PRACTICA DE LABORATORIO No 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RAFAEL ARLEY VIEDA

20131181034
MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL
20131181017

BIOQUIMICA
DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JSE DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
INGENIERIA SANITARIA
BOGOT D.C
2014

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
RESUMEN
Los carbohidratos son biomolculas, que contienen es sus estructuras grupos funcionales
como aldehdos o cetonas polihidroxilados. Los carbohidratos al contener grupos carbonilo
e hidroxilo presentan propiedades y comportamiento qumico tpico de estos dos grupos
funcionales, los carbohidratos se clasifican generalmente en monosacridos y polisacridos
(simples y complejos), los monosacridos son carbohidratos que no se pueden descomponer
a compuestos ms simples por medio de hidrolisis, estos a su vez se subdividen por el
nmero de tomos de carbono y grupo que contengan en: aldosas (aldehdo) y cetosas
(cetona). Un polisacrido es un carbohidrato que al hidrolizarse da dos o ms unidades de
monosacridos .Los monosacridos presentan reacciones caractersticas de xido-reduccin
como las reacciones con los reactivos de Tollens y Fehling, la formacin de osazonas y la
formacin de furfurales.
OBJETIVOS
Objetivo general
Identificar mediante reacciones caractersticas el comportamiento qumico de los
carbohidratos, caracterizndolos en monosacridos (aldosas o cetosas), en disacridos o
polisacridos.
Objetivos especficos
Diferenciar mediante reacciones cualitativas los monosacridos de los disacridos y
polisacridos.
Reconocer y analizar las reacciones que se llevan en cada una de las pruebas de Molish,
Azcares reductores, Barfoed, Bial, Seliwanoff, Prueba del cido msico, Formacin de
osazonas y Prueba de Wolhk en los carbohidratos.
Reconocer la capacidad oxido-reductora de los monosacridos.
Identificar los carbohidratos en una muestra problema.
MARCO TEORICO
Los carbohidratos son polihidroxialdehdos, polihidrixicetonas o compuestos que por
hidrolisis se convierten en aqullos, un carbohidrato que no es hidrolizable a compuestos
ms simples, se denomina monosacrido. Un carbohidrato que por hidrlisis da dos
molculas de monosacrido se llama disacrido, mientras que el que da muchas molculas
de monosacrido por hidrlisis es un polisacrido.
Un monosacrido se puede clasificar ms precisamente: si contiene un grupo aldehdo se le
conoce como aldosa; si contiene una funcin cetona es una cetosa. Segn el nmero de
tomos de carbono que contenga, se conoce el monosacrido como triosa, tetrosa, pentosa,
hexosa, y as sucesivamente.
Los carbohidratos que reducen los reactivos de Fehling (o Benedict) y Tollens, se conocen
como azcares reductores. Todos los monosacridos, sean aldosas o cetosas, son azcares
reductores, como lo son tambin la mayora de los disacridos, siendo una excepcin
importante la sacarosa (azcar de mesa comn), la que no es reductora.

MATERIALES Y REACTIVOS

Una gradilla para tubos de ensayo

Tubos de ensayo (1= Blanco- Glucosa- y 2= Patrn-Fructosa)
Alfa Naftol 10%. Formula: C10H7O
cido sulfrico concentrado. Formula : H2SO4
Solucin de almidn. Formula: C6H10O5
cido clorhdrico. Formula: HCl
Reactivo de lugol. Formula: I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada.
Galactosa 1%. Formula: C6H12O6
Reactivo de Benedict. Formula: CuSO4.5H2O/ CNa2O3/ CKNS
Sacarosa. Formula : C12H22O11
Fructosa. Formula: C6H12O6
Lactosa. Formula: C12H22O11
Reactivo de Fehling.

RESULTADOS
Tabla 1 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Molish
Compuesto
Sacarosa

PRUEBA DE MOLISH ( C10H7O/ H2SO4 )

Caractersticas

Resultado

C12H22O11

Se observ la aparicin de dos capas, la

primera de color violeta y un precipitado de
color rojo

Positivo

Fructosa
C6H12O6
Se observ la aparicin de dos capas, la
primera de color violeta, el precipitado de
color rojo pero en mayor cantidad que la
presentada por la sacarosa

Positivo

Tabla 2 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

Compuesto
Fructosa
C6H12O6
Sacarosa
C12H22O11

PRUEBA DE FEHLING
Caracterstica

Resultado

Precipitado rojo

Positivo

Precipitado rojo

Negativo

Tabla 3 Reconocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo

PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua
destilada
Compuesto
Caracterstica
Resultado

Almidn
C6H10O5
Coloracin caf-rojiza
oscura

Positivo

Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Tollens

PRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS
Compuesto
Caractersticas
Resultado
Fructosa
C6H12O6
Coloracin rojiza

