OBSERVACION DE CROMOSOMAS MEIOTICOS

De la Cruz Roxana1; Luna Connie1; Nuevo Natalie1;Ruiz Roberto1; Briceo Ruben1

1_Facultad de Ciencia Biolgicas, Universidad Nacional Mayor de San Macos

Palabras clave: Meiosis, paquiteno, Acheta domesticus.

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INTRODUCCION:
La meiosis es un mecanismo celular
mediante el cual se reduce a la mitad el
nmero
cromosomas,
quedando
siempre un representante de cada
pareja de cromosomas homlogos. As,
durante la reproduccin sexual, la
fusin de dos gametos de dos
individuos para formar un nuevo
permite la formacin de un zigoto con
las dos componentes de cada de cada
pareja de cromosomas homlogos, es
decir, dar a un organismo diploide. En
la meiosis inicialmente hay una
replicacin
del
genoma,
y
posteriormente ocurren dos divisiones
celulares (denominadas meiosis I y
meiosis II), producindose 4 clulas
haploides. Cada una de estas clulas
haploides terminar convirtindose en
un gameto.
Durante la meiosis se da un proceso
denominado recombinacin. En las
clulas germinales, y en todas las
somticas, la informacin gentica
aportada por la madre y por el padre se
encuentra en cromosomas diferentes,
ambos progenitores aportan una copia
para cada cromosoma. Durante la
recombinacin se intercambian parte
de las cromtidas entre cada pareja de
cromosomas homlogos obteniendo
cromosomas con informacin nica que
da lugar a la variabilidad gentica.
Todo esto ocurre en la Profase I es por
ello la importancia de su estudio.
La observacin de los cromosomas
meiticos se realiza para el estudio de
su morfologa y los cambios que sufren

estos durante este mecanismo. Se

extrajeron las gnadas de Acheta
domesticus macho para la obtencin de
espermatocitos en desarrollo que nos
permiten observar las fases de la
meiosis. Estos fueron tratados con en
el laboratorio mediante un protocolo.

OBJETIVOS:

Conocer
el
protocolo
de
obtencin de lminas meiticas
para el estudio de cromosomas
paquitnicos.
Observar y caracterizar las
principales fases de la meiosis
en clulas animales.
Evaluar el uso de las gnadas
de grillo como muestra para la
obtencin de lminas meiticas.

MATERIALES:

Para realizar el tratamiento se

utilizaron
los
siguientes
materiales:
Agua destilada
Laminas portaobjeto
Laminillas portaobjeto
Papel toalla
Placas Petri
Pipetas Pasteur
Gnadas de Acheta domesticus
Carnoy
HCl 1N
Targa
Orceina actica

METODOLOGIA:
Para realizar el procedimiento de
obtencin
y
diferenciacin
de
cromosomas, se utiliz como muestra
biolgica las gnadas de Acheta
domesticus macho, las cuales fueron
extradas mediante una diseccin, luego al
ser extradas se le suministro gotas de
suero fisiolgico, para evitar que la
muestra se deteriore.
A continuacin las gnadas fueron
sumergidas en solucin fijadora (CARNOY)
la cual deshidrata el tejido el impide el
movimiento de los cromosomas. Se
mantuvo en esta solucin un tiempo
aproximado de 15 minutos.
Luego se procedi a lavar, sumergiendo
las gnadas en agua destilada un tiempo
de 5 minutos.
Siguiendo el procedimiento, se
sumergieron las gnadas en solucin
hidrolizaste (HCl 1N) la cual disuelve
pectinas de la lmina media y crea poros
en la pared celular, para permitir que las
dems soluciones puedan penetrar en la
clulas. Se mantuvo en esta solucin un
tiempo aproximado de 21 minutos.

membrana gonadal y sola consiste de

tbulos liberados, esta fue sumergida en
solucin ablandadora la cual facilita la
disociacin de masas celulares y fragiliza la
carioteca, para poder apreciar a los
cromosomas de mejor manera. Se
mantuvo en esta solucin un tiempo
aproximado de 4 minutos.
Luego se volvi a enjuagar remojando los
tbulos en agua destilada por un tiempo de
5 minutos.
Para finalizar se pasaron los tbulos a la
lmina portaobjeto, para poder agregarles
solucin colorante (Orcena 2%) la cual
teir
los
cromosomas
y
otros
peculiaridades como crommeros o Knobs.
Los tbulos estuvieron remojados en esta
solucin un tiempo de 20 minutos.
Por ltimo, pasado el tiempo
determinado, se procedi a colocar la
laminilla y a realizar el squash, para
observar al microscopio.

