instrumental, Productos, Equipamiento y Seguridad

Antes de iniciar un procedimiento de necropsia es necesario comprobar que disponemos de todo el
instrumental, productos qumicos, recipientes y otro material fungible, y equipamiento necesarios para
completar el proceso.
Lo Primero: tu Seguridad
Cualquier persona puede verse expuesta a diversos riesgos durante la realizacin de un protocolo
necropsia. Adems de los riesgos derivados del manejo de animales (mordeduras, araazos, etc.),
durante la necropsia se van a utilizar instrumentos cortantes y/o punzantes, y, lo que representa un
mayor riesgo, productos qumicos que pueden ser peligrosos si se inhalan o entran en contacto con
nuestra piel o mucosas. Lo ideal sera disponer de una cabina de extraccin de gases o una mesa de
necropsia con algn sistema de ventilacin que nos proteja de gases y vapores. Si no disponemos de
este equipamiento, la necropsia debera realizarse en un rea amplia y bien ventilada.
Equipamiento
Adems de la campana de extraccin de gases o la mesa de necropsia ventilada, puede ser necesario
disponer del siguiente equipamiento:
Peso digital adecuado a la especie (ratn: que discrimine al menos dcimas de gramo).
Lmpara de luz fra.
Lupa binocular para diseccin de partes de reducido tamao.
Cmara fotogrfica.
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Instrumental y Reactivos
Es importante contar tanto con el instrumental como con los reactivos adecuados para poder completar
la necropsia y obtener y conservar las muestras de tejido de una forma correcta. Es recomendable
preguntar al laboratorio de anatoma patolgica (o cualquier otro en que se vayan a procesar muestras)
sobre la mejor forma de conservar muestras si no se est seguro de cmo recogerlas.
Como mnimo, debe disponerse de varias tijeras de diseccin (alguna con punta roma), varios tipos de
pinzas y un bistur.
Observacin Clnica
El observar a los animales para detectar cualquier cambio de comportamiento o de apariencia
representa una parte importante del trabajo diario. Uno debe sentirse cmodo hacindolo. Sin
embargo, para detectar cambios en un animal se debe conocer primero lo que resulta normal. Durante
el desarrollo del trabajo diario se presentan muchas oportunidades de observar la apariencia y el
comportamiento habituales de los animales. Cuando se realice una observacin se debe tener siempre
en mente qu es normal en un animal o un determinado grupo o tipo de animales. En un animal,
cualquier cambio con respecto a lo normal se llama signo clnico porque puede ser el signo (indicador
observable) de una enfermedad clnica. El estornudo, la diarrea o las modificaciones del apetito son
algunos ejemplos de signos clnicos. Tambin podemos llamarle cambio del estado normal del animal o
hallazgos anormales. Es decir, lo que usted encuentra en el animal que no es habitual. Por ejemplo, un
corte o un araazo, una tumefaccin o un cambio de comportamiento. No hay ninguna diferencia entre
signos clnicos y hallazgos anormales; slo son diferentes formas de describir cambios con respecto a
un animal normal.
No es difcil hacer observaciones. Slo se necesita estar atento a cualquier cambio o alteracin en los
animales sin importar lo pequeos que sean los animales o los cambios. La persona que trabaja
directamente y a diario con animales tiene la ventaja de que conoce muy bien a los animales con los
cuales trabaja y es capaz de notar cambios mnimos que otras personas no podran notar. Para hacer
estas observaciones, es necesario utilizar todos los sentidos: vista, odo, tacto y en ocasiones tambin
el olfato. Practique la manera de hacer una observacin realizando el ejercicio que aparece a
continuacin:
Qu es esto?
100

1) Una naranja.
2) Un objeto de forma redonda (esfrica), de color naranja. Su superficie aparece irregular con zonas
brillantes. La parte superior es ligeramente cncava y contiene un poco de material verde en el centro.
La respuesta nmero 1 es un diagnstico. Es la conclusin a la cual se lleg despus de ver la foto y
compararla con su descripcin mental y experiencias con naranjas. La respuesta nmero 2 es una
observacin. Es lo que los sentidos inspiran y lo que se puede medir o examinar objetivamente.
Despus de que toda la informacin es obtenida se puede decir Esto probablemente es una naranja.
Como estas observaciones fueron hechas sobre una foto, no se pueden evaluar elementos como peso,
olor o sonido. Estos parmetros son otras medidas o evaluaciones objetivas que pueden ser tenidas en
cuenta por todo observador.
Cuando se hace una observacin, es importante analizar todos los aspectos del animal. Con roedores
pequeos en jaulas, es muy fcil abrir la jaula y slo observar sus espaldas. Examine el animal entero y
su jaula; de las orejas a la cola, de arriba hacia abajo, como tambin sus excreciones y medio
ambiente. Esto puede proporcionarle pistas valiosas y un cuadro completo sobre el problema al
personal veterinario o de investigacin.
Secuencia de una Observacin Clnica
1. Examinar el exterior de la jaula y observar las condiciones de la sala o recinto.

2. Abrir la jaula (o corral).
3. Observar el agua y el alimento.
4. Observar las paredes de la jaula y el lecho.
5. Observar el comportamiento, condicin (delgado, obeso, etc.) y la actitud del animal en la jaula.
6. Levantar (sujetar) al animal.
7. Observe el dorso del animal.
8. Observe la parte ventral del animal.
9. Observe las extremidades del animal (cabeza, cola, extremidades, patas).
10. Comprobar si hay algn exudado (ojos, boca, nariz, ano, etc.).
Informacin a Recoger
1. Especie, cepa, edad o peso, sexo e historial (si se conoce) del animal.
2. Descripcin de la observacin.
3. Dnde est localizada la anomala en el animal.
4. Tamao de la anomala o descripcin del signo clnico.
5. Duracin de la anomala (si se sabe).
6. Si otros animales han presentado o no signos clnicos similares.
7. Cualquier otra descripcin que pueda ayudar a una persona que no haya visto al animal.
101

Vocabulario de Uso Anatmico
102

DORSAL: superficie orientada hacia el lomo o la superficie superior de las extremidades.

VENTRAL: superficie orientada hacia el abdomen o el suelo.
CRANEAL: hacia la parte anterior del cuerpo (hacia la cabeza).
ANTERIOR: mitad delantera del cuerpo.
POSTERIOR: mitad trasera del cuerpo.
CAUDAL: hacia la parte posterior del cuerpo (hacia la cola).
ROSTRAL: hacia la cabeza o la boca.
PALMAR: superficie debajo de los extremos proximales de la mueca, orientada hacia el suelo.
PLANTAR: superficie debajo del extremo proximal del tobillo, orientada hacia el suelo.
103

PROXIMAL: cerca del eje longitudinal del cuerpo

DISTAL: alejado del eje longitudinal del cuerpo.
MEDIAL: superficie orientada hacia el plano medial del cuerpo.
LATERAL: superficie orientada al opuesto del plano medial del cuerpo.
AXILAR: zona de las axilas.
TORCICA: zona del trax
ABDOMINAL: zona del abdomen.
INGUINAL: zona de la ingle.
PERINEAL: zona entre y alrededor del ano y de los rganos genitales.
Vocabulario til
A continuacin se expone un listado con trminos que pueden ser tiles durante la realizacin de un
protocolo de necropsia:
Abdomen, abdominal: zona del abdomen. Cavidad debajo del diafragma que contiene rganos
como el estmago, instestinos, hgado, bazo, riones, etc.
Absceso: acmulo de clulas muertas, restos de tejido, clulas inflamatorias, bacterias y otros restos
tisulares (pus) que se acumulan en un rgano o tejido (son comunes bajo la piel).
Adhesin: dos tejidos u rganos quedan pegados debido a una inflamacin o trauma.
Anemia, anemic: el animal aparece plido; existeanimal appears pale; quality or quantity of blood is
poor which occurs due to hemorrhage or to such conditions as large masses, leukemias, lymphomas,
etc.
Anoftalmia: el animal carece de ojos.
Anorexia, anorxico/a: falta de apetito o aversin por la comida.
Ataxia, atxico/a: desorden, irregularidad, o perturbacin de las funciones del sistema nervioso que
afecta a los movimientos voluntarios.
Atelectasia: expansin imperfecta o colapso parcial de los pulmones, ms frecuente en los recin
nacidos, puede tambin encontrarse anotado como consolidacin.
Atrofia; atrfico/a: no desarrollado. Disminucin exagerada de tamao.
Autolisis; (auto)lisado: lisado de clulas y destruccin de tejidos despus de la muerte del animal.
104

Biliar: perteneciente o relativo a la bilis o vescula biliar.

Bulboso: que tiene forma de bulbo.
Caquexia: estado de malnutricin normalmente asociado con el desarrollo de un tumor o con una
enfermedad crnica.
Caquctico: falta de apetito observada en enfermedades crnicas.
Calcreo, calcificacin: apariencia de los depsitos de calcio (zonas normalmente blanquecinas y
endurecidas).
Calcinosis: condicin que indica la presencia de depsitos calcreos.
Clculo: acmulo de aspecto mineral (piedra) en la pelvis renal, uretra, vejiga o vescula biliar.
Caseoso: material purulento en forma slida.
Cirrosis; cirrtico: apariencia fibrosa del hgado.
Crtex; cortical: capa o zona externa de un rgano o estructura.
Cianosis, ciantico: apariencia griscea o azulada, sobre todo de las mucosas, por una deficiente
oxigenacin de la sangre.
Degeneracin, degenerativo: deficiente (disminucin) funcin o forma de un rgano.
Deshidratacin: deficiencia de lquido en clulas o espacio intersticial.
Diafragma, diafragmtico: msculo que separa las cavidades torcica y abdominal.
Edema, edematoso: fluid accumulation within tissues, esp. connective tissues
Emaciacin, emaciado/a: ausencia de grasa corporal debido a inanicin o a una enfermedad crnica.
Endometrio: capa mucosa interna del tero.
Entrico/a: perteneciente a los intestinos.
Enteritis: inflamacin de los intestinos.
Epiglotis: membrana que tapa la trquea al tragar.
Epitelio, epitelial: capa celular externa que normalmente cubre una superficie (piel, intestino, esfago,
tero, etc.).
Esplnico: perteneciente o relativo al bazo.
Esplenomegalia: aumento evidente de tamao del bazo.
105

Estroma: matriz de tejido conjuntivo de un tejido o tumor.

Exudado: fluido que se filtra de un tejido o vaso debido a una lesin, una permeabilidad alterada o una
inflamacin.
Fibrosis, fibrtico/a: tejido fibroso con apariencia rgida y firme.
Folculo, folicular: saco, bolsa o cavidad.
Friable: que se desmenuza fcilmente.
Hemangioma, hemangiomatoso: lesin de los vasos sanguneos. Tumor benigno de los vasos
sanguneos.
Hemorragia, hemorrgico: sangrado abundante e incontrolado.
Heptico: perteneciente o relativo al hgado.
Hepatitis: inflamacin del hgado.
Hepatomegalia: aumento en tamao del hgado.
Hidrocefalia: deformacin del crneo causado por una acumulacin de fluido.
Hiperemia (congestin): congestin, acumulacin de sangre.
Hiperplasia, hiperplsico: aumento del nmero de clulas de un tejido u rgano.
Hipertrofia: aumento en tamao de una clula, tejido u rgano.
Hipotaxia, hipotctico: desorientacin, movimientos dbiles o torpes.
Ictericia, ictrico: coloracin amarillenta de tejidos y/o mucosas causado por la cumulacin de
bilirrubina.
In situ: en el sitio.
In vitro: en cultivo o en el tubo de ensayo.
In vivo: en un organismo vivo.
Inflamacin: alteracin de un tejido causada por una lesin o estimulacin anormal. Aspecto irritado,
enrrojecido, engrosado del tejido normalmente con aumento local de la temperatura.
Intersticio, intersticial: espacio microscpico entre clulas de un tejido.
Queratinizacin: engrosamiento de la epidermis por produccin excesiva de queratina.
Cifosis: aspecto encorvado del animal. Causado por dolor o malestar.
106

Letrgico: resistencia del animal a moverse o responder a estmulos.

Mdula, medular: porcin interna o central de un rgano.
Meninges: membranas que rodean el encfalo y la mdula espinal.
Mesometrio: membrana de tejido conjuntivo que une los cuernos uterinos a la pared del abdomen.
Metstasis, metastsico: diseminacin de un tumor a diversos tejidos a travs de vasos sanguneos o
linfticos.
Microftalmia: ojos hipodesarrollados.
Morbilidad, mrbido: enfermo.
Moribundo: prximo a la muerte.
Necrosis, necrtico/a: muerte celular.
Neoplasia, neoplsico: crecimiento de nuevo tejido anormal.
Nefritis: inflamacin de los riones.
Ocular: perteneciente o relativo al ojo.
Pedunculado, pednculo: estructura unida a otra por un tallo o puente.
Perforate: que presenta agujeros.
Perineal: rea de la vulva/escroto y el orificio anal.
Peritoneo, peritoneal: membrana que rodea las vsceras abdominales.
Piloereccin: aspecto erizado y descuidado del pelo. Se ve en animales enfermos que no pueden
acicalarse.
Pleura, pleural: membrana que rodea los pulmones.
Polidipsia: ingesta excesiva de agua.
Plipo: estructura de forma redondeada provista de un pednculo.
Poliuria: excesiva produccin de orina.
Prepucio, prepucial: saco que contiene y proteje el pene.
Prolapso: protrusin de un tejido u rgano fuera de su ubicacin normal.
Purulento: que tiene aspecto de pus. Tpico del contenido de abscesos.
107

Ploro, pilrico: Parte del estmago junto a la unin con el duodeno.

Sebceo: se refiere normalmente a una secreccin grasa o con aspecto de tejido graso.
Septicemia, septicmico: infeccin sistmica causada por microorganismos presentes en la sangre;
infeccin que afecta a todo el organismo.
Seroso: lquido con aspecto acuoso.
Ssil: lesin o masa unida al tejido por una base grande, sin pednculo.
Subcutneo: situado debajo de la piel.
Superficial: se refiere a las estructuras de la superficie del cuerpo de un animal o a aquellas que estn
ms cerca de la superficie en comparacin con una localizacin de referencia.
Trombo: masa de fibrina en un vaso sanguneo.
Ventral: relativo a la zona del vientre de un animal. Zona opuesta a la dorsal.
Vertebra, vertebral: huesos que protegen la mdula espinal y forman la columna vertebral.
Vescula, vesicular: saco pequeo lleno con un gas o, ms comnmente, un lquido.
Vscera, visceral: cada uno de los rganos contenidos en las principales cavidades del cuerpo de los
animales.
108

Caso Prctico. Control Sanitario en Ratn

A tener en cuenta:
Realizar la necropsia siempre de forma sistemtica y siguiendo los pasos establecidos.
Marcar en la hoja de necropsia los rganos revisados.
Recoger muestras de rganos con lesiones o alteraciones macroscpicas (comprobar para
cada rgano: localizacin, forma, color y tamao).
Recoger de forma rutinaria muestras para parasitologa, microbiologa y anlisis serolgico.
Tomar muestras sin daar el tejido.
El volumen de fijador debe ser unas 10 veces el volumen de la muestra recogida. En caso de
que el rgano sea muy grande, coger una porcin representativa.
En los rganos o tejidos alterados, recoger muestras que contengan tejido alterado y no
alterado (bordes de lesiones).
Utilizar una marcacin sistemtica para las muestras (por ejemplo, n de necropsia + n de
serie).
Las muestras para microbiologa deben recogerse con materiales estriles.
DATOS NECROPSIA
Necropsia:
Edad/DOB:
Centinela:
Observaciones:
Fecha:
Lnea:
Idnetificacin:
IDENTIFICACIN DEL INVETIGADOR/PROYECTO

Nombre/Lab
Email:
Observaciones:
Sexo:
Mutacin/Tg:
Telfono
Procedimiento:
ASPECTO EXTERNO Y ALOJAMIENTO

Alojamiento
Movimiento:
Sentidos:
Aspecto general:
Orificios naturales:
Equilibrio:
109

SIGNOS CLNICOS EXTERNOS

Pelaje:
Piel:
Hocico:
Boca:
Genitales externos:
Mamas:
M. anteriores:
Observaciones:
SACRIFICIO DEL ANIMAL

Motivo:
Encontrado muerto:
Observaciones:
Ojos:
Dientes:
Cola:
M. posteriores:
Mtodo:
Tiempo en refrigeracin:
RECOGIDA DE MUESTRAS EXTERNAS

Ectoparsitos:
Celofn pelo:
Celofn anal:
Bacteriologa:
Serologa:
Micologa:
Patologa (piel):
Hora:
Endoparsitos:
Heces flotacin:
Otros:
Nasofaringe:
Pelo para micologa:
INCISIN POR LA LNEA MEDIA DEL ABDOMEN

Muestra Observaciones
Mucosa subcutnea
N.L. Superficiales
Glndulas mamarias
Glndulas prepuciales
ABRIR CAVIDAD ABDOMINAL POR PERITONEO
Pncreas
Bazo
Estmago
Duodeno/Yeyuno/leon
Ciego/Colon/Recto
N.L. Mesentricos
Vejiga
Ovarios/Testculos
tero/gl. sexuales
Rin dcho/adrenal
Rin izdo/adrenal
Otros N.L. abdominales
Hgado
Otros
110
Orejas:
Peso
Peso

ABRIR CAVIDAD TORCICA POR UNIN COSTOCONDRAL

Gl. salivares
N.L. cervicales
Traquea/tiroides
Pulmones
Corazn
Timo
N.L. mediastnicos
Otros
Peso
CRANEO
Muestra
Observaciones
Peso
Ojos
Gl. Lacrimales/Harder
Encfalo
Cerebelo
Hipfisis
Otros
RAQUIS / MEDULA ESPINAL Y HUESOS LARGOS DE LOS MIEMBROS
Raquis
Fmur
Otros
OTRAS MUESTRAS Y OBSERVACIONES
Peso
Peso
Observaciones:
111
ALOJAMIENTO DE
ANIMALES DE
LABORATORIO

Alojamiento de Animales de Laboratorio
El uso de modelos animales en la ciencia se remonta a la antigua Grecia, donde Aristteles describe
las bases de la experimentacin animal en su libro Historia Animalium. Hoy en da, su empleo en la
investigacin biomdica y en pruebas de eficacia y seguridad biolgica es una ms de las tcnicas
disponibles en muchos laboratorios.
Desde la publicacin de la primera ley que regula el uso de animales en procedimientos experimentales
(Cruelty To Animals Act, 1876) en Inglaterra, se han promulgado diversas regulaciones en muchos
paises. Uno de los principios mundialmente aceptados e incorporados a muchas de las legislaciones
existentes es el conocido como de las 3Rs de Russell & Burch (1959). Este principio apela a la
responsabilidad del investigador para buscar tcnicas alternativas que no impliquen el uso de animales
(Reemplazar); para disear los ensayos de forma que se emplee el mnimo nmero de animales sin
afectar a la validez de los resultados experimentales (Reducir); y para fomentar la utilizacin de todos
los mtodos y tecnologas disponibles para minimizar el dolor y sufrimiento que se le puedan ocasionar
a los animales utilizados, y mejorar las condiciones en las que estos se mantienen (refinar).
Por lo tanto, los animales utilizados en la investigacin biomdica o dedicados a la cra para
procedimientos experimentales, deben ser alojados de acuerdo con sus caractersticas y necesidades
especficas, en un entorno confortable y controlado que permita al animal llevar a cabo los
comportamientos que le son propios. Esto, adems de un requerimiento legal recogido en mltiples
marcos normativos, es un deber tico y un signo de buena prctica cientfica. Existen numerosos
estudios que recogen la influencia que sobre los resultados experimentales tiene la composicin
gentica (fondo gentico) de un animal. La variabilidad gentica influye en uno de los problemas ms
indeseables a los que las ciencias experimentales se enfrentan: la variabilidad dentro de un ensayo.
Debido principalmente a este efecto no deseado, se ha invertido mucho tiempo y esfuerzo en conseguir
modelos animales con un fondo gentico definido.
Al igual que el fondo gentico, las condiciones medioambientales y de alojamiento de los animales
pueden llegar a tener una influencia considerable sobre los resultados experimentales. Como se ha
dicho, adems del componente tico del buen trato y el bienestar animal, no debe perderse de vista
que el aumento en la variabilidad de un ensayo ha de ser compensado con un mayor tamao de la
muestra, o lo que es lo mismo, con el uso de un mayor nmero de animales para conseguir el mismo
objetivo. Esto va en contra del concepto de las 3Rs que debe inspirar toda la buena prctica, las
recomendaciones y la legislacin sobre el uso de animales en el mbito cientfico.
Dada la diversidad de especies animales utilizadas como modelo en la investigacin biomdica y sus
diferentes necesidades en lo referente al alojamiento, es muy difcil establecer criterios generales sobre
las caractersticas que debe tener un alojamiento adecuado. Adems, hay que tener tambin en cuenta
que las zonas de alojamiento de animales son parte del ensayo. Es ms, los animales van a estar ms
tiempo en la zona de alojamiento que en la propiamente experimental por lo que aquella tendr una
mayor influencia sobre los resultados obtenidos.
A continuacin se hace un repaso de las condiciones de alojamiento y cmo los distintos parmetros
pueden perjudicar el bienestar animal o los resultados experimentales. Asimismo, se hace un breve
resumen tanto de la legislacin aplicable como de las recomendaciones internacionales al respecto.
115

Conceptos y Definiciones
ACH
Acrnimo de la expresin inglesa air changes per hour, es decir, nmero de renovaciones de aire por
hora. Es un parmetro muy importante en las instalaciones donde se mantienen animales, ya que la
calidad ambiental es funcin directa del nmero de renovaciones de aire por hora.
Alojamiento Primario
Es el espacio en inmediato contacto con el animal; pecera, cubeta, jaula, corral, etc. Es quizs el
elemento que mayor impacto tiene sobre el bienestar del animal ya que es aqu donde los animales
pasan la mayor parte del tiempo, descansan, se alimentan, etc.
Alojamiento Secundario
Es el cubculo, habitacin, instalacin o recinto en el que se mantienen los animales en su alojamiento
primario. Las caractersticas y calidad del alojamiento secundario limitan las del alojamiento primario.
As, en muchos casos no es posible mejorar o adaptar las condiciones medioambientales en que se
mantienen los animales slo con cambios en el alojamiento primario y, por lo tanto, es necesario
modificar tambin el secundario.
Entorno Fsico
El entorno fsico es el conjunto de variables fsicas que determinan el ambiente en el que se mantiene
un animal. Las condiciones y caractersticas del alojamiento primario determinan el microambiente, y
las del secundario, el macroambiente. Ambos, determinan la calidad del entorno fsico del animal.
HEPA
HEPA es el acrnimo de un tipo especial de filtros que por su altsima eficiencia de filtrado se conocen
tambin como filtros absolutos. Los filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air) fueron creados por los
fundadores de una empresa llamada Cambridge Corporation, en Estados Unidos.
Los primeros filtros HEPA fueron diseados para el Proyecto Manhattan, nombre bajo el cual se
invent y fabric en Los lamos la primera bomba atmica. Haca falta un dispositivo eficaz para filtrar
los contaminantes radiactivos del aire que se escapaban al exterior. El desarrollo se realiz bajo un
contrato secreto entre el gobierno de los Estados Unidos y una compaa Cambridge Corporation. La
eficiencia de filtrado de estos primeros filtros era de 99.95% en partculas de 0.3 m, cercana a la de
los fabricados actualmente. En la actualidad, existen diversos grados de filtrado considerados HEPA
que van desde una eficiencia del 99.97% hasta el 99.99995% para partculas de 0.3
116
m. Una

curiosidad de los filtros HEPA es que la eficiencia de filtrado se ve incrementada para partculas
menores de 0.3 m.
Clasificacin europea de filtros:
Filtro
Eficiencia (MPPS*)
U17
> 99.999995%
U16
99.99995% - 99.999995%
U15
99.9995% - 99.99995%
H14
99.995% - 99.9995%
H13
99.95% - 99.995%
H12
99.5% - 99.95%
H11
95% - 99.5%
H10
85% - 95% (existen categoras por debajo de 85%)
*MPPS: most penetrating particule size
Humedad Relativa (HR)

La humedad ambiental, o cantidad de vapor de agua presente en el aire, se puede expresar de forma
absoluta midiendo la cantidad de vapor de agua, o de forma relativa (humedad relativa). La humedad
relativa es la relacin porcentual entre la cantidad de vapor de agua que contiene el aire y la que
necesitara contener para llegar al punto de saturacin a una temperatura dada. Por ejemplo, una
humedad relativa del 70% indica que de la totalidad de vapor de agua (el 100%) que podra contener el
aire a esta temperatura, slo tiene el 70%.
IVC
Cubeta ventilada individualmente (del ingls, Individually Ventilated Cage). Estos sistemas se conocen
tambin como racks ventilados. Son un conjunto de cubetas utilizadas, por lo general, para alojar
roedores dispuestas en un rack especial que cuenta con un sistema de impulsin y extraccin de aire y
con tomas individuales para cada cubeta. Son especialmente adecuados para la contencin de brotes
infecciosos y la reduccin de la exposicin a alrgenos procedentes de los animales.
Partes Por Milln (ppm)

Es una forma de expresar la concentracin de una sustancia. Las partes por milln de una sustancia es
una forma muy comn para expresar la cantidad de un compuesto gaseoso disuelto en el aire. En
cierto modo, es una medida anloga al porcentaje (%), de hecho, es equivalente decir 1% y 10,000
ppm. Es ms cmodo decir que la concentracin de una sustancia es 1 ppm que 0.0001%, por eso, las
ppm son muy utilizadas en situaciones en las que no se espera que una sustancia alcance una
concentracin elevada (e.g., niveles de amoniaco en aire: la concentracin mxima recomendada en el
lugar de trabajo es de 25 ppm).
117

Refinamiento
Es el intento constante de mejorar el bienestar animal y controlar la incidencia de variables en un
experimento cientfico, lo que supone una disminucin en la variabilidad de los datos experimentales
obtenidos.
Variabilidad
Las medidas de variabilidad tienen por objeto medir la magnitud de los desvos de los valores de la
variable con respecto al valor central de la distribucin. Las medidas de variabilidad son tambin
medidas de grado de representatividad de las medidas de tendencia central.
Temperatura Corporal
Los animales pueden clasificarse, desde el punto de vista de la capacidad que tienen de regular su
temperatura corporal, en 2 grandes grupos: ectotermos (poiquilotermos) y endotermos (homeotermos).
Prcticamente todos los invertebrados, peces, amfibios y reptiles son ectotermos. Por el contrario, las
aves y mamferos son homeotermos.
Los animales ectotermos se caracterizan porque dependen de la tempertatura mediambiental o de
fuentes de calor externas para regular su temperatura corporal. En general, presentan una escasa o
nula capacidad para generar calor por procesos metablicos. Los animales homeotermos poseen una
temperatura corporal constante, hasta cierto punto independiente de las condiciones ambientales. En el
caso de los mamferos, esta temperatura se situa alrededor de los 37-38 C. La termorregulacin en
homeotermos se basa en la capacidad de ajustar la produccin interna de calor por procesos de forma
que se compensan las prdidas por intercambio con el medio ambiente.
Los animales endotermos extraen la energa necesaria para su regulacin trmica de la energa
qumica contenida en el alimento que ingieren. El metabolismo de los animales ectotermos depende de
la temperatura ambiental. Por ello, los animales ectotermos pueden pasar das, semanas e incluso
meses sin ingerir alimento.
Los sistemas para la regulacin corporal de los animales son muy variados y complejos, por lo que no
debe hablarse de animales de sangre fra o de sangre caliente.
118

Alojamiento: Legislacin y Recomendaciones

El real decreto 1201/05 establece lo siguiente en cuanto a las condiciones en que deben mantenerse
los animales (texto literal extrado del artculo 4 del citado real decreto):
1.
Los centros o establecimientos previstos en este real decreto debern cumplir los siguientes
requisitos en relacin con el cuidado general y alojamiento de los animales de experimentacin:
a. Que a los animales se les proporcionen unas condiciones adecuadas de alojamiento, medio
ambiente, cierto grado de libertad de movimientos, alimentacin, bebida y cuidados que
aseguren su salud y bienestar.
b. Que se limite al mnimo imprescindible cualquier restriccin que les impida satisfacer sus
necesidades fisiolgicas y etolgicas.
c. Que las instalaciones y las condiciones ambientales en las que se cren, mantengan, custodien
o se utilicen los animales de experimentacin les garanticen un adecuado nivel de bienestar y
que ello se verifique diariamente.
d. Que se disponga de medidas, medios e instalaciones que garanticen la eliminacin, en el plazo
ms breve posible, de cualquier deficiencia que provoque alteraciones en el estado de salud o
bienestar de los animales, con las alarmas necesarias.
e. Que las normas de trabajo e instrucciones de uso de todos los elementos consten por escrito.
f. Que tengan previsto por escrito un plan de actuacin en caso de emergencia o catstrofe.
g. Que se evite el acceso al interior de las instalaciones de personal no autorizado.
h. Que el bienestar y la salud de los animales sean supervisados por el personal competente
definido en el anexo I, para prevenir el dolor, as como el sufrimiento, la angustia o el dao
duraderos.
2.
Los establecimientos o centros deben cumplir lo establecido en el anexo II, as como la normativa
vigente sobre las explotaciones ganaderas que les sea aplicable.
3.
Los centros usuarios deben disponer, adems, de instalaciones adecuadas para la realizacin de
necropsias, toma de muestras y pruebas sencillas de diagnstico.
4.
El manejo de los animales de experimentacin se realizar de acuerdo con el anexo III, sin
perjuicio de la normativa vigente en materia de conservacin de las especies naturales y de la
fauna y flora silvestres.
A continuacin se exponen los aspectos principales de la legislacin y las recomendaciones sobre el

alojamiento de los animales para usos cientficos.
Alojamiento Primario
Tanto las directrices recogidas en la legislacin, como las recomendaciones internacionales acerca del
alojamiento primario son bastante detalladas ya que, por estar en inmediato contacto con los animales,
son las caractersticas de este las que de una manera ms relevante van a influir en su bienestar.
119

Espacio
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de pequeos roedores y conejos
(en reserva y durante los procedimientos), segn lo dispuesto en el RD 1201/2005.
Especie
Superficie mnima (cm)
Altura mnima (cm)
Ratn
180
12
Rata
350
14
Hmster sirio
180
12
Cobaya
600
18
Conejo 1 kg
1,400
30
Conejo 2 kg
2,000
30
Conejo 3 kg
2,500
35
Conejo 4 kg
3,000
40
Conejo 5 kg
3,600
40
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de pequeos roedores durante la
cra, segn lo dispuesto en el RD 1201/2005.
Especie
Superficie mnima por madre (cm)
Altura mnima (cm)
Ratn
200
12
Rata
800
14
Hmster
6,500
12
Cobaya
1,200
18
1,000 por adulto
18
Cobaya en colectividades
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de conejos durante la cra, segn lo
dispuesto en el RD 1201/2005.
120
Peso coneja (kg)
Superficie mnima por

coneja (m)
Altura mnima
(cm)
Superficie del nido

(m)
0,30
30
0,1
0,35
30
0,1
0,40
35
0,12
0,45
40
0,12
0,50
40
0,14

La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de gatos durante la cra y
procedimientos, segn lo dispuesto en el RD 1201/2005.
Peso
(kg)
Superficie por
gato (m)
Altura mnima
(cm)

gata (jaula, m)

gata (cercado, m)
0,5 1
0,2
50
13
0,3
50
0,58
34
0,4
50
0,58
45
0,6
50
0,58
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de perros en jaulas durante la
realizacin de procedimientos, segn lo dispuesto en el RD 1201/2005.
Altura hasta la cruz (cm)
Superficie por perro (m)
Altura mnima (cm)
30
0.75
60
70
1.00
60
75
1.75
140
Los perros slo deben permanecer en las jaulas el tiempo estrictamente necesario para los propsitos
del procedimiento. Se aconseja soltar a los perros enjaulados para que hagan ejercicio una vez al da,
siempre que esto no sea incompatible con el objetivo del procedimiento. Se recomienda limitar la
reclusin de los perros sin facilitarles ejercicio diario. Interesa que las zonas para el ejercicio sean
bastante grandes para que el perro tenga libertad de movimientos. No se aconseja usar suelos de
rejilla en las jaulas de perros, a menos que as lo requiera el procedimiento. Teniendo en cuenta las
grandes diferencias en la altura y la poca relacin entre altura y peso en diversas razas de perros, la
altura de la jaula debera basarse en la altura del cuerpo a nivel de la cruz del animal. Como regla
general, se aconseja que la altura mnima de la jaula sea doble respecto a la altura de la cruz.
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de perros en cercados durante la
realizacin de procedimientos, segn lo dispuesto en el real decreto 1201/2005.
Peso (kg)

perro (m)
Superficie mnima adyacente para ejercicio por perro

Hasta 3 perros por m
Ms de 3 perros por m
<6
0.5
0.5 (1.0)
0.5 (1.0)
6-10
0.7
1.4 (2.1)
1.2 (1.9)
10-20
1.2
1.6 (2.8)
1.4 (2.6)
20-30
1.7
1.9 (3.6)
1.6 (3.3)
> 30
2.0
2.0 (4.0)
1.8 (3.8)
121

Las cifras entre parntesis indican la superficie total por perro, es decir, la superficie del suelo del
cercado ms la superficie adyacente para ejercicio. Los perros alojados permanentemente al aire libre
deberan tener acceso a un lugar cubierto para protegerse de la intemperie. Cuando los perros estn
alojados sobre suelo de rejilla, se aconseja que dispongan de una superficie lisa para dormir. No se
recomienda utilizar suelos de rejilla a menos que el procedimiento as lo requiera. Las divisiones entre
cercados impedirn a los perros herirse mutuamente.
Debido a la gran diversidad de tamaos y caractersticas de los primates, es especialmente importante
adaptar la forma y los accesorios internos, as como las dimensiones de sus jaulas a sus necesidades
particulares. El volumen total de la jaula es tan importante para los primates como la superficie del
suelo. Como principio general, la altura debera ser la mayor dimensin de la jaula, al menos para los
antropomorfos y otros simios. Las jaulas tendrn altura suficiente al menos para que los animales
puedan ponerse de pie. Es recomendable que la altura mnima de la jaula para los animales que se
desplacen suspendidos sea suficiente para que puedan balancearse extendidos totalmente sin que
lleguen a tocar el suelo de la jaula con los pies. En su caso, se dispondrn las perchas de modo que
los primates puedan utilizar la parte superior de la jaula.
Teniendo en cuenta estas observaciones, la tabla siguiente constituye una orientacin general para el
enjaulado de los grupos de especies ms utilizadas (superfamilias Ceboidea y Cercopitheoidea).
Peso (kg)
Superficie mnima para 1 o 2 animales (m)
Altura mnima (cm)
<1
0.25
60
13
0.35
75
35
0.50
80
57
0.70
85
79
0.90
90
9 15
1.10
125
15 25
1.50
125
Pueden alojarse en una misma jaula 2 primates compatibles. Cuando no se puedan poner en parejas,
es conveniente colocar las jaulas de forma que puedan verse mutuamente, pero tambin que exista la
posibilidad de evitarlo cuando sea necesario.
La tabla siguiente muestra las lneas directrices para el alojamiento de cerdos en jaulas durante la
realizacin de procedimientos o en reserva, segn lo dispuesto en el RD 1201/2005.
122
Peso (kg)
Superficie mnima por cerdo (m)
Altura mnima (cm)
5 - 15
0,35
50
15 - 25
0,55
60
25 - 40
0,80
80

Esta tabla se aplicara tambin a los lechones. No se recomienda mantener a los cerdos enjaulados a
menos que sea indispensable para el objetivo del procedimiento y en tal caso slo durante el mnimo
tiempo.
Alojamiento Secundario
El RD 1201/2005 establece en su anexo II toda una serie de directrices relativas al alojamiento
secundario de los animales y sus instalaciones.
Ventilacin
Los locales de alojamiento tendrn un sistema adecuado de ventilacin que satisfaga las exigencias de
las especies alojadas. El objeto del sistema de ventilacin es suministrar aire limpio y mantener bajo el
nivel de olores, gases nocivos, polvo y agentes infecciosos de cualquier tipo. Tambin eliminar el
exceso de calor y de humedad.
En condiciones normales el rgimen de ventilacin debera ser de 15 a 20 renovaciones de aire por
hora. El sistema de ventilacin se disear de forma que se eviten las corrientes de aire.
Temperatura
La tabla que a continuacin se muestra, ilustra los mrgenes de temperatura recomendados para las
especies animales ms comnmente utilizadas.
Especie
Zona ptima (C)
Primates del Nuevo Mundo no humanos
20-28
Ratn
20-24
Rata
20-24
Hmster sirio
20-24
Jerbo
20-24
Cobaya
20-24
Primates del Viejo Mundo no humanos
20-24
Codorniz
20-24
Conejo
15-21
Gato
15-21
Perro
15-21
Hurn
15-21
Aves de corral
15-21
Paloma
15-21
Porcina
10-24
Caprina
10-24
Ovina
10-24
Bovina
10-24
Caballar
10-24
123

Las cifras se refieren slo a animales adultos normales. Se ajustar la temperatura de los locales de
acuerdo con los cambios en la regulacin trmica de los animales, que puedan deberse a condiciones
fisiolgicas especiales o a los efectos del procedimiento. Se dispondr de un sistema de climatizacin
que sea capaz tanto de calentar como de enfriar el aire que suministra.
En los establecimientos usuarios es necesario el control preciso de la temperatura de los locales de
alojamiento, ya que la temperatura del ambiente es un factor fsico que afecta profundamente al
metabolismo de todos los animales.
Humedad Relativa
La humedad relativa ptima en las zonas de alojamiento para la mayora de las especies es de 55%
+/ 10%. Se deben evitar los ndices de humedad relativa inferiores al 40% y superiores al 70%
durante periodos prolongados.
Iluminacin y Ciclos de Luz

En los locales que carezcan de ventanas, es necesario disponer de un sistema de iluminacin
controlada tanto para satisfacer las necesidades biolgicas de los animales como para proporcionar un
ambiente de trabajo satisfactorio. Tambin es necesario controlar la intensidad y el ciclo de luzoscuridad.
Diseo de la Instalacin
Las instalaciones se construirn de forma que suministren un ambiente adecuado para las especies
alojadas en ellas y se disearn para evitar el acceso de personas no autorizadas. Las instalaciones
que formen parte de un edificio mayor se protegern mediante normas de construccin y disposiciones
que limiten el nmero de accesos e impidan la circulacin de personas no autorizadas.
Se recomienda la existencia de un programa de mantenimiento de las instalaciones para evitar
cualquier fallo de su equipamiento.
Zonas de Alojamiento
Se tomarn todas las medidas necesarias para garantizar la limpieza regular y eficaz de los locales, as
como el mantenimiento de un nivel higinico satisfactorio. Los techos y paredes sern resistentes, con
superficies lisas, impermeables y fcilmente lavables. Se prestar especial atencin a las juntas con
puertas, conductos, tubos y cables. Las puertas y ventanas, en su caso, estarn construidas o
protegidas de forma que eviten el acceso de animales ajenos al establecimiento. Los suelos sern
lisos, impermeables, no deslizantes y fcilmente lavables y soportarn el peso de las estanteras u
otros materiales pesados. En el caso de que haya sumideros, estarn cubiertos adecuadamente y
dispondrn de una barrera que evite el acceso de animales ajenos al centro.
Las zonas donde los animales se mueven libremente tendrn paredes y suelos con un revestimiento
especialmente resistente para soportar el gran desgaste causado por stos y las operaciones de
124

limpieza. Dicho material no ser perjudicial para la salud de los animales ni que pueda causar heridas a
los animales. En esas zonas son aconsejables los sumideros. Los equipos y accesorios debern
protegerse especialmente para evitar que los animales los estropeen o se hieran con ellos.
Los locales destinados al alojamiento de animales de experimentacin de granja (vacuno, ovino,
caprino, porcino, equino, aves de corral, etc.) cumplirn la normativa vigente referente a los animales
de granja.
No se alojarn juntas especies incompatibles. La incompatibilidad puede deber a las especies animales
en cuestin (depredador y presa) o a la diferencia en requerimientos medioambientales (e.g.,
temperaturas muy diferentes). Las zonas de alojamiento podrn disponer de instalaciones para
procedimientos o manipulaciones menores, en su caso.
Laboratorios y Zonas Especiales

Todos los establecimientos dispondrn, al menos, de instalaciones para realizar pruebas sencillas de
diagnstico, necropsias y/o recogida de muestras para investigaciones ms amplias. Los
establecimientos de cra o suministradores dispondrn de instalaciones adecuadas para preparar la
expedicin de animales. Debern tomarse medidas a la recepcin de los animales para el
establecimiento de cuarentenas.
Se dispondr de locales de experimentacin con fines generales y especiales, siempre que no sea
conveniente realizar los procedimientos u observaciones en su alojamiento. Se dispondr de locales
para alojar por separado a los animales enfermos o heridos.
Se dispondr, en su caso, de una o ms salas convenientemente equipadas para la realizacin de
experimentos quirrgicos en condiciones aspticas. Tambin es conveniente disponer de instalaciones
para el perodo posoperatorio cuando sea necesario.
Zonas Accesorias y de Servicio

Los locales para el almacenamiento de los alimentos y/o camas debern ser frescos, secos y a prueba
de parsitos e insectos. Otros materiales que pudieran estar contaminados o presentar peligro se
almacenarn en un local diferente.
Se dispondr de locales para almacenamiento de jaulas, instrumentos y cualquier otro material limpio.
Los locales de limpieza y lavado sern lo bastante amplios para alojar las instalaciones necesarias para
descontaminar y limpiar el material usado. El proceso de limpieza debera organizarse de forma que
quede separado el circuito de material limpio del de material sucio, para evitar la contaminacin del
material recin limpiado. Las paredes y los suelos deberan estar recubiertos con un material resistente
adecuado y el sistema de ventilacin debera tener suficiente capacidad para eliminar el exceso de
calor y de humedad.
Se adoptarn disposiciones para el almacenamiento y la eliminacin de los cadveres y residuos de los
animales en condiciones higinicas satisfactorias. Se tomarn medidas para la eliminacin de dichos
125

restos con garantas de seguridad y atendiendo a la normativa vigente. Se adoptarn precauciones

especiales con los residuos muy txicos o radiactivos.
El proyecto y construccin de las zonas de circulacin se adecuar a las normas establecidas para los
locales de alojamiento. Se aconseja que los pasillos sean bastante anchos para permitir la fcil
circulacin del material mvil.
126

Alojamiento Adecuado
La provisin de un alojamiento y un entorno adecuados para los animales no slo es, como hemos
visto, un requerimiento legal, sino que es tambin un deber moral y presenta, adems, una
componente prctica, como es el evitar o minimizar la interferencia que las condiciones del alojamiento
tienen sobre la calidad de los datos experimentales.
Tanto el alojamiento primario como el secundario deben ser diseados atendiendo a los ms altos
estndares de calidad y, por supuesto, de bienestar animal. Asimismo, su diseo debe garantizar la
seguridad del personal que trabaja con los animales. Son numerosos los factores que han de tenerse
en cuenta a la hora de planear el entorno fsico en el que se van a mantener los animales:
- La especie, cepa, raza, edad, sexo, y cualquier otra caracterstica relevante del grupo de animales
que se van a utilizar.
- La posibilidad de mantener los animales alojados en grupos y la capacidad o conveniencia de
interactuar a travs de la vista, olfato, o contacto fsico.
- Los objetivos del proyecto cientfico y los procedimientos experimentales que se van a llevar a cabo,
as como su severidad.
- Las posibilidades y limitaciones de la instalacin.
- Las necesidades y requerimientos de enriquecimiento ambiental para los animales. Esto es sobre
todo importante en animales grandes que necesiten zonas de ejercicio y/o juego.
- La utilizacin de productos, materiales o equipos que representen un peligro qumico, fsico o
biolgico, real o potencial, tanto para los animales como para quienes los manipulan.
Alojamiento de Peces
Alrededor de un 5% de los vertebrados utilizados en experimentacin son peces. Los estudios se
desarrollan habitualmente en: guppy (Poecilia reticulata), pez cebra (Danio rerio), truchas y miembros
de la familia de las carpas.
Los peces se utilizan fundamentalmente en estudios medioambientales, toxicolgicos (acumulacin y
metabolismo de residuos y contaminantes), control de calidad del agua, y estudios de oftalmologa al
ser modelo de regeneracin del nervio ptico.
Sin duda, uno de los peces ms utilizados en investigacin cientfica hoy en da es el pez cebra. La
utilizacin de este modelo ha crecido mucho en los ltimos aos por ser muy apropiado para ciertos
estudios relacionados con la salud humana, la alimentacin y la biotecnologa. Otra gran ventaja es su
pequeo tamao (4-5 cm), su facilidad de reproduccin, y los cuidados, relativamente sencillos, que
necesita para ser mantenido en cautividad.
127

Caractersticas Generales de los Peces

El entorno natural del pez cebra son lagos, charcas, zonas anegadas, o corrientes lentas de agua en
zonas de India y Pakistn. Aunque las condiciones ptimas de alojamiento para el pez cebra son an
objeto de intensa investigacin, se considera que el hecho de que un ambiente sea adecuado para
estos animales puede deducirse a partir de parmetros reproductivos y de desarrollo. En general, un
ambiente ptimo debera rendir una supervivencia de embriones de entre el 80% y el 95%, que,
adems, deberan alcanzar un tamao de 1 a 1.5 cm a las 48 horas post-fertilizacin.
El pez cebra es un animal muy social y gregario. En condiciones normales forman bancos en los que
no parece tener mucha importancia la composicin del grupo, pudiendo englobar incluso individuos de
otras especies. De hecho, las interacciones entre individuos ocurren durante la formacin de bancos y
el desove.
El comportamiento agresivo entre individuos se encuentra limitado al periodo de puesta de huevos,

aproximadamente una hora despus de que las luces del acuario se enciendan. Es este un
comportamiento agresivo territorial que no suele causar daos a otros peces, aunque s puede
observarse a unos peces persiguiendo e incluso mordiendo a otros. Estas demostraciones de
agresividad por machos territoriales son, en general, muy breves y sirven para alejar a otros individuos
del lugar de desove.
128

Iluminacin y Fotoperiodo
Un fotoperiodo de 14 horas de luz y 10 de oscuridad parece ser el ms adecuado para el
mantenimiento del pez cebra. Se ha observado que si las larvas se mantienen en condiciones de luz
constante, se producen serias alteraciones de la visin y el comportamiento, aunque estas no se
corresponden con ninguna alteracin anatmica. Ms an, los individuos que se cran en condiciones
anormales de iluminacin, parecen recuperarse sin problemas al ser mantenidos en un ambiente con
un fotoperiodo adecuado. Si, por el contrario, se mantiene el acuario en condiciones de oscuridad
constante, se produce un retraso en el desarrollo de los embriones, retrasndose su eclosin hasta 7
das o ms post-fertilizacin.
Aunque el pez cebra parece contar con los mecanismos necesarios para una visin en color, no se han
descrito requerimientos especficos en cuanto a la composicin espectral de la luz para su alojamiento.
A menos que se descubra algn requerimiento especfico, la iluminacin de un fluorescente estndar
es adecuada para estos animales. Asimismo, se debera considerar la posibilidad de eliminar o reducir
la luz de longitudes de onda que favorezcan el crecimiento de algas, ya que esto contribuye al
mantenimiento de una higiene ptima del acuario.
En cuanto a la intensidad de la luz, una iluminacin de entre 50 y 325 lux a nivel de la superficie del
agua, se ha descrito como adecuada. En muchos acuarios se opta por mantener una intensidad de luz
baja que adems contribuye a limitar el crecimiento de algas.
Temperatura
El pez cebra es un animal euritrmico, es decir, que tolera un rango bastante amplio de temperaturas.
En su ambiente natural, el pez cebra soporta temperaturas tan bajas como 6C en invierno, o por
encima de 38C en verano. Esto se ha confirmado con estudios de laboratorio en los que lneas
salvajes de pez cebra se han mantenido desde 6.2C a 41.7C. No obstante, es muy distinto el rango
de temperatura en que un animal puede sobrevivir, de la temperatura ptima para su mantenimiento, o
incluso de la temperatura que el animal prefiere. El mantenimiento de peces cebra en condiciones
deficientes tiene un coste metablico para el animal que afectar a su reproduccin, desarrollo y
bienestar. En cuanto a la temperatura ptima para mantener las colonias de cra de pez cebra, el
consenso parece fijar esta en los 28.5C. No obstante, el mantener una colonia de peces cebra durante
todo el ao a esta temperatura comprometer su bienestar. A esta temperatura, se provoca el desove
continuo, lo cual es una situacin antinatural para esta especie.
Calidad del Agua

La calidad del agua es el factor ms importante tanto para la salud como para el bienestar de los
peces. Una mala calidad del agua puede provocar enfermedades, estrs, y puede afectar a la
reproduccin. No existe an consenso total en cuanto a los parmetros que determinan la calidad del
agua. An as, los niveles de contaminantes deben ser controlados. Esto se consigue principalmente
con la renovacin del agua de los tanques, la eliminacin de restos de comida, la limpieza de tanques y
sistemas, y asegurando que los biofiltros funcionan a la perfeccin. Aunque algunos estudios
demuestran que el pez cebra puede habitar aguas con un pH entre 5.9 y 8.1, la mayora de los
129

acuarios se mantienen dentro de un rango de pH entre 7.0 y 8.0. En general, no debe permitirse que el
pH del agua baje de 6.0 o sea mayor de 8.0, siendo quizs el rango ptimo de 6.8 a 7.5. En cualquier
caso, el pH debe ser comprobado a menudo.
Si la calidad de agua no es ptima para los peces, stos son ms suceptibles a padecer enfermedades
infecciosas. Las mediciones ms importantes de la calidad de agua son las concentraciones de
amonaco, nitritos, nitratos y pH. La concentracin de oxgeno disuelto y la temperatura tambin son
importantes, pero son problemas menos frecuentes. El amoniaco en el agua existe de 2 formas,
+
ionizado (NH4 ) y no ionizado (NH3). El amonaco no ionizado es mucho ms importante que la

concentracin total de amonaco porque resulta txico para los peces y afecta directamente a las
branquias
provoca hiperplasia y fusin de branquias , provocando una respiracin dificultosa. Los
peces que sufren una intoxicacin por amonaco presentan signos de hipoxia. Los nitritos tambin son
muy txicos para todos los animales incluyendo los peces, concentraciones tan bajas como 1 ppm
pueden resultar mortales para el animal.
El mecanismo de toxicidad del nitrito es semejante al del monxido de carbono. El nitrito se fija a la
hemoglobina y una vez unido, le impide transportar oxgeno. Por tanto, los peces mueren por asfixia.
Los nitratos no son tan txicos para los peces, y se controlan fcilmente cambiando el 25% del agua
del acuario cada 3 o 4 semanas. El pH por lo general no provoca una toxicidad directa, en un pH
relativamente neutro pueden vivir la mayora de los peces. El pH est directamente afectado por el
+
proceso de nitrificacin, en el que se liberan 4 iones (H ) que irn acidificando el sistema, para evitarlo
se puede tamponar el sistema incorporando en el acuario, conchas de ostra o dolomita dentro de la
grava. Debe recordarse que el amonaco es menos txico a pH bajo, siendo interesante mantener los
acuarios con un pH que flucte entre 6.5 y 7.
En los acuarios recin montados es frecuente que aparezca, si no se tiene experiencia, el sndrome del
tanque nuevo los peces mueren entre las 2-6 semanas despus de que se instale el acuario al no
haberse establecido el proceso de nitrificacin. La nitrificacin es un proceso natural que ocurre de
forma constante en el suelo y en el agua como parte principal del ciclo del nitrgeno. En este proceso
el amonaco es convertido en nitratos en 2 pasos. Las especies bacterianas de nitrosomas oxidan el
+
amonaco (como amonio: NH4 ) a nitrito (NO2 ), y las especies bacterianas nitrobacter oxidan los nitritos
-
a nitratos (NO3 ). El amonaco constituye alrededor del 80% de los productos de excrecin
nitrogenados del pez. La nitrificacin es el mtodo ms eficaz para extraer el amonaco
que es
sumamente txico del medio ambiente del pez. En un acuario establecido, las bacterias nitrificantes
pueden oxidar el amonaco a travs de nitritos a nitratos de una forma tan efectiva que aunque la
poblacin sea elevada, los niveles de amonaco y nitritos permanecern bajas. Sin embargo, las
concentraciones de nitratos se elevarn por no existir plantas suficientes para utilizar el nitrato
producido en el sistema. Este problema no es grave, porque el nitrato no es txico para los peces a
concentraciones por debajo de 4,000 ppm.
El sndrome del tanque nuevo se presenta cuando se colocan muchos peces en un contenedor no
acondicionado, en el que no hay suficientes bacterias nitrificantes para oxidar el amonaco a nitrato tan
rpido como lo excretan los peces, cuando esto sucede, las concentraciones de amonaco y nitritos se
incrementan y pueden matar a los peces. La prevencin del sndrome del tanque nuevo puede lograrse
130

introduciendo peces lentamente, aadiendo un puado de grava de un acuario acondicionado, o

adicionando sales de amonaco y nitrito al nuevo acuario, para estimular el crecimiento de las bacterias
nitrificantes antes de introducir a los peces.
Los peces requieren iones tales como el calcio, magnesio, hierro y selenio para mantener un buen
estado de salud. Estos iones pueden aportarse en la dieta o en el entorno (agua). En cuanto al oxgeno
disuelto, se estima adecuada una concentracin de 6.0 ppm (mg/L). Existen, no obstante, una serie de
iones disueltos en el agua que pueden ser perjudiciales para los animales. La concentracin en el
medio de estos iones (sobre todo amonio y nitritos) debe controlarse y, en caso de aumentar,
corregirse. Los nitritos son absorbidos por las branquias y pueden afectar a la capacidad que el pez
tiene para absorber oxgeno.
Es importante conocer tanto el origen como las propiedades del agua utilizada para mantener los
acuarios. Si se utiliza agua de abastecimiento pblico (agua del grifo), sus propiedades pueden variar
mucho de una localidad a otra (sobre todo en el contenido de metales e iones). En todo caso, el cloro
del agua debe eliminarse antes de su uso por alguno de los medios disponibles. Asimismo, las tuberas
y conducciones de los sistemas utilizados en el acuario no deben liberar ningn producto que pueda
ser potencialmente txico para los peces. Sobre todo, deben evitarse tanto las tuberas de cobre como
las galvanizadas.
Ruido y Vibraciones
El mantenimiento de peces cebra en los modernos acuarios parece sugerir que estos toleran bien los
ruidos y vibraciones generados por los sistemas de saneamiento y circulacin de agua (bombas,
tuberas, etc.). Sin embargo, suelen reaccionar de manera brusca a ruidos o vibraciones inesperadas o
extraas. Debe, por lo tanto, evitarse este tipo de ruidos fuertes e inesperados. En un diseo ideal, se
debera evitar que el equipamiento que genera ruidos o vibraciones se encuentre en la misma sala en
que los peces estn alojados. La reproduccin del pez cebra se ve afectada en entornos ruidosos o en
los que hay mucha actividad.
Material y Diseo de los Tanques

Los tanques en que se mantienen los peces cebra suelen estar construidos de materiales plsticos,
como por ejemplo el policarbonato. Es importante asegurarse de que todos los elementos utilizados en
el sistema (tanques, tuberas, bombas, conexiones, etc.) estn hechos con materiales que no liberan
ningn compuesto txico al agua.
El uso de materiales transparentes es muy recomendable, ya que permite la observacin de los
animales sin necesidad de manipular los tanques. Sin embargo, puede tener el inconveniente de que la
actividad fuera del acuario moleste a los peces. Por otro lado, el uso de materiales opacos o poco
transparentes puede presentar problemas higinicos ya que es ms difcil valorar el estado del acuario.
Se estima que un acuario de color azul traslcido es probablemente el ms indicado para estos
animales. Se ha visto tambin que los animales prefieren que el tanque est colocado sobre una
superficie oscura.
131

Los peces cebra pueden saltar fuera del acuario, por lo que es recommendable que todos los tanques
tenga algn tipo de cubierta. Se ha visto que si se dispone de una tapa traslcida, los animales
parecen menos afectados por la actividad que hay a su alrededor. Por otro lado, los desages de los
tanques deben estar cubiertos para evitar que los peces puedan escapar.
La pecera debe, en cualquier caso, tener el tamao apropiado para el nmero, clase y tamao del pez.
Los peces agresivos producen problemas sociales y tensin, que se traduce en enfermedades. La
pecera debe llevar filtros, un aireador y un calentador (cuando se mantienen peces tropicales). Los
filtros pueden ser: los de grava son los que se conservan con mayor facilidad, los ms eficientes y los
menos susceptibles a fallas mecnicas, su falta puede conducir a problemas en la calidad del agua; los
de caja externos contienen carbn activado, son adecuados para eliminar materiales y color del agua,
ayudan en la aireacin, pero tienen muy poca actividad de aireacin biolgica, deben ser adicionales a
un filtro de grava; finalmente, los de caja esquineros son econmicos pero insuficientes, a menos que
se les limpie con regularidad no filtran en forma adecuada. El aireador garantiza la concentracin de
oxgeno en la superficie al circular las burbujas de aire y el agua desde el fondo hacia la superficie. Sin
aireador el acuario aguantar 1 pulgada de longitud corporal del pez por cada 7 pulgadas cuadradas de
agua. El calentador evita las fluctuaciones de temperatura que pueden causar tensin en los peces y
predisponerlos a enfermedades, sobretodo cuando el acuario es pequeo. Adems en los acuarios se
pueden introducir ornamentos y raspadores que permitan que los peces se escondan, reduciendo al
mnimo la tensin de la cautividad y existencia en la jaula de vidrio. Estos pueden ser: maderas,
piedras, plantas, grava mezclada con conchas de ostras o dolomitas para amortiguar el pH. Todos los
elementos que se introduzcan deben desinfectarse confirmndose que no son portadores de
patgenos.
Cuarentena de Peces
Es importante disponer de una instalacin de cuarentena para recibir peces de otros laboratorios y
evitar o reducir la transmisin de enfermedades e infecciones. Las recomendaciones en cuanto a la
duracin de la cuarentena son variables; varan entre 2 semanas y un mes. En cualquier caso, el
periodo de cuarentena depender del origen de los animales, el sistema de alojamiento, etc. En
ocasiones, en lugar de introducir animales adultos, incluso tras un periodo de cuarentena, se
introducen los huevos tratados, lo cual representa un riesgo menor. Los embriones suelen sanitizarse
con una solucin de hipoclorito sdico (35 mg/L) durante 5 minutos.
Alojamiento de Anfibios
Los anfibios fueron los primeros vertebrados en adaptarse a la vida fuera del agua, al menos
parcialmente. Se estima que surgieron hace unos 360 millones de aos. Con el transcurso del tiempo,
a partir de los anfibios se desarrollaron los reptiles que a su vez dieron lugar a los mamferos y las
aves. A diferencia de otros vertebrados, los anfibios se distinguen por sufrir una transformacin total
durante su desarrollo. A este cambio se le denomina metamorfosis.
Se estima que existen hoy en da unas 4,300 especies diferentes de anfibios, las cuales se encuentran
clasificadas en 3 grupos:
132

- Los anfibios similares a las lombrices o serpientes, son los anfibios sin miembros o ceclidos. Estos
se agrupan en el Orden Gymnophiona o Apoda.
- Las salamandras y tritones, que pertenecen al orden Caudata.
- Las ranas y sapos, que pertenecen al orden Anura.
Caractersticas Generales de los Anfibios

Muchas especies de anfibio se encuentran protegidas por el convenio CITES. En la actualidad, el sapo
de garras africano (Xenopus laevis) y el ajolote (Ambystoma mexicanum) son los ms utilizados en
estudios de desarrollo, embriognesis y organognesis; estudios de toxicologa y obtencin de nuevos
frmacos; estudios electrofisiolgicos, por la fcil manipulacin de los oocitos.
Aunque son varios los anfibios que se han utilizado en investigacin biomdica, la especie ms comn
en un animalario es el sapo (o rana) de garras africano Xenopus laevis. En las ltimas dcadas se ha
sustituido en parte el uso de esta rana por otra estrechamente relacionada con ella: Xenopus tropicalis.
Son 2 las caractersticas que hacen de Xenopus tropicalis un modelo ms adecuado para ciertas reas
de investigacin:
- Xenopus tropicalis presenta un ciclo vital ms corto que Xenopus laevis (5 meses).
- Es una especie diploide (en lugar de tetraploide).
Ser difcil, sin embargo, que el uso de Xenopus tropicalis reemplace por completo al de Xenopus
laevis por otras razones prcticas (e.g., que sus embriones y huevos son ms pequeos y se liberan en
grupos en lugar de individualmente). Las condiciones, el hbitat natural, y las caractersticas
fisiolgicas de estas 2 especies difieren ligeramente, por lo que es de esperar que sus condiciones
ptimas de alojamiento sean tambin algo distintas.
Xenopus laevis es una de las 17 especies del gnero Xenopus que se incluye dentro de la familia
Pipidae. Se le encuentra por lo general en aguas estancadas de charcas, lagunas, estanques o
acequias, normalmente con un sustrato de fango bastante profundo. Estas ranas, en su hbitat natural
son de costumbres nocturnas. En ocasiones, pasan las temporadas de sequa enterradas en el fango
en un estado de letargo, lo que se conoce como estivacin. Xenopus laevis es un animal
completamente acutico y nunca deja el agua. Si bien, se ha descrito que en ocasiones pueden migrar
a zonas cercanas. Esta migracin est limitada por la distancia a recorrer ya que fuera del agua son
muy susceptibles a la deshidratacin.
Por extrao que pueda parecer ya que carece de rganos externos visibles , el sapo Xenopus laevis
tiene un sentido del odo muy desarrollado, lo que le facilita la comunicacin acstica bajo el agua. Se
comunican con una especie de chasquidos que emiten. Los orificios nasales estn ubicados en la parte
ms alta de la cabeza, en el hocico. Presentan 2 cavidades nasales (la rostral y la vomeronasal) que
les permiten olfatear tanto en el aire como dentro del agua. Estos animales se guan por el olfato para
localizar comida, no tienen un sentido del gusto muy desarrollado y presentan la gran ventaja para su
cra en cautividad de que, a diferencia de otras ranas, comen alimento inerte como carne o piensos.
133

