ANTECEDENTES HISTORICOS

Hace 500 aos, clebre holands Antoine van Leewenhoek describi la

existencia de la unidad funcional, anatmica y de origen de los seres
vivos, i.e. la clula. Hasta finales del siglo XIX, era universalmente
aceptado que los procesos de la vida eran el resultado directo de una
fuerza vital y que estos procesos ocurran exclusivamente en las
clulas. En el verano de 1896, esta doctrina llamada vitalismo, parte de
las ideas de la generacin espontanea, fue desacreditada por el
experimento que dio origen al nacimiento de a Bioqumica. M Hahn, un
cientfico alemn, trataba de separar protenas de la levadura en un
mortero con arena muy fina y tierra de diatomeas, que no es sino
las frstula o

envoltura

de polisacridos de

las

diatomeas

uno

protoctistas muy bonitos. El extracto de levadura se filtr en un pao

muy

fino

desafortunadamente

para Hahn,

era

muy

difcil

de

preservar. Hans Buchner, colega de Hahn le record que la fruta se

conserva agregndole azcares, haciendo una mermelada, le sugiri
agregar

sacarosa.

El

experimento

lo

realiz Eduard,

hermano

de Hans que visitaba el laboratorio para experimentar con extractos de

levadura. Cuando agreg la sacarosa al extracto de levadura, de la
solucin emergan burbujas. Eduard concluy que la fermentacin, el
proceso

descrito

ocurriendo.

por

Louis Pasteur como

Actualmente

particularmente importante

esa

la vida

observacin

para

nosotros,

no

sin

aire,

sera

estaba

tal

vez

pero Buchner haba

demostrado que los procesos de la vida (la fermentacin en este caso),

podan ocurrir fuera de la clula viva. El fantasma posedo de la mquina

viviente se haba exorcizado.
La hiptesis de Buchner consisti en que la fermentacin resulta de la
actividad de una enzima, que l llam zimasa. Actualmente llamamos a
este proceso que realmente se lleva a cabo por 10 enzimas, gluclisis
del

griego glycos:

dulce

+ lysis:

ruptura.

Por

estas

observaciones, Buchner gan el premio Nobel.

En 1941, Fritz Lipman y Herman Kalkar descubrieron las funciones de los

compuestos de alta energa como el ATP en el metabolismo intermedio.
Gracias a la invencin de tcnicas para la purificacin de enzimas y a
experimentos hechos en bacterias y levaduras, se describieron las
reacciones de esta va. Las funciones de los cofactores como el NAD+ y
de los compuestos fosforilados en el metabolismo, se describieron por
primera vez en la gluclisis. La fermentacin es el aprovechamiento de
la glucosa en ausencia de O2, el objetivo final de esta va, es la sntesis
de molculas de alta energa qumica como el adenosn trifosfato(ATP),
que se utilizan para realizar trabajo. Los organismos primitivos se
originaron en un mundo cuya atmsfera careca de 0 2 y por esto, la
gluclisis se considera como la va metablica ms primitiva y por lo
tanto, est presente en todas las formas de vida actuales. La va
consiste de 10 reacciones enzimticas en las cuales la glucosa, una
fuente de energa para casi todos los organismos, se convierte en
piruvato. Esta transformacin, conlleva a la produccin de dos molculas

de ATP. Vale la pena considerar que la gluclisis es la nica va en los

animales que produce ATP en ausencia de Oxgeno. En la reaccin neta,
tambin se reducen dos molculas de NAD+ a NADH:
D-glucosa + 2Pi + 2ADP
2 piruvato + 2NADH + 2H+ + 2ATP + 2H2O

En condiciones anaerobias, el piruvato es convertido a lactato en los

animales o etanol en las levaduras, acompaado de la regeneracin
de NAD+ el cual permite a la gluclisis continuar en ausencia de
Oxgeno.
De las reacciones listadas en la Tabla X se puede deducir que el cambio
en la energa libre para la conversin de glucosa en piruvato es de
8.44 kcal mol-1, lo que corresponde a una constante de equilibrio de
105 a 298 K. Debido a eso, la gluclisis es un proceso unidireccional.