RESULTADOS:
PROFASE I:
Paquiteno:

Pasado este tiempo se procedi a romper

la membrana que sostiene dentro los
tbulos de las gnadas, para poder
liberarlos y que estos puedan estar en
contacto directo con la soluciones.
Se volvi a enjuagar la muestra, la cual
an conservaba la membrana gonadal con
los tbulos parcialmente liberados,
remojndola en agua destilada por un
tiempo de 5 minutos.
Pasado este tiempo se procedi a separar
totalmente los tbulos, agrupndolos en
pares si fuera posible, para que as las
siguientes sustancias difundan las clulas
de los tbulos.
A continuacin se procedi a sumergir a
la muestra, la cual ya no conserva la

Lamina: PA
Foto: DSC_2327
Aumento: 1000X
Coordenadas: 132.4/30.8

Zoom:2X

Lamina: PA
Foto: DSC_2334
Aumento: 1000X
Coordenadas: 131.9/30.6
Se observan los bivalentes, cromosomas
homlogos apareados, los crommeros,
knobs y el cromosoma X (ms pigmentado
y de mayor tamao).
METAFASE I:

Aumento: 1000X
Se observan las ttradas alineadas en el
ecuador de la clula.

PROFASE II
En esta fase se observa la presencia de
cromosomas compactos (reordenados) en
nmero haploide y por el rompimiento de
la membrana nuclear, mientras aparecen
nuevamente las fibras del huso.
Aumento: 1000X
Zoom: 2X

METAFASE II:
Se observ una forma particular de la
metafase pero en general se debe observar
los cromosomas en el plano ecuatorial con
las cromtides parcialmente separadas.

difcil obtencin con un solo ensayo debido

a la corta duracin que presenta esta fase.
Adems de su difcil separacin de los
cromosomas sin daar la muestra.
Solo se obtuvo una clula en fase de
Paquiteno que se encontraba con los
cromosomas bien separados (Foto:
DSC_2327) por lo que no se pudo elaborar
el cariotipo.
Tampoco pudimos encontrar la fase de
Diacinesis debido a una mala separacin de
los tbulos seminferos lo que nos impidi
una buena observacin, por la acumulacin
y yuxtaposicin de las clulas, adems a la
baja tincin por el uso de orcena muy
diluida.

Aumento: 1000X
Zoom: 2X

CONCLUSIONES

El protocolo realizado fue eficaz para

la obtencin de lminas meiticas y las
observaciones sus fases.

La especie utilizada permiti y puede

permitir la observacin de las
diferentes fases de la Meiosis,
desarrollando
el
protocolo
adecuamente.

Se pudo caracterizar la mayora de

fases meiticas.

RECOMENDACIONES:
DISCUSIN DE RESULTADOS:
El protocolo realizado es efectivo para la
preparacin de lminas meiticas, ya que
nos permiti observar varias fases de la
meiosis. Sin embargo es necesario llevarlo
a cabo con mucho cuidado debido a la
fragilidad de las clulas animales y al
pequeo tamao de los tbulos
seminferos de la especie utilizada.
La cantidad de cromosomas en la fase de
paquiteno fueron abundantes pero de

Tener cuidado al supervisar el tiempo

empleado para cada reactivo.
Se recomienda tambin separar la
membrana gonadal y los tbulos
seminferos con mucho cuidado.
Es recomendable realizar el protocolo
varias veces para obtener suficientes
clulas en fase de Paquiteno y
Diacinesis.
Por ltimo se recomienda realizar un
squash uniforme y con fuerza sobre la

muestra, para evitar espacios de aire

entre la muestra.

BIBLIOGRAFIA:

Prez G. , PRCTICAS PRINCIPIOS

DE GENTICA Y MEJORA VEGETAL,
Departamento Produccin Agraria
Universidad Pblica de Navarra, 3
I.A. 08/09.
http://www.biologia.edu.ar/cel_eu
ca/meiosis.htm
http://www.oocities.org/geneticaf
ca/MEIOSIS.pdf
ACTIVIDAD PRACTICA No. 9
BIOLOGIA CELULAR MITOSIS Y
MEIOSIS. CARIOTIPO, Universidad
Centroccidental
Lisandro
Alvarado Decanato de Ciencias de
la Salud, Noviembre 2009.
Megas M. , Molist P. , Pombal M. ,
ATLAS de HISTOLOGA VEGETAL y
ANIMAL,
Departamento
de
Biologa Funcional y Ciencias de la
Salud. Facultad de Biologa.
Universidad de Vigo. (Versin:
Marzo 2015)