La respiracin cutnea tpica de anfibios no est muy bien desarrollada en el gnero Xenopus, por lo
que cuando se encuentran en la superficie o fuera del agua utilizan para la respiracin sus pulmones
que estn bastante desarrollados. Estos animales moriran si se les impidiese acceder a la superficie
del agua, ya que su respiracin cutnea es insuficiente.
Estas ranas presentan un sistema sensorial parecido al sistema lateral de los peces compuesto por
unos 180 rganos individuales que forman crculos alrededor del dorso, la cabeza y los ojos. Es este un
sistema muy sensible que les sirve para percibir movimientos y vibraciones en el agua. Este sistema es
visible como una lnea simtrica de puntos grisceos o blanquecinos de unos 2 o 3 mm de longitud.
La superficie dorsal de Xenopus laevis es de un color verde oliva con manchas ms oscuras, siendo su
parte ventral blanquecina o amarillenta. La piel presenta cromatforos
clulas que contienen
pigmentos que le sirven como camuflaje y que controlan mediante hormonas. Su piel es hmeda y
resbaladiza, con una secreccin mucosa que le protege de daos mecnicos y funciona tambin como
una barrera para patgenos. Presentan tambin unas glndulas serosas que secretan una serie de
compuestos que les protegen de depredadores y tienen propiedades antibacterianas y antifngicas.
Las hembras son ms grandes que los machos, alcanzando un tamao de unos 15 cm desde el hocico
al extremo del cuerpo (cloaca). Los machos alcanzan unos 8-10 cm. Los machos alcanzan la madurez
sexual entre los 10 y 12 meses de edad, mientras que las hembras, tambin dependiendo de las
condiciones ambientales, este proceso puede durar 2 aos. En condiciones ptimas de laboratorio, los
machos suelen alcanzar la madurez sexual a los 8 meses y las hembras a los 12.
En condiciones naturales, la reproduccin de Xenopus laevis es estacional; desde Septiembre a Marzo.
Una hembra grvida puede contener entre 1,000 y 27,000 huevos. El tamao de la puesta guarda
relacin con el tamao de la hembra. En su ambiente natural y en condiciones favorables, las hembras
realizan varias puestas durante la poca de reproduccin.
Los renacuajos de Xenopus son tpicamente herbvoros y se alimentan de trozos muy pequeos de
vegetales suspendidos en el agua. Una vez que se ha producido la metamorfosis y su apariencia es la
de una rana juvenil (dependiendo de las condiciones ambientales, este proceso puede durar entre 2 y 3
meses), cambian a una dieta estrictamente carnvora. El comportamiento normal de los individuos
adultos consiste en permanecer inmviles la mayor parte del tiempo, con las patas extendidas. Algunos
estudios de poblaciones de Xenopus en su hbitat natural sugieren un comportamiento territorial.
En cautividad, estas ranas pueden vivir entre 10 y 15 aos. Aunque en las condiciones ptimas en las
que se mantienen en un animalario, se ha publicado que pueden llegar a los 25 aos o ms. No existen
datos concluyentes sobre la longevidad de estos animales en su entorno natural en Sudfrica, pero se
ha reportado que un individuo vivi al menos 18 aos en libertad en una charca del Reino Unido.
Iluminacin y Fotoperiodo
Xenopus laevis puede desarrollarse y reproducirse dentro de un rango bastante amplio de condiciones
de iluminacin. Sin embargo, si estos animales se someten a condiciones de iluminacin continua,
oscuridad o un fotoperiodo inadecuado, pueden mostrar sntomas graves e incluso pueden llegar a
134

morir. Un fotoperiodo de 14 horas de luz y 10 de oscuridad parece ser el ms adecuado para el

mantenimiento de estos animales, si bien algunos laboratorios optan por un ciclo de 12 horas de luz y
12 de oscuridad. Se ha comprobado que ambos escenarios son igualmente adecuados para la
reproduccin de estas ranas.
El uso de un sistema gradual de apagado de las luces es muy recommendable ya que es ms parecido
a lo que sucede en la naturaleza al atardecer. Adems, permite a los animales adaptarse al cambio e
iluminacin.
En cuanto al espectro de la luz proporcionada, se ha visto que si se somete a los animales a unos
niveles de luz similares a la luz solar, se obtienen unos niveles de vitamina D y un balance
calico/fsforo idneos. Adems, se mejora la calidad de los huevos obtenidos. Para animales que se
van a mantener en el animalario durante 6 meses o ms, debera considerarse la provisin de luz
compuesta por longitudes de oda equivalents a la solar, incluido la ultravioleta.
Aunque obviamente la iluminacin en un animalario debe ser adecuada para llevar a cabo las labors de
cuidado, limpieza y observacin de los animales, no debera someterse a las ranas a un ambiente muy
luminoso. Las condiciones estndar de iluminacin en muchos animalarios causan aversin en estos
animales. Es recomendable que las ranas tengan la posibilidad de acceder a una parte del tanque en la
que puedan evitar su exposicin a la luz para evitar una situacin de estrs.
La especie Xenopus laevis en su hbitat natural es de costumbres nocturnas, aunque no son muchas
las instalaciones de laboratorio que tienen en cuenta este comportamiento con el fin de minimizar la
interferencia con la fase de descanso del animal.
Caractersticas del Agua

No existe consenso en cuanto a la cantidad de agua en la que se deben mantener los anfibios en
cautividad. En muchos casos las recomendaciones y diferencias entre parmetros se deben ms a las
caractersticas de mantenimiento y cuidados (limpieza, alimentacin, densidad de poblacin, etc) que a
los requerimientos especficos del animal. En cualquier caso, no existe una gua clara para determiner
cual es la cantidad optima de agua para mantener species como Xenopus laevis. No debe asumirse
que los anfibios en general muestran indiferencia respecto a las limitaciones impuestas por el tamao
del acuario y la cantidad de agua.
Es importante proporcionar a los animales un volumen adecuado de agua, pero en un tanque de las
dimensiones adecuadas. Es tambin crtico que la profundidad del agua sea la adecuada. Por
supuesto, tan importante como el volumen y profundidad es la calidad del agua. En general, las
dimensiones del tanque y la profundidad del agua deben permitir al animal:
- Moverse con facilidad y nadar por el acuario.
- Permanecer totalmente sumergido en el agua a una distancia adecuada de la superficie.
- Evitar el contacto con otros animales.
- Girar en cualquier direccin, sin impedimento de las paredes del tanque o de otros animales.
- La cantidad de agua debe ser suficiente como para aadir algn tipo de enriquecimiento ambiental.
135

En su hbitat natural, la especie Xenopus laevis se puede encontrar en aguas tranquilas a

profundidades muy variables. En un estudio diseado para determinar la profundidad de agua en la
que debe mantener esta especie en el laboratorio, se criaron ranas Xenopus laevis en tanques de 5, 10
y 20 cm de profundidad, no observndose ninguna diferencia en cuanto a su crecimiento. No obstante,
las ranas mantenidas en agua poco profunda muestran un incremento del estrs, agitacin y
respuestas de huida. Por otro lado se ha visto que el mantenimiento de niveles de agua insuficientes
produce regresin ovrica en hembras y que la comunicacin entre individuos en estado salvaje se
incentiva en aguas profundas en las que el sonido se propaga mejor. Aunque pueden encontrarse
recomendaciones muy distintas en cuanto a la profundidad de los tanques para mantener ranas del
gnero Xenopus, raramente se encuentra la justificacin de dicha recomendacin.
Las recomendaciones del Consejo de Europa (revisin de 2004) en funcin del tamao del animal son
las siguientes:
- < 6 cm = 6 cm de profundidad.
- 6-9 cm = 8 cm de profundidad.
- 10-12 cm = 10 cm de profundidad.
- 13-15 cm = 12.5 cm de profundidad.
En general, se considera que si las ranas adoptan una postura en la que apoyan sus patas traseras en
el fondo del tanque y dejan asomar parte de su cabeza fuera del agua, esto es un signo de bienestar
para esta especie.
Sin duda, el factor ms importante en cuanto al alojamiento adecuado de esta especie es la densidad
de poblacin. En su hbitat natural, los individuos no viven en contacto directo los unos con los otros,
por lo que la presencia cercana de otros individuos puede ser una fuente de estrs. De hecho, cuando
se mantienen ranas Xenopus con una mayor superficie de acuario disponible por animal, estas tienden
a crecer mucho ms rpido que las ranas mantenidas en un tanque con mayor densidad de poblacin.
Como en el caso de la profundidad del tanque, se pueden encontrar diversas recomendaciones sobre
el volumen de agua ptimo por animal. Los datos para animales en edad reproductiva varan entre
unos 2 y 8 litros de agua por individuo en el acuario. Sin embargo, pueden encontrarse
recomendaciones de hasta 19 litros de agua por individuo.
Temperatura
En su ambiente natural la especie Xenopus laevis se ha encontrado en muy diversas zonas
geogrficas con una gran variacin de temperatura. Como la mayora de las especies de anfibio,
Xenopus laevis es una especie de sangre fra (ectotrmica), lo que significa que su temperatura
corporal depende de la del medio en que se encuentre. Por esto, Xenopus laevis es muy sensible a las
variaciones en temperatura del entorno, y desarrolla problemas de salud rpidamente si las
condiciones no son adecuadas. En su ambiente natural, los anfibios seleccionan su temperatura
corporal localizando el ambiente trmico apropiado; exponindose al sol, entrando y saliendo del agua,
ocultndose bajo rocas o troncos e incluso haciendo una cavidad en el suelo o fango. En el caso de
Xenopus laevis, que es una especie completamente acutica, esta regulacin de la temperatura
136

corporal se consigue localizndose ms cerca de la superficie o en aguas profundas. Se estima que el

rango idneo de temperatura del agua para Xenopus se encuentra entre los 21C y 24C, pudiendo ser
letal para este animal una temperatura del agua de 30C.
Si la temperatura del agua se encuentra fuera del rango adecuado para esta especie, los animales
dejarn de comer y sufrirn una depresin de su sistema inmune, sobre todo a bajas temperaturas (por
debajo de 21C). El mantenimiento de estos animales en el laboratorio a una temperatura menor de la
recomendada de 21C es la causa ms comn de infecciones por microorganismos patgenos, sobre
todo si la temperatura es menor de 15C. En cualquier caso, se debe evitar someter a los animales a
temperaturas inferiores a 14C o superiores a 26C. De hecho, si se mantienen los animales fuera del
rango indicado, su crecimiento y desarrollo se ve retardado. En un estudio diseado para determinar la
temperatura ptima para el mantenimiento de Xenopus laevis, no se encontraron diferencias
significativas entre animales mantenidos a 19, 22, o 24C por un periodo de 5 meses (los animales
comenzaron el estudio a una edad de 3.5 meses).
El objetivo a alcanzar en el diseo de un acuario para Xenopus laevis debera ser ofrecer a los
animales la temperatura ptima para su bienestar y desarrollo, y para los procedimientos
experimentales que se van a llevar a cabo (el parmetro ms importante suele ser la calidad de los
huevos). No deben usarse tan solo los lmites de tolerancia como referencia para determinar la
temperatura del agua. No se conoce con certeza cual es la temperatura ptima y los valores que
pueden encontrarse en las guas varan ligeramente. Sera recomendable ofrecer a estos animales
zonas con temperaturas ligeramente distintas para que ellos mismos seleccionen su microambiente
(Consejo de Europa, 2003), aunque esto puede no ser viable con el tipo de acuarios que normalmente
se utilizan en el animlario.
Es importante minimizar las fluctuaciones de la temperatura tanto del agua como de la sala. Si bien las
ranas son bastante resistentes a incrementos o descensos graduales en la temperatura, pueden ser
bastante sensibles a cambios bruscos y pueden llegar a morir debido a cambios abruptos de entre 2 y
5C. Es ms, cuando se van a cambiar animales de un tanque a otro con una temperatura distinta, se
debe hacer de una forma gradual o utilizando tanques a distintas temperaturas para permitir una
aclimatacin progresiva.
Cuarentena para Anfibios

Aunque existe consenso en cuanto a la necesidad de establecer un periodo de cuarntena, no est tan
claro cunto debe durar este. Algunos proveedores comerciales recomiendan un periodo de
cuarentena para estos animales de entre 7 y 10 das. Otros, recomiendan 2 semanas o un mnimo de
30 das. En el caso de anfibios silvestres capturados en la naturaleza, se deberan mantener aislados
durante 90 das.
El ciclo biolgico de la mayora de los parsitos de Xenopus laevis tiene una duracin de entre 4 y 6
semanas. Por lo tanto, parece sensato establecer un perodo de cuarentena de, al menos, esta
duracin. Durante el perodo de cuarentena, los animales se deben observar a diario buscando
cualquier anomala; signos generales de enfermedad, actividad, color de la piel, lceras, petequias en
137

las extremidades, inflamaciones, etc. En muchos casos, es recomendable inciar algn tipo de
tratamiento profilctico durante la cuarentena.
Alojamiento de Reptiles
Las aproximadamente 7,000 especies de reptiles que viven hoy en da se clasifican en 4 grupos
principales:
- Cocodrilos.
- Lagartos y serpientes.
- Tortugas.
- Tutaras.
El uso de reptiles en investigacin biomdica abarca campos como la gentica, etologa,
endocrinologa e inmunologa entre otros. Por ejemplo, la lagartija anolis se utiliza en estudios de
comportamiento y es un modelo en el que se pueden reproducir ciertos sntomas tpicos de la
enfermedad de Parkinson. Existen otros muchos estudios sobre agresividad, fisiologa del estrs, y
efectos de toxinas y neurotoxinas, sobre todo en serpientes.
Caractersticas Generales de los Reptiles

Algunos reptiles son completamente acuticos, otros son arborcolas, los hay terrestres o que viven en
madrigueras. Se pueden encontrar reptiles en prcticamente cualquier ecosistema, por lo que en
principio parece complicado establecer pautas generales para su alojamiento en un animalario. No
obstante, hay 3 caractersticas generales muy importantes a la hora de disear un entorno adecuado:
1. Son animales ectotermos (poiquilotermos). Es decir, su temperatura corporal est controlada por la
del ambiente.
2. Se deben conocer, y en la medida de lo posible replicar, las condiciones de su hbitat natural.
3. El personal al cuidado de estos animales debe conocer los principales signos de estrs y
enfermedad, con el objeto de identificarlos lo antes posible.
La alimentacin de estos animales requiere un nivel de macronutrientes, protenas, hidratos de carbono
y grasas en la dieta cuantitativamente similar a las necesidades de los mamferos. Existen dietas
comerciales especficas pero no gozan de gran aceptacin, ya que la mayora de los reptiles cogen
directamente el alimento con las mandbulas, siendo mejor toleradas cuando se administran animales
jvenes. Es esencial mantener los animales en un ambiente apropiado. Para que la alimentacin y la
digestin sean las adecuadas deben controlarse cuidadosamente la temperatura y la humedad
ambiente. El fotoperodo, el substrato y los componentes de las jaulas tambin pueden afectar el
comportamiento alimenticio. La pulverizacin de agua en el ambiente proporciona mayores
posibilidades de ingestin. En el caso de los reptiles, en las especies a las que se les ofrecen presas
vertebradas, es aconsejable matar o aturdir a los animales de alimento justo antes de ofrecerlos, para
reducir la posibilidad de lesin por mordeduras y golpes contra las paredes del recinto. En el caso de
tortugas acuticas y de algunos lagartos herbvoros el color de los alimentos puede tener importancia
prefiriendo las dietas de color rojo o amarillo.
138

La temperatura ptima para el desarrollo de las actividades fisiolgicas normales de los reptiles vara
de unas especies a otras. Una de las ventajas que presenta la ectotermia es que el ritmo metablico y
los requerimientos energticos de estos animales son comparativamente mucho menores que el de
mamferos o aves (la energa metablica no se invienrte en calentar el cuerpo). La mayor desventaja es
que la temperatura ambiental controla la actividad y comportamiento del animal, por lo que ste debe
buscar las zonas con una temperatura adecuada que le permita alimentarse, reproducirse, etc. Por
todo esto, es importante que los reptiles tengan cierta libertad para seleccionar la temperatura
adecuada en funcin de sus necesidades. Por ejemplo, una serpiente buscar una fuente de calor
despus de ingerir alimento para ayudar con la digestin. Por el contrario, despus de defecar se
ubicar en las zonas ms templadas del cubculo. Los reptiles viven en hbitats muy distintos, desde
zonas templadas a desiertos, por lo que hay que conocer el hbitat y costumbres especficas de cada
animal para intentar mejorar sus condiciones de alojamiento en el laboratorio.
Luz y Temperatura
En general, si un reptil en cautividad pasa todo el tiempo cerca de la fuente de calor, entonces se
puede inferir que la temperatura ambiental es baja. Por el contrario, si se coloca en la zona ms alejada
de la fuente de calor, entonces la temperatura ambiente es, probablemente, muy elevada para el
animal.
El cubculo debe tener un gradiente de temperatura adecuado para la especie: animales que habitan
en la zona tropical entre 27-38C; en la zona templada entre 20-35C y las tortugas acuticas a
temperaturas ms bajas. En algunas especies temperaturas superiores a 5 grados de los lmites
superiores establecidos pueden ser letales. Es necesario evitar las temperaturas extremas y sus
cambios bruscos. A temperaturas inferiores los reptiles se vuelven inactivos, lo que constituye un
fenmeno estacional normal en las especies de la zona templada.
En el laboratorio, el ciclo de luz y la temperatura ambiental se fijan normalmente para toda una sala o
cubculo. Lo ideal es que tanto las caractersticas del fotoperiodo como la temperatura se asemejen lo
ms posble a los existentes en el hbitat natural de la especie de reptil de que se trate. En ocasiones,
puede ser necesario disponer de un sistema programado que simule los ciclos de luz y temperatura
existentes en una determinada regin a lo largo del ao. Pueden encontrarse frmulas y tablas que
proporcionan la duracin promedio del da en funcin de la latitud por semana. Muchos reptiles son de
hbitos nosturnos, por lo que si han de observarse durante la jornada normal, su ciclo de luz debera
ser invertido.
Por lo general, se mantiene un ciclo de doce horas de luz y doce horas de oscuridad. Pueden utilizarse
lmparas incandescentes para suministrar iluminacin y calefaccin a las jaulas, pero debe evitarse el
contacto directo para evitar quemaduras trmicas. Si se utilizan lmparas trmicas deben estar
protegidas y colocadas a unos 45 cm del animal.
La calidad de la iluminacin es tambin muy importante, sobre todo para salud y bienestar de las
especies diurnas. La luz del sol, que obviamente sera la forma ideal de iluminacin para estos
animales, no puede ofrecerse en un ambiente de laboratorio. Incluso en el caso de disponer de
139

ventanas al exterior, los cristales no dejarn pasar los rayos ultravioleta (UV). Las especies que no se
alimentan de presas vivas (por ejemplo, algunas lagartijas herbvoras) son especialmente sensibles a la
calidad de la iluminacin, ya que dependen de su exposicin a la luz UV para sintetizar la vitamina D3
(necesaria para el metabolismo del calcio). La deficiencia de calcio es un problema muy comn en
reptiles que se mantienen en un alojamiento que no es el adecuado. En estos casos, se debe aportar
una fuente artificial de luz UV con una lmpara de luz oscura, por lo general, en combinacin con
fluorescentes de luz de amplio espectro (del tipo Vita-lite). Las especies nocturnas no tienen unos
requerimientos especficos en cuanto a la calidad de la iluminacin (puede utilizarse una luz roja si se
necesita observar los animales). Se debe evitar que los animales tengan contacto directo con la fuente
de calor o iluminacin, si bien la iluminacin no debe estar a ms de un metro del cubculo o jaula.
Aunque no es estrictamente necesario, como un elemento de refinamiento puede controlarse la
temperatura de modo que vare en funcin del ciclo de luz (en el desierto, la temperatura desciende
dramticamente al atardecer.
La temperatura del aire para especies tropicales debe mantenerse alrededor de 27C, y las especies
subtropicales entre 20 y 25C. Debe colocarse un termmetro en algn lugar dentro del alojamiento
primario para tener un control adecuado de la temperatura. Es muy recomendable que los reptiles
tengan algn lugar ms fresco en el que puedan refugiarse del calor si lo desean y evitar el
sobrecalentamiento. Es tambin importante que la tapa de la jaula, tanque o cubculo no sea slida y
deje escapar el exceso de calor. Algunos sistemas como las piedras calientes que pueden adquirirse
en las tiendas de mascotas no ofrecen un gradiente trmico; en su lugar fuerzan al reptil a elegir entre
un lugar fro o demasiado caliente (lo que puede resultar tambin en quemaduras).
Humedad, Agua y Calidad del Aire

Son diversos los requerimientos de humedad relativa, disponibilidad de agua y flujo de aire entre
distintas especies. Resulta adecuado controlar la humedad a nivel de la sala si todos los animales
alojados proceden del mismo hbitat. En algunos casos pueden necesitarse humidificadores del
ambiente. Como regla general, las especies tropicales requieren una humedad relativa de al menos el
70%, aunque para la mayora de las especies resulta adecuado un rango de humedad relativa entre el
60 y 70%. Una humedad relativa baja puede causar problemas con la muda de estos animales. En
cubculos pequeos, la humedad relativa puede incrementarse colocando el recipiente con agua cerca
de la fuente de calor.
Las especies semiacuticas necesitan agua en cantidad suficiente para permitir la inmersin completa.
En muchas especies la alimentacin, la reproduccin y la interaccin social se realizan en el agua. La
calidad del agua debe mantenerse por medio de filtracin y aireacin, los restos deben retirarse para
impedir el desarrollo de microorganismos patgenos. En las especies de puerto debemos tener en
cuenta la salinidad del agua, y en algunas especies de tortugas acuticas un pH similar al de su
ambiente natural. La falta de humedad (< 35%) causa sequedad excesiva, especialmente en las
especies no adaptadas ambientes ridos, y la excesiva (> 70%) facilita la aparicin de hongos y
bacterias que predisponen infecciones cutneas. Las exigencias de agua estn relacionadas con su
biodisponibilidad en su ambiente natural. Las especies acuticas o semiacuticas tienden a ser
140

ureotlicas (excretoras de urea) y las de ambientes ms secos ureocotlicas (excretoras de cido

rico) que tiende a conservar ms agua. En muchas especies se producen prdidas de agua a travs
de la piel (en el orden cocodrilia sta puede llegar hasta el 20%), mientras que en otras especies, se ha
demostrado su absorcin transcutnea.
Son varias e importantes las funciones que una fuente de agua tiene en el alojamiento de reptiles: por
supuesto, les sirve para beber, pero tambin ayuda a que se desprenda la piel en el proceso de muda
(ecdisis), por otro lado, los reptiles utilizan el agua para regular su temperatura corporal. Es
recomendable que los animales se rocen diariamente con agua por medio de un nebulizador.
La cantidad de agua y su ubicacin dentro del cubculo que ocupen los reptiles depender de la
especie alojada. Algunas lagartijas, por ejemplo, no bebern nunca de un recipiente con agua ya que
estan adaptadas a recoger con la lengua las gotas depositadas sobre hojas u otras superficies.
Algunas tortugas pasan la mayor parte del tiempo sumergidas en el agua, por lo que no se requiere
una fuente de agua adicional. Las serpientes deben disponer de un recipiente con agua fresca del que
poder beber o remojarse en tiempo de muda de la piel. En general, las especies terrestres necesitan
agua fresca que puede colocarse en un pequeo recipiente. Debido al uso de materiales plsticos o de
metal para proporcionar agua para el bao, se debe proveer a los animales con una rampa cuya
superficie no sea deslizante para que puedan salir y entrar al agua. Se debe tener especial cuidado con
el acceso de entrada y salida al agua en especies con garras que pueden resbalar fcilmente por
superficies lisas (e.g., las tortugas terrestres con uas). Tanto el agua de bebida como el agua para el
bao se deben proporcionar a temperatura ambiente.
Alojamiento primario
Las necesidades y caractersticas del alojamiento primario para reptiles son muy variadas y las
condiciones bsicas de higiene responden a lo que cualquier persona entendera como un habitculo
limpio. Las condiciones de alojamiento que habitualmente se mantienen en los animalarios o en lugares
especializados, como un zoo, son adecuadas desde el punto de vista de la reproduccin y longevidad
de los animales. En general, las jaulas, tanques y acuarios de material plstico son los que presentan
una mayor ventaja desde el punto de vista de la higiene y bienestar del animal.
El tamao del alojamiento primario depender del tamao y actividad del animal. El habitculo debe
permitir la creacin de un gradiente de temperatura, debe dejar espacio para elementos de
enriquecimiento ambiental, para que el animal se ejercite, y para el establecimiento de un territorio si se
alojan varios animales con comportamiento territorial.
La mayora de los reptiles utilizan tanto el espacio horizontal como el vertical, esto se debe tener en
cuenta al disear el alojamiento para cada especie. Segn esto, un cubculo pequeo, pero con
suficiente amplitud vertical y provisto de un entorno complejo de ramas, perchas, etc., ser ms
adecuado para una especie arborcola que otro de mayores dimensiones horizontales y menor
complejidad estructural. Los elementos para aadir la complejidad que haga adecuado el entorno son
muy variados, pero no deben usarse materiales con puedan liberar productos qumicos (pinturas,
colorantes, revestimientos antideslizantes o ignfugos, etc.). Otros elementos como superficies
141

adecuadas para entrar y salir del agua, superficies rugosas para frotarse durante la muda, superficies
calientes sobre las que reposar, lugares donde esconderse, etc., deben formar parte del alojamiento
para proporcionar al animal cierto control sobre el entorno.
Como substrato puede utilizarse papel de peridico en tiras (de hecho el pael es un substrato
recomendado dado que es limpio, absorbente, barato y fcil de cambiar). Materiles como el csped
artificial (Asto-turf) son tambin adecuados y fciles de sanitizar. Adems, son bastante adecuados
para que se fronten los animales que mudan la piel. Otros substratos como la rena o el serrn, no son
adecuados ya que pueden acumularse en sus fauces o ser ingeridos por los animales, causndoles
estomatitis y otros problemas digestivos. A las especies acuticas se les puede aportar grava o
piedras.
Las superficies del cubculo deben desinfectarse frecuentemente con leja u otro desinfectante
adecuado para evitar el crecimiento de hongos y bacterias. Es importante enjuagar bien con agua
todos los materiales que vayan a estar en contacto con el animal. Si es posible, las jaulas, acuarios o
tanques deberan lavarse y sanitizarse en un lavajaulas. Las puertas y cubiertas de las jaulas deben
poder cerrarse y asegurarse, ya que algunas especies pueden escapar fcilmente por una pequea
abertura. Con el objeto de reducir los intentos de escapar, la posibilidad de traumatismos, y la
excitacin del animal, las superficies transparentes deben limitarse a lo estrictamente necesario. Esto
es especialmente importante cuando se vayan a introducir animales nuevos en el cubculo o jaula.
Las especies arborcolas o semiarborcolas requieren, adems de un sustrato adecuado, ramas y
perchas en las que reposar, escapar, esconderse y delimitar un territorio. Segn el tamao del animal y
su peso, las ramas y perchas sern de un dimetro adecuado y tendran una determinada disposicin.
Cuando se alojan animales en grupos, es importante tener en cuenta la disponibilidad de ramas para
todos. Las lagartijas dominantes, por ejemplo, ocuparn las partes ms elevadas, no dejando a los
subordinados acceder a esta parte del habitculo. Muchos reptiles son territoriales y su
comportamiento social es muy limitado (no forman jerarquas sociales), en ocasiones estos individuos
se ven forzados a convivir con otros congneres en un espacio reducido, lo que es una fuente de
estrs para el animal.
El alojamiento en grupos de especies diurnas muy sociables, exige colocar varias estaciones para
tomar el sol, alimentarse, descansar apartados de los individuos dominantes de la misma especie y de
todo observador humano. Debe evitarse el hacinamiento para reducir las situaciones de competencia
exagerada, siendo conveniente la separacin durante la alimentacin en las especies agresivas para
evitar lesiones.
El hacinamiento puede ser uno de los mayores problemas relacionados con el alojamiento de reptiles.
Esto causa graves problemas como peleas, heridas, e incluso la muerte del animal. Algunos reptiles
muestran un comportamiento dominante y territorial muy marcado, y no permitien a los subordinados
acceder a escondites y zonas de reposo. Estos animales pueden sufrir de estrs crnico vindose
comprometidas sus funciones fisiolgicas bsicas (alimentacin, reproduccin, etc.). El contacto visual
es crtico en este tipo de comportamiento: la postura agresiva de un animal dominante en un tanque
puede impedir que los animales del tanque adyacente se alimenten. Aislar a los animales no es la
142

solucin, dado que el vivir en grupos estructurados presenta ventajas y aporta un elemento de
bienestar. Lo que debe hacerse es adaptar el tamao y complejidad del cubculo al nmero, actividad y
comportamiento de los animales alojados. No obstante, las especies soliatarias no deberan ser
forzadas a vivir en grupo. Para algunas especies un reborde negro de unos 20 cm en el fondo de la
jaula aade seguridad.
A pesar de tener en cuenta los puntos anteriormente descritos, los animales pueden presentar el
sndrome de mala adaptacin, que se utiliza al describir la incapacidad del reptil para adaptarse a su
ambiente en cautiverio. Se caracteriza por: letargia, anorexia, caquexia y muerte. La modificacin del
entorno puede mejorar al animal. Se recomienda la pulverizacin del recinto con agua antes de la
comida, para estimular el apetito, el aumento de la temperatura ambiental, el aumento de la luz de
espectro completo y/o la inyeccin de vitamina B12. En individuos que rehusan los alimentos durante
largos perodos en ambientes ptimos, conviene reducirles la temperatura a 15-18C y elevarla
lentamente hasta el nivel deseado, simulando un ayuno invernal de 3 semanas, tras el que suelen
alimentarse con normalidad. Esta prctica no debe utilizarse con animales caqucticos porque mueren,
recomendndose la alimentacin forzada.
Salmonella
Se ha constatado que la mayora, si no todos, los reptiles son portadores de la bacteria Salmonella spp.
De hecho, la incidencia de salmonellosis relacionada con el contacto con reptiles mantenidos como
mascotas (sobre todo iguanas) se ha visto incrementada al ser estos animales ms frecuentes. Ya que
la infeccin por Salmonella en el hombre se adquiere slo por ingestin, es recomendable lavarse las
manos inmediatamente despus de manejar estos animales.
Alojamiento de Aves
Las aves que existen hoy en da se estudian en 2 grupos bsicos. Las que pueden volar y las que han
perdido la habilidad de hacerlo. A estas ltimas se las denomina rtidas o corredoras. Entre las rtidas
tenemos el avestruz, los andes, los casuarios y otros. Para sorpresa de muchos, entre las que
vuelan (llamadas carenadas) se incluyen tambin los pinginos. Y junto con los pinginos, se
encuentran la gran mayora del resto de las aves que conocemos.
Caractersticas Generales de las Aves

Las aves son animales vertebrados adaptados al vuelo y, aunque alguna haya perdido esta facultad,
toda su anatoma y fisiologa estn ordenadas en funcin de esta adaptacin. Las aves tienen el
cuerpo cubierto de plumas, stas son exclusivas de esta especie, y les sirven para volar y protegerse.
Las patas carecen de plumas y suelen estar formadas por escamas parecidas a los reptiles. Su piel
est desprovista de glndulas sudorparas y sebceas. Tienen un esqueleto ligero y resistente.
Un alojamiento adecuado para aves debe proporcionarles seguridad, comodidad y debe permitir que
las aves se ejerciten, que tengan la posibilidad de modificar su entorno y de expresar su
comportamiento natural. Se debe, sobre todo, permitir el contacto o la interaccin con otros individuos
143

de su especie. Al igual que sucede con otros animales de laboratorio, un alojamiento de baja calidad,
que no cumpla con los requerimientos de espacio, o demasiado simple, provocar la aparicin de
comportamientos estereotpicos. Estos son el signo inequvoco de un nivel de bienestar inaceptable y
debe evitarse su aparicin, o corregirse la situacin cuando aparezcan.
Alojamiento primario
De manera general, se deberan utilizar corrales o aviarios en lugar de jaulas para mantener aves en
un entorno de laboratorio. No obstante, existen algunas especies de pjaros de pequeo tamao que
pueden ser alojadas en grupos utilizando jaulas adecuadas y mantener altos estndares de bienestar.
Es tambin muy importante la forma de la jaula, corral o aviario, viniendo sta determinada por las
caractersticas de la especie alojada. Por ejemplo, para alojar aves voladoras la forma debe ser
alargada y estrecha. La aves se encontrarn mejor en instalaciones al aire libre y la posibilidad de
proporcionar este tipo de alojamiento debe ser siempre considerada, evaluando los posibles problemas
o interferencias con los experimentos que se van a llevar a cabo. Por ejemplo, si se mantienen aves en
un aviario o corral al aire libre, es ms probable que estas contraigan algn tipo de enfermedad
infecciosa transmitida por aves salvajes.
La mayora de las especies son muy sociales (al menos, gran parte del ao) y muy sensibles a la
formacin de grupos estables de individuos relacionados, por lo tanto, el alojamiento primario debe
favorecer la formacin de estos grupos.
En cuanto a la disposicin del alojamiento primario, se ha visto que las aves se sienten ms seguras si
el corral o aviario slo tiene una cara abierta a la sala o habitacin, aunque por otro lado debe
permitirse la visin o interaccin con otras jaulas, sobre todo en especies muy sociales. Para la
mayora de las especies, es ms adecuado que las jaulas o corrales se mantengan a cierta altura del
suelo. Esto tambin ayuda a habituar a los animales al contacto humano.
Las aves que pasan la mayor parte de su tiempo en el suelo (gallinas, codornices, etc.) deben disponer
de un suelo o base de la jaula slido con algn tipo de sustrato para evitar lesiones en las patas y
permitir un comportamiento natural. El sustrato ms adecuado es la viruta de madera, pero no el serrn
que puede daar las patas de los animales o ser ingerido. Si debido a las caractersticas de los
procedimientos que se van a llevar a cabo, tienen que mantenerse los animales en suelos de rejilla, se
debe proporcionar algn tipo de superficie slida para descanso. Esta superficie debera ocupar al
menos un tercio de la superficie de la jaula o corral. Si se necesita recolectar material fecal, las perchas
o reas donde las aves se posan deben colocarse justo encima del suelo de rejilla. Con el fin de evitar
lesiones en patas o dedos, el tamao de la rejilla debe guardar proporcin con el tamao de las patas
de la especie que va a ser alojada (esto es especialmente importante en estudios que requieren una
gran proporcin de suelo de rejilla: ensayos metablicos o toxicolgicos, por ejemplo).
Las perchas deben ser de un material que no dae o erosione los dedos de las aves. Es conveniente
proporcionar perchas de diferentes dimetros para que las aves ejerciten sus dedos. Si se opta por
utilizar ramas naturales como percha, estas deben estar libres de sustancias txicas y pesticidas. Las
aves de granja prefieren perchas que posean una superficie plana superior. La posicin en que se
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colocan las perchas dentro de la jaula o corral es tambin muy importante; para aves trepadoras (e.g.,
cotorras y papagayos), una sola percha en un lugar elevado, mientras que las aves voladoras
preferirn, al menos, una percha en cada extremo de la jaula para saltar o volar.
En algunos casos, las condiciones de alojamiento, independientemente de su idoneidad, son parte del
proyecto cientfico (por ejemplo, cuando lo que se pretende investigar son precisamente las
consecuencias que sobre el animal tiene su alojamiento en un entorno especfico, o estudios sobre la
transmisin de enfremedades en las condiciones en que se mantienen las aves para uso alimentario,
etc.). Por supuesto, esto slo debe permitirse si est totalmente justificado en la realizacin del estudio,
tras un anlisis del coste/beneficio del experimento.
Temperatura y Humedad
Existen numerosas guas y recomendaciones prcticas que establecen los niveles adecuados de
temperatura y humedad para las distintas especies. En recintos mplios se debera considerar el
establecimiento de un gradiente de temperatura para que los animales puedan seleccionar el ambiente
que encuentran ms apropiado en funcin de sus caractersticas particulares. En el caso de especies
para las que o bien no existen guas o bien la informacin es insuficiente, se recomienda alojar a estos
animales en unas condiciones lo ms parecidas al de su ambiente natural. Si los individuos estn
sometidos a algn tipo de estrs o se encuentran en unas condiciones a las que les resulta costoso
adaptarse, tanto el bienestar como la validez de los datos esperimentales pueden verse afectados.
Iluminacin
En general, las aves tienen una buena visin dentro de un rango bastante amplio de intensidades
luminosas. Se sabe que el ojo de las aves funciona en las condiciones aproximadas en que el ojo
humano lo hace, por lo que una iluminacin adecuada para las personas debera ser, en principio,
adecuada para la mayora de las aves (es decir, dentro de un margen alrededor de los 500 lux).
Las aves tienen un fotoreceptor en el tlamo que regula sus ritmos circadianos. Por lo que tanto la
cantidad (intensidad y duracin) como la calidad de la luz deben tenerse en cuenta para el bienestar y
el equilibrio fisiolgico de algunas especies. Las aves nocturnas, tales como bhos y lechuzas,
necesitarn un lugar oscuro durante la fase de luz para posarse y domir o descansar. Es conveniente
evitar tanto el encendido como el apagado instantneo de las luces con un sistema que ofrezca un
apagado o encendido gradual. En ocasiones, el apagado abrupto de las luces puede sorprender a las
aves en pleno vuelo, o sin posibilidad de buscar un lugar para descansar.
La frecuencia a la que un ave deja de percibir una luz estroboscpica como intermitente es bastante
superior a la del hombre, por lo que es de suponer que un ave percibir un fluorescente normal (con
una frecuencia de 100 Hz) como una luz intermitente o que emite destellos, lo que puede molestar al
animal. Se recomienda, por lo tanto el uso de lmparas incandescentes o fluorescentes de al
frecuencia. Por otro lado, la luz artificial tiene un espectro distinto de la luz natural (sobre todo en la
zona del UV), por lo que ciertos tipos de iluminacin podran aparecer raros a ojos de algunas
especies de ave. Existe evidencia experimental de que la calidad de la luz (sobre todo en ausencia de
la parte UV del espectro) influye en el comportamiento reproductivo, quizs porque los colores del
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plumaje se vean alterados. Se recomienda, por este y otros motivos, que si el acceso a una iluminacin
natural no es posible, se busque un sistema de iluminacin que sea lo ms parecido posible a la
iluminacin natural (en espectro, intensidad, etc.).
Consideraciones Adicionales
La provisin de una cantidad de espacio adecuada y unas condiciones ambientales estables no es
suficiente para mantener aves en un estado fisiolgico y psicolgico ptimo. La calidad del alojamiento
es esencial para mantener unas condiciones de bienestar ptimas. En todo caso, el espacio que se les
proporciona a los animales como alojamiento debe complementarse con estructuras u objetos que
aadan complejidad al entorno. En el caso de las aves, debera considerarse la adicin de espacio
para el bao (tanto en agua como en tierra), ejercicio, juego, y para unos de los comportamientos ms
tpicos de las aves; posarse en un lugar elevado. Tambin es recomendable aportar objetos que sirvan
de refugio o escondite a las aves.
En muchas especies de mamfero, es una prctica habitual el enriquecimiento del entorno por adicin
de objetos que se cambian o rotan frecuentemente. Aunque para las aves, esto tambin puede ser una
estrategia aceptable, no debe olvidarse que muchas presentan un comportamiento neofbico y la
rotacin de objetos puede ser una fuente importante de estrs. Algunas especies (crvidos, loros, etc.)
perciben la interaccin con sus cuidadores como un elemento de enriquecimiento ambiental, por lo que
este debe promoverse en la medida de lo posible.
Alojamiento de Roedores
Los roedores representan algo ms del 90% de todos los animales utilizados en investigacin y otros
fines cientficos. Quizs por esto, las condiciones y necesidades de alojamiento de este grupo son las
que ms se han estudiado y, por tanto, las que mejor se conocen. Son muchas las recomendaciones
que pueden encontrarse respecto al entorno ptimo en que deben mantenerse los roedores, y dada su
importancia en el mbito de la experimentacin animal debera intentarse siempre ir ms all de los
mnimos exigidos por la legislacin y optimizar el ambiente en el que se mantienen.
Son muchas y variadas las especies de roedor que se utilizan en investigacin biomdica. En el
presente texto nos limitaremos a comentar las condiciones ideales de alojamiento de las especies ms
comunes: ratones, ratas, hmsteres y cobayos. Mucho se ha investigado en cuanto a la influencia del
alojamiento en roedores, pero se ha hecho normalmente desde un punto de vista fisiolgico o
valorando su impacto en los resultados experimentales. Aunque esta aproximacin es necesaria, se
debe profundizar ms en el estudio de las necesidades fisiolgicas y psicolgicas de los roedores y
tratar de adaptar a estas el alojamiento.
Caractersticas Generales de los Roedores

Aunque son animales bastante familiares para el hombre, lo cierto es que ratas, ratones y hmsteres
muestran una aversin natural hacia el hombre y evitan ser manejados. Por el contrario, los cobayos s
son animales domesticados que normalmente toleran la presencia humana. Esta aversin hacia el
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hombre puede, sin embargo, modificarse si se manejan los animales desde edades tempranas y
conseguirse que los animales toleren el contacto humano. Tan slo es necesario realizar esta prctica
unas cuantas veces con los animales antes del destete, para que acepten ser manejados durante toda
su vida.
Los roedores deben tener acceso constante al agua, incluso aunque los animales parezcan beber
poco. Si la bebida se les proporciona mediante un sistema autmtico, las salidas de agua deben
comprobarse diariamente. Si, por el contrario, el agua se les proporciona en botellas, estas deben
cambiarse y esterilizarse al menos una vez a la semana. En el caso de los cobayos, si su dieta se
encuentra generosamente suplementada con vegetales frescos, no necesitan aporte de agua.
En el laboratorio, las ratas, ratones y hmsteres comen trozos de dieta slida que normalmente toman
del comedero y llevan a un lugar de la jaula seguro donde lo comen en cuclillas utilizando sus patas
delanteras. Los cobayos comen el alimento directamente del comedero o del suelo sin utilizar sus
extremidades anteriores, aunque a veces pueden ayudarse de estas para sujetar piezas grandes de
comida (por ejemplo, una zanahoria). En general, a los roedores se les debe suministrar una dieta
especficade laboratorio en forma de pellet de alta calidad y la disposicin de alimento sera ad libitum.
En ocasiones, la dieta se puede complementar con pipas de girasol o vegetales. A los cobayos se les
debe proporcionar siempre heno de alta calidad.
Obviamente, una de las caractersticas ms relevantes de los roedores es la necesidad que tienen de
roer. Si no se les proporciona un objeto que puedan roer frecuentemente, los incisivos crecern,
haciendo imposible su alimentacin en casos extremos. En la mayora de los animalarios, esto se
consigue con la dieta en forma de pellets. Los hmsteres roen continuamente el alimento. A menudo,
transfieren grandes cantidades de este desde el comedero hasta algn lugar dentro de la jaula donde
lo almacenan.
El crecimiento excesivo de los incisivos debido a la ausencia de dieta u objetos adecuados para roer,
representa un serio problema no slo para el bienestar del animal, sino tambin para su salud. Esta
condicin afecta a la capacidad del animal para comer y para acicalarse. Todos los roedores pasan
gran parte del da acicalndose; limpiando y cuidando su pelaje. Este lo comportamiento lo realizan
siempre en cuclillas o en postura bpeda, utilizando su lengua, dientes, manos y uas. Por ejemplo,
cuando un hmster despierta puede pasar una media hora acicalndose antes de hacer ninguna otra
cosa. En ocasiones, el pelaje puede tener un aspecto mojado despus de una sesin de acicalamiento.
El ratn, pero sobre todo el hmster, son animales evolutivamente adaptados a vivir en nidos dentro de
madrigueras, por lo que, si se les aporta el material adecuado, construirn nidos bastante elaborados
en los que descansar. Las ratas, ratones y cobayos dormirn en grupo o aislados en funcin de la
temperatura ambiental. La fase de sueo de estos animales coincide con la fase de luz del fotoperiodo,
aunque no duermen continuamente sino a intervalos de duracin variable. La posicin normal para
dormir en ratas, ratones y hmsteres consiste en apoyarse sobre sus 4 patas y esconder la cabeza
entre los miembros anteriores. Las ratas pueden echarse sobre su flanco y adoptar una postura
totalmente extendida en fases de sueo ms profundo: para permitir esta postura natural del animal
debe disponer de una superficie de unos 35 a 45 cm de largo. La posicin en forma de ovillo durante
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el sueo en ratas y ratones indica que la temperatura es algo baja para ellos. Los cobayos se tumban
en el suelo apoyando la cabeza sobre sus patas delanteras.
Cuando se colocan en una posicin normal sobre sus 4 patas, las ratas y los ratones (a diferencia de
hmsteres y cobayos) necesita espacio horizontal extra debido a su larga cola que se mantiene recta.
Esta posicin natural requiere un espacio horizontal de 35 a 48 cm para una rata adulta y entre 11 y 15
cm para un ratn. Otra postura natural muy comn es la de colocarse en cuclillas sobre sus patas
traseras. Esta es la postura que adoptan para comer, beber, o acicalarse. Es muy comn observar a
las ratas, ratones y hmsteres en esta posicin, aunque no es una postura habitual en cobayos que
son animales tpicamente cuadrpedos (necesitan apoyarse sobre sus 4 patas para encontrar una
posicin estable y segura). Los cobayos pueden asumir brevemente esta posicin para acicalarse el
pelaje de la cara o cabeza.
El espacio vertical que requiere un animal para adoptar una postura bpeda extendida es de unos 30
cm en la rata, 11 cm en el ratn, y 14 cm en el hmster. Los cobayos no adoptan, por lo general, una
posicin bpeda.
Cuando un roedor percibe un peligro o se encuentra con un depredador, inicia una huida con un patrn
de locomocin muy caracterstico; aproxima la zona ventral al suelo, y marcha con pasos cortos y las
patas extendidas lateralmente. Las ratas y ratones se desplazan en condiciones normales con la cola
totalmente extendida y recta sin tocar el suelo. Cualquier otra posicin de la cola puede ser signo de
que se encuentran en un habitculo que es demasiado pequeo.
Es evidente que un suelo slido es mucho ms apropiado para las patas de los roedores que los suelos
de rejilla. Aunque los reodores pueden desplazarse aparentemente bien sobre un suelo de rejilla, en
realidad no estn usando sus extremidades de una forma natural y a la larga esto puede causar dolor,
lesiones o malestar. Por otro lado, este tipo de suelos dificulta el mantenimiento del calor corporal, por
lo que el animal puede estar sometido a un estrs adicional. Algunos materiales son especialmente
desaconsejable, ya que su superficie poco o nada abrasiva hace que las uas no se desgasten y
crezcan de manera anmala. Si esto ocurre, las uas deben recortarse para evitarle esa incomodidad
al animal.
A diferencia de los cobayos, las ratas, los ratones, y los hmsteres son unos excelentes trepadores.
Los ratones, sin embargo, presentan tambin una gran habilidad para saltar y en ocasiones saltan un
obstculo u objeto en lugar de trepar por l. De hecho, el ratn puede saltar una altura y longitud de
varias veces la de su propio cuerpo. El ratn, y en menor medida la rata y el hmster, posee adems
un excelente reflejo de enderezamiento (righting reflex). El cobayo y el hmster, debido
principalmente a una menor fuerza en sus extremidades posteriores, no son en general buenos
saltadores.
Cavar tneles y madrigueras es uno de los comportamientos ms tpicos de los roedores. El ratn y el
hmster son grandes cavadores, siendo el impulso por este comportamiento mucho menor en la rata y
el cobayo. Es imposible satisfacer plenamente este instinto en roedores mantenidos en cubetas en el
animalario, pero si pueden ofrecerse soluciones que permitan al animal desarrollar actividades y
comportamientos cuasi-naturales. Un sustrato ideal para esta actividad es la viruta de maderas (sobre
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todo de rboles no resinosos). Aunque la viruta se considera generalmente como el lecho por
antonomasia, puede ser tambin considerado como un elemento de enriquecimiento ambiental (sobre
todo en ratones).
En la rata y el ratn, slo las hembras gestantes construyen autnticos nidos. Eso s, tanto ratas como
ratones construyen, si disponen de los materiales apropiados, estructuras similares a un nido (aunque
menos elaboradas) para descansar. Tanto los hmsteres hembra como macho construyen nidos
bastante elaborados. Por el contrario, los cobayos no presentan este comportamiento.
El ratn, y muchos otros roedores, son animales tigmotcticos (preferencia por desplazarse junto a una
pared u objeto evitando los espacios abiertos). De hecho, una de las situaciones que mayor aversin
causa a un roedor es cruzar un espacio abierto e iluminado. En este sentido, la provisin de objetos
dentro de la jaula aumenta la superficie til de la misma.
Comportamiento Social
El juego es una parte muy importante del comportamiento social de los roedores. Adems, proporciona
una forma de ejercicio necesaria para el desarrollo fsico, social y sexual de los individuos jvenes. Una
vez alcanzada la edad adulta, los roedores no suelen desarrollar actividades relacionadas con el juego
entre ellos. Por esto, aunque los individuos jvenes pesan menos que los adultos, necesitan ms
espacio para este tipo de actividades. Consecuentemente, definir las necesidades de espacio slo en
funcin del peso del animal podra no ser muy acertado. Un comportamiento social habitual entre las
ratas adultas es el acicalamiento mutuo entre individuos, aunque no es frecuente, en condiciones
normales, en ninguna de las otras 3 especies de roedor aqu mencionadas.
El olfateo de la zona ano-genital entre individuos adultos del mismo sexo suele anunciar el comienzo
de una pelea. En muchas ocasiones, el enfrentamiento se evita porque alguno de los individuos adopta
una posicin de sumisin (tumbado sobre su dorso). En caso de que se produzca la pelea, los
animales pueden llegar a infligirse heridas bastante graves e incluso causar la muerte del oponente.
Las peleas, sobre todo entre machos, pueden llegar a representar un problema bastante grave, siendo
la separacin de los individuos la nica solucin, ya que el agresor no puede expulsar de su campo
sensorial al agredido.
Los cobayos macho muestran un comportamiento dominante y agresivo con otros individuos para
demostrar su estatus jerrquico. Es muy frecuente que en un conflicto jerrquico, los cobayos se
peleen de manera bastante agresiva. Al contrario de lo que sucede con ratones y ratas, la pelea acaba
cuando uno de los contendientes adopta una posicin sumisa, los cobayos no adoptan este postura,
sino que el individuo sometido dejar sbitamente de producir feromonas tpicas de los machos y se
comportar como una hembra. De hecho, a partir de ese instante, el macho dominante comenzar a
tratar al sometido como una hembra, mostrando incluso comportamientos propios del cortejo. Ms an,
los cobayos macho normalmente no atacan a las hembras, por lo que el macho sumiso puede ahora
enfrentarse al dominante, siempre que adopte un comportamiento similar a las hembras, sin peligro de
ser agredido. En cobayos, la huida, ms que inhibir la agresividad del macho dominante, la estimula.
En un grupo de cobayos en el que hay machos y hembras, siempre que una de ellas est en estro, los
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machos probablemente pelearn entre s. En el grupo, existe siempre un macho que domina al resto,
que vive una situacin de estrs social continuo. Por su lado, los cobayos hembra alojados en grupo
nunca pelean entre s.
Un hmster macho es por lo general mucho menos agresivo que una hembra. Los machos muy
raramente atacan a las hembras, pero estas s que suelen mostrar un comportamiento bastante
agresivo con los machos y entre ellas. Se recomienda mantener las hembras individualizadas y los
machos en pequeos grupos desde el destete. Las hembras tambin pueden mantenerse en pequeos
grupos si no son reproductoras.
Comportamiento Reproductivo
La reproduccin en estas 4 especies de roedor es por lo general oportunista, aunque se ha visto que
los ratones y hmsteres presentan mayor tendencia a forma parejas mongamas estables. Cuando una
hembra se encuentra en estro aceptar la copulacin con cualquier macho. Durante la cpula, ratones,
ratas y hmsteres emiten vocalizaciones dentro del rango de los ultrasonidos, mientras que los
cobayos emiten sonidos y silbidos audibles.
Las cras de hmster, rata y ratn nacen poco desarrolladas y necesitan muchos cuidados, as como
ser mantenidos en un nido construido por la hembra para mantener una temperatura y un entorno
adecuados. Es muy importante que las hembras gestantes tengan a su disposicin material adecuado
para construir el nido antes del parto. Las hembras (y, en menor medida, los machos) tienen el reflejo
de devolver al nido las cras que lo abandonan. Por el contrario, las hembras de cobayo no parecen
proporcionar muchos cuidados a sus cras, que nacen ya bastante desarrolladas. Las hembras de
cobayo no acicalan ni defienden a sus cras. De hecho si 2 cobayos hembra tuviesen cras de la misma
edad, sera imposible distinguir las 2 camadas por el trato que las hembras proporcionan a las cras.
Caractersticas Especficas del Ratn

El ratn de laboratorio pertenece al gnero Mus y deriva del ratn casero (Mus musculus; tambin
llamado ratn comn o ratn domstico). La taxonoma del este gnero es compleja y por el momento
no totalmente clara. La mayora de investigadores considera que el ratn de laboratorio deriva de
cruces de al menos 3 grupos de ratones caseros (3 subespecies) bien diferenciados: M. m. molossinus,
M. m. domesticus y M. m. musculus. Un ratn de laboratorio adulto pesa entre 20 y 40 g y su longitud
media total (incluida la cola) es de alrededor de 15 cm. Cuando se apoyan sobre sus patas traseras
pueden alcanzar una altura de unos 12 cm. Un ratn de laboratorio presenta una longevidad mxima
de unos 2 aos.
El ratn es un animal de hbitos nocturnos o crepusculares con una elevada capacidad de adaptacin
a diferentes ambientes. Aunque no es un animal estrictamente gregario, s vive en grupos familiares y
busca el contacto fsico con otros congneres. El ratn es un animal omnvoro que desarrolla su
mxima actividad durante la fase oscura (noche), por lo que todos sus sentidos estn adaptados a un
ambiente silencioso y poco iluminado. Su visin en general, y la de los colores en particular, es
bastante precaria. Los machos adultos son de mayores que las hembras. Los incisivos del ratn
presentan crecimiento continuo.
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Caractersticas Especficas de la Rata

Las ratas se encuentran muy relacionadas con los ratones (ambos pertenecen a la familia Muridae). La
rata de laboratorio comn deriva de la rata parda (Rattus norvegicus). La rata de laboratorio pesa, en
function del sexo y de la lnea, entre 250 y 1,000 g y mide entre 40 y 50 cm (desde el hocico hasta la
punta de la cola). En una posicin bpeda, la rata puede alcanzar los 25 o 30 cm de altura. Su
longevidad natural es de unos 3 o 4 aos.
Caractersticas Especficas del Hmster

Existen varias species de hamster, pero el ms utilizado en el laboratorio es el hmster sirio o dorado
(Mesocricetus auratus). Todos los hamsters srios utilizados en laboratorio proceden de 3 ejemplares
capturados alrededor de los aos 30 en Aleppo (Siria). Tienen una cabeza relativamente grande y un
cuerpo robusto en comparacin con ratas y ratones. Un hmster adulto alcanza una longitude de entre
8 y 12 cm y puede llegar a pesar 100 g. En posicin bpeda alcanza una altura de 11 a 14 cm.
Los hmsteres, a diferencia de las ratas y los ratones son animales muy poco sociales y en muchos
casos rechazan ser alojados en grupos. Los hmsteres tienen un comportamiento explorador notable.
Esta especie presenta como caracterstica particular el periodo de gestacin ms corto de todos los
mamferos placentarios (16 das). Una hembra puede crar 8 camadas al ao, aunque su longevidad es
de 1.5 a 2 aos. Los hmsteres pueden hibernar si la temperature desciende por debajo de cierto nivel
crtico. El hmster sirio es uno de los ltimos roedores incorporados a la lista de modelos animales
disponibles. Todos los hmsteres utilizados como modelo experimental proceden de una camada
capturada en el dedierto sirio cerca de Aleppo en 1930.
Caractersticas Especficas del Cobayo

El cobayo (Cavia porcellus) es un animal originario de Sudamrica que ha sido completamente
domesticado. Son, por lo general, animales muy dciles y mucho menos activos que otros roedores. En
el hbitat humano se mantienen generalmente libres alrededor de la casa. Si se mantienen en una
jaula o cercado, no hay necesidad de cubrirlo ya que los cobayos no son buenos escaladores ni
intentarn saltar o escapar.
Existen 3 razas principales de cobayo; pelo corto, pelo largo y pelo en roseta. Las cras nacen despus
de un periodo de gestacin de 66 das. Las cras de cobayo al nacer no tiene un aspecto de cra, sino
que ms bien tienen la apariencia de un adulto joven. Durante el primer da de vida, las cras ya
empiezan a roer y a probar el alimento slido. Las cras de cobayo, a diferencia de los adultos, son muy
giles y activas. Un cobayo hembra puede cruzarse con xito a una edad tan temprana como 3
semanas y parir su primera camada a los 3 meses. Los machos tambin pueden ser sexualmente
activos y maduros a partir de las 3 semanas de edad.
Los ejemplares adultos llegan a pesar ms de 1 kg y medir 30 cm (de hocico a cola) y puede llegar a
vivir 8 aos en condiciones de alojamiento adecuadas. Los cobayos son animales muy sociables y
gregarios, y prefieren ser alojados en grupos. En la naturaleza no construyen madrigueras, pero
pueden ocupar las que otros animales han abandonado.
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Cualquier persona que haya estado en contacto con estos animales, conoce lo importante que es la
vocalizacin y comunicacin por medio de silbidos, gruidos, chasquidos, y otros sonidos similares. Es
muy comn que estos animales comiencen a vocalizar cuando entra una persona familiar (cuidador) en
la sala en la que estn alojados. La comunicacin por medio del olfato es an ms importante en esta
especie animal, ya que aporta informacin sobre el estatus social y reproductivo de los individuos.
Retos para el Refinamiento del Alojamiento

Uno de los principales retos a los que se enfrenta el refinamiento de las condiciones en que se alojan
los roedores es el elevado coste que supone en general cualquier modificacin de su entorno o del
alojamiento primario. No deben despreciarse, sin embargo, las consecuencias que sobre un estudio
(igualmente costoso y cuidadosamente diseado) pueden tener unas condiciones de alojamiento
inadecuadas. Las condiciones de alojamiento de una colonia de roedores deben partir de lo establecido
en la legislacin y recomendaciones, y, a partir de ah, refinarse en funcin de caractersticas
especficas y posibilidades de la instalacin.
Alojamiento de Lagomorfos
Existen cerca de 35 razas y ms del doble de variedades. La American Rabbit Breeders Association
(Asociacin Americana de Criadores de Conejos) tiene una lista estndar de 28 razas y alrededor de
80 variedades. Las razas varan en tamao, tipo de pelo o color de la capa, habiendo sido
seleccionadas para la produccin de carne, pelo o con fines experimentales. Como representativas
entre las razas de mayor tamao (mayores de 5 kg de peso vivo) habra que sealar al gigante de
Flandes o al gigante de Checkered; entre las razas de tipo medio (2 a 5 kg de peso vivo) ms
representativas, estara la raza californiana o neozelandesa, la cual ha sido desarrollada para la
obtencin de carne, seleccionndolas a favor de crecimiento temprano y aumento de la eficacia en la
conversin de alimentos. Entre las razas de pequeo formato (menores de 2 kg de peso vivo) cabe
sealar la holandesa y la polaca, muy apreciadas como mascotas.
Existen pocas cepas desarrolladas para fines de laboratorio, en la actualidad existen 6 cepas
endocriadas, es decir, como resultado del cruzamiento de hermanos por hermanas, durante, por lo
menos, 20 generaciones. Esto se debe a que es muy costoso establecer un stock de animales
endocriados, porque disminuye la productividad, aumenta la susceptibilidad a enfermedades
infecciosas y aumenta la mortalidad.
Las razas mas frecuentes para uso en el laboratorio son:
- Raza Nueva Zelanda blanco, de cuerpo cilndrico y temperamento ligeramente nervioso;
- Raza Californiano, de cuerpo cilndrico, piel blanca con manchas negras sobre el hocico, las orejas, el
rabo y las 4 patas. De temperamento muy nervioso;
- Raza Chinchilla, de cuerpo corto y fino, la piel cubierta de pelos negros y blancos entremezclados,
dando aspecto de color grisceo. Existen 3 clases: pequea, gigante y americana.
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De entre las especies animales utilizadas en investigacin cientfica, es quizs el conejo el que ms
claramente ocupa el lugar de presa en muchos ecosistemas. Esto, sin duda, ha hecho que el conejo
desarrolle toda una serie de adaptaciones que le ayudan a escapar de sus depredadores, y que
condicionan los requerimientos en cuanto a su alojamiento en el laboratorio. El conejo tiene un campo
visual de 360 (como ocurre con muchas otras presas) y su principal mecanismo defensivo consiste en
percibir a un depredador lo antes posible y correr a esconderse. A partir de estas 2 caractersticas,
puede deducirse que 2 de los principales comportamientos son la vigilancia y el huir a un lugar donde
esconderse.
En su ambiente natural, los conejos excavan madrigueras que pueden tener un tamao y complejidad
muy considerable. La madriguera no es slo un lugar donde esconderse, sino que adems sirve como
refugio para criar. Los conejos tienen hbitos nocturnos o crepusculares y pasan la mayor parte del da
dentro de sus madrigueras, congregados en grupos. Cuando salen al exterior, mantienen una mayor
distancia con otros miembros del grupo y son menos tolerantes.
En la naturaleza, los conejos son animales muy gregarios que forman grandes colonias. Los grupos
reproductores estables estn formados por 1 macho dominante y entre 3 y 6 hembras adultas. Los
machos dominantes marcan un territorio con feromonas presentes en su orina y heces. Los miembros
de una colonia se reconocen entre ellos por el olor. La estructura social de las colonias de conejos
incluye 2 lneas jerrquicas relativamente independientes; la del macho dominante, y la del resto de
hembras. Las relaciones de sumisin y dominancia son muy marcadas y los comportamientos
agresivos son escasos. La domesticacin de esta especie parece no haber alterado mucho su
comportamiento, las relaciones sociales y la forma de establecerlas. Tenemos, por lo tanto, la
obligacin de adecuar el alojamiento de estos animales a sus necesidades para mejorar su bienestar
fsico y psicolgico.
Las jaulas tradicionales en que se mantienen los conejos individualizados parecen no ser el alojamiento
ptimo para esta especie. Un entorno mucho ms adecuado es el alojamiento en grupo en pequeos
corrales con elementos que aporten cierta complejidad estructural al habitculo. De hecho, los conejos
alojados en grupos muestran un repertorio muchsimo ms mplio de actividades y comportamientos
que los alojados individualmente.
Alojamiento individual
Las jaulas que se utilizan habitualmente para el alojamiento individual de conejos estn ms pensadas
para la higiene y limpieza de la instalacin que para el bienestar del animal. En base a numerosos
datos y estudios, este tipo de alojamiento no es el adecuado para el conejo y limita muchas de sus
actividades y comportamientos especficos.
De hecho, muchas de las actividades que normalmente se observan en conejos individualizados son
en realidad alteraciones del comportamiento y estereotipias. Estas actividades aberrantes sustituyen al
comportamiento normal del animal, que se encuentra inhibido bien por la ausencia de estmulos o bien
por la imposibilidad de llevarlo a cabo. Es frecuente encontrar animales que muerden o chupan los
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comederos o botellas, que se frotan la nariz, que se arrancan el pelo, que golpean las paredes con las
patas, todo ello de forma repetitiva o compulsiva.
Si el protocolo experimental exige que el animal se mantenga individualizado (e.g., estudios
metablicos), debe procurarse, al menos, que mantenga contacto visual y olfatorio con otros individuos.
Se debe aportar una superficie elevada para el descanso del animal y/o un objeto que le sirva de
refugio. El heno y los trozos de madera son una solucin econmica y fcilmente disponible para
mejorar el entorno del animal. El heno debe cambiarse cada 2 o 3 das. Por otro lado, existe una gran
variedad de elementos de enriquecimiento ambiental disponibles que pueden ayudar en estos casos.
Se ha visto que los conejos individualizados a los que se les aporta heno y otros elementos de
enriquecimiento del entorno, muestran una reduccin en la incidencia de estereotipias. Esto indica que
las condiciones de alojamiento indivudual son un problema y que este problema puede revertirse con la
provisin de los objetos o materiales adecuados.
Comportamiento Social del Conejo y Alojamiento en grupo