Positivo

Sacarosa
C12H22O11

se mantiene la coloracin
azul

Negativo

Tabla 5 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Benedict

PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICT
Compuesto
Caractersticas
Resultado
Sacarosa
No se produjo ningn
C12H22O11
Negativo
cambio de coloracin
Galactosa
C6H12O6

Se produjo un cambio de
coloracin del azul claro a
rosado evidenciando el
proceso de reduccin

Tabla 6 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Barfoed

Positivo

Compuesto
Sacarosa
C12H22O11

Fructosa
C6H12O6

PRUEBA DE BARFOED
Caractersticas

Resultado

Coloracin azul

Negativo

Coloracin azul

Negativo

Tabla 7 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

Compuesto
Sacarosa
C12H22O11

PRUEBA DE SELIWANOFF
Caractersticas

Resultado

Coloracin rosada clara

Positivo

Coloracin rosada intensa

Positivo

Fructosa
C6H12O6

Tabla 8 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

Compuesto
Sacarosa
C12H22O11

PRUEBA DE BIAL
Caractersticas

Resultados

Coloracin anaranjado claro

Negativo

Coloracin anaranjado
oscuro

Negativo

Fructosa
C6H12O6

Tabla 9 Reconocimiento de carbohidratos- prueba del cido Msico

Compuesto
Galactosa
C6H12O6

PRUEBA DEL CIDO MSICO

Caractersticas

Resultado

Se forman los cristales

Positivo

No se forman cristales

Negativo

Sacarosa
C12H22O11

Tabla 10 Reconocimiento de carbohidratos- formacin de osazonas

Compuesto
Galactosa
C6H12O6

FORMACION DE OSAZONAS
Caractersticas

Resultado

Coloracin amarilla y
cristales del mismo color

Positivo

Coloracin amarilla pero no

aparecen cristales

Negativo

Fructosa
C6H12O6

Tabla 11 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos

PRUEBA PARA DISCARIDOS SACAROSA
Tubo con
Caractersticas
Resultado
HCl
Coloracin amarilla

Positivo

Coloracin ligera rosada

Negativo

Traslucido

Negativo

NaOH

H2O

Tabla 12 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos

PRUEBA DE WOLHK
Caractersticas

Resultado

Ligera capa superior rojiza

Positiva

Traslucido

Negativo

Compuesto
Lactosa
C12H22O11

Fructosa
C6H12O6

ANALISIS DE RESULTADOS
Ensayo
Prueba de
Molisch

La reaccin de la fructosa con el H 2SO4 concentrado, forma

un furfural o un derivado del furfural, que se reconoce con el
alfa naftol por formacin de un color purpura violeta, el
H2SO4
concentrado
descompone
el
carbohidrato
presentndose una hidrolisis en los enlaces glucosidicos.
Este tipo de reaccin es de adiccin nucleofilica y de tipo
SN1, en el cual el H 2SO4 concentrado presenta una hidrolisis
de los enlaces glucosidicos y con el alfa naftol se precipitan
para dar una coloracin violeta que es el positivo para los
hidratos de carbono.

Ilustracin 1. Reaccin del Monmero con el

H 2 S O4

concentrado

Ilustracin 2 Reaccin del derivado furfural con el Alfa naftol

En este ensayo se identifican los azucares reductores, todos los monmeros
contienen en sus extremos funciones qumicas (Aldehdos y Cetonas) que
pueden reducir otras sustancias.
En la reaccin con el reactivo de Benedict, la galactosa al ser una aldosa
reduce el complejo cprico, desapareciendo el color azul intenso, por un
color rojo ladrillo que el cual es positivo para este ensayo.
La sacarosa es la unin por los dos extremos reductores de la glucosa y la
fructosa, por lo consiguiente no podr efectuar esta reduccin del ion
Reactivo de cprico.
Benedict

Ilustracin 3 Reaccin de la glucosa con el Reactivo de Benedict

Reactivo de En presencia de agentes oxidantes, iones metlicos como el
+2
Fehling
Cu , los monosacridos presentan varias reacciones de
oxidacin. Presentndose un cambio de coloracin a rojo
ladrillo indicando la presencia de un azcar reductor, Para el
ensayo con la sacarosa al ser esta la unin de los extremos
nucleofilicos de la glucosa y la fructosa no posee iones libres
para formar la reaccin de reduccin.