REACCIONES DE LA GLUCLISIS

Reaccin 1 La glucosa, se fosforila y rinde glucosa 6P (G6P), una molcula con

mayor energa. La enzima responsable de la reaccin, una quinasa
(hexoquinasa) consume una molcula de ATP y libera ADP. La misma
hexoquinasa fosforila otras hexosas como fructuosa, galactosa y manosa.
Glucosa + ATP G6P + ADP Es irreversible, es decir la los productos (G6P y ADP)
no liberan los reactivos (Glucosa y ATP). La fosforilacin de la glucosa tiene
ventajas para la clula: la G6P es ms reactiva que la glucosa y a diferencia de
sta no atraviesa la membrana celular porque no tiene transportador. De esta
forma se evita la prdida de un sustrato energtico para la clula. GLUCOLISIS
11
Reaccin 2 La G6P se isomerisa a fructosa-6-fosfato (F6P) por accin de una
isomerasa, que facilita la isomerizacin de estas hexosas en los dos sentidos:
de F6P a G6P o de F6P a G6P, la reaccin es reversible. G6P F6P
Reaccin 3 Consiste en la fosforilacin de la F6P en el C1, que rinde fructosa
1,6-bifosfato (F1-6P). En esta reaccin, catalizada por otra quinasa, la
fosfofructoquinasa (FFQ), se consume ATP. Esta enzima merece especial
atencin porque, como se mencionar ms adelante, participa en la regulacin
de la gluclisis. F6P + ATP F1-6P + ADP Esta reaccin, al igual que la primera,
es irreversible, y ambas constituyen pasos importantes porque son los puntos
de control de la gluclisis.

Reaccin 4 En esta reaccin la F1-6P se rompe en 2 molculas de 3 carbonos

(triosas): la dihidroxiacetona 3-fosfato (D3P) y gliceraldehdo 3-fosfato (GA3P)
mediante una reaccin reversible catalizada por una liasa (aldolasa). F1-6P
GA3P + D3P
Reaccin 5 El GA3P sigue los pasos de la gluclisis, la otra triosa generada,
D3P, por isomerizacin produce otra molcula de GA3P. La reaccin es
reversible, y est catalizada por una isomerasa. GA3P + D3P 2 GA3P ste es
el ltimo paso de la Fase con gasto de energa en la que se consumieron 2 ATP.
As, en el cuarto paso se genera una molcula de GA3P, y en el quinto paso
se genera la segunda molcula de ste. De aqu en adelante, las reacciones
ocurrirn dos veces, debido a que se generan dos molculas de GA3P por
hexosa. Hasta el momento solo se han consumido 2ATP, sin embargo, en la
segunda etapa, el GA3P se transforma en una molcula de alta energa, a partir
de la cual se obtendr el beneficio final de 4 molculas de ATP. GLUCOLISIS 12
Fase de obtencin de energa
Reaccin 6 Consiste en la oxidacin del GA3P e incorporacin de un fosfato a
la molcula, de manera que se genera un compuesto con mayor energa. En
este paso, que en realidad implica dos reacciones, acta una deshidrogenasa
que utiliza NAD+ y se genera NADH.H. Se ver al finalizar la descripcin de la
va, cmo y por qu es necesario reoxidar este cofactor. GA3P + P + NAD+
1,3-bisfosfoglicerato + NADH.H
Reaccin 7 En este paso el grupo fosfato del 1,3-bifosfoglicerato se transfiere
a una molcula de ADP, por una quinasa, generando as la primera molcula de
ATP de la va. Esta manera de obtener ATP, en la que no participa la cadena
respiratoria, se denomina fosforilacin a nivel de sustrato. 1,3-bisfosfoglicerato
+ ADP 3-fosfoglicerato + ATP Como la glucosa se transform en 2 molculas
de GA3P se sintetizan un total de 2 ATP en este paso. Las reacciones 6 y 7 de la
gluclisis corresponden a un caso de acoplamiento, donde una reaccin
energticamente desfavorable (6) es seguida por una reaccin muy favorable
energticamente (7) que induce a que ocurra la primera
Reaccin 8 Consideramos aqu a dos reacciones sucesivas, de las cuales una,
la isomerizacin del 3-fosfoglicerato a 2-fosfoglicerato, no aparece
representada en la figura 2 y la otra corresponde a la transformacin del 2fosfoglicerato en fosfoenolpiruvato (PEP), por accin de la enolasa. 2Fosfoglicerato PEP + H2O
Reaccin 9 En la ltima reaccin, irreversible, se desfosforila el PEP y se
obtiene piruvato y ATP. La transferencia del grupo fosfato del PEP al ADP la
cataliza una quinasa (piruvato quinasa). Es la segunda fosforilacin a nivel de
sustrato: se fosforila el ADP a ATP independientemente de la cadena
respiratoria. PEP + ADP Piruvato + ATP Como se observa, el oxgeno no es

necesario en ninguna reaccin de la gluclisis; la va ocurre en clulas aerobias

y fermentativas.