El alojamiento en grupo de conejos es el ptimo desde el punto de vista del bienestar del animal.
Adems de permitir un repertorio de comportamientos mucho ms mplio que el alojamiento en jaulas,
reduce o elimina la incidencia de estereotipias. El animal dispone de ms espacio, aunque
relativamente (superficie/n de animales) el espacio es menor, lo que le permite ejercitar ms
actividades. El alojamiento en grupo de conejos en el animalario no se ha considerado una opcin
viable, debido principalmente a los problemas de agresividad que pueden darse. De hecho, si se alojan
machos adultos, se producirn peleas bastante serias. Este problema se da a partir de las 12 o 14
semanas de edad. Los jvenes pueden alojarse en grupos hasta entonces, pero slo deben
mantenerse en este alojamiento si estn castrados.
Agrupar conejos jvenes no suele presentar problemas de peleas o agresividad. Lo ideal es formar
grupos justo despus del destete. Si los animales son compaeros de camada, el grupo ser an ms
slido y estable, ya que antes del destete probablemente se haban formado relaciones jerrquicas
entre ellos (durante el juego; de ah la importancia de facilitar este comportamiento). Uno de los
inconvenientes que presenta el alojamiento en grupos es la identificacin de los animales, que pueden
marcarse con algn tinte (libre de xileno) adecuado. Este marcaje debe renovarse de forma regular.
Otra forma de identificacin es la implantacin de microchips.
Si un animal se ha mantenido individualizado durante 6 meses o ms, no debe intentarse su trasladarlo
a un corral. Estos conejos suelen ser muy asustadizos y no poseen una coordinacin motora adecuada
(fruto de la prolongada inactividad), lo que provoca que se lesionen o golpeen. Una solucin ms
adecuada consiste en alojarlos en parejas estables con compaeros compatibles. Esto slo es posible
con animales jvenes y hembras adultas. Los machos adultos que han sido mantenidos aislados no
deben alojarse junto con otros conejos. Si se va a reagrupar un animal, esto no debe hacerse de
golpe y debe siempre vigilarse al grupo para identificar cualquier comportamiento agresivo. Los
animales que deban ser separados del grupo temporalmente por alguna causa (enfermedad,
tratamiento, lesin, etc.) se deberan alojar en un lugar que mantenga contacto olfatorio y visual con el
154

grupo. Con esto se consigue que las relaciones jerrquicas no se pierdan y el animal sea aceptado si
ha de reintroducirse en el grupo de nuevo.
Las hembras adultas toleran bien el alojamiento en grupos, por lo que siempre debera considerarse su
alojamiento conjunto. De hecho, los conejos hembra prefieren el alojamiento en grupo (agrupar
hembras compatibles en parejas puede ser una solucin intermedia) a la individualizacin en jaulas. El
establecimiento de un rango jerrquico entre los animales es un requisito para que se forme un grupo
estable. Por lo tanto, el retirar o aadir individuos a un grupo ya establecido puede causar problemas
bastante graves de agresividad. Las peleas no cesarn hasta que la jerarqua del grupo se
reestablezca de nuevo. Este tipo de alojamiento permite a los animales desarrollar su comportamiento
gregario y les hace menos susceptibles al estrs. Las hembras que se han agrupado a una edad
avanzada, pueden mostrar comportamiento agresivo (perseguir/acechar, morder, o araar) y
provocarse heridas, por lo general, leves. Esto es inevitable, pero puede mejorarse con la introduccin
de elementos a modo de refugios y barreras visuales. Por razones prcticas, no deben mantenerse
grupos de ms de 10 individuos.
Condiciones de la Jaula o Recinto

En cuanto a la estructura del habitculo en el que se mantienen los conejos, ya sea en grupos o
individualizados, debe contar con plataformas elevadas y objetos en los que puedan ocultarse (sobre
todo si se pretende criarlos). En la medida de lo posible, las zonas de descanso y alimentacin deben
estar separadas. Es til contar con una zona de aislamiento, a la que pueda conducirse un animal para
aislarlo. En los recintos de cra es conveniente contar con un espacio al que slo las cras puedan
acceder (e.g., porque la entrada sea demasiado pequea para los adultos).
El sustrato adecuado para el alojamiento en grupo es la viruta de madera o algn tipo de paja de
calidad. Tambin puede utilizarse papel. La dimensin vertical del habitculo puede aprovecharse con
la instalacin de plataformas elevadas. Este tipo de estructuras es de hecho el lugar preferido por los
conejos para descansar. Puede mejorarse el entorno aadiendo trozos de madera, o estructuras para
esconderse tales como tubos o cajas de material plstico o de cartn (esto tambin ayuda a evitar o
hacer ms leves las peleas). Los objetos que se aporten como refugio (i.e., para que el animal se
esconda dentro) deben tener perforaciones. Esto da ms seguridad al animal, que puede ver su
entorno desde una posicin segura, y facilita las labores de cuidados y manejo. Una forma de evitar
reacciones exageradas de alerta o miedo consiste en que las paredes del recinto o jaula no sean
slidas y los animales puedan ver aproximarse al personal.
Manejo
A la hora de sacar a un conejo de su jaula o confinamiento, el animal intentar huir. Si se le ha
proporcionado un lugar en el que esconderse, lo ideal es esperar a que el animal se esconda y
entonces capturarlo y sujetarlo adecuadamente en esta ubicacin, en la que, normalemente, ofrecer
menor resistencia. Es muy importante manejar estos animales con firmeza, calma y seguridad para
evitar provocar una situacin de ansiedad o estrs en el animal. Si asocia su manejo con una situacin
estresante, probablemente el conejo presente mayor resistencia a ser manejado. Si los conejos son
155

manejados adecuadamente, en lugar de huir se acercarn al personal que les resulte familiar y no
tratarn de esconderse cuando vayan a ser manejados o sujetados. Es importantsimo manejar al
animal con firmeza, para aportarle seguridad, y sujetarle adecuadamente el tercio posterior para evitar
lesiones graves en la colunma vertebral. Es tambin un recurso muy adecuado permitir que el animal
esconda su cabeza entre el brazo y el cuerpo de la persona que lo est sujetando.
Alojamiento de Perros
Hoy en da existen unas 300 razas, que se clasifican en funcin de su peso y tamao en variedades,
las ms pequeas presentan unos 18 cm de altura y 1-2 kg y las grandes y pesadas unos 80 cm de
alto y 90 kg de peso. La raza beagle, es la ms utilizada como modelo animal, alcanzando un peso
medio de unos 10-12 kg.
Su empleo se ha reducido en los ltimos aos y se destinan a estudios cardiovasculares referentes al
gasto y monitorizacin cardaca; arterioesclerosis; shock endotxico; transplantes; desarrollo de
tcnicas quirrgicas; estudios digestivos relacionados con el anlisis de las secreciones de jugo
gstrico y de la secrecin pancretica, lceras gstricas, obesidad, regeneracin heptica; estudios de
metabolismo y nutricin referentes al metabolismo energtico, absorcin de sustancias, o como modelo
en estudios dentales.
El perro es un animal muy social. En los grupos se establece un complicado orden social, cuya
jerarqua depende en gran medida del sexo del animal. En general, los machos son ms agresivos que
las hembras, especialmente con otros machos y con perros adultos que no les resultan familiares. Los
machos marcan su territorio depositando regularmente orina en distintos lugares. El manipulador
siempre debe ser el dominante del grupo, y debe permanecer cerca de los perros durante el perodo de
socializacin (4-8 semanas de vida), para garantizar su adaptacin. Se debe prestar especial atencin
a los grupos donde se reintroducen animales que han permanecido aislados, para confirmar que se
integran normalmente. El manejo experimental nunca se debe realizar en el territorio del animal.
Se pueden alojar tanto en lugares cerrados como al aire libre. Es preferible alojarlos en grupos
pequeos con una zona cubierta y un espacio al aire libre. Los cercados cubiertos deben tener en una
zona un suelo de rejilla y en el resto un suelo blando, y deben mantenerse templados y sin corrientes
de aire. Deben disponer de una zona para dormir aislada y seca, a ser posible con calefaccin bajo el
suelo. El suelo del espacio al aire libre debe tener una inclinacin en torno al 5%, para asegurar un
drenaje correcto.
De forma temporal, se pueden utilizar jaulas para alojar a los perros. stas segn las directrices
europeas, estn en relacin con el tamao del perro, siendo la superficie mnima mayor cuando los
animales se mantienen en grupo. De igual forma, se aconseja que la altura mnima de la jaula sea el
doble respecto a la altura a la cruz del animal. Por ejemplo, un beagle necesita una superficie mnima
2
de suelo de 1 m y una altura de 80 cm para una estancia corta, mientras que si se mantiene en grupo
2
necesita una superficie interior de 1.2 m y un espacio exterior de al menos 1.6 m por animal. Si se
mantienen aislados es conveniente, siempre que sea posible, disponer de un recinto de paseo, donde
puedan permanecer al menos durante media hora. Los perros no se aclimatan bien a las bajas
156

temperaturas. Se aconsejan temperaturas entre 22 y 25C. stas deben ser ligeramente superiores
cuando se alojen en solitario. Las cras recin nacidas durante la primera semana de vida, dependen
del calor externo para regular su temperatura corporal, necesitando que el alojamiento se mantenga
entre 26 y 29C, para conseguirlo se suele instalar una lmpara de calor a una altura mnima de 1 m.
La ventilacin debe ser la adecuada para minimizar las corrientes y los olores.
La iluminacin debe ser uniforme y lo suficientemente intensa, sin que llegue a ser excesiva, como para
permitir la inspeccin rutinaria de los animales y la limpieza de los cubculos. Son sensibles a ruidos de
alta frecuencia. Estos sonidos pueden producirles alteraciones fsicas y comportamentales, que pueden
interferir con los resultados experimentales. Los perros son animales carnvoros, cuando son adultos
deben alimentarse una vez al da, con comida preparada para perros (seca o hmeda). En el caso de
los cachorros, es preferible dosificar la dieta en varias tomas. Como mtodo de enriquecimiento
ambiental, se aconseja variar el tipo de dieta. En el caso de grupos, es esencial comprobar que todos
los animales tienen acceso a suficiente comida. Habitualmente, tienen acceso ad libitum al agua, ya
sea en un bebedero o por medio de un sistema automtico de bebida, aunque pueden mantenerse
suministrndoles agua 2 veces al da en perodos no inferiores a una hora.
Enriquecimiento ambiental
El enriquecimiento ambiental puede definirse como cualquier modificacin del entorno que potencia el
bienestar fsico y/o psicolgico de un animal, aportando estmulos apropiados a sus necesidades
especficas. Es fundamental, por lo tanto, conocer el comportamiento normal y las necesidades de
cada especie para que los cambios sean eficaces en su funcin de mejorar el bienestar. No basta con
aadir cosas al entorno del animal; el enriquecimiento ambiental se debe disear como un programa y
su eficacia evaluarse para asegurar que se beneficia al animal sin perjudicar la investigacin. En
ningn caso debe ser un proceso aleatorio en el que se aaden objetos que subjetivamente nos
parecen atrayentes o beneficiosos para el animal.
No todos los comportamientos que un animal lleva a cabo en la naturaleza tienen la misma importancia
en cautividad. El comportamiento natural de una especie debe, por supuesto, conocerse, pero se debe
complementar con otros estudios realizados en condiciones experimentales controladas que aporten
informacin sobre el grado de importancia de un determinado comportamiento. Para la realizacin de
estas pruebas controladas se han diseado 2 tipos de test:
Pruebas de Preferencia
En este tipo de pruebas los animales tienen la posibilidad de elegir entre 2 o ms opciones de
enriquecimiento a las que acceden libremente. En este caso, el tiempo que pasan en cada uno de los
entornos de que disponen, es el factor determinante para decidir la opcin de enriquecimiento ms
adecuada.
157

Pruebas de Fuerza de la Motivacin

En este tipo de ensayos, la fuerza de motivacin por un elemento determinado puede ser estimada por
el precio que un animal est dispuesto a pagar por acceder a dicho elemento. De tal manera, si un
ratn est dispuesto a sufrir una experiencia que le produzca aversin para acceder a un tipo de
enriquecimiento en concreto, demostrar que ste le aporta la posibilidad de desarrollar un patrn de
comportamiento para el que est fuertemente motivado y por tanto, la posibilidad de llevarlo a cabo
potenciar su bienestar.
De este modo, una vez que conocemos los patrones de comportamiento que son importantes para la
especie a tratar, las condiciones de alojamiento deben modificarse para, posteriormente, verificar que
el bienestar se ve efectivamente potenciado, y que los resultados de la investigacin no sern
negativamente afectados.
Tipos de Enriquecimiento Ambiental

Los distintos tipos de enriquecimiento ambiental se clasifican en 2 categoras: enriquecimiento social, y
enriquecimiento fsico.
Enriquecimiento Social
El hecho de estar confinado en un recinto (alojamiento primario), sin posibilidad de huida o escondite,
es probablemente el principal factor estresante para un animal. Esta disposicin lo asla del entorno y
restringe cualquier posibilidad de control sobre el mismo. Para los roedores y conejos, un espacio
abierto es extremadamente amenazante, ya que se exponen a la vista de un depredador potencial.
Numerosos estudios han demostrado que el confinamiento individualizado en jaulas sin ningn tipo de
estructuracin, est asociado con niveles elevados de estrs, ansiedad y miedo, con una mayor
incidencia de diversas patologas (hipertensin, desarrollo de tumores, lceras gstricas, etc.), adems
de fomentar la aparicin de comportamientos anormales.
Se han realizado numerosos estudios de preferencia en especies gregarias como el ratn o la rata,
encontrndose que estos animales prefieren ser alojados en grupos incluso en condiciones de
superpoblacin. Para los animales sociales, un compaero es el elemento de enriquecimiento ms
cambiante. Mientras que un objeto es esttico y de inters slo para ciertas actividades, otro animal
crea continuamente nuevas e impredecibles situaciones a las que el animal debe reaccionar. Esto tiene
un efecto positivo sobre el comportamiento exploratorio y de alerta, adems de proporcionar diversin,
ocupacin y probablemente un sentimiento de seguridad que mejora la repuesta a factores estresantes
como los procedimientos experimentales, lo que, potencialmente, disminuye la distorsin de los datos
obtenidos.
Dado que los ratones son animales muy territoriales, alojar machos en grupo puede dar lugar a
problemas de peleas entre ellos. Para reducir las agresiones entre machos, un comportamiento, por
otro lado, normal en esta especie, los grupos deben ser estables y armoniosos. Obtenindose los
mejores resultados si se agrupan al ser destetados. Como se ver ms adelante, aadir estructuras a
158

la jaula que permitan una va de escape para los animales subordinados, tambin disminuye la
agresin entre machos.
En resumen, las especies gregarias deben ser alojadas en parejas o grupos dado el nivel de estrs que
el aislamiento de otros congneres supone a estos animales.
Enriquecimiento Fsico
El enriquecimiento fsico puede conseguirse mediante la aportacin de objetos que provean una fuente
de ejercicio, escondite etc., o modificando la estructura de la jaula permitiendo un mejor
aprovechamiento del espacio disponible. La construccin de nidos es uno de los comportamientos para
los cuales los ratones estn ms fuertemente motivados. Todos los estudios de motivacin y
preferencia demuestran que:
-
Los ratones eligen aquellos materiales con los que pueden construir nidos.
El material dela nido es preferido a los nidos prefabricados.
Cuando se ofrecen distintos materiales, los ratones eligen frecuentemente una combinacin de 2
materiales para construir el nido.
Proveer de material para la construccin de nidos resulta en un aumento de peso y/o disminucin de la
ingesta de comida mientras que los resultados de pruebas de comportamiento no se ven afectados.
Este efecto de incremento del peso corporal se debe, presumiblemente, a la disminucin en la cantidad
de energa utilizada para la termorregulacin despus de aadir el material de nido.
Adems se ha demostrado que la agresividad en grupos de machos disminuye notablemente e incluso
desaparece si el material de nido es transferido a la nueva jaula durante los cambios. Parece ser que
de esta manera las marcas de orina permanecen inalteradas por lo que la estabilidad en la jerarqua
del grupo se mantendra.
El aumento de la complejidad del entorno (por adicin de objetos o proporcionando espacios ms
estructurados) incrementa las oportunidades para la exploracin y locomocin, adems de proveer a
los ratones de medios para estructurar el espacio en reas separadas de descanso, excrecin, etc.,
asemejando las madrigueras naturales.
En los ensayos de preferencia realizados, se observa que las ratas y ratones muestran una fuerte
motivacin por las jaulas a las que se les ha aadido algn tipo de estructuracin. En cuanto a los
efectos fisiolgicos de este tipo de enriquecimiento, es muy difcil generalizar dadas, en primer lugar,
las diferentes respuestas inherentes a cada cepa, pero tambin la falta de estandarizacin en los
programas de enriquecimiento y la enorme variabilidad en el diseo experimental. Las diferentes
pruebas para evaluar el impacto del enriquecimiento ambiental en los parmetros fisiolgicos difieren
no solo en los objetos o estructuras aadidos, sino en la rotacin de los mismos (desde experimentos
en los que el objeto se cambia cada semana a aquellos en los que el objeto es siempre el mismo), los
tiempos, los parmetros a medir, etc.
159

Teniendo en cuenta estas premisas, puede concluirse que, en lo que al comportamiento se refiere, los
animales alojados en jaulas enriquecidas estructuralmente presentan menores niveles de ansiedad y
un incremento de actividad exploratoria a la vez que se potencian comportamientos positivos tales
como el juego y acicalamiento (grooming) y disminuyen los comportamientos estrereotipados
(estereotipias) y negativos.
En algunos casos de machos agrupados (principalmente en cepas de comportamiento agresivo) la
adicin de estructuras ha originado un notable incremento de la agresividad, seguramente porque
dichas estructuras pueden dar lugar a luchas territoriales. Es importante tambin comprobar que los
objetos aadidos no faciliten el monopolio de las fuentes de comida y agua ya que esto generar
luchas por las mismas. En general, el incremento en la agresividad tiene como consecuencia una
disminucin de peso y mayores niveles de corticosterona y testosterona. El aumento en los niveles de
corticosterona puede ser debido a la competicin por la dominancia pero tambin el incremento de
ejercicio fsico provoca el mismo efecto.
Este aumento en los niveles basales de corticosterona (siempre dentro del rango normal) de los
animales alojados con enriquecimiento ambiental, han sido observados en muchos estudios, y puede
ser debido tanto a efectos positivos como negativos, ya que podra estar relacionado con un estrs
moderado causado por la exposicin a nuevos objetos y/o a un incremento en la actividad fsica.
En cualquier caso, los ratones alojados en ambientes enriquecidos, an cuando presenten valores
basales aumentados de corticosterona, responden mejor a situaciones de estrs que aquellos alojados
en condiciones estndar en los que, los niveles plasmticos de esta hormona, se elevan
significativamente ante la exposicin a un estresante agudo. Este resultado confirmara la hiptesis de
que los efectos del enriquecimiento sobre el comportamiento podran ser parcialmente explicados por
un ms adaptativo sistema hipotlamo-hipfisis-corteza adrenal y una ms eficiente accin de los
corticosteroides en estos animales.
En cuanto al efecto en la respuesta inmune, el aumento en la complejidad de las cajas ha demostrado
tener efectos diferentes dependiendo de la especie, cepa e incluso variando a lo largo del tiempo. En
algunos casos en que se observ un aumento de la agresin entre machos, ste se correlacion con
inmunosupresin, mientras que recientes estudios concluyen que ratones alojados en ambientes
enriquecidos presentan un significativo aumento en los niveles de clulas NK, una subpoblacin de
leucocitos que intervienen en la inmunidad innata y con un importante papel en la eliminacin de
clulas tumorales y aquellas infectadas por virus. Sin embrago, la medicin de los niveles de NK dentro
de los 7 primeros das de exposicin a la jaula enriquecida dan como resultado una disminucin de los
valores, aumentando notablemente despus de este periodo.
En definitiva, los resultados muestran que las condiciones de alojamiento de los ratones tienen un
efecto modulador de patrones especficos del sistema inmune, aunque dichas alteraciones no son del
todo consistentes y, en muchos casos, se han obtenidos resultados contradictorios entre experimentos.
Adems, conclusiones definitivas sobre el efecto del enriquecimiento ambiental basadas en parmetros
inmunolgicos son difciles de hacer si tenemos en cuenta que todos los animales estudiados estn
160

sanos y las alteraciones encontradas podran haber servido para alcanzar de nuevo la homeostasis
despus de la exposicin al estrs de un nuevo ambiente.
Enriquecimiento nutricional
Incrementar la diversidad de los alimentos ofrecidos, variar su presentacin o la disponibilidad de los
mismos, puede constituir un interesante mtodo para combatir problemas como la inactividad o la falta
de estmulo. Algunos de los comportamientos anormales observados en animales de laboratorio estn
relacionados con la motivacin nutricional. Por ejemplo, se ha demostrado que el alimentar a los
conejos justo antes del inicio del periodo de oscuridad (su fase de actividad), reduce notablemente el
comportamiento estereotpico.
Asimismo, si se les ofrece la dieta de manera que tengan que desarrollar algn tipo de trabajo para
obtenerla, las ratas y los ratones prefieren buscarla activamente an cuando podran disponer de ella
libremente.
161

Enriquecimiento e Interferencia con la Investigacin

Las condiciones del entorno, el estatus sanitario, el fondo gentico y el manejo de los animales influyen
necesariamente en:
-
Parmetros reproductivos.
Resultados experimentales.
Bienestar animal.
Algunos de estos parmetros se encuentran caracterizados en estirpes estndar de rata y ratn, por lo
que es posible identificar rpidamente cualquier desviacin. En otros casos, o bien los parmetros no
se encuentran caracterizados, o bien no se conoce su variabilidad en respuesta a alteraciones en el
entorno, por lo que es mucho ms difcil identificar problemas.
Enriquecimiento Ambiental y Variabilidad

El diseo de un programa de enriquecimiento debe superar 3 fases; y evaluado que, efectivamente
cumple su propsito, es decir, que contribuye al bienestar del animal, debe considerarse el impacto
sobre los resultados experimentales.
A este respecto, hay datos contradictorios sobre el aumento de la variabilidad en los resultados
obtenidos a partir de ratones alojados en ambientes enriquecidos y que estara en contra del principio
de reduccin de las 3Rs.
Si bien algunos estudios observaron un aumento en la variabilidad de los resultados, otros artculos
recientes describen que o bien no afecta o incluso reduce la variabilidad. En cualquier caso, an un
aumento en la variabilidad de algunos estudios especficos debera valorarse teniendo en cuenta la
mejora en el bienestar de miles de ratones. En otras palabras, si, como resultado de un programa de
enriquecimiento un investigador necesita incrementar el tamao de muestra en un 20% pero con un
decrecimiento del 5% en los comportamientos estereotipados de 10,000 ratones en el animalario, la
implementacin del programa de enriquecimiento seguir siendo todava preferible.
El principio de las 3Rs debe ser vlido tanto para la experimentacin como en las condiciones de
alojamiento
De igual modo, hay que tener en cuenta la validez de los datos obtenidos. La validez de los datos
depende en gran medida de la disponibilidad de animales con valores basales adecuados, es decir,
animales no alterados en cuanto a su fisiologa y comportamiento. Una desviacin de la normalidad
puede deberse tanto a unas condiciones de alojamiento deficientes como a formas de enriquecimiento
inadecuadas.
En definitiva ambos conceptos (variabilidad y validez) deben ser evaluados en cada caso mediante la
realizacin de un anlisis de coste/beneficio.
162

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164
BIENESTAR ANIMAL

Bienestar Animal
La evaluacin del bienestar de los animales utilizados en experimentacin y otros fines cientficos es
una necesidad que nace de la obligacin moral que contraemos respecto de su cuidado y uso. Para
proporcionar a los animales los cuidados adecuados necesitamos primero evaluar si un animal se
encuentra o no en un estado adecuado de bienestar.
Lo primero que debe hacerse a la hora de evaluar el estado de bienestar de un animal es definir (o
decidir) qu parmetros nos van a aportar una mejor medida de su estado. El problema de cmo medir
el bienestar animal es, por lo tanto, un problema cientfico. En cambio, la interpretacin de los
resultados y su evaluacin posee un componente tico. La ciencia del bienestar animal, aporta modelos
y sistemas para la valoracin (medicin) del estado de un animal que adems tienen en cuenta la
posible influencia de ste en los resultados experimentales.
Es el del bienestar animal un campo de estudio complejo en el que, aunque se ha avanzado mucho en
las ltimas dcadas, an queda mucho por hacer en cuanto al refinamiento de las condiciones en que
se alojan los animales, su cuidado, y su uso.
167

Bienestar Animal
Conceptos y Definiciones
A continuacin se exponen algunos conceptos y definiciones que sern tiles a la hora de comprender
los elementos y sistemas de evaluacin del bienestar de los animales utilizados en investigacin.
Bienestar animal
Es el estado en el que un animal se encuentra en armona con un determinado entorno. En dicho
estado, el animal tiene todas sus necesidades satisfechas, se encuentra libre de dolor, angustia o
enfermedad, y mantiene un equilibrio psicolgico con el ambiente y con otros individuos. El bienestar
animal se refiere siempre a un conjunto de parmetros. Un animal puede tener un problema fsico,
como un tumor, y no estar afectado si no siente dolor o incomodidad. De igual manera, un animal
puede sentir temor o ansiedad sin que necesariamente sufra un problema fsico. Un malestar puede,
por tanto, afectar al estado fsico y/o mental de un animal, o a ambos.
Entendido como una disciplina cientfica, el bienestar animal se ocupa de proporcionar los indicadores y
mtodos para la evaluacin del estado de salud fsica y mental de un animal en relacin con su
entorno.
Conducta y comportamiento
En muchos casos los trminos conducta y comportamiento se utilizan como sinnimos y, por lo tanto,
de forma intercambiable.
Distrs (Angustia)
Cuando un agente estresante (ver definicin de estrs ms abajo) es severo, de larga duracin, o se
presenta como un efecto acumulativo de varios estresantes, entonces el coste biolgico total de la
respuesta de estrs puede afectar a otras funciones biolgicas crticas para el animal, alterndolas de
tal manera que el animal entra en un estado pre-patolgico durante el cual es vulnerable al desarrollo
de patologas. Es en este perodo cuando el animal experimenta distrs y su bienestar est
amenazado. El distrs slo tiene lugar cuando el coste biolgico de la respuesta a una situacin de
estrs afecta negativamente a las funciones biolgicas crticas para el bienestar del animal y es nuestra
responsabilidad detectar una situacin de distrs antes de que el animal llegue al estado patolgico.
Dolor
El concepto de dolor es relativamente ambiguo. Dado que el dolor es una sensacin subjetiva y, por lo
tanto, difcil de medir para un observador externo.
168

Bienestar Animal
Estrs
El estrs es la respuesta biolgica que un animal exhibe para intentar adaptarse a un evento (agente
estresante) que amenaza su homeostasis (i.e., estado de equilibrio biolgico). Por tanto, no se
producir estrs a menos que un animal perciba un riesgo (agente estresante) para su estabilidad, ya
sea de manera consciente (dolor, fro, calor, miedo, peligro, etc.) o inconsciente (e.g., crecimiento de un
tumor). Independientemente de la percepcin consciente o inconsciente del estresante, el estrs
resultante puede o no llegar a producir distrs.
Toda respuesta de estrs se produce por uno de los 4 sistemas generales de respuesta del organismo:
comportamiento, sistema nervioso autnomo, sistema neuroendocrino y sistema inmune. Debido a que
la mayora de los estresantes son breves, los cambios en las funciones biolgicas requeridos para
enfrentase a ellos son mnimos y no tienen consecuencias significativas para el animal, es decir, el
coste biolgico de la adaptacin al estresante es mnimo y no afecta al bienestar. Una vez que el
estresante es aliviado, el animal vuelve al estado normal.
Homeostasis
En Biologa la homeostasis es el estado de equilibrio dinmico o el conjunto de mecanismos por los
que todos los seres vivos tienden a alcanzar una estabilidad en las propiedades de su medio interno y
por tanto de la composicin bioqumica de los lquidos y tejidos celulares, para mantener la vida, siendo
la base de la fisiologa.
Homeostasis u homeostasia es la tendencia de los organismos vivos y otros sistemas a adaptarse a las
nuevas condiciones y a mantener el equilibrio a pesar de los cambios.
Necesidades
Las necesidades, que pueden definirse como un conjunto de requisitos fundamentales en la biologa
del animal para obtener una serie de recursos o para responder a estmulos ambientales o corporales
particulares [Broom y Johnson, 1993], deben ser satisfechas para asegurar el bienestar del animal.
Las necesidades incluyen una gran variedad de factores tales como la provisin de alimento y agua, la
comodidad, el enriquecimiento ambiental y la prevencin de enfermedades. Pueden clasificarse, en
orden de importancia relativa, en:
-
Necesidades para mantener la vida: deben cumplirse para asegurar la supervivencia.
Necesidades para mantener la salud: prevencin de enfermedades, heridas o daos.
Necesidades para mantener la comodidad: mejoran la calidad de vida.
Todas estas necesidades deben cumplirse para asegurar el bienestar animal.
Sufrimiento
Puede definirse como la sensacin que aparece en el animal cuando la intensidad o complejidad del
estrs, dolor, falta de salud, etc., al que es sometido excede su capacidad de adaptarse o soportar la
169

Bienestar Animal
situacin. Aunque el sufrimiento est en gran medida relacionado con el estrs, sufrimiento y estrs no
son equivalentes.
Welfare y well-being
Existe cierta confusin con respecto al correcto uso de los trminos ingleses welfare y well-being.
Ambos se utilizan en la literatura cientfica y tcnica relacionada con el bienestar animal, si bien en el
mbito de los animales de laboratorio, el trmino welfare es de uso ms frecuente.
170

Bienestar Animal
Indicadores de Bienestar Animal

Los animales no pueden, obviamente, expresar de una forma cuantitativa cual es su estado de
bienestar. Precisamente por esto, la estimacin del estado de bienestar de una animal es siempre
indirecta y, por lo general, se deduce de la ausencia de indicadores de malestar, sufrimiento o
enfermedad, as como de la satisfaccin de sus necesidades etolgicas, fisiolgicas, psicolgicas y
sociales.
Segn lo anterior, cuantos menos indicadores de ausencia de bienestar encontremos en un animal,
mayor ser el estado de bienestar del animal.
Los indicadores que nos van a ayudar a evaluar el estado de bienestar de un animal son muy variados,
pero pueden clasificarse en 4 grandes grupos:
-
Fisiolgicos o bioqumicos. Un cambio en el bienestar animal causa un cambio en el estado fsico y

fisiolgico de un individuo. El animal puede responder de varias formas.Una forma de evaluar el
bienestar animal es medir sus repuestas fisiolgicas, conocidas como respuestas al estrs o
equilibrio homeosttico.
Comportamiento. Se estima que las desviaciones del comportamiento habitual de una especie
animal son un signo claro de un pobre bienestar. Son frecuentes las estereotipias, reacciones o
actividades exageradas o inhibidas, etc., como resultado de una mala adaptacin del animal a unas
condiciones determinadas.
Estado de salud. Es este un criterio muy valioso para determinar el bienestar, ya que las
enfermedades y heridas son la principal causa de sufrimiento. La ausencia de enfermedad es
necesaria para el bienestar, pero no es indicadora del mismo. La relacin entre estado de salud y
bienestar se establece por la observacin y anlisis de los animales.
Produccin y reproduccin. Estan basados en los resultados y parmetros reproductivos. Estos

indicadores estn muy influenciados por el manejo, condiciones ambientales y estado de salud del
animal.
Analoga. Se basan en el principio de analogia segn el cual en situaciones de ausencia de

bienestar similares (determinadas por la presencia/ausencia de indicadores) las sensaciones de las
personas y los animales son anlogas. Son estos, quizs, los indicadores ms discutibles.
171

Bienestar Animal
Evaluacin del bienestar animal

El concepto five freedoms
El concepto de los 5 grados de libertad fue desarrollado por la organizacin britnica Farm Animal
Welfare Council (FAWC) y se han convertido en un sistema prctico de evaluacin del bienestar de una
animal. Este sistema se desarroll originalmente para animales de granja, pero se ha visto que puede
ser aplicado sin dificultad a la evaluacin del estado de animales de trabajo, de compaa, y, por
supuesto, de laboratorio.
Las 5 libertades*, segn su revisin de 1993, son:
*Libertad entendida como ausencia (estar libre de).
-
Libertad de sensacin de hambre y sed (acceso a una dieta y agua que permita al animal
mantenerse sano).
Libertad de sensacin de discomfort (disponibilidad de un alojamiento adecuado).
Libertad de dolor, daos y enfermedad (tanto por una adecuada prevencin como por la provisin
de tratamientos adecuados).
Libertad de miedo y distrs.
Libertad para desarrollar un comportamiento normal para la especie (disponibilidad de espacio e

instalaciones adecuadas).
La utilidad de este marco conceptual reside en que establece un punto de partida para:
-
El consenso entre cientificos y politicos de diferentes pases para el desarrollo de marcos legales,
cdigos y sistemas de evaluacin del bienestar animal.
Ser utilizado como un indicador inicial de qu debe ser evaluado y aportado a los animales.
Estas libertades son requerimientos o necesidades del animal tan relevantes que pueden entenderse
como irrenunciables. Son necesidades ltimas y tienen que ser cubiertas para la supervivencia del
animal. Precisamente por ello, las 5 libertades no nos dicen mucho sobre el grado de sufrimiento que la
falta de una o varias de ellas provoca en el animal. Es decir, aunque las necesidades bsicas estn
cubiertas, el estado del animal puede no ser aceptable.
Evaluacin de Indicadores de Bienestar

Como se ha comentado anteriormente, existen multitud de indicadores que pueden utilizarse para
determinar el estado de bienestar del animal. Algunos de estos son indicadores negativos, es decir, es
su ausencia lo que nos indica que el bienestar del animal es aceptable. Por ejemplo, la ausencia de
estereotipias (indicador relacionado con el comportamiento del animal) es una buena seal respecto al
estado del animal.
172

Bienestar Animal
No todos los indicadores tienen, obviamente, la misma importancia, y es comn que deban
considerarse varios de los indicadores de cada grupo para tener una idea ms o menos completa de
cual es el estado de bienestar de un animal o grupo de animales.
Test de Preferencia
Los tests de preferencia tienen su fundamento en que ante una situacin en la que un animal deba
hacer una eleccin entre 2 o ms situaciones alternativas, estos preferirn la que mejor satisfaga sus
necesidades en el momento del test. Independientemente de cuales sean las necesidades del animal
(bsicas o accesorias), interpretaremos que el bienestar de un animal es mejor en la situacin
preferida. Estos test deben realizarse en condiciones controladas para tener el mximo grado de
seguridad respecto a la eleccin del animal (por ejemplo, que la eleccin no responde a una aversin a
algn elemento del test).
Es discutible, cuando menos, que la relacin entre preferencia y bienestar sea absoluta y directa. Por
esto, se debe medir la fuerza de la motivacin para utilizar esta como un indicador ms fiable del
bienestar animal. Asimismo, se debe tener en cuenta que la preferencia es consecuencia del
comportamiento del animal y su expresin es la eleccin que este hace. La eleccin se puede hacer de
forma activa o pasiva. La eleccin activa se produce cuando el animal se desplaza hacia el factor y la
eleccin pasiva cuando no necesita desplazarse porque ya est en ese factor. A nivel experimental,
slo la eleccin activa indica preferencia, ya que no puede conocerse la causa de la eleccin pasiva.
Es muy importante llevar a cabo un buen diseo experimental, con unas condiciones muy bien
determinadas y la seleccin de un control adecuado que verifique la ausencia de otros factores en la
eleccin del animal.
Los resultados que se obtienen de los tests de preferencia se pueden utilizar en la prctica para
aumentar el grado de bienestar de los animales mediante la introduccin en su ambiente de elementos
de enriquecimiento, incidiendo sobre los patrones de conducta relevantes para la especie en cuestin.
173
COMPORTAMIENTO DE
LOS ANIMALES DE
LABORATORIO

Comportamiento de los Animales de Laboratorio
176

El comportamiento es el conjunto de movimientos que realiza un animal. Todo comportamiento puede

dividirse en los movimientos que lo conforman. Estos movimientos consisten en contracciones
musculares coordinadas entre s.
-
Sujeto: individuo que realiza el movimiento.
Objeto: individuo hacia el que se orienta el movimiento. Puede ser otro animal, una planta o un
objeto inmaterial, como una piedra o un tronco.
177

Clases de Comportamiento
Comportamiento Innato
Los comportamientos innatos se llaman as porque no es necesario aprenderlos. Su origen no es
ontognico, sino filognico. Hay genes que codifican para estos comportamientos.
Reflejos
Se caracterizan porque slo responden ante estmulos externos. Son movimientos simples. Son
comunes a muchas especies animales incluso no relacionadas entre s. Un ejemplo es el reflejo
pupilar.
Taxias
Una clase especial de reflejos son las taxias. Son reflejos de orientacin espacial caracterizados por el
giro de toda o una parte del cuerpo del sujeto. Un ejemplo es el giro de los ojos cuando vemos algo por
el rabillo o el giro completo de cabeza para enfocarlo bien.
Patrones (o Pautas) Fijos de accin

Tambin denominados pautas fijas de accin (fixed action patterns [FAP]). Son los movimientos
instintivos. Se definen como pautas o secuencias de conducta reconocibles que, una vez iniciadas, se
completan independientemente del influjo externo. Se caracterizan por ser movimientos innatos que
responden tanto ante estmulos externos proporcionados por el medio ambiente como internos
generados por el sistema nervioso central. Tambin dependen de los niveles hormonales. Pueden
llegar a ser muy complejos, perfectamente coordinados, y caractersticos de una sola especie. Pueden
usarse como carcter taxonmico.
Un instinto a secas se define como un conjunto de pautas de conducta que contribuyen a una funcin
comn. Son compartidos por todos los miembros de la especie y se desarrollan en ausencia de los
modos habituales de aprendizaje o prctica. En realidad, cuando hablamos de instintos, estamos
hablando, ms que de comportamientos innatos, de tendencias innatas de comportamiento. Llamamos
instinto maternal a la tendencia innata a cuidar de los hijos, instinto territorial a la tendencia innata a
formar territorios, instinto cazador a la tendencia innata a matar otros animales para comrselo, etc.
Caractersticas de las Pautas Fijas de Accin y los Instintos

Tanto las pautas fijas de accin como el comportamiento instintivo tienen un origen gentico: estn
codificadas en el genoma como los caracteres fsicos. Se relacionan con la fisiologa ms que con la
psicologa. Al igual que le ocurre a un rgano al que no se le permite actuar (por ejemplo, un brazo
178

escayolado que se atrofia) las pautas fijas de accin pueden atrofiarse si no se les permite
desencadenarse. Por ejemplo: animales cazadores criados en cautividad que no saben cazar.
Esto no significa que el sujeto haya olvidado ese comportamiento, simplemente que est atrofiado.
Tericamente, lo mismo que el brazo escayolado puede volver a moverse tras un tratamiento de
rehabilitacin, la pauta fija de accin puede volver a desencadenarse tras un proceso equivalente a la
rehabilitacin. Por ejemplo: entrenamiento en cetrera a las aves rapaces criadas en cautividad a las
que se va a soltar en un rea protegida.
Requieren un proceso de maduracin antes de desencadenarse. El que una especie no realice
determinado movimiento instintivo desde pequeo no significa que ste sea aprendido, sino que no ha
madurado an. Por ejemplo, el comportamiento sexual o depredador.
Los instintos estn jerarquizados dependiendo de las exigencias medioambientales. Por ejemplo, en un
territorio desconocido prima el instinto de exploracin sobre cualquier otro. El desconocimiento de que
las jerarquas existen ha llevado a errores en el pasado. Los conductistas, en su empeo por negar la
existencia de los instintos, decidieron probar que la construccin del nido en las ratas es un
comportamiento aprendido. Un conductista cri ratas desde pequeas en jaulas desnudas que no
contenan material para construir el nido. Se haba observado que en tales circunstancias las ratas
usan la comida como material para el nido, as que las cri alimentndolas con alimento lquido.
Entonces, lo que ocurra es que las ratas trataban de construir el nido usando su propia cola, as que
se les amput desde pequeas. Ntese que el mero acto de usar la comida o su propia cola para
construir el nido, ya nos indica la espontaneidad del comportamiento. Criadas de esta forma, rabonas y
con alimento lquido, jams haban tenido la menor oportunidad de construir un nido. El conductista
sac una rata de su jaula de cra, la coloc en una jaula experimental con material para el nido y
esper. La rata no construy el nido. Quedaba demostrado que la construccin del nido no es instintiva.
Los etlogos criticaron el experimento argumentando que en una jaula desconocida el instinto
jerrquicamente predominante es la exploracin, no la construccin del nido. Un etlogo repiti el
experimento exactamente igual, con las mismas condiciones, pero esta vez introdujo el material para la
construccin del nido en la jaula habitual de la rata. La rata se construy un nido perfecto a la primera.
Cuando se quieren criar ratones en el animalario, se aconseja meter a la hembra en la jaula del macho
y no al revs, ya que si se metiese al macho en la jaula de la hembra, en vez de cortejarla y aparearse
con ella, se dedicara a explorar la nueva jaula.
Todo instinto va asociado a un rgano que, al igual que el instinto, ha de madurar. Ahora bien,
frecuentemente sucede que la maduracin de los instintos y de los rganos no corre pareja. Puede, por
ejemplo, que el instinto madure antes que el rgano, con lo cual el animal lo desencadene con
resultados infructuosos. Por ejemplo, el instinto de vuelo en las aves madura antes que las plumas
remeras. Las aves intentan volar cuando las plumas remeras son an demasiado pequeas y dbiles.
No pueden volar hasta que crezcan. A un observador le puede dar la impresin de que el ave est
aprendiendo a volar, porque primero lo hace mal y luego bien, como si practicase y con la prctica
ganase habilidad. Si se cra al ave en un tubo para que no pueda abrir las alas hasta que las remeras
179

hayan crecido definitivamente y entonces se suelta, el ave volar con movimientos perfectamente
coordinados desde el primer intento.
La construccin de un nido por parte de las aves madura con los aos. En las primeras nidadas, las
aves construyen nidos no muy buenos; con los aos, los nidos son mejores. Esto no es aprendizaje. Si
se impide que el ave construya el nido los primeros aos, cuando lo haga por primera vez lo har tan
bien como un ave de la misma edad a la que s se le haya permitido construir el nido todo ese tiempo.
Los movimientos instintivos son rgidos y no varan con el aprendizaje durante la ontogenia, pero s
pueden variar durante la filogenia por mutacin y seleccin natural. Si da la impresin de que un sujeto
vara su comportamiento con la experiencia se debe a la parte correspondiente al autoadiestramiento,
no a la instintiva.
Ontognicamente, y al igual que sucede con los rganos, el desarrollo de los instintos depende de las
condiciones medioambientales en las que se desarrolle el sujeto. Una persona que lleve una vida
sedentaria desarrollar una musculatura flccida. Si no toma suficiente calcio de pequeo, puede
quedar raqutico. Si a un animal se lo cra en completa oscuridad, no desarrollar las clulas retinianas
y ser ciego.
K. Lorenz cri alcaudones desde pichones alimentndolos con carne. Al crecer, desencadenaron el
comportamiento tpico de especie de empalar a sus presas en espinas. Pero tuvieron que aprender lo
que era una espina. Al principio, desencadenaban este comportamiento en cualquier parte, hasta que,
por casualidad, lo hacan sobre una espina. Al ver que la presa se quedaba ah empalada, aprendan
que las espinas eran el lugar ideal para hacerlo. Lorenz concluy que el movimiento realizado con el
cuello para empalar era instintivo y el conocimiento de la espina, aprendido.
Aos despus, otro cientfico realiz el mismo experimento, pero aliment a sus pichones de alcaudn
con gusanos de la harina. Cuando crecieron, los alcaudones empalaron a sus vctimas directamente en
las espinas. Es decir, el conocimiento de la espina tambin era instintivo, pero en los alcaudones de
Lorenz se haba atrofiado por deficiencias en la alimentacin.
Los estmulos que influyen en el desencadenamiento de los movimientos instintivos tienen 2 orgenes:
exgenos (proporcionados por el medio ambiente, como en el caso de los estmulos) y endgenos,
generados por el sistema nervioso central. Para que se desencadene el movimiento instintivo, la suma
total de estmulos endgenos ms exgenos ha de alcanzar o superar un valor umbral. Los
comportamientos instintivos se realizan sin necesidad de concentrarse en ellos.
La generacin de estmulos endgenos explica por qu los movimientos instintivos son espontneos e
involuntarios. Los humanos no son conscientes de la mayor parte de los movimientos instintivos que
realizan, hasta el extremo de que muchas personas creen que los humanos no tienen instintos. Cuando
el sujeto va a realizar un movimiento instintivo determinado, lo primero es preparar los msculos que
van a contraerse. Por ejemplo, para saltar primero hay que flexionar las piernas. A estos movimientos
preparatorios se les llama movimientos de intencin.
180

Caractersticas de los Estmulos Exgenos o Seal

Se define un estmulo seal como aquel aspecto de un estmulo, normalmente complejo, que provoca
la respuesta ms intensa. Las plumas del pecho de un petirrojo provocan una respuesta ms intensa
que la suscitada por todos los dems rasgos juntos. La respuesta puede ocurrir sin el estmulo seal (si
se le quitan las plumas rojas), pero con mucho menos vigor.
El objeto del instinto es el individuo o cosa material portador de los estmulos exgenos que participan
en el desencadenamiento del movimiento instintivo. Los estmulos exgenos que conducen al
desencadenamiento de una pauta fija de accin se llaman estmulos clave, llave o seal.
Un desencadenante (releaser) es un estmulo seal aportado por otro individuo de la misma especie
que el sujeto y que tiene importancia en la comunicacin intraespecfica. Las plumas rojas del pecho
del petirrojo del ejemplo anterior son un desencadenante. Por tanto, slo algunas caractersticas del
objeto son estmulos seal. El resto del cuerpo importa menos. Por ejemplo: el espinosillo
(Gasterosteus aculeatus) es un pez cuyos machos son muy territoriales y expulsan a los otros machos.
Durante la mayor parte del ao, estos peces son pardos y parecen hembras, viven en cardmenes sin
mostrar agresividad unos con otros, pero durante la poca de celo los machos se separan y hacen
territoriales, cambian de color: se vuelven azules por el dorso y rojos por el vientre. Esa combinacin de
azul arriba y rojo abajo es el estmulo seal que desencadena la reaccin agresiva de los otros
machos. As que se puede desencadenar el comportamiento agresivo en un espinosillo artificialmente
mostrndole un reclamo, incluso tosco, que sea azul por arriba y rojo por debajo. No importa que no
tenga forma de pez. Slo importa que sea azul por arriba y rojo por abajo.
De todas las caractersticas del objeto del instino, los estmulos seal verdaderamente importantes son
seleccionados mediante el Mecanismo Desencadenante Innato (innate releasing mechanism) o MDI.
Cuando un sujeto desencadena un comportamiento instintivo, no busca conseguir un beneficio con l,
sino desencadenar el comportamiento instintivo en s. La acumulacin de estmulos endgenos
generados por el SNC resulta muy molesta y el sujeto no se queda tranquilo hasta que logra gastar
todo ese potencial energtico. Por ejemplo, las aves acuticas herbvoras, como los patos, bucean
para comer plantas del fondo del estanque. En cautividad, en estanques sin plantas, continan
buceando aunque no haya plantas para comer. Lo que ms les interesa es desencadenar el
comportamiento de buceo para gastar todo el potencial energtico generado por la acumulacin de
estmulos endgenos para ese comportamiento, no comer plantas.
Naturalmente, todo esto es terico; en la naturaleza, en la prctica, y desde el punto de vista ecolgico,
el sujeto s obtiene un beneficio desencadenando el comportamiento instintivo.
Ejemplo general:
El SNC de un sujeto comienza a elaborar estmulos para determinado comportamiento. Por ejemplo, un
gato que quiere cazar un ratn. A medida que se acumulan, el gato siente una motivacin interna de
cazar un ratn. As que se va a buscar ratones. Cuando ve al ratn, los estmulos seal proporcionados
por el ratn se suman a los estmulos endgenos. Si entre ambos superan un valor umbral
desencadenante, el gato desencadenar el comportamiento y dar caza al ratn.
181

Esto no tiene nada que ver con el hambre que tenga el gato. Los gatos domsticos bien alimentados
son tan buenos cazadores como los silvestres. Cazan los ratones, pero no se los comen. El instinto de
caza es independiente del de alimentacin. Ambos responden a estmulos diferentes y a mecanismos
desencadenantes innatos diferentes.
Si hay demasiados estmulos:
Le damos un ratn al gato. Lo caza. Le damos otro ratn. Lo vuelve a cazar. Y as, vamos repitiendo el
experimento. A medida que le damos ratones, el gato los caza con menos ganas, hasta que al final
deja de cazarlos, se limita a mirarlos. Sin embargo, comprobamos que el gato no est fsicamente
cansado y an puede correr, trepar y saltar con normalidad. Lo que ocurre es que, como le damos
varios ratones seguidos al gato, el SNC del animal no tiene tiempo a generar suficientes estmulos
endgenos y el animal pierde la motivacin interna, as que el desencadenamiento del comportamiento
de caza depende cada vez ms de los estmulos exgenos generados por el ratn. Cada vez es ms
difcil alcanzar el valor umbral. Al final no se logra alcanzar el valor umbral y el gato deja de cazar los
ratones. Pasadas unas horas, cuando vuelva a alcanzarse el valor normal de estmulos endgenos, el
gato volver a cazar ratones.
Si hay pocos estmulos:
Si el sujeto pasa mucho tiempo sin desencadenar el comportamiento, los estmulos endgenos se
acumularn ms de lo normal causando ansiedad en el sujeto. El sujeto buscar la situacin ambiental
desencadenante (comportamiento de apetencia o motivacin), pero si no la encuentra, el mecanismo
desencadenante innato de esa pauta de accin fija pierde selectividad; puede que otros objetos que
tan slo muestran algunos estmulos seal sean suficientes para que la suma de los mismos a los
estmulos endgenos supere el valor umbral. Entonces, el individuo desencadenar el comportamiento
sobre un objeto inadecuado. Una persona famlica puede alimentarse de cosas que en una situacin
normal le daran asco o no son realmente alimentos humanos. Una persona que lleve muchas horas
sin dormir puede quedarse dormida en lugares totalmente inadecuados, como conduciendo. Un gato
que vive dentro de una casa sin ratones puede cazar una zapatilla o un juguete.
Si no hay ningn estmulo:
El caso ms extremo es aqul en el que el sujeto no encuentra estmulos externos en absoluto. En ese
caso, los estmulos endgenos pueden acumularse hasta tal extremo que ellos solos superen el valor
umbral. Entonces el sujeto desencadenar la reaccin sin objeto, en el vaco (vacuum activity). Por
ejemplo: aves que cazan insectos sin insectos, perros que entierran huesos en el suelo de baldosas de
la cocina, etc. No se descarta que el animal que realiza la accin en el vaco tenga algn tipo de
vivencia subjetiva o visin, aunque, naturalmente, esto no puede demostrarse.
182

Comportamientos Aprendidos
Inteligencia
El sujeto entiende el problema que se le plantea y obra en consonancia para resolverlo. Si se cambia
un detalle del problema, el sujeto adapta su comportamiento para resolver el problema. La inteligencia
depende exclusivamente de la corteza cerebral. Slo son verdaderamente inteligentes los mamferos y
quizs algunas aves como los loros y algunos invertebrados como los pulpos.
Autoadiestramiento
El sujeto no entiende el problema que se le plantea. Desencadena sobre el mismo todo tipo de
comportamientos tpicos de la especie hasta que encuentra la solucin por casualidad, se la aprende
de memoria y, a partir de entonces, desencadena sobre el mismo problema el mismo comportamiento.
Si se cambia un detalle del problema, el sujeto no es capaz de adaptar su comportamiento y vuelve a
una situacin equivalente al principio. sta es la forma ms habitual de aprendizaje en todas las
especies, desde los protozoos hasta el hombre.
El comportamiento habitual de un animal es una mezcla de taxias y otros reflejos, pautas fijas de
conducta y autoadiestramiento, todo ello entremezclado.
Domesticacin
La domesticacin de una especie produce alteraciones fsicas y fisiolgicas respecto a los antepasados
salvajes. Esto tambin afecta al comportamiento. El comportamiento de los animales domesticados no
es como el de sus antepasados salvajes. Los animales domesticados son menos selectivos en sus
mecanismos desencadenantes innatos que sus antepasados silvestres. Cada especie de faisn o
gallina salvaje reconoce a los polluelos de su especie por los dibujos de las plumas coloreadas de la
parte superior de la cabeza. Una hembra de faisn dorado picar a un pollo de faisn plateado porque
no reconocer los dibujos de las plumas de la parte superior de la cabeza. Las gallinas bankiva
(antepasados de las gallinas domsticas) tambin lo hacen, pero las gallinas domsticas no. El
mecanismo desencadenante innato de las gallinas domsticas es muchsimo menos selectivo que el de
las bankiva por un proceso de domesticacin.
Cuando una gallina bankiva pone huevos en el suelo de la selva, lugar ms peligroso que las ramas de
los rboles, se aparta del nido unos cientos de metros y cacarea fuerte para atraer la atencin de
cualquier depredador que pase por las cercanas y desviarlo del nido. En la gallina domstica, el
proceso de domesticacin propici el mantenimiento de una mutacin en el instinto. Ahora la gallina
cacarea dentro del nido nada ms poner el huevo. En la naturaleza, la seleccin natural habra barrido
tal mutacin, porque ahora atraera la atencin de los depredadores hacia el nido. En cautividad se
mantiene porque no hay depredadores.
Las alteraciones en el comportamiento de los animales domsticos se deben a mutaciones naturales
que aparecen en algn individuo y que son seleccionadas por los criadores por conveniencia. Algunos
183

animales domsticos, como el perro, tienen un carcter neotnico, son psicolgicamente cachorros
toda su vida. Por eso son tan afables y juguetones. Otro comportamiento que se altera es el del cortejo.
Tpicamente, los animales domsticos tienen comportamientos de cortejo mucho ms reducidos que
sus antepasados salvajes. Ello le conviene al criador para no perder tiempo cuando se quiere cruzar
una hembra por un semental.
184

Animales en Cautividad
Mantener un animal en cautividad no altera su fisiologa, salvo que sufra estrs. Pero eso tambin le
puede pasar en la naturaleza. Por tanto, tampoco altera su conducta innata. El sistema nervioso central
de los animales en cautividad sigue generando estmulos internos y, por tanto, estos animales siguen
teniendo una motivacin interna a desencadenar los comportamientos tpicos de su especie. Por
desgracia, las jaulas de los animales suelen ser muy pobres en estmulos seal. Los animales no
tienen ante qu reaccionar. Esto produce una acumulacin de estimulacin endgena anormalmente
alta que puede conducir a actividades en el vaco o estados de frustracin. La frustracin se define
como un estado de motivacin que ocurre cuando las acciones de un animal no llevan a las
consecuencias o recompensa esperada. La frustracin conduce a cambios fisiolgicos, estrs y
anormalidades en la conducta que pueden falsear los resultados de los experimentos que se estn
realizando.
Un ejemplo muy conocido es el del mapache. A los mapaches se los llama ositos lavadores. La
razn es que se dice que lavan su comida. Eso slo lo hacen en cautividad, no en la naturaleza. En la
naturaleza viven junto a ros en los que buscan animalillos para alimentarse de ellos. Los buscan
mediante el tacto de las manos, palpando las piedras. Se trata de una pauta fija de accin. En las
primitivas jaulas de zoolgico no tenan ningn ro, slo un suelo de cemento y un plato con comida y
otro con agua. El animal se frustraba tanto que acababa echando la comida en el plato con agua, para
palparlo con las manos como hara en la naturaleza. De ah la impresin de que estaba lavando su
comida.
Hace aos, en el zoolgico de Londres tenan un armadillo en una jaula con suelo de cemento que
estaba siempre muy nervioso. Corra de aqu para all sin parar, como si buscase algo. Los armadillos
en la naturaleza suelen enterrarse en la tierra. Echaron una capa de tierra sobre el suelo de cemento y
ello resolvi el problema.
Lo ideal es que un animal en cautividad pueda desencadenar todos los comportamientos innatos
tpicos de su especie. Como esto no siempre es posible, debera procurarse que pueda desencadenar
la mayor cantidad de ellos. Para ello es importante conocer el comportamiento de ese animal en la
naturaleza.
Pero las especies ms tpicas en animalarios, como el ratn casero o la rata parda, han sufrido un
proceso de domesticacin que puede haber producido una alteracin en algunos comportamientos
instintivos. Como esta alteracin es gentica, puede haberse producido slo en algunas estirpes y en
otras, no.
La falta de estmulos medioambientales conduce, adems, al aburrimiento de los animales. Los
animales emplean tcnicas para combatir el aburrimiento. Una de ellas consiste en alargar cualquier
acto para que dure ms. Por ejemplo, muchos ratones alargan innecesariamente su acicalamiento
personal o el de sus congneres, resultado con ello que se arrancan el pelo de tanto lamrselo
(peeling). Otros animales alargan la exploracin de su territorio (la jaula) con el resultado de que
185

acaban desarrollando movimientos estereotipados, repetitivos y sin fin real alguno. Otros alargan el
acto de alimentarse, por lo que se vuelven obesos.
Cuando un animal en cautividad desencadena un comportamiento pernicioso, hemos de preguntarnos
si se trata de una aberracin producto de una cautividad inadecuada o de un comportamiento natural
que se vuelve pernicioso en cautividad.
Un problema que tenan los aficionados a la avicultura cuando criaban aves tales como mirlos o
zorzales era que estas aves cortejaban, ponan huevos, los incubaban y alimentaban a los pollos, todo
ello de manera normal. Un buen da, sin ms, agarraban a las cras y las arrojaban fuera del nido para
dejarlas morir de hambre en el suelo de la jaula. Esto no es ningn comportamiento aberrante producto
del cautiverio. Lo que pasaba es que como estas aves en la naturaleza alimentan a sus hijos con
insectos y stos son difciles de cazar, llevan poco alimento al nido, por lo que los pollos siempre estn
hambrientos. Cuando los padres llegan al nido, los pollos inmediatamente les piden de comer abriendo
el pico y mostrndoles su interior coloreado. El nico caso en que un pollo no pide alimento es si se ha
muerto. La inmovilidad del pollo constituye el estmulo seal del comportamiento instintivo de echar
fuera del nido a los pollos muertos. Como en cautividad se proporcionaba abundante alimento a las
aves, los pollos dejaban en seguida de tener hambre, as que cuando los padres llegaban al nido no les
pedan comida y permanecan inmviles. Los padres interpretaban que se haban muerto y los
arrojaban fuera del nido. Este problema se arregla simplemente dndoles menos comida para que
siempre estn un poco hambrientos.
En la naturaleza, cuando las ratonas se estresan (debido, por ejemplo, a la cercana de un depredador)
es frecuente que se coman a sus cras. Esto es un comportamiento natural. En cautividad, cualquier
molestia (limpieza de la jaula, por ejemplo) puede provocar tal estado de estrs en la ratona que se
coma sus cras, perjudicando as el experimento. No se trata de ningn comportamiento aberrante. Al
tener un origen gentico, sera tericamente posible la aparicin de alguna estirpe en la que esta
conducta haya mutado y las ratonas ya no se coman a sus cras si se estresan. La conservacin de
esta estirpe sera aconsejable en cautividad.
Tambin es comn en roedores que se coman aquellas cras dbiles o enfermizas. En la naturaleza
esto tiene un sentido biolgico de perpetuacin de la especie, al evitar el gasto energtico de tener que
alimentar a una cra que se va a morir de todos modos. Por desgracia, en el laboratorio muchas veces
los experimentos conllevan un debilitamiento o malformacin de las cras. Las madres detectan esto y
se las comen, perjudicando as la investigacin. No es ninguna aberracin, sino un comportamiento
natural.
Los ratones caseros y las ratas pardas viven en la naturaleza en grupos llamados clanes. Un clan se
origina cuando un macho copula con una hembra, tienen hijos y estos, cuando llega la edad adulta, no
abandonan a sus padres, sino que permanecen con ellos, se aparean unos con otros y tienen ms
cras. De esta forma, el nmero de integrantes de un clan crece exponencialmente. Sobrepasado cierto
nmero, los miembros del clan son incapaces de reconocerse personalmente unos a otros. El nico
carcter que les permite saber que el otro es tambin miembro del mismo clan es el olor: todos los
miembros del mismo clan huelen igual. Los miembros del mismo clan son muy tolerantes unos con
186

otros, pero muy territoriales e intolerantes con miembros de otros clanes. Los distintos clanes se
combaten entre s. En el caso del ratn casero, los verdaderamente combatientes son los machos. Los
hermanos de camada huelen todos igual, as que se toleran. Pero en el momento en que se separan
para aparearse con otras hembras, cambian de olor, por lo que no pueden volver a juntarse, ya que no
pueden reconocerse, interpretan que el otro pertenece a un clan distinto y combaten hasta la muerte.
Esto no pasa con las hembras.
187

Enriquecimiento Ambiental y Comportamiento

Como las jaulas de los animalarios son medios ambientes muy pobres en estmulos y esto puede
frustrar a los animales, conviene proporcionarles objetos artificiales que acten como estmulos seal.
Esto es el enriquecimiento ambiental.
La clave de un buen enriquecimiento ambiental estriba en elegir los objetos que se van a introducir en
la jaula de manera que tengan suficientes caractersticas en comn con los estmulos seal naturales
como para que los mimeticen y el animal reaccione ante ellos cmo reaccionara ante un autntico
estmulo seal en la naturaleza. El enriquecimiento ambiental permite que el sujeto desencadene las
pautas de accin fijas tpicas de su especie, previniendo as que los estmulos endgenos generados
por el sistema nervioso central se acumulen demasiado y el animal se estrese.
A veces, el enriquecimiento ambiental, lejos de relajar a los animales, lo que consigue es estresarlos
an ms. Ello se debe a que los objetos introducidos en la jaula no se han elegido correctamente y no
mimetizan suficientemente bien los estmulos seal que el animal necesita. El sujeto se encuentra con
un objeto con el que no sabe cmo reaccionar, que no comprende, que no le sirve para nada, que le
es ajeno y que podra ser potencialmente peligroso.
Una buena norma es la siguiente: Cuantas ms posibilidades de eleccin tenga un animal, menos
probabilidad hay de que nos equivoquemos en su mantenimiento en cautividad. Por ejemplo, se le
pueden dar a un ratn distintos elementos de enriquecimiento ambiental y dejar que l elija sus
preferidos (casetas, materiales para roer y fabricarse el nido, lecho, etc.).
Un ejemplo de enriquecimiento ambiental son los acuarios de reproduccin del danio cebra (Danio
rerio). Los danios cebra son unos peces asiticos de agua dulce que se emplean en investigacin
cientfica. Se trata de genuinos animales salvajes que an no han sufrido un proceso de domesticacin,
por lo que su comportamiento contina siendo idntico al de los animales que viven en la naturaleza.
Se trata de animales ovulparos y de fecundacin externa. Para poder reproducirlos en cautividad, se
les han de ofrecer estmulos seal adecuados. Estos animales se reproducen principalmente durante el
monzn de verano a la orilla de las lagunas en las que viven. Ponen sus huevos en zonas
preferentemente cubiertas de plantas acuticas, cuando sale el sol. Se coloca a los reproductores en el
acuario por la tarde y se recogen los huevos a la maana siguiente. Los acuarios de reproduccin para
esta especie imitan la orilla de un lago cubierta de plantas acuticas. Los acuarios son desnudos y
constan de 2 mitades: una superior de fondo fenestrado para permitir el paso de los huevos y salvarlos
de la voracidad de sus padres y una inferior para recoger los huevos definitivamente. Las plantas
acuticas de la orilla se imitan colocando un trozo de fibra artificial verde que puede desinfectarse tras
su uso y volver a utilizarse. La luz del amanecer se imita mediante el encendido de las luces de la sala.
Una orilla es un plano inclinado. Si se inclina la mitad superior de la pecera de forma que un extremo
llegue hasta el borde del agua, se proporciona a la pareja reproductora todo un rango de profundidades
para que pueda elegir dnde quiere poner los huevos. Usualmente, eligen la zona ms somera incluso
aunque salgan por encima del nivel del agua y queden expuestos al aire. Durante el monzn, la
temperatura del agua baja. Aadir un chorro de agua fra estimula la puesta.
188

Desde el punto de vista humano, este acuario de reproduccin no se parece a la orilla de un lago, pero
desde el punto de vista de los animales s. Esto significa que este modelo de acuario de reproduccin
tiene suficientes caractersticas en comn con la orilla de un lago para mimetizarla y que el mecanismo
desencadenante innato del comportamiento de cortejo y puesta de huevos de los danios cebra
seleccione especficamente los estmulos seal que mimetizan la orilla de un lago, desechando todos
los dems.
189

Nutricin Animal
Bibliografa
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Harr, Rom y Lamb, Roger. Diccionario de etologa y aprendizaje animal. Ed. Paidos. 1991.
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S.A. 1 ed 1974.
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Tinbergen, Nikolaas. The study of instinct. Clarendon Press. 1951.
4.
Lorenz, Konrad. Fundamentos de la etologa: estudio comparado de las conductas. Ed. Paidos. 2000
NUTRICIN ANIMAL

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192

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La nutricin de los animales juega, sin duda, un papel muy importante en la investigacin. No solo es
esencial para mantener la salud del animal sino que adems, es en s misma una de las variables del
estudio. La nutricin puede afectar tambin a los resultados experimentales como una variable
indeseada si no es la adecuada para los animales. A lo largo de este tema, repasaremos:
-
Los nutrientes bsicos necesarios para una correcta alimentacin.
Los requerimientos nutricionales de las principales especies utilizadas en el laboratorio.
De qu forma las manipulaciones dietticas pueden ser utilizadas como parte de un protocolo
experimental.
Las formulaciones ms comunes de las dietas para animales de experimentacin.
193

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Bioqumica Nutricional y Nutrientes Bsicos

Las macromolculas que componen los sistemas biolgicos (clulas, tejidos, rganos, etc.) pueden
clasificarse en 4 grupos:
-
Carbohidratos.
cidos nuclicos.
Protenas.
Lpidos.
Es importante tener una idea de las funciones que estas macromolculas realizan dentro del organismo
y de qu fuentes podemos obtenerlas o sintetizarlas para comprender las necesidades de los animales
de ciertos nutrientes.
Carbohidratos
Los carbohidratos son molculas constituidas por tomos de hidrgeno (H), oxgeno (O) y carbono (C)
a partir de los cuales se forman las unidades bsicas de los carbohidratos: los monosacridos (e.g.,
glucosa, fructosa). Los carbohidratos se clasifican segn el nmero de monosacridos que los
constituyen en:
-
Oligosacridos: formados por entre 1 y 6 monosacridos (e.g., sucrosa, lactosa).
Polisacridos: formados por ms de 6 monosacridos (e.g., celulosa, almidn).
Las fuentes primarias de carbohidratos en la dieta de animales son los cereales; maz, trigo o avena.
Algunas dietas para animales contienen carbohidratos en forma de almidn purificado y sucrosa. Los
carbohidratos aportan alrededor del 45% de las caloras de una dieta animal.
Digestin y Absorcin
Los carbohidratos ingeridos en la dieta son digeridos en primer lugar por una enzima que se encuentra
en la saliva y en secreciones las pancreticas: la amilasa. Esta primera digestin va a facilitar la accin
de otras enzimas como son la maltasa, la lactasa o la sucrasa. El resultado final de todo este proceso
es la liberacin de glucosa de los carbohidratos ingeridos ms complejos.
La glucosa es utilizada en el organismo como fuente de energa as como para la sntesis de
compuestos tales como las glicoprotenas o complejos protena-azcares. La glucosa excedente puede
ser transformada en Glucgeno y almacenada en el organismo para su liberacin a demanda.
Aminocidos y Protenas
Los aminocidos son las molculas que componen las protenas. Existen 20 aminocidos clsicos que
se dividen en 2 grupos:
194

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Esenciales.
No esenciales.
Los aminocidos denominados esenciales son aquellos que deben ser ingeridos en la dieta para
garantizar la supervivencia del organismo. Los aminocidos no esenciales, aunque pueden estar
presentes en la dieta, pueden ser sintetizados por el organismo. Distintas especies animales pueden
tener aminocidos esenciales distintos.
Las protenas, que pueden ser de origen vegetal o animal, contienen distintos perfiles de aminocidos.
Ciertas protenas de origen vegetal son deficientes en determinados aminocidos esenciales para
algunos animales, mientras que las de origen animal tienen una composicin de aminocidos ms
adecuada a los requerimientos del animal lo que las convierte en una excelente fuente de protenas.
Aminocidos y protenas van a tener una funcin esencial en la formacin de tejidos tales como
msculo, hueso, rganos, nervios, etc.
Digestin y Absorcin
Una vez que el alimento es masticado se inicia la ruptura (hidrlisis) de las protenas en el estmago
gracias a la accin de los jugos gstricos y una enzima, la pepsina. Otras enzimas como la tripsina, la
quimotripsina o la elastasa actan sobre las protenas hidrolizadas facilitando la liberacin de los
aminocidos que pueden ser absorbidos a travs de la pared del intestino delgado. Una vez en el
torrente sanguneo, los aminocidos son distribuidos a las clulas de todo el organismo dnde sern
utilizados para sntesis de nuevas protenas; protenas estructurales, enzimas, hormonas, etc.
Lpidos
La unidad esencial de los lpidos son los cidos grasos. La unin de 3 cidos grasos constituye un
triglicrido. Una mezcla de cidos grasos y triglicridos que es slida a temperatura ambiente se
denomina grasa mientras que si esta mezcla es lquida a temperatura ambiente recibe el nombre de
aceite. Generalmente, las grasas animales a temperatura ambiente son slidas mientras que las
vegetales son lquidas.
Al igual que ocurre con los aminocidos, ciertos cidos grasos, denominados por ello esenciales,
deben ser ingeridos con la dieta ya que no pueden ser sintetizados por el organismo. Los cidos grasos
linolico y linolnico son esenciales para los animales. Ambos son componentes estructurales de las
membranas celulares, intervienen en los procesos de oxidacin para la produccin de energa y son
piezas bsicas en la sntesis de un grupo de hormonas denominadas prostaglandinas.
Las grasas y aceites aportan entre un 10% y un 25% de las caloras de una dieta animal dependiendo
del estatus del animal (gestante, crecimiento, lactacin, envejecimiento, etc.).
Digestin y Absorcin
La digestin de las grasas comienza en el estmago. En cerdos, perros y conejos, el estmago secreta
una enzima llamada lipasa gstrica. En ratas y ratones, la lipasa es secretada en su forma inactiva por
195

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unas glndulas de la lengua pasando a su forma activa en el estmago. La lipasa produce la hidrlisis
de entre un 10 y un 30% de los triglicridos. La accin de la lipasa contina en el intestino delgado
dnde otras enzimas se unen a la hidrlisis de las grasas dando lugar a la liberacin de sus
componentes: glicerol y cidos grasos que sern absorbidos a travs de la pared intestinal en un
proceso facilitado por las sales biliares.
Una vez distribuidos por el organismo, los cidos grasos se incorporan a rutas metablicas especficas
o se integran en estructuras celulares o tisulares.
Vitaminas
Las vitaminas son un grupo de compuestos orgnicos que deben aportarse con la dieta en pequeas
cantidades. Estos compuestos suelen actuar como colaboradores de enzimas (coenzimas) en muchas
rutas metablicas. La mayora de las vitaminas deben ser transformadas a su forma activa una vez
ingeridas. Por ejemplo: A (cido retinoico), D, tiamina, niacina (NAD), etc. Las vitaminas se clasifican
en 2 grupos en funcin de sus caractersticas de solubilidad:
-
Vitaminas hidrosolubles.
Vitaminas liposolubles.
Las vitaminas hidrosolubles deben ser ingeridas con la dieta diariamente ya que no pueden ser
almacenadas en el organismo, por el contrario las liposolubles s pueden almacenarse y son
absorbidas con las grasas de la dieta. Las vitaminas hidrosolubles se detallan en la tabla siguiente:
Vitamina
Funcin
Vitamina A
Vitamina D
Vitamina E
Vitamina K
Diferenciacin celular, funcin del sistema reproductivo, visin.