Ilustracin 4 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo

de Fehling
El ensayo con el reactivo de Tollens es una reaccin de
oxidacin, en la cual se identifica a las aldosas, ya que las
cetosas no reaccionan. En la reaccin el reactivo de Tollens
se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el
ion de plata se reduce a plata elemental. Sin embargo la
fructosa si reduce el reactivo de Tollens, esto se debe a que
la fructosa se isomeriza fcilmente en una mezcla de aldosas
por una serie
Reactivo de (glucosa y manosa) en una disolucin bsica
1
de desplazamiento tautomericos ceto-enol .
Tollens

Ilustracin 5 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo

de Tollens
El reactivo de Barfoed es una prueba para distinguir entre monosacridos y
disacridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representativo ya que la
sacarosa que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.
+2
Tericamente la velocidad de reaccin al reducir el ion Cu
, por parte
Prueba de
Barfoed

del monmero debe ser ms rpida que la del disacrido, Esta reaccin est
limitada al tamao de la molcula, siendo la reaccin de los monmeros
mucho ms rpida que los disacridos

Ilustracin 6 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo de Barfoed

El yodo se introduce en las espiras de la molcula del
almidona, por lo cual este toma una coloracin oscura. El
Prueba de
almidn es coloreado de azul en presencia de Lugol, debido
lugol
a una adsorcin o fijacin del I-3sobre las unidades de
glucosa de la amilosa.
Prueba
Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de cidos
de
minerales y en un medio caliente sufren procesos de
Seliwano deshidratacin, lo cual da como producto un anillo
f
pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, segn sea el
monosacrido pentosa o hexosa, los furfurales se
condensas dando una coloracin roja. Las cetosas se
deshidratan ms rpido que las aldosas, lo cual permite
diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff la fructosa al ser
una cetohexosa da un resultado positivo, en cuanto a la

sacarosa esta al contener fructosa da tambin positivo si se

deja correr el tiempo adecuado para que se efectu la
hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.

Prueba
de Bial

Ilustracin 7. Reaccin de las cetohexosas con el reactivo

de Seliwanoff
Esta prueba se basa en la formacin de furfural, al hacer
reaccionar pentosas con HCl y posteriormente con orcinol.
El furfural es un aldehdo electrofilico, en presencia de
cido, adiciona fenoles (con prdida de agua) produciendo
sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una
coloracin azul-verde. En la prueba de Bial no se cont con
la ribosa, procedimos a realizar la prueba con fructosa y
sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser
pentosas no dan una coloracin positiva, sin embargo las
hexosas al reaccionar con el reactivo de Bial originan una
coloracin verde, caf o caf-rojiza, razn por lo cual en la
fructosa se observ una coloracin caf rojiza oscura y en
la sacarosa una coloracin similar pero clara. Para la
pentosas la reaccin es:

Prueba

Ilustracin 8. Reaccin de las pentosas con reactivo de Bial

La prueba de cido msico permite identificar la galactosa.

El HNO3 oxida tanto al grupo aldehdo como al alcohlico

primario para formar cidos dicarboxilico, el cido msico
insoluble se forma gracias a la oxidacin de la galactosa,
este cido dicarboxilico al ser insoluble precipita en forma
de cristales.

del cido
msico

Ilustracin 9. Reaccin de la galactosa con HNO3

Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehdo y
cetona respectivamente pueden reaccionar con la
fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza un
exceso de fenildidrazina se forma una osazona que
contiene dos residuos de fenilhidrazina por molcula,
mientras que una tercera molcula del reactivo se
convierte en anilina y amoniaco 1. La osazona formada por
la galactosa (aldosa) es insoluble y se presenta en forma de
cristales amarillos.
Formaci
n
de
osazonas

Prueba
para
disacrid
os
Sacarosa

Ilustracin 9. Formacin de osazonas

La sacarosa es un disacrido que
carece de
poder
reductor, esto se debe a que no posee en la molcula un
grupo aldehdo o cetona en forma de hemiacetlitica, el HCl
hidroliza la sacarosa dando lugar a la glucosa y la fructosa,
sus monosacridos integrantes. Al aplicar la prueba de
Benedict y la de Seliwanoff estas dan positivo. La hidrolisis

Prueba
de Wolhk

acida de su enlace glicosidico permite que sus mono

sacridos glucosa y fructosa (azucares reductores)
reaccionen con el reactivo de Benedict, por otro lado la
glucosa y la fructosa en la prueba de Seliwanoff tambin
arroja un resultado positivo, a causa de las razones
anteriormente expuestas (ver prueba de Seliwanoff).
La prueba de Wolhk permite identificar la lactosa. Lactosa es un azcar
reductor, forma una osazona y existe en formas alfa y beta que mutarrotan.,
se toma como resultado positivo la aparicin de una coloracin rojiza; en
nuestra muestra de lactosa se observ una ligera capa superior rojiza
mientras que en nuestro blanco no hubo ningn cambio.

CUESTIONARIO
1. Qu diferencia existe entre azucares reductores y no reductores?