IMPORTANCIA BIOLOGICA DEL CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs (conocido tambin como ciclo de los cidos
tricarboxlicos o ciclo del cido ctrico) es un ciclo metablico de
importancia fundamental en todas las clulas que utilizan oxgeno
durante el proceso de respiracin celular. En estos organismos
aerbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjuncin de las rutas
metablicas responsables de la degradacin y desasimilacin de
loscarbohidratos, las grasas y lasprotenas en anhdrido carbnico
yagua,
con
la
formacin
de
energa
qumica.
El ciclo de Krebs es una ruta metablica anfiblica, ya que participa
tanto en procesos catablicos como anablicos. Este ciclo proporciona
muchos precursores para la produccin de algunos aminocidos, como
por ejemplo el cetoglutarato y el oxalacetato, as como otras molculas
fundamentales
para
la
clula.
El ciclo toma su nombre en honor del cientfico anglo-alemn Hans Adolf

Krebs, que propuso en 1937 los elementos clave de la ruta metablica.

Por este descubrimiento recibi en 1953 el Premio Nobel de
Medicina.El Ciclo de Krebs (descubierto por Sir Hans Adolf Krebs) es un
conjunto de reacciones que puede oxidar completamente el acetilCoA a CO2 a fin de liberar la energa para sintetizar el ATP, la moneda
energtica de la clula y est constituido por un conjunto de reacciones
a travs de las cuales se completa la degradacin total de los productos
de la gluclisis.
Las enzimas del Ciclo de Krebs se encuentran presentes en la matriz
mitocondrial; el cido pirvico atraviesa la membrana mitocondrial y
penetra en la mitocondria donde se transforma en acetil-CoA, que
entra en el Ciclo de Krebs.
La cadena respiratoria es un conjunto de reacciones de oxidacinreduccin que se da en las mitocondrias, a culminar los procesos
respiratorios y esta formada por un conjunto de molculas, llamadas
transportistas de protones y de electrones, que se encuentran presentes
en las crestas mitocondriales.
Estas molculas, al reducirse y oxidarse, transfieren protones y
electrones desde el substrato hasta el oxgeno molecular, que se reduce
formando agua; en este proceso se forma el ATP, pero para que las
varias secuencias de reacciones de la cadena ocurran, es necesaria la
presencia de diversas enzimas especficas que catalizam todo el
proceso.

El balance energtico de la respiracin aerbica de una molcula

de glucosa es de 38 molculas de ATP, lo que equivale a 266
kilocaloras.
El metabolismo de una clula contiene incontables reacciones
bioqumicas, sin embargo, es posible identificar un metabolismo del
esqueleto.

El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz mitocondrial en la clula eucariota

El acetil-CoA (Acetil Coenzima A) es el principal precursor del ciclo. El cido ctrico (6
carbonos) o citrato se obtiene en cada ciclo por condensacin de un acetil-CoA (2 carbonos)
con una molcula deoxaloacetato (4 carbonos). El citrato produce en cada ciclo una molcula
de oxaloacetato y dos CO2, por lo que el balance neto del ciclo es:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + P i + 2 H2O CoA-SH + 3 (NADH + H +) + FADH2 +

GTP + 2 CO2
Los dos carbonos del Acetil-CoA son oxidados a CO2, y la energa que estaba acumulada es
liberada en forma de energa qumica: GTP y poder reductor (electrones de alto
potencial): NADH y FADH2. NADH y FADH2 son coenzimas (molculas que se unen a
enzimas) capaces de acumular la energa en forma de poder reductor para su conversin en
energa qumica en la fosforilacin oxidativa.
REACCIONES DEL CICLO DE KREBS
Reactivos/ Productos
Molcula

I. Citrato
II. cis-AconitatoNota
1

III. Isocitrato

IV. Oxalosuccinato

V. -cetoglutarato

VI. Succinil-CoA

VII. Succinato
VIII. Fumarato
IX. L-Malato
X. Oxalacetato

Enzima

Tipo de reaccin

Coenzima

Coenzima

1. Aconitasa

Deshidratacin

2. Aconitasa

Hidratacin

H 2O

Oxidacin

NAD+

NADH + H+

3. Isocitrato
deshidrogenasa
4. Isocitrato
deshidrogenasa

H2O

Descarboxilacin

5. -cetoglutarato

Descarboxilacin

NAD+ +

NADH + H+

deshidrogenasa

oxidativa

CoA-SH

+ CO2

GDP

GTP +

+ Pi

CoA-SH

Oxidacin

FAD

FADH2

Adicin (H2O)

H 2O

Oxidacin

NAD+

6. Succinil CoA
sintetasa
7. Succinato
deshidrogenasa
8. Fumarato Hidratasa
9. Malato
deshidrogenasa
10. Citrato sintasa

Hidrlisis

Condensacin

NADH + H+