Mantenimiento de niveles sanguneos de calcio
Revierte formas txicas del oxgeno
Interviene en procesos de coagulacin
Vitaminas liposolubles:
196
Vitamina
Funcin
Tiamina
Riboflavina
Niacina
cido pantotnico (vit B6)
Cianocobalamina (vit B12)
cido flico
Biotina
cido ascrbico vit C)
Metabolismo energtico
Coenzima A, metabolismo energtico, biosntesis
Coenzima en muchas rutas, maduracin de glbulos rojos
Rutas de sntesis
Rutas de sntesis
Formacin de colgeno, sntesis de hormonas, antioxidante

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Minerales
Los minerales son componentes inorgnicos imprescindibles para la vida. Algunos minerales se
almacenan en el organismo y se utilizan a demanda mientras que otros no se almacenan en formas
utilizables en el cuerpo. Se excretan en orina y deben ser aportados en la dieta de manera regular.
Algunas de las ms importantes se recogen en la tabla siguiente:
Mineral
Sodio (Na) / Cloro (Cl)
Funcin / lugar de accin
Potasio (K)
Balance osmtico y acido-base, impulso nervioso

Balance osmtico y acido-base, impulso nervioso, coenzima
Magnesio (Mg)
Esqueleto, msculo, metabolismo energtico
Calcio (Ca)
Esqueleto, enzimas, protenas de unin a calcio, impulso nervioso
Fsforo (P)
Esqueleto, metabolismo energtico, componente de ADN y ARN
Zinc (Zn)
Funciones genticas unido a protenas, integridad de la piel
Cobre (Cu)
Enzimas oxidativos, maduracin de glbulos rojos
Hierro (Fe)
Hemoglobina (sangre) y mioglobina (msculo), enzimas
Iodo (I)
Hormonas tiroideas, metabolismo corporal
Manganeso (Mn)
Enzimas oxidativos, sntesis de cidos grasos, tejido conectivo
Selenio (Se)
Sistemas enzimticos, reduccin de perxidos
Las formas inicas de los minerales en los jugos gstricos e intestino son reabsorbidas en el tracto
intestinal y reciclados. Las funciones de los minerales en el organismo son enormemente variadas.
197

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Requerimientos Nutricionales
Los animales de laboratorio deben disponer de una dieta perfectamente equilibrada que aporte todos
los nutrientes necesarios para el mantenimiento de la homeostasis. En una dieta equilibrada tpica,
deben aportarse aproximadamente unos 50 nutrientes bsicos en las concentraciones adecuadas. No
slo existen diferencias en cuanto a los requerimientos nutricionales entre especies distintas, sino que
otras caractersticas como la estirpe, edad, sexo, estado reproductivo, estatus microbiolgico o las
condiciones medioambientales varan notablemente las necesidades de los distintos nutrientes.
Ratas y Ratones
Las dietas formuladas especficamente para ratas y ratones aportan los nutrientes requeridos en las
proporciones adecuadas. Puesto que las ratas, ratones, hmsteres y jerbos tienen requerimientos
nutricionales similares, en general la misma dieta puede ser utilizada para todas estas especies.
Energa
Es aportada esencialmente por los carbohidratos y, sobre todo, por las grasas. La densidad calrica de
una dieta se refiere al porcentaje de grasa de la misma. Cuanto mayor sea la densidad calrica, menor
ser la ingesta de alimento necesaria para mantener el requerimiento energtico de un animal.
El requerimiento energtico depende en gran medida de la cepa, edad y estado fisiolgico (etapa
reproductiva, crecimiento, envejecimiento etc.) del animal. Debido al tamao corporal de la rata y que
puede consumir diariamente una mayor cantidad de comida, esta especie no es tan sensible como el
ratn a la densidad energtica de la dieta. Por ejemplo, durante la etapa de crecimiento, la dieta del
ratn debe contener entre un 5.5% y un 9% de grasas, mientras que la rata puede alcanzar un grado
ptimo de crecimiento con un aporte de grasa de entre un 4% y un 5.5%. Durante el periodo de
lactacin, la dieta de ratas y ratones debe contener un porcentaje de grasa de entre un 5% y un 9%. Si
bien, ciertas cepas de ratn muy prolficas, pueden necesitar un porcentaje de grasas de hasta un 11%.
Las ratas alimentadas ad libitum o con dietas de alto contenido energtico, desarrollan obesidad con la
edad lo que puede distorsionar los datos de supervivencia en estudios de envejecimiento debido al
aumento en la incidencia de fallos renales y cardiacos relacionados con la obesidad. En estudios de
carcinognesis, la obesidad puede dificultar el diagnstico de tumores. Para evitar la aparicin de
obesidad, es conveniente evitar la alimentacin ad libitum y aportar la dieta de forma racionada.
Protenas y Aminocidos
Una dieta equilibrada debe contener entre un 14% y un 24% de protena, siendo los ratones los que
necesitan unos niveles ms elevados de este nutriente. Las protenas son la fuente de aminocidos
esenciales y en las dietas de laboratorio proceden principalmente de harinas de soja, maz, pescado,
trigo, etc.
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Minerales y Vitaminas
La dieta debe aportar tambin un balance adecuado de vitaminas y minerales para el ptimo
crecimiento y desarrollo del animal. En el caso de una alimentacin racionada, hay que prestar especial
atencin al aporte de minerales y vitaminas con la dieta para evitar carencias o desequilibrios de estos
nutrientes.
Nutriente
Porcentaje ptimo
Grasa
4 - 12
Protena
14 - 24
Hidratos de carbono
45 60
Fibra
2.5
Cobayos
Los cobayos son herbvoros que normalmente consumen gran cantidad de forraje. Sin embargo, los
piensos de laboratorio contienen ms energa y menos fibra de la que una cobaya consumira en la
naturaleza por lo que es conveniente suplementar la dieta con heno. Uno de los aspectos ms
problemticos de la nutricin de los cobayos es su requerimiento de vitamina C. Otro problema es que
los cobayos desarrollan durante los primeros meses de vida preferencias especficas por un tipo de
dieta e incluso por un dispositivo de alimentacin determinado y puede ser difcil cambiar estos hbitos
en la edad adulta.
Energa
Dado que son herbvoros, los cobayos tienen la capacidad de producir la fermentacin de la fibra y
obtener energa a partir de este nutriente. Es habitual que la dieta de las cobayas contenga entre 3 y 4
veces ms fibra que las dietas de ratn, es decir, hasta un 16% de fibra.
Las cobayas requieren 10 aminocidos esenciales en la dieta. Las cobayas tienen la capacidad de
digerir las protenas de una amplia variedad de vegetales. Aunque los requerimientos proteicos para el
cobayo adulto no han sido determinados, se ha demostrado que las dietas de ingredientes naturales
que aportan entre un 18% y un 20% de protena cruda facilitan un desarrollo satisfactorio del cobayo.
Si la dieta no aporta un balance ptimo de calcio, fsforo, potasio y magnesio, puede producirse la
calcificacin de tejidos blandos debido a que un exceso de calcio y fsforo puede disminuir la eficiencia
de la utilizacin de magnesio. Por ejemplo, la alfalfa puede contener un elevado porcentaje de calcio y
fsforo pero bajos niveles de magnesio. Si se alimenta a las cobayas con grandes cantidades de alfalfa
junto con una dieta equilibrada, puede producirse una deficiencia de magnesio lo que provocar la
aparicin de depsitos minerales en el tejido blando, es decir, la calcificacin de dicho tejido.
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Conejos
Al igual que las cobayas los conejos son animales herbvoros por lo que su dieta se basa
exclusivamente en alimentos de origen vegetal. Los conejos, al igual que ratas y ratones, practican la
coprofagia con la particularidad de que los conejos fabrican 2 tipos de heces; duras y blandas. Las
heces blandas (cecotrofos) se producen durante la noche y son ingeridas directamente del ano segn
son excretadas. Este tipo de heces son muy ricas en vitaminas del complejo B entre otros nutrientes.
La coprofagia les ofrece, la capacidad de aprovechar al mximo los nutrientes que no han sido
absorbidos en una primera digestin.
Energa
Los requerimientos energticos para el mantenimiento, cra o lactacin de conejos no han sido
completamente descritos an. Los conejos digieren muy eficientemente el almidn presente en los
cereales siendo sta una de sus principales fuentes de energa. Sin embargo, una aportacin excesiva
de cereales puede provocarles trastornos digestivos.
Las bacterias presentes en el intestino delgado de los conejos contribuyen a la digestin de la fibra
dando lugar a la produccin de cidos grasos voltiles lo que aumenta la utilizacin energtica de este
nutriente por los conejos. Se estiman apropiados unos porcentajes de fibra del 18% de fibra para cra y
lactacin y del 25% para mantenimiento. El alto contenido en fibra de la dieta ayuda a promover la
motilidad gstrica y reduce el sobre acicalamiento, por lo que disminuye la formacin de bolas de pelo
en el estmago.
Aunque no en grandes cantidades, ciertos cidos grasos son esenciales para los conejos y deben ser
debidamente aportados en la dieta. Excesivos niveles de cidos grasos pueden provocarles diarreas.
Son 10 los aminocidos esenciales para los conejos. Las principales fuentes de aminocidos en las
dietas de conejo son la soja y la alfalfa. Los porcentajes mnimos de protena estimados apropiados
para las distintas fases del ciclo vital del conejo son los siguientes:
Estadio
Crecimiento
Porcentaje ptimo
T
16
Gestacin
15
Lactacin
17
Mantenimiento
12
En la mayora de los mamferos, los niveles de calcio en sangre estn regulados por la accin de una
hormona, la calcitonina. Sin embrago, en los conejos, los niveles de calcio estn directamente
influenciados por el contenido en calcio de la dieta. Por ello, una dieta excesivamente rica en calcio
200

Nutricin Animal
puede causar concentraciones elevadas de este mineral en sangre. La ruta de excrecin de calcio
mayoritaria en conejos es la orina, al contrario de lo que ocurre en la mayora de mamferos en los que
el calcio es excretado principalmente en la bilis. El exceso de calcio ser eliminado por tanto en la orina
siendo los conejos muy tolerantes a dietas ricas en calcio (con porcentajes de hasta el 4.5%). Uno de
los minerales esenciales en la dieta de los conejos es el cobalto, requerido para la sntesis de vitamina
B12 por los microorganismos del tracto gastrointestinal.
Cerdos
En la actualidad, se utilizan tanto cerdos de granja como cerdos miniatura (minipigs) en diversas
disciplinas de la investigacin biomdica. Los minipigs son cerdos criados especficamente para
investigacin, al ser su tamao menor que el de un cerdo de granja presentan curvas de crecimiento
menos acusadas. An as, los minipigs son fisiolgicamente similares a los cerdos de granja y, por lo
tanto, sus requerimientos dietticos muy parecidos.
Energa
Los cerdos criados para consumo humano se alimentan ad libitum para favorecer un rpido crecimiento
y un mayor engorde. La alimentacin de los cerdos criados para laboratorios debe ser racionada para
prevenir la aparicin de obesidad. Esta restriccin puede acompaarse de reduccin en la ingesta
diaria o utilizando dietas de bajo contenido calrico y alto contenido en fibras. Si se opta por una
restriccin de la ingesta utilizando una dieta normal, ser necesario aportar algn tipo de
enriquecimiento ambiental en forma de objetos / golosinas de nulo o bajo aporte calrico para prevenir
situaciones de estrs.
A menudo se utilizan porcentajes de fibra de hasta el 18% con el fin de reducir el aporte calrico de las
dietas y conseguir un efecto de saciedad que reduzca el estrs provocado por la menor ingesta de
caloras.
Son 10 los aminocidos esenciales para los cerdos ya que son incapaces de sintetizarlos. Dado que
los cerdos son omnvoros, los aminocidos pueden ser aportados tanto de fuentes vegetales como
animales. Aunque los lechones pueden necesitar hasta un 26% de protena en la dieta, cuando se
cran en el laboratorio generalmente se alimentan para obtener un menor crecimiento por lo que no se
requieren niveles superiores al 16%.
Puesto que en la mayora de los casos los cerdos se alimentan en condiciones de ingesta restringida,
las dietas deben tener reforzado su contenido en minerales y vitaminas para prevenir deficiencias en
estos nutrientes. Ms de una docena de compuestos inorgnicos son requeridos en la dieta diaria de
los cerdos. Hay que tener en cuenta que en la naturaleza, los cerdos se cran en contacto directo con
suelos de los que pueden extraer ciertos minerales al ser ingeridos. Por ejemplo, los lechones criados
201

Nutricin Animal
en granjas obtienen el hierro necesario para su crecimiento de la tierra que ingieren y de las heces de
sus madres. Privados de estas fuentes, el hierro debe ser aportado en la dieta.
En cuanto a las vitaminas, tanto las liposolubles como hidrosolubles, a excepcin de la vitamina C,
deben ser aportadas en la dieta diaria.
Perros
Los perros son bsicamente carnvoros, aunque no carnvoros obligados como, por ejemplo, los gatos.
Esto significa que pueden desarrollarse perfectamente con dietas compuestas por fuentes de nutrientes
distintas a la carne. Estas dietas suelen ser extrusionadas (con ingredientes previamente cocinados) lo
que facilita la utilizacin de nutrientes provistos por productos de origen animal, vegetal o sinttico.
Energa
Los perros mantenidos en el ambiente de laboratorio, con ejercicio limitado, pueden desarrollar
obesidad fcilmente por lo que la ingesta calrica debe ser ajustada en funcin del peso, nivel de
ejercicio, constitucin y condicin general del animal.
Los cachorros pueden llegar a necesitar 2 veces ms caloras por unidad de peso corporal (2x) que los
perros adultos. Cuando el peso corporal alcanza el 50% del peso esperado para un adulto, la ingesta
calrica debe reducirse a 1.6x y es aconsejable reducir esta ingesta hasta 1.2x cuando se llega al 80%
del peso adulto.
Los requerimientos energticos durante la gestacin y lactacin son igualmente superiores; hasta 3x en
caso de camadas numerosas. Aunque la mayora de las dietas contienen altos porcentajes de grasa
que proveen hasta el 35% de las caloras, los perros son capaces de utilizar las caloras provenientes
del almidn cocinado. Los perros necesitan ingerir carbohidratos como fuente de glucosa para evitar
situaciones de hipoglucemia.
Son 10 los aminocidos esenciales para los perros y deben ser aportados en la dieta. Factores tales
como la digestibilidad, composicin en aminocidos, biodisponibilidad, densidad calrica de la dieta y
estado fisiolgico del perro deben ser tenidos en cuenta para determinar los niveles ptimos de
protena de la dieta.
En general, se requiere un porcentaje de protena mnimo del 20% para asegurar la ganancia de peso,
mantenimiento y apariencia del animal. An as, dietas que contienen hasta un 27% de protenas
pueden necesitarse en ciertas condiciones (cra, elevado ejercicio fsico, etc.).
202

Nutricin Animal
Los minerales requeridos en mayor cantidad (macrominerales) en los perros son; calcio, fsforo,
magnesio, sodio, potasio y cloro. Los minerales que se necesitan en mucha menor cantidad (minerales
traza) son: hierro, zinc, cobre, manganeso, iodo y selenio.
Respecto a las vitaminas, los requerimientos de los perros son muy similares a los de la mayora de los
mamferos con la particularidad de que los perros adultos sanos no requieren aporte de vitamina C en
la dieta.
Primates no Humanos
Casi 30 especies distintas de primates no humanos se utilizan actualmente en investigacin cada una
de las cuales tiene caractersticas fisiolgicas especficas. En este apartado, se describen los
requerimientos nutricionales generales de monos del viejo mundo (i.e., gneros Cynomolgus y
Rhesus), monos del nuevo mundo (gnero Saimiri) y chimpancs.
Energa
Debido a la diferencia de tamao entre monos del viejo mundo (de 10 a 75 kg) y del nuevo mundo (de
1 a 20 kg) los requerimientos energticos de unos y otros son muy diferentes. Por ejemplo, en el primer
caso, una galleta tpica para estas especies contiene un 5% de grasa y aporta el 13% de las caloras
diarias necesarias, mientras que en el segundo caso, una galleta especialmente formulada para estas
especies contiene un 9% de grasa y aportar el 22% de las caloras diarias. La ingesta diaria de grasas
debe estar muy contralada para evitar el desarrollo de obesidad, diabetes o enfermedades
cardiovasculares.
Los requerimientos en cuanto a la ingesta de protenas en estas especies son similares a los de los
humanos y equiparables en los distintos estadios de desarrollo. En las dietas a base de ingredientes
naturales (no purificadas) las fuentes de protena ms habituales son los cereales, harinas de pescado,
lcteos y, en algunos casos, huevos.
Para las especies del nuevo mundo la dieta debe contener al menos un 20% de protena mientras que
para las especies del viejo mundo, el suficiente un contenido proteico de entre el 15 y el 20%. Estos
porcentajes pueden variar en funcin de los estadios del desarrollo, situaciones de estrs, etc.
Un adecuado balance de vitaminas y minerales es necesario para el correcto desarrollo de estos
animales. Puesto que no sintetizan la vitamina C, ste nutriente debe ser aportado en la dieta en una
concentracin ni inferior a los 200 mg/kg. Debido a la baja estabilidad de esta vitamina, la fecha de
caducidad de las dietas debe ser respetada ya que el aporte de esta vitamina en dietas caducadas
puede no cumplir los requerimientos mnimos y causar trastornos por deficiencia de vitamina C.
203

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Peces
Dentro de las especies de peces utilizadas en investigacin hay especies herbvoras, carnvoras y otras
que pueden alimentarse tanto de plantas como animales. Para especies carnvoras hay disponibles 2
tipos de dietas: dietas vivas y dietas de laboratorio de ingredientes naturales. Las dietas vivas estn
constituidas por pequeos peces o crustceos como las Artemias. Al ser criados in situ estos
organismos, hay que tener precauciones para evitar contaminaciones de la dieta.
Las dietas de laboratorio estn diseadas para proveer una adecuada nutricin sin los costes y trabajo
asociados al mantenimiento de las dietas vivas. Lo ms comn es una alimentacin combinada de
dieta de laboratorio y dieta viva. Los requerimientos nutricionales en estas especies tambin varan
segn el estado de desarrollo siendo los requerimientos energticos de las larvas superiores a los de
los adultos.
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Nutricin Animal
Tipos de Dietas
Esterilizacin de Dietas
Con el fin de aumentar la seguridad en la utilizacin de dietas en ambientes de bioseguridad como los
animalarios de barrera y disminuir el riesgo de contaminaciones, las dietas suelen ser esterilizadas
antes de su uso. Actualmente hay disponibles 2 procesos para la esterilizacin de dietas: autoclavado y
esterilizacin.
Autoclavado
En este proceso, la dieta es mantenida a elevadas temperaturas durante un tiempo determinado. Esto
puede provocar la degradacin de algunos nutrientes termolbiles por lo que las dietas autoclavables
debern estar reforzadas en estos nutrientes.
Si se autoclavan dietas que no han sido especialmente formuladas para este proceso, es muy probable
que se produzcan deficiencias en nutrientes termolbiles. En el caso opuesto, aportar una dieta
formulada para autoclavar sin sufrir este proceso podrn producirse trastornos por exceso de ciertos
nutrientes. La tiamina y la vitamina A son 2 de los componentes ms sensibles al calor por lo que sus
niveles residuales despus del autoclavado de estos 2 compuestos se tomarn como indicativo de la
eficacia del proceso de autoclavado.
Irradiacin
Este proceso esteriliza la dieta mediante el uso de irradiacin gamma. La fuente de irradiacin utilizada
es normalmente el istopo de cobalto-60 que proporciona unos niveles de irradiacin suficientes para
disminuir la carga microbiana de la dieta hasta niveles aceptables para su utilizacin en zonas de
barrera. Puesto que este proceso no produce apenas aumento de calor, no se producir la degradacin
de nutrientes termolbiles y por lo tanto no es necesario el reforzamiento de la dieta en dichos
nutrientes.
Tipos de Dietas
Dietas de Ingredientes Naturales

La mayora de las dietas fabricadas para animales de experimentacin se componen de ingredientes
naturales. Cereales como el maz, trigo, avena o cebada se utilizan como fuente de carbohidratos. Las
fuentes de protena ms habituales son los subproductos de la industria harinera como el gluten o el
germen de trigo as como la soja, alfalfa deshidratada, harinas de pescado o productos lcteos. Los
minerales y vitaminas se suplementan en las cantidades adecuadas para cubrir los requerimientos
nutricionales de cada especie.
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Nutricin Animal
Estas dietas se presentan habitualmente en forma de pellets con la dureza adecuada a cada especie;
los roedores deben ingerir dietas con la suficiente dureza para producir el desgaste de los incisivos. En
el caso de perros, gatos y primates no humanos, las dietas se presentan en forma extrusionada para
asegurar la digestibilidad.
Dietas Purificadas
Dietas purificadas son aquellas en las que cada nutriente deriva de un ingrediente discreto
normalmente un ingrediente altamente refinado o procesado que a menudo se clasifican como
alimentos de grado humano. Ingredientes tpicos de estas dietas son la casena de la leche, el
almidn de maz, sucrosa, aminocidos cristalinos, fibra purificada, vitaminas y minerales sintticos y
aceites de consumo humano entre otros.
La principal ventaja de las dietas purificadas es que sus frmulas son abiertas es decir, cada dieta
tiene disponible su frmula en la que se describen de manera exacta y detallada todos los ingredientes
y sus cantidades incluyendo vitaminas y minerales. Estas dietas permiten un elevado control sobre el
aporte de los distintos nutrientes en la alimentacin de los animales de experimentacin.
Dietas Especializadas
Las dietas especializadas se formulan a demanda (segn requerimientos de la investigacin) a partir de
ingredientes purificados como el caso de las dietas purificadas de manera que puede aumentarse,
disminuir e incluso eliminar un nutriente concreto con el fin de estudiar el efecto que este tipo de
nutricin tendr en el animal. Algunas de las dietas especializadas ms comunes son:
-
Direct-Add Diets: dietas en las que el investigador requiere que se aade mayor cantidad de
algn componente que ya existe en la dieta.
Diet-Induced Obesity (DIO) Diets: dietas diseadas especficamente para favorecer la aparicin
de obesidad y resistencia a la insulina. Las dietas DIO contienen una variedad de fuentes de grasa
y carbohidratos que contribuyen al desarrollo de la obesidad.
Western Diets: dietas con elevado contenido en grasas y colesterol para favorecer el desarrollo
de enfermedades cardiovasculares.
Gluten-free Diets: algunas especies, particularmente especies de primates no humanos, son

incapaces de tolerar niveles altos de gluten en la dieta por lo que se han diseado dietas bajas en
gluten para evitar los problemas gastrointestinales provocados por esta intolerancia.
Salt Modified Diets dietas con contenidos de sales apropiados para favorecer el desarrollo de
hipertensin en el modelo animal apropiado.
Medicated Diets: dietas que contienen medicamentos en su composicin normalmente utilizadas

para el tratamiento de infecciones bacterianas o erradicar parsitos (e.g., fenbendazole) o para
causar la expresin de un fenotipo determinado (e.g., doxiciclina).
Imaging Diets: muchos investigadores utilizan biomarcadores fluorescentes junto con sistemas
de imagen ptica para evaluar los efectos de un tratamiento en animales. Los cereales contenidos
en las dietas tienen un alto grado de auto-fluorescencia lo que puede enmascarar la fluorescencia
propia del biomarcador e impedir el anlisis por imagen. Esta auto-fluorescencia ocurre en parte
206

Nutricin Animal
por la clorofila presente en ciertos ingredientes vegetales como la alfalfa. Para evitar esta
fluorescencia de fondo, es aconsejable que los animales se alimenten con una dieta purificada
especialmente formulada para este tipo de experimentos aproximadamente durante los 3 a 7 das
previos al estudio.
Dietas Lquidas
Las dietas lquidas se fabrican a partir de ingredientes purificados que se disuelven o resuspenden en
un lquido (e.g., agua o alcohol). Este tipo de dietas se utilizan en ciertos protocolos de investigacin
como en estudios del efecto de la ingesta de alcohol o cuando el animal es incapaz de masticar o el
estudio requiere de una dieta lquida.
207

Nutricin Animal
Papel de la Dieta en la Investigacin

Influencia del Tipo de Dieta
La dieta no solo influye en el estado fisiolgico y bienestar del animal por su composicin, tambin el
esquema de alimentacin elegido puede afectar el resultado de nuestro experimento. Algunos
esquemas de alimentacin pueden servirnos como herramienta para aumentar la estandarizacin en el
diseo experimental.
Ad libitum vs Alimentacin Racionada

En funcin de la especie y del objetivo del experimento, puede ser preferible una dieta restringida en
lugar de la alimentacin ad libitum (disponibilidad continua). Por ejemplo, la alimentacin ad libitum se
considera una mala prctica veterinaria para especies como perros, cerdos, gatos, primates en incluso
en ratas ya que son propensos a desarrollar obesidad con el consiguiente aumento de trastornos
derivados del sobrepeso. Se ha demostrado que la alimentacin ad libitum en ratas Wistar induce
degeneracin renal severa a los 9 meses de edad mientras que la alimentacin restringida al 75% de la
ingesta ad libitum la previene. Esto va a afectar negativamente los resultados de estudios de
envejecimiento al disminuir la supervivencia de los animales e introducir ruido en estudios de
toxicologa crnica.
Pair-feeding o Alimentacin Pareja

En ciertos estudios puede ser necesario equiparar la ingesta de comida entre el grupo control y el
tratado cuando la ingesta voluntaria difiera mucho entre ambos grupos. Esto suele pasar cuando la
sustancia a testar se administra en la dieta y aporta caractersticas de palatabilidad negativas (e.g., mal
sabor) o cuando el tratamiento afecta a la salud del animal impidiendo una correcta alimentacin.
Desde el punto de vista de la estandarizacin, el grupo control y el grupo tratado deben tener un
ingesta similar y realizarse ms o menos a las mismas horas del da, de otro modo, ser imposible
analizar nicamente los efectos del tratamiento. Los mtodos para equiparar la ingesta de ambos
grupos son:
-
Pesar la comida. Este mtodo consiste en pesar la comida ingerida por el grupo tratado y
administrar esa misma cantidad al grupo control al da siguiente. Una desventaja de este mtodo
es que puede ser que la cantidad total de comida del grupo control se dispensa de una vez y
quizs a horas en las que no es habitual la ingesta de alimento (e.g., al inicio de la fase de luz, es
decir, del perodo de descanso en los roedores). Esto puede inducir una diferencia notable en los
patrones de alimentacin entre el grupo control y el grupo tratado impidiendo de nuevo una
comparacin apropiada entre ambos grupos.
Dispensadores de comida. Puede entrenarse a los animales para que obtengan la comida al
activar el dispositivo que la contiene. Pueden acoplarse los dispensadores de manera que el grupo
control reciba la comida a la misma vez que el grupo tratado activa el dispositivo. Este sistema da
208

Nutricin Animal
lugar a una estandarizacin ptima tanto en las cantidades de comida ingerida como en los
patrones de alimentacin entre ambos grupos.
-
Administracin por sondaje oral. Mediante la administracin directa en el estmago, ya sea por
sonda gstrica o por la insercin de una cnula, podremos administrar exactamente la misma
cantidad de comida a la misma hora a todos los animales.
Sondaje Oral
Para asegurar una administracin precisa del compuesto a testar suele ser necesario administrarlo
directamente en el estmago mediante una sonda gstrica. Es importante tener en cuenta que la
biodisponibilidad de la sustancia es diferente si se administra directamente en el estmago o si es
ingerida de manera fisiolgica. Se ha publicado que tras la ingesta voluntaria de un determinado
frmaco, los resultados fueron comparables a los obtenidos en humanos a diferencia de los obtenidos
tras la administracin por sonda gstrica.
Las desventajas de este sistema de administracin es que se omiten los procesos orofarngeos
adems de evitarse los efectos fsicos del masticado y la accin de las enzimas presentes en la saliva
que inician el proceso de digestin en la boca. Por ejemplo, los picos de glucosa e insulina aparecen
mucho ms pronto tras una ingesta voluntaria de comida que tras la administracin por sonda, an
cuando en el segundo caso, la comida alcanza el estmago mucho antes. Adems, esta tcnica puede
causar estrs, traumas fsicos (sobre todo en administraciones repetidas) y supresin de la actividad
gastrointestinal.
Influencia de los Ritmos Circadianos
Alimentacin y Ritmos Circadianos

En condiciones de alimentacin ad libitum, las especies nocturnas como el ratn, la rata, el hmster, o
el conejo comern la mayor parte de su ingesta diaria durante la fase de oscuridad y solamente una
pequea parte ser ingerida durante la fase de luz. Esto se considera una reminiscencia de su
comportamiento en la naturaleza, dnde el periodo de luz es mucho ms peligroso debido a la
exposicin a depredadores y es probable que est incluso determinado genticamente.
En ratas y ratones, se producen 2 o 3 picos de ingesta de comida durante la fase de oscuridad. El
primero tiene lugar durante las primeras horas de dicha fase y est motivado por el dficit de energa
provocado por el periodo de descanso (ciclo de luz). A mitad de la fase de oscuridad aparece un
segundo pico de ingesta y, por ltimo, un tercer pico tiene lugar en los momentos que preceden a la
fase de luz (amanecer), incluso si el estmago est lleno. El pico del amanecer se considera
necesario para almacenar reservas energticas para la fase de luz o descanso en la que la ingesta es
mnima. Este ltimo pico aparece unas 2 horas antes del inicio de la fase de luz.
Este comportamiento (adecuar la ingesta de manera que se evite el riesgo de exposicin a
depredadores) es probablemente el resultado de la seleccin natural y est genticamente
determinado. Las funciones biolgicas que se repiten con una periodicidad diaria aproximada se
209

Nutricin Animal
denominan ritmos circadianos. El reloj circadiano que dirige y controla la actividad alimenticia diaria
est localizado en el ncleo supraquiasmtico (SCN) y recibe el nombre de light entrainable oscillator
(LEO). Si el SCN se lesiona, el ritmo luz/oscuridad de ingesta de comida puede desaparecer.
An cuando las ratas pueden ser entrenadas para ingerir su racin diaria en 1 o 2 tomas, su ritmo
circadiano alimenticio se mantiene. Adems, con este esquema de ingesta (1 o 2 tomas diarias) se
produce un fuerte conflicto entre el comportamiento alimenticio y la fisiologa gastrointestinal de manera
que al restaurarse la alimentacin ad libitum las ratas vuelven inmediatamente a su ritmo circadiano
original.
Influencia de los Ritmos Circadianos en el Diseo Experimental

Los animales utilizados en experimentacin pueden tener tanto hbitos diurnos como nocturnos, es
decir, ser activos durante la fase de luz o la de oscuridad. Algunas especies no tienen un
comportamiento circadiano claro como es el caso de los cobayos, los cuales son activos durante las 24
horas con cortos periodos de descanso entre fases de actividad.
La mayora de los experimentos se desarrollan durante la fase de luz, es decir, durante el perodo de
descanso de los animales nocturnos. Si el alimento est presente nicamente durante la fase de luz,
las ratas se acostumbrarn rpidamente a comer a esas horas, sin embargo, su reloj circadiano
permanece activo y volver a instaurar el patrn de ingesta normal tan pronto como se vuelva a una
alimentacin ad libitum.
En cualquier caso, la ingesta de comida durante la fase de luz en lugar de la fase de oscuridad,
provocar diferencias sustanciales en la fisiologa, neuroqumica y comportamiento. Tambin la
respuesta a agentes farmacolgicos puede ser diferente. Puede extrapolarse esta situacin (la
alimentacin diurna de animales nocturnos) a los efectos que tiene sobre los humanos el trabajo a
turnos alternos da/noche; asociado con alteraciones fisiolgicas, hemorragias estomacales, patrn de
sueo alterado, etc. Esto se produce porque las respuestas fisiolgicas y conductuales no estn
sincronizadas con el patrn circadiano propio de cada especie, lo que puede causar una alteracin del
bienestar y la salud y por lo tanto afectar a los resultados experimentales.
Otras actividades rtmicas que no parecen a priori directamente relacionadas con la ingesta de comida
(e.g., actividad locomotora o temperatura corporal) se van a ver tambin influenciados por un esquema
de alimentacin alterado.
Otro aspecto a tener en cuenta en el diseo experimental es el comportamiento neofbico de ratas y
ratones frente a nuevos alimentos. En la naturaleza, evitan comer grandes cantidades de cualquier
alimento nuevo hasta que se demuestre que es seguro. El cambio drstico de dieta en el animalario
evocar este comportamiento por lo que se producir una reduccin en la ingesta durante los primeros
das.
La variacin en la composicin de las dietas tambin puede influenciar cambios conductuales y
fisiolgicos en respuesta a agentes estresantes. Por ejemplo, se ha demostrado que una dieta rica en
210

Nutricin Animal
grasas tiene un efecto positivo comparado con las dietas ricas en carbohidratos al exponer a las ratas a
agentes estresantes fisiolgicos o psicosociales.
Influencia del Tipo de Alojamiento

La manera en que se alojan los animales en el laboratorio y las condiciones de manejo pueden influir
tanto en la cantidad de alimento ingerida como sobre los patrones alimenticios, es decir, la distribucin
de la ingesta a lo largo del da. El alojamiento en grupo o individualizado tendr inevitablemente
implicaciones en los resultados experimentales. Se ha demostrado que:
-
Ratas y ratones de ambos sexos alojados individualmente tienen una mayor ingesta de alimento
que los alojados en grupo (2, 4 u 8 ratones por jaula).
Los ratones alojados individualmente o en grupos de 2, tienen un mayor peso corporal y mayor
variabilidad de peso que otros tamaos de grupo.
Al igual que los patrones de conducta, los patrones alimenticios se pueden ver alterados en funcin
del estatus social cuando los animales se alojan en grupo ya que un animal dominante puede
impedir la ingesta de comida por parte de los subordinados a determinadas horas.
Manipulaciones Nutricionales
Las deficiencias o excesos nutricionales son a menudo utilizados en el laboratorio para estudiar los
efectos fisiolgicos relacionados con un nutriente especfico. Estos son algunos de los efectos que
pueden conseguirse mediante la manipulacin de una dieta:
-
El exceso de grasa aumenta la densidad calrica de una dieta. La mayora de las especies son
sensibles al contenido calrico de la dieta por lo que reducirn inmediatamente la ingesta de
alimento. Si la dieta no est especialmente formulada y el resto de nutrientes (protenas, hidratos de
carbono, etc.) no estn suplementados de manera proporcional, el animal acabar desarrollando
deficiencias de estos nutrientes al disminuir la cantidad de comida ingerida. Esta condicin puede
ocurrir tanto con dietas de ingredientes naturales como purificadas.
A partir de dietas purificadas pueden fabricarse dietas que carezcan de un nico aminocido (ej.,
triptfano) que nos permiten estudiar el efecto de la carencia de este nutriente en un organismo.
De la misma manera pueden modificarse la composicin de las dietas purificadas para disminuir su
aporte en uno o ms minarles o vitaminas y estudiar los efectos fisiolgicos de una dieta baja en
estos componentes.
Influencia de los Ritmos Circadianos

Existen en la actualidad numerosos modelos animales en los que el fenotipo (hipertensin, obesidad,
enfermedades cardiovasculares, etc.) se induce a travs de una dieta especializada.
La dieta tambin puede ser utilizada para regular la expresin de genes in vivo como es el caso de
modelos con mutaciones condicionales (sistemas turn on/turn off) en las que la activacin de la
mutacin depende de la presencia de un determinado compuesto (e.g., el antibitico doxiciclina).
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Nutricin Animal
Recompensa y Enriquecimiento
La alimentacin puede utilizarse como un mtodo muy eficiente de enriquecimiento ambiental,
entrenamiento (recompensa) o de modificacin del comportamiento. Actualmente existe una amplia
gama de productos alimenticios especialmente diseados para los animales de experimentacin
(certificados, acalricos o bajos en caloras, estriles, etc.) de manera que es fcil seleccionar aquellos
productos que no interfieran en nuestra investigacin a la vez que procuramos a nuestros animales una
fuente de entretenimiento muy gratificante.
Este tipo de enriquecimiento es prcticamente obligado en especies como los primates no humanos y
es muy til para el entrenamiento de los animales de cualquier especie en nuevas tcnicas. Por
ejemplo, las ratas pueden ser entrenadas utilizando sustancias dulces en 3 das a ingerir un tratamiento
directamente de la jeringuilla, evitando tener que recurrir a la administracin por sondaje gstrico, una
de las tcnicas ms estresantes para estos animales.
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Nutricin Animal
Privacin de Alimento
El ayuno es una prctica habitual en experimentacin animal, sobre todo en toxicologa. Su objetivo es
principalmente la estandarizacin de resultados ya que, un ayuno de 12 horas asegura que la ltima
comida se realiz al menos 12 horas antes evitndose la influencia que la presencia de comida en el
estmago pudiera tener en la absorcin del producto. El ayuno provoca tambin que los animales estn
en un estado metablico muy diferente al fisiolgico o normal, lo cual afectar indudablemente a los
resultados experimentales.
Efecto del Ayuno en el Vaciado Gstrico y el Peso Corporal

El tiempo de ayuno vara considerablemente de unos protocolos a otros. Es importante a este respecto,
tener claro el objetivo de la privacin de comida para evitar perodos ms largos de los estrictamente
necesarios que puedan comprometer el bienestar animal e influenciar negativamente en los resultados.
Vaciado del Estmago

El vaciado del estmago en ratas y ratones se produce con 6 horas de ayuno. Cuando la privacin de
comida en ratas excede las 6 horas durante el perodo de oscuridad, se produce un claro aumento de
la actividad locomotora (como resultado de un aumento del comportamiento de bsqueda de comida) y
el grooming (acicalamiento) aumentando considerablemente la cantidad de pelos encontrada en el
estmago. En ratones, adems, se observa la aparicin de comportamientos estereotipados ya que,
debido a su pequeo tamao y elevado metabolismo, los ratones son extremadamente sensibles a la
privacin de comida.
Vaciado intestinal
An cuando se ha publicado que en la rata es necesario un periodo de ayuno de entre 18 y 22 horas
para provocar el vaciado del intestino, en otros estudios no se han encontrado diferencias en cuanto al
grado de vaciado intestinal entre un ayuno de 6 y de 18 horas.
Peso corporal
La privacin de alimento durante 18 horas dar lugar a una prdida de peso de al menos el 10% del
peso corporal y en estos casos es muy frecuente que el animal ingiera viruta o papel. En algunos casos
se han reportado prdidas de peso de hasta el 18% con una gran variacin de unos individuos a otros
(con algunos animales perdiendo nicamente el 3% de su peso) en periodos de ayuno de 24 horas.
La reduccin en el peso del hgado puede ser incluso mayor que la del peso corporal y los niveles de
cidos grasos libres aumentarn considerablemente.
213

Nutricin Animal
Efectos del Ayuno sobre otros Parmetros

El ayuno por un periodo de tiempo de hasta 24 horas provoca, entre otros efectos, comportamiento
agresivo, aumento de la
actividad locomotora, estrs, reduccin de peso corporal y el hgado y
disminucin de la temperatura corporal y niveles de glucosa en plasma. El metabolismo basal se ve

notablemente reducido y se ha demostrado que esta disminucin perdura incluso despus de que la
comida ha sido reintroducida y el peso corporal se ha recuperado.
El efecto de un periodo corto de ayuno depende en gran medida del momento en que se produzca. Si
la privacin de alimento tiene lugar durante la fase de oscuridad, cuando se da la mayor ingesta de
alimento y actividad, disminuyen notablemente los valores plasmticos de muchos parmetros como
glucosa, urea, lactato o aminocidos, mientras que se incrementan el glicerol o los cidos grasos. Las
ratas eutanasiadas al principio de la fase de luz, tienen menor peso de hgado y menores niveles de
glicgeno heptico tras un ayuno de tan solo 3 horas. Es indudable que estos cambios afectarn
tambin a la bioqumica celular interna y por tanto deberemos esperar efectos diferentes en
preparaciones de clulas, tejidos u rganos aislados de animales privados o no de comida.
214

Nutricin Animal
Bibliografa
1.
AALAS Learning Library.
2.
The Welfare of Laboratory Animals, 2007. Nutrition and animal welfare, Merel Ritskes-Hoitinga and Jan H.
Strubbe.
3. Fasting in Rodents, Norecopa 2009.
215
GENTICA DE LOS
ANIMALES DE
LABORATORIO

Gentica de los Animales de Laboratorio
218

Antes de profundizar en el estudio de las propiedades y caractersticas genticas de las principales

especies animales utilizadas en la investigacin biomdica, conviene revisar algunas definiciones y
conceptos que nos van a resultar tiles.
cido Desoxirribonuclico
El cido Desoxirribonuclico (ADN, aunque normalmente se utiliza su abreviatura en ingls: DNA) es
una macromolcula, en realidad un polmero de nucletidos. Los nucletidos estn qumicamente
compuestos por una base nitrogenada, el azcar desoxirribosa y un grupo fosfato. Existen 4 bases
nitrogenadas distintas (y por lo tanto, 4 nucletidos distintos) en el DNA: citosina (C), timina (T),
adenina (A) y guanina (G). El DNA es la molcula portadora de la informacin hereditaria.
cido Ribonuclico
El cido Ribonuclico (ARN, aunque normalmente se utiliza su abreviatura en ingls: RNA) es una
macromolcula, en realidad un polmero de nucletidos. Los nucletidos estn qumicamente
compuestos por una base nitrogenada, el azcar ribosa y un grupo fosfato. Existen 4 bases
nitrogenadas distintas (y por lo tanto, 4 nucletidos distintos) en el RNA: citosina (C), uracilo (U),
adenina (A) y guanina (G). La principal funcin del RNA es servir como mensajero durante la expresin
gnica para la sntesis de polipptidos.
Alelo
Se denomina alelo a cada una de las formas alternativas que puede presentar un gen. Los alelos se
diferencian entre s por su secuencia. Esta diferencia puede manifestarse en forma de variaciones de la
funcin de ese gen. Los mamferos son diploides (poseen 2 alelos de cada gen), procediendo un alelo
del padre y el otro de la madre. Cada par de alelos se ubica en un locus o lugar del cromosoma
equivalente (u homlogo).
Por ejemplo, 2 alelos, de los ms de 50 que tiene el locus agut (A) del ratn, son a y A. El trmino alelo
alelomorfo fue acuado por William Bateson y significa literalmente "forma alternativa".
Carcter
Un carcter es cualquiera de los rasgos (biolgicos, fisiolgicos, anatmicos, etc.) que se transmiten de
padres a hijos. Es una caracterstica observable de un ser vivo que se transmite. Por ejemplo, el color
de pelo.
Cariotipo
El cariotipo es una prueba de laboratorio mediante la cual se obtiene una representacin grafica
(normalmente fotogrfica) de los cromosomas presentes en el ncleo de una sola clula somtica de
219

un organismo determinado. El cariotipo humano se compone de 23 pares de cromosomas, el del ratn

de 20.
Los cromosomas de la gallina son similares a los de otras aves y los de reptiles. 6 de los pares de cromosomas son similares
a los encontrados en los mamferos, mientras que el resto son micro-cromosomas, 2n = 78. Los cromosomas sexuales
pertenecen al grupo de los grandes. Se denominan ZZ en el macho (gallo) y ZW en la hembra (gallina). Entre las aves la
hembra es el sexo heterogamtico (a diferencia de los mamferos en que el macho es XY), y es por tanto el que determina el
sexo de la descendencia.
Consanguinidad
Un individuo presenta un determinado grado de consanguinidad si sus padres son parientes. Si 2
individuos emparentados (i.e., descendientes de un antecesor comn) se aparean (lo que se conoce
como endogamia), existe una determinada probabilidad de que 2 alelos presentes en un locus de
cualquiera de sus descendientes sean idnticos. Esta probabilidad puede calcularse y se conoce como
coeficiente de consanguinidad (F). El coeficiente de consanguinidad no es equivalente a la
homocigosis, pero ambos estn relacionados. Cuanto ms cercano a 1 sea el coeficiente de
consanguinidad, mayor ser la probabilidad de encontrar loci homocigotos.
Cromosoma
El cromosoma es el material gentico (ADN) condensado y organizado. En el caso de los organismos
eucariontes el cromosoma se forma fundamentalmente de la interaccin entre el ADN, las histonas y
otras protenas no histnicas. Los cromosomas eucariticos son molculas muy largas de ADN doble
hlice en interaccin con protenas (histonas y no histonas) que pueden encontrarse en un estado
relajado o poco compactado, como en los ncleos de las clulas en interfase, o en estados altamente
compactados como sucede en la metafase mittica.
Deriva Gentica
Cada locus heterocigoto posee 2 alelos diferentes que se separarn en vulos y espermatozoides. Los
vulos y espermatozoides que se combinan para dar lugar a un embrin es, obviamente, un suceso
aleatorio, por lo que el alelo que va a pasar a la siguiente generacin lo har con una cierta
probabilidad. La deriva gentica es el cambio en las frecuencias allicas de una poblacin debido al
azar en la transmisin de genes de una generacin a otra.
A nivel de una poblacin, y en cada generacin, se produce un sorteo de genes durante la formacin
de gametos que se conoce como deriva gentica. La mayora de los organismos son diploides, es
decir, tienen 2 alelos de cada gen. Los gametos de estos organismos portan solo uno de los 2 alelos de
cada gen. El que un gameto lleve un alelo u otro es una cuestin de azar, anloga a obtener una cara
al tirar una moneda, por lo que la formacin de gametos y su consiguiente unin para formar el embrin
de la siguiente generacin solo puede describirse como un proceso probabilstico.
220

Dominancia
La dominancia es el predominio en la expresin fenotpica de un alelo o carcter sobre otro, de forma
que, si la dominancia es completa, el heterocigoto Aa tendr fenotpicamente la apariencia determinada
por el alelo A.
Por extensin, un fenotipo dominante ser aquel que est determinado por un alelo dominante, y por lo
tanto se expresar siempre que est presente. Por ejemplo, si el alelo que le da el color rojo a una flor
es dominante, aunque un individuo tenga otro alelo que determine otro color (es decir, sea heterocigoto
para ese locus), sus flores sern rojas.
La relacin de dominancia entre caracteres o alelos puede tambin ser incompleta, dndose entonces
fenotipos intermedios (por ejemplo, si el alelo A determina el color rojo de la flor y el alelo a el color
blanco, en un caso de dominancia incompleta, el individuo Aa podra presentar flores rosas; es decir,
un fenotipo intermedio).
El concepto de dominancia es, en general, relativo. En muchos casos existen ms de 2 variantes o
alelos de un gen. En este caso, un alelo podra ser dominante con respecto a un segundo alelo y
recesivo respecto a un tercero.
Endogamia
(En ingls, inbreeding). La endogamia es el apareamiento de individuos relacionados. Esta relacin
consiste en tener uno o varios ancestros en comn, por lo que la relacin es una relacin gentica.
F1
Con la notacin F1 se conoce la primera generacin filial de un cruce. En un experimento de
cruzamiento, los gametos producidos por la generacin parental (P) se fusionan para dar lugar a los
individuos que formarn la generacin filial (es decir, los hijos). Se denomina F1 a esta primera
generacin, ya que puede haber otras generaciones producto del cruce entre individuos de la
generacin anterior. Estas sucesivas generaciones se notan F2, F3, F4, etc.
Fenotipo
Son las propiedades y caractersticas observables o medibles del genotipo y en las cuales contribuye el
medio ambiente.
Gen
(Del griego genos = nacimiento). Los genes son segmentos de ADN (cromosoma) responsables cada
uno de un determinado carcter; son la unidad funcional de la herencia. El botnico dans Wilhelm
Johannsen (1857 - 1927) utiliz este nombre por primera vez, en 1909, para nombrar a los elemente de
Mendel (Johannsen tambin acu otros trminos de uso frecuente como fenotipo, genotipo y
seleccin).
221

Gentica
Es la rama de la biologa que estudia la herencia biolgica y las propiedades de transmisin de los
caracteres hereditarios.
Genoma
El genoma es el conjunto de la informacin gentica que porta un individuo. En eucariotas, esta
informacin gentica comprende tanto el ADN contenido en el ncleo como en otras estructuras
citoplasmticas (e.g., mitocondrias y cloroplastos). El genoma contiene una cantidad enorme de
informacin. Por ejemplo, el tamao del genoma del ratn es de 2.8 Gigabases.
Genotipo
En un sentido general, el genotipo es el conjunto de genes o factores hereditarios que posee un
individuo determinado, dentro de una especie. Cuando se refiere a un gen o conjunto de genes, el
genotipo es la composicin allica de este o estos.
Herencia
La herencia (o herencia biolgica) hace referencia al conjunto de caracteres que se transmiten de
progenitores a descendencia.
Heterocigosis
Situacin en la que los 2 alelos de un gen son diferentes, en este caso el alelo dominante es el que se
expresa.
Homocigosis
Un homocigoto es un organismo que tiene 2 copias o alelos iguales de un gen en los 2 loci homlogos,
tambin llamado raza pura.
Ligamiento
Cuando 2 loci se encuentran situados sobre el mismo cromosoma, se dice que estn ligados. Todos
aquellos loci que se encuentran situados sobre el mismo cromosoma forman un Grupo de Ligamiento.
Cuanto ms alejados estn entre s 2 loci ligados ms probable es que se d sobrecruzamiento entre
ellos, cuanto ms cerca estn entre s 2 loci ligados menos probable es que se d sobrecruzamiento
entre ambos.
2 loci ligados pueden estar en fase de acoplamiento AB/ab (los 2 alelos dominantes sobre el mismo
cromosoma, y los 2 recesivos sobre el cromosoma homlogo) o en fase de repulsin Ab/aB (un alelo
dominante y otro recesivo sobre cada cromosoma).
222

Locus
En plural, loci. Es el lugar fsico (sitio) que ocupa un gen en un cromosoma. Si consideramos al
cromosoma como una sucesin lineal de genes, el sitio de cada gen en esta secuencia ordenada ser
su locus.
Meiosis
La mayora de los seres vivos, y especialmente los organismos eucariticos presentan algn
mecanismo de reproduccin sexual a lo largo de su ciclo vital. Aunque propiamente no podemos hablar
de reproduccin sexual en organismos como las bacterias, si podemos decir que mediante la
conjugacin hay transmisin de material hereditario de un organismo a otro. En la reproduccin sexual
no hay transmisin de material hereditario de un organismo a otro sino que a partir de material de 2
organismos de la misma especie, se genera un nuevo ser vivo, un nuevo individuo. El proceso
mediante el cual dos clulas de dos individuos distintos se unen para generar uno nuevo se denomina
fecundacin. La fusin de 2 clulas cualesquiera acarreara un problema muy grave; el aumento
ilimitado de material gentico. Como el nuevo individuo proviene de la fusin de 2 clulas tendra doble
cantidad de ADN que sus respectivos padres, y sus hijos el doble que l y as sucesivamente. Este
proceso sera incompatible con la vida y por tanto debe existir un mecanismo de reduccin del material
gentico en las clulas. Este mecanismo es la meiosis.
La meiosis es el proceso mediante el cual se forman unas clulas que llamamos gametos cuya
caracterstica principal es que poseen la mitad de ADN que el resto de las clulas del individuo. Esta
mitad de ADN no es aleatoria, sino que es justamente una dotacin o juego cromosmico completo, es
decir cada gameto contiene un juego completo de genes localizados en un juego cromosmico
completo. Adems, este juego cromosmico completo, mediante la recombinacin y la segregacin
aleatoria, resulta ser mezcla de los 2 juegos que posee el individuo original. Es decir de cada pareja de
homlogos se obtiene un cromosoma mezcla del paterno y materno producindose as un nuevo juego
o dotacin cromosmica haploide en el que se han originado unas nuevas combinaciones de genes.
De esta forma de un individuo diploide que tiene 2 juegos cromosmicos (1 procedente de cada
parental), se obtiene una clula haploide mezcla de ambos progenitores que al unirse con otra clula
proveniente de otro individuo de sexo opuesto (fecundacin) originar un nuevo individuo con dotacin
diploide.
La reproduccin sexual es la consecuencia de la meiosis y la fecundacin, y es un proceso casi
universal en los organismos superiores.
Parentesco
2 individuos son parientes si tienen, al menos, un antecesor comn. Los parientes son individuos que
comparten genes idnticos por descendencia: copias o rplicas de un gen ancestral comn. Si un
individuo A es antepasado comn de los individuos B y C, y stos reciben ambos una copia del mismo
gen, es decir, el mismo segmento de ADN de un locus cualquiera de A, podemos decir que B y C
tienen genes en comn que son idnticos por descendencia procedentes de A.
223

El parentesco ms simple es el que hay entre un progenitor y su descendiente. En un locus cualquiera

un descendiente tiene 2 genes, 1 de los cuales (el gen paterno) es una copia de 1 de los genes de su
padre, y el otro (el gen materno) es una copia de 1 de los genes de su madre. Puesto que esto es
cierto para todos los loci, podemos decir que un descendiente comparte exactamente la mitad (50%) de
sus genes con cada uno de sus padres.
Mutacin
Inicialmente (De Vries, 1901), la mutacin se defini como cualquier cambio heredable en el material
hereditario que no se puede explicar mediante segregacin o recombinacin.
A partir del descubrimiento de que el material hereditario es el ADN y de la propuesta de la Doble
Hlice para explicar la su estructura (Watson y Crick, 1953), una mutacin es cualquier cambio en la
secuencia de nucletidos del ADN. La mutacin es la principal fuente de variabilidad gentica en las
poblaciones, mientras que la recombinacin, al crear nuevas combinaciones a partir de las generadas
por la mutacin, es la fuente secundaria de variabilidad gentica.
Recesividad
El trmino alelo recesivo se aplica al miembro de un par allico que no se manifiesta cuando otro alelo
dominante (respecto a l) est presente. Para que el fenotipo de este alelo se observe, el organismo
debe poseer 2 copias del mismo, provenientes 1 de cada progenitor. Los alelos que determinan el
fenotipo recesivo necesitan estar en homocigosis para poder expresarse.
Sobrecruzamiento
La probabilidad de sobrecruzamiento est influenciada por muchos motivos, uno de ellos es el sexo de
los individuos, de manera que en algunos organismos la probabilidad de sobrecruzamiento en machos
es mayor que en hembras, mientras que en otros sucede al contrario. En la especie humana la
frecuencia de sobrecruzamientos (y por tanto de recombinacin). Como consecuencia de esto, el mapa
gentico humano femenino tiene una mayor longitud que el mapa masculino. Se dan situaciones
extremas, como en Drosophila melanogaster, en las que los machos son aquiasmticos (no presentan
sobrecruzamiento), mientras que las hembras si muestran quiasmas y tienen sobrecruzamiento. Las
hembras del gusano de seda (Bombyx mori) son aquiasmticas, mientras que los machos s tienen
quiasmas.
Se ha demostrado que la edad y la temperatura pueden influir en la frecuencia de sobrecruzamientos.
En Drosophila melanogaster y en saltamontes la frecuencia de sobrecruzamientos disminuye con la
edad, aunque no de una manera gradual.
Otra cuestin importante es que la frecuencia de sobrecruzamiento no es igual en todas las regiones
de un cromosoma: es menor en las regiones centromricas y mayor en las regiones telomricas.
224

Conceptos Generales de Gentica

La gentica general se ocupa del estudio de la herencia y de los patrones de transmisin de los
caracteres hereditarios.
Leyes de Mendel
Un monje austraco, Gregor Mendel, desarroll los principios fundamentales de la gentica; es decir, de
la transmisin de los caracteres hereditarios. Mendel demostr que las caractersticas heredables se
transmiten como unidades discretas que se heredan por separado en cada generacin. Estas unidades
discretas, que Mendel llam elemente, se conocen hoy como genes. Mendel present los resultados de
sus experimentos en 1865.
El modelo experimental utilizado por Mendel fue el guisante comn (Pisum sativum), que tiene una flor
que normalmente se autopoliniza. La parte masculina de la flor se llama antera, produce el polen, que
contiene los gametos masculinos. La parte femenina de la flor es el gineceo, formado por estigma,
estilo, y el ovario. El vulo (gameto femenino) es producido en el ovario. El proceso de polinizacin (la
transferencia de polen de la antera al estigma) ocurre, en el caso del guisante, antes de la apertura de
la flor. Del grano de polen crece un tubo (tubo polnico) que permite al ncleo viajar a travs del
estigma y el estilo, y eventualmente llegar al ovario. Las paredes del ovario formarn las futuras vainas
(legumbre) y los vulos fecundados las semillas.
1 ley. Principio de la Segregacin

El principio de la segregacin o primera Ley de Mendel, propone la separacin de los factores
apareados durante la formacin de los gametos, donde cada gameto recibe uno u otro factor durante
su formacin. Los organismos portan 2 factores (alelos) por cada carcter. Estos factores se separan
durante la formacin de los gametos.
Cruzamiento prueba
Para probar la hiptesis de que los alelos estn en pares y se separan en la formacin de gametos se
llev a cabo un experimento adicional: se cruz la F1 (semillas lisas) con la raza pura paterna de
semillas rugosas (parental homocigoto recesivo) a lo que se denomin cruzamiento prueba.
En un cruzamiento prueba se cruzan un genotipo desconocido que muestra el carcter dominante con
el parental homocigoto recesivo. Lo que se pretende demostrar es si el genotipo desconocido es
homocigoto dominante o heterocigoto para ese carcter. Si se producen 2 fenotipos distintos quiere
decir que el progenitor desconocido era heterocigoto para ese carcter. Si por el contrario aparece un
solo fenotipo es homocigoto.
225