Los azucares reductores poseen un grupo carbonilo libre, lo cual les permite reducirse,
en cambio en los azucares no reductores el grupo carbonilo se encuentra combinado en
unin glicosidica, haciendo que estos carezcan de capacidad reductora.
2. Cmo puede justificar el hecho de que la glucosa, al igual que la fructosa de prueba
positiva para azucares reductores?

Tanto la glucosa como la fructosa son considerados azucares reductores, es decir se

oxidan fcilmente con oxidantes suaves, los dos poseen carbonos libres en forma de
hemiacetales otorgndoles la capacidad de reducir.

3. Consulte las estructuras en forma abierta o cerrada de los siguientes azucares y consulte
de donde se extraen o en donde abundan y para que se emplean cada una de ellas:

a) Manosa

Forma abierta

Forma cerrada

La manosa se encuentra en las gomas vegetales y es constituyente de muchas protenas.

b) Galactosa

La galactosa es sintetizada por las glndulas mamarias para producir lactosa, que es un
disacrido formado por la unin de glucosa y galactosa, por tanto el mayor aporte de
galactosa en la nutricin proviene de la ingesta de lactosa de la leche. Es un
monosacrido que se obtiene en el intestino, por medio de la accin de la enzima
lactasa. Se convierte en glucosa en el hgado como aporte energtico, forma parte de los
glucolpidos y glucoprotenas de las membranas celulares de las clulas sobre todo de
las neuronas

c) Lactosa

Est presente en todas las leches de los mamferos. La lactosa representa una fuente
energtica de fcil utilizacin y favorece la absorcin de calcio y magnesio.

d) Fructosa

Se encuentra en los vegetales, las frutas, la miel, la hidrolisis del azcar de caa y de la
inulina. El hgado la almacena en forma de glucgeno tambin es convertida en glucosa
y utilizada por el organismo.

e) Almidn

Es un homopolisacrido de reserva energtica predominante en las plantas, constituido por la

unin de grandes cantidades de monmeros de glucosa.El almidn se encuentra en los
amiloplastos de las clulas vegetales, sobre todo en las semillas, las races y los tallos,
incluidos los tubrculos.

f) Sacarosa

Abundante en la frutas y vegetales, es usado por la abejas para hacer miel, es usada
como edulcorante, fuente de energa y conservante.

g) maltosa

Se encuentra en la cerveza, en los granos de cebada, se puede obtener por hidrolisis de

almidn y glucgeno. Se usa como edulcorante y en jarabes.

h) Ribosa

La fuente principal de la ribosa son los cidos nucleicos, es vital para los elementos
estructurales de los cidos nucleicos y de las coenzimas como ATO, NAD+, NADP+,
flavoproteinas, intermediario en la va de las pentosas.

CONCLUSIONES
Los carbohidratos al poseer en su estructura aldehdos o cetonas, presentan un
comportamiento qumico ligado a los grupos funcionales de estos, como por ejemplo la
capacidad de oxidarse con agentes oxidantes suaves como el reactivo de fehling o de

Tollens o la capacidad de formar osazonas, adems esta clase de reacciones permiten

diferenciar monosacridos de disacridos como la sacarosa.

Los monosacridos se diferencia de los disacridos (sacarosa) por su poder reductor,

poder que es otorgado por el carbono libre que posee, los monosacridos a su vez se
subdividen en aldosas y cetosas, y en pentosas o hexosas, estos fueron identificados y
diferenciados mediante la prueba de Tollens, de Seliwanoff y de Bial, en las que se
evidencio la velocidad de deshidratacin de las aldosas y cetosas, y la formacin de
furfural o hidroximetil furfural, segn provenga una pentosa o hexosa.

La sacarosa al hidrolizarse libera a sus monosacridos constituyentes: la glucosa y la

fructosa, debido a esto la sacarosa presento resultados positivos en la prueba para
disacridos y en la prueba de Seliwanoff.
BIBLIOGRAFIA
1. Morrison, J.Boyd, R. (1976). Qumica orgnica: Bioqumica. Estados Unidos
2. Morales. (2005)Reconocimiento de los monosacridos, disacridos y de los polisacridos,
Universidad Nacional del Callao, Lima-Per
J. Ernesto Luquet. (2010). Bioqumica: Carbohidratos, San Juan de Pasto
3. Teijn, J.Garrido, A, Villaverde, C. Blanco, M. Mendoza, C. Ramirez, J. (2005). Fundamentos de
Bioqumica Estructural: Hidratos de Carbono. Mxico, D.F.
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5. Wade L.G. (2004). Qumica Orgnica.
Madrid, Espaa: Pearson Educacin S.A.

6. McMurry, John. Quimica organica. (2008) .CengageLearning Editores, S.A.