2 ley. Principio de la Distribucin Independiente

Cuando se forman los gametos, los alelos de un gen para una caracterstica dada se separan
(segregan) independientemente de un alelo para otra caracterstica. Si los caracteres se separan de
forma independiente unos de otros durante la formacin de los gametos, se puede entender el
resultado de un cruzamiento dihbrido.
3 ley. Principio de la Combinacin Independiente

Segn este principio, 2 loci situados sobre 2 cromosomas diferentes se combinan de forma
independiente. Cuando 2 loci estn situados sobre cromosomas distintos (es decir, son
independientes), un diheterocigoto (AaBb) produce 4 tipos de gametos en igual proporcin.
Teora Cromosmica de la Herencia

A finales del siglo XIX algunos cientficos como Boveri, Strassburger o Weissman, estudiando la
divisin celular, ya apuntaban la posibilidad de que los factores hereditarios (genes) podran estar
relacionados con los cromosomas. Tras el redescubrimiento de las Leyes de Mendel en 1900, Sutton
reinterpret el significado de la meiosis y la fecundacin y relacion las observaciones citolgicas
(comportamiento cromosmico) con los factores hereditarios propuestos por Mendel. Este es el inicio
de la Teora Cromosmica de la Herencia, la cual propone que son los cromosomas los portadores de
la informacin gentica. Los puntos principales de esta teora son los siguientes:
Los genes estn situados en los cromosomas. Morgan demostr la relacin existente entre un
gen y un cromosoma. En 1910 descubri un mutante de Drosophila que tena el ojo de color
blanco. Este carcter tena, adems, una herencia muy particular ya que estaba ligada al sexo
y se poda correlacionar con la segregacin de los cromosomas sexuales.
La ordenacin de los genes en los cromosomas es lineal. Este hecho fue demostrado por
Sturtevan en 1913 al completar el primer mapa de ligamiento en Drosophila. Este mapa
constaba de 6 genes y observ que las distancias entre 2 genes, era la suma de las distancias
entre cada uno de ellos con otro intermedio. Por lo tanto, los genes estn uno detrs de otro a
lo largo del cromosoma. Posteriormente, este hecho fue corroborado al identificar la ausencia
o presencia de ciertos caracteres con la de bandas en los cromosomas politnicos,
localizando citolgicamente los genes sobre una determinada banda. El lugar que ocupa un
determinado gen en el cromosoma es lo que se denomina locus, por lo que es equivalente
decir un gen con 2 alelos a un locus (ubicacin del gen en el cromosoma) con esos 2 mismos
alelos, o que 2 loci estn ligados cuando estn situados en el mismo cromosoma.
El fenmeno citolgico del sobrecruzamiento e intercambio de segmentos cromosmicos es la
causa del fenmeno gentico de la recombinacin. Este hecho fue demostrado por Creighton
y McClintock en el maz, utilizando un doble marcaje citolgico y gentico. Como marcaje
gentico utilizaron un diheterocigtico para 2 loci ligados en el cromosoma 9. Como marcador
citolgico utilizaron un cromosoma 9 que tena un abultamiento ( knob) en un extremo
226

producido por un bloque de heterocromatina, y el otro extremo terminaba en un segmento

translocado bastante grande del cromosoma 8. Esta planta fue cruzada por otra planta
citolgicamente normal y doble recesiva para los marcadores genticos.
Caracteres Cualitativos
Los rasgos o caracteres cualitativos son por lo general categoras discretas. Generalmente solo uno o
unos pocos genes poseen un gran efecto sobre un rasgo cualitativo. El medio ambiente tiene
generalmente un pequeo papel en influenciar la categora (fenotipo) que es determinada por un
genotipo concreto. Es decir, en este caso, el fenotipo de un animal refleja su genotipo. Ejemplos de
rasgos cualitativos son:
Color de pelo.
Defectos hereditarios como el enanismo.
Tipo sanguneo.
La gentica de los caracteres cualitativos es sencilla y se corresponde con la gentica mendeliana.
Las formas alternativas de un carcter son producidas por formas alternativas de un gen (alelos). Con
frecuencia, el carcter normal recibe el nombre de carcter salvaje o silvestre, y a los dems
caracteres se les denomina caracteres mutantes.
Caracteres Cuantitativos
Los rasgos o caracteres cuantitativos difieren de los cualitativos de 2 formas importantes:
Se encuentran influenciados por muchos genes.
La expresin fenotpica es influenciada ms fuertemente por el medio ambiente que en el caso
de los rasgos cualitativos.
Los caracteres cuantitativos son aquellos que pueden medirse, como la longitud, el peso, el nmero de
huevos o cras por hembra, etc. En este caso, los individuos no pueden clasificarse dentro de
categoras discretas, y el valor o fenotipo normal se corresponde con la media. Los valores de los
caracteres cuantitativos suelen ajustarse a una distribucin normal. La mayora de los rasgos
cuantitativos muestran un cierto grado de heredabilidad. La heredabilidad es evidente cuando los
individuos se desvan positiva o negativamente respecto a la media. La herencia gentica cuantitativa
est determinada por el efecto de muchos genes diferentes, de los que cada uno puede contribuir con
una intensidad distinta. Los caracteres cuantitativos suelen estar bastante influidos por las condiciones
del medio ambiente.
227

Herencia Ligada al Sexo

Algunos caracteres se dice que estn ligados al sexo. En realidad, lo que esta expresin significa es
que son caracteres que vienen determinados por un gen cuyo locus se encuentra sobre el cromosoma
sexual femenino (cromosoma X). Existen algunas enfermedades que siguen este patrn de herencia.
En estos casos, y como la mutacin que provoca la enfermedad es recesiva, las hembras heterocigotas
son portadoras, pero no sufren la enfermedad. Los machos que hereden el cromosoma afectado de
una madre portadora s desarrollarn la enfermedad (la hembra portadora pasa la condicin al 50% de
la descendencia). La hemofilia, por ejemplo, es una alteracin de la coagulacin sangunea ligada al
cromosoma X.
228

Gentica y Modelos Animales

Aunque en los inicios del estudio moderno de la gentica se utiliz una planta como modelo para
descifrar los principios de la transmisin de genes (caracteres), son los modelos animales los que ms
han contribuido al avance de esta ciencia. El uso de modelos animales ha supuesto el mayor avance
en la investigacin de las causas, diagnstico y tratamiento de graves enfermedades, y ha permitido el
desarrollo, produccin y control de medicamentos, alimentos y otros productos de una forma segura.
La investigacin cientfica requiere el uso de modelos para estudiar problemas complejos. En estos
problemas biolgicos intervienen un nmero muy grande de variables, tanto conocidas como
desconocidas, por lo que la estandarizacin de modelos, reactivos y ensayos debe ser siempre una
prioridad para el cientfico. En el caso de los modelos animales, existe tambin un componente tico
que no debe perderse de vista. Por todo ello, es ineludible el desarrollo de modelos animales
estandarizados (o definidos) con una serie de caractersticas genticas, fisiolgicas y sanitarias
conocidas y controladas, y su mantenimiento en un ambiente adecuado y estable que respete los
principios de bienestar animal y buena prctica cientfica.
A continuacin se expondrn las caractersticas genticas de algunos de los modelos animales ms
comunes en la investigacin cientfica. Dado que el ratn de laboratorio es con diferencia el modelo
ms utilizado hoy en da, se ofrece un apartado ms detallado de sus caractersticas genticas en el
captulo siguiente.
Pez cebra
El pez cebra (Danio rerio) es un telesteo, de la familia de los ciprnidos, cuyo uso como modelo
experimental ha crecido de forma notoria en los ltimos aos. Este pez tiene una serie de
particularidades que lo hacen idneo para estudios genticos y de desarrollo. Quizs lo ms ventajoso
para su uso experimental es la rapidez con que se desarrolla (pasa del estadio de embrin de 1 clula
a la eclosin del huevo en slo 48 horas). Adems, el embrin es completamente transparente, lo que
facilita el seguimiento de clulas, tejidos y rganos durante su desarrollo. Asimismo, la realizacin de
tcnicas de transgnesis es relativamente sencilla debido, en parte, al gran tamao del embrin
(comparado, por ejemplo, con el de ratn). Cada hembra produce una gran cantidad de huevos, lo que
permite realizar experimentos con una gran significacin estadstica. En definitiva, el hecho de que el
pez cebra sea un vertebrado, de pequeo tamao, sus embriones numerosos que se desarrollan
externamente y su facilidad de manipulacin, ha hecho de este animal una herramienta til para la
investigacin cientfica.
Aunque las aplicaciones para la investigacin gentica en el pez cebra se centraron inicialmente en la
mutagnesis y el anlisis de mutantes (gentica directa), hoy en da se han desarrollado tcnicas de
transgnesis y otros tipos de anlisis gentico. El genoma del pez cebra presenta 25 pares de
cromosomas y un tamao haploide de 1.5 Gigabases.
229

Estirpes de Pez Cebra

Son numerosas las lneas de Danio rerio que se han desarrollado en los ltimos 20 aos. La
informacin ms actualizada puede encontrarse en la red ZebraFish Information Network (ZFIN). Las
lneas salvajes ms conocidas son: AB, TU, IN and WIK. A continuacin se muestra un listado con las
principales estirpes:
AB (AB)
HK/AB (HK/AB)
SJD (SJD)
AB/C32 (AB/C32)
HK/Sing (HK/SING)
SJD/C32 (SJD/C32)
AB/TL (AB/TL)
Hong Kong (HK)
Tuebingen (TU)
AB/Tuebingen (AB/TU)
India (IND)
Tupfel long fin (TL)
C32 (C32)
Indonesia (INDO)
Tupfel long fin nacre (TLN)
Cologne (KOLN)
Nadia (NA)
WIK (WIK)
Darjeeling (DAR)
RIKEN WT (RW)
WIK/AB (WIK/AB)
Ekkwill (EKW)
Singapore (SING)
SJA (SJA)
Muchas de estas lneas tienen diversos grados de consanguinidad, aunque ninguna es completamente
isognica. Debido a que estas estirpes no estn totalmente caracterizadas, en muchos casos la
eleccin de una lnea es un asunto de preferencia personal. Las principales estirpes utilizadas en
experimentos de mutagnesis son AB y TU (Tbingen o Tuebingen). La estirpe AB fue desarrollada por
G. Streisinger cruzando animales de una tienda de mascotas.
La estirpe Wild-type India Calcutta (WIK) se desarroll a partir de individuos capturados en zonas de la
India con el fin de obtener una lnea de referencia con un alto grado de polimorfismo para el mapeo de
mutantes obtenidos en el fondo TU (en cruces WIK x TU, se obtena un 68% de microsatlites
polimrficos). La lnea IN ms difcil de criar en cautividad que WIK se utiliz en el proyecto MGH
de mapeo meitico junto con la lnea AB. La lnea SJD se cruz durante varias generaciones para
aumentar su consanguinidad en el laboratorio de S. L. Johnson, y es muy polimrfica respecto a TU
(75%), por lo que en principio es una mejor lnea para mapear mutaciones. Esta lnea es muy difcil de
criar, sobre todo por la anormal distribucin de sexos (problema, por otro lado, bastante comn en pez
cebra con cierto grado de consanguinidad).
En el pez cebra se han identificado mutaciones cuyo fenotipo, observable a simple vista, se puede
utilizar como un marcador gentico. Si bien, estas mutaciones no resultan tan tiles como en otros
modelos animales, debido al elevado nmero de cromosomas (25 pares) y a la ausencia de
cromosomas balancer (cromosomas con inversiones que impiden la recombinacin con su
homlogo). Un ejemplo de este tipo de mutaciones es TL (Tuebingen long fin) que porta una mutacin
recesiva (leot1) que origina manchas de pigmentacin y otra dominante (lof dt2) que le da aletas
visiblemente ms largas que el tipo salvaje.
230

Comparado con otros organismos modelo, como la mosca del vinagre (Drosophila melanogaster), el
nematodo Caenorhabditis elegans, o el ratn (Mus musculus), el nmero de protocolos y herramientas
para la manipulacin del pez cebra es an limitado. No sorprende este hecho, ya que el pez cebra es
un modelo relativamente reciente en la investigacin biomdica (iniciado por George Streisinger a
finales de los 70). A continuacin se describen algunos de los mtodos desarrollados para su
manipulacin gentica.
Anlisis Gentico (Gentica Directa)

La forma ms directa, y que ms xito ha tenido, para la identificacin de genes es el anlisis gentico
de mutantes. El principio de esta tcnica es sencillo: se inducen mutaciones aleatorias en el genoma de
un organismo, posteriormente este se reproduce y se analiza la descendencia en busca de fenotipos
mutantes. Esto es lo que se ha denominado gentica directa; la identificacin de un gen por sus
efectos fenotpicos. Esta tcnica tiene como principal ventaja que permite identificar genes
desconocidos. El principal inconveniente es que la identificacin de mutantes est limitada por la
disponibilidad de pruebas y ensayos para la deteccin de un fenotipo en cuestin. Por ejemplo, si se
carece de un test para medir la glucosa en sangre, no podr identificar un gen cuya funcin est
relacionada con la glucemia, a no ser que produzca algn otro efecto. Otra limitacin de esta tcnica
deriva de la redundancia funcional de algunos genes, por lo que una mutacin puede ser compensada
por otro gen distinto evitando que se muestre el fenotipo del mutante. An as, la gran cantidad de
embriones, la rapidez con que se desarrollan y lo fcil que resulta observar estos embriones durante su
desarrollo hacen del pez cebra un modelo ideal para el anlisis gentico directo del desarrollo
embrionario y la identificacin de genes involucrados en este proceso.
Mutagnesis qumica
La mutagnesis qumica se ha utilizado extensivamente en la identificacin de genes, sobre todo de
aquellos involucrados en el desarrollo embrionario. Son varios los productos qumicos utilizados,
aunque el ms comn es el ENU (N-etil-N-nitrosourea), que es un agente alquilante y un potente
mutgeno. Induce mutaciones transfiriendo su grupo etilo a radicales O y N de las bases nitrogenadas,
lo que provocar errores en la duplicacin del ADN. Las mutaciones ms comunes son transversiones
ATTA o transiciones ATGC. En el pez cebra la frecuencia de mutaciones por este agente es de 0.6 a
3
4.8 10 .
La mutagnesis qumica en el pez cebra ha dado como resultado la identificacin de unas 2,000 lneas
mutantes. La mayora de estas mutaciones son recesivas y afectan al desarrollo embrionario o de las
larvas, y muchas son letales en homocigosis. Se puede obtener un listado actualizado de los mutantes
en la siguiente direccin de internet: http://zfin.org.
Mutagnesis por Insercin

La principal desventaja de la mutagnesis qumica reside en la localizacin en el genoma de las
mutaciones una vez identificado un fenotipo mutante. La localizacin de genes a partir de un fenotipo
mutante es muy laboriosa (precisamente por ser mutaciones puntuales). Sin embargo, si la mutacin se
231

generase como consecuencia de la insercin en el genoma de una secuencia conocida (retrovirus,

transposn, etc.), este problema desaparece: puede utilizarse la secuencia introducida (conocida) para
identificar las regiones flanqueantes.
El retrovirus se inyecta en un embrin de pez cebra en estado de blstula, lo que dar lugar a un
fundador mosaico (i.e., que no lleva la insercin en todas sus clulas) cuyos gametos portarn la
mutacin con una frecuencia entre un 3 y un 20%. Tras realizar un incross de los descendientes se
obtendr una generacin F1. Aproximadamente, el 20% de estos peces portar entre 5 y 10
inserciones por individuo. Si se vuelve a realizar un incross entre los individuos de la F1, obtendremos
una F2 sobre la que se repetir el proceso obtenindose una F3 que puede ya analizarse
fenotpicamente. Hasta la fecha se han desarrollado unas 500 lneas mutantes por esta tcnica. La
frecuencia de mutaciones por insercin es entre 7 y 10 veces menor que la obtenida por mutagnesis
qumica con ENU.
Mutagnesis por Irradiacin

El uso de radiaciones ionizantes como agentes mutgenos ha sido bastante comn hasta hace poco
tiempo. La disponibilidad de mtodos ms finos se est imponiendo. Las mutaciones obtenidas por
irradiacin son normalmente anomalas cromosmicas (deleciones, inversiones, traslocaciones, etc.).
Es tambin comn que se obtengan mutaciones dominantes, por lo que las que son letales no pueden
mantenerse. Existen algunos estudios en los que se ha uti
pez
cebra. La supervivencia de mutantes en protocolos de irradiacin de esperma es del 25%, mientras que
si lo que se irradia son cigotos, esta puede verse incrementada hasta el 50%.
Gentica Inversa
La secuenciacin de los genomas de muchas especies animales, ha generado una gran cantidad de
informacin que puede utilizarse para analizar secuencias que se sospecha que son genes, pero cuya
funcin no se ha encontrado. La manipulacin gentica que permite conocer la funcin de un gen
partiendo de su secuencia, es lo que se conoce como gentica inversa. Durante 2 dcadas, el ratn
ha sido el nico vertebrado en el que este tipo de tcnicas se ha realizado con xito.
La tecnologa utilizada en ratn se basa fundamentalmente en la recombinacin homloga en clulas
madre embrionarias (ES). Mediante esta tcnica, una secuencia generada en el laboratorio, reemplaza
a su homlogo en el genoma, por lo que su efecto puede estudiarse en organismos vivos. Esta tcnica
no est muy desarrollada en el pez cebra, modelo en el que se utilizan otras aproximaciones
experimentales.
Morfolinos (knockdown)
El uso de morfolinos es un mtodo rpido para generar fenotipos y analizar por tanto la funcin de un
determinado gen. La tcnica consiste en microinyectar oligonucletidos modificados que interfieren con
la expresin de un gen bloqueando la traduccin de su ARN mensajero. Debido al desarrollo externo
de los embriones de pez cebra, es muy fcil inyectar no slo uno, sino varios morfolinos durante varias
etapas del desarrollo embrionario. La obtencin de ratones con un fenotipo determinado mediante la
232

manipulacin de clulas embrionarias lleva, en el mejor de los casos entre 8 y 12 meses. Mediante el
uso de morfolinos en el pez cebra, el fenotipo de la primera generacin puede estudiarse en unos das
o incluso en unas horas despus de la inyeccin.
Los morfolinos son oligonucletidos cortos (de 18 a 25 nucletidos de longitud) cuyas bases se
encuentran ligadas a un anillo de morfolina en vez del azcar correspondiente. Los morfolinos son
capaces de unirse a un pre-ARN mensajero complementario, con lo que se evita su posterior
procesamiento. Tambin tienen un uso farmacutico: se pueden usar contra bacterias y virus o en el
tratamiento de enfermedades genticas. Lo que se consigue con los morfolinos no es una modificacin
gentica, en realidad es un knockdown (disminucin o eliminacin transitoria de la expresin de un
gen) y aunque los fenotipos obtenidos no son tan consistentes y reproducibles como los obtenidos por
recombinacin homloga, s puede considerarse fenocopias de fenotipos mutantes.
TILLING
El mtodo TILLING (del ingls Targeting Induced Local Lesions in Genomes) es una tcnica bastante
eficiente para identificar mutantes. El mtodo se desarroll en plantas (Arabidopsis thaliana), pero se
ha adaptado su uso al pez cebra. Las mutaciones se inducen de manera aleatoria (por ejemplo, por
mutagnesis qumica) y los peces as obtenidos se cruzan con individuos normales, y es la
descendencia de este cruce la que se analiza para encontrar mutaciones (se toman biopsias para
obtener ADN).
Muchos de los pasos de este mtodo pueden automatizarse por lo que es posible analizar muchas
muestras en poco tiempo. Cuando se encuentra una mutacin, el pez portador se cruza para expandir
una lnea en la que puede hacerse un anlisis fenotpico.
Interferencia por ARN

Al igual que los morfolinos, la interferencia por ARN es un mtodo para obtener modelos knockdown. El
fundamento de este mtodo se basa en la respuesta celular a un ARN de doble cadena. Cuando se
introduce un ARN de doble cadena en una clula, se desencadena un proceso por el cual se produce
una degradacin de secuencias similares e inhibicin de la traduccin del ARN mensajero endgeno.
Este fenmeno se descubri en el gusano C. elegans en 1998 y desde entonces se ha empleado con
xito en muchas otras especies.
Transgnesis
La expresin de genes exgenos o endgenos bajo el control de secuencias promotoras modificadas
es una forma muy comn de estudiar la funcin de un gen in vivo. Existen tcnicas para conseguir la
expresin tanto estable como transitoria de un transgn en el pez cebra. La expresin transitoria
presenta algunos problemas en este modelo animal por lo que para obtener unos niveles y distribucin
adecuados en la expresin de un gen deben construirse transgnicos estables.
Se han obtenido transgnicos utilizando retrovirus, electroporacin y por el bombardeo con partculas
cubiertas de ADN. Sin embargo, el mtodo ms utilizado es la microinyeccin de una constrccin de
233

ADN en embriones en estadio de una clula. En el pez cebra esta tcnica es rpida y se pueden
alcanzar altos porcentajes de integracin del ADN inyectado (entre un 5 y un 30%). Entre el 1 y el 50%
de la descendecia F1 de un fundador mosaico para el transgen, portar el transgn. En estos
experimentos se utilizan sofisticados mtodos de control y anlisis de la expresin:
Genes reporteros o marcadores (reporter genes) como la protena verde fluorescente (GFP,
green fluorescent protein), su derivado cian (de color azul. CFP, cyan fluorescent protein), o
amarillo (YFP, yellow fluorescent protein). La expresin de todos ellos se puede hacer especfica
de tipo celular con el uso de secuencias promotoras adecuadas.
Promotores que se activan en funcin de la temperatura (e.g., el de hsp70), para controlar la

expresin en el tiempo (cuando se cambie la temperatura a voluntad).
El sistema Gal4-UAS. Este sistema consta de 2 partes; GAL4, que es un activador de la

transcripcin, y UAS, que es la secuencia a la que GAL4 se une. El gen que codifica para GAL4 se
coloca bajo el control de un promotor a nuestra eleccin (normalmente un promotor endgeno
especfico de tipo celular o tejido), mientras que la secuencia UAS controla la expresin del
transgn. Con esto, el transgn slo se expresa donde y cuando Gal4 se est expresando.
Anfibios
Los embriones pertenecientes a distintas especies de anfibios son uno de los mejores modelos
experimentales para estudios de gentica del desarrollo. Existen 2 caractersticas que hacen de estos
embriones un modelo ideal; su gran tamao, y su desarrollo externo. El tamao permite realizar una
serie de tcnicas de microciruga y manipulacin que seran ciertamente difciles, si no imposibles, en
otros modelos. Los primeros experimentos con anfibios se hicieron en ranas comunes (gnero Rana),
tritones (gnero Triturus), o axolotes (gnero ambystoma). Durante los aos 50, se comenz a utilizar
la especie africana Xenopus laevis por su idoneidad para ser mantenida en el laboratorio (a diferencia
de otros anfibios, no necesita ser alimentada con presas vivas).
Xenopus laevis o Xenopus tropicalis

El principal problema que presenta Xenopus laevis es su poliploida, lo que le hace un modelo
extremadamente difcil para la manipulacin gentica. Se ha observado que tanto en peces como en
anfibios se han producido duplicaciones del genoma durante la evolucin, siendo el gnero Xenopus un
claro ejemplo de esto. El gnero Xenopus engloba unas 20 especies distintas, todas ellas poliploides
(de 4n a 12n) excepto una. Xenopus laevis tiene 36 cromosomas, y aunque se clasific como una
especie diploide, ms tarde se demostr que era en realidad tetraploide (4n). De hecho, el aislamiento
de un gen en Xenopus laevis trae consigo siempre la descripcin de 2 genes parlogos. Esta
redundancia y complejidad gentica (4 genes iguales 2 a 2) hace que la manipulacin gentica de esta
especie sea virtualmente imposible.
Existe slo una especie dipliode dentro del gnero Xenopus: Xenopus tropicalis. Esta especie es muy
cercana a Xenopus laevis desde un punto de vista morfolgico y evolutivo. X. tropicalis posee todas las
caractersticas que hacen de X. laevis un buen organismo modelo, pero adems es un organismo
dipliode y el tamao de su genoma es aproximadamente la mitad que el de X. laevis. Adems, tiene 20
234

pares de cromosomas en lugar de los 36 que presenta X. laevis. El genoma de X. tropicalis es de

hecho uno de los ms pequeos dentro de los anfibios (por ejemplo, el genoma de una salamandra es,
en funcin de la especie, entre 10 y 50 veces mayor), aproximadamente igual al del pez cebra, y la
mitad que el del ratn.
Hasta el momento, los sistemas para inhibir la expresin de un gen y estudiar as su funcin en anfibios
se reducen a la creacin de mutantes dominantes negativos. X. tropicalis ofrece la posibilidad de
manipular el genoma para generar autnticos mutantes de prdida de funcin de un gen (knockouts).
Transgnesis en X. tropicalis
El procedimiento para generar transgnicos consiste en integrar la construccin en ncleos de esperma
in vitro, para despus transplantarlos a un ovocito (huevo no fecundado), dando esto lugar a un
embrin transgnico. Este mtodo es muy eficiente; se pueden obtener cientos de embriones
transgnicos en una sola sesin. Los individuos resultantes no sern quimricos (como puede ocurrir
con el pez cebra o el ratn), ya que la construccin se integr en el genoma masculino
(espermatozoides) antes de la fertilizacin del huevo. Esto tiene la ventaja de que el individuo
resultante puede ser estudiado ya como un transgnico.
El sistema para la produccin de transgnicos en Xenopus puede tambin utilizarse como mtodo de
mutagnesis por insercin. Por ejemplo, por el mtodo del gene trap. En este mtodo lo que se
consigue es que un transgn que sirve como marcador (e.g., la protena verde fluorescente) pero que
carece de promotor, se integre aleatoriamente en algn gen. Si el transgn se integra en un gen que se
est transcribiendo (expresando) veremos el gen marcador y adems, debido a la insercin, habremos
anulado la funcin del gen. Una gran ventaja de este mtodo es que debido al desarrollo externo de los
embriones, los resultados pueden seguirse en cualquier etapa del desarrollo.
Rata de Laboratorio (Rattus norvegicus)

La rata de laboratorio ha sido un modelo animal muy utilizado en investigacin biomdica y su empleo
como organismo modelo data de 1850. La rata fue ya utilizada por W. Bateson para comprobar
principios de las leyes de Mendel en mamferos (transmisin de variates de color de pelaje). La primera
lnea consangunea fue desarrollada en 1909 por Helen D. King (el mismo ao en que se comenz el
inbreeding (cruzamiento endogmico) de la lnea de ratn DBA1).
La utilidad de la rata como modelo en estudios genticos, sobre todo de caracteres complejos y
enfermedades humanas, ha mejorado con el desarrollo de herramientas que permiten un anlisis
gentico muy potente. Debido a que la rata se ha utilizado durante mucho tiempo y en campos muy
diversos (fisiologa, toxicologa, farmacologa, metabolismo, comportamiento, terapias, etc.), se dispone
de una cantidad ingente de informacin que hace de este modelo un sistema muy interesante para el
desarrollo de tcnicas de anlisis gentico.
Obviamente, el ratn es an el modelo de eleccin para estudios de gentica en mamferos, pero el
desarrollo reciente de ciertas tcnicas de anlisis gentico y genmico, est haciendo que el estudio de
la rata cobre de nuevo inters. Se dispone de una secuencia de alta calidad del genoma de la rata, de
235

mapas genticos de alta resolucin, y de herramientas de comparacin genmica relacionadas con el

genoma humano y el del ratn. Toda la informacin actualizada referente al desarrollo del anlisis
gentico de la rata puede encontrarse en la pgina wed principal del Rat Genome Database.
236

Gentica del ratn de laboratorio

Sin duda, el ratn de laboratorio es el modelo animal que ms ha contribuido al conocimiento de la
gentica de mamferos y al desarrollo y perfeccionamiento de tcnicas que permiten su manipulacin
gentica.
Origen del Ratn de Laboratorio

El gnero Mus, que agrupa una gran variedad de especies y subespecies entre las que se encuentra el
ratn comn o domstico. Este gnero (perteneciente al orden Rodentia) tiene unas 40 especies,
divididas en 4 subgneros (Mus, Nannomys, Coelomys y Pyromys). El subgnero Nannomys (ratones
pigmeos africanos) cuenta con 19 especies, Pyromys cuenta con 5 y Coelomys con 4 (ambos grupos
estn restringidas a la India y el sureste asitico). El subgnero Mus es con diferencia el ms
estudiado, se distribuye por Europa y Asia y cuenta con 11 especies, la ltima de las cuales se
identific en la isla de Chipre en 2006.
En los inicios de la era neoltica, hace unos 10,000 aos, los ancestros del ratn domstico,
colectivamente conocidos como Mus musculus, haban divergido en 4 poblaciones (ahora clsificdas
como subespecies) que ocupaban diferentes territorios:
M. musculus domesticus
Pakistn e India occidental
M. musculus musculus
Norte de la India
M. musculus castaneus
Bangladesh
M. musculus bactrianus
India central
Con el asentamiento de los primeros grupos humanos durante este perodo, gracias sobre todo a la
aparicin de prcticas agrcolas y a la domesticacin de animales, tiene lugar el establecimiento de una
relacin de comensalismo con el hombre que propicia la dispersin de las subespecies del gnero Mus
siguiendo las migraciones del hombre en busca de nuevas tierras frtiles y pastos. Ya en la poca del
imperio romano, estos pequeos roedores se haban extendido por toda Europa y Asia para,
finalmente, alcanzar el continente americano en el siglo XV en los barcos a los primeros
conquistadores.
Es precisamente esta relacin de comensalismo lo que define al ratn domstico, trmino que
representa a un grupo de especies dentro del gnero Mus (M. musculus domesticus, musculus,
castaneus y bactrianus) que se caracterizan por vivir en estrecha relacin con el hombre. Aunque estos
4 grupos pueden ser diferenciados morfolgica y molecularmente, es posible el cruce entre individuos
de cualquiera de las 4 poblaciones, al menos en el laboratorio, originndose descendientes frtiles de
ambos sexos, lo que refuerza la definicin de estos grupos como subespecies.
Desde el inicio de su vida comensal con el hombre, el ratn ha causado temor y curiosidad a partes
iguales. Si bien poda causar daos devastadores tanto en reservas de comestibles como por ser
vehculo de enfermedades, su apariencia y vivacidad despert pronto la curiosidad del hombre, que
237

comenz su cra seleccionando aquellos cuyo pelaje era menos habitual. Esta cra selectiva fue
especialmente prolfica en China y Japn. Hay escritos de origen chino, de 3,000 aos de antigedad,
que mencionan la existencia de ratones manchados. La cra de ratones en busca de variantes
exticas de pelaje se extendi a Europa, dnde ya en el siglo XVIII se publicaron datos sobre la
herencia del color del pelaje, y posteriormente a Amrica. El primer uso del ratn como animal de
experimentacin data del ao 1664, cuando Robert Hooke lo utiliz para estudiar las propiedades del
aire. A principios del siglo XX el ratn comienza a ser utilizado masivamente para estudios de gentica.
En la adopcin del ratn como modelo de estudio por los primeros genetistas norteamericanos jug un
importante papel Miss Abbie Lathrop, una profesora de escuela retirada que comenz la cra de
ratones para venderlos como mascotas alrededor del ao 1900. Cerca de su granja de Massachussets
se encontraba el Instituto Bussey, de la Universidad de Harvard, dirigido por William Ernest Castle, que
inici en 1902 un anlisis sistemtico de la herencia y variacin gentica en el ratn y otros mamferos.
A. Lathrop, no solo proporcion a Castle y sus colegas una fuente constante de ratones, sino que
condujo su propio programa de experimentos, llegando a tener ms de 11,000 ratones con un completo
archivo de cruces. Los primeros estudios de transplantes llevados a cabo por el grupo de Castle,
pusieron de manifiesto la necesidad de disponer de lneas de ratones genticamente homogneos,
inicindose la cra de la primera lnea consangunea (DBA) en 1909 por uno de los alumnos de Castle,
Clarence Little, que, junto con otros colegas, desarrollara ms tarde algunas de las ms conocidas
lneas de ratn; C57BL/6, C57BL/10, C3H, CBA, o BALB/c, muchas de ellas originadas enteramente a
partir de ratones provenientes de la granja de M. Lathrop. Ninguna de estas lneas consanguneas
clsicas de ratones son representativas de alguna de las 4 subespecies de Mus musculus, sino que se
tratan de un mosaico de todas ellas, principalmente M. m domsticus, musculus y castaneus, siendo M.
musculus domesticus la que contribuye mayoritariamente.
Principales Estirpes Definidas Genticamente
Nomenclatura
Se pueden consultar las reglas de nomenclatura de las lneas y stocks de ratn en la siguiente
direccin:
Tipos de Cruces
Desde un punto de vista gentico se pueden establecer los 4 tipos distintos de cruce que a
continuacin se detallan. El tipo de cruce viene determinado por la composicin allica que los
parentales tengan en el locus que se est considerando.
238

A/A X A/A
a/a X a/a
A/A
A/A
Incross
A/A X a/a
a/a X A/A
A/A
a/a
Backcross
Outcross
A/a X A/A
A/a X a/a
A/a X A/a
A/a
A/a
Intercross
A/a
A/A
a/a
Lneas Consanguneas
Las lneas consanguneas se obtienen tras cruzar ratones hermanos durante 20 o ms generaciones
consecutivas. Despus de 20 generaciones, se obtendrn animales con un grado de consanguinidad
cercano a 1, siendo los individuos de la generacin 20 isognicos (i.e., su genoma es idntico) y
homocigotos (alelos iguales para todos los loci).
F1
F2
F20
Cruces Hermano x Hermana
239

Hbridos F1
Los hbridos F1 resultan de la primera generacin de un cruce entre 2 lneas consanguneas.
X
C57BL/6
BALB/c
B6CF1
Por convencin, se nombra primero abreviada la lnea de la hembra que gener el hbrido, continuacin
la del macho, y por ltimo se aade F1.
Lneas Consanguneas Recombinantes

Las estirpes consanguneas recombinantes se generan a partir de individuos obtenidos en una
generacin F2 de cruce entre 2 estirpes consanguneas y posterior cruce entre hermanos durante 20 o
ms generaciones.
X
C57BL/6
BALB/c
X
B6CF1
B6CF1
F1
F20
Lnea recombinante BXC1
240

Lneas Coisognicas
Derivan de una lnea consangunea en la que ha ocurrido (y se ha identificado) una mutacin puntual.
La nica diferencia entre ambas ser, de hecho, la presencia de la mutacin. En el ejemplo a
continuacin, el individuo albino podra iniciar una lnea coisognica con C57BL/6J.
F51
X
C57BL/6J
C57BL/6J
F52
F53
C57BL/6J normales
C57BL/6J Albino
Lnea Coisognica
Lneas Congnicas
Una lnea congnica se obtiene tras realizar un backcross de un ratn que posee una caracterstica de
inters (mutante, transgnico, KO, etc.) con una lnea consangunea durante, al menos, 10
generaciones. En ese momento, podremos decir que la lnea que hemos generado es congnica
respecto a la consangunea que hemos utilizado. Al realizar cruces consecutivos con ratones de una
lnea consangunea, el fondo gentico del ratn que nos interesa se va enriqueciendo en el fondo
gentico deseado.
Backcross n
% fondo gentico receptor
1 (F1)
50
2 (N2)
75
3 (N3)
87.5
4 (N4)
93.75
5 (N4)
96.875
10 (N10)
99.9
241

A continuacin se muestra un esquema del diseo de cruces a seguir para generar una lnea
consangunea. Observar cmo con los cruces sucesivos, el fondo gentico C57BL/6J va aumentando.
Se indica asimismo, la estrategia para fijar los cromosomas sexules XX y XY.
% Fondo B6
XX
XY
0%
X
mutante
XX
C57BL/6J
XY
X
C57BL/6J
XX
C57BL/6J
N2
75%
N3
87.5%
mutante
XY
X
C57BL/6J
50%
mutante
XY
X
XX
F1
mutante
N10
99.8%
Lnea congnica
Existen otras lneas derivadas de distintas estrategas de cruce y de seleccin gentica con utilidad en
ciertas reas de investigacin:
Hbridos F2
Conviene tener en cuenta la gran diferencia que existe entre un hbrido F1 y un hbrido F2. Los ratones
hbridos F1 son isognicos entre s, aunque con un alto ndice de heterocigosidad. Si se cruzan entre s
los individuos F1, se habr producido una recombinacin durante la meiosis obtenindose lo siguiente:
x
F1
F2
242

Como puede observarse en el esquema anterior, al darse la recombinacin durante la meiosis en los
individuos de la F1 (proceso de formacin de gametos), en la F2 se van a obtener individuos que sern
todos diferentes entre s (la recombinacin en cada gameto sucede al azar). Esto puede plantear un
problema grave; si partimos de individuos de una F2 y a partir de ellos derivamos colonias, lneas o
stocks, lo que se obtiene puede ser muy distinto (los individuos de partida son genticamente distintos).
Lneas Consmicas
Una lnea consmica es aquella que, poseyendo un genoma propio de una lnea consangunea, porta
un cromosoma entero de otra lnea consangunea.
X
C57BL/6J
BALB/c
Lnea Consmica para el cromosoma 19 de BALB/c

C57BL/6-Chr 19BALB/c
La lnea donante del cromosoma 19 en el ejemplo anterior sera BALB/c (sealada en rojo). Se anota
como superndice detrs de cromosoma.
Lneas Conplsticas
Una lnea consmica es aquella que, poseyendo un genoma nuclear propio de una lnea
consangunea, todo su ADN cromosmico pertenece a otra lnea consangunea.
O : cromosoma mitocondrial
X
C3H
C57BL/6J
F1
X
C57BL/6J
N2
X
C57BL/6J
O
N10
Lnea conplstica
243

Lneas Congnicas recombinantes

Una lnea consangunea segregante se obtiene cruzando 2 lneas consanguneas de forma que se
obtiene una F1. Los individuos F1 se cruzan entre s obtenindose una F2. A continuacin se toman
parejas de esta F2 y se inicia el sistema de cruce utilizado para la generacin de lneas consanguneas
(cruces hermano x hermana durante 20 generaciones).
x
B6
BALB/c
F1
B6CF1
F2
F20
BXC1
BXC2
BXC3
BXC4
Colonias No Definidas Genticamente

Dentro de las colonias de ratn no definidas genticamente se consideran comnmente las colonias (o
stocks) no consanguneas (e.g., el ratn swiss albino), y las colonias denominadas random bred. Estas
ltimas son colonias que se mantienen con un sistema de cruce al azar.
Estas colonias deben mantenerse bajo un sistema de cra que evite al mximo el aumento de la
consanguinidad. Puede ser til seguir un sistema como el que se ilustra a continuacin:
244

D
C
En este sistema los reproductores de cada colonia (A, B, C, y D) se reponen de la de al lado, y la de

enfrente. Por ejemplo; las hembras de la colonia A pasarn a ser reproductoras de la colonia B,
mientras que los machos pasarn a ser reproductores de la colonia C. En colonias pequeas puede ser
complicado, o poco prctico, mantener un sistema de rotacin como este.
Gentica Bsica del Pelaje

El pelo de mamferos se caracteriza por la longitud, color y, en parte, por su estructura fsica, por
ejemplo lacio o rizado. La presencia y distribucin de los diversos tipos de pelo (por ejemplo, pelo
protector y lana) desempea un papel en la apariencia fsica del animal. El color del pelo puede
proporcionar camuflaje o alguna seal distintiva respecto al grupo. Especialmente para animales que
habitan en el agua o animales que cazan peces, el pelaje es de gran importancia para la regulacin de
la temperatura. El pelaje de animales como la foca, nutria o el visn tiene que ser muy resistente y
durar todo el invierno. Otros animales como la liebre y los zorros tienen un pelaje que los mantiene
calientes, pero este pelaje no es necesario que sea tan fuerte como los antes mencionados. La
mayora de los mamferos presentan un pelaje de invierno del que se desprenden durante la primavera
y el verano.
Como ya se ha comentado en la introduccin al gnero Mus, el ratn domstico se empez a criar en
cautividad hace miles de aos con el objeto de obtener variedades y colores de pelaje curiosos. Por lo
tanto, son muchos los mutantes identificados a los largo de los aos, lo que ha llevado a la
identificacin de multitud de genes y alelos relaciondos con el pelaje del ratn. De hecho, se han
encontrado ms de 100 genes relacionados con el aspecto y distribucin del pelaje.
No obstante, son 4 los principales loci que determinan el color del pelaje y que adems tienen una
utilidad prctica en el animalario. Veamos primero, de forma muy resumida, cmo se forma el color del
pelaje del ratn. El pelo del ratn de laboratorio puede presentar 2 tipos de pigmentos, uno amarillento
(feomelanina) y otro parduzco oscuro o negro (eumelanina), en su pelaje. Ambos pigmentos se
sintetizan a partir del aminocido tirosina:
245

La enzima tirosinasa (Tyr) fabrica el precursor de ambos pigmentos a partir de la tirosina. Este
precursor es posteriormente procesado de formas distintas para dar lugar a la eumelanina (negro) o la
feomelanina (amarillento). Este proceso de sntesis tiene lugar en los melanocitos. Los 4 genes que
determinan el color del pelaje son:
AABBCCDD
Agut
aaBBCCDD
AAbbCCDD
no agut (negro)
marrn
AABBccDD
AABBCCdd
albino
diluido (grisceo)
A (Agut): el alelo salvaje (normal) determina la disposicin de pigmentos. Es decir, el pelo cubierto de
eumelnina con una banda de feomelanina. Los alelos mutantes ms comunes son: a (non-agouti;
y
aumenta la extensin de eumelnina a todo el pelo; el ratn parece negro) y A (yellow; extiende la
franja de feomelnina, el ratn parece amarillo).
B (Brown): el alelo salvaje determina el color oscuro intenso de la eumelanina. El alelo mutante ms
comn es: b (brown; la eumelanina pierde intensidad y parece marrn).
C (Tyr): es el gen que codifica para la enzima Tirosinasa que fabrica el precursor de ambos
compuestos. La mutacin ms conocida es el albinismo (c; la tirosinasa no es activa y no hay color).
D (Dilute): el alelo mutante ms comn es: d (dilute; produce una dilucin de los pigmentos, por
ejemplo, el negro parece gris).
Segn esto, algunos de los fenotipos ms comunes seran:
Pelo de ratn
Tirosinasa
(Tyr)
Eumelanina
Tirosina
DOPA-quinona
Feomelanina
Color normal (agut)
246

Control de la Pigmentacin en el Ratn

Como se ha visto en la seccin anterior, el color del pelaje de un ratn (y en general el de cualquier
animal) viene determinado por genes que controlan la sntesis del pigmento, su cantidad y su
distribucin. De una forma muy simplificada, son 4 (o 5 si incluimos el locus E) los genes que tienen
una mayor importancia en la determinacin del aspecto del pelaje, pero en realidad, slo en la
pigmentacin, son cientos los genes que influyen de una u otra forma. En en esta seccin se expone
de forma un poco ms detallada cmo se produce el pigmento, y cmo se regula su sntesis.
Las variedades de melanina que dan color a la piel, los ojos o el pelo de un animal se sintetizan en una
clula especializada: el melanocito. El melanocito deriva de la cresta neural y migra hacia la epidermis
y el folculo piloso durante la embriognesis. Se caracteriza por su ncleo ovoide y su disposicin a
nivel de la capa basal epidrmica. Poseen prolongaciones (dendritas) que les mantienen en
contactando con los queratinocitos y su densidad es variable dependiendo de la regin anatmica.
Tanto la eumelanina como la feomelanina son producidas a partir de la tirosina en el melanocito (en
una vacuola especial denominada melanosoma), estando su sntesis regulada por diversas enzimas de
entre las que destaca la tirosinasa que metaboliza el aminocido tirosina para formar
dihidroxifenilalanina (DOPA).
Eumelaninas
Feomelaninas
247

Los genes implicados en el color o aspecto del pelaje de ratn son cientos, y sus variantes allicas
suman ms de mil. Estos genes regulan aspectos tan diversos como:
Desarrollo de los melanocitos. Las mutaciones ms conocidas son white spotting (W,
identificado como Kit) y steel (Sl, identificado como el ligando de Kit o Kitl). Las mutaciones en
los loci Kit and Kitl dan lugar a ratones con manchas blancas, o completamente blancos con
ojos pigmentados. Se ha identificado un gen cuyan mutaciones dan lugar a un fenotipo
parecido: Mitf (microphthalmia-associated transcription factor). Mitf regula la expresin del gen
antiapopttico Bcl2 y se considera el principal regulador del desarrollo del melanocito.
Mantenimiento de clulas precursoras de melanocitos. Genes como Mitf, Pax3, y Sox10 estn
relacionados con el mantenimiento de precursores de melanocitos.
Formacin del melanosoma. En los melanosomas se sintetiza y almacena el pigmento.
Existen dos tipos de melanosomas; eumelanosomas (con pigmento negro o marrn) y
feomelanomas (con figmento rojizo o amarillo). En su formacin y maduracin el melanosoma
pasa por 4 estados diferentes. El pigmento (melanina) se sintetiza cuando el melanosoma
pasa al estado III. Existen, al menos, 20 mutaciones relacionadas con la formacin del
melanosoma que por lo general dan lugar a un fenotipo de hipopigmentacin.
Funcionamiento del melanosoma. Las enzimas que intervienen en la sntesis de la melanina
estn codificadas por algunos de los genes cuyas mutaciones son ms significativas en la
determinacin del color del pelaje; albino (c, tirosinasa, Tyr), slaty (slt, DOPAcromo
tautomerasa, Dct), y brown (b, tyrosinase-related-protein1, Tyrp1). Otras mutaciones estn
relacionadas con la formacin de estructuras sobre las que se deposita el pigmento.
Transporte del melanosoma. Los melanosomas se forman cerca del ncleo y migran durante
su maduracin hacia las dendritas, desde donde pasan a los queratinocitos adyacentes
proporcionando color a estos y al pelo. Algunas de las mutaciones que interfieren con la
migracin del melanosoma son muy frecuentes en ratn. Por ejemplo, dilute (d), ashen (ash),
and leaden (ln). Estos genes codifican para la Miosina Va, Rab27a y Melanofilina, y son
protenas implicadas en el transporte intracelular.
Regulacin del tipo de pigmento. Un grupo muy importante de genes relacionados con el color
del pelaje son los que codifican para protenas que determinan qu tipo de pigmento se
sintetiza y cuando. En un ratn normal o wild-type, la punta del pelo es negra (eumelanina),
la zona central posee una banda amarillenta (feomelanina), y el resto del pelo es tambin
negro (melanina de nuevo). El mecanismo que controla el pigmento que se va a sintetizar est
regulado por el receptor Mc1r (melanocortin-1 receptor) (Mc1r) y sus ligandos, la hormona
estimulante de melanocitos (-MSH) y la protena Agut (agouti signal protein o ASP). La
protena ASP est codificada por el locus A y Mc1r por el locus E, 2 de los 5 principales loci
relacionados con el color de pelo (A, B, C, D, y E). Existen otras mutaciones relacionadas con
la regulacin del tipo de pigmento producido: mahogany, mahoganoid, dorsal-dark stripe, y
umbrous.
248

Mucha ms informacin til sobre la pigmentacin y el pelo de los mamferos, y en especial el ratn
puede encontrarse en: Montoliu L, Oetting WS, Bennett DC. Color Genes. (2011). European Society for
Pigment Cell Research. World Wide Web (URL: http://www.espcr.org/micemut)
249

Manipulacin Gentica del Ratn

Un animal genticamente modificado es aquel que ha experimentado un cambio de su informacin
gentica en todas y cada una de sus clulas mediante un proceso en el que se ha utilizado la tcnica
del ADN recombinante en alguno de sus pasos. La modificacin de la informacin puede ser de
diversos tipos, bien por la inclusin de nueva informacin, la eliminacin de una informacin existente o
la sustitucin de informacin por otra parecida. Una mutacin espontnea o provocada por agentes
fsicos o qumicos da lugar a un cambio en la informacin gentica pero no genera un individuo
genticamente modificado porque no se utiliza para ello molculas de ADN sintetizadas o manipuladas
en el laboratorio.
Es frecuente que, de forma coloquial, los ratones genticamente modificados se denominen transgnicos. Esto no es correcto,
ya que los ratones transgnicos son slo una parte de los genticamente modificados. An as, este uso est bastante
extendido y no es raro oir laboratorio de transgnicos, zona de transgnicos, etc.
Los animales genticamente modificados han supuesto una revolucin en los estudios de ciencias de
la vida y precisamente por ello su presencia es cada vez ms importante en los animalarios Es
precisamente la utilizacin de ADN recombinante lo que marca la diferencia. Los animales transgnicos
han supuesto una herramienta cada vez ms utilizada para investigacin en Biomedicina y se puede
decir que han colonizado la prctica totalidad de los animalarios del mundo.
Mtodos de Modificacin Gentica

Hasta la fecha se han utilizado varios sistemas de obtencin de animales transgnicos que podramos
englobar en 2 grandes estrategias, la transgnesis aditiva y la muta gnesis dirigida, segn se aada
una nueva informacin al organismo en una zona al azar, o se busque la modificacin de un gen
determinado, localizado en un lugar especfico del genoma mediante un proceso llamado
recombinacin homloga.
Transgnesis Aditiva
La transgnesis aditiva consigue la introduccin estable de un fragmento de ADN exgeno o extrao
(i.e., procedente de otra especie) en el genoma de un organismo. Generalmente, este ADN exgeno,
tambin denominado transgn o construccin, se introduce en embriones unicelulares, y los que lo
integren en su genoma previamente a la primera divisin lo portarn en todas sus clulas y generarn
un organismo transgnico: el transgn pasar a la descendencia a travs de la linea germinal
(gametos).
Entre las aplicaciones de los animales transgnicos cabe destacar:
250

El estudio de la funcin y regulacin de genes especficos.

El estudio a nivel molecular el desarrollo embrionario y su regulacin.
Manipulacin de la expresin gnica in vivo.
Uso de organismos como biorreactores para la produccin de proteinas humanas.
Aportar funciones o caractersticas a un organismo.
La correccin de errores innatos mediante terapia gnica.
Se han conseguido animales transgnicos utilizando tcnicas diferentes:
Microinyeccin en proncleos.
Utilizacin de vectores virales.
Electroporacin en clulas ES.
Mtodos que implican la utilizacin de espermatozoides o sus precursores.
De todos estos sistemas el de uso ms generalizado es la microinyeccion pronuclear. Este sistema se
basa en la introduccin de una solucin del transgn en el proncleo de embriones en fase de 1 clula,
o en ambos ncleos celulares cuando se inyecta en fase de 2 clulas. En este momento es posible que
se produzca la incorporacin del transgn en algn cromosoma del embrin mediante un proceso
denominado recombinacin ilegtima, en el que es imposible predecir, ni el lugar, ni el nmero de
copias que se van a integrar (normalmente se integran varias copias en tndem en una nica
localizacin cromosmica). Por esta razn, la expresin, es decir, el funcionamiento de la construccin
est condicionado por una serie de factores no controlables que darn lugar a que una misma
informacin no se comporte de la misma manera en los diversos transgnicos que se obtengan a partir
de la microinyeccin de un mismo transgn. Esto justifica el que haya una cierta variabilidad entre
distintas lneas fundadoras (todos los descendientes derivados de un nico animal que ha incorporado
el transgn y lo transmite se denomina lnea transgnica, y al primer individuo, fundador).
Cuando la integracin del transgn ocurre despus de la primera divisin celular, el animal resultante es quimrico, lo que
quiere decir que las clulas de su cuerpo tienen diferentes caractersticas, segn tengan o no el transgn. As, en la
"ovecabra" quimera entre oveja y cabra, parte de las clulas de su piel producen lana y parte pelo.
La molcula de ADN que se utiliza para la modificacin, el transgn, est compuesta por una serie de
elementos bsicos, por un lado el promotor, que establece dnde y cundo va a expresarse, es decir a
estar presente la protena codificada por el siguiente fragmento, la porcin estructural. Esta parte del
transgn se transformar en una molcula de acido ribonucleico mensajero (ARNm), la cual, una vez
251

haya salido del ncleo, dar lugar a una protena especfica. Por ltimo, cualquier transgn debe contar
con una cadena de poli A que acta como un modulador de expresin dando estabilidad al ARNm y
tambin indicando al complejo enzimtico que sintetiza el ARN donde est el final del gen.
Esta tcnica de obtencin de animales transgnicos tiene una serie de ventajas e inconvenientes. Es
una tcnica que requiere un equipamiento bastante sofisticado, pero el mismo equipo se puede aplicar
prcticamente a todas las especies de animales y permite trabajar con construcciones de tamaos muy
variados. Se ha utilizado con xito en ratn, rata, conejo, ovino, caprino, porcino y vacuno y en otras
especies podra aplicarse de igual manera. Sin embargo, la tcnica es poco eficiente, especialmente en
grandes animales, en los que menos del 1% de los animales nacidos procedentes de la microinyeccin
han sido realmente modificados genticamente. En el ratn la eficiencia es mayor, en esta especie
aproximadamente un 10-15% de las cras nacidas son transgnicas.
Tcnica de microinyeccin de proncleos en ratn. El embrin en estadio de 1 clula y en una fase en la que no se
han fusionado an los proncleos masculino y femenino, se sujeta con una pipeta especial y la solucin que
contiene el transgn es entonces microinyectada en el proncleo masculino.
La informacin gentica exgena (transgn) tambin puede incorporarse al nuevo individuo utilizando
vectores. Fundamentalmente se han usado agentes virales que basan su ciclo vital en la utilizacin de
la maquinaria celular para replicarse actuando como perfectos parsitos, algunos de ellos tristemente
famosos como los retrovirus. Actualmente los vectores virales que se utilizan fundamentalmente son
los lentivirus.
252

Por ltimo, se puede utilizar un sistema de incorporacin de ADN desnudo en clulas ES segn un
proceso semejante al que se describir ms adelante para la generacin de animales knock-out o
knock-in.
Microinyeccin
(proncleos)
Transferencia de
embriones
Seleccin (presencia transgn)
Fundador 1 +/T
Fundador 2 +/T
Transmisin lnea germinal
Transmisin lnea germinal
Lnea Tg1
Lnea Tg2
Proceso de generacin de lneas de ratones transgnicos por microinyeccin de proncleos. El transgn es

microinyectado en el proncleo masculino, despus los embriones son transferidos a una hembra receptora
(pseudogestante) y la descendencia analizada tanto para ver si portan el transgn, como para ver si lo transmiten
a las cras. Cada individuo portador del transgn y que lo transmita por va germinal, dar lugar a una lnea
transgnica.
Una de las aplicaciones ms interesantes de la tecnologa de generacin de animales transgnicos es

la utilizacin de ganado transgnico para producir proteinas de inters terapetico. Para esto, se
fabrica una construccin con el gen codificante de la proteina, y una secuencia o promotor que haga
que se exprese dicho gen en unas determinadas clulas solamente. Por ejemplo, si se quiere que la
proteina se produzca en la leche, el transgn se fusiona con la secuencia reguladora de una proteina
de la leche, con lo que la proteina slo se formar en las clulas de glndulas mamarias. Esto es lo que
se hizo con la oveja Tracy en 1992, la primera oveja que produjo una proteina humana, la -antitripsina
bajo la regulacin del promotor ovino de la -lactoglobulina. Dicha proteina se produce en una cantidad
de 35 g/L, la cual se emplea para el tratamiento del edema pulmonar.
Lo mismo se ha hecho para la famosa cerda Genie, que fabrica en su leche la proteina C humana que
controla la coagulacin sanguinea y es necesaria para los hemoflicos.
Mutagnesis Dirigida
Con este segundo tipo de modificacin gentica se consigue una alteracin mucho ms selectiva de la
informacin gentica. En lugar de incorporar la informacin (el ADN) al azar, se consigue modificar una
secuencia predeterminada y conocida del genoma aprovechando el fenmeno de recombinacin
253

homloga. Este mecanismo tiene lugar de manera natural durante la divisin meitica, es decir aquella
divisin de las clulas reproductoras por el que se reduce a la mitad la informacin gentica (2n a n en
diploides). Durante la recombinacin homloga se produce un intercambio de fragmentos homlogos
de ADN en la etapa de alineamiento de los cromosomas. El fenmeno de recombinacin puede
utilizarse para alterar la informacin gentica de un individuo gracias a la existencia de lneas celulares
pluripotentes (normalmente, clulas ES) que pueden ser transformadas en cultivo. Es decir en este
caso la modificacin no se hace sobre el propio embrin, sino sobre unas clulas que luego se
incorporan al embrin o se utilizan como donantes de ncleo.
Las secuencias utilizadas en estos casos son construcciones de ADN que incorporan la informacin
que se quiere incluir, flanqueada por unas regiones homlogas a las del gen o secuencia que quiere
modificarse, y que se conoce como gen o secuencia diana. Adems, se incorpora un marcador que
permite distinguir las clulas transformadas (es decir, que han incorporado la construccin) de aquellas
que no lo estn, ya que la eficiencia de la recombinacin homloga es muy baja, con frecuencias que
oscilan entre 1 clula de 100.000 y 1 clula de 10 millones.
Mediante esta tecnologa se ha logrado la eliminacin total de un gen (fenmeno conocido como Knock
out) incluyendo en nuestra secuencia un fragmento de informacin gentica que bloquee la
transcripcin o la traduccin del gen. Es decir, se modifica el gen incluyendo una informacin errnea
que hace que sea imposible que se produzca la protena.
Hembra donadora de blastocistos
C57BL/6J
Microinyeccin
Manipulacin
gentica
en el laboratorio
Ratn quimera
Lnea ES (129)
Seleccin en cultivo
Generacin de ratones mutantes por gene targeting. Las clulas ES modificadas en el laboratorio aprovechando
el fenmeno de recombinacin homloga se microinyectan en un blastocisto. De aqu se obtiene un ratn quimera
que debe analizarse tanto para comprobar que porta la alteracin, como que la transmite a la descendencia.
254

Este sistema tambin ha permitido desarrollar un tipo de ratones modificados genticamente llamados
Knock in, que permiten colocar una determinada protena en un lugar especfico bajo el control de una
determinada secuencia regulatoria endgena. Los animales Knock-out y Knock-in han sido una de las
herramientas ms potentes para obtener informacin sobre la funcin de un gen observando lo que
ocurre cuando se elimina (es decir, observando el fenotipo del ratn knock out).
Como se ha indicado antes, en este tipo de transgnesis es esencial contar con una lnea celular que
pueda mantenerse en el laboratorio y sobre la que puedan realizarse las modificaciones genticas que
se pretenden. Esta lnea celular adems debe de ser capaz de contribuir a la formacin de un nuevo
individuo.
La gran mayora de los KO y KI que se utilizan en investigacin se han generado utilizando clulas ES
embrionarias: Las clulas de este tipo se obtienen a partir de embriones en fases previas a la
implantacin, en los que ya se han diferenciado 2 poblaciones celulares, el trofoblasto, que dar lugar a
la placenta fetal y la masa celular interna que a su vez dar lugar al feto. Las clulas ES se obtienen a
partir de estas ltimas que, una vez aisladas, son mantenidos en un medio especial sobre un sustrato
celular que impide su diferenciacin. Estas clulas adems deben tener la capacidad de desarrollarse
en determinadas condiciones como si se tratara de clulas embrionarias, integrando rganos y tejidos
del embrin y del individuo adulto. Estas lneas celulares son susceptibles de ser transformadas como
cualquier otra lnea, bien por la insercin de un nuevo gen (knock in) o la inactivacin de alguno de los
genes existentes (knock out) y que da lugar a los ratones de este nombre. Adems es posible aislar la
poblacin celular transformada y obtener a partir de ella una lnea de clulas que contengan la nueva
informacin de forma estable.
Para producir los individuos genticamente modificados, un pequeo nmero de clulas ES
transformadas se inyectan en el interior de la cavidad de un blastocisto, o se agregan a una mrula
colocndolas dentro de la zona pelcida, que es la membrana que rodea al embrin durante las
primeras fases de desarrollo. Los embriones procedentes de estas manipulaciones se transfieren a
hembras receptoras y se dejan desarrollar a trmino. En caso de tener xito el proceso, parte de las
clulas transformadas colonizarn al embrin receptor, contribuyendo a la formacin de los tejidos y
rganos del nuevo individuo. Por esa razn, por medio de esta metodologa siempre se obtiene un
individuo quimrico, es decir con mezcla de clulas que incluyen el transgn y otras que no. Es
esencial para el xito del proceso que parte de las clulas pluripotenter hayan sido capaces de
colonizar la lnea germinal para poder obtener en una generacin posterior descendencia
genticamente transformada.
Hasta hace muy pocos aos solo existan clulas ES de ratn, hace poco se ha logrado aislar clulas
ES de rata, pero no hay de otras especies, por ello para conseguir animales KO y KI en especies
domsticas requiere la utilizacin de un sistema de clonacin o transferencia nuclear semejante al que
dio lugar al nacimiento de la oveja Dolly.
255

Adicin de clulas ES modificadas a un embrin utilizando la tcnica de agregacin.
Adicin de clulas ES modificadas a un embrin utilizando la tcnica de microinyeccin de blastocistos.
256

Gestin de Colonias de Ratones Modificados Genticamente

La inclusin en un animalario de animales, fundamentalmente ratones modificados genticamente
requiere replantear ciertas sistemticas de manejo e incluir algunas metodologas nuevas para poder
adaptarse a las caractersticas especficas de estos animales. Es conveniente resaltar que un animal
transgnico en muchos casos no difiere de un animal normal ms que lo que puede diferenciarse una
mutacin espontnea, las caractersticas fenotpicas en muchos casos no son evidentes y bsicamente
no requieren, por definicin, unas condiciones sanitarias o de mantenimiento especiales Trabajar con
animales genticamente modificados tampoco requiere por definicin unas instalaciones de alta
seguridad. El grado de control del confinamiento y de aislamiento depende exclusivamente del riesgo
que pueden representar para la salud humana y el medio ambiente y deben de marcarse en cada caso
particular. Un altsimo porcentaje de modificaciones genticas pueden considerarse totalmente inocuas
y por ello pueden ser mantenidas en unas instalaciones convencionales.
Posiblemente el mayor problema de un estabulario que aloje animales transgnicos deriva de la
identificacin y mantenimiento de las lneas. Esto s requiere un cuidado especial que necesariamente
recae en el responsable de las instalaciones y en todo el personal encargado de la limpieza y
mantenimiento. Tambin se requiere la puesta a punto de ciertas tcnicas de anlisis que no son
frecuentes en los animalarios tradicionales y si tpicas de laboratorios de biologa molecular como es el
caso de la reaccin en cadena de la polimerasa, vulgarmente conocida por sus siglas inglesas, PCR.
Esta es la tcnica que se utiliza de forma rutinaria para identificar los animales que son transgnicos.
Bsicamente consiste en amplificar un pequeo fragmento de ADN mediante una reaccin totalmente
biolgica, regulada por un enzima, la Taq polimerasa. Este enzima es capaz de sintetizar la cadena
complementaria de ADN a partir de un molde. Repitiendo el proceso varios ciclos se logra multiplicar de
forma exponencial la cantidad de un fragmento especfico hasta tal punto que puede ser visualizado en
una electroforesis.
Es tambin importante diferenciar animalarios que mantienen una o varias lneas transgnicas y los
que las producen de forma rutinaria, en el primer caso puede asemejarse enormemente a la gestin
que se realiza con ciertas estirpes consanguneas sin mayor complicacin. En el segundo caso sin
embargo la gestin si tiene que enfocarse especficamente a controlar ciertos aspectos especficos.
Fundador, Lnea y Genotipo

Hay una serie de conceptos bsicos que conviene recordar. Un animal fundador es aquel que se
obtiene directamente del nacimiento del embrin que ha sido microinyectado o agregado y que ha
incorporado la informacin gentica en la lnea germinal, por lo que es capaz de transmitirla a la
descendencia. Esto no quiere decir que el animal fundador haga una transmisin mendeliana de la
misma. Absolutamente todos los animales procedentes de sistemas basados en recombinacin
homloga (Knock out/ knock in) y mas de un 60 % de los procedentes de microinyeccin son quimeras,
es decir no todas sus clulas incorporan la nueva informacin y por esa razn, si el transgen no se ha
incorporado a la lnea germinal no se producir la transmisin a la descendencia. El fundador se
considera la generacin 0 (F0). La lnea es la familia de descendientes que se obtienen del fundador
original y que siempre llevarn una identificacin que haga referencia a la construccin que incorporan,
independientemente de su fondo gentico.
257

En los animales transgnicos, el nmero de generaciones puede ser un aspecto importante. En ciertos
casos se ha descrito una inactivacin del gen que se manifiesta como una prdida de actividad del
mismo en la cuarta o quinta generacin y por ello es esencial llevar un buen registro del rbol
genealgico de la lnea.
Una vez se ha producido el fundador, si es tarea del animalario el establecer la lnea, deben de
concretarse con el grupo investigador una serie de aspectos importantes. En muchos casos puede
trabajarse en un fondo gentico hbrido, sin embargo, en otros casos en que la accin del transgen
modula una funcin intrnseca del animal, el fondo gentico puede ser muy importante, tal es el caso
cuando lo que se hace es modificar el sistema inmune, y en el caso de estudios de neurobiologa, si la
expresin fenotpica del transgen es de tipo conductual, hay diferencias substanciales entre diferentes
fondos genticos. En este caso es necesario retrocruzar hacia una lnea determinada C57, CBA, 129,
lo que requiere tiempo ya que son necesarias 10 generaciones de retrocruzamiento con el fondo
gentico deseado para alcanzar un 99% de pureza de una lnea.
Homocigosis vs Heterocigosis
Otro aspecto importante en lo que se refiere a las lneas es que el transgen este en homocigosis o en
heterocigosis. En el primer caso se transmitir al 100% de la descendencia. En el segundo, slo al 50%
y requiere realizar un genotipado, es decir una caracterizacin gentica para determinar si el transgen
est o no presente en ese individuo en particular. Para poder estudiar el fenotipo de un knock out
deben de generarse animales homocigotes, aunque es cierto que en muchos casos estos no son
viables, es decir mueren durante el desarrollo o son incapaces de reproducirse. Por esta razn la lnea
como tal se mantiene en heterocigosis producindose homocigotes para el estudio especfico de lo que
ocurre en ausencia total de un gen.
En el caso de la transgnesis aditiva, es decir aquella en la que se incorpora una nueva informacin, la
ventaja de obtener animales en homocigosis es aumentar hasta cierto punto los niveles de expresin,
aunque nunca se llegan a doblar.
Como consecuencia de los avances cientficos, se han diseado sistemas en los que el transgen no se
manifiesta de forma constante o en todas las clulas, son los llamados transgnicos inducibles,
posiblemente los mas conocidos son aquellos regulados por la tetraciclina en los sistemas tet on/ tet
off. En estas lneas, slo se puede trabajar con animales heterocigotes porque el animal objeto de
estudio es el producto del cruce de 2 lneas, por lo que ser un doble transgnico, pero heterocigote
para 2 construcciones diferentes.
Requisitos Particulares
Una de las mayores diferencias en la gestin de una colonia transgnica especialmente en el caso de
roedores, que son la gran mayora, es que la unidad de trabajo no es la cubeta, sino un nico individuo,
por eso es necesario contar con un sistema de identificacin individualizado lo que no es fcil, adems
si es posible debe de combinarse con un sistema que permita obtener una muestra de tejido suficiente
como para poder realizar el genotipado. Hay sistemas de marcaje que combinan ambas funciones, la
amputacin de dedos o el marcaje de orejas, aunque en este ltimo caso es complejo lograr una
258

muestra limpa. Para identificar los animales individualmente se puede recurrir al tatuaje de dedos o la
colocacin de pendientes o microchips.
Independientemente del sistema de marcaje que se utilice, en una colonia de animales transgnicos la
utilizacin de fichas identificativas en las jaulas es esencial, como tambin lo es concienciar al personal
de la importancia de no mezclar animales y de avisar de cualquier duda o posible equivocacin de
animales antes de que se produzca un dao mayor. Un animal escapado en este caso nunca debe
reintegrarse a ninguna jaula hasta comprobar fuera de toda duda su filiacin. Los programas de gestin
de colonias en estos casos son una gran ayuda.
Biotecnologa Reproductiva Aplicada a la Gestin de Colonias

En la gestin de colonias transgnicas la biotecnologa reproductiva facilita mucho ciertos aspectos.
Las tcnicas ms utilizadas son las siguientes:
Transferencia de embriones
La transferencia de embriones consiste en la obtencin de embriones en fases previas a la
implantacin y su emplazamiento en una hembra que acta como madre de alquiler donde se
implantan los embriones transferidos hasta llevar la gestacin a trmino. En las fases previas a la
implantacin los embriones tienen una cubierta, la zona pelcida, que acta como un autentico filtro
contra microorganismos, por lo que convenientemente lavados, los embriones pueden servir para
eliminar un agente infeccioso de una colonia sin perder la gentica. Utilizando embriones, es tambin
posible trasladar una lnea de un animalario a otro sin comprometer el estado sanitario de la colonia
receptora. Los embriones frescos en refrigeracin mantienen una viabilidad aceptable durante 48 horas
y congelados se mantienen viables de forma indefinida. En el caso de la mayora de las especies
animales se precisa sincronizar el ciclo sexual de hembra receptora con el estadio de desarrollo del
embrin, en el caso de roedores, tienen la particularidad de necesitar como receptoras hembras en
estado de pseudogestacin. Esto quiere decir que las hembras han tenido que ser cubiertas por un
macho infrtil. Por esta razn en los animalarios que trabajan con estas especies es preciso disponer
de machos vasectomizados. En el caso de las conejas es preciso inducir la ovulacin, pero en este
caso puede realizarse utilizando un macho vasectomizado o recurriendo a un preparado hormonal.
Los resultados de la transferencia dependen de muchos factores, pero por trmino medio es esperable
obtener entre un 25-50% de animales nacidos a partir de los embriones transferidos
Criopreservacin
Muchos animalarios se enfrentan al problema de una falta literal de espacio. Es especialmente
frecuente en aquellos que trabajan con modelos genticamente modificados. Conseguir estos es
extremadamente costoso y al final de los experimentos deben quedar a disposicin de otros grupos de
investigacin, lo que supone una carga para el animalario que los mantiene. La solucin en estos casos
es criopreservarlos, es decir someterlos a un proceso de conservacin a baja temperatura que
259

mantiene la viabilidad de forma indefinida. La temperatura que asegura esa conservacin es la del
nitrgeno lquido (-196C).
Se pueden congelar las lneas en forma de embriones o en forma de gametos, fundamentalmente
espermatozoides. El proceso requiere sustituir el mximo del agua intracelular posible para evitar que
se formen cristales de gran tamao que rompan las estructuras celulares. Esto se consigue recurriendo
a soluciones criopretectoras a base de agentes qumicos que sustituyen al agua intracelular
(crioprotectores penetrantes) o bien que obligan a la salida del agua desde el exterior de la clula
(crioprotectores no penetrantes). La bajada de la temperatura ser ms lenta o ms rpida
dependiendo de la tcnica de congelacin utilizada. En algunos casos es necesario recurrir a la
utilizacin de equipos de congelacin, en otros casos se realiza en vapores de nitrgeno lquido.
Congelar embriones o espermatozoides depende de muchos factores, disponibilidad, costes, velocidad
con la que se necesita recuperar la lnea en el futuro, que se conozca exactamente el fondo gentico y
dependiendo de si la modificacin gentica est en heterocigosis o en homocigosis.
En este momento existen consorcios internacionales que realizan la congelacin y distribucin de
lneas genticamente modificadas a nivel mundial, pero es conveniente que los animalarios dispongan
de un servicio propio ya que la congelacin puede servir para evitar la deriva del fondo gentico que
tiene lugar en el tiempo de forma natural, o en caso de tener que realizar un vaciado sanitario.
Otras Tcnicas Reproductivas de Inters

La fecundacin in vitro o fertilizacin in vitro consiste, como su nombre indica en fecundar ovocitos
recuperados de hembras donantes con espermatozoides obtenidos del epiddimo de un macho
donante, bien utilizando esperma fresco o congelado-descongelado. La fecundacin in vitro permite
disponer de un gran nmero de embriones en un momento dado y se empieza a utilizar junto con la
criopreservacion para crear bancos de embriones en menos tiempo. Los resultados de esta tcnica
dependen enormemente del fondo gentico, hay estirpes con buena respuesta, mientras que en otras
es prcticamente imposible lograr unas buenas tasas de fertilidad, especialmente con esperma
congelado. En esos casos se puede recurrir a la inyeccin intracitoplasmtica de esperma o ICSI. Esta
tcnica muy utilizada en la reproduccin asistida humana, es mucho ms compleja en el ratn, pero
permite recuperar animales incluso a partir de espermatozoides liofilizados.
260

Bibliografa
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261
ADQUISICIN DE
ANIMALES Y ESTATUS
SANITARIO

Adquisicin de Animales y Estatus Sanitario
Los animales vienen utilizndose en experimentacin animal desde hace siglos, pero ha sido en el siglo
XX dnde se ha extendido su uso. Utilizamos animales en experimentacin para el aumento de nuestro
conocimiento, tanto en investigacin que tenga como destino los propios animales a los que va dirigida
la investigacin (vacunas, cirugas, etc.) como, fundamentalmente, modelos de los procesos y
respuestas que tienen los humanos u otros animales. Por lo tanto los animales de experimentacin son
un reactivo biolgico ms utilizado en la investigacin, como los cultivos in vitro, etc. Como todo
reactivo utilizado en experimentacin debe tener una serie de caractersticas conocidas para que al
introducirle una variable, el objeto de estudio, y observar cambios en esas caractersticas, dichos
cambios puedan ser achacados a la variable introducida y no a las caractersticas del reactivo. Por tal
motivo, los animales de experimentacin deben de tener caractersticas conocidas, es decir deben
tender a la estandarizacin.
La estandarizacin permite tener modelos animales fiables y reproducibles donde las respuestas sean
homogneas y podamos conocer sus parmetros biolgicos, reproductores, inmunolgicos,
susceptibilidades, metabolismo, comportamiento, etc. Esta homogenizacin de las respuestas nos
permite reducir la variabilidad, reduciendo el nmero de animales para obtener respuestas
estadsticamente significativas, y nos permite aumentar la calidad de los experimentos.
Los factores que aumentan la variabilidad de lso modelos animales podemos dividirlos en:
Factores internos (genticos).
Factores
externos:
medioambientales
(alojamiento,
manejo,
alimentacin,
etc.)
microbiolgicos (flora microbiolgica que porta el animal).

Estos factores microbiolgicos pueden alterar la respuesta de los animales ya que son capaces tanto
de provocar alteraciones de la salud (fiebre, diarrea, hemorragia, muerte, etc.) como alteraciones de
parmetros fisiolgicos (alteraciones del sistema inmune, cintica de tumores, etc.).
263

Estandarizacin Microbiolgica
De acuerdo con la legislacin, todos los centros donde se utilicen animales de experimentacin deben
de disponer de un especialista en salud animal. Asimismo, durante el registro de los centros deben
presentar un informe tcnico sanitario y llevar de forma peridica datos sobre:
Determinacin peridica del estatus sanitario.
Realizacin de cuarentenas.
Tratamientos.
Vacunaciones.
La determinacin del estatus sanitario permitir evitar la alteracin de los resultados experimentales
debido a los factores externos microbiolgicos. Como hemos mencionado anteriormente las infecciones
pueden alterar el fenotipo de los animales, y por lo tanto los resultados experimentales de forma
evidente alterando la salud de los animales, pero tambin de forma subclnica.
Por ejemplo:
Ratones inmunocompetentes infectados por MPV pueden ver alterado su fenotipo:
-
reduce respuesta de LT y citoquinas, sin afectar la viabilidad celular.
efectos adversos en cultivos celulares.
altera la cintica de los tumores y el rechazo de los injertos.
altera la tolerancia perifrica
Ratas resistentes a diabetes (DR-BB) infectadas por KRV pueden ver alterado el porcentaje
de ratas que desarrollan diabetes.
Por lo tanto hay motivos cientficos, es decir de alteracin de los resultados para utilizar animales que
estn estandarizados microbiolgicamente, pero adems existen motivos comerciales, y motivos
legales.
Motivos comerciales porque los pases que comercializan productos que tienen contacto con el ser
humano necesitan para su comercializacin realizar pruebas de seguridad, toxicidad, etc. En animales
de experimentacin para que esos productos se puedan comercializar en otros pases. Los organismos
que regulan el comercio de estos materiales disean unas guas para reaizar estos test de seguridad,
toxicidad, etc. Donde establecen qu tipo de test hay que hacer, en qu condiciones, y con qu
reactivos biolgicos. Siempre que se utilizan animales como reactivos biolgicos para realizar dichos
test, deben de ser animales con un estatus microbiolgico conocido.
Tambin hay motivos legales ya que para la realizacin de productos que van destinados al consumo
humano, fundamentalmente frmacos, fitosanitarios, etc. para su utilizacin es necesario la realizacin
264

de test, donde se utilizan animales, y son requeridos por agencias especializadas (Agencia espaola
del Medicamento, EMEA, FDA). Dichas agencias regulan la realizacin de estos test mediante leyes
donde se requiere que los animales utilizados en estos test sean animales donde se haya evaluado su
estado sanitario.
Por estos motivos, diferentes agencias internacionales que agrupan a los colectivos que utilizan
animales de experimentacin (ICLAS, FELASA, AALAS, AALAC, etc.) promueven la estandarizacin
microbiolgica de los animales de experimentacin mediante la publicacin de recomendaciones para
la realizacin de controles sanitarios que
establezcan el estatus microbiolgico de los animales
utilizados en experimentacin animal.
265

Estatus Microbiolgico
Para obtener el estatus microbiolgico de los animales que utilizamos en experimentacin hay que
tener en cuenta que podemos hablar de individuos o de poblaciones, y que no existe una legislacin
especfica al respecto sino recomendaciones de los organismos internacionales.
Por tal motivo, al establecer un control que permita conocer el estatus microbiolgico de los animales
deberemos valorar:
los agentes que queramos testar.
la frecuencia que queramos obtener la informacin.
los animales disponibles.
los ensayos y los laboratorios donde los realicemos.
Asimismo, tendremos que tener en cuenta las caractersticas de nuestra instalacin, los requerimientos
legales o cientficos, y de la experimentacin que realicemos.
266

Definicin Microbiolgica
Una vez realizados los test el responsable en salud animal de la instalacin puede emitir un informe
donde se indique cual es el estatus microbiolgico de los animales o de la instalacin. Dichos informes
se utilizan tambin para el intercambio de animales entre centros, tanto a nivel comercial con casa
suministradoras como a nivel cientfico por intercambios de reactivos biolgicos o colaboraciones.
Con dichos informes podemos conocer el estatus microbiolgico de los animales que vamos a utilizar.
Dicho estatus no tienen una nomenclatura oficial pero si existen definiciones que se utilizan a nivel
internacional y que algunas veces pueden inducir a confusin.
Convencional: animales sin sintomatologa clnica.
Virus free: animales libres de anticuerpos frente a los principales virus.

SPF: Specific Pathogen Free. Libre de unos agentes determinados y/o anticuerpos frente a
alguno de ellos.
SOPF: Specific Oportunistic and Pathogen Free. Libre de agentes patgenos definidos en una
lista, donde se incluyen agentes oportunistas.
Gnotobiticos: animales con una microbiologa definida.
Germ free: animales libres de microorganismos.

Los animales que han sido definidos microbiolgicamente requieren un alojamiento que permita
minimizar las probabilidades de cambio de su estatus. Por ese motivo se alojan en sistemas que
introducen unas barreras entre el animal y su entorno para evitar la contaminacin del animal con la
flora del entorno. Dichas barreras sern ms rigidas y seguras cuanto menor probabilidad queramos
tener de que los aniamles contacten con la flora microbiolgica de su entorno. Dichas barreras pueden
ser fsicas o tcnicas.
a. Barreras fsicas:
Puertas/paredes/techos.
Filtros de aire/sobre presin.
Filtros de agua.
Esterilizacin.
Desinfeccin.
Guantes/mascarillas/trajes.
Duchas.
Cubetas.
267

Cabinas.
Aisladores.
Esclusas
SAS.
Lavadoras.
Autoclaves.
b. Barreras tcnicas:
Circuitos y flujos.
Protocolos de trabajo.
Sistemas todo dentro/todo fuera.
Cuarentenas.
Control de plagas.
Control de materiales biolgicos.
El mayor riesgo que existe de contaminacin microbiolgica de los animales de experimentacin se
debe a otros animales o muestras de animales de su misma especie. Esto tiene como consecuencia
que la entrada de animales del exterior de cada instalacin requiera de un control que establezca el
riesgo de contaminacin microbiolgica de los animales de cada una de las instalaciones.
268

Adquisicin de Animales
Actualmente el transporte de animales de experimentacin entre diferentes centros a nivel nacional e
internacional es alto ya que la mayora de los usuarios no tienen espacio para mantener producciones
peridicas de animales que luego se utilicen en experimentacin. Asimismo, el intercambio cientfico
entre instituciones tambin ha incrementado el transporte de animales como reactivos biolgicos entre
centros.
De acuerdo a la legislacin espaola (RD 1201/2005) existen 3 tipos de centros donde se trabaja con
animales de experimentacin: centros de cra, centros suministradores y centros usuarios. Se definen
dichos centros como:
Centro de cra: cualquier establecimiento donde se cran animales de experimentacin.
Centro suministrador: cualquier establecimiento que suministra y mantiene animales de
experimentacin, no nacidos en el mismo centro.
Centro usuario: cualquier establecimiento en el que se utilicen animales de experimentacin.
Por lo tanto los centros de cra se establecen para criar animales de experimentacin y enviar estos
animales a los centros suministradores o a los centros usuarios directamente. Los centros
suministradores se establecen para mantener animales y para enviarlos a los centros usuarios, y es en
estos ltimos donde se realiza la experimentacin.
Durante todo el proceso de produccin y llegada a los centros usuarios existe un flujo de animales,
cuyo tamao depender de diferentes factores.
Adems del flujo de animales entre los centros de cra, los centros suministradores, y los centros de
usuarios, existe un intercambio cientfico a nivel mundial entre los diversos investigadores de los
centros, en el que los modelos animales son transportados y recibidos de forma frecuente y peridica.
Dicho intercambio se produce entre todas las zonas del mundo, lo que convierte a los animales de
experimentacin en posibles vectores de enfermedades.
El transporte de los animales tiene una influencia directa en 2 aspectos bsicos relacionados con la
calidad de los modelos animales, un aspecto relacionado con el estado sanitario y un aspecto
relacionado con el bienestar.
Desde un punto de vista sanitario, el transporte afecta tanto a la posible contaminacin de los animales
con agentes infecciosos durante el transporte, como a las posibles contaminaciones de los animales
del centro receptor con agentes infecciosos que porten los animales que son transportados. Asimismo,
hay que tener en cuenta la posibilidad de zoonosis ya que en ocasiones los animales que llegan a los
centros provienen de pases o zonas donde la prevalencia de enfermedades transmitidas de los
animales a los humanos es ms alta.
269

Manejo, Sujeccin e Identificacin de Animales
Desde un punto de vista relacionado con el bienestar de los animales, es claro que el transporte tiene
un efecto estresante en los animales, llegando a tener un impacto sobre el bienestar de los animales
as como sobre la validez de
los resultados experimentales realizados con estos animales. Las
respuestas fisiolgicas y de comportamiento frente al estrs afectan a mltiples sistemas y funciones

biolgicas. Si el estrs tiene unos niveles altos o se prolonga mucho en el tiempo aparecen signos y
sntomas clnicos evidentes, que van desde el simple miedo, nuseas, hambre, sed, hasta dolor,
dependiendo de la especie animal y las circunstancias del transporte.
El estrs durante el transporte tambin puede afectar a la susceptibilidad frente a infecciones o a la
aparicin de enfermedades espontneas.
Existen diferentes parmetros que permiten medir el estrs en los animales, tales como: los niveles de
corticosterona, cortisol, glucosa, tamao de glndulas adrenales, cambios en el comportamiento,
consumo de agua y comida, peso, etc., y se ha comprobado que el transporte altera estos parmetros
y que para que vuelvan a niveles normales es necesario el paso de un periodo de tiempo en el sitio de
destino.
Los principales factores que pueden tener influencia sobre la aparicin del estrs durante el transporte
son:
El manejo
El alojamiento en un espacio nuevo como es la caja de transporte
El alojamiento en las cajas de transporte de forma diferente a como estaban alojados en el
sitio de salida (compaeros de caja, aislamiento, etc.).
Procesos de carga y descarga.
Movimientos, vibraciones, aceleraciones y desaceleraciones o frenazos.
Espacios, olores, y ruidos desconocidos.
Cambios en la temperatura y humedad.
Falta de alimento, o nuevos alimentos suministrados para el transporte.
Cambios en los ciclos de luz
Todos los cambios de la nueva instalacin del centro receptor (nuevos cuidadores, alimentos,
olores, etc.).
Por tales motivos el traslado de animales solo debe realizarse en aquellos casos en los que sea
estrictamente necesario y siempre que se realice deber tomarse la medidas necesarias para
minimizar el estrs durante el transporte. Las medidas ms importantes que debemos tener en
consideracin son:
La naturaleza y el comportamiento normal de los animales que se estn transportando
(posturas normales, alimentos a suministrar durante el transporte, etc.).
270

El diseo y los materiales de las cajas de transporte. La facilidad para su manejo, inspeccin
de los animales, etc.
El nmero de animales por caja.
El ambiente dentro de la caja
El tipo y cantidad de comida, el tipo de cama, etc.
El tiempo de transporte
El nmero de paradas durante el transporte y el nmero de cambios de vehculo de transporte.
El tipo de transporte.
La experiencia de la empresa y el personal de transporte.
El transporte de animales est regulado legalmente, tanto desde el punto de vista de animales de
experimentacin como la importacin y exportacin de animales entre pases.
A nivel nacional la informacin que se solicita para el traslado de animales de experimentacin aparece
en el anexo IV del RD 1201/2005. En dicho decreto se pide que acompae a los animales un
documento que indique el remitente, destinatario, sitio de carga., transporte, transportista, especie,
nmero de animales, identificacin de los animales, estado sanitario dependiente de la especie que se
traslada, identificacin del responsable en salud animal, cuidados durante el transporte, da y hora de
carga y descarga, duracin del transporte, etc.
Dicho Real Decreto exige la necesidad de que el transportista o empresa de transporte est capacitada
legalmente para realizar el transporte de animales de experimentacin.
A nivel internacional existe gran variedad de documentacin necesaria para el traslado de animales
entre pases y depende mucho de los pases de carga y descarga que vaya a atravesar el envo de
animales, as como de su carcter comercial o cientfico. Debido a esta gran variedad existe compaas
especializadas en este tipo de transporte y preparacin y gestin de la documentacin necesaria para
la importacin/exportacin internacional.
Otro factor a tener en cuenta, desde el punto de vista legal, es el tipo de animal que se est
transportando ya que existe una normativa especfica para el transporte de Organismos Modificados
Genticamente RD 178/2004.
Siempre que exista un traslado de animales debe de conocerse previamente, por el centro que va a
recibir los animales, todos los datos de los animales, as como la forma de alojarse, la forma de envo,
fecha y hora de envo, caractersticas sobre su manejo, el estado sanitario del rea de donde proceden,
etc. Por lo tanto deber existir siempre una coordinacin entre ambos centros, y una aceptacin del
envo, previo al envi de los animales.
271

Para dicha aceptacin el centro receptor solicita un informe al centro emisor, con el estado sanitario del
rea donde proceden los animales para ver si sus caractersticas microbiolgicas estn dentro de las
caracterstica microbiolgicas del rea donde van a se alojados
Una vez que los animales son transportados y llegan a su destino, teniendo en cuenta los puntos
anteriormente descritos sobre el estrs, la salud animal, y los requerimientos legales, dichos animales
deben de supervisarse. Dicha supervisin debe de realizarse de forma estructurada revisando:
La documentacin recibida cotejando que est correcta y solicitando la documentacin que

falte.
Las cajas de transporte para observar que no existen roturas de las cajas que pueda
posibilitar la entrada de insectos u otros animales.
Una vez abierta la caja supervisar el espacio de la caja donde se alojan los animales, la cama
y el alimento suministrado.
El aspecto externo y la paricin de signos y sntomas clnicos de los animales.
Mediante esta supervisin se detectar si los animales recibidos son los animales esperados, vienen
en las condiciones esperadas, en el caso que se detecte alguna incidencia, se podr localizar la posible
causa y poner tratamientos, y confirmar que los animales estn en condiciones, sanitarias y de
bienestar, optimas para la experimentacin.
En la experimentacin animal, uno de los puntos ms importantes es el mantenimiento de los animales
que se van a dedicar a la experimentacin, en unas condiciones estables y conocidas, tanto desde el
punto de vista del medioambiente, como desde el punto de vista microbiolgico. Por tal motivo, se
realizan controles peridicos de los animales para establecer qu agentes infecciosos estn presentes
en la unidad. Asimismo, la unidad cuenta con diferentes mecanismos que evitan que los agentes
infecciosos entren en el rea, directamente o vehiculados, y los animales se vean expuestos a ellos. El
mayor riesgo de introducir agentes infecciosos para las colonias de animales de experimentacin
alojados en un rea son animales, externos a esa rea y de la misma especie. Por este motivo uno de
los mecanismos con los que cuentan las unidades son las denominadas cuarentenas.
Una vez que llegan los animales a la instalacin es necesario establecer un periodo de cuarentena y/o
estabilidad.
La cuarentena se define como la separacin de los animales que llegan, de aquellos animales
presentes en la instalacin para evaluar su estado sanitario. Adems, durante este periodo, los
animales pueden recuperarse del estrs del transporte mencionado anteriormente, y adaptarse a la
nueva instalacin (tipos de alojamiento, comida, bebida, luz, ciclos, etc.). Para una total adaptacin
ser necesario que pasen unos das en el sitio experimental donde vayan a permanecer.
272

El tipo de rea destinado a la cuarentena depender de la especie animal que vayamos alojar, pero la
caracterstica comn a todas ellas es que estarn separadas, lo ms posible, del rea donde alojamos
los animales de la instalacin tanto fsicamente como en rutinas de trabajo.
Existen recomendaciones sobre el tiempo que deben pasar los animales en cuarentena. Dichas
recomendaciones sobre el periodo de cuarentena que se establezca est en base a diferentes
parmetros:
La especie animal.
El grado de proteccin de la instalacin.
La procedencia del envo.
El estado sanitario del rea de donde procedan los animales.
Los test que se realicen durante la cuarentena.
Los resultados que se reciban durante la cuarentena.
Las observaciones de signos y sntomas clnicos que se observen durante la cuarentena.
Del destino de los animales.
De las incidencias durante el transporte.
Como norma general deben anotarse todas las observaciones, los test y sus resultados, los
tratamientos y los resultados obtenidos para valorar al finalizar la cuarentena si los animales suponen
un riesgo para los otros animales alojados en el centro, o si renen las condiciones microbiolgicas
para su uso en la experimentacin.
La cuarentena tiene otra funcin aadida, no menos importante que las anteriores, que es la proteccin
del personal que trabaja con animales de experimentacin del riesgo de zoonosis.
273
MANEJO, SUJECCIN E
IDENTIFICACIN DE
ANIMALES

276

Manejo de Animales
El correcto manejo e inmovilizacin del animal es una prctica esencial para poder llevar a cabo los
procedimientos experimentales de manera segura, tanto para el animal como el personal. A
continuacin se detallan los mtodos de sujecin y manejo de las principales especies animales
utilizadas en investigacin cientfica.
Peces
Al ser animales completamente acuticos, su manejo presenta problemas especficos. Es necesario
recordar que las branquias de los peces se pueden daar si el ste permanece fuera del agua. En
general, no deben manipularse bruscamente. Se deben utilizar siempre redes de contencin para
trasvasarlos sin problemas de una pecera a otra, peceras comunicadas separadas por trampillas, o
bolsas con agua y aire para el transporte.
Para su inmovilizacin se aconseja el uso de anestsicos disueltos en el agua, como el MS 222, con el
fin de que el estrs causado sea mnimo y reducir la posibilidad de traumatismos durante su
manipulacin.
Anfibios
La manipulacin o sujeccin de anfibios ha de hacerse con la mano o mejor con guantes
humedecidos previamente para evitar que la capa de mucus protector de la piel sea daada o
eliminada. La mayora de los anfibios son muy sensibles al calor, por lo que no deben ser manipulados
fuera de su entorno normal por mucho tiempo. Si se tienen que manejar durante un perodo
prolongado, se recomienda mantenerlos en un ambiente hmedo o envueltos en un pao hmedo,
lejos de fuentes de luz o de calor, para no daar la capa de mucus protector.
Las ranas y sapos son ms fciles de sujetar durante un corto perodo, manteniendo el pulgar y el
ndice alrededor de su cintura y apretando ligeramente las piernas con los restantes dedos y la palma
de la mano. Personas con poca experiencia pueden utilizar redes de peces.
Para inmovilizarlos: agua con hielo, al disminuir la temperatura se disminuye el metabolismo y con ello
los movimientos, o anestsicos disueltos en el agua, como el MS 222. Debe tenerse en cuenta que al
disminuir la temperatura nicamente se reducen los movimientos al animal, para realizar intervenciones
quirrgicas debe administrarse anestesia y analgesia, para evitar el sufrimiento. Si el agua contiene
demasiado hielo puede provocar el cambio de la piel.
Reptiles
La mayora de los reptiles pueden ser sujetados manualmente para su examen. El animal debe
sujetarse cerca de la cintura escapular, rodeando al cuerpo con suavidad. El procedimiento se facilita
cubriendo los ojos con una tela.
277

Los lagartos ms grandes deben apresarse sujetndolos por detrs de la cabeza y alrededor de la
cintura pelviana. Si se les sujeta por detrs de la cintura plvica la cola puede desprendrseles.
Algunas especies ms pequeas de lagartos son demasiado delicadas para ser examinadas
visualmente, siendo recomendable la induccin qumica para su reconocimiento.
Los ofidios pequeos no venenosos pueden sujetarse apresando el cuello inmediatamente detrs de la
cabeza y sosteniendo el cuerpo con la otra mano. Sin embargo, la inmovilizacin adecuada de los
ofidios constrictores exige la participacin de ms de una persona. La cabeza se envuelve en un trapo
hmedo para impedir la visin y el animal se apresa por detrs de la cabeza mientras otra persona
sujeta el resto del cuerpo. Hay que evitar la tensin excesiva del cuello. Muchas serpientes pueden
trasladarse por medio de un gancho colocado cerca del centro de su cuerpo, sin necesidad de contacto
fsico. Las serpientes venenosas deben ser tratadas con cuidado, por personal con experiencia y nunca
por una persona sola.
Puede recurrirse a tubos transparentes plexigls con un extremo cerrado. Se coloca al animal frente a
un tubo de calibre adecuado y sujeto por unas pinzas. Cuando la serpiente tiene medio cuerpo dentro
se apresa el extremo abierto y el animal simultneamente. As podemos efectuar el examen,
administrar medicamentos y procedimientos terapeticos menores.
Los Quelonios se inmovilizan apresndolos por el caparazn. Varias especies muerden y han de ser
tratadas con cautela. Los miembros de mayor tamao pertenecientes al orden Crocodilia exigen
inmovilizacin qumica, mientras que los ms pequeos pueden inmovilizarse usando una red provista
de mango. La red se coloca alrededor de la cabeza y el mango se trae hacia atrs sobre la pelvis del
animal sujetndolas juntas, para evitar que el animal se vuelva. Los ojos se cubren con una tela y las
fauces se mantienen cerradas con esparadrapo. Debe advertirse que tanto la cola como las fauces
pueden ser peligrosas.
Aves
Se puede utilizar una red, una vez dentro de ella, se le sujetan las alas para que no se daen. Se
puede inmovilizar manteniendo las alas plegadas sobre el cuerpo rodeando ambos con las manos o
mantenindolo en el aire con las alas totalmente desplegadas.
Conejos
Los conejos son tmidos y excitables por lo que su manejo debe hacerse con el mayor cuidado para
evitar causarles dao, pero con firmeza. Para sacar al conejo de la jaula agarrarle por la piel de la zona
dorsal del cuello con una mano y sujetar la zona lumbar y patas traseras con la otra.
De esta manera evitaremos que el conejo golpee con sus patas traseras. Una mala sujecin de la parte
trasera del conejo puede causarle lesiones al animal (e.g., fractura de columna) o a nosotros mismos.
Para transportar al conejo lo colocaremos tal y como muestra la figura con su cabeza escondida entre
nuestro cuerpo y el brazo y sujetando con firmeza las patas traseras con una mano mientras que la otra
278

permanece libre para abrir la puerta de la jaula, etc. Nunca se dejar a un conejo encima de la mesa de
trabajo sin la debida sujecin para evitar cadas accidentales.
Rata
Las ratas deben ser cogidas siempre por la base de la cola, no por el extremo, para evitar lesiones.
Para inmovilizarlas, es conveniente rodearles el trax y abdomen de manera que las patas delanteras y
la cabeza queden inmovilizadas a la vez que se permite respirar al animal libremente. Podemos
ayudarnos cubriendo al animal con un trapo. Ratas de pequeo tamao pueden ser inmovilizadas
sujetndolas por la piel inter-escapular y cuello.
Ratn
Los ratones son fcilmente inmovilizados sujetando firmemente la piel del cuello-dorso de manera que
nos aseguremos de impedir la movilidad de la cabeza. Segn el procedimiento a realizar (sondaje oral,
inoculacin ip, marcaje de orejas, etc.) sern pequeas variaciones en el mtodo de inmovilizacin
para facilitar la ejecucin de la tcnica. La siguiente imagen muestra el mtodo correcto de
inmovilizacin para el sondaje oral de un ratn.
Hmster
Antes de coger a un hmster hay que asegurarse de que est despierto y ha advertido nuestra
presencia ya que son muy asustadizos y pueden morder si se sobresaltan. Para el traslado durante el
cambio de jaula, los hmsters pueden ser sujetados de la piel de la espalda o cogidos con ambas
manos.
Para inmovilizarlo a la hora de realizar procedimientos, colocar al hmster sobre la rejilla presionando
su espalda con la palma de la mano a la vez que intentamos agarrar la mayor cantidad de piel posible
entre nuestro pulgar y los otros 4 dedos. Una vez inmovilizado, sujetamos el pliegue de piel
fuertemente presionando con los 4 dedos contra la parte anterior de la base del pulgar.
Cobayo
Para sujetar a un cobayo, deberemos colocar una mano alrededor del trax y con la otra sujetaremos
las patas traseras del animal. Para procedimientos sencillos, se puede inmovilizar al animal
envolvindolo en una toalla dejando accesible la parte del cuerpo dnde se va a realizar el
procedimiento. Las cobayas no tienen piel sobrante como en el caso del ratn o el hmster por lo que
no debe utilizarse las mismas tcnicas para el manejo del cobayo.
279

Identificacin de Animales
La correcta identificacin de los animales alojados en un animalario, o a los que se les est aplicando
algn procedimiento experimental es una prctica muy importante para evitar problemas y confusin en
la aplicacin de tratamientos, toma de muestras y recogida de datos. No existe un nico mtodo de
identificacin recomendable para todas las situaciones y especies animales, por lo que es
recomendable conocer las distintas posibilidades as como sus ventajas e inconvenientes para poder
elegir el ms adecuado.
Identificacin Temporal
Marcas de Tinta
Este sistema consiste en hacer marcas con rotuladores en la cola, el pelo o los dedos del animal. Es
til cuando se requiere un mtodo fcil y rpido para una identificacin a corto plazo.
Factores a tener en cuenta:
-
Es necesario renovar las marcas frecuentemente (a diario o cada 2-3 das).
Existe riesgo de abandono materno cuando se utiliza este sistema de identificacin en neonatos ya
que el manejo puede estresar a la madre.
Identificacin Permanente
Se entiende por mtodos de identificacin permanentes todos aquellos mtodos que, en principio, no
es necesario renovar durante la vida del animal.
Muescas en Orejas
El marcaje por muescas en las orejas es uno de los mtodos ms habituales, fciles de realizar,
baratos y eficaces. Produce un mnimo dolor y/o distress y puede utilizarse la muestra de tejido
obtenida para el genotipado.
A tener en cuenta:
-
Puede ser difcil la numeracin completa en ratones menores de 2 semanas.
Desgarros por peleas etc, pueden hacerlas indescifrables.
Permite una amplia variedad de cdigos.
Crotales
Los crotales o pendientes es un mtodo de identificacin utilizado tanto en grandes como en pequeos
animales. Aunque en principio es un mtodo permanente, no es raro que el pendiente se desprenda al
280

rasgarse la oreja. Tambin es frecuente reacciones inflamatorias sobre todo si la colocacin del
pendiente no es la correcta. Si imaginamos la oreja del ratn como la esfera de un reloj, el crotal debe
colocarse en la posicin que ocupara el nmero 4.
Tatuajes
El tatuaje en la cola, falanges u orejas es un mtodo til tanto para adultos como para neonatos y se
utiliza en grandes y pequeos animales. Consiste en la introduccin de tinta en las capas internas de la
piel con ayuda de una aguja o tatuador. Al igual que en el caso de las muescas en orejas, esta tcnica
permite un amplia variedad de cdigos.
Microchips
Los microchips son unos dispositivos que se implantan subcutneamente y que emiten una seal de
radio frecuencia que es recibida por el lector adecuado. Esta seal es interpretada como un nmero
de identificacin. Estos dispositivos suelen llevar incorporado un sistema anti-migracin que evita que
el microchip se mueva de la zona de aplicacin (generalmente la zona interescapular). Son estriles y
en algunos casos, reutilizables.
Actualmente se dispone de microchips que adems del nmero de identificacin pueden aportar otros
datos fisiolgicos como la temperatura corporal.
Amputacin de falanges
La amputacin de falanges ha sido un mtodo de identificacin muy utilizado hasta hace poco tiempo,
pero muy controvertido por el impacto que puede tener en el bienestar animal. Aunque algunas
publicaciones recientes han aportado informacin que pone en entredicho el impacto negativo de esta
tcnica sobre el bienestar animal, al menos a corto plazo, es recomendable utilizar otro mtodo de
identificacin siempre que sea posible hasta que se disponga de ms informacin sobre los efectos
secundarios de este mtodo.
Consideraciones:
-
Amputar falanges (no ms de 2) nicamente de una de las patas traseras.
Realizar en neonatos de no ms de 7 das de edad.
281
TOMA DE MUESTRAS

Toma de Muestras
284

Toma de Muestras
La recogida de una o varias muestras biolgicas, ya sea durante o al final de los experimentos, forma
parte de la prctica totalidad de los diseos experimentales que incluyen animales.
En base a los datos obtenidos de estas muestras se elaboran los resultados de los experimentos y por
lo tanto, la validez de las conclusiones derivadas de estos resultados depender en gran medida de
que las muestras biolgicas hayan sido recogidas en los tiempos adecuados, con las tcnicas correctas
y se hayan procesado apropiadamente. Por lo tanto, un buen diseo experimental que incluya la
recogida de especmenes biolgicos, deber tener en cuenta todos aquellos factores que afectan a la
integridad de dichas muestras y que pueden falsear los datos obtenidos de ellas; sitio de recoleccin de
la muestra, tcnica adecuada, tipo de procesado de la muestra, etc.
A continuacin se describen los mtodos de recogida de las muestras biolgicas ms habituales en
ratas y ratones (sangre, DNA y orina) as como otras mucho menos habituales (leche, CSF, mdula
sea, etc.).
285

Toma de Muestras
Obtencin de Muestras de Sangre

La sangre es sin duda la muestra biolgica que con mayor frecuencia se recoge de los animales de
experimentacin. Por ello, numerosas tcnicas se han puesto a punto con el fin de minimizar el estrs,
dao y efectos secundarios producidos a los animales.
Antes de elegir una u otra tcnica, es esencial que el investigador est al corriente de las implicaciones
que dicha tcnica tiene, no solamente sobre el animal, sino sobre la muestra obtenida. Los factores a
considerar a la hora de seleccionar la tcnica de extraccin de sangre son:
-
La especie.
El tamao del animal.
El tipo de muestra requerida (suero, plasma, sangre completa, etc.).
La calidad de la sangre obtenida (estril o no estril).
La cantidad de sangre requerida.
La frecuencia de sangrado.
El estatus de salud el animal.
La experiencia del tcnico en los diferentes mtodos de sangrado.
Efectos Fisiolgicos de la Prdida de Sangre

La respuesta de un animal a un procedimiento de extraccin de sangre va mucho ms all de la simple
prdida de un volumen determinado de sangre. En la respuesta van a influir muchos factores como son
la velocidad en que se extrae la sangre, el sitio y mtodo de extraccin, la habilidad del tcnico, el uso
y tipo de anestesia, la edad, sexo y estado de salud del animal entre otros.
El estrs asociado a cualquier procedimiento de extraccin de sangre puede influenciar los niveles de
glucosa circulantes, corticosteroides, prolactina, epinefrina, hormona del crecimiento, insulina, renina
plasmtica, enzimas en suero as como el recuento de glbulos blancos, eritrocitos y plaquetas. Tales
cambios fisiolgicos pueden incluso invalidar los resultados experimentales.
Prdidas Mnimas (<10% del Volumen Circulante)

Con prdidas mnimas de sangre (inferiores al 10% del volumen de sangre circulante: Vc), los
animales, en general, no presentarn sintomatologa importante. Tras extracciones de menos del 10%
del Vc, los reflejos iniciados por los baroreceptores causarn la liberacin de hormonas colinrgicas de
la mdula de la glndula adrenal y las terminaciones de los nervios simpticos. Como resultado de esta
activacin, se producir:
286
Un aumento del ritmo cardiaco.
Contraccin de los lechos arteriales de msculo y piel.
Contraccin de venas y reservorios venosos.

Toma de Muestras
La presin arterial, retorno venoso y el rendimiento cardiaco se mantienen o se ven mnimamente

afectados mientras que mecanismos compensatorios se activan para reponer la prdida de sangre;
secrecin de hormona antidiurtica y activacin del sistema renina-angiotensina aldosterona.
Prdidas Moderadas (15-20% del Volumen Circulante)

Con prdidas de sangre moderadas el animal sufrir un marcado descenso de la presin arterial y
rendimiento cardaco a pesar de los mecanismos compensatorios. La extraccin del 15% al 20% del Vc
causar la liberacin masiva de acetilcolina con la consiguiente taquicardia, intensa contraccin arterial
y redistribucin de la sangre que ser movilizada desde el intestino y la piel. La contraccin venosa
mantiene parcialmente el retorno venoso y la movilizacin de fluidos intersticiales al compartimento
vascular restablece algo de la prdida de sangre. Se produce glicolisis anaerbica por falta de oxgeno
mientras que el aumento de las concentraciones plasmticas de lactato causa acidosis metablica a la
que seguir una taquipnea compensatoria.
Prdidas Severas (>20% del Volumen Circulante)

Con mayores prdidas de sangre, la cada del rendimiento cardiaco, presin sangunea y perfusin de
tejidos ponen en serio peligro la vida del animal. La funcin cardiaca se va a ver limitada por la
disminucin en la sangre que llega al corazn, as como por el factor depresor del miocardio liberado
por el pncreas al disminuir su grado de perfusin. La anoxia de tejidos, hipercapnia y acidosis pueden
dar lugar a la diseminacin del dao celular, daos irreversibles en tejido que comprometen la
viabilidad de los rganos y la muerte.
El investigador debe planear y ejecutar cada protocolo de extraccin de sangre teniendo en cuenta el
estrs asociado con el manejo y prdida de sangre del animal y hacer todo lo posible para minimizar la
reaccin del animal a ambos agentes estresantes. La planificacin y control adecuados de la extraccin
de sangre y de todas las variables experimentales asociadas con ella, no solo mejorarn el bienestar
animal sino que minimizarn la confusin de los datos experimentales. Para ello, es importante tener
en cuenta estas sugerencias:
-
Acondicionar a los animales al manejo por parte de los tcnicos al procedimiento en cuestin.
Utilizar la tcnica que menos impacto tenga en los valores sanguneos.
En caso de extraccin de volmenes importantes, es conveniente compensar la prdida de sangre

con suero fisiolgico administrado por va subcutnea.
Valorar el uso de anestesia o sedacin para el procedimiento.
Lgicamente, habr que tener en cuenta el anestsico o sedante utilizado ya que puede tener
influencia sobre los valores sanguneos. Sin embrago, en muchas ocasiones es preferible el uso de
estos medicamentos de los que conocemos perfectamente los efectos, a las consecuencias
imprevisibles que el estrs pueda tener en dichos parmetros.
287

Toma de Muestras
Volumen Seguro de Extraccin

Para determinar la cantidad de sangre que podemos extraer sin causar efectos deletreos en la salud
del animal que podran, adems, influir en los resultados experimentales, debemos tener en cuenta
estos factores:
-
Volumen de sangre circulante de la especie en cuestin (o peso del animal).
Frecuencia de sangrado requerida.
Tiempo de recuperacin entre sangras.
La tabla siguiente recoge los valores estimados de volumen de sangre circulante para las principales
especies utilizadas en investigacin.
Especie
Volumen circulante (mL/kg)
Ratn
Rata
Cobayo
Conejo
Minipig
Perro (Beagle)
Macaco
72
64
75
56
65
85
56
(Rhesus)
Es decir, se estima que para un ratn el volumen total de sangre corresponde al 7.2% de su peso y al
6.4% en el caso de la rata. Basndose en estos valores de volmenes de sangre circulante, se han
establecido los volmenes seguros de extraccin de sangre y los perodos de recuperacin estimados
para extracciones nicas y mltiples.
Extraccin nica
Muestra (% Vc*)
Recuperacin
Extracciones mltiples
Muestra (% Vc* en 24h)
Recuperacin
7,5 %
1 semana
7,5 %
1 semana
10 %
2 semanas
10 15 %
2 semanas
4 semanas
20 %
4 semanas
15 %
*Vc: Volumen circulante.
Se ha comprobado que, en una extraccin del 10% del Vc, el volumen de sangre se recupera en 24
horas pero el recuento de eritrocitos y reticulocitos no vuelve a valores basales hasta pasadas 2
semanas de la extraccin. Si se requieren extracciones diarias, no ms del 1% del Vc debe ser extrado
en cada sangra. El diseo experimental debe incluir tantos grupos como sea necesario para no
exceder el volumen de muestra mximo, reduciendo as la posibilidad de obtener artefactos.
La tabla a continuacin recoge los volmenes seguros de extraccin para rata y ratn en funcin del
peso del animal basndose en las premisas establecidas en la tabla anterior.
288

Toma de Muestras
Vc* Total
7,5% Vc
10% Vc
15% Vc
20% Vc
(mL)
(mL)
(mL)
(mL)
(mL)
Ratn (25g)
1.8
0.1
0.2
0.3
0.4
Rata (250g)
16
1.2
1.6
2.4
3.2
Especie (peso)
*Vc: Volumen de sangre circulante
Como regla general:

Rata
Ratn
Volumen total
64 ml/kg
Volumen total
72 mL/kg
V extraccin cada 2
semanas
600 L/100g
V extraccin cada 2
semanas
70 L/10g
V extraccin cada 24h
60 L/100g
V extraccin cada 24h
7 L/10g
Mtodos de Extraccin de Sangre

Salvo que se especifique lo contrario, todos los mtodos de extraccin de sangre descritos a
continuacin son aplicables tanto en ratas como en ratones.
Vena Safena
La vena safena del ratn es fcilmente visible a travs de la piel (una vez depilada) por lo que esta
tcnica es fcil de realizar. Una vez realizada la puncin con la aguja (23G), la sangre fluye y es
recogida pasivamente con un capilar.
A tener en cuenta:
-
La sedacin del animal potenciar la vasodilatacin de la vena facilitando la extraccin de sangre.
Valorar el uso de anestesia para minimizar el estrs por la inmovilizacin.
Permite mltiples extracciones.
No es adecuada para la obtencin de grandes volmenes de sangre (200L en ratas y 50L en

ratn).
Vena Facial
Actualmente es la tcnica alternativa a la puncin retro-orbital en ratn y empiezan a aparecer
publicaciones en las que se utiliza en ratas, aunque en esta especie an no est perfectamente
descrita. La vena facial es el vaso que recoge la sangre de la cabeza y de la piel de la mejilla.
La obtencin de muestras de sangre por puncin de la vena facial ha demostrado ser un mtodo
efectivo, rpido y poco estresante para el animal. Puede realizarse esta tcnica en el mismo animal al
289

Toma de Muestras
menos 4 veces en cortos perodos de tiempo sin observar efectos adversos en el animal, siempre y
cuando respetemos los volmenes mximos y perodos de recuperacin.
A tener en cuenta:
-
No requiere anestesia.
Permite mltiples sangrados.
En ratn, permite la extraccin de volmenes mximos recomendados.
Puncin del Seno Retro-orbital

Aunque esta tcnica fue descrita por primera vez en 1913 y se ha venido utilizando desde entonces
como de manera rutinaria tanto en rata como en ratn, la puncin retro-orbital est siendo cada vez
ms discutida debido a su elevado impacto en el bienestar animal y el potencial de influir en resultados
experimentales por los efectos secundarios como infecciones, inflamacin, etc.
Actualmente, la mayora de las instituciones exigen una justificacin cientfica slida para el uso de esta
tcnica. En cualquier caso, su realizacin slo es aceptable bajo anestesia y por personal cualificado.
Vena Sublingual
La vena sublingual es fcilmente accesible y permite la recogida de grandes volmenes de sangre.
Aunque se requiere la anestesia, su uso facilita el procedimiento. La presencia de enzimas en la saliva
hace que esta tcnica deba ser utilizada con precaucin si vamos a realizar bioanlisis con la muestra
obtenida.
Vasos Axilares
Se trata de un procedimiento terminal que requiere que el animal est totalmente anestesiado y debe
ser eutanasiado despus del procedimiento.
Arteria Cartida
Se trata tambin de un procedimiento terminal que requiere de la anestesia profunda del animal. Para
acceder a la cartida se realiza una escisin en la piel y tejido muscular del cuello. Una vez localizada
la arteria, se realiza la puncin y se recoge la sangre con una pipeta.
Puncin Cardaca
Es un procedimiento terminal que puede realizarse con el animal anestesiado o en los primeros
momentos tras la eutanasia con CO2. Permite la obtencin de elevados volmenes de sangre y que,
con las debidas precauciones, puede obtenerse estril.
Se han reportado diferencias en valores hematolgicos entre la puncin cardiaca con exposicin de la
cavidad torcica y la extraccin sin apertura de la caja torcica (tal y como aparece en la foto).
290

Toma de Muestras
Vena Yugular
Se han puesto a punto en los ltimos aos procedimientos no quirrgicos para la extraccin de sangre
de la vena yugular en ratas y ratones. La tcnica requiere mantener la cabeza del animal en una
postura poco natural de manera que se haga accesible la vena, por lo que se aconseja el uso de
anestesia para minimizar el estrs. La extraccin se realiza con una aguja de 25G y pueden obtenerse
grandes volmenes.
Vena Lateral de la Cola

La vena lateral de la cola puede utilizarse como mtodo de extraccin de pequeos volmenes de
sangre. La dilatacin de la vena facilitar la extraccin de muestra que puede realizarse por pequeos
cortes o mediante extraccin con una jeringuilla unida a una aguja de 25G o 30G.
Amputacin del Extremo de la Cola

Esta tcnica implica la amputacin del extremo de la cola (5 mm). Se obtienen pequeos volmenes
de sangre. El flujo puede aumentarse calentando la cola a uno 45 C y masajearla pero hay que tener
en cuenta que ste proceso puede causar una leucocitosis inflamatoria que resultar en un valor de
glbulos blanco aumentado.
Las muestras obtenidas de la vena de la cola difieren en los valores de hematocrito y recuento
diferencial de clulas sanguneas de las muestras obtenidas por puncin retro-orbital y presentan una
elevada variacin entre muestras.
Procesado de la Muestra e Influencia en los Resultados

Uno de los anlisis ms frecuentemente realizados con muestras de sangre es el anlisis de
parmetros hematolgicos. La tcnica seleccionada para obtener la sangre, la habilidad de la persona
que la realiza, la eleccin del anticoagulante, el procesado de la muestra, etc., van a influenciar los
resultados obtenidos al introducir artefactos que pueden pasarnos inadvertidos.
A continuacin se detallan los factores que pueden afectar a estos resultados.
Variables Pre-analticas
Los parmetros hematolgicos en el ratn y en la rata estn fuertemente influenciados por variables
como la edad, sexo, o cepa del ratn, el estrs, el estado sanitario y nutricional, as como la tcnica de
extraccin de la muestra y su posterior manipulacin. La interpretacin de un anlisis hematolgico
puede llevar a conclusiones errneas si no se controlan todas estas variables. La siguiente tabla
recoge todas aquellas variables pre-analticas que afectarn a los resultados.
291

Toma de Muestras
Caractersticas
fisiolgicas
Obtencin de la muestra
Edad
Diseo experimental
Sexo
Manejo/cambio de jaulas previos**
Fondo gentico
Anestesia*
Transporte
Orden de extraccin
Hora de extraccin
Sitio de extraccin
Manejo y almacenaje de la
muestra
Ayuno
Anticoagulante utilizado
Instrumentacin
Enfermedades concurrentes
Relacin anticoagulante/sangre
Orden de anlisis
Anlisis
Calidad de la muestra (cogulos,

lipemia, hemlisis)
*Puede alterar la presin sangunea y los contajes celulares

**Puede alterar el recuento de leucocitos
Tcnica de Extraccin y Manipulacin de la Muestra

El proceso de extraccin de sangre y su posterior manipulacin pueden alterar los parmetros
hematolgicos. Para evitar estas influencias no deseadas, se deben seguir las siguientes
recomendaciones:
-
La sangre se debe extraer rpidamente y segn un procedimiento que reduzca al mximo el estrs
causado al animal y el dao tisular y/o de la muestra. La hemlisis causada por una tcnica de
extraccin incorrecta o mal ejecutada se denomina hemlisis ex vivo. Se puede reconocer por el
color rosado o rojizo del plasma o suero y no indica, generalmente, un proceso de hemlisis in vivo.
La hemlisis ex vivo alterar parmetros propios de eritrocitos; vindose ms afectados los
calculados que los directamente medidos (ver apartado 5.1.2.2). Para evitar la hemlisis, es
necesario no provocar turbulencias en el flujo de sangre durante la extraccin y la agitacin
excesiva de la muestra.
En muestras agitadas durante 3 minutos en una noria pueden obtenerse valores ms bajos de
RBC, HGB y HCT que las sometidas a agitacin manual suave.
292

Toma de Muestras
La tabla a continuacin muestra los artefactos ms frecuentes y los parmetros a los que afectan
resaltando en rojo los artefactos debidos a problemas durante el proceso de extraccin o por
procesado incorrecto de la muestra (poca agitacin, exceso de anticoagulante, etc.).
Parmetro falseado
Causa del artefacto

Analizador mal configurado para sangre de ratn
Disminucin de eritrocitos
Muestra coagulada
Exceso de anticoagulante
Aumento de MCHC
Falso aumento de hemoglobina por lipemia o cuerpos de Heinz

Reticulocitos resistentes a lisis contados como WBC
Aumento de leucocitos
Clulas rojas nucleadas

Trombos de plaquetas contados como WBC
Aumento de Eosinfilos
Trombos de plaquetas contados como eosinfilos

Analizador mal configurado para sangre de ratn
Disminucin de plaquetas
Dificultades tcnicas durante extraccin

Trombos de plaquetas no contados como plaquetas
Manejo inapropiado de la muestra
Tiempo de coagulacin
aumentado
Dificultades tcnicas durante extraccin

Cogulo no detectado
Exceso de anticoagulante
Sitio de Extraccin
El sitio de extraccin puede tambin influenciar los valores de ciertos parmetros. Por ejemplo:
-
Los valores de hematocrito y hemoglobina son ms elevados en muestras obtenidas de sangre de

la cola que de cualquier otro vaso perifrico.
El recuento leucocitario de muestras obtenidas por puncin cardiaca suele dar valores menores de
WBC totales pero recuento de neutrfilos aumentado.
En cuanto a los valores eritrocitarios, los de muestras de sangre central (puncin cardiaca) suelen
ser menores que los de sangre perifrica (e.g., vena safena, facial).
Tambin hay que tener en cuenta que, en funcin del sitio de extraccin, obtendremos una muestra
de sangre arterial, venosa o mezcla de ambas (ver tabla a continuacin).
Sitio de extraccin
Tipo de sangre obtenida
Vena de la cola
Mezcla arterial/venosa
Vasos axilares
Mezcla arterial/venosa
Vena cava posterior
Venosa
Seno retroorbital
Venosa
Puncin cardiaca
Arterial, venosa o mezcla de ambas
293

Toma de Muestras
En general, las muestras obtenidas mediante un catter no son vlidas para anlisis hematolgico
debido al elevado riesgo de inflamacin crnica.
Para evitar la variabilidad en funcin del sitio de extraccin, ste deber ser el mismo para todos los
individuos dentro del experimento y para todas las extracciones.
Anticoagulantes ms Utilizados
Los anticoagulantes previenen la coagulacin sangunea y mantienen la morfologa celular. Una vez
recogida la muestra, sta debe agitarse suavemente de inmediato para prevenir la formacin de
cogulos. Si se utilizan tubos preparados con anticoagulante el volumen de la muestra debe ser el
indicado por el fabricante. No solo la eleccin del anticoagulante a utilizar, sino tambin su
concentracin pueden alterar los valores hematolgicos o invalidar la muestra para ulteriores anlisis.
Los anticoagulantes previenen la coagulacin sangunea y mantienen la morfologa celular. Una vez
recogida la muestra, sta debe agitarse suavemente de inmediato para prevenir la formacin de
cogulos. Si se utilizan tubos con anticoagulante, el volumen de la muestra debe ser el indicado por el
fabricante. Los anticoagulantes utilizados en hematologa son:
EDTA (cido Etilendiamino Tetraactico)

2+
Accin: agente quelante del in Ca . Inhibe la accin del calcio en el proceso de coagulacin. Rango
de concentracin: 0.5 a 2.0 mg/mL de sangre. Concentracin ptima: 1.5 mg/mL de sangre. El EDTA
es el anticoagulante de eleccin para la determinacin de parmetros hematolgicos. Se recomienda
utilizar su sal di-potsica (K2EDTA), ya que genera menos artefactos que la tri-potsica (K3EDTA). Los
posibles artefactos debidos a concentraciones inadecuadas de EDTA son:
-
Exceso de EDTA: crenacin de eritrocitos por salida de agua al medio extracelular. Consecuencia:
falsa disminucin de HCT y VCM.
Defecto de EDTA: Riesgo de coagulacin de la muestra.
La viabilidad de una muestra en EDTA y refrigeracin (4C) es de 24 horas para recuento de clulas
totales y de 8 horas para recuento diferencial de leucocitos.
Heparina
Accin: neutraliza la trombina. La sangre no puede utilizarse para determinacin de parmetros de
coagulacin. Concentracin ptima: 14-17 U/mL de sangre. La heparina no impide completamente la
agregacin plaquetaria y de los glbulos blancos y da una coloracin azulada de fondo en frotis teidos
con Giemsa.
Citrto Sdico
Accin: al igual que el EDTA, inhibe la accin del calcio en el proceso de coagulacin. Concentracin
ptima: Solucin de citrato sdico al 3.2% (0.109 mmol/L). Dilucin de la muestra 1:9 (una parte de
294

Toma de Muestras
anticoagulante por 9 de sangre). Aunque no se recomienda su uso para un anlisis hematolgico

completo, ya que favorece la lisis celular, es el anticoagulante de eleccin para estudios de coagulacin
y plaquetas. La tabla a continuacin resume las utilidades de los distintos anticoagulantes.
Anticoagulantes para anlisis hematolgico
Anticoagulante
EDTA
Heparina
Citrato sdico
Modo de accin
Secuestro de Ca
2+
Inhibe formacin de
Trombina
Secuestro de Ca
2+
Concentracin de uso
Problemas
1,5 mg/ml sangre
14-17 U/ml sangre
No para pruebas de
coagulacin
1:9 Solucin 3,2%
Agregacin plaquetas y
leucocitos
295

Toma de Muestras
Obtencin de Muestras de ADN

La obtencin de muestras de ADN es un procedimiento necesario para el genotipado de lneas de
ratones modificados genticamente. Tradicionalmente, la muestra de ADN se ha obtenido de la cola,
por escisin de la ltima porcin en el momento del destete.
Actualmente, se dispone de mtodos de extraccin y purificacin de ADN muy precisos que permiten la
obtencin de suficiente ADN a partir de tejidos cuya obtencin es menos traumtica que la de la cola.
Por ejemplo, se puede obtener ADN suficiente para el genotipado por PCR de la muestra de tejido que
se extrae durante el marcaje por muescas en las orejas, de pequeos volmenes de sangre, de pelo,
de muestras del epitelio bucal recogidas con un hisopo, etc.
En el caso de obtencin de ADN a partir de la biopsia de cola, es importante para el bienestar animal
seguir estas pautas:
-
A partir de la segunda semana de vida comienza la calcificacin de las ltimas vertebras de la cola
por lo que la edad ptima para realizar biopsia es de los 14 a los 21 das de edad.
Cortar la mnima cantidad necesaria para obtener el ADN requerido segn el mtodo de
genotipado (1-2 mm son suficientes para el genotipado por PCR).
296

Toma de Muestras
Obtencin de Muestras de Orina

La obtencin de muestras de orina es un requerimiento bsico en estudios de toxicologa,
comportamiento, nutricin, metabolismo, etc. Las tcnicas de recoleccin de orina se pueden clasificar
en 2 grandes grupos segn sea necesaria algn tipo de intervencin o no.
Mtodos de Obtencin de Muestras No Estriles

Se han descrito numerosas tcnicas para la obtencin de muestras de orina de ratones sin
intervencin. Algunas de los mtodos que han demostrado ser ms efectivos en cuanto a la cantidad
de orina obtenida consisten en colocar al animal (ratas y ratones) sobre una lmina de plstico o una
placa petri durante un tiempo y recoger despus la orina producida aspirndola con una micropipeta.
La produccin de orina puede aumentarse acercando una poco de algodn humedecido en dietil ter a
la nariz del animal.
Si se requieren grandes cantidades de orina pueden recurrirse al alojamiento del animal en jaulas
metablicas en las que se recogen los desechos (heces y orina) producidos por el animal de manera
continua.
Lgicamente, la orina obtenida mediante cualquier de estos mtodos no es estril.
Mtodos de Obtencin de Muestras Estriles

Mediante la puncin directa de la vejiga urinaria como procedimiento terminal, y con las tcnicas
aspticas adecuadas, se obtienen muestras de orina estril de ratas y ratones.
La insercin de un catter en la uretra puede realizarse bajo anestesia general en ratas aunque es un
procedimiento complicado y con un elevado riesgo de infeccin si no se lleva a cabo con la asepsia
requerida.
297

Toma de Muestras
Obtencin de Otras Muestras Biolgicas

Lquido Biliar
El sistema biliar puede ser una ruta importante de eliminacin de frmacos. Por ello, el estudio del
contenido biliar es importante para estudios farmacocinticos o metablicos.
La bilis puede ser obtenida en ratones mediante canulacin del conducto biliar comn o de la vescula
biliar tanto para obtencin de muestras repetidas (es decir, mediante ciruga con recuperacin del
ratn) o como procedimiento terminal.
La produccin de bilis en un ratn adulto de unos 20 g es de aproximadamente 2 mL al da aunque
este parmetro depende del sexo, dieta, etc. Puesto que el flujo de bilis depende en gran medida de la
temperatura corporal, es importante mantener constante la temperatura del animal durante un
procedimiento terminal mediante el uso de mantas trmicas o lmparas de calor y puede ser necesaria
la administracin subcutnea de suero fisiolgico templado.
Al contrario que los ratones, las ratas carecen de vescula biliar por lo que la bilis producida en el
hgado es vertida directamente en el duodeno a travs del conducto biliar comn. La obtencin de bilis
por tanto se realizar mediante la canulacin de este conducto. Sin embargo, hay que tener en cuenta
que los conductos pancreticos se unen al conducto biliar comn por lo que, dependiendo de la altura
a la que se inserte la cnula y los conductos que liguemos, podremos obtener bilis, jugos pancreticos
o una mezcla de ambos.
Mdula sea
6
Pequeas muestras de mdula sea (aprox 10 clulas) pueden obtenerse por aspirado del fmur de
ratones anestesiados. Mayores cantidades de mdula sea se pueden obtener de ratones
eutanasiados por aspirado total de las tibias y fmures.
Fludo Cerebroespinal
El fluido cerebrospinal se obtiene mediante aspirado de la cisterna magna (o cuarto ventrculo) de ratas
y ratones. La tcnica (utilizada tambin para la administracin intra.cerebroventricular de sustancias)
requiere de un aparato estereotxico que asegura la introduccin de la aguja en la estructura cerebral
correcta. La introduccin de cnulas permite la extraccin repetida de CSF de animales no
anestesiados. En el caso de ratones pueden obtenerse hasta 25 L de CSF y hasta 0.5 mL se han
obtenido en ratas.
Es relativamente frecuente la contaminacin del CSF con sangre al seccionar inadvertidamente
pequeos capilares sanguneos durante el procedimiento.
298

Toma de Muestras
Heces
Las heces pueden ser recogidas de manera sencilla debido a que ratas y sobre todo ratones, defecan y
orinan frecuentemente simplemente al ser inmovilizados. Tambin pueden utilizarse jaulas metablicas
para la recogida continua de heces y orina.
Salida y Fludo Lacrimal

Las secreciones de saliva pueden recogerse por introduccin de hisopos o papel de filtro en la cavidad
oral de ratas y ratones o mediante lavados orales usando puntas de pipeta. La administracin
intraperitoneal de frmacos parasimptico-mimticos, como la pilocarpina (3-5 mg/kg), puede
incrementar la produccin de esta secrecin.
Para la obtencin de muestras de saliva no contaminada con secreciones respiratorias o lacrimales
(contaminacin muy frecuente mediante las tcnicas citadas) se han descrito mtodos de canulacin
de conductos salivales.
El fluido lacrimal puede ser recolectado del saco conjuntival usando papel de filtro absorbente o
pequeos tubos capilares tras la administracin de pilocarpina.
Leche
Como parte de la evaluacin de la seguridad de nuevos frmacos un a medida importante es el
potencial del compuesto, o de sus metabolitos activos, de ser transferido a los bebs a travs de la
leche materna. Consecuentemente, se han desarrollado varios mtodos de obtencin de leche de ratas
y ratonas lactantes.
La extraccin puede realizarse de manera manual o mediante dispositivos ordeadores. La cantidad
de leche obtenida depende mucho del tiempo que la madre est separada de sus cras y puede ser
aumentada mediante la administracin intraperitoneal de oxitocina.
Fludo Peritoneal
Clulas peritoneales pueden ser obtenidas mediante lavados de la cavidad peritoneal con soluciones
adecuadas en funcin de la muestra de inters. Aunque se han descrito tcnicas de aspirado peritoneal
repetido en animales anestesiados, este procedimiento suele realizarse de manera terminal.
Clulas (Macrfagos) Alveolares

Se ha descrito la obtencin de clulas pulmonares mediante repetidos lavados broncopulmonares de
ratones anestesiados a travs de la insercin de una cnula en la trquea. Unos 20 L de solucin de
lavado por gramo de ratn (el 80% de la capacidad pulmonar) son instilados dentro de los pulmones a
travs de la cnula y aspirados inmediatamente.
299

Toma de Muestras
Bibliografa
A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood, Including
Routes and Volumes. EFPIA 2000.
Refining procedures for the administrations of substances. Laboratory Animals, 2001, 35, 1-41.
Relationship between dosing vehicles, dose volume and stress. ACLAM, 1999.
Laboratory Animal Medicine, 2
nd
edition, 2002.
The Mouse in Biomedical Research, 2
nd
edition, 2007.
nd
The Laboratory Rat, 2 edition, 2006.

Gingival vein punction. A new simple technique for drug administration or blood sampling in
mice and rats. Scand. J. Lab. Sci. 2009 Vol 36 No. 2
Biological effects of blood loss: implications for sampling volumes and techniques
300
ADMINISTRACIN DE
SUSTANCIAS

Administracin de Sustancias
302

La administracin de substancias a los animales de experimentacin es una prctica habitual necesaria

para una amplia variedad de investigaciones cientficas. Los volmenes de administracin, rutas y
frecuencia deben ser compatibles con el bienestar animal a la vez que se asegura la validez cientfica
del procedimiento.
El primer aspecto a tener en cuenta durante la administracin de cualquier substancia son las
caractersticas fisicoqumicas del producto; pH, osmolaridad, solubilidad, sensibilidad a la luz, olor,
sabor, etc. Con toda esta informacin podremos decidir la pauta de administracin adecuada, el
volumen idneo de administracin, la ruta ms apropiada o el solvente a utilizar en su caso.
Es importante resear que cualquier tcnica de administracin pasa en primer lugar por un manejo e
inmovilizacin correctos del animal para asegurar el mnimo estrs para el animal as como la ejecucin
correcta de la tcnica.
A continuacin se detallan las principales vas de administracin con especial atencin a las especies
ms utilizadas en experimentacin (rata y ratn).
Volmenes de Administracin
En la tabla de ms abajo se especifican los volmenes de administracin considerados como buenas
prcticas as como los valores mximos para cada una de las rutas y especies ms utilizadas en
experimentacin. Los datos se agrupan en 2 columnas. La columna de la izquierda recoge los
volmenes ptimos para las distintas rutas de administracin tanto para administraciones nicas como
repetidas, mientras que los valores de la derecha se refieren a los volmenes mximos permitidos. Si
se exceden estos valores se vern comprometidos tanto el bienestar animar como la validez cientfica
del procedimiento.
Algunos de los valores mximos sugeridos parecen demasiados elevados al compararlos con los
recomendados como buenas prcticas. Cuando se administren volmenes cercanos a estos valores
mximos, es necesario prestar especial atencin a los efectos sobre el bienestar animal as como a la
formulacin del producto, sobre todo en el caso de administraciones repetidas. La reaccin fisiolgica a
la administracin de estos volmenes tan elevados podra dar lugar a la reduccin de la duracin del
estudio y por lo tanto comprometer la validez cientfica del mismo.
Este aspecto debe ser tenido en cuenta antes de finalizar el protocolo y de comenzar el estudio. Es
absolutamente recomendable, tanto por cuestiones de bienestar animal como de integridad cientfica,
tener referencias de estudios in vitro as como de estudios piloto in vivo del producto en cuestin.
Como norma general, el volumen de administracin debe ser el mnimo compatible con la formulacin
del compuesto y exactitud de la administracin.
303

Rutas y Volmenes (ml/kg excepto *ml/sitio)
Especies
Oral
sc
ip
im
iv bolus
iv perfusin
5-10
10
20
0.05*
Ratn
5
(25)
(50) (40) (80) (0.1)*
10
5
10
0.1*
Rata
5
(20)
(40) (10) (20) (0.2)*
10
1
5
0.25
Conejo
2
(10)
(15)
(2) (20) (0.5)
5
1
1
0.25
Perro
2.5
(5)
(15)
(2) (20) (0.5)
5
2
0.25
Macaco
2
(-)
(15)
(5) (10) (0.5)
10
2
0.25
Marmoseto
2.5
(10)
(15)
(5) (20) (0.5)
10
1
1
0.25
Minipig
2.5
(5)
(15)
(2) (20) (0.5)
sc: subcutneo, ip: intraperitoneal, im: intramuscular, iv: intravenoso, (-): dato no disponible
Consideraciones a tener en cuenta:

-
Para inyectables no acuosos, tener en cuenta el tiempo de absorcin antes de repetir la

administracin.
Las inoculaciones intramusculares deben limitarse a 2 sitios por da.
Las inoculaciones subcutneas deben limitarse a 2-3 por da.
Esta tabla no incluye la administracin subcutnea de adyuvante de Freund.
Seguridad y Solubilidad de Sustancias

Todas las administraciones parenterales deben realizarse con tcnicas aspticas y las substancias o
soluciones inyectables deben ser estriles y libres de compuesto pirgenos.
Con el fin de administrar una dosis exacta y evitar causar daos en el tejido, la toxicidad de la
substancia, el volumen y la formulacin deben ser considerados. Si la substancia ha de ser diluida, el
diluyente elegido debe ser seguro. El suero fisiolgico (cloruro sdico al 0,9%) o cualquier otro solvente
fisiolgico como el PBS o medios de cultivos son vehculos de eleccin. Aunque el agua destilada
puede utilizarse bajo ciertas condiciones, es siempre preferible una solucin salina ya que el agua
inoculada subcutneamente causa dolor y en inoculacin intravenosa provoca hemlisis.
Por razones de solubilidad o ratio de absorcin, algunas substancias requieren solventes ms
complejos para dar lugar a concentraciones plasmticas teraputicas. Algunos de los vehculos ms
utilizados en estos casos gracias a que sus propiedades no interfieren con la substancia de inters son:
304
Agua + 0.85% de cloruro sdico.
Polietilen glicol al 60%.
Tween 80 al 10%.
Metil celulosa al 0.5%.

Todos estos vehculos pueden ser administrados por cualquiera de las rutas de administracin
parenteral teniendo en cuenta que las concentraciones especificadas son las mximas permitidas,
siendo recomendable su uso a concentraciones inferiores.
Las substancias liposolubles nicamente se pueden diluir en vehculos oleosos lo que retarda de
manera sustancial su absorcin. Este tipo de diluciones no puede administrarse por va intravenosa,
por lo que en estos casos, debe recurrirse a una emulsin del 15% leoacuosa. Los adyuvantes
liposolubles y las emulsiones leo-acuosas pueden causar peritonitis aguda cuando se administran
intraperitonealmente.
En algunos casos, las substancias pueden administrarse en forma de suspensin. Puesto que las
partculas en suspensin tienden a sedimentar o precipitar, este tipo de formulaciones deben estar bien
mezcladas antes de su administracin para favorecer la suspensin de las partculas. En el caso de
administrase por va intravenosa, hay que tener en cuenta que las partculas pueden ser retenidas en
los capilares de extremidades y pulmn, lo que afectar a la distribucin del producto inoculado y, en
algunos casos, puede provocar estrs respiratorio en el animal.
pH de las Soluciones Inyectables

Tanto la rata como el ratn, al igual que los humanos, toleran la inyeccin de soluciones con un amplio
rango de pH. Para todas las rutas de administracin, el rango de trabajo es el rango de pH
comprendido entre 4.5 y 8.0.
El mayor grado de tolerancia se da en la administracin intravenosa debido a la elevada capacidad de
tamponar que tiene la sangre y de la rpida dilucin del producto en el torrente sanguneo. An as, la
velocidad de administracin debe ser lo suficientemente lenta y debe prevenirse efectos irritantes por la
administracin de la solucin fuera de la vena. La segunda va en cuanto a tolerancia al pH es la
intramuscular seguida de subcutnea e intradermal. Los preparados para administracin oral pueden
tener un pH tan bajo como 3 sin que esto represente ningn riesgo.
Ratio de Absorcin y Distribucin de Sustancias

El grado de absorcin est influenciado por el fujo sanguneo en el lugar de administracin, la
naturaleza de la substancia y la formulacin en la que es administrada. La absorcin va a determinar el
efecto de la substancia y es un factor importante a la hora de determinar la dosis.
Mientras que los compuestos endgenos normalmente pasan a travs de las membranas por
mecanismos de transporte especiales, la penetracin de xenobiticos sigue principios fsicos tales
como difusin pasiva de acuerdo con una concentracin de gradiente, por lo que la absorcin
depender de la dosis administrada.
La liposolubilidad, propiedades fsico-qumicas, grado de ionizacin y tamao de molcula son otros
factores que afectan directamente a la absorcin de un compuesto. Aquellos compuestos altamente
solubles en los fluidos corporales se absorbern rpidamente, mientras que las substancias que son
ionizadas y no son liposolubles solamente sern absorbidas si existe un transportador especfico.
305

Vas de Administracin
Administracin Enteral (per os)
La administracin enteral comprende la administracin de substancias a travs del aparato digestivo
bien sea oral; mediante ingestin voluntaria o por introduccin de una sonda gstrica hasta el
estmago, o por va rectal. El producto administrado no puede ser irritante para la mucosa digestiva.
La principal ventaja de esta ruta es la posibilidad de administrar grandes volmenes (en comparacin
con otras rutas) de sustancias no o soluciones no estriles.
Administracin Oral
En principio, la absorcin gastrointestinal va a tener lugar a lo largo de todo el tracto digestivo. La
absorcin de la mayora de las substancias administradas oralmente ocurre por difusin de sus formas
no ionizadas ya que la mucosa que tapiza el tracto gastrointestinal es prcticamente impermeable a
molculas ionizadas. Consecuentemente, la absorcin de los compuestos se potenciar en el pH cido
del estmago o en el ambiente prcticamente neutro del intestino, dependiendo del carcter inico del
compuesto; en el estmago, si el producto tiene un pH cido, o en el intestino delgado si es bsico.
Debido a su mayor superficie y elevado riego sanguneo, el intestino delgado es la principal zona de
absorcin en esta ruta. Otros factores que influyen en la absorcin del producto pueden ser:
-
Los alimentos, que pueden disminuir la absorcin del frmaco.
Cuando la presencia de alimento puede interferir en la absorcin del frmaco, puede ser necesario
restringir la ingesta de comida del animal antes de la administracin. En estas ocasiones, la
duracin del ayuno debe restringirse al mnimo imprescindible y deber tener en cuenta el patrn de
alimentacin de la especie, las caractersticas fisiolgicas, dieta, ritmos circadianos, etc.
La resistencia del frmaco al pH del estmago. Si las molculas del frmaco se destruyen a pH
cidos, deber administrarse por otra va o recubrirse con una cubierta entrica.
Efecto de primer paso.
Excluyendo aquellas substancias que son absorbidas en la boca y el recto, todas las substancias
administradas por va oral son transportadas por el sistema portal al hgado antes de alcanzar la
circulacin sistmica. Una vez en el hgado, los compuestos pueden ser metabolizados en mayor o
menor medida lo que dar lugar a una disminucin en las concentraciones sistmicas si los metabolitos
son inactivos. Este efecto de primer paso deber ser tenido en cuenta a la hora de seleccionar esta
ruta de administracin y la dosis.
Administracin en agua de bebida
La disolucin del producto a administrar en el agua de bebida es til cuando ste dispone de un amplio
rango teraputico de seguridad. A la hora de calcular la dilucin del producto hay que tener en cuenta
306

el consumo de agua/da estimado para la especie en cuestin (1,5 mL/10g p.v en el caso del ratn y 811 mL/100g p.v para las ratas). An s, ratas y ratones pueden reducir el consumo de agua si el
compuesto diluido confiere mal olor o sabor. Por esta razn, este mtodo de administracin puede ser
muy poco exacto en lo que a la dosificacin de un animal individual. Sin embargo, es til para el
tratamiento de una colonia de ratones y suele utilizarse para la administracin de antibiticos. Otras
limitaciones de este mtodo son:
-
Que el producto debe ser soluble en agua.
Que el producto no reaccione con el plstico.
Que el producto sea qumicamente estable.
Para estos casos puede optarse por botellas metlicas o de color mbar para sustancias fotosensibles,
aadir ciclodextrina para disoluciones inestables o sucrosa para enmascarar el sabor amargo de ciertos
productos. En el caso de ser necesaria la adicin de sucrosa, habr que tener en cuenta que facilitar
el crecimiento de bacterias por lo que ser necesario un cambio de agua ms frecuente (2 o ms veces
por semana).
Administracin en alimento slido
Un mtodo ms exacto de administracin de frmacos por va oral est disponible actualmente a travs
de piensos fabricados especialmente que incorporan en su composicin el frmaco deseado. Cuando
se solicite la fabricacin de una dieta medicada es importante recordar que las ratas y ratones comen
en funcin de requerimientos energticos, no por el efecto saciante de la comida. La siguiente frmula
puede utilizarse como una referencia para el clculo de los requerimientos calricos medios diarios:
161 kcal ME/BWkg0.75/da
Otra frmula til cuando no se requiere una dosificacin muy precisa es la siguiente:
150 mg/kg BW / da
Cuando se introduce una dieta medicada es importante monitorizar el peso y la ingesta de comida al
menos inicialmente. Con ello nos aseguraremos no solo de que la cantidad deseada de frmaco es
ingerida sino que los animales mantienen el apetito.
Administracin por sonda gstrica
La introduccin directa de un compuesto dentro del estmago de un animal es la forma de
administracin oral ms exacta. Hay una limitacin en cuanto al volumen que puede ser administrado
ya que la capacidad del estmago es relativamente fija. Se ha sugerido que un volumen de 40 mL/kg
sobrepasa la capacidad del estmago causando que el producto pase directamente al intestino
delgado o posiblemente se produzca reflujo esofgico. Por ello, se estima que no ms de 2 mL deben
ser administrados a un ratn adulto.
Una gua segura para determinar el volumen a administrar es limitar el volumen al 1% del peso corporal
del animal, por lo que, para un ratn de 20g, el volumen ideal ser de 0,2 mL. En el caso de las ratas,
los volmenes recomendados se detallan en la tabla siguiente.
307

Peso en gramos
Volumen a adminsitrar (mL)
30
1.0
50
2.0
100
3.0
200
4.0
300
5.0
En conejos y cobayas el volumen mximo recomendado es de 5 mL.

Las sondas gstricas pueden ser rectas o curvas, de metal o catteres flexibles. Las sondas metlicas
tienen una pequea bola en el extremo que no solo reduce el dao al esfago sino que tambin ayuda
a prevenir el avance de la sonda dentro de la trquea. La siguiente tabla muestra las medidas y tipo de
sonda recomendadas para las principales especies en funcin del peso. En general, la longitud de la
sonda debe ser aproximadamente la distancia de la nariz del ratn hasta la ltima costilla.
Especie
Ratn
Rata
Rango de peso
en gramos
Dimetro de
la bola
Forma
24
1 mm
Recta
15 - 20
22
1, 1
1 mm
Recta
20 - 25
20
1, 1 , 3
2 mm
Recta, curva
25 - 30
18
1, 1 , 2
2 mm
Recta, curva
30 - 35
18
2, 3
2 mm
Recta, curva
50 - 75
20
1, 1
2 mm
Recta
75 - 120
18
1, 1
2 mm
Recta, curva
18
2, 3
2 mm
Curva
16
3 mm
Recta, curva
16
3, 4
3 mm
Curva
14
4 mm
Curva
100 - 200
200 - 350
Cobaya
Longitud
Hasta 14
150 - 300
Hamster
Medida
(G)
13
4 mm
Recta
60 - 200
18
2 mm
Curva
250 - 300
18
1 , 2
2 mm
Curva
350 - 450
16
3, 4
3 mm
Curva
14
4 mm
Curva
13
4 mm
Recta
3, 4
3 mm
Curva
400 - 600
Conejo
1 3 kg
16
Longitud en pulgadas (1 pulgada: 2.54 cm)
An cuando el diseo especial de las sondas y el tapizado de clulas escamosas del esfago de ratas
y ratones minimizan el riesgo de injurias, se trata de una tcnica muy estresante para el animal (se
lleva a cabo en animales conscientes) y no son infrecuentes los efectos secundarios por daos en el
esfago o aspirado pulmonar, principalmente en administraciones repetidas.
Es esencial un buen entrenamiento para realizar la tcnica con seguridad y mnimo riego de injurias al
animal. Una vez expulsado el producto dentro del estmago, debe detenerse cualquier presin sobre el
308

mbolo de la jeringuilla para prevenir que el producto salga de la sonda y sea aspirado en el esfago o
la faringe. Si durante el proceso de administracin se observase algn sntoma de distress (tos,
expulsin del producto por la nariz, etc.) en el animal deber detenerse inmediatamente y observar la
recuperacin del animal. Si se observan sntomas de dificultad respiratoria tras la administracin se
valorar la conveniencia de la eutanasia.
Administracin Rectal
La instilacin rectal de un producto puede llevarse a cabo utilizando un catter flexible de los utilizados
para el sondaje oral. Los bordes del catter deben ser redondeados para evitar cualquier posibilidad de
trauma en el epitelio intestinal.
El volumen mximo para el ratn es de 0.5 mL y debe evitarse la administracin de burbujas de aire
que podran causar discomfort. La administracin puede realizarse en ratones conscientes sujetando al
ratn por la base de la cola, elevndola e introduciendo el catter unos 4 cm a travs del ano.
En esta ruta de administracin, la absorcin es muy errtica pero se evita el efecto de primer paso ya
que, tras la absorcin en la mucosa rectal (as como la oral) el producto se incorpora al circuito venoso
mayor que vierte directamente en el corazn, no en el hgado.
Administracin Parenteral
La administracin parenteral se refiere a todas aquellas rutas de administracin en las que el absorcin
del frmaco se realiza a travs de una barrera distinta del tracto gastrointestinal, y que, generalmente,
implica la ruptura de dicha barrera por algn mtodo mecnico como una aguja.
Como regla general, el menor tamao de aguja y el menor volumen posible deben utilizarse para estas
rutas. Otros factores a tener en cuenta son:
-
Evitar burbujas de aire por el riesgo de embolismo.
Administrar los compuestos a temperatura ambiente ya que la administracin de productos fros

causa dolor.
Las substancias inyectadas en la circulacin deben ir disueltas en los solventes adecuados.
Aplicacin Tpica
Aun cundo es relativamente fcil la administracin de un compuesto en zonas sin pelo, el problema
con esta va de administracin es la posibilidad de que el animal ingiera parte del producto durante el
acicalamiento. Para prevenir esto, suelen utilizarse vendajes, collares isabelinos, etc. El principal factor
que afecta a la absorcin dermal es el balance hidro-lipdico de la sustancia. La capa ms externa de
la piel es esencialmente una barrera lipdica mientras que la epidermis interna es bsicamente un
medio acuoso. Por tanto, la capacidad de una sustancia para ser absorbida a travs de la piel y entrar
en la circulacin sistmica depender de su habilidad para penetrar a travs de las fases lpidicas y
acuosas de la piel.
309

Cuando la aplicacin tpica se realiza en animales con pelo a los que previamente se ha depilado, hay
que tener en cuenta que el ciclo de crecimiento del pelo afectar a la absorcin y en el caso de
animales en crecimiento (ratas, conejos, minipigs) en los que se realice una administracin crnica (de
3 a 6 meses) ser necesario adaptar la dosis al tamao creciente del animal.
Administracin Intradrmica
La zona ms comnmente utilizada para esta aplicacin es la piel de la zona dorsal o del abdomen. Si
no se utilizan estirpes sin pelo (e.g., nude), el pelo de la zona a inocular debe retirarse previamente.
Antes de proceder con la inoculacin, la piel debe limpiarse con un antisptico. La administracin
intradrmica es correcta cuando se forma un pequeo abultamiento en la zona de inoculacin. Los
volmenes de inoculacin y las agujas recomendadas se detallan en la siguiente tabla.
Especie
Volumen a adminsitrar (mL)/sitio*
Aguja
Ratn
0.05
30 G
Rata
0.05
27 G
Cobaya
0.1
23 25 G
Conejo
0.1
23 25 G
*Mximo 6 sitios de inoculacin
Administracin Subcutnea
En comparacin con otras rutas la administracin subcutnea tiene una serie de ventajas:
-
El rea subcutnea est muy irrigada pero el nmero de capilares vara con la zona, lo que puede
dar lugar a variaciones en los ratios de absorcin.
Al producirse un depsito de la sustancia en el lugar de inoculacin, esta va de administracin es

til cuando se requiere un periodo de absorcin relativamente lento.
Suspensiones oleosas pueden ser administradas por esta va. La administracin conjunta de
hialuronidasa incrementar la absorcin de este tipo de productos.
La tabla recoge los volmenes de administracin y tamaos de aguja recomendados.
Especie
Ratn
25-27 G
Rata
25 G
Cobaya
5 - 10
23 25 G
20
23 25 G
Conejo
*Mximo 2-3 sitios de inoculacin
a
25 ml/kg
b
Mximo 0.5 ml por sitio
310
Aguja

En general, la zona de eleccin para esta administracin es la zona dorsal o inter-escapular y suele
realizarse en animales conscientes con mnima inmovilizacin.
Implantacin de Pellets o Cpsulas
Se utiliza este mtodo cuando se requiere una administracin repetida a lo largo del tiempo. Con estos
dispositivos, el producto es liberado paulatinamente. Es importante elegir un sitio de implantacin al
que el animal no acceda fcilmente durante el acicalamiento, generalmente se realiza en la zona
interescapular. Es necesaria la preparacin asptica de la piel antes de la implantacin que suele
realizarse con una aguja de 14G o de mayor tamao.
Minibombas osmticas
Una amplia variedad de dispositivos implantables pueden utilizarse para la liberacin sostenida de un
producto a lo largo del tiempo (durante das, semanas o meses). Las minibombas osmticas se
implantan subcutneamente para obtener una dosificacin continua o intermitente del producto. Se
trata de un procedimiento de ciruga menor que se realiza bajo anestesia general introduciendo el
dispositivo a travs de un aincisin en la piel que posteriormente se cierra con grapas o suturas.
Administracin Intramuscular
Esta ruta generalmente resulta en una absorcin algo ms rpida que la obtenida en la administracin
subcutnea debido al mayor grado de irrigacin del tejido muscular (generalmente 45-60 minutos para
la mayora de los fludos). Esta va es poco utilizada en el caso de ratas y sobre todo ratones por el
pequeo tamao de la masa muscular (generalmente el quadriceps o glteos) lo que limita el volumen
de administracin. La penetracin de unos 5 mm en el caso de la rata y de unos 3 para el ratn es
suficiente para asegurar la inoculacin intramuscular a la vez que se evita el riesgo de daar el
periostio del fmur. Despus de la inoculacin se debe masajear la zona para dispersar el producto.
Este tipo de administracin es dolorosa debido a la distensin de las fibras musculares y adems
requiere de un elevado grado de inmovilizacin del animal. Por otro lado, es difcil asegurar que la
tcnica se ha hecho correctamente y en ocasiones, an cuando la administracin sea adecuada, es
posible que se haya depositado en la fascia.muscular (envoltura de tejido conectivo que asla a los
msculos).
Debido a todos estos inconvenientes, esta ruta de administracin solo se utiliza cuando cualquiera de
las otras rutas no es adecuada. La tabla VI recoge los volmenes y tamaos de aguja recomendados
para esta ruta.
Especie
Ratn
0.05
Rata
0.1
22 - 25 G
Cobaya
0.3
23 25 G
Conejo
0.5 - 1
*Mximo 2 sitios de inoculacin para el ratn y de 2-4 para la rata.
a
Ruta de administracin no recomendada en ratn
Aguja
25 - 30 G
23 25 G
311

Administracin Intraperitoneal
Junto con la subcutnea, la administracin intraperitoneal es la ruta ms utilizada en ratas y ratones. La
elevada superficie de la cavidad abdominal y el abundante flujo sanguneo facilitan una rpida
absorcin.
La tcnica implica la administracin de cualquier sustancia en la cavidad peritoneal a travs de la pared
abdominal. Esta ruta suele utilizarse para la administracin de grandes volmenes de sustancias
solubles (e.g., anestsicos) cuando se requiere una rpida absorcin. Aunque el procedimiento de
inoculacin es relativamente sencillo, es difcil asegurar que toda la dosis es administrada en la cavidad
abdominal y que no ha sido introducida accidentalmente en intestino, vejiga urinaria u otro rgano.
Tambin hay que tener en cuenta que la absorcin puede realizarse por circulacin sistmica o portal.
sta ltima lleva implcita el paso previo por hgado con la consiguiente degradacin metablica para
aquellos compuestos susceptibles de degradacin heptica. Para evitar en la medida de lo posible la
inoculacin en ciego o vejiga, es imperativo determinar el lugar correcto de inoculacin segn se
describe a continuacin para cada caso:
-
Con el ratn correctamente inmovilizado (evitando cualquier movimiento durante el procedimiento)

trazar una lnea imaginaria que cruce su abdomen transversalmente justo sobre sus rodillas.
La aguja deber ser insertada sobre esta lnea, en el lado derecho del animal y lo ms cercano
posible a la lnea que divide longitudinalmente el abdomen. De esta manera disminuimos el riesgo
de inyectar en ciego o vejiga urinaria.
La aguja debe alcanzar una profundidad de aproximadamente medio centmetro (en ratn) y debe
insertarse con un ngulo de unos 30-45 con respecto a la superficie del abdomen.
Se puede aspirar ligeramente para asegurarse de que no se ha alcanzado ningn vaso sanguneo,
ciego o vejiga urinaria. Sin embargo hay que tener en cuenta que el ms mnimo movimiento de la
aguja dentro de la cavidad abdominal puede provocar rasgados en intestino, rganos, etc., con el
consiguiente riesgo de peritonitis. Si ningn fluido es aspirado, proceder a la inyeccin de la
muestra.
Retirar la aguja y presionar ligeramente la zona de inyeccin.
Con ligeras adaptaciones en cuanto a profundidad de inoculacin, esta descripcin es vlida para el
resto de especies en las que esta tcnica es de aplicacin. La tabla siguiente recoge las
recomendaciones en cuanto a volumen, tamao de aguja y profundidad de inyeccin.
Especie(peso adulto)
Aguja
V ml/kg(mx.)
V mx. **
27G
<0.05 ml
Ratn (20-25g)
25-27G
20 (80)
2-3 ml
< 0.5 cm
Rata (250g)
23-25G
10 (25)
5-10 ml
0.5 - 1 cm
Cobaya (0.7-1.2kg)
23-25G
10-15 ml
1 cm
Hmster* (120g)
23-27G
3-4 ml
0.5 cm
Conejo (2.5 kg)
21-23G
50-100 ml
1.5 cm
Neonatos
*Syrian hmster
**Volumen mximo referido a individuos adultos
312
Profundidad aproximada

Habitualmente se recomienda inclinar al animal de manera que su cabeza quede por debajo del
abdomen con el fin de que las vsceras se desplacen caudalmente alejndose del sitio de inoculacin.
Sin embargo, las vsceras se hayan bastante inmovilizadas debido al poco espacio libre disponible en
la cavidad abdominal por lo que esta manipulacin es, hoy en da, de cuestionable utilidad.
An cuando se asume que una inoculacin intraperitoneal siempre aloja el producto en la cavidad
peritoneal, un significativo nmero de inoculaciones se realizan incorrectamente al inocularse la
substancia intragstricamente, intraintestinalmente, subcutnea, retroperitoneal, etc. La frecuencia de
errores reportada por tcnicos experimentados es del 11 al 20%.
El control del pH del compuesto a utilizar es de especial importancia en la ruta i.p. pH alejados del
rango fisiolgico pueden causar irritacin y/o ulceracin. Esto dar lugar a sntomas de dolor (postura
arqueada), formacin de tejido fibroso y adhesiones. Algunos solventes no acuosos pueden causar
hinchazn de los bordes de los lbulos hepticos.
Recomendaciones:
-
Comprobar pH antes de la inoculacin.
Trabajar dentro de un rango de pH de 4.5 - 8.0.
Tener en cuenta que la medida de pH por s sola no es buen indicador del potencial de irritacin ya
que ste tambin depende de la concentracin y del punto de ionizacin (pK) del compuesto.
No se aconseja utilizar esta ruta para estudios de mltiples administraciones debido al riesgo de
posibles complicaciones (efecto irritante acumulado, dao producido por la aguja, potencial para
inocular en rganos abdominales, etc.). Como regla general:
-
No administrar ms de una vez por da. Subsecuentes administraciones diarias necesitan rigurosa
justificacin.
Cuando sean necesarias administraciones repetidas, considerar como alternativa la implantacin de

minibombas para la liberacin continua del producto.
Implantacin de Bombas Osmticas

Las minibombas osmticas pueden implantarse en la cavidad abdominal adems de subcutneamente.
Es importante tener en cuenta el tamao del implante para asegurarnos de que los rganos internos no
se van a ver comprimido o desplazados por el dispositivo.
En este caso, se trata de un procedimiento de ciruga mayor al exponerse la cavidad abdominal, por lo
que debern seguirse todas las premisas de este tipo de cirugas (asepsia, analgesia, cuidados perioperativos, etc.).
Administracin Intravascular
La inoculacin directa en el torrente sanguneo va a permitir una rpida dilucin del compuesto y un
efecto teraputico prcticamente inmediato.
313

Administracin Intra-arterial
Generalmente se realiza en la arteria cartida y femoral y suelen realizarse por la insercin de cnulas
(en ratas y ratones) que requieren de ciruga para asegurar la correcta inoculacin.
Administracin Intravenosa
La inoculacin intravenosa ofrece numerosas ventajas sobre otras vas de administracin:
-
Control de la velocidad de administracin con lo que podemos obtener concentraciones plasmticas

constantes.
Rpida respuesta.
Se consigue la mxima disponibilidad de la substancia con mnimas prdidas.
Administracin de productos que se absorben pobremente por va enteral o resultan dolorosos o

irritantes por otras vas parenterales.
Los volmenes de inoculacin intravenosa recomendados para las especies ms habituales se recogen
en la tabla siguiente.
Especie
Volumen recomendado
Aguja
Ratn
0.2 mL
25 - 30 G
Rata
1 - 2 mL
23 - 27 G
Cobayo
0.5 mL
25 - 26 G
Conejo
10 mL/kg
23 25 G
Algunas recomendaciones generales a la hora de llevar a cabo esta tcnica son:

-
Excepto para procedimientos generales, razonables tcnicas aspticas con equipamiento estril
deben ser empleadas, sobre todo en estudios de larga duracin que requieren inoculaciones
frecuentes.
Asegurarse de que no son inoculadas burbujas de aire.
Si hemos accedido correctamente al interior de una vena, no notaremos resistencia al presionar el

mbolo y el producto inoculado ser inmediatamente diluido en el torrente sanguneo de manera
que no observaremos ningn tipo de presin en los tejidos adyacentes al vaso.
Al finalizar la inoculacin presionaremos el sitio de inoculacin con un algodn para prevenir la

salida de sangre o del fluido administrado.
Si el mismo vaso va a ser utilizado para varias administraciones, empezar siempre por la parte ms
distal posible con respecto al corazn. Esta precaucin es necesaria ya que en algunos casos la
sustancia inoculada y la puncin del vaso pueden causar daos en el vaso o tejidos adyacentes de
manera que puede bloquearse el vaso y quedar inutilizada la aparte distal del mismo para
posteriores administraciones.
314
Es importante tener en cuenta ciertas precauciones a la hora de elegir el vaso para la inoculacin:

Consecuencias de una posible trombosis intravascular o administracin extravascular del

producto.
Puesto que las sustancias administradas pueden ser metabolizadas en el hgado, es

importante saber si el vaso elegido forma parte del sistema porta o de la circulacin general.
Debido a la rapidez de respuesta de esta va, hay que tener especial cuidado en el clculo de
la dosis a administrar.
Numerosas tcnicas estn hoy disponibles para la administracin intravenosa, tanto para animales
conscientes como bajo anestesia. Algunas de las ms frecuentes en rata y ratn son:
-
En animales conscientes:
-
Vena lateral de la cola.
Vena safena.
Vena dorsal metatarsal.
En animales anestesiados:
Vena sublingual y vena gingival.
Vena del pene.
Seno retro-orbital.
En animales anestesiados y mediante ciruga:
-
Vena jugular externa.
Vena femoral.
La vena lateral de la cola es la vena ms utilizada en ratas y ratones. La dilatacin de los vasos previa
a la inoculacin facilita la tcnica en gran medida. Podemos conseguir esta dilatacin mediante la
aplicacin de calor a la zona con una lmpara de infrarrojos, sumergiendo la cola en agua caliente unos
segundos (40-45C) o administrando frmacos que producen vasodilatacin perifrica (medetomidina,
acepromazina, etc.).
La vena safena suele utilizarse ms como va de extraccin de pequeos volmenes de sangre pero
puede servir tambin como va de administracin. Aunque no es necesaria la anestesia si es
recomendable por el tiempo de inmovilizacin requerido.
La vena metatarsal dorsal se localiza en la superficie dorsal del pie y se accede a ella introduciendo
una aguja de 27G o 30G paralelamente a la superficie del pie y dirigida hacia la articulacin.
Nuevos mtodos de administracin de sustancias se han puesto a punto en los ltimos aos con el fin
de disminuir el estrs, dolor o efectos secundarios de las tcnicas clsicas. 2 de estas nuevas tcnicas
son la administracin (tambin pueden utilizarse como va de extraccin) en vena gingival y vena
sublingual. Aunque ambas vas son tiles tambin en ratn, se utilizan mayoritariamente en ratas.
315

La vena sublingual es fcilmente visible en la parte interna de la lengua. Una vena sublingual discurre a
cada lado de la lnea que divide longitudinalmente la lengua. La administracin se puede realizar en
cualquiera de las 2 y para administraciones repetidas deberan alternarse ambas venas.
La vena gingival se localiza en la mandbula inferior, justo debajo del nacimiento de los incisivos
inferiores y es fcilmente accesible insertando una aguja 30G con un ngulo de aproximadamente 20
a lo largo de la lnea que separa ambos incisivos. Una de las ventajas de esta va es que la vena
gingival drena en la vena cava superior y por lo tanto llega a la parte derecha del corazn y llega a los
pulmones antes de alcanzar la circulacin sistmica por lo que esta ruta es especialmente til en
estudios que requieran el acceso farmacolgico directo al corazn y pulmones. Estas vas no son tiles
si tenemos que inocular volmenes grandes. No se recomienda superar los 150 L. Ambas tcnicas
permiten administraciones repetidas con mnimo dao y efectos secundarios.
La vena del pene debe ser utilizada nicamente en casos excepcionales debido a los potenciales
daos en la vena. Lgicamente, solo puede ser utilizada en machos y no se recomienda la inoculacin
de grandes volmenes. Aunque la anestesia facilita el procedimiento, no es imprescindible. Este vaso
no forma parte del sistema portal sino que vierte directamente en la circulacin general por lo que se
evita el efecto de primer paso.
La administracin y extraccin utilizando el seno retro-orbital no est permitida en muchas instituciones
o es necesaria justificacin cientfica para utilizarla debido al elevado riesgo de dao tisular, edema,
infecciones e incluso prdida del globo ocular. Es imprescindible la anestesia del animal y muy
recomendable la aplicacin de analgsicos o pomadas anestsicas.
El acceso a la vena yugular y a la femoral sin un entrenamiento especfico solo puede hacerse
mediante exposicin quirrgica de los vasos.
La tabla recoge una clasificacin de las principales vas de administracin intravenosa incluyendo el
potencial impacto en el bienestar animal.
Ruta
Anestesia
Impacto
bienestar
animal
Comentarios
Vena del pene
No
xx
Puede causar edema, hemorragia y discomfor
Vena de la cola
No
xx
Necesaria dilatacin previa
Vena Jugular
Si
xx
Puede requerir ciruga
Retro-orbital
Si
xxx
Ulceraciones oculares, prdida de humor vtreo,

infeccin, queratitis y ceguera probables
Vena Safena
No
Vena Gingival
Si
x: bajo impacto; no doloroso, rpido, procedimiento minimamente invasivo

xx: impacto medio; doloroso, manejo estresante, probable dao en tejidos adyacentes
xxx; mximo impacto; doloroso, manejo muy estresante, daos serios, efectos secundarios crnicos, muerte.
316

Administracin Intrasea
La tibia y el fmur son las zonas ms utilizadas para la inoculacin intrasea, ruta muy utilizada en
transplantes de clulas hematopoyticas en ratn. El volumen mximo es 10-15 L.
La elevada irrigacin de estos huesos hace de esta va una de las ms rpidas (la segunda ms rpida
despus de la intravenosa) por lo que hay que tener especial cuidado en la concentracin de clulas a
inocular para evitar embolias y otras complicaciones. Requiere anestesia y analgesia porst-operatoria.
Otras Tcnicas
Inoculacin en almohadilla plantar
Esta tcnica se ha utilizado histricamente para estudios de inflamacin y de produccin de
anticuerpos pero actualmente se est restringiendo mucho su uso por motivos de bienestar animal ya
que las almohadillas plantares son zonas extremadamente sensibles y son las estructuras que
soportan el peso corporal. Si el uso de esta ruta est cientficamente justificado, se debe limitar a una
nica pata trasera y limitar el volumen a 10-20 L (ratn).
Inoculacin intratmica
La inoculacin directa en timo es una tcnica frecuente en estudios de inmunologa. El procedimiento
clsico requiere la exposicin directa del timo mediante la escisin quirrgica de la clavcula y las 2
primeras costillas. En los ltimos aos, se han publicado refinamientos de esta tcnica que evitan la
exposicin de la cavidad torcica mientras que mantienen la efectividad de la tcnica clsica.
Administracin intranasal
La instilacin en la cavidad nasal se utiliza principalmente en estudios de infeccin y protocolos de
produccin de anticuerpos. Debido al potencial estresante de esta tcnica se requiere justificacin
cientfica y se recomienda realizarla bajo ligera anestesia. La administracin consiste en instilar con
una micropipeta la solucin (no ms de 20 L) en los orificios nasales externos. Si la administracin se
realiza demasiado rpidamente o el volumen es excesivo se puede producir sofocacin e incluso
muerte.
Administracin en neonatos
El pequeo tamao de cras de ratas y ratones y la posibilidad de canibalismo o abandono materno
debido a la manipulacin, hacen que la administracin a neonatos no sea un procedimiento fcil.
En el caso de ratones, se aconsejan los siguientes volmenes en funcin de la ruta:
Oral: mximo 0.1 mL utilizando una sonda 30G.
Subcutnea: 0.1 mL en regin interesacpular con un aguja 30G.
Intraperitoneal: para evitar la salida del producto administrado, la inoculacin intraperitoneal
en ratn suele hacerse insertando una aguja 30G en paralelo a la vena femoral derecha
avanzando subcutneamente hasta acceder a la cavidad abdominal. El volumen mximo es
de 0.1 mL.
317

Intravascular; aunque muy poco frecuente, se han descrito administraciones por esta ruta a
travs de la vena anterior facial o directamente en el corazn.
318

Bibliografa
1.
A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood, Including Routes and
Volumes. EFPIA 2000.
2.
Refining procedures for the administrations of substances. Laboratory Animals, 2001, 35, 1-41.
3.
www.aalaslearninglibrary.com
4.
Relationship between dosing vehicles, dose volume and stress. ACLAM, 1999.
5.
Laboratory Animal Medicine, 2nd edition, 2002.
6.
The Mouse in Biomedical Research, 2nd edition, 2007.
7.
The Laboratory Rat, 2nd edition, 2006.
8.
Gingival vein punction. A new simple technique for drug administration or blood sampling in mice and rats.
Scand. J. Lab. Sci. 2009 Vol 36 No. 2
319
ANESTESA, ANALGESIA
Y CUIDADOS
PERIOPERATIVOS

Anestesia, Analgesia y Cuidados Perioperativos
321

El siguiente texto est basado en 2 libros de referencia:

Laboratory Animal Anaesthesia de Paul Felcknell en su tercera edicin.
Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals de Richard E. Fish, Marilyn J. Brown, Peggy
J. Danneman and Alicia Z. Karas en su segunda edicin.
Una anestesia segura y eficaz requiere una cuidadosa preparacin. Los equipos de anestesia y de
monitorizacin sern revisados cuidadosamente para asegurarse de que estn en buenas condiciones
y que cualquier elemento que entre en contacto con el animal ha sido limpiado y desinfectado
correctamente. Tambin es importante asegurarse de que estn disponibles suministros suficientes de
medicamentos y gases anestsicos para satisfacer tanto el uso previsto como el de emergencia.
Los animales se aclimatarn a las instalaciones. Tambin se realizar un examen clnico para evaluar
su estado de salud y su comportamiento normal as como la respuesta a los seres humanos
(socializacin).
322

Equipos y Gases
Lo primero que tenemos que comprobar es que todos los equipos que vamos a utilizar se encuentran
disponibles, en perfecto estado y que funcionan correctamente. Tambin tenemos que comprobar que
tenemos todos los frmacos anestsicos que necesitaremos durante la ciruga, no solo en cantidad
suficiente para el procedimiento que realizaremos sino que tendremos en cuenta las posibles
complicaciones que puedan surgir. Se adjuntan a continuacin las comprobaciones que hay que
realizar en el equipo de anestesia antes de iniciar la ciruga.
Si utilizamos balas de oxgeno comprobar que hay una con suficiente oxgeno y otra llena en
caso de que agotemos la primera.
Comprobar que el manorreductor de la bala en uso est completamente abierto.
Comprobar que las balas de oxgeno estn llenas y adecuadamente fijadas a la mquina de
anestesia porttil; asegurar que el rotmetro funciona correctamente. Las bobinas deben rotar
cuando el gas fluye a travs del sistema (observar el pequeo punto blanco). El flujo se mide
desde la parte superior de la bobina. Cerrar el flujo para comprobar que la bobina baja y no se
queda en posicin estancada.
Si se utilizar un anestsico voltil, comprobar que el vaporizador est lleno y que el dial se
mueve de manera suave a lo largo de todo el rango. Si utilizamos un equipo con varios
vaporizadores, comprobaremos que hemos seleccionado el vaporizador que deseamos
utilizar.
Si el equipo de anestesia tiene un agente absorbente en el circuito, nos aseguraremos que
est desconectado si no se utilizar. Comprobar que la cal sodada no est agotada (se
produce un cambio de coloracin de rosa a blanco o blanco a violeta).
Conectar el circuito que se utilizar al equipo de anestesia, comenzar el suministro de oxgeno
y comprobar que no hay fugas en el circuito ocluyendo el extremo del paciente y cerrando
completamente cualquier vlvula. Abrir las vlvulas para comprobar que no se atascan.
Si se utilizar un ventilador mecnico, conectarlo, encenderlo y observarlo durante unos
ciclos. Si es posible, comprobar el volumen tidal que libera con un espirmetro.
Realizar todas las comprobaciones recomendadas por el fabricante de los equipos de
monitorizacin.
Oxgeno
El gas puede ser suministrado mediante balas o mediante un circuito centralizado. Las balas tienen un
cdigo de color (los cilindros de oxgeno son de color negro con un hombro blanco; los cilindros de
xido nitroso son de color azul). Bajo ninguna circunstancia debe aplicarse aceite o grasa alrededor del
323

sello ya que los gases a presin emiten calor segn se liberan de la botella y pueden causar
explosiones si se utiliza aceite o grasa. La presencia de un manmetro nos indicar si hay gas
disponible. Los cilindros de oxgeno contienen oxgeno bajo presin, y el indicador de presin
gradualmente disminuye a medida que se agota. Un cilindro de tamao E (el tamao instalado en la
mayora de mquinas de anestesia) contiene aproximadamente 625 litros de gas. Los fabricantes
etiquetan los cilindros para confirmar esto. Los cilindros de xido nitroso contienen xido nitroso lquido,
por lo que, a diferencia de un cilindro de oxgeno, la lectura de presin no caer hasta que el cilindro
est casi vaco. Lo mejor es usar una mquina con 2 balas de oxgeno para que se pueda cambiar de
una bala a otra en caso necesario.
Tamao de bala
Capacidad (L)
350
625
3,000
3,500
6,900
Cuando se cambian las balas estas han de manejarse con cuidado, sobre todo si estn llenas. Si estos
se caen, su "cuello" se puede fracturar, lo que lleva a la descompresin explosiva y lesiones al
personal. Por esta razn, los cilindros siempre deben fijarse a la pared o estar en carros especiales,
cuando no estn montados en una mquina de anestesia.
Manorreductor
El manorreductor se sita entre la bala y el resto del equipo de anestesia. El manorreductor reduce la
presin desde aproximadamente 134 bar (en un cilindro de tamao E lleno) a los 4 bar requeridos en la
mquina de anestesia. La vlvula tambin acta como un regulador para proporcionar una presin de
gas constante.
Rotmetro
El flujo se proporciona por separado para cada gas y se controla mediante una vlvula. A medida que
la vlvula se abre, una bobina se mueve hacia arriba el medidor de flujo. El flujo de de gas se lee en la
posicin de la parte superior de la bobina. Las vlvulas son delicadas, y slo debe abrirse y cerrarse
con la mano.
Vaporizador
Los anestsicos voltiles se suministran como lquidos que se vaporizan (se transforman en un gas)
antes de mezclarse con los gases anestsicos y suministrarlos a los animales. Los vaporizadores estn
324

diseados para su uso con un nico agente especfico. La instalacin que existe en el vaporizador y el
cuello de la botella son especficos para cada agente, por lo que es imposible llenar el vaporizador con
el agente equivocado. Los vaporizadores modernos estn diseados para dar una concentracin de
anestsico constante que compense los cambios en el flujo de gas y la cada de la temperatura que se
produce cuando el agente se vaporiza. Los vaporizadores modernos funcionan mediante el
fraccionamiento de una pequea proporcin del flujo de gas fresco saturndolo completamente con
anestesia. Despus se vuelve a mezclar con el flujo principal de gas. Los vaporizadores necesitan un
mantenimiento peridico para funcionar correctamente.
Flujo de Oxgeno de Emergencia

El suministro de oxgeno de emergencia se inicia pulsando un botn que normalmente se encuentra al
lado del suministro de gas para el animal. Se proporciona un suministro de oxgeno a alto flujo que no
pasa por el rotmetro ni vaporizadores.
Alarma de Suministro de Oxgeno

Cuando la presin de oxgeno cae, emiten un silbido fuerte. Slo se puede restablecer cuando la
presin de oxgeno vuelve a ser la correcta.
Cmara de Anestesia
Cuando se anestesian roedores, a menudo es ms conveniente utilizar una cmara de anestesia. Los
anestsicos voltiles van desde un vaporizador a la cmara y los residuos de anestsico deben ser
eliminados de una manera controlada, bien canalizndolos fuera de la habitacin o adsorbidos con
carbn activado. Dado que todos los anestsicos causan algn grado de depresin respiratoria, el
oxgeno, ya sea solo o en combinacin con el xido nitroso, se debe utilizar como gas portador, en
lugar del aire. El animal debe ser observado durante la induccin. La cmara siempre se debe limpiar a
fondo despus de su uso.
Mscaras
Las mscaras fabricadas para uso veterinario son en forma de cono. Las mascarillas deben ajustarse
cmodamente alrededor del hocico y no debe obstaculizar ni la boca ni la nariz. Si se utiliza una
mscara demasiado grande, el espacio alrededor de la nariz del animal y la boca (el espacio muerto
del equipo) puede atrapar el aire exhalado, con una alta concentracin en dixido de carbono, y se
puede volver a respirar a menos que los flujos de gas sean muy altos. Sin embargo, puesto que incluso
los ndices ms bajos de flujo que puede ser proporcionado con precisin por muchas mquinas de
anestesia son superiores a los realmente necesarios por pequeos roedores, la mayora de los
sistemas que utilizan mascarilla actan como sistemas abiertos y el espacio muerto en la mscara
tiene relativamente poca importancia.
325

Tubos Endotraqueales
Los tubos endotraqueales se utilizan para mantener una va area clara para que se pueda asistir la
respiracin si es necesario. Tambin protegen las vas respiratorias cuando los reflejos de deglucin y
la tos se suprimen, por lo que material como la saliva no entra en la trquea. La mayora de los tubos
disponibles en el mercado son excesivamente largos para uso animal y su longitud debe ser reducida
para reducir el espacio muerto.
Laringoscopios
Los laringoscopios se utilizan para obtener una visin clara de la laringe para que el tubo endotraqueal
se pueda pasar fcilmente y sin trauma.
Equipo de Monitorizacin
Los equipos de inspeccin deben encenderse con tiempo para estabilizarlos y revisar sus funciones.
Establecer los lmites de alarma para la especie que vayamos a anestesiar. Las mantas trmicas deben
encenderse aproximadamente 30-60 minutos antes de su uso para que puedan alcanzar la
temperatura de funcionamiento deseada.
326

El Animal
El factor ms importante para reducir los riesgos asociados con la anestesia es el uso de animales con
un estado sanitario muy alto. Es muy importante asegurarse de que cualquier animal que va a ser
anestesiado este al menos en buen estado de salud y libre de sintomatologa clnica.
Los animales se deben obtener por lo menos 7 a 14 das antes de su uso previsto para que tengan
suficiente tiempo para la aclimatacin a su nuevo entorno. Durante este perodo los cambios
metablicos y hormonales causados por el estrs del transporte volvern a la normalidad. Adems, el
animal puede ser vigilado para detectar cualquier signo de enfermedad. El personal de apoyo y los
investigadores tendrn tambin la oportunidad de familiarizarse con el comportamiento y las
caractersticas de los animales, y se pueden registrar el peso corporal, el crecimiento y el consumo de
alimentos y agua. Esta informacin es muy valiosa para evaluar los animales despus de someterse a
un procedimiento quirrgico. Muchos de los sistemas de evaluacin del dolor en fase de desarrollo se
basan en el conocimiento de estas variables, y es importante que dicha informacin se registre.
La aclimatacin de las especies domsticas que rpidamente desarrollan una relacin con su cuidador
(por ejemplo, perros, gatos y cerdos) tiene la ventaja de reducir sufrimientos innecesarios durante la
induccin y la recuperacin de la anestesia. El manejo regular de la mayora de las especies,
incluyendo los pequeos roedores, facilita que los animales se habiten al procedimiento. Esta
aclimatacin incluye la situacin que encontrarn los animales al recuperarse de la anestesia, por
ejemplo el aislamiento.
Examen Clnico
Cualquiera que sea el estado de salud del animal, se realizar un examen clnico antes de la induccin
de la anestesia. Si hay alguna desviacin de la normalidad, se puede solicitar la ayuda de tcnicos y
veterinarios. Si el aspecto general del animal es anormal o cualquier signo clnico est presente, la
induccin de la anestesia no se realizar hasta que se obtenga el asesoramiento de expertos. Como se
mencion anteriormente, es til controlar la ingesta de alimentos y el agua adems del peso corporal
durante unos das antes de la ciruga. Esto permitir evaluar si la ingesta es normal y ser de utilidad
en el seguimiento de la recuperacin post-operatorio del animal.
Ayuno
Los gatos, perros, hurones, primates y cerdos no deben recibir ningn alimento durante las 8-12 horas
antes de la anestesia para reducir al mnimo el riesgo de vmito durante la induccin de la anestesia o
durante la recuperacin. En rumiantes, un corto perodo de inanicin (12-24 horas) puede ayudar a
reducir la incidencia de timpanismo ruminal (la acumulacin de gases en el estmago).
El ayuno pre-anestsico en conejos y pequeos roedores es innecesario, ya que el vmito durante la
induccin no se produce en estas especies. De vez en cuando se pueden observar problemas en los
cobayos, ya que pueden mantener los alimentos en su faringe despus de ser anestesiados. Si esto
327

ocurre en un nmero significativo de animales, se introducir un breve perodo de ayuno pre-anestsico

(3-4 horas). Es importante tener en cuenta que los roedores y los conejos son coprfagos, por lo que si
se va a realizar una ciruga abdominal en estas especies hay que instaurar medidas para evitar la
ingestin de sus heces que proporcionen un estmago completamente vaco.
Si el apetito del animal est deprimido a causa del dolor, el estrs quirrgico o el retraso en la
recuperacin de la anestesia, la alimentacin y la ingesta de agua puede deprimirse gravemente
durante al menos 24 horas despus de la operacin. Las consecuencias metablicas de esto,
especialmente cuando se combina con el ayuno preoperatorio, pueden ser graves y pueden
comprometer los datos de investigacin obtenidos y el bienestar de los animales. Por tanto, es
preferible retener el alimento nicamente cuando esto sea requerido por un protocolo de investigacin
en particular. Si un corto perodo de ayuno es necesario, esto se puede lograr proporcionando una
cantidad limitada de alimentos. No se debe ayunar los animales preados de ninguna especie, pero en
particular los rumiantes y cobayas ya que puede producir graves alteraciones metablicas que pueden
resultar fatales.
Las aves grandes o medianas (por ejemplo patos, pollos, palomas) puede estar en ayunas durante 612 horas para reducir el riesgo de regurgitacin. Los pjaros ms pequeos no deben estar en ayunas
durante ms de 2 horas para evitar el riesgo de hipoglucemia. El ayuno de los reptiles y anfibios en
general, es innecesario. Los peces deben estar en ayunas durante 24-48 horas antes de la anestesia.
Todos los animales debern tener acceso a agua potable hasta aproximadamente 60 minutos antes de
la induccin de la anestesia. Siempre que sea posible, los animales deben ser pesados antes de la
anestesia, tanto para permitir el clculo preciso de las dosis de los frmacos como para permitir la
evaluacin de cualquier prdida de peso despus de la ciruga.
328

Anestesia
Para llevar a cabo procedimientos quirrgicos en animales, la percepcin del dolor debe estar
completamente suprimida. Si la anestesia se indujo simplemente para proporcionar contencin
mientras que se llevan a cabo procedimientos no dolorosos, slo se requerir una anestesia con ligera
supresin del dolor. Estos diferentes niveles de la anestesia se pueden producir de varias maneras,
usando un solo agente, o combinaciones de agentes y tcnicas.
Es importante recordar que los 2 principales objetivos de la anestesia son prevenir el dolor y posibilitar
un manejo sin estrs. El mtodo elegido debe causar una mnima angustia al animal. Tambin se debe
prestar atencin a la reduccin del miedo y la angustia asociados con el manejo o la sujecin fsica y el
transporte del animal desde su sala o habitculo al quirfano.
La seleccin de un mtodo de anestesia que sea el que con menos probabilidad interfiera con un
protocolo experimental especfico es la tarea ms difcil. Los efectos farmacolgicos y fisiolgicos de
varios agentes anestsicos deberan revisarse. Esto reducir las interacciones entre la tcnica y el
protocolo experimental.
Medicacin Preanestsica
Puede ser til incluir medicacin preanestsica, como parte de la anestesia. Las ventajas de esto son:
La administracin de sedantes o tranquilizantes pueden reducir la agresin y el miedo o
aprehensin y ayudan a una induccin de la anestesia libre de estrs.
El uso de analgsicos puede reducir el dolor, especialmente en el perodo inmediato
postoperatorio, y pueden aliviar el dolor de una manera ms eficaz a travs de "la analgesia
preventiva.
La atropina o el glicopirrolato se pueden dar para reducir las secreciones bronquiales y
salivares y para proteger el corazn de la inhibicin vagal causada por algunos
procedimientos (por ejemplo, la intubacin endotraqueal, la manipulacin de las vsceras en
ciruga). Es recomendable utilizar el glicopirrolato en conejos, ya que la atropina es a menudo
ineficaz en esta especie.
El uso de sedantes, tranquilizantes y analgsicos puede reducir la cantidad de anestesia
necesaria. Estos agentes tambin proporcionan una induccin y una recuperacin ms suave
de la anestesia.
En los seres humanos, muchos de los frmacos utilizados reducen el miedo y calman la ansiedad.
Efectos similares se producen en los animales. Adems del uso de frmacos, el manejo cuidadoso y
experto de los animales de laboratorio es una parte esencial antes y despus de la anestesia.
329

Si realizamos la induccin por va intravenosa, entonces es til aplicar una crema anestsica local (e.g.,
EMLA) a la piel que recubre la vena unos 45-60 minutos antes de la inyeccin intravenosa. Esto elimina
el dolor o las molestias de puncin venosa, y tiene la ventaja aadida de eliminar cualquier movimiento
en respuesta al procedimiento, ya que la piel est completamente anestesiada.
330

Analgesia
Guas para paliar el dolor
La eleccin del protocolo analgsico adecuado es especialmente complicada en especies como
roedores y conejos debido a la complejidad de la valoracin de los signos de dolor. Se admite que es
esperable que cualquier procedimiento que cause dolor en humanos lo cause tambin en animales.
Para valorar que procedimientos pueden requerir la administracin de un tratamiento para aliviar el
dolor hay que tener en cuenta varios factores:
Lo invasivo del procedimiento (qu cavidades se invaden?, se afectan tejidos
especialmente sensibles como huesos o dientes?).
Grado esperado de severidad de dolor (Qu dolor causa un el procedimiento en humanos?).
Administracin de analgesia pre-operatoria.
En base a esta informacin se elegir el tipo de analgsico ms adecuado y la duracin del
tratamiento. Como gua general:
Las cirugas superficiales requieren terapia analgsica por 12-14 horas (canulacin de vasos
superficiales, incisiones en piel, etc.).
Cirugas invasivas como laparotomas se beneficiarn de regmenes paliativos del dolor de 2448 horas.
Ciruga torcica ortopdica requerir terapia analgsica durante 3-4 das.
Tipos de analgsicos
El dolor puede ser aliviado o tratado mediante el uso de 4 tipos de regmenes analgsicos:
Opiceos (gentes narcticos de accin central). Rgimen sistmico.
AINEs (analgsicos, antiinflamatorios no esteroideos). Rgimen sistmico.
Anestsicos de accin local o regional. Rgimen local.
Analgesia multi-modal.
Opiceos
Los analgsicos opiceos son molculas con efecto agonista o antagonista de los receptores de
opiceos. Existen varios receptores opiceos cada uno de los cuales identificados con una letra del
331

alfabeto griego. Los ms relevantes para la accin analgsica de estos frmacos son los receptores
(kappa). La estimulacin de estos receptores por un agonista puro produce los efectos tpicos
de los opiceos:
Analgesia (
).
Euforia ( ).
Sedacin ( ).
Depresin de la respiracin (
).
No todos los analgsicos opiceos son agonistas puros. Algunos son agonistas parciales mientras que
otros son una mezcla de agonista/antagonista. Algunos ejemplos de este grupo de frmacos son:
morfina, fentanilo, petidina o buprenorfina.
El opiceo ms usado en pequeos animales es la Buprenorfina, un agonista parcial con un periodo de
actividad de entre 6-12 horas y que puede ser administrado por numerosas rutas siendo la subcutnea
la ms utilizada.
Es importante resaltar que los opiceos utilizados como medicacin prequirrgica pueden tener efectos
sinrgicos con otras drogas utilizadas para inducir o mantener la anestesia. Por tanto, las dosis de los
frmacos administrados deben ser reajustadas.
En ratas, se ha reportado la aparicin de efectos secundarios como el pica (ingestin de sustancias
no nutritivas en respuesta a la aparicin de naseas) que puede complicar el post-operatorio.
AINES
Los AINEs son frmacos que actan tanto a nivel del SNC como localmente en los tejidos por inhibicin
de la produccin de prostaglandinas. Todos los AINEs comparten al menos un mecanismo de accin
denominado inhibicin de la(s) enzima(s) ciclooxigenasa(s); COX, lo que da lugar a una disminucin
en la sntesis de varias prostaglandinas y tromboxanos, potentes mediadores qumicos de inflamacin
que activan nociceptores perifricos. Esto provoca una reduccin/prevencin de la inflamacin y el
dolor. Este grupo de frmacos va a variar en su selectividad por las enzimas ciclo-oxigenasas 1 y 2:
COX-1 y COX-2.
COX-1; es una ciclo-oxigenasa constitutiva que sintetiza prostaglandinas necesarias para la
funcin normal del tracto gastrointestinal y sistema renal.
COX-2; se trata de una ciclo-oxigenasa inducible que regula la produccin de prostaglandinas
que intervienen en procesos de inflamacin.
Actualmente se considera que la inhibicin de la COX-1 es la causante de la toxicidad gastrointestinal y
renal de estos frmacos, mientras que la inhibicin de la COX-2 provee la actividad antinflamatoria.
332

Aunque se ha promovido el desarrollo de AINEs selectivos para COX-2 con el fin de evitar los efectos
indeseables de la inhibicin de la COX-1, actualmente se ha comprobado que el mecanismo de accin
de la COX es ms complejo de lo anteriormente descrito y que la selectividad de los frmacos por una
u otra COX varia de una especie a otra.
Aunque histricamente este grupo de frmacos se ha utilizado para el tratamiento del dolor crnico,
han demostrado ser tambin muy eficaces para el tratamiento del dolor agudo post-operatorio. Algunos
de los ms utilizados en pequeos animales son: carprofeno, ketoprofeno, meloxicam o flunixin. Los
nuevos
agentes,
como
el
carprofeno
(antagonista
selectivo
COX-2),
poseen
mejor
ratio
efectividad/toxicidad y pueden ser administrados como tratamiento preventivo o paliativo. La

dosificacin habitual es una administracin subcutnea diaria.
Anestsicos Locales
El efecto de los anestsicos locales comienza unos 5 o 10 minutos tras la aplicacin (por ejemplo,
tpica) y puede durar desde 45 minutos hasta varias horas.
La administracin de estos frmacos puede realizarse por varias tcnicas:
Infiltracin o infusin: se inocula el anestsico en solucin a travs de la piel y otras capas de
tejidos a lo largo de la lnea de incisin antes o despus de realizar la ciruga.
Bloqueo de conduccin nerviosa.
Se inocula el anestsico sobre el nervio que inerva el lugar de la ciruga.
Anestesia espinal o regional.
Se inocula el anestsico dentro del canal vertebral, epiduralmente o dentro del espacio subarcnoideo.
Administracin Tpica.
La administracin tpica de anestsicos locales como la lidocana puede ser una solucin cmoda para
determinados procedimientos (extraccin de sangre de la oreja en conejos, biopsia de cola en ratones,
etc.). Bupivacana, Lidocana o Lignocana son los anestsicos locales ms utilizados en animales de
laboratorio.
Analgesia Multinodal
La analgesia multi-modal es un protocolo de analgesia en el que se combina la accin de distintos tipos
de analgsicos para combatir el dolor. Este tipo de regmenes paliativos son tiles cuando el dolor est
provocado por diferentes rutas neuronales y sistemas transmisores, lo que hace que sea poco probable
que responda correctamente a un nico tipo de analgsicos.
Utilizando una combinacin de analgsicos, es posible adems reducir las dosis administradas de cada
uno por lo que se reduce la aparicin de efectos secundarios.
333

Es conveniente considerar este tipo de tratamientos paliativos en el caso de procedimientos

considerados muy dolorosos como el caso de la toracotoma.
Dosificacin de analgsicos
Las tablas que se exponen a continuacin recogen las dosis recomendadas de los analgsicos ms
habitualmente utilizados en ratas, ratones y conejos.
Dosificacin de analgsicos para ratn
Dosis
Va
administracin
Posologa
0.05 0.1 mg/kg
SC, IP
4 12h
Carprofen
5 - 10 mg/kg
SC
12 24h
Ketoprofen
2 5 mg/kg
SC
12 24h
Analgsico
Buprenorfina
Bupivacana (local)
Diluda al 0.25 %. Administracin tpica antes de realizar la incisin
Dosificacin de analgsicos para rata
Dosis
Va
administracin
0.01 - 0.05 mg/kg
SC, IP
0.1 0.25 mg/kg
Oral
Carprofen
5 mg/kg
SC, Oral
24h
Ketoprofen
2 5 mg/kg
SC
24h
Analgsico
Buprenorfina
Bupivacana (local)
Posologa
6 12h
Diluda al 0.25 %. Administracin tpica antes de realizar la incisin
Dosificacin de analgsicos para conejo
Analgsico
Buprenorfina
Carprofen
Ketoprofen
Bupivacana (local)
334
Dosis
Va de
administracin
Posologa
0.05 0.1 mg/kg
SC, IP
8 12h
1.5 mg/kg
Oral
12h
4 mg/kg
SC
24h
3 mg/kg
SC
24h
Diluda al 0.25 %. Administracin tpica antes de realizar la incisin.
REDUCCIN DEL
DOLOR, MALESTAR Y
SUFRIMIENTO

Reduccin del Dolor, Malestar y Sufrimiento
336

El hombre ha utilizado animales desde el principio de su existencia. A medida que la civilizacin

avanza, tambin lo hace la toma de conciencia y la proteccin hacia los animales. Una forma de
utilizacin de los animales es la experimentacin y, al igual que en otros mbitos, la preocupacin por
su proteccin se ha desarrollado con el tiempo.
As, en 1822 en el Reino Unido se public la primera ley sobre proteccin animal (referida en aquel
momento slo a los animales domsticos y de trabajo). En 1876 se promulg la primera legislacin
referida, ahora s, a los animales utilizados en experimentacin, y en 1959 se public el principio de las
3Rs en el que se basa toda la legislacin europea posterior.
Principales hitos en la legislacin europea y espaola sobre experimentacin animal:
1822 Martins Act (Richard Martin. Society for the Prevention of Cruelty to Animals).
1876 Cruelty to Animals Act (Experimentacin animal).
1959 The Principles of Humane Experimental Technique. (Russell y Burch).
1966 Laboratory Animal Welfare Act.
1986 Directiva 86/609/EEC.
2005 RD1201/2005.
2010 Directiva 2010/63/EU (proteccin de los animales utilizados en fines cientficos). Aparece
el trmino welfare 54 veces.
Como hemos dicho, en los principios de las 3Rs se basa la legislacin actual que regula la realizacin
de los experimentos. Uno de estos principios es el refinamiento. Mientras que el reemplazamiento y la
reduccin son trminos concretos, el refinamiento es un trmino muy amplio que se puede realizar
utilizando estrategias muy variadas.
Entendemos por refinamiento todas aquellas tcnicas utilizadas en experimentacin animal que
permitan el mantenimiento o la mejora del bienestar animal.
El bienestar animal ya ha sido explicado anteriormente y es un trmino difcil de definir, pero
resumiendo en una definicin podemos decir que el bienestar animal es la capacidad de interrelacionar
el animal con el medio ambiente que le rodea y adaptarse a este mediante el desarrollo del
comportamiento innato que tendra en la naturaleza.
Para que el animal desarrolle su comportamiento innato necesitar un alojamiento y entorno adecuado,
una socializacin adecuada, una dieta adecuada y prevenir o eliminar la aparicin del dolor, el malestar
o el sufrimiento. Es difcil decir hasta donde la aparicin de estos sntomas interrelacionan con el
bienestar animal, lo que parece claro es que al animal le resultar ms difcil desarrollar su
comportamiento innato si aparecen de forma persistente el dolor, el sufrimiento o el malestar.
337

El refinamiento es un concepto amplio que engloba todo esfuerzo dirigido a evitar la aparicin de estos
sntomas mediante: tcnicas quirrgicas menos agresivas o invasivas, utilizacin de analgsicos y
anestsicos, mejora de los tratamientos postquirrgicos, mejora de tcnicas de recogida de muestras
(menos dolorosas), habituar a los animales a la toma de muestras o a las inoculaciones mediante
estmulos de recompensa, alojamiento en grupo para las recuperaciones, etc.
338

Sufrimiento: Dolor, Malestar y Angustia

Dolor, malestar, y angustia son los 3 factores que debemos evitar de acuerdo a la legislacin espaola.
Cada uno de ellos no es un compartimento aislado sino que todos ellos pueden solaparse, o la
aparicin de uno llevar a la aparicin de otro u otros. Tampoco es fcil de definir desde el punto de
vista animal estos sntomas, es decir sensaciones que pueden experimentar los animales y en los que
nosotros solo podemos ver los signos e inferir que son debidos a esos sntomas.
El sufrimiento tiene un componente fsico y un componente emocional. El componente emocional es
difcil de medir en animales, pero podemos deducirlo de forma indirecta a travs de las alteraciones
fisiolgicas y del comportamiento.
Para el hombre es ms sencilla la observacin de alteraciones del comportamiento en mamferos
superiores que en otros vertebrados como los anfibios, reptiles, o peces, aunque no por ello se puede
descartar que estos animales puedan sufrir.
El sufrimiento puede variar tanto en intensidad como en duracin. La combinacin de estas 2
magnitudes marcar el nivel de sufrimiento del animal. Es decir, animales con una intensidad de
sufrimiento bajo pero cronificado, pueden ver alterado su comportamiento y su fisiologa, al igual que
un sufrimiento de intensidad alta y agudo.
Se pueden clasificar cada uno de los estados por los que los animales pueden sufrir, por ejemplo:
Dolor y Malestar
El dolor es una sensacin desagradable con un componente sensorial asociado a un dao tisular, o
expresado como si este existiera, que proviene de los nocioceptores, y responde a un estmulo trmico,
mecnico, o qumico, y un componente emocional. Los nociceptores se encuentran en tejidos
corporales como piel, vsceras, vasos sanguneos, msculo, tejido conectivo, periostio y meninges.
Los impulsos nerviosos captados por estos nociceptores se transmiten hasta la corteza cerebral donde
estas seales son traducidas en sentimientos emocionales, dolor, y su localizacin. Tambin existen
seales nerviosas que descienden desde la corteza cerebral y modifican o inhiben la transmisin de la
seal de los nociceptores. Por tales motivos la maduracin del sistema nervioso es un punto a tener en
cuenta en la prevencin o el tratamiento del dolor. Otro punto a tener en cuenta es la continuidad del
estmulo doloroso ya que puede provocar que el umbral de estmulo necesario para activar los
nociceptores disminuya provocando cuadros de hiperalgesia.
Angustia (Distrs)
Este trmino se refiere a aquellas situaciones en que los animales no pueden adaptarse a los estmulos
(estresores) externos o internos que reciben.
339

Los animales se adaptan a los cambios en su entorno volviendo a un punto de equilibrio fisiolgico y de
comportamiento, por este motivo es necesario dedicar un tiempo adecuado a la aclimatacin a los
cambios antes de iniciar un proceso experimental. Aunque el propio proceso experimental es un
estresor, es posible reducirlo mediante estrategias como las tcnicas de entrenamiento y recompensa.
Mientras que el dolor tiene un componente fsico, la angustia puede no tenerlo y s presentar un
componente nicamente mental o estar relacionada con el miedo.
Podemos imaginar que probablemente el miedo sea uno de los sentimientos ms comunes en los
animales de experimentacin y se produce alteraciones fisiolgicas y del comportamiento como la
activacin del sistema nervioso simptico como se realizara en situaciones de peligro y defensa, o
comportamientos de inmovilidad. El miedo y la ansiedad pueden provocar cambios en la frecuencia
cardiaca, la presin sangunea, elevaciones de los niveles de glucosa en sangre, dilatacin de pupilas,
defecacin y prdidas de orina.
La angustia tambin puede aparecer por no poder adaptarse mentalmente a nuevos espacios, o no
poder desarrollar su comportamiento natural en ellos. Esta angustia o distrs es diferente del distrs
fsico o fisiolgico y suele relacionarse con la aparicin de comportamientos anormales, que pueden ir
desde las estereotipias (comportamientos anormales, repetidos, y sin un sentido), hasta las
automutilaciones. Estos comportamientos pueden reflejar estados mentales de aburrimiento,
frustracin, aislamiento, etc. Estos comportamientos pueden ser ms evidentes en especies
filogenticamente ms cercanas al ser humano (primates, perros, etc.) pero aparecen en muchas otras
especies (rata, ratn, etc.).
340

Alteraciones Provocadas por el Malestar

Las alteraciones provocadas por el malestar pueden ser mltiples y difciles de establecer como causa
efecto. Dichas alteraciones tienen gradientes de intensidad, es decir, a mayor malestar o alteracin del
bienestar, pueden provocarse alteraciones mayores. Podemos observar desde cambios en el
comportamiento que alterarn test de comportamiento hasta cambios morfolgicos en zonas cerebrales
tras sufrir dolor prolongado a edades tempranas. De forma general las alteraciones descritas son:
Alteraciones hormonales (eje hipotlamo-hipfisis, ACTH, corticosteroides, catecolaminas,
hormonas sexuales, etc.).
Alteraciones del sistema inmune (e.g., inmunodepresin).
Alteraciones de la reproduccin.
Alteraciones de los parmetros bioqumicos (e.g., glucosa).
Alteraciones de los ritmos habituales (frecuencia cardiaca, tensin arterial, ritmos circadianos,
etc.).
Alteraciones en comportamiento (tests de comportamiento).
Alteraciones anatmicas (e.g., de la estructura cerebral).
341

Reconocimiento y Control del Malestar

Como hemos comentado anteriormente el malestar tiene un componente emocional. No podemos
preguntar a los animales cules son sus emociones, sino solo observar la expresin de su
comportamiento. En animales superiores como primates, perros, etc., es ms sencillo reconocer
estados emocionales, mientras que en roedores es difcil reconocer expresiones faciales relacionadas
con estas emociones. En cualquier caso, cada una de estas expresiones depende de la especie que se
considere.
Aunque los animales no tienen por qu sufrir malestar de la misma forma que sufrimos los humanos,
tampoco hay que desdear que en los casos en los que nosotros sufrimos malestar podran sufrirlo
tambin los animales, adems de en aquellas situaciones en los que su entorno o situacin individual
les impida realizar su comportamiento innato. Es importante tener en cuenta durante la observacin del
comportamiento de los animales que en cada momento del da su actividad vara, sobre todo en
roedores donde su principal actividad se realiza en horas de oscuridad. Asimismo, su actividad es
dependiente del sexo, edad, fondo gentico, modificacin o mutacin gentica, etc. Una buena
aproximacin es la comparacin del comportamiento previo a la experimentacin y los cambios
observados durante la experimentacin. Todas estas observaciones son subjetivas, es decir,
dependientes del observador. Por este motivo tambin se han utilizado la comparacin de parmetros
fisiolgicos como la concentracin de glucosa, creatinina, cortisol, corticosterona, frecuencia cardiaca,
etc. El problema es que la manipulacin de lso animales para realizar estas mediciones pueden
interferir en el significado de las mismas.
A partir de 1985 (Morton y Griffiths) se han desarrollado diferentes estrategias de observacin, que se
inicia desde la distancia prestando atencin a:
1. La apariencia del animal.
2. La postura.
3. El comportamiento en su jaula o corral.
Posteriormente se observa el animal desde cerca observando:
1. La respuesta del animal a estmulos previstos.
2. Presencia de signos clnicos (diarrea, vmitos, descargas nasales, etc.).
3. Posturas anormales.
Una vez analizado el comportamiento se pueden realizar mediciones que de forma indirecta podran
indicar alteraciones como la medida del peso que en el caso de descenso del peso podra indicar un
descenso en la toma de alimento.
La prdida de peso, si las condiciones iniciales eran satisfactorias, suele estar relacionada con un
deterioro del bienestar del animal, mientras que la no prdida de peso o la ganancia no tienen por qu,
ya que en los casos de crecimientos de tumores o ascitis el peso de los animales no suele descender
en los primeros momentos.
342

Tcnicas Aspticas
Los signos clnicos de dolor, estrs o dao prolongados que podemos observar en los animales
comnmente, aparecen en la tabla siguiente:
Signo
Alteracin
Defensa
Alteracin de la postura para evitar el movimiento, el contacto, o la manipulacin

del rea del dolor.
Aspecto
Dependiente de especie. Prdida de acicalamiento y limpieza, cambio postural.

Cambio en la expresin facial (en primates).
Comportamiento
Deprimido, inmvil, no responde a estmulos. Comportamiento nervioso (se tumba,

se levanta, alteraciones en el peso, circling, lentitud) o alteraciones en el sueo.
Animales grandes pueden gruir, rechinar dientes (ovejas y cabras). Movimiento
anormal de ojos (primates).En general alteran su interaccin social.
Vocalizaciones
Cuando se palpa el rea dolorida o cuando se mueve para evitarlo. Los roedores
emiten vocalizaciones ultrasnicas.
Mutilaciones
Se lamen, muerden, rascan, agitan, o frotan la zona dolorida.
Sudoraciones
En especies que suden (caballos). Asociada a algunos tipos de dolor (clico).
Prdida de apetito
Dejan o reducen su ingesta de comida y agua. Lleva asociado una prdida de

peso.
Estos son los parmetros bsicos a controlar aunque habr otros parmetros que aadir, especficos
de la especie o del protocolo animal que se est supervisando.
Para los parmetros subjetivos es conveniente usar una puntuacin ya que no tienen porqu ser
parmetros binarios (si o no), sino tambin tienen un componente cuantitativo. Por ejemplo, si se
realiza un control de la respiracin se puede cuantificar su deterioro mediante una puntuacin desde
normal a muy alterada, puntuando de 0 a 3.
Reconocimiento del Malestar

Como ya hemos comentado en el reconocimiento del malestar una de las mejores formas de detectarlo
es mediante tablas especficas de la especie, cepa/raza, modificacin gentica, protocolo experimental,
sexo, edad, etc. que detecte y cuantifique. Dichas tablas no sirven solo para una deteccin puntual sino
para un seguimiento en el tiempo de las condiciones de bienestar del animal, la deteccin de la
aparicin de alteraciones del bienestar, su empeoramiento o la correccin de dichas alteraciones.
Existen mltiples recomendaciones sobre qu parmetros evaluar dependiendo de las especies
animales y de los protocolos experimentales.
As, para experimentos de toxicologa la OCDE presenta unas guas dependiendo del tipo de estudio
que se vaya a realizar (e.g., irritacin, carcinognesis). Para estudios de enfermedades infecciosas
343

existen guas en funcin de los agentes que se testan y en las que la medicin de la temperatura de los
animales es un parmetro habitual. Para estudios de seguridad o eficacia de vacunas, los parmetros
dependern de los agentes vacunales (e.g., en vacuna del ttanos la postura es un parmetro
fundamental). Para estudios de investigacin frente al cncer existen guas del UKCCCR donde
aparecen parmetros como el tamao del tumor, la apariencia del tumor, la ulceracin del tumor, etc.
Para estudios de dolor donde es necesario la aparicin del dolor se debe de cuantificar la cantidad y el
tipo de dolor que se est estudiando.
En algunos casos no se conoce cuales pueden ser las alteraciones del bienestar de los animales o
cuales pueden ser las consecuencias de algunos protocolos experimentales. En estos casos es
necesaria la realizacin de estudios pilotos antes de realizar estudios que involucren un grna nmero
de animales. En dichos estudios los investigadores pueden observar:
Signos clnicos que aparecen en los animales.
Posibles interacciones de analgsicos o anestsicos.
Datos prcticos de cmo supervisar la aparicin de malestar en los animales.
De acuerdo a nuestra legislacin (RD 1201/2005) y a diferentes organismos internacionales (e.g.,
OCDE) los experimentos con animales debern llevarse a cabo evitando el dolor, sufrimiento y dao
prolongado. Por tal motivo, adems de supervisar su aparicin debemos proponer medidas paliativas o
correctoras Desde enriquecimiento o mejora del entorno en caso de comportamientos anormales, curas
en caso de presencia de heridas, analgsicos en caso de deteccin de dolor, etc.
Criterios de Punto Final Humanitario (Humane Endpoints)

Cuando durante el procedimiento aparecen alteraciones dao, dolor, o sufrimiento prolongado que no
puede ser corregir mediante mediadas paliativas o correctoras es necesario aplicar criterios de punto
final del experimento, es decir sacrificio de los animales. El criterio de punto final se puede definir como
el punto inicial donde se detecta en un animal un dolor, una angustia, un distress muy grave, o una
muerte prxima. En general, los niveles de sufrimiento que no se deben tolerar se resumen en:
Incapacidad para comer o beber.
Prdida de peso rpida o continua.
Deshidratacin grave.
Alteraciones graves del comportamiento (falta de grooming).
Alteraciones neurolgicas (convulsiones, reflejos reducidos, etc.).
Apata o letargia.
Signos que indiquen dolor, dao, o sufrimiento grave.
Alteraciones respiratorias graves.
344

Tcnicas Aspticas
Los criterios de punto final se deben aplicar por motivos morales y legales, pero tambin por motivos
cientficos ya que el dolor, y la aparicin del malestar, pueden alterar de forma significativa los
resultados experimentales alterando parmetros inmunolgicos, hormonales, etc. Asimismo, la
aplicacin del punto final previene la posibilidad de que aparezcan animales muertos antes de poder
ser recogidos con lo que se deterioran mucho los tejidos que luego se van a estudiar.
345

Clasificacin de la Severidad de los Procedimientos

Cada vez ms, la evaluacin de los procedimientos se realiza en base a la severidad de los mismos.
De hecho la nueva directiva Europea incluye una clasificacin de la severidad a tal efecto. Esta
clasificacin permite una evaluacin ms rpida de los procedimientos.
La severidad de un procedimiento viene determinada por el grado de dolor, sufrimiento, angustia o
dao duradero que se prev que experimente un animal durante su realizacin, teniendo en cuenta que
no se considera procedimiento todo aquello que provoque menos dolor que un pinchazo realizado con
tcnicas veterinarias adecuadas. De acuerdo con la nueva directiva 2010/63/UE, las categoras y las
clasificaciones de la severidad son los siguientes
Seccin I. Categoras de Severidad
Sin Recuperacin del Animal

Los procedimientos que se realizan enteramente bajo anestesia general y tras los cuales el animal no
recuperar la conciencia deben clasificarse como de no recuperacin.
Leve
Procedimientos que pueden causar dolor, sufrimiento o angustia leves de corta duracin, as como los
procedimientos sin alteracin significativa del bienestar o del estado general de los animales deben
clasificarse como leves.
Moderado
Procedimientos que pueden causar dolor, sufrimiento o angustia moderados de corta duracin, o leves
pero duraderos, as como los procedimientos que pudieran causar una alteracin moderada del
bienestar o el estado general de los animales deben clasificarse como moderados.
Severo
Procedimientos que pueden causar dolor, sufrimiento o angustia intensos, o moderados pero
duraderos, as como los procedimientos que pueden causar una alteracin grave del bienestar o del
estado general del animal deben clasificarse como severos.
Seccin II. Criterios de Atribucin

La atribucin de la categora de severidad tendr en cuenta cualquier intervencin o manipulacin de
un animal en un procedimiento determinado. Se basar en los efectos ms severos que pueda
experimentar un animal despus de aplicar todas las tcnicas apropiadas de refinamiento. Al asignar
346

Tcnicas Aspticas
un procedimiento a una categora, el tipo de procedimiento y dems factores se tendrn en cuenta.

Todos estos factores deben considerarse caso por caso y deben incluir:
El tipo de manipulacin, el tratamiento.
La naturaleza del dolor, sufrimiento, angustia o dao duradero causados por (todos los
elementos de) el procedimiento, su intensidad, duracin y frecuencia y la multiplicidad de
tcnicas empleadas.
El sufrimiento acumulativo en un procedimiento.
La prevencin de la expresin del comportamiento natural incluidas las restricciones en las
normas de alojamiento, zootcnicas y de cuidado de los animales.
A efectos de la clasificacin de la severidad del procedimiento, se tendrn en cuenta los siguientes
factores adicionales:
Especie y genotipo.
Madurez, edad y sexo del animal.
Experiencia de formacin del animal en el procedimiento.
Si se reutiliza el animal, la severidad real de los procedimientos anteriores.
Los mtodos utilizados para reducir o suprimir el dolor, el sufrimiento y la angustia, incluidos el
refinamiento de las condiciones de alojamiento, zootcnicas y de cuidado de los animales.
Uso de puntos finales incruentos.
Seccin III. Ejemplos

A continuacin se ofrecen ejemplos de diversos tipos de procedimientos atribuidos a cada categora de
severidad sobre la base de los factores relativos al tipo de procedimiento.
Procedimiento Leve
a. Administracin de anestesia, salvo para el nico propsito de sacrificar.
b. Estudio farmacocintico en que se administra una nica dosis y se recoge un nmero limitado
de muestras de sangre (totalizando <10 % del volumen circulante) y no se prev que la
sustancia cause ningn efecto nocivo perceptible.
c. Tcnicas no invasivas de diagnstico por imagen en animales (e.g., resonancia magntica) con
sedacin o anestesia apropiadas.
d. Procedimientos superficiales, por ejemplo biopsias de oreja y rabo, implantacin subcutnea no
quirrgica de minibombas y transpondedores.
e. Aplicacin de dispositivos exteriores de telemetra que nicamente causan al animal un
debilitamiento menor o una interferencia menor con la actividad y el comportamiento normales.
347

f. Administracin de sustancias por va subcutnea, intramuscular, intraperitoneal, por sonda

gstrica e intravenosa por vasos sanguneos superficiales, cuyo efecto sobre el animal es leve,
y el volumen se encuentra dentro de lmites apropiados para el tamao y la especie del animal.
g. Induccin de tumores, o tumores espontneos, que no causan ningn efecto nocivo
clnicamente perceptible (por ejemplo, ndulos pequeos, subcutneos, no invasivos).
h. Cra de animales genticamente modificados con fenotipo leve.
i. Alimentacin con dietas modificadas, que no cubren las necesidades nutricionales de todos los
animales y se prev que causen una anomala clnica leve en el perodo de estudio.
j. Confinamiento a corto plazo (< 24 h) en jaulas metablicas.
k. Estudios que implican la privacin a corto plazo de interlocutores sociales, enjaulado solitario a
corto plazo de ratas o ratones adultos de cepas gregarias.
l. Modelos que exponen al animal a estmulos nocivos que se asocian brevemente con dolor,
sufrimiento o angustia leve, y que el animal puede evitar.
m. La combinacin o acumulacin de los siguientes ejemplos puede dar lugar a una clasificacin
leve:
i.
Evaluacin de la composicin corporal a travs de mediciones no invasivas y restriccin

mnima.
ii.
Supervisin ECG con tcnicas no invasivas con una restriccin mnima o nula de
animales habituados.
iii.
Aplicacin de dispositivos exteriores de telemetra que no se prev que causen ningn

impedimento a animales socialmente adaptados y que no interfieren con la actividad y el
comportamiento normales.
iv.
Cra de animales genticamente modificados sin fenotipo clnicamente perceptible.
v.
Adicin a la dieta de marcadores inertes para seguir el paso de la digesta.
vi.
Retirada de la alimentacin durante un perodo inferior a 24h en ratas adultas.
vii. Ensayos en campo abierto.
Procedimiento Moderado
a. Aplicacin frecuente de sustancias de prueba que producen efectos clnicos moderados, y
extraccin de muestras de sangre (> 10 % de volumen circulante) en un animal consciente en
el plazo de algunos das sin reemplazo del volumen.
b. Estudios de determinacin de la gama de dosis causante de toxicidad aguda, pruebas de
toxicidad crnica/carcinogenicidad, con puntos finales no letales.
c. Ciruga bajo anestesia
y analgesia apropiadas, asociada con dolor
o sufrimiento
postquirrgicos o alteracin postquirrgica de la condicin general. Ejemplos: toracotoma,

craneotoma, laparotoma, orquidectoma, linfodenectoma, tiroidectoma, ciruga ortopdica
con estabilizacin efectiva, trasplante de rganos con tratamiento efectivo del rechazo,
implantacin de catteres, o dispositivos biomdicos (telemetra, minibombas, etc.).
d. Modelos de induccin de tumores, o tumores espontneos, que se prev que causen dolor o
angustia moderada, o interferencia moderada con el comportamiento normal.
348

Tcnicas Aspticas
e. Irradiacin o quimioterapia con una dosis subletal, o con una dosis que de otro modo sera
letal, pero con reconstitucin del sistema inmunitario. Cabra esperar que los efectos nocivos
fueran leves o moderados y efmeros (<5 das).
f. Cra de animales genticamente modificados que se espera den lugar a un fenotipo con
efectos moderados.
g. Produccin de animales genticamente modificados mediante procedimientos quirrgicos.
h. Uso de jaulas metablicas que impliquen una restriccin moderada de movimientos durante un
perodo prolongado (hasta 5 das).
i. Estudios con dietas modificadas que no cubren las necesidades nutricionales de todos los
animales y que se espera que causen una anomala clnica moderada en el perodo de estudio.
j. Retirada de la alimentacin durante 48 horas en ratas adultas.
k. Provocar reacciones de escape y evasin en las que el animal no pueda escapar o evitar el
estmulo, y que se espera que den lugar a una angustia moderada.
Procedimiento Severo
a. Ensayos de toxicidad en los que la muerte sea el punto final o se prevean muertes y se
provoquen situaciones fisiopatolgicas intensas. Por ejemplo, ensayo de toxicidad aguda con
una nica dosis (vanse las directrices de la OCDE sobre ensayos).
b. Ensayos de dispositivos en los que el fracaso pueda causar dolor o angustia severos o la
muerte del animal (e.g., dispositivos de reanimacin cardaca).
c. Ensayo de potencia de una vacuna, enfermedad progresiva que causa la muerte, asociada con
dolor, angustia o sufrimiento moderados duraderos.
d. Irradiacin o quimioterapia con una dosis letal sin reconstitucin del sistema inmunitario, o
reconstitucin con la produccin de enfermedad de injerto contra husped.
e. Modelos con induccin de tumores, o con tumores espontneos, que se espera causen
enfermedad mortal progresiva asociada con dolor, angustia o sufrimiento moderados
duraderos. Por ejemplo, tumores que causan caquexia, tumores seos invasivos, tumores que
dan lugar a diseminacin metaststica, y tumores que se permite que se ulceren.
f. Intervenciones en animales bajo anestesia general que se espera den lugar a dolor, sufrimiento
o angustia postoperatorios severos, o moderados pero persistentes, o a una alteracin severa y
persistente de su condicin general. Produccin de fracturas inestables, toracotoma sin
analgesia adecuada, o traumatismo para producir el fallo multiorgnico.
g. Trasplante de rgano donde es probable que el rechazo del rgano origine angustia o la
alteracin severa del estado general del animal (e.g., xenotransplante).
h. Reproduccin de animales con trastornos genticos que se espera experimenten una
alteracin severa y persistente de su estado general, por ejemplo la enfermedad de Huntington,
distrofia muscular, modelos de neuritis crnicas recurrentes.
j. Uso de jaulas metablicas (restriccin severa de movimientos durante un perodo prolongado).
k. Choque elctrico ineludible (e.g., para producir invalidez inducida).
l. Aislamiento completo durante perodos prolongados de especies gregarias (perros y primates).
m. Inmovilizacin de ratas para inducirles lceras gstricas o fallo cardiaco por estrs.
n. Natacin forzada o pruebas de ejercicio con el agotamiento como punto final.
349

Como ejemplo de sntomas de severidad, en ratn:

Tabla sintomatologa clnica
Leve
350
Moderado
Severo
Reduccin de la ganancia
de peso corporal
Prdida de peso corporal de

hasta un 20%
Prdida de peso corporal mayor

de un 25%
Pilo ereccin parcial
Marcada pilo ereccin
Marcada pilo ereccin con otra

sintomatologa de deshidratacin
Deprimido pero todava

responde. El animal
muestra un modelo normal
de comportamiento si se le
estimula. Interacciona con
otros animales del entorno.
Deprimido. El animal
muestra un modelo de
comportamiento deprimido
an si se le provoca. Poca
interaccin con otros
animales del entorno.
No responde al estmulo ni la
provocacin.
Encorvado de manera
temporal, especialmente
despus de manipularle.
Encorvado de manera
intermitente
Encorvado permanentemente
(congelado)
Vocalizacin transitoria
Vocalizacin intermitente
cuando se le estimula
Animal incomodo, vocalizaciones

sin estimulo
Mucosas normales
Palidez de ojos, nariz,

orejas y almohadillas
plantares
Palidez y el animal se siente fro

cuando se le coge
Descarga oculonasal
transitoria
Descarga oculonasal
persistente
Descarga oculonasal persistente

y copiosa
Respiracin normal
Respiracin alterada
Respiracin trabajosa
Tremores transitorios
Tremores intermitentes
Tremores persistentes
Sin convulsiones
Convulsiones intermitentes
Convulsiones persistentes
Sin postracin
Postracin transitoria
Postracin prolongada (de mas

de una hora)
Sin automutilacin
Sin automutilacin
Automutilacin
TCNICAS ASPTICAS

Tcnicas Aspticas
352

Tcnicas Aspticas
Asepsia significa sin microorganismos Ausencia de microorganismos que producen enfermedad.

Tcnica septica: procedimiento realizado para disminuir la presencia de microorganismos.
Uno de los problemas que nos podemos encontrar tras una ciruga son infecciones causadas por virus,
bacterias u hongos. Estas infecciones provocan problemas en la recuperacin tras la ciruga y por lo
tanto en el xito de la misma. Estos problemas pueden ser, desde un retraso en la cicatrizacin de la
herida hasta la muerte del animal.
Las tcnicas aspticas no deben ser solo utilizadas durante la ciruga sino que deben usarse en
cualquier manipulacin que realicemos a un animal que pueda causarle una infeccin posterior tales
como administraciones, obtencin de sangre, etc. Todos nos sorprenderamos si vemos a una
enfermera sacando sangre a un paciente con una aguja no estril o utilizando una aguja no estril en
una administracin intramuscular. Por qu si esto nos extraa vamos a hacer lo mismo con los
animales con los que trabajamos en experimentacin?
La realizacin rutinaria de algunos procedimientos puede ahorrarnos muchas preocupaciones y sobre
todo permite aplicar las 3 Rs (refinamiento de la tcnica y reduccin en el nmero de los animales).
Tcnica Asptica en Ciruga

El procedimie para disminuir la carga microbiolgica consiste en: limpieza, desinfeccin y esterilizacin.
Limpieza
Proceso de eliminacin de restos orgnicos e inorgnicos. La suciedad interfiere en cualquier proceso
que realicemos de desinfeccin o esterilizacin ya que el producto que utilicemos no podr acceder al
interior de las zonas donde el material orgnico e inorgnico este acumulado. Para desprender la
suciedad utilizaremos una sustancia detergente junto con accin mecnica y secado.
Desinfeccin
Proceso de eliminacin total de los microorganismos de una superficie exceptuando a las esporas. La
eficacia de la contaminacin depender de varios factores.
Del tipo de contaminacin del material.
De la limpieza previa.
De la concentracin del desinfectante.
Del tiempo de contacto con el material de la configuracin del objeto.
Esterilizacin
Proceso de eliminacin total de microorganismos, incluidas sus formas de resistencia (esporas).
353

Tcnicas Aspticas
Instalaciones
Dentro de una instalacin donde estn ubicados animales de experimentacin y donde se realicen
cirugas deben existir una serie de areas bien definidas que se exponen a continuacin:
rea para la preparacin de los animales.
rea para la limpieza y el cepillado de manos.
Quirfano(s).
rea de recuperacin adecuada para el cuidado intensivo y postoperatorio de los animales.
rea para el almacenaje de instrumentos y de soluciones, lavado y esterilizacin de los
instrumentos.
Sin embargo, en muchos animalarios no se cuenta con este tipo de instalaciones sobre todo en el caso
de roedores donde normalmente estas reas no estn claramente definidas. Si estas cirugas son
realizadas de forma habitual en los laboratorios se debera dejar una zona ordenada, bien iluminada y
fcil de limpiar para realizar este tipo de cirugas. Nunca deberamos realizar una ciruga en lugares
destinados al alojamiento de animales.
Preparacin para la Ciruga

En primer lugar se debe preparar al paciente; esta parte debera realizarse en un lugar diferente a
donde se va a realizar la ciruga. Durante esta primera parte se realiza el rasurado del animal
eliminando todo el pelo de la zona donde vamos a trabajar. Tendremos que tener en cuenta un margen
de seguridad eliminando el pelo no solo de la zona donde se produce la incisin sino toda la zona
alrededor.
A continuacin, se debe realizar una limpieza y desinfeccin de la piel para reducir al mnimo la
cantidad de microorganismos. Si el animal presenta una herida sucia entonces es recomendable
realizar una limpieza previa con suero. Posteriormente se aplicar un desinfectante, generalmente
povidona yodada, que permitir comprobar la zona desinfectada.
Todo el instrumental que vaya a ser utilizado en la ciruga debe ser previamente esterilizado y colocado
sobre paos estriles para impedir la contaminacin del material.
Lavado de manos: El objetivo fundamental del lavado de manos del personal
es reducir la flora
residente y la flora contaminante de manos y antebrazos. Su duracin debe ser adecuada (3 a 5

minutos) y realizarse con agua y jabn anti-microbiano.
La funcin de los paos quirrgicos y las batas es la creacin de un campo estril alrededor del campo
quirrgico, para evitar en lo posible la contaminacin de la herida y por tanto la disminucin del riesgo
de infeccin quirrgica. Los paos quirrgicos deben ser esterilizados lo que permitir trabajar de
manera segura y cmoda pudiendo dejar el material quirrgico sobre estos paos.
354

Tcnicas Aspticas
Tras la ciruga, todo el material y la sala o zona del laboratorio destinado a este fin, deben ser limpiados
y desinfectados para evitar acmulo de suciedad en la zona quirrgica.
355

Criterios de Punto Final Humanitario
Bibliografa
1.
ANUAL SOBRE EL CUIDADO Y USO DE LOS ANIMALES DE EXPERIMENTACIN. Canadian Council on

Animal Care.
2.
Knecht, C.D. et al. Fundamental Techniques in Veterinary Surgery, 3rd Ed. W.B. Saunders, Philadelphia, PA,
1987.
3.
356
Guide for the Care and Use of Laboratory Animal. National Reasearch Council 1996.
CRITERIOS DE PUNTO
FINAL HUMANITARIO

358

Actualmente, todas las leyes que regulan el uso de animales de experimentacin incorporan el
concepto de las 3Rs: refinamiento, reduccin y reemplazo. Basndose en estos conceptos, las leyes
establecen que los procedimientos se deben realizar de forma que se eviten o minimicen el dolor,
distress o sufrimiento causados a los animales.
Se puede definir el punto final humanitario como el indicador ms temprano de sufrimiento animal que
justifica el sacrificio del mismo por motivos humanitarios y su objetivo es minimizar el coste en
bienestar de los experimentos con animales. Un protocolo de punto final debe estar adaptado a un
proyecto, experimento e incluso a un grupo experimental determinado pero hay que disearlo teniendo
en cuenta que va a ser aplicado a un animal en particular. Los criterios de punto final deben indicarnos
cuando un animal debe dejar de ser un sujeto del experimento, cuando un tratamiento paliativo debe
ser aplicado o cuando un animal debe ser eutanasiado por motivos humanitarios.
Es importante diferenciar entre el punto final programado para el experimento, es decir, el momento en
que se da por concluido el experimento y no se va a realizar ninguna otra observacin o toma de
muestras del animal, y el punto final humanitario, que determina el sacrificio del animal por motivos
humanitarios independientemente de que se hayan alcanzado o no, los objetivos del experimento.
En el pasado, no era infrecuente utilizar la muerte del animal como punto final programado. Sin
embargo, la muerte rara vez est directamente relacionada con la variable experimental objeto de
estudio sino que suele deberse a efectos indirectos tales como la deshidratacin y la inanicin al ser
incapaz el animal de beber o comer; la deshidratacin da lugar a un aumento de la viscosidad de la
sangre que puede provocar un fallo cardaco, mientras que la ingesta de una cantidad insuficiente de
comida puede originar la disminucin de la temperatura corporal y la muerte.
Este proceso puede durar varios das y la pregunta que debemos plantearnos es que informacin
obtenemos desde que el animal es diagnosticado como moribundo y el momento de su muerte. Salvo
que est justificado cientficamente, es necesario establecer un punto final sustituto para evitar el
sufrimiento innecesario del animal. An cuando el aspecto tico de la aplicacin del punto final
humanitario es sin duda el objetivo principal, no hay que olvidar que el fin de todo experimento es la
obtencin de datos, cuya validez cientfica si proceden de un animal psicolgica y fisiolgicamente
anormal es, cuando menos, cuestionable.
359

Diseo de un Protocolo de Punto Final Humanitario

Valoracin del Objetivo del Experimento
Un protocolo de punto final humanitario adecuado debe eliminar el sufrimiento innecesario del animal
teniendo siempre en cuenta el objetivo del experimento. Esto evitar que el experimento tenga que
repetirse por la invalidez de los datos y por tanto, d como resultado el uso de un mayor nmero de
animales.
Por ello, se debe valorar cual es el fin del experimento y predecir que patologas o efectos adversos
pueden aparecer a causa del procedimiento. En base a esta informacin se determinarn los
indicadores fisiolgicos y/o de comportamiento ms efectivos para el diseo de un punto final
humanitario adecuado.
Indicadores de Dolor, Distrs y Enfermedad

De entre todos los indicadores de dolor y distrs que pueden ser observados en una especie dada, el
protocolo de punto final humanitario debe recoger aquellos que demuestren ser los ms efectivos a la
hora de evaluar el grado de sufrimiento del animal durante el procedimiento en cuestin.
Si se desconocen a priori dichos indicadores, el desarrollo de estudios piloto con un pequeo nmero
de animales ofrece la oportunidad de familiarizarse con los signos y sntomas esperados.
Los signos clnicos generales utilizados habitualmente para evaluar la condicin de un animal son:
Peso corporal.
Apariencia fsica.
Signos clnicos medibles.
Comportamiento no provocado.
Respuesta a estmulos externos o comportamiento provocado.
Algunos de los signos clnicos que, dependiendo de la severidad y duracin, pueden constituir un
criterio de punto final, son:
Rpida prdida de peso.
Diarrea persistente.
Dermatitis progresiva.
Pelo erizado, postura arqueada, letargia.
360

Respiracin laboriosa, descarga nasal.

Ictericia y/o anemia.
Signos neurolgicos.
Hemorragia por cualquier orificio.
Automutilacin.
Cualquier condicin que interfiera con comer y beber (e.g., dificultad en el movimiento).
Excesiva o prolongada hipertermia o hipotermia.
El protocolo de punto final debe contemplar tanto parmetros generales como signos clnicos que se
prevea puedan estar afectados por el tratamiento en cuestin.
Determinacin del Criterio de Punto Final

Es innegable que la valoracin del estado de un animal tiene un componente subjetivo que puede
dificultar la deteccin del momento adecuado para la aplicacin del punto final humanitario. Una
herramienta til para estandarizar la cuantificacin de la severidad de los signos de dolor o
sufrimiento observados en un animal es la denominada score sheet o lista de signos clnicos
cuantificados en funcin del grado de desviacin respecto de un valor considerado fisiolgico o normal.
Es decir, una vez seleccionados los parmetros adecuados para valorar el estado del animal para un
experimento dado, se asignar a cada uno de ellos una gradacin numrica desde un valor mnimo,
indicativo de que el parmetro en cuestin no est afectado, a un valor mximo cuando se aprecie un
cambio severo respecto del valor considerado normal para ese indicador. El incremento en la suma de
los valores otorgados a cada parmetro, se interpretar como una indicacin del aumento del deterioro
de la condicin fsica del animal.
Por ejemplo, la tabla siguiente detalla un protocolo de punto final para un experimento de generacin
de enfisema pulmonar en ratas. A los parmetros generales de evaluacin de la condicin del animal
se ha incluido como signo clnico especfico del experimento la alteracin del patrn y ritmo respiratorio.
361

Parmetro
Apariencia
Comportamiento natural
Hidratacin
Signos clnicos
Comportamiento
provocado
ID animal
Cuantificacin
Normal
Falta general de acicalamiento
Piloereccin, descargas nasal y/o ocular
Piloereccin, postura arqueada
Ojos entrecerrados
Normal
Cambios menores
Poco activo y aislado pero alerta
Letrgico o inmvil, no alerta
Normal
Test de piel anormal
Patrn y ritmo respiratorio normal
Cambios ligeros, ritmo ligeramente aumentado
Ritmo aumentado con respiracin abdominal
Ritmo disminuido con respiracin abdominal
Marcada respiracin abdominal y cianosis
Normal
Ligera depresin o respuesta exagerada
Cambios moderados en comportamiento esperado
Muy dbil o precomatoso
Da:
3
Puntuacin total
0 - 19
En funcin de la evolucin de los animales observada durante un experimento piloto con pocos
animales, se determino el siguiente protocolo de actuacin segn la puntuacin dada a cada animal:
0-4
Normal.
5-9
Monitorizacin continua, considerar analgesia.
10 -14
Sufrimiento, aplicar tratamiento paliativo, considerar eutanasia.
14
Aplicar eutanasia.
Hay que tener en cuenta que una vez iniciado el experimento, puede ser necesario modificar el
protocolo de punto final humanitario para introducir nuevos parmetros indicativos del deterioro de la
condicin fsica del animal que no haban sido recogidos inicialmente o eliminar otros que no
demuestren ser tiles en nuestro experimento.
Entrenamiento del Personal y Frecuencia de Observaciones

Cualquier protocolo de punto final ser intil si el personal encargado de la supervisin de los animales
no tiene el entrenamiento adecuado en el reconocimiento de los parmetros incluidos en el mismo o si
la frecuencia de las observaciones no es la apropiada.
Por tanto, es esencial conocer los valores fisiolgicos considerados basales, as como estar
familiarizado con el comportamiento normal de la especie en cuestin: animales tales como roedores,
conejos o primates no humanos no muestran significativos cambios en el comportamiento an cuando
padezcan severo dolor o distrs. En adicin a esto, las diferencias entre estirpes dentro de la misma
362

especie deben ser tenidas en cuenta previamente al diseo del protocolo de punto final humanitario. Se
establecer un rgimen adecuado de observaciones para la valoracin de los indicadores escogidos
que ser adaptado en funcin de la evolucin de los sntomas y signos presentes.
363

Guas de Aplicacin del Punto Final Humanitario

La tabla a continuacin recoge las observaciones clnicas ms generales en estudios de toxicologa y
oncologa.
Parmetro
Observaciones
Apariencia general
Deshidratacin, disminucin peso, postura anormal, hipotermia, inflamacin, prolapso etc.
Pelo y piel
Decoloracin, manchas de orina, rojez, cianosis, ictericia, abscesos, ulceracin, alopecia,

falta de acicalamiento.
Ojos
Exoftalmia, microftalmia, ptosis, descarga ocular, opacidad.
Nariz, boca, cabeza
Descarga nasal, inclinacin de cabeza, salivacin, malocclusion
Respiracin
Disnea, taquipnea, estornudos
Orina
Sangre en orina, decoloracin, poliuria, anuria
Heces
Decoloracin, sangre en heces, diarrea
Locomocin
Hiperactividad, letargia, convulsiones, circling, ataxia
Estas observaciones generales, junto con aquellos signos clnicos ms especficos del experimento en
cuestin, sern la base para establecer un protocolo de punto final humanitario apropiado.
Cncer
Los criterios especficos de punto final humanitario para experimentos de generacin de tumores son:
Que el tumor interfiera con funciones normales (movimiento, ingestin de comida, etc.), o
cause dolor o distrs debido a su localizacin.
Una prdida de peso corporal del 20%, teniendo en cuenta el tamao del tumor.
La ulceracin o infeccin del tumor, independientemente del tamao del mismo.
Invasin de tejidos adyacentes al tumor solido.
Tamao del tumor:
5% del peso normal del animal para pases rutinarios de tumores.
10% del peso normal del animal para animales en estudios de eficacia (el 10% de peso
tpicamente equivale a un dimetro de 17 mm en ratones de 25 g o 35 mm en ratas de 250 g).
364

Toxicologa
Toxicidad Aguda
Recomendaciones para la elaboracin de un protocolo de punto final:
Recopilar toda la informacin posible (estudios in vitro, estudios previos in vivo, relacin
estructura-actividad de la substancia a testar, pH de la substancia, etc.).
Realizar un ensayo piloto siempre que sea posible.
Llevar a cabo observaciones frecuentes de la condicin del animal en las primeras horas tras
la administracin de la substancia.
Los signos clnicos predictivos de muerte en toxicidad aguda ms frecuentes y que por tanto
determinan el momento de aplicacin de la eutanasia humanitaria son:
Convulsiones (tnicas, clnicas, inespecficas, etc.).
Posicionamiento lateral.
Temblores.
Jadeos, respiracin laboriosa.
Vocalizacin.
Toxicidad Crnica
En estudios de toxicidad crnica hay que tener en cuenta que, aparte de los efectos adversos
relacionados con el tratamiento en cuestin, numerosas patologas pueden desarrollarse de manera
espontnea. Por lo tanto, se deber estar familiarizado con las patologas propias de la especie/estirpe
en la cual se lleve a cabo el estudio. Como regla general, si se detecta dolor o distress severo o
continuado, o la condicin general del animal puede interferir con el objetivo del experimento, la
eutanasia humanitaria debe ser considerada. La prdida de peso es un buen indicativo del deterioro de
la condicin de un animal por lo que este parmetro debe medirse al menos semanalmente y
compararse, no solo con la medida de la semana anterior, sino con el valor mximo obtenido para ese
animal con el fin de detectar un deterioro crnico.
Enfermedades Infecciosas
Un descenso de temperatura por debajo de un punto crtico (generalmente por debajo de los 36 C en
ratas y ratones) es un criterio de punto final til en este tipo de experimentos.
365

Gua para Determinar el Grado de Severidad

Como hemos visto, la evaluacin cuantitativa de la condicin de un animal puede ser una tarea
complicada ya que pocas veces un nico indicador nos aporta la informacin suficiente o es
determinante por s solo. Sin embargo, determinar la severidad de los sntomas puede ser esencial
para evitar en primer lugar el sufrimiento innecesario del animal y en segundo lugar la prdida de
muestras que nos aporten los datos experimentales en los que basar las conclusiones del estudio. En
la tabla a continuacin se detallan los signos ms comunes indicativos de dolor o distrs en rata y
ratn. El grado de alteracin en cada uno de los signos se valora como ligero (o leve), moderado, o
substancial, de manera que es fcil determinar la severidad con que el parmetro en cuestin se ve
afectado.
Gua de lmites de severidad en Rata y Ratn
Parmetro
Peso corporal
Poco afectado
Peso corporal
Postura
Apariencia
Sustancialmente
afectado
Prdida del 10-20%
Prdida > 20%
Postura encorvada
intermitente
Postura encorvada
persistente
Pelaje marcadamente
erecto + postura
arqueada +
comportamiento
indiferente
Laboriosa
persistentemente
Persistente, pelaje de la
barbilla
permanentemente
mojado
Piloereccin
Parcial
Pelaje marcadamente
erecto
Respiracin
Normal
Patrn anormal
intermitente
Salivacin
Transitoria
Intermitente con el
pelaje de la barbilla
mojado
Temblores
Transitorios
Intermitentes
Continuos
Convulsiones
No
Intermitentes (pero
duracin <10 min)
Postracin
No
Transitoria <1h
Comportamiento
no provocado
Socializacin
Interaccin con
compaeros
Escasa interaccin
Continuos (eutanasiar si
duracin >10 min)
Persistente >1h
(eutanasiar si duracin
>3h)
No interacciona con
compaeros de jaula
Respuesta a
estmulos
Comportamiento
provocado
Cambios mnimos
Respuesta limitada a
la estimulacin (e.g.
manejo)
Signos clnicos
366
Prdida de hasta el
10%
Postura arqueada
transitoria
especialmente
despus del
tratamiento
Moderadamente
afectado
No respuesta al estmulo
o provocacin

Mtodos de Eutanasia
Bibliografa
1.
Guidance document on the recognition, assessment and use of clinical signs as humane endpoints for
experimental animals used in safety evaluation. OECD, ENV/JM/MONO(2000)7
2.
Canadian Council on Animal Care (1998), Guidelines on: choosing an appropriate endpoint in experiments
using animals for research, teaching and testing. Ottawa, Canada.
3.
Hendriksen and Morton, ed. (1998), Humane Endpoints in Animal Experiments for Biomedical Research.
Proceedings of the International Conference, 22-25 November 1998, Zeist, The Netherlands. Laboratory
Animals Ltd, by Royal Society of Medicine Press Limited, London, England.
4.
Institute for Laboratory Animal Research Journal (2000), Humane Endpoints for Animals Used in Biomedical
Research and Testing. 41: No. 2
5.
Morton and Griffiths (1985), Veterinary Record 116:431-43.
6.
Montgomery (1990), Cancer Bulletin 42:230-237.
7.
Toth (1997), Contemporary Topics 36:44-48.
8.
Stokes (1999) Humane Endpoints in Animal Experiments for Laboratory Animals Used in Toxicity Testing.
Proceedings of the 3rd World Congress on Alternatives and Animal use in the Life Sciences, 31 August - 2
September 1999, Bologana, Italy.
9.
United Kingdom Co-ordinating Committee on Cancer Research (1997), UKCCCR Guidelines for the Welfare
of Animals in Experimental Neoplasia, 2nd ed. London, England.
10. Bullard et al. (1981), J. Neuropath. Exp. Neurol. 40:410-427.

11. Tomayko and Reynolds (1989), Cancer Chemother. Pharmacal. 24:148-154.
12. Sung et al. (1993), Cancer Research 53: 2092-2099.
13. Welch et al. (1994), Oncogene 9:255-262.
14. Hamm (1995), Contemporary Topics 34:69-71.
367
MTODOS DE
EUTANASIA

Mtodos de Eutanasia
370

Mtodos de Eutanasia
Se consideran mtodos aceptables de eutanasia aquellos que causan la muerte humanitaria del animal
cuando se utilizan como mtodo nico (no es preciso sedacin o inconsciencia previa).
Los mtodos aceptables condicionados son aquellos que por la naturaleza de la tcnica (mayor
potencial de causar distrs o errores al ejecutarla) no se admiten como mtodo nico siendo necesaria
la sedacin / anestesia previa del animal.
Algunas definiciones tiles:
Eutanasia
Mtodo de provocar la muerte con el mnimo dolor y/o distress.
Feto
Embrin de mamfero desde el estado de desarrollo en que sus principales caractersticas adultas son
ya apreciables hasta el momento del nacimiento.
Neonato
Se consideran neonatos las ratas y ratones desde su nacimiento hasta el dcimo da de vida.
Adulto
Se consideran adultos las ratas y ratones a partir del da 10 de vida.
371

Mtodos de Eutanasia
Eutanasia de Roedores y Conejos Adultos

Mtodos Fsicos
Estos mtodos causan la prdida de consciencia inmediata por trauma fsico al cerebro. Aunque
resulten desagradables para observadores e incluso para los tcnicos que los llevan a cabo, son
rpidos y posiblemente los menos estresantes para el animal. Es imprescindible un correcto
entrenamiento del personal que los lleve a cabo.
Dislocacin Cervical
Aceptado para ratones y ratas de pequeo tamao (hasta 200 g). Para ratas de mayor tamao y
conejos de hasta 1 kg, es necesaria la sedacin o anestesia previa a la aplicacin de este mtodo. En
cualquier caso, siempre que sea posible, se aconseja la sedacin o anestesia previa con isoflurano. La
dislocacin cervical debe provocar la disrupcin de la columna vertebral y el encfalo a nivel de la
primera vertebra.
Decapitacin
Aceptado para ratones, ratas, y conejos de pequeo tamao. La decapitacin implica la diseccin del
cuello del animal, cerca de la cabeza, por medio de un instrumento cortante (guillotina). Debido al
manejo potencialmente estresante que requiere esta tcnica, es imprescindible la sedacin o anestesia
previa del animal.
Mtodos Qumicos
Los mtodos qumicos provocan la muerte del animal por depresin del SNC y/o depresin
cardiorespiratoria.
Anestsicos inhalados
Aceptado para ratones y ratas. El anestsico utilizado con mayor frecuencia es el isoflurano. La
eutanasia con isoflurano se llevar a cabo en la cmara de anestesia manteniendo al animal a la
concentracin de anestsico utilizada para la induccin: 5% Isoflurano 0.8-1 L/min de O2 hasta la
confirmacin de su muerte.
Dixido de carbono CO2

Aceptado para ratones y ratas. La eutanasia con CO2 es uno de los mtodos de eleccin para
pequeos animales. Sin embargo, existen an discrepancias sobre el protocolo a seguir para minimizar
los efectos adversos previos a la prdida de consciencia como son el dolor producido en las mucosas
de las vas respiratorias al utilizarse a concentraciones elevadas ( 50%) y la disnea que se produce a
372

Mtodos de Eutanasia
bajas concentraciones (15-20%). Siguiendo las recomendaciones expuestas en el Newcastle

consensus meeting on carbone dioxide euthanasia of laboratory animals (2006), el protocolo
aconsejado para la eutanasia con CO2 de ratas y ratones ser el siguiente:
Realizar la eutanasia, siempre que se pueda, en la propia jaula del animal. Si esto no fuese
posible, el animal a sacrificar se alojar en una jaula limpia con viruta.
Nunca se agruparn machos provenientes de jaulas distintas.
En caso de agrupar hembras, se debe respetar el nmero mximo de animales por jaula.
El flujo ptimo de llenado de la cmara es del 20% del volumen de la jaula por minuto. Una
vez comprobada la inconsciencia del animal puede aumentarse el flujo de gas. Todo el
proceso puede llevar 4-5 minutos.
Comprobar la muerte del animal.
Inyectables
Aceptado para ratones, ratas, y conejos. Los principales agentes anestsicos inyectables utilizados
como mtodo eutansico son:
Anestsicos neurolpticos + tranquilizantes

(ketamina + xilacina, ketamina + medetomidina, etc.). Utilizados en una dosis igual a 3 veces la dosis
teraputica y administrados por va intraperitoneal o intravenosa.
Barbitricos
Pentobarbital sdico: a una dosis de 200 mg/Kg y una concentracin de 200 mg/mL para
administracin intravenosa. En el caso de administracin intraperitoneal se aconseja diluir a 100 mg/mL
para evitar un posible efecto irritante. La tabla siguiente resume los mtodos de eutanasia habituales
aceptados para ratas, ratones y conejos adultos.
373

Mtodos de Eutanasia
Especie
Mtodo aceptable
Comentarios
Pentobarbital sdico
Dosis: 200 mg/Kg Concentracin: 100-200 mg/ml Va: IP, IV
Ketamina : Xilacina
Dosis: 300:30 mg/Kg Volumen: 10 ml/Kg Va: IP, IV
Ketamina : Medetomidina
Decapitacin
Previa sedacin o anestesia. Material: Guillotina
Anestsicos inhalados
Isoflurano: 5% isoflurano 0.8-1 L/min O2
CO2
Flujo de llenado lento
Dislocacin cervical
Personal adecuadamente entrenado. Sedacin previa aconsejada
Decapitacin
Previa sedacin o anestesia. Material: Guillotina
Ketamina : Xilacina
Ketamina : Medetomidina
Pentobarbital sdico
Dosis: 200 mg/Kg Concentracin: 100-200 mg/mL Va: IP, IV
Conejos
Ratas
Ratones
Confirmacin de la Eutanasia
Es esencial, una vez aplicado el mtodo eutansico, confirmar la muerte del animal. Los aspectos ms
importantes en el reconocimiento de la muerte son:
Cese del latido cardiaco y la respiracin.
Ausencia de reflejos.
Descenso de la temperatura corporal por debajo de 25C.
Si existen dudas sobre la muerte del animal, proceder de nuevo a la eutanasia con el mismo u otro
mtodo eutansico.
374

Mtodos de Eutanasia
Eutanasia de Roedores Neonatos

Dixido de carbono (CO2)
La elevada resistencia de los neonatos a la hipoxia resulta en un tiempo muy prolongado de
inconsciencia cuando se utiliza la inhalacin de CO 2 como mtodo de eutanasia. Por ello, es necesario
utilizar un segundo mtodo fsico (decapitacin o dislocacin cervical) para asegurar la muerte del
animal.
La tabla siguiente recoge los tiempos de exposicin a CO2 estimados para asegurar la muerte de los
neonatos:
Ratones
Ratas
Tiempo exposicin CO2
Tiempo exposicin CO2
Sin pelo (0-6 das)
60 min
40 min
Con pelo, ojos cerrados (7-13 das)
20 min
20 min
Ojos abiertos - destete (14-20 das)
10 min
10 min
Destetados adultos ( 21 das)
5 min
5 min
Apariencia / edad
Otros Mtodos
Decapitacin.
Dislocacin cervical (no recomendado en ratones neonatos debido a la dificultad por su
pequeo tamao).
La inmersin en lquidos fijadores o en nitrgeno lquido deber realizarse nicamente previa
anestesia del animal (anestsicos inhalados o inyectables). La utilizacin de la hipotermia
como mtodo anestsico para neonatos de hasta 6 das deber estar debidamente justificada.
375

Mtodos de Eutanasia
Eutanasia de Fetos (Roedores)

Se distinguen 2 estadios fetales segn el desarrollo del tubo neural y por tanto, de la capacidad de
percibir estmulos dolorosos:
1. Fetos de hasta 15 das de gestacin: el desarrollo del sistema nervioso hasta aqu es mnimo y la
percepcin de estmulos dolorosos es improbable. La eutanasia de la madre o la extraccin del
tero producirn la muerte rpida de los fetos por falta de riego sanguneo.
2. Fetos de ms de 15 das: el desarrollo del sistema nervioso se considera suficiente para percibir
estmulos dolorosos.
La eutanasia de fetos en este estadio de desarrollo podr realizarse de la siguiente manera:
Fetos que van a ser utilizados en un procedimiento o estudio

Inyeccin intracraneal de anestsico (ketamina + xilacina, barbitricos, etc.).
Decapitacin.
Si se requiere la fijacin de tejidos, el feto debe ser anestesiado antes de su inmersin en el
lquido fijador. La anestesia puede hacerse por:
Inyeccin de agente anestsico.
Hipotermia: evitando que el feto est en contacto directo con la fuente de fro.
Fetos que NO van a ser utilizados en un procedimiento o estudio

El mtodo de eutanasia de eleccin para la madre ser:
Dixido de carbono (CO2).
Dislocacin cervical.
376

Mtodos de Eutanasia
Bibliografa
1.
Newcastle consensus meeting on carbon dioxide euthanasia of laboratory animals, 2006.
2.
Recommendations for euthanasia of experimental animals. Working party report. FELASA.
377

Manual Del Curso de Categoría B

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Animales de laboratorio.

Uso, manejo y cuidados

Charles River Laboratories. 2011.

Manual de Cuidados y Tcnicas en experimentacin Animal

Isabel Blanco Gutirrez

Beln Pintado Sanjuanbenito

Charles River Laboratories

Centro Nacional de Biotecnologa (CNB CSIC)

Ernesto de la Cueva Bueno

Jos Manuel Snchez Morgado

Charles River Laboratories

Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (CNIC)

Teresa de la Cueva Bueno

Jess Martnez Palacios

Charles River Laboratories

ngel Naranjo Pino

Centro de Investigaciones Energticas, Medioambientales y

Alfredo Serrano Montalvo

Charles River Laboratories. 2011.

Manual de Cuidados y Tcnicas en Experimentacin Animal

Manual de Cuidados y Tcnicas en experimentacin Animal

Legislacin Nacional ................................................................................................. 16

Legislacin Autonmica ............................................................................................ 18

ANATOMA Y FISIOLOGA DE LOS PRINCIPALES MODELOS ANIMALES ............... 23

Manual de Cuidados y Tcnicas en Experimentacin Animal

rganos de los Sentidos .................................................................................................... 61

Protocolo Estandarizado de Necropsia ..................................................................... 99

ALOJAMIENTO DE ANIMALES DE LABORATORIO ................................................ 113

Alojamiento: Legislacin y Recomendaciones ........................................................ 119

Alojamiento Adecuado ............................................................................................ 127

Enriquecimiento ambiental ...................................................................................... 157

Enriquecimiento e Interferencia con la Investigacin .............................................. 162

Bibliografa .............................................................................................................. 163

Manual de Cuidados y Tcnicas en experimentacin Animal

BIENESTAR ANIMAL ............................................................................................... 165

Indicadores de Bienestar Animal ............................................................................ 171

COMPORTAMIENTO DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO ................................ 175

Animales en Cautividad .......................................................................................... 185

Requerimientos Nutricionales ................................................................................. 198

Tipos de Dietas ....................................................................................................... 205

Papel de la Dieta en la Investigacin ...................................................................... 208

Privacin de Alimento ............................................................................................. 213

Bibliografa .............................................................................................................. 215

Manual de Cuidados y Tcnicas en Experimentacin Animal

GENTICA DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO ............................................... 217

Conceptos Generales de Gentica ......................................................................... 225

Gentica y Modelos Animales ................................................................................. 229

Gentica del ratn de laboratorio ............................................................................ 237

Manipulacin Gentica del Ratn ........................................................................... 250

Bibliografa .............................................................................................................. 261

Manual de Cuidados y Tcnicas en experimentacin Animal

Rata ................................................................................................................................. 279

Identificacin de Animales ...................................................................................... 280

TOMA DE MUESTRAS ............................................................................................ 283

Obtencin de Muestras de ADN ............................................................................. 296

Obtencin de Otras Muestras Biolgicas ................................................................ 298

Bibliografa .............................................................................................................. 300

Vas de Administracin ........................................................................................... 306

Bibliografa .............................................................................................................. 319

El Animal ................................................................................................................. 327

Anestesia ................................................................................................................ 329

Manual de Cuidados y Tcnicas en Experimentacin Animal

Analgesia ................................................................................................................ 331

REDUCCIN DEL DOLOR, MALESTAR Y SUFRIMIENTO ...................................